CN102172882B - 一种头足类耳石切片的研磨及保存方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种头足类耳石的研磨及保护方法，该方法包括提取、浸泡、放置、树脂包埋、切割、固定在载玻片上、打磨、抛光以及保存等步骤。本发明可以解决头足类耳石甚小，不易研磨，以及研磨过程中，耳石易碎，打磨后轮纹易褪去的问题，能使耳石轮纹保持较长的时间。

Description

一种头足类耳石切片的研磨及保存方法
技术领域
本发明属于水产学领域，主要涉及一种头足类耳石切片的研磨及保存方法。
背景技术
头足类是软体动物门的重要类群，不仅具有很高的经济价值，而且在海洋生态中占有重要地位。头足类耳石与鱼类一样，是一种很好的信息载体，它具备2个基本条件。一是信息输入稳定；二是所输入的信息能得到良好的储存。
耳石沉积具不可逆性，其生长贯穿整个生命过程，只有在极度缺氧的情况下才会发生耳石的再吸收。耳石是位于平衡囊内起平衡作用的一对硬组织，它是头足类加速度感应器，包含大量生物学和生态学信息，被形象的称作生命记录仪。它可揭示了头足类的孵化体长、胚胎发育期的温度、年龄、生长、特殊过渡时期的信息、洄游路线、种群结构、产卵次数、交配事件发生时间与次数、个体发育期转变、栖息环境等，还可以用作系统和生活式样研究。
头足类具有生长快、生命周期短等特点，耳石具有信息储存稳定的特点，是研究头足类年龄和生长的最有效方法之一。头足类耳石虽有轮纹结构，除生长早期外，其余时期均需要打磨来观察轮纹结构。由于头足类与鱼类相比，其耳石甚小，以大型头足类茎柔鱼(胴长超过100cm)为例，其最大耳石长度为2749μm，而且耳石结晶体易碎。因此在研磨之前必须包埋，一方面为了增加研磨接触面积，另一方面有利于研磨平面的选择。
头足类耳石的制片是一个复杂而精细的过程，制片效果的好坏直接关系日龄鉴定的准确性及可靠性。影响制片效果主要有两方面：一是研磨平面的选择，二是处理方法的选择。研磨平面的选择是头足类耳石制片过程中最为重要且关键的一环。同时观察发现，打磨后的耳石长期暴露于空气中会使轮纹褪去。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对现有技术的不足而提供一种头足类耳石切片的研磨及保存方法。
本发明所要解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现：
一种头足类耳石切片的研磨及保存方法，具体包括如下步骤：
1、提取：用竹制镊子将平衡囊内的头足类耳石取出；
2、浸泡：将头足类耳石取出后，放在离心管中，加入重量百分比浓度为70％的酒精浸泡1周以上；
3、放置：将头足类耳石按正确的方式放入塑料模具的包埋槽当中，研磨头足类耳石的纵截面，即由翼区、侧区分别向右、向左研磨至核心；
4、树脂包埋：按1∶1的体积比将压克力粉和固化剂配置成溶液，将调配好溶液倒入塑料模具的包埋槽中，溶液覆盖头足类耳石，包埋后放置阴凉处待其硬化形成包埋有头足类耳石的硬化树脂块；
5、切割：将包埋有头足类耳石的硬化树脂块以头足类耳石为中心，切割成1-2mm的薄片，并使研磨面平行于头足类耳石的长轴；
6、固定：将切割好的薄片用强力速粘胶粘在载玻片上固定，并使头足类耳石翼区朝上；
7、打磨：研磨过程中，先用600号砂纸粗磨至头足类耳石表面，再用800号、1200号砂纸细磨，并随时在光学显微镜下观察其研磨程度，至接近耳石核心处；
8、抛光：以0.05μm氧化铝剂加水在绒布抛光研磨面，除去多余的油质和杂质，如此完成一面的研磨过程；
9、将载玻片泡在热水中数分钟，取下一面研磨好的薄片，干燥后，将一面研磨好的薄片翻面，使头足类耳石侧区朝上，再用强力速粘胶粘在载玻片上；重复上述步骤7-8，至头足类耳石核心中点清晰可见，然后将载玻片泡在热水中数分钟，取下研磨好的薄片，干燥后涂上透明的指甲油，放入鳞片袋中保存，并做好标记。
本发明具有如下有益效果和实质性特点：
本发明解决了头足类耳石甚小，不易提取、不易研磨，以及研磨过程中，耳石易碎、打磨后轮纹易褪去的问题，提供一种能够快速准确研磨至耳石核心的方法，保证较高的制片成功率，同时使打磨后的耳石轮纹能保持较长的时间。
附图说明：
图1为本发明茎柔鱼耳石形态及纵截面示意图
图2为本发明塑料模具的结构示意图。
图1中，1为背区，2为测区，3为翼区，4为吻区，5为纵截面，图2中，6为包埋槽，7为模具。
具体实施方式：
为了使本领域技术人员能够理解本发明的其它技术方案，本具体实施方式以茎柔鱼为例将对本发明所涉及的各项技术方案，进一步阐述本发明。
一种茎柔鱼的耳石切片的制备和保存方法，具体包括如下步骤：
1、提取：用竹制镊子将茎柔鱼平衡囊内的耳石取出，注意要轻拿轻放，以免损坏耳石；
2、浸泡：将茎柔鱼的耳石取出后，放在离心管中，加入重量百分比浓度为70％的酒精浸泡1周以上；
3、放置：将茎柔鱼耳石的侧区2紧紧挨着包埋槽6的边缘，水平放置，研磨耳石的纵截面，即由翼区3、侧区2分别向右、向左研磨至核心；
4、树脂包埋：先对包埋槽6进行编号，号码与离心管的编号一致，每个包埋槽6的规格为：长22mm，宽：19mm，高：8mm，按1∶1的体积比将压克力粉和固化剂配置成溶液，将调配好溶液倒入包埋槽6，溶液需要覆盖茎柔鱼耳石，包埋后放置阴凉处24小时，待其硬化；
5、切割：将包埋有茎柔鱼耳石的硬化树脂块固定在切割机的夹具上，以耳石为中心，切割成1-2mm的薄片，并使研磨面平行于耳石长轴；
6、固定：融化强力速粘胶，用针沾取适量的强力速粘胶，将切割好的薄片粘在载玻片上固定，使耳石翼区3朝上；
7、打磨：按住载玻片，放置于研磨机上，先用600号砂纸粗磨至耳石表面，再用800号、1200号砂纸细磨，并随时在光学显微镜下观察其研磨程度，至接近耳石核心处；
8、抛光：以0.05μm氧化铝剂加水在绒布抛光研磨面，除去多余的油质和杂质。如此完成一面的研磨过程；
9、将载玻片泡在热水中数分钟，取下薄片。确定干燥后(至少30分钟以上)，将薄片块翻面，使耳石侧区2朝上，再用强力速粘胶粘在载玻片上。重复上述的研磨过程，至耳石核心中点清晰可见。
10、最后将打磨好的耳石切片涂上透明的指甲油，放入鳞片袋中保存，并做好标记。
应理解本发明所述的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行的描述，并非对本发明构思和范围进行限定，在不脱离本发明设计思想的前提下，本领域中工程技术人员对本发明的技术方案做出的各种变型和改进，均应落入本发明的保护范围，本发明请求保护的技术内容，已经全部记载在权利要求书中。

Claims (1)

1.一种茎柔鱼的耳石切片的制备和保存方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
（1）、提取：用竹制镊子将茎柔鱼平衡囊内的耳石取出，注意要轻拿轻放，以免损坏耳石；
（2）、浸泡：将茎柔鱼的耳石取出后，放在离心管中，加入重量百分比浓度为70%的酒精浸泡1周以上；
（3）、放置：将茎柔鱼耳石的侧区紧紧挨着包埋槽的边缘，水平放置，研磨耳石的纵截面，即由翼区、侧区分别向右、向左研磨至核心；
（4）、树脂包埋：先对包埋槽进行编号，号码与离心管的编号一致，每个包埋槽的规格为：长22mm，宽：19mm，高：8mm，按1:1的体积比将压克力粉和固化剂配置成溶液，将调配好的溶液倒入包埋槽，溶液需要覆盖茎柔鱼耳石，包埋后放置阴凉处24小时，待其硬化；
（5）、切割：将包埋有茎柔鱼耳石的硬化树脂块固定在切割机的夹具上，以耳石为中心，切割成1-2mm的薄片，并使研磨面平行于耳石长轴；
（6）、固定：融化强力速粘胶，用针沾取适量的强力速粘胶，将切割好的薄片粘在载玻片上固定，使耳石翼区朝上；
（7）、打磨：按住载玻片，放置于研磨机上，先用600号砂纸粗磨耳石表面，再用800号、1200号砂纸细磨，并随时在光学显微镜下观察其研磨程度，至接近耳石核心处；
（8）、抛光：用0.05μm氧化铝剂加水在绒布上抛光研磨面，除去多余的油质和杂质；如此完成一面的研磨过程；
（9）、将载玻片泡在热水中数分钟，取下薄片；干燥30分钟以上，确定干燥后，将薄片块翻面，使耳石侧区朝上，再用强力速粘胶粘在载玻片上；重复上述步骤（7）-（8）的研磨过程，至耳石核心中点清晰可见；
（10）、最后将打磨好的耳石切片涂上透明的指甲油，放入鳞片袋中保存，并做好标记。
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