CN102175661A - 大肠杆菌在线分析仪 - Google Patents

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张海红
韩龙
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Abstract

本发明涉及细菌检测设备，公开了一种大肠杆菌在线分析仪，包括恒温箱和采样泵，所述恒温箱内设置有温度传感器、加热装置、分析仪主板、培养盘和荧光分光光度计，所述恒温箱外设置有显示器，所述分析仪主板电连接温度传感器、加热装置、荧光分光光度计和显示器，所述采样泵的出口管接培养盘且入口与外界样品管接。本发明实现了大肠杆菌检测从采样、培养到分析、显示等功能的自动化和一体化，具有检测灵敏度高，检测速度快，低成本，无二次污染，维护量小、运行成本低的优点，实现了大肠杆菌的自动在线分析与监测。

Description

大肠杆菌在线分析仪
技术领域
本发明涉及细菌检测设备，尤其是涉及一种自动采样检测的大肠杆菌在线分析仪。
背景技术
大肠杆菌是人畜粪便中数量最多的一种细菌，是国际上公认的检验各种水质和食物流行病学上安全性的通用指标。大肠杆菌越多，表明水源受到人畜粪便污染的污染程度越高，病原菌存在的可能性也相对增高，这给人体健康带来潜在的危险性，尤其是肠出血性大肠杆菌会引起人类出血性肠炎甚至死亡，近年来相继在美国、日本、英国、德国等国家流行和暴发。近年来，有些国家在执行HACCP管理中，将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。
其检验方法一般应用传统的多管发酵法(MTF)和滤膜过滤法(MF)。我国以MTF法为标准检测方法。为达到确认和定量检测，须通过将样品在培养皿中培养24-72小时后用平板计数法进行细菌菌落计数，这些检测需要在实验室进行多项繁杂分析试验和制备培养基，由于需要培养时间长，还得需要专用设备来进行计数，并且由于没有特异性，不能区别形态相近的致病菌，灵敏度差，需要专业的技术人员来完成，难以实现现场快速检测。目前国外已有的基于荧光技术检测样品中大肠杆菌都是采用最大可能数法(MPN)，也就是单管定性，多管定量。但这种方法需要根据测出的荧光光强手工计算大肠杆菌数量，耗时耗力，未能实现荧光光强-大肠杆菌浓度的自动转换，且缺乏相应的数据存储与记录装置，不利于长时期的监测，而且，人工采样与培养也增大了操作上的误差。
发明内容
针对以上问题，本发明目的在于提供一种可以自动采样检测并带有连续不间断监测的大肠杆菌在线分析仪。该实用新型克服了现有检测大肠杆菌技术的不足和缺陷，具有灵敏度高、检测速度快等优点。
本发明是通过以下技术措施实现的，一种大肠杆菌在线分析仪，包括恒温箱和采样泵，所述恒温箱内设置有温度传感器、加热装置、分析仪主板、培养盘和荧光分光光度计，所述恒温箱外设置有显示器，所述分析仪主板电连接温度传感器、加热装置、荧光分光光度计和显示器，所述采样泵的出口管接培养盘且入口与外界样品管接。
具体的，所述培养盘上承装有培养基和荧光底物。
具体的，所述恒温箱的温度恒定为37℃。
具体的，所述分析仪主板还电连接有数据存储装置。
具体的，所述荧光分光光度计设置在能接收到培养盘发出的光线的位置。
所述荧光分光光度计优选检测366nm荧光光强的分光光度计。
作为一种优选方式，所述分析仪主板电连接有设置在恒温箱外壳的数据远程传输接口。
作为一种优选方式，所述分析仪主板电连接有设置在恒温箱外壳的控制键和打印接口。
所述采样泵优选蠕动泵。
其中，分析仪主板控制蠕动泵将经预处理的样品送至恒温箱，于37℃在培养基上培养6小时，之后经荧光分光光度计自动测量366nm处的荧光光强，并将光强信号直接根据荧光光强-大肠杆菌浓度曲线转换为大肠杆菌浓度，在显示器上进行输出或者进行结果的打印。
培养基的组分配方如下：(NH4)2SO420-25g；Na2HPO420-23g；KH2PO45-6g；NaCl 15-16g；乳糖10-15g；精解蛋白胨2-3g；脱氧胆酸钠1-3g；十二烷基磺酸钠2-3g；MgSO4·7H2O 2-5g；Na2SO30.5-1g；Mn(SO4)25-10mg；ZnSO45-10mg；CaCl20.5-1g；将上述所有组份剂量溶于500-3000倍重量的水中，即为培养基。荧光底物组分配方如下：间-硝基苯酚-β-D-吡喃半乳糖苷0.1-0.3g，4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷酸0.07-0.12g，将上述的所有组份剂量溶于100-200倍重量的75％～100％乙醇中，即为荧光底物。
本发明以大肠杆菌培养和荧光检测技术为基础，实现了样品的自动采样、自动测量、检测数据的自动转换和自动输出一体化，减少了人工工作流程和人工操作误差，较之原有大肠杆菌检测技术具有检测灵敏度高，测量误差小，检测速度快，节省耗材等优点，并广泛适用于短期或长期的大肠杆菌在线检测与分析。
附图说明
图1为本发明的结构框图。
具体实施方式
下面结合实施例并对照附图对本发明作进一步详细说明。
一种大肠杆菌在线分析仪，包括恒温箱3和蠕动泵1；恒温箱3内设置有温度传感器7、加热装置10、分析仪主板9、培养盘8和检测366nm荧光光强的荧光分光光度计6，恒温箱3外壳处设置有显示器2、数据远程传输接口、控制键4和打印接口5；分析仪主板9电连接有数据存储装置、温度传感器7、加热装置10、分光光度计6、数据远程传输接口、控制键4、打印接口5和显示器2；蠕动泵1的出口管接培养盘8且入口与外界样品管接；培养盘8上承装有培养基和荧光底物；荧光分光光度计6设置在能接收到培养盘8发出的光线的位置。
样品首先经常规预处理。之后由分析仪主板9控制蠕动泵1泵至恒温箱3内的培养盘8中进行培养，培养盘8中承装有培养基和荧光底物。培养基的组分配方如下：(NH4)2SO420-25g；Na2HPO420-23g；KH2PO45-6g；NaCl  15-16g；乳糖10-15g；精解蛋白胨2-3g；脱氧胆酸钠1-3g；十二烷基磺酸钠2-3g；MgSO4·7H2O 2-5g；Na2SO30.5-1g；Mn(SO4)25-10mg；ZnSO45-10mg；CaCl20.5-1g；将上述所有组份剂量溶于500-3000倍重量的水中，即为培养基。荧光底物组分配方如下：间-硝基苯酚-β-D-吡喃半乳糖苷0.1-0.3g，4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷酸0.07-0.12g，将上述的所有组份剂量溶于100-200倍重量的75％～100％乙醇中，即为荧光底物。
分析仪主板8通过温度传感器7控制加热装置10恒定恒温箱3内的温度为37℃。经过6小时的培养后，由分析仪主板9控制荧光分光光度计6进行366nm处的荧光光强测量，测量结果经荧光光强-大肠杆菌浓度转换，直接存储在分析仪主板9上的存储装置中，并由显示器2直接显示或经打印机进行打印输出。
以上是对本发明大肠杆菌在线分析仪进行了阐述，用于帮助理解本发明，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：包括恒温箱和采样泵，所述恒温箱内设置有温度传感器、加热装置、分析仪主板、培养盘和荧光分光光度计，所述恒温箱外设置有显示器，所述分析仪主板电连接温度传感器、加热装置、荧光分光光度计和显示器，所述采样泵的出口管接培养盘且入口与外界样品管接。
2.根据权利要求1所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述培养盘上承装有培养基和荧光底物。
3.根据权利要求1所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述恒温箱的温度恒定为37℃。
4.根据权利要求1所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述分析仪主板电连接数据存储装置。
5.根据权利要求1述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述荧光分光光度计设置在能接收到培养盘发出的光线的位置。
6.根据权利要求1所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述荧光分光光度计为检测366nm荧光光强的分光光度计。
7.根据权利要求1或4所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述分析仪主板设置电连接有设置在恒温箱外壳的数据远程传输接口。
8.根据权利要求1所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述分析仪主板电连接有设置在恒温箱外壳的控制键和打印接口。
9.根据权利要求1所述的大肠杆菌在线分析仪，其特征在于：所述采样泵为蠕动泵。
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