CN102115712B - 核酸分子杂交实验的移液方法及其反应装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种核酸分子杂交实验的移液方法，其包括以下步骤：将膜条与试剂置入容器中并加热至实验温度；振荡所述容器，并按照实验需求适时加入相应的试剂；反应完成后，将所述容器离心脱水，使膜条与试剂分离。本发明还公开了一种实现该方法的反应装置，其包括一个设置在外设的核酸分子杂交仪上的、可旋转的、上面布置有若干个膜槽的转盘。本发明中的核酸分子杂交实验的移液方法，利用旋转离心力实现移液脱水，克服了以往移液速度慢，导致实验误差大的缺点。本发明振荡方便，移液快速，可广泛应用于核酸分子杂交实验。

Description

核酸分子杂交实验的移液方法及其反应装置

技术领域

本发明涉及一种分子生物学实验当中的移液方法及其反应装置，特别是一种核酸分子杂交实验中的移液方法及实现该方法的反应装置。

背景技术

互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链DNA分子的过程称为杂交，核酸分子杂交是一种基本的分子生物学实验，例如在检测病人的血液中是否含有特定的病原体或肿瘤细胞，就需要进行核酸分子杂交实验，核酸分子杂交仪就是进行这种实验所用的仪器。进行核酸分子杂交的一般步骤是，先确定检测方向，准备好试验用的膜条和试剂，将膜条浸入到核酸分子杂交仪的反应装置中，一般地，是指浸入至盛有杂交液的膜槽中，然后将在PCR扩增仪中扩增得到的实验样品加入到所述的杂交液中，让其与试剂混合并且与膜条上的分子探针发生特异性结合的预反应，接着依序定时加入定量的结合液、洗脱液、显色液，膜槽在整个反应过程中还应当不停地振荡，保证膜条浸润完全，试剂与实验样品均匀接触反应，同时，反应过程还需要保持在指定的温度(通常比环境温度高)中。当上述反应结束后，脱去试剂，将膜条浸入到终止液中，等反应终止、显色定型后，取出膜条并用扫描仪扫描膜条，将结果自动存档。

目前传统的核酸分子杂交仪，是采用长水槽式的加热反应装置。具体地，是在一个长水槽内设置有若干个膜槽，需要的实验温度是依靠在长水槽内通入温水，然后对温水加热到指定的实验温度；为了使试剂与实验样品反应均匀所需要的振荡动作，则由长水槽的晃动，带动膜槽运动来实现；而加液和移液的步骤，则是依靠仪器的吸管，分别插入到每个膜槽内加液或吸液。但这种做法，一方面由于水量大，温度不好控制，而实验温度则是需要比较精确和稳定的；另一方面，由于移液的步骤是用吸管进行的，这使得各个动作必须分开进行，而导致同一批次的测试样品的反应时间有偏差，并且该操作会长达3小时，这段过长的时间必导致试验的结果有误差，因此需要有一种新的移液的方法，能让反应试剂快速移液，并且可操作性强。

发明内容

本发明的目的，是为了提供一种核酸分子杂交实验的移液方法，其具有进行核酸分子杂交实验时移液迅速的特点。

本发明的另一个目的，是为了提供一种能实现所述核酸分子杂交实验的移液方法的反应装置。

本发明解决其技术问题的解决方案是：

核酸分子杂交实验的移液方法，其包括以下步骤：

1)、将膜条与试剂置入容器中并加热至实验温度；

2)、振荡所述容器，并按照实验需求适时加入相应的试剂；

3)、反应完成后，将所述容器离心脱水，使膜条与试剂分离。

一种实现所述的核酸分子杂交实验的移液方法的反应装置，其包括一个设置在外设的核酸分子杂交仪上的、可旋转的、上面布置有若干个膜槽的转盘。

作为上述技术方案的进一步改进，所述转盘下方设置有温控装置，所述膜槽以转盘的中心轴为中轴辐射分布。

作为上述技术方案的进一步改进，所述膜槽以转盘的中心为中轴辐射偏心分布，偏心方向与转盘的旋转方向相反。

作为上述技术方案的进一步改进，所述膜槽有24个。

作为上述技术方案的进一步改进，所述膜槽设有延伸到转盘外的、收尾向上弯曲的槽道。

作为上述技术方案的进一步改进，所述转盘设有布置在其上方并与其扣合的挡水罩。

作为上述技术方案的进一步改进，所述挡水罩的上部洞穿并设有遮光片。

本发明的有益效果是：本发明中的核酸分子杂交实验的移液方法，利用旋转离心力实现移液脱水，克服了以往移液速度慢，导致实验误差大的缺点。本发明中的反应装置，利用转盘下方的温控装置快速升温降温，保证实验温度，温控较以前通水升降温的方式更快速准确，转盘正反转振荡，高速旋转移液。本发明中的核酸分子杂交实验的移液方法移液迅速、可操作性强；相应的反应装置结构简单，操作便捷，实现了离心式脱水移液的目的，可广泛应用于核酸分子杂交实验。

附图说明

下面结合附图及实施例对本发明作进一步的说明。

图1是本发明中的转盘的饼状剖切结构示意图；

图2是本发明中的转盘安装在核酸分子杂交仪后的整体结构爆炸图。

具体实施方式

核酸分子杂交实验的移液方法，其包括以下步骤：

1)、将膜条与试剂置入容器中并加热至实验温度；

2)、振荡所述容器，并按照实验需求适时加入相应的试剂；

3)、反应完成后，将所述容器离心脱水，使膜条与试剂分离。

参照图1～图2，一种实现所述的核酸分子杂交实验的移液方法的反应装置，其包括一个设置在外设的核酸分子杂交仪上的、可旋转的、上面布置有若干个膜槽4的转盘1。具体地，所述转盘1由铝合金制成，上面覆有一层防腐层。转盘1的转动由伺服电机驱动。

作为上述技术方案的进一步改进，所述转盘1下方设置有温控装置，所述膜槽4以转盘1的中心轴为中轴辐射分布。所述温控装置是设置在转盘1下方的温度控制器，通过通电流产生热量，将所述转盘1进行加温或降温，由于电流可以比较方便地控制，因此转盘1的发热量也可以较为准确地控制，并且利用在转盘1下面用电流产生热量的升温(降温)方式，较以前依靠加热比热大的水来让膜槽4升温或降温的方式，具有温控快速方便的特点。

作为上述技术方案的进一步改进，所述膜槽4以转盘1的中心为中轴辐射偏心分布，偏心方向与转盘1的旋转方向相反。这种偏心辐射的布置方式，使转盘1在旋转脱水时，膜槽4内的试剂能快速地从槽内甩出，实现快速脱水。

作为上述技术方案的进一步改进，所述膜槽4有24个。多个膜槽4，使本发明能一次最多处理24个不同的实验样品，大大节省了时间。

作为上述技术方案的进一步改进，所述膜槽4设有延伸到转盘1外的、收尾向上弯曲的槽道41。槽道41对转盘1旋转脱水时对槽内溶液具有更优良的导流作用，并且由于其收尾向上，在转盘1低速转动时，膜槽4内的液体不会因为离心力而被甩离，而只会在转盘1达到一定的转速时，才会被甩离。

作为上述技术方案的进一步改进，所述转盘1设有布置在其上方并与其扣合的挡水罩2。挡水罩2可以防止转盘1旋转时大量的试剂飞溅出去。

作为上述技术方案的进一步改进，所述挡水罩2的上部洞穿并设有遮光片3。遮光片3既可以保护转盘1内的膜条在一定的光照条件下反应，又可以使外部的操作人员及时看到膜条的显色变化。

工作时，先准备包含有配液瓶6、注射泵7、控制器9、注射通道5、转盘1的杂交仪8，所述控制器9控制注射泵7定时定量地将配液瓶6中的试剂通过注射通道5加入膜槽4内。前期先进行标准的预处理程序，待到操作时，往转盘1的膜槽4内贴膜条，膜条以3的倍数放入，最多放入24条，控制注射泵7启动，往膜槽4内注入4ml的杂交液，温控装置启动将槽内的杂交液升温至45℃；这时候，手动往膜槽4内加入待测样品的PCR扩增产物，盖上挡水罩2和遮光片3，控制器9控制转盘1缓慢正反转动，每次转动45°，转速为12r/min，振荡60分钟；接着，转盘1高速旋转脱水，转速为300r/min，槽内液体便会由于离心作用，从槽道41甩离；在完成第一次的试剂移除后，按照实验流程，依次加入如结合液、洗脱液、显色液等试剂，参照上述的振荡与移液的操作，利用转盘1进行振荡与移液脱水。整个实验操作时间为100分钟，比之传统的核酸分子杂交仪节省了许多时间。

以上是对本发明的较佳实施进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明精神的前提下还可作出种种的等同变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (5)

1.核酸分子杂交实验的移液方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1)、将膜条与试剂置入容器中并加热至实验温度，所述容器为一转盘(1)；

2)、振荡所述容器，并按照实验需求适时加入相应的试剂；

3)、反应完成后，将所述容器以转速为300r/min的速度离心脱水，使膜条与试剂分离；

其中步骤1)～步骤3)的转盘(1)，是设置在外设的核酸分子杂交仪上的、可旋转的、上面布置有若干个膜槽(4)的、由伺服电机驱动的转盘(1)；所述转盘(1)下方设置有温控装置，所述膜槽(4)以转盘(1)的中心轴为中轴辐射分布；所述膜槽(4)设有延伸到转盘(1)外的、收尾向上弯曲的槽道(41)；所述膜槽(4)以转盘(1)的中心为中轴辐射偏心分布，偏心方向与转盘(1)的旋转方向相反。

2.一种实现权利要求1所述的核酸分子杂交实验的移液方法的反应装置，其特征在于：其包括一个设置在外设的核酸分子杂交仪上的、可旋转的、上面布置有若干个膜槽(4)的、由伺服电机驱动的转盘(1)；所述转盘(1)下方设置有温控装置，所述膜槽(4)以转盘(1)的中心轴为中轴辐射分布；所述膜槽(4)设有延伸到转盘(1)外的、收尾向上弯曲的槽道(41)；所述膜槽(4)以转盘(1)的中心为中轴辐射偏心分布，偏心方向与转盘(1)的旋转方向相反。

3.根据权利要求2所述的反应装置，其特征在于：所述膜槽(4)有24个。

4.根据权利要求2所述的反应装置，其特征在于：所述转盘(1)设有布置在其上方并与其扣合的挡水罩(2)。

5.根据权利要求4所述的反应装置，其特征在于：所述挡水罩(2)的上部洞穿并设有遮光片(3)。