CN102207484B - 一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法。本发明属于维生素分析检测技术领域。一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：取待测血样与维生素样本处理液混合，利用循环方波伏安法检测样品在维生素检测仪传感器探头上发生氧化还原反应时产生的电流信号；通过比较不同浓度维生素标准样品的电流信号值，制定标准曲线，根据待测样品产生的电流信号值，获取待测血样中维生素的含量。本发明具有灵敏度高、准确度好、操作简便、快捷、应用范围广，适合于医疗卫生部门使用，能够对血样中的维生素A、B1、B2、B6、B9、B12、C、D、E、K1、K3进行分析检测等优点，可用于血样中维生素含量快速检测。
Description
技术领域
本发明属于维生素分析检测技术领域，特别是涉及一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法。
背景技术
维生素（vitamin）是机体为维持正常生理功能必须由食物摄取的一类微量有机物，在调节物质代谢和维持生理功能等方面发挥着重要作用。长期缺乏或过量摄入某种维生素，都会导致相应的疾病。如缺乏维生素A会出现夜盲症、干眼病和皮肤干燥；缺乏维生素D可患佝偻病；缺乏维生素B12可患恶性贫血；摄入过量的维生素E会破坏凝血功能，增加出血的可能性；摄入超过1000毫克的维生素C会影响肾脏的排毒功能。
目前，检测人体维生素含量的仪器和检测方法各有不同，主要有微生物法、紫外分光光度法、荧光分析法、高效液相色谱法等。高效液相色谱法中的前处理技术繁琐耗时、需要较多有机溶剂，且血清需要量较大。紫外分光光度法、荧光分析法能检测的维生素种类较少。目前应用于维生素检测的仪器有：韩国Younglin公司研制出了维生素分析仪，利用高效液相方法检测食品、药品中的各种维生素；德国拜发R-Biopharm公司利用荧光法生产出检测维生素的仪器。由于高效液相色谱仪、荧光分析仪等仪器价格昂贵，并且需要专门技术人员进行操作，检测方法繁杂，检测时间较长，所以不易推广。
发明内容
本发明为解决公知技术中存在的技术问题而提供一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法。
本发明的目的是提供一种血样中的维生素电化学分析方法，具有灵敏度高、准确度好、操作简便、快捷、应用范围广等特点，适合于医疗卫生部门使用，能够对血样中的维生素A、B1、B2、B6、B9、B12、C、D、E、K1、K3进行分析检测等特点的检测血样维生素含量的循环方波伏安法。
本发明实现过程：取一定量的血样与一定量自制的维生素样本处理液混合，利用循环方波伏安法使血样中的维生素在自制的传感器探头上发生氧化（还原）反应，产生电流信号。通过比较不同浓度维生素标准样品的电流信号值，制定标准曲线，根据待测样品产生的电流信号值，获取待测样品中维生素的含量。
本发明检测血样维生素含量的循环方波伏安法为解决公知技术中存在的技术问题所采取的技术方案是：
一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：取待测血样与维生素样本处理液混合，利用循环方波伏安法检测样品在维生素检测仪传感器探头电极上发生氧化还原反应时产生的电流信号；通过比较不同浓度维生素标准样品的电流信号值，制定的标准曲线，根据待测样品产生的电流信号值，获取待测血样中维生素的含量。
本发明检测血样维生素含量的循环方波伏安法还可以采取如下技术方案：
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素A含量时，检测仪的初始电位为-200～400mV，终止电位为1000～1800mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～60mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素A样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸氨、高氯酸锂、高氯酸镁、高氯酸银中一种或几种组成，高氯酸盐的加入量为0.05～10mol/L；高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸锂、高氯酸氨是高氯酸盐的最优选。强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸的加入量为0.01～5mol/L；硝酸、高氯酸是强酸的最优选。二甲基甲酰胺的加入量为1～100mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素B1含量时，检测仪的初始电位为-400～400mV，终止电位为1000～1800mV，电位增量为5～20mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～60mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素B1样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸氨、高氯酸锂、高氯酸镁、高氯酸银中一种或几种组成，高氯酸盐的加入量为0.1～10mol/L；强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸的加入量为0.01～8mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为0.01～2mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素B2含量时，检测仪的初始电位为-1500～-500mV，终止电位为-400～900mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～60mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素B2样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸氨、高氯酸锂、高氯酸镁、高氯酸银中一种或几种组成，高氯酸盐的加入量为0.05～10mol/L；强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸的加入量为0.01～2mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为0.01～10mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素B6含量时，检测仪的初始电位为-600～400mV，终止电位为500～1000mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为20～80mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素B6样本处理液由磷酸盐缓冲溶液、碱性溶液、表面活性剂组成；磷酸盐缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸一氢铁、磷酸二氢铁、磷酸氢二铵、磷酸二氢铵、磷酸二氢钙中一种或一种以上组成，磷酸盐缓冲溶液加入量为0.005～10mol/L，碱性溶液由氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氨水中一种或几种组成，碱性溶液加入量为0.01～1mol/L，表面活性剂由硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、单硬脂酸甘油酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯的一种或几种组成，表面活性剂加入量为0.05～10mmol/L，脂肪酸山梨坦、聚山梨酯、单硬脂酸甘油酯是表面活性剂的最优选。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素B9含量时，检测仪的初始电位为-2000～-500mV，终止电位为-400～1000mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～80mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素B9样本处理液由酒石酸盐、醋酸盐缓冲溶液、表面活性剂、离子强度调节剂、强酸和丁二酮肟乙醇溶液组成；酒石酸盐由酒石酸钾钠、酒石酸锑钾、酒石酸氨钾、酒石酸钠、酒石酸钾中的一种或几种组成，酒石酸钾、酒石酸钾钠是酒石酸盐的最优选，酒石酸盐加入量为2～10mmol/L，醋酸盐缓冲溶液由醋酸钠、醋酸钾、醋酸铵中一种或几种和醋酸组成，醋酸盐缓冲溶液加入量为0.01～10mol/L，表面活性剂由硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、单硬脂酸甘油酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯中的一种或几种组成，十六烷基三甲基溴化铵、单硬脂酸甘油酯是表面活性剂的最优选，表面活性剂加入量为0.05～50mmol/L，离子强度调节剂由氯化钾、氯化钠、硫酸钠，氯化钾、硝酸钾中的一种或几种组成，离子强度调节剂加入量为0.01～10mol/L，强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，氯化钠、氯化钾、硝酸钾是离子强度调节剂的最优选，强酸加入量为0.01～5mol/L，丁二酮肟的加入量为0.01～10mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素B12含量时，检测仪的初始电位为-2000～-500mV，终止电位为-400～1000mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～80mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素B12样本处理液由酒石酸盐、醋酸盐缓冲溶液、表面活性剂、离子强度调节剂、强酸、乙醇和丁二酮肟组成；酒石酸盐由酒石酸钾钠、酒石酸锑钾、酒石酸氨钾、酒石酸钠、酒石酸钾中的一种或几种组成，酒石酸盐加入量为0.02～5mol/L，醋酸盐缓冲溶液由由醋酸钠、醋酸钾、醋酸铵中一种或几种和醋酸组成，醋酸盐缓冲溶液加入量为0.01～10mol/L，表面活性剂由硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、单硬脂酸甘油酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯中的一种或几种组成，表面活性剂加入量为0.02～10mmol/L，离子强度调节剂由氯化钾、氯化钠、硫酸钠，氯化钾、硝酸钾中的一种或几种组成，离子强度调节剂加入量为0.05～10mol/L，强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸加入量为0.01～5mol/L，丁二酮肟的加入量为0.02～10mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素C含量时，检测仪的初始电位为-400～400mV，终止电位为1000～1800mV，电位增量为5～20mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～60mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素C样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸氨、高氯酸锂、高氯酸镁、高氯酸银中一种或几种组成，高氯酸盐加入量为0.01～10mol/L，强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸的加入量为0.01～10mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为0.01～10mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素D含量时，检测仪的初始电位为-200～400mV，终止电位为1000～1800mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～60mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素D样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸氨、高氯酸锂、高氯酸镁、高氯酸银中一种或几种组成，高氯酸盐加入量为0.04～8mol/L，强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸的加入量为0.02～10mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为0.05～10mmol/L；
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素E含量时，检测仪的初始电位为-200～400mV，终止电位为1000～1800mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～60mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素E样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾、高氯酸氨、高氯酸锂、高氯酸镁、高氯酸银中一种或几种组成，高氯酸盐加入量为0.04～8mol/L，强酸由盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸中一种或几种组成，强酸的加入量为0.05～10mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为0.01～2mmol/L。
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素K1含量时，检测仪的初始电位为-1000～100mV，终止电位为-100～1500mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～80mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素K1样本处理液由氯化铵、硝酸铵、氨水、盐酸、四甲基氯化铵、二乙胺、三乙胺中的一种或几种组成，氯化铵、盐酸、四甲基氯化铵是维生素K1样本处理液的最优选，加入量为0.02～15mol/L；
所述的检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特点是：检测血样中维生素K3含量时，检测仪的初始电位为-1000～100mV，终止电位为-100～1500mV，电位增量为2～15mV，方波频率为3～10Hz，方波幅度为10～80mV，循环次数为1～8，等待时间为1～60s。维生素K3样本处理液由氯化铵、硝酸铵、氨水、盐酸、四甲基氯化铵、二乙胺、三乙胺中的一种或几种组成，氯化铵、盐酸、四甲基氯化铵是维生素K3样本处理液的最优选，加入量为0.01～5mol/L。
本发明具有的优点和积极效果是：
检测血样维生素含量的循环方波伏安法由于采用了本发明全新的技术方案，与现有技术相比，本发明具有灵敏度高、准确度好、操作简便、快捷、应用范围广，适合于医疗卫生部门使用，能够对血样中的维生素A、B1、B2、B6、B9、B12、C、D、E、K1、K3进行分析检测等优点。
本发明提供的一种检测血样中维生素含量的方法，具有测试时间短、准确度高、检测范围广等优点，可以用于血样中维生素含量的快速检测。
附图说明
图1是本发明维生素D标准样品电流值—浓度标准曲线示意图。
具体实施方式
为能进一步了解本发明的技术内容、特点及功效，兹例举以下实施例，并配合附图详细说明如下：
参阅附图1。
实施例1
检测血样维生素含量的循环方波伏安法：取一定量的待测样品与一定量自制的维生素样本处理液混合，利用循环方波伏安法使待测样品中的维生素在自制的传感器探头上发生氧化（还原）反应，产生电流信号。通过比较不同浓度维生素标准样品的电流信号值，制定标准曲线，根据待测样品产生的电流信号值，获取待测样品中维生素的含量。
检测血样中维生素D含量的具体实施过程：
1.配制维生素D样本处理液：维生素D样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐为高氯酸钠、高氯酸钾，高氯酸盐加入量为4mol/L，强酸为盐酸、硫酸，加入量为2mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为5mmol/L；
2.检测仪调试：检测血样中维生素D含量时，检测仪的初始电位为100mV，终止电位为1400mV，电位增量为7mV，方波频率为6Hz，方波幅度为30mV，循环次数为6，等待时间为30s。
3、维生素D标准样品—浓度标准曲线
（1）用移液器准确移取2000uL维生素D样本处理液；
（2）用移液器分别准确移取10uL、20uL、50uL、100uL、200uL维生素D标准样品至维生素D样本处理液中，混合均匀；
（3）处理工作电极及辅助电极，在已设定好的维生素D检测参数的条件下，分别进行检测，记录电流信号值；
（4）绘制维生素D标准样品电流值—浓度标准曲线（附图）。
4、血样中维生素D的快速检测方法
（1）用移液器准确移取2000uL维生素D样本处理液；
（2）用移液器准确移取80uL血样至维生素D样本处理液中，混合均匀；
（3处理工作电极及辅助电极，在已设定好的维生素D检测参数的条件下，进行检测，记录电流信号值；
（4）与标准曲线比较，获得血样中维生素D的含量。
Claims (1)
1.一种检测血样维生素含量的循环方波伏安法，其特征是：取待测血样与维生素样本处理液混合，利用循环方波伏安法检测样品在维生素检测仪传感器探头上发生氧化还原反应时产生的电流信号；通过比较不同浓度维生素标准样品的电流信号值，制定标准曲线，根据待测样品产生的电流信号值，获取待测血样中维生素的含量；
检测血样中维生素D含量时，检测仪的初始电位为100mV，终止电位为1400mV，电位增量为7mV，方波频率为6Hz，方波幅度为30mV，循环次数为6，等待时间为30s；维生素D样本处理液由高氯酸盐、强酸、二甲基甲酰胺组成；高氯酸盐是高氯酸钠、高氯酸钾，高氯酸盐加入量为4mol/L，强酸为盐酸、硫酸，强酸的加入量为2mol/L；二甲基甲酰胺的加入量为5mmol/L。
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