CN102125599B - 一种黄芪有效组分制备方法与用途 - Google Patents

一种黄芪有效组分制备方法与用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种黄芪有效组分的制备方法。药材通过加热提取，浓缩，反相硅胶柱分离，洗脱，洗脱液浓缩干燥后得到有效组分。本发明提供的黄芪有效组分可在制备治疗、预防心血管疾病药物中的应用。本发明方法设计合理，能快速准确地得到有效成分，在生产中更易于药物的质量控制。

Description

一种黄芪有效组分制备方法与用途
技术领域
本发明属中药制剂，涉及一种治疗心血管疾病的中药提取物，具体地说涉及从黄芪中提取的有效组分的制备方法与医药用途，该有效组分通过提取，反相硅胶柱中压分离而获得。
背景技术
心血管疾病是危害人类健康的第一杀手，近年来，随着我国人口老年化以及人们工作、生活、饮食结构及环境等的变化，冠心病等心脑血管疾病的发生率也逐年增多，严重威胁着人民的身心健康。天然产物中许多活性物质具有抗心肌缺血、缺氧作用，其中一些已开发成治疗冠心病和心绞痛的新药。因而从天然产物中寻找具有抗心肌缺血、缺氧生理活性的有效物质，是发现、开发新药的有效途径之一。我国药用生物资源十分丰富，其生理活性物质是研究和发现新药先导化学物，开发新药的天然宝库。目前，我国从天然产物中提取活性物质，用于开发成治疗冠心病、安全性好、毒性低的新药还很少，从天然产物中提取活性物质，开发成具有抗心肌缺血作用，用于治疗冠心病和心绞痛的新药，具有重要应用价值和广阔发展前景。
黄芪为豆科植物蒙古黄芪及膜荚黄芪的干燥根，是一种常用中药，味甘、性温，有补气升阳、固表止汗、托毒排脓和生肌等功效。黄芪具有免疫调节作用，可使细胞的生理代谢增强。近年来研究发现黄芪中含有的黄芪多糖、皂甙、黄酮等化合物具有较强的生物活性。黄芪皂苷能通过扩张血管达到降压目的，黄芪的总黄酮和总皂苷等成分具有显著的抗氧化活性，能抑制自由基的产生和清除体内过剩的自由基，故能有效地延缓衰老。
因此，从黄芪中分离出有效组分，开发出治疗心血管疾病的现代中药具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黄芪有效组分的制备方法，通过以下步骤实现：将黄芪药材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取，药渣加乙醇水溶液提取，将提取液浓缩成浸膏，用反相硅胶柱对其进行分离，用低浓度甲醇作为流动相，得洗脱液，将洗脱液浓缩干燥后得样品。
优选的，本发明的黄芪有效组分制备方法，包括下列步骤：取黄芪药材，将其粉碎后加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液I。药渣加入70%乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液II，将提取液II浓缩成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C18柱对其进行分离，用5%甲醇作为流动相，得洗脱液，将洗脱液浓缩干燥后得样品。
本发明的另一个目的是提供所述黄芪有效组分在制备治疗、预防心血管疾病的药物中的应用。经药理实验证明，本发明提供的黄芪有效组分对心肌细胞有保护作用。
本发明的黄芪有效组分可以作为活性成分，加入药剂学上接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂的制备方法制成制剂。
所述的制剂包括注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、喷雾剂、滴丸剂 、崩解剂、口崩片、微丸等。
本发明提供的制备方法设计合理，能快速准确地得到有效成分，在生产中更易于药物的质量控制。本发明的黄芪有效组分及其制剂可在制备治疗、预防心血管疾病药物中应用。
具体实施方式
下面将结合实施例进一步详细说明本发明的实质内容和有益效果，该实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。
实施例一 黄芪有效组分的制备
将黄芪药材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取，药渣加乙醇水溶液提取，将提取液浓缩成浸膏，用反相硅胶柱对其进行分离，用低浓度甲醇作为流动相，得洗脱液，将洗脱液浓缩干燥后得样品。
实施例二 黄芪有效组分的制备
取黄芪药材，将其粉碎后加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液I。药渣加入70%乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液II，将提取液II浓缩成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C18柱对其进行分离，用5%甲醇作为流动相，得洗脱液，将洗脱液浓缩干燥后得样品。
实施例三 滴丸制剂的制备
取黄芪有效组分0.5g与10.5g聚乙二醇-20000混合均匀，加热熔融，化料后移至滴丸滴灌中，药液滴至6~8℃液体石蜡中，除油，制得滴丸400粒。
实施例四 冻干粉针剂的制备
取黄芪有效组分0.5g、葡萄糖4.5g、硫代硫酸钠0.9g和蒸馏水1000ml，上述组分混合均匀后，分装400支，冷冻干燥，即得。
实施例五 黄芪有效组分的的活性评价实验
1．黄芪组分对H2O2损伤心肌细胞的保护作用
体外培养H9C2心肌细胞，培养液为DMEM(高糖)+10%FBS(G)+1%非必需氨基酸+0.1%双抗。取对数生长期细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养24 h后，加入200μmol/mL H2O2损伤心肌细胞30 min，再加入终浓度为50μg/mL的黄芪组分孵育24 h，采用MTT法测定细胞活力。结果表明，该组分对H2O2损伤心肌细胞的保护率为15.42 %。
2. 黄芪组分对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用
体外培养H9C2心肌细胞，培养液为DMEM(高糖)+10%FBS(G)+1%非必需氨基酸+0.1%双抗。取对数生长期细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养24 h后，在缺氧小室中培养6 h。缺氧结束后，取出细胞培养板加入经无糖Hank’s稀释的终浓度为50μg/mL的黄芪组分，在正常培养条件下孵育6 h，取细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果表明，该组分对缺氧复氧损伤的心肌细胞保护率为23.31 %。

Claims (2)

1.一种黄芪有效组分在制备治疗心血管疾病药物中的应用，所述黄芪有效组分通过以下步骤获得：取黄芪药材，将其粉碎后加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液I；药渣加入70%乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液II，将提取液II浓缩成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C18柱对其进行分离，用5%甲醇作为流动相，得洗脱液，将洗脱液浓缩干燥后得有效组分。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物由黄芪有效组分加入药剂学上可接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂制备方法制成。 
3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的制剂包括液体制剂或固体制剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101073592A (zh) * 2006-05-18 2007-11-21 天津天士力制药股份有限公司 一种黄芪药材的提取分离方法

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