CN102153382B - 一种复合微生物叶面肥喷施剂及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及的是微生物领域，具体的说是一种复合微生物叶面喷施剂及其使用方法。叶面肥喷施剂由复合微生物的发酵物组成，所述复合微生物发酵物为产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌的共同培养物与慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌的单一培养液复合而成，按重量百分比计，混合比例为共同发酵物占40％，单一培养细菌分别占10％。将所述喷施剂按1∶1000-1∶500水稀释后，喷施于植物、蔬菜或花卉叶片上。本发明叶面喷施剂可延长蔬菜生长期、提高蔬菜产量、品味，蔬菜产量可以提高5.5-10.0％；延长花卉观赏期，花卉观赏期可以延长8-10天。
Description
技术领域
本发明涉及的是微生物领域，具体的说是一种复合微生物叶面喷施剂及其使用方法。
背景技术
微生物肥料是一类含有活微生物的特定制品，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应，其中活微生物起到关键作用。由于微生物肥料中含有活的微生物活动因素，可促进植物生长。
目前的研究表明，多种共生固氮菌、芽孢杆菌、光合细菌以及纤维分解菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌等均在植物生产中具有功能作用，可作为微生物肥料菌种。并且，由于不同菌种对植物的促生长作用机理不同，复合微生物肥料日益受到人们的关注。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复合微生物叶面喷施剂及其使用方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种复合微生物叶面肥喷施剂：叶面肥喷施剂为复合微生物的发酵物，所述复合微生物发酵物为产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌的共同培养物与慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌的单一培养液复合而成，按重量百分比计，混合比例为共同发酵物占40％，单一培养细菌分别占10％。
所述的复合微生物肥料：将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌共同发酵培养至总菌数达到109个/mL以上，再与分别培养至对数生长期的慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌混合得复合微生物的发酵物，混合比例为共同发酵物占40％，每单一培养细菌分别占10％。
上述菌株均购自中国农业微生物菌种保藏中心，其产朊假丝酵母于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC20060；乳酸链球菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10653；嗜酸乳杆菌于中国工业微生物菌种保藏中心的编号为CICC6005；枯草芽孢杆菌于中国工业微生物菌种保藏中心的编号为CICC20037；慢生大豆根瘤菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC15402；生脂固氮螺菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10481；沼泽红假单孢菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10649；巨大芽孢杆菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC02991；胶质芽孢杆菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC02983；圆褐固氮菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10098。
所述复合微生物的发酵物，发酵后产物的pH值为4.5-7.5。
复合微生物叶面肥喷施剂的使用方法：将所述喷施剂按1∶1000-1∶500水稀释后，喷施于植物、蔬菜或花卉叶片上。
本发明所具有的优点：
1.本发明叶面喷施剂采用复合微生物肥料的菌种复合组合，该组合可协调发挥促生长作用，具有功能互补性；
2.本发明叶面喷施剂有利于发酵，pH值在4.5-7.5之间，活微生物数量在30亿/mL以上，微生物活力稳定；
3.本发明叶面喷施剂的效果良好，效果试验表明，可提高蔬菜的品味、产量，其产量可以提高5.0％-10.0％；同时可延长花卉的观赏期和草坪绿期8-10天。
具体实施方式
实施例1
叶面肥喷施剂为复合微生物的发酵物。
复合微生物发酵物：
1)将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按照常规方法分别进行活化培养至对数生长期，而后将活化后的产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按体积比1∶1∶1∶1混合，而后将混合后菌种按照重量百分比4％接种于液体发酵培养基中复合培养，在30℃下，发酵培养70h，发酵物pH值为4.5-7.5，至总菌数达到109个/mL以上；其中液体发酵培养基为葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，余量为蒸馏水，按常规方法将慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌分别于各自的培养基中摇瓶培养48-72h，分别扩大培养至微生物数量达到108个/mL以上，即活化至处于对数生长期。
2)将共同发酵培养至总菌数达到109以上的产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌复合培养物，与分别培养至对数生长期的慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌混合得复合微生物的发酵物，混合比例为共同发酵物占40％，单一培养细菌分别占10％。发酵后产物的pH值为4.5-7.5。
上述菌株均可分别按照常规方法培养，本实施例给出的知识众多培养条件中的一种，分别为：
产朊假丝酵母的培养基：马铃薯浸粉3g，葡萄糖20g，琼脂粉15g，蒸馏水加至1000mL，121℃高压灭菌20分钟。产朊假丝酵母增殖培养条件28℃培养24-48h。
乳酸链球菌的培养基：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，乙酸钠0.5％，柠檬酸铵0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，琼脂1.5-2％，pH6.5。121℃高压灭菌20分钟。乳酸链球菌增殖培养条件30℃培养48-72h。
嗜酸乳杆菌的培养基：葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，乙酸钠0.5％，柠檬酸铵0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，琼脂1.5-2％，pH6.5。121℃高压灭菌20分钟。嗜酸乳杆菌增殖培养条件37℃培养48-72h。
枯草芽孢杆菌的培养基：蛋白胨10g，琼脂20g，氯化钠5g，肉浸粉10g，水加至1000mL，pH7.2。121℃高压灭菌20分钟。枯草芽孢杆菌增殖培养条件30℃培养48-72h。
慢生大豆根瘤菌的培养基：甘露醇10g、K2HPO40.5g、酵母粉0.4g、MgSO4·7H2O0.2g、NaCl0.1g、CaCl2·6H2O0.1g、蒸馏水1000mL、pH6.8-7.0。121℃高压灭菌20分钟。慢生大豆根瘤菌增殖培养条件28℃培养48-72h。
生脂固氮螺菌的培养基：蔗糖10g，K2HPO40.5g，NaCl0.1g，酵母膏1g，柠檬酸铁(1％)1mL，CaSO40.2g，MgSO4·7H2O0.2g，MnSO4(1％)1mL，NaMoO4(1％)1mL，硼酸(1％)1mL，蒸馏水1000mL，pH6.8-7.0；121℃高压灭菌20分钟。生脂固氮螺菌增殖培养条件在25-30℃条件下，培养48-72h。
嗜沼泽红假单孢菌的培养基：酵母粉0.3％，蛋白胨0.3％，硫酸镁0.05％，氯化钙0.03％，蒸馏水1000mL，pH6.8-7.0；121℃高压灭菌20分钟。嗜沼泽红假单孢菌增殖培养条件在30℃条件下，培养72-96h。
巨大芽孢杆菌的培养基：蛋白胨0.5％，牛肉膏0.3％，氯化钠0.5％，蒸馏水1000mL，pH7.0；121℃高压灭菌20分钟。巨大芽孢杆菌增殖培养条件在30℃条件下，培养24-48h。
胶质芽孢杆菌培养基：蔗糖10g，酵母膏0.2g，(NH4)SO40.5g，MgSO40.1g，KCl0.1g，Na2HPO40.1g，CaCO31.0g，蒸馏水1000mL，pH7.0。121℃高压灭菌20分钟；增殖培养条件在32-36℃条件下，培养20-40h。
圆褐固氮菌培养基：葡萄糖10g，KH2PO40.2g，MgSO4·7H2O0.2g，NaCl0.2g，CaSO4·7H2O0.2g，CaCO35.0g，蒸馏水1000mL，pH7.0-7.2，113℃灭菌30分钟。增殖培养条件在28-36℃条件下，培养24-48h。
上述菌株均购自中国农业微生物菌种保藏中心，其产朊假丝酵母于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC20060；乳酸链球菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10653；嗜酸乳杆菌于中国工业微生物菌种保藏中心的编号为CICC6005；枯草芽孢杆菌于中国工业微生物菌种保藏中心的编号为CICC20037；慢生大豆根瘤菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC15402；生脂固氮螺菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10481；沼泽红假单孢菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10649；巨大芽孢杆菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC02991；胶质芽孢杆菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC02983；圆褐固氮菌于中国农业微生物菌种保藏中心的编号为ACCC10098。
使用方法：将所述喷施剂按1∶1000水稀释后，喷施于植物叶片上。
试验材料：温室内栽培的番茄，按照常规管理。
试验设计：试验设计对照组和微生物叶面喷施剂施用组(用量为1.5mL/m2，1∶1000稀释)，每个处理组4个重复，每个重复15m2。
产量测定：测定试验期内采收的可上市番茄总重量。
试验结果：对照组的番茄产量为5.3kg/m2，喷施组为6.2kg/m2，产量提高了16.9％。
实施例2
叶面肥喷施剂由复合微生物的发酵物组成，所述复合微生物发酵物为产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌的共同培养物与慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌的单一培养液复合而成，按重量百分比计，混合比例为共同发酵物占40％，单一培养细菌分别占10％。发酵后产物的pH值为4.5-7.5。
使用方法：将所述喷施剂按1∶500水稀释后，喷施于植物叶片上。
试验材料：成坪第二年的草地早熟禾草坪，按照常规管理实施浇水、剪草作业。
试验设计：试验设计对照组和微生物叶面喷施剂施用组(用量为1.5mL/m2，1∶500稀释)，每个处理组6个重复。
绿期测定：直接观测法，记录草坪80％叶片枯黄的时间。
试验结果：对照组枯黄时间为12月3日，叶面肥施用组的枯黄时间为12月14日，枯黄时间推迟11天。
Claims (4)
1.一种复合微生物叶面肥喷施剂，其特征在于：叶面肥喷施剂为复合微生物的发酵物，所述复合微生物发酵物为产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌的共同培养物与慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌的单一培养液复合而成，按重量百分比计，混合比例为共同发酵物占40％，单一培养细菌分别占10％。
2.按权利要求1所述的复合微生物叶面肥喷施剂，其特征在于：所述的复合微生物肥料：将产朊假丝酵母、乳酸链球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌共同发酵培养至总菌数达到109个/mL以上，再与分别培养至对数生长期的慢生大豆根瘤菌、生脂固氮螺菌、沼泽红假单孢菌、巨大芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌和圆褐固氮菌混合得复合微生物的发酵物，混合比例为共同发酵物占40％，每单一培养细菌分别占10％。
3.按权利要求1所述的复合微生物叶面肥喷施剂，其特征在于：所述复合微生物的发酵物的pH值为4.5-7.5。
4.一种权利要求1所述的复合微生物叶面肥喷施剂的使用方法，其特征在于：将所述喷施剂按1:1000—1:500水稀释后，喷施于植物叶片上。
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