CN102078302B - 一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法 - Google Patents
一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102078302B CN102078302B CN 201010603372 CN201010603372A CN102078302B CN 102078302 B CN102078302 B CN 102078302B CN 201010603372 CN201010603372 CN 201010603372 CN 201010603372 A CN201010603372 A CN 201010603372A CN 102078302 B CN102078302 B CN 102078302B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chitosan
- berbamine
- agar
- nanoparticle
- drug
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒，属于纳米载体药物缓释领域，该载药纳米粒由小檗胺、壳聚糖、琼胶和三聚磷酸钠组成。该载药纳米微粒的制备方法是将小檗胺溶于壳聚糖醋酸溶液中，滴入作为交联剂的三聚磷酸钠水溶液，经离心，冷冻干燥，得到载药的壳聚糖纳米粒。再将壳聚糖纳米粒加入热琼胶水溶液中，经离心，冷冻干燥即得小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。体外实验证实，等剂量小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒比单纯小檗胺药物具有更强、更持久的抗肿瘤活性。本发明的优点在于以壳聚糖-琼胶作为复合材料，通过聚阴阳离子集合的方式将药物包埋于微粒中，提高了药物的缓释效果：复合材料廉价，生产成本低，制备工艺简单，易于规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法，属于纳米载体药物缓释领域。
背景技术
药物纳米载体是以纳米颗粒作为药物载体，将药物分子包裹在纳米颗粒之中或吸附在其表面，通过靶向分子与细胞表面特异性受体结合，在细胞摄取作用下进入细胞内，实现安全有效的靶向药物输送和基因治疗。药物纳米载体具有高度靶向性、缓控释放、提高难溶药物的溶解率和吸收率等优点，有助提高药物疗效和降低毒副作用。药物纳米载体是一类极具开发潜力的新型载体，其突出的优点越来越为医药界所关注，现已成为解决重大疾病的诊断和治疗的一个新亮点。
壳聚糖是自然界唯一的聚阳离子型天然高分子材料，是从虾蟹壳等提取出来的化合物，具有良好的生物可降解性，良好的血液相容性和组织相容性，成膜性好，同时还具有抗菌活性。作为一种生物医学材料，壳聚糖已广泛应用于人工皮肤、外科手术缝合线、止血剂等方面。近年来，壳聚糖又被用于药物缓释材料，拓展了它在医学领域的应用。
琼胶主要是由石花菜、江蓠等红藻中提取出来的一种多糖，是一种天然易降解的高分子化合物。琼胶具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等作用以及良好的吸湿保湿特性，在食品、医药等方面具有广泛应用。
小檗胺(Berbamine)是小檗属植物中提取分离得到的一种双苄基异喹啉类生物碱。小檗胺具有广泛的生理活性，例如升高白细胞血小板、抗炎、调节免疫功能、抗肿瘤、逆转多药耐药、心血管系统药理活性等。在我国小檗胺盐酸盐(商品名升白安)作为一种辅助治疗药物早已应用于临床，用于治疗多种原因引起的白细胞及血小板减少症；亦用于预防癌症放疗、化疗后白细胞减少。小檗胺及其衍生物不但对多种实体瘤显示出广泛的抑制活性，近年来研究发现对白血病具有强效的抑制活性，显示出小檗胺及其衍生物在抗白血病方面的潜在应用前景。
已有专利技术制备小檗胺、小檗胺衍生物及其盐，并提供了可在制备治疗血液肿瘤性疾病药物中的应用(中国专利申请号分别：200810060382.1、200810163438.6)。然而鲜见有以壳聚糖及琼胶为载体，负载小檗胺为抗肿瘤药的纳米粒缓释制剂报道。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的不足，提供一种能提高药物小檗胺的利用率，以达到缓释、延长药物作用时间和提高疗效的小檗胺壳聚糖-琼胶纳米微粒的制备方法。
为实现上述发明目的，本发明采取的技术方案是：该小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的粒径为1～500nm，它由小檗胺、壳聚糖、琼胶和三聚磷酸钠组成，小檗胺的质量百分比为4％～18％，壳聚糖的质量百分比为67％～81％，琼胶的质量百分比为0.3％～2％，三聚磷酸钠的质量百分比为8％～15％；
制备方法如下：
(1)取壳聚糖溶解于质量百分数为05％～2.0％的醋酸溶液中，制成浓度为1.0～2.5mg/mL，pH值在3～6之间的壳聚糖溶液；
(2)将小檗胺溶于壳聚糖溶液中，再于室温条件下加入浓度为1.0～2.0mg/mL的三聚磷酸钠，充分搅拌后，离心分离，真空冷冻干燥，得小檗胺壳聚糖纳米粒；
(3)再取琼胶溶解于热去离子水中，配成浓度为0.1～0.5mg/mL的琼胶水溶液；
(4)将步骤(2)所得小檗胺壳聚糖纳米粒置于热琼胶水溶液中，充分搅拌后，液体高速离心分离，真空冷冻干燥即得小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。
所述壳聚糖的平均分子量为5.0×104～8.0×105，脱乙酰度为大于90％。
所述小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的粒径为1～500nm。
所述小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒包封率达83％，载药量达16％，具有良好的缓释效果，小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒在pH＝7.4的磷酸缓冲液中释放2天以上，可用于体内的长循环。
本发明的优点在于以壳聚糖-琼胶作为复合材料，通过聚阴阳离子集合的方式将药物包埋于微粒中，提高了药物的缓释效果；复合材料廉价，生产成本低，制备工艺简单，易于规模化生产。
小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的体外抗肿瘤活性测定：
(1)实验材料：人白血病K562细胞
(2)实验方法：将处于对数生长期的肿瘤细胞，以5×103/孔的密度接种于96孔板中，每孔加细胞悬液200μL，在培养24h后，分别加入5种浓度的药物，每个浓度设3个复孔。细胞在37℃，5％CO2培养箱中孵育72小时后，加入浓度为5mg/mL的MTT溶液20μL，继续培养4小时。吸去上清液，加入150μL DMSO，轻微振荡板使甲瓒完全溶解，用酶联免疫检测仪测定每孔光密度值(OD值)，取3复孔OD值的平均值，计算细胞抑制率。抑制率(IR％)＝(1-TOD/COD)×100％，其中TOD为给药组光密度(OD)均值，COD为溶剂对照组OD均值；将所得数据用LOGIT法计算IC50值。
(3)实验结果：实验结果证实，等剂量小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒比单纯小檗胺药物具有更强、更持久的抗肿瘤活性。
具体实施方式
实施例一 空载药物壳聚糖-琼胶纳米粒的制备
将相对分子质量为18万，脱乙酰度为92％的壳聚糖用1％醋酸溶解完全，得到壳聚糖溶液，其浓度为1.0mg/mL；然后将10mL的1.0mg/mL三聚磷酸钠溶液加入到20mL的壳聚糖溶液中，室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时制成纳米粒悬浮液。将悬浮液在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到壳聚糖纳米粒。再将得到的纳米粒加入浓度为0.1mg/mL的琼胶水溶液中，在室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时，将液体在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到壳聚糖-琼胶纳米粒。
实施例二 小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备
将相对分子质量为18万，脱乙酰度为92％的壳聚糖用0.5％醋酸溶解完全，得到壳聚糖溶液，其浓度为1.0mg/mL，再将模型药物小檗胺溶于壳聚糖溶液中，得到小檗胺的浓度为1.0mg/mL；然后将10mL的1.0mg/mL三聚磷酸钠溶液加入到20mL的小檗胺-壳聚糖溶液中，室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时制成纳米粒悬浮液。将悬浮液在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺-壳聚糖纳米粒。再将得到的纳米粒加入浓度为0.1mg/mL的琼胶水溶液中，在室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时，将液体在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。纳米粒的包封率为78％，载药量为13％，在pH＝7.4的磷酸缓冲液中，2天累计释放量达到95％。
实施例三 小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备
将相对分子质量为18万，脱乙酰度为92％的壳聚糖用1％醋酸溶解完全，得到壳聚糖溶液，其浓度为1.0mg/mL，再将模型药物小檗胺溶于壳聚糖溶液中，得到小檗胺的浓度为1.0mg/mL；然后将10mL的1.0mg/mL三聚磷酸钠溶液加入到20mL的小檗胺-壳聚糖溶液中，室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时制成纳米粒悬浮液。将悬浮液在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺-壳聚糖纳米粒。再将得到的纳米粒加入浓度为0.5mg/mL的琼胶水溶液中，在室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时，将液体在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。纳米粒的包封率为81％，载药量为12％，在pH＝7.4的磷酸缓冲液中，2天累计释放量达到93％。
实施例四 小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备
将相对分子质量为18万，脱乙酰度为92％的壳聚糖用2％醋酸溶解完全，得到壳聚糖溶液，其浓度为2.5mg/mL，再将模型药物小檗胺溶于壳聚糖溶液中，得到小檗胺的浓度为1.5mg/mL；然后将10mL的2.0mg/mL三聚磷酸钠溶液加入到20mL的小檗胺-壳聚糖溶液中，室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时制成纳米粒悬浮液。将悬浮液在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺-壳聚糖纳米微粒。再将得到的纳米粒加入浓度为0.2mg/mL的琼胶水溶液中，在室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时，将液体在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。纳米粒的包封率为83％，载药量为16％，在pH＝7.4的磷酸缓冲液中，2天累计释放量达到92％。
实施例五 小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备
将相对分子质量为18万，脱乙酰度为92％的壳聚糖用1％醋酸溶解完全，得到壳聚糖溶液，其浓度为2.5mg/mL，再将模型药物小檗胺溶于壳聚糖溶液中，得到小檗胺的浓度为1.5mg/mL；然后将10mL的2.0mg/mL三聚磷酸钠溶液加入到20mL的小檗胺-壳聚糖溶液中，室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时制成纳米粒悬浮液。将悬浮液在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺壳聚糖纳米粒。再将得到的纳米粒加入浓度为0.1mg/mL的琼胶水溶液中，在室温条件下以800rpm的速度搅拌0.5小时，将液体在18000rpm的转速下离心20分钟，最后将沉淀物真空冷冻干燥，得到小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。纳米粒的包封率为82％，载药量为15％，在pH＝7.4的磷酸缓冲液中，2天累计释放量达到93％。
Claims (3)
1.一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法，其特征在于：该纳米粒的粒径为1～500nm，它由小檗胺、壳聚糖、琼胶和三聚磷酸钠组成，小檗胺的质量百分比为4％～18％，壳聚糖的质量百分比为67％～81％，琼胶的质量百分比为0.3％～2％，三聚磷酸钠的质量百分比为8％～15％；
制备方法如下：
(1)取壳聚糖溶解于质量百分数为05％～2.0％的醋酸溶液中，制成浓度为1.0～2.5mg/mL，pH值在3～6之间的壳聚糖溶液；
(2)将小檗胺溶于壳聚糖溶液中，再于室温条件下加入浓度为1.0～2.0mg/mL的三聚磷酸钠，充分搅拌后，离心分离，真空冷冻干燥，得小檗胺壳聚糖纳米粒；
(3)再取琼胶溶解于热去离子水中，配成浓度为0.1～0.5mg/mL的琼胶水溶液；
(4)将步骤(2)所得小檗胺壳聚糖纳米粒置于热琼胶水溶液中，充分搅拌后，液体高速离心分离，真空冷冻干燥即得小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒。
2.根据权利要求1所述小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖的平均分子量为5.0×104～8.0×105，脱乙酰度为大于90％。
3.根据权利要求1所述小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法，其特征在于：所述小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒包封率达83％，载药量达16％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010603372 CN102078302B (zh) | 2010-12-17 | 2010-12-17 | 一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010603372 CN102078302B (zh) | 2010-12-17 | 2010-12-17 | 一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102078302A CN102078302A (zh) | 2011-06-01 |
| CN102078302B true CN102078302B (zh) | 2012-12-26 |
Family
ID=44084630
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201010603372 Expired - Fee Related CN102078302B (zh) | 2010-12-17 | 2010-12-17 | 一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102078302B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106822986B (zh) * | 2017-04-07 | 2019-11-12 | 广东海洋大学 | 一种壳聚糖-琼胶低聚糖多孔球珠止血材料的制备方法 |
| WO2022168123A1 (en) * | 2021-02-08 | 2022-08-11 | Panjab University, Chandigarh | Process for preparing nanoformulation for delivery of berbamine |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101273989A (zh) * | 2008-04-09 | 2008-10-01 | 浙江大学 | 一类小檗胺衍生物及其盐的应用 |
| CN101429201A (zh) * | 2008-12-22 | 2009-05-13 | 浙江大学 | 柠檬酸小檗胺盐及制备方法和应用 |
-
2010
- 2010-12-17 CN CN 201010603372 patent/CN102078302B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101273989A (zh) * | 2008-04-09 | 2008-10-01 | 浙江大学 | 一类小檗胺衍生物及其盐的应用 |
| CN101429201A (zh) * | 2008-12-22 | 2009-05-13 | 浙江大学 | 柠檬酸小檗胺盐及制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102078302A (zh) | 2011-06-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106806343B (zh) | 一种叶酸和聚多巴胺修饰的肿瘤靶向介孔二氧化硅纳米粒及制备方法与应用 | |
| Pourmadadi et al. | The synthesis and characterization of double nanoemulsion for targeted Co-Delivery of 5-fluorouracil and curcumin using pH-sensitive agarose/chitosan nanocarrier | |
| KR102203555B1 (ko) | 입자의 동결건조 또는 동결을 위한 중합체 부형제의 용도 | |
| CN101926775B (zh) | 包载硫酸长春新碱的双功能纳米粒制剂的制备和应用方法 | |
| WO2018041261A1 (zh) | 一种肿瘤治疗药物 | |
| CN101991541B (zh) | 阿昔洛韦-壳聚糖纳米粒的制备方法 | |
| Wang et al. | Two novel nanoscale preparations of micelle and thermosensitive hydrogel for docetaxel to treat malignant tumor | |
| CN107308457A (zh) | 一种具有肿瘤微环境响应性降解的深层穿透纳米递药系统 | |
| CN105012271A (zh) | 一种共担载阿霉素和trail的白蛋白纳米粒靶向制剂及制备方法 | |
| CN111214460A (zh) | 叶酸-壳聚糖-纳米硒肿瘤靶向载药体系及其制备方法 | |
| CN105997943B (zh) | 一种人血清白蛋白负载喜树碱类药物的纳米颗粒及其制备方法和应用 | |
| Wei et al. | Development of functional nanomedicines for tumor associated macrophages-focused cancer immunotherapy | |
| CN103655484B (zh) | 一种利用自组装技术制备紫杉醇缓释微球的方法及其产品 | |
| CN102078302B (zh) | 一种小檗胺壳聚糖-琼胶纳米粒的制备方法 | |
| CN104434792A (zh) | 聚合物胶束及其制备方法和抗肿瘤药物组合物、制剂及其制备方法 | |
| Zayed et al. | Fucoidans as nanoparticles: Pharmaceutical and biomedical applications | |
| CN107007550B (zh) | 一种氧化还原响应性两亲性共聚物及其制备方法和应用 | |
| CN100560133C (zh) | 磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微球及其制药用途 | |
| CN106389385B (zh) | 一种基于环糊精及卵磷脂为载体的番荔素纳米粒及其制备方法和应用 | |
| CN108102082B (zh) | 聚己内酯基二乙基磺丙基甜菜碱及制备方法以及其作为药物释放载体的构建方法 | |
| CN109666087B (zh) | 一种环糊精类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN107812189B (zh) | 一种主动靶向特定肿瘤细胞的竹红菌素纳米制剂及其制备方法和应用 | |
| CN108451931B (zh) | 一种pah/f聚电解质复合物纳米载体及其制备方法 | |
| CN108392483B (zh) | 一种紫杉醇联合2-甲氧基雌二醇的白蛋白纳米粒的制备方法及应用 | |
| Miao et al. | Preparation of DOX/BSANP and its antitumor effect on bel-7404 liver cancer cells in vitro and in vivo |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20121226 Termination date: 20131217 |