CN102065838A

CN102065838A - 用于眼前部持续递送的原位胶凝系统

Info

Publication number: CN102065838A
Application number: CN2009801221507A
Authority: CN
Inventors: C·豪格; S·约纳
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2008-06-12
Filing date: 2009-06-11
Publication date: 2011-05-18
Also published as: KR20110042282A; WO2009150209A1; JP2011522863A; RU2011100108A; MX2010013685A; US20110082221A1; EP2288339A1; AU2009256553A1; CA2726502A1; BRPI0915116A2

Abstract

一种在眼用活性剂至眼的持续递送中特别良好地适用作递送基质的眼用制剂。该制剂包含其中古洛糖醛酸含量为约35％-约45％的海藻酸盐和赋形剂、特别是结冷胶或硬葡聚糖以及溶于或混悬于其中的活性剂，它们一起提供了用于眼的原位胶凝系统。

Description

用于眼前部持续递送的原位胶凝系统

发明领域

本发明涉及用于将活性剂递送至眼的延时释放制剂。

发明背景

在将眼用溶液滴入至眼时，大部分滴入的流体由于过量流体的流出以及溶液被泪水稀释和排除而损失。提高眼生物利用度已经成为开发用于经眼递送眼用制剂的新方法的推动力。这些方法包括使用软膏剂、植入剂和凝胶剂。但是，这些方法各自具有缺点。例如，应用眼软膏剂可使视觉模糊。固体植入剂经常是不舒服的，结果是患者顺应性低。凝胶剂引起眼睑粘着，结果是不被广泛接受。

最近已经开始努力采用相变系统来递送眼用制剂。这类系统可以以液体形式应用于眼，并且只有当在眼穹窿(cul de sac)中时它们才转变为凝胶相。已经报道了数种这类相变系统，其中相变化取决于多种因素如温度、pH或阴离子浓度。多糖由于能够保留水并同时膨胀形成水凝胶而良好地适合于这类系统。海藻酸盐是具有快速胶凝性质的多糖；形成足够强以适合许多工业和医学应用的凝胶。

海藻酸盐作为用于递送眼用药物的原位形成凝胶的用途是已知的，并且在美国专利5,776,445中记载。海藻酸盐是含有两类均聚嵌段β-D甘露糖醛酸(M-M)嵌段和α-L-古洛糖醛酸(guluronic acid)(G-G)嵌段以及具有交替序列(M-G)的嵌段的嵌段共聚物。海藻酸盐对二价金属离子的亲和力随着L-古洛糖醛酸残基在海藻酸盐中的含量增加而增加。胶凝性质以及产生基质是高含量古洛糖醛酸的结果；制剂需要至少50％的古洛糖醛酸含量。

上述系统以及其它海藻酸盐原位胶凝系统中存在特定的问题。虽然海藻酸盐由于其生物相容性和可生物降解而良好地适于眼用，但是它不能使眼用治疗剂在眼前部延长释放。因此，现有的海藻酸盐原位胶凝系统没有改善眼生物利用度。

此外，改变的海藻酸盐相变系统、例如结冷胶制剂如Balasubramaniam等人，Drug Deliv，10：185-191(2003)中所述的那些显示出8小时的最长药物释放持续时间。因此，根据所涉及的治疗剂，患者仍然需要通过滴眼管将液体形式的海藻酸盐溶液应用于眼穹窿与结冷胶制剂相联合，这对于患者而言是不方便的，从而导致患者顺应性差。

发明概述

本文描述了历经长达24小时或更长时间的延长时间将活性剂——例如药物或其它治疗剂——持续递送至眼组织的海藻酸盐原位胶凝基质和系统。

在一项实施方案中，海藻酸盐与赋形剂合并形成原位胶凝系统。在另一项实施方案中，海藻酸盐以约35％-45％的古洛糖醛酸含量存在。在一项实施方案中，赋形剂是硬葡聚糖(scleroglucan)或结冷胶。在另一项实施方案中，海藻酸盐连同赋形剂与药物活性剂一起合并，以便形成缓慢、延时释放活性剂的原位胶凝基质。原位胶凝基质的理想制剂允许最小限度地每天一次或每周一次地滴凝胶系统，这取决于所用的活性剂。

在一项实施方案中，已经发现，将结冷胶添加至含有约35％-45％古洛糖醛酸的海藻酸盐中提供了这样的原位形成凝胶：在体外和体内从胶凝基质中延长释放活性剂。还已经发现，将硬葡聚糖添加至含有约35％-45％古洛糖醛酸的海藻酸盐提供了这样的原位形成凝胶：与常规海藻酸盐相比，改善了药物体外和体内释放。活性剂可以溶于(亲水的)或混悬于(疏水的)、由此被“捕获”或掺入用于药物持续递送的结冷胶/海藻酸盐原位胶凝基质或者硬葡聚糖/海藻酸盐原位胶凝基质中。

在另一项实施方案中，原位胶凝基质提供了用于宽治疗范围的药物递送系统，并且对于历经延长时间递送活性剂用于在眼前部局部治疗(例如干眼、炎性反应、微生物感染)以及促进药物活性剂递送至眼用于治疗眼疾病如青光眼是尤其有利的。

在一项实施方案中，与滴眼液相比，本文公开的原位胶凝基质容易应用于眼穹窿中。制剂在滴入穹窿之前是粘稠液体，在与阴离子泪液接触时经历相变由液体形成凝胶。通过胶凝化，原位胶凝基质保持其完整性而长时间没有溶解或溶蚀，以促进活性剂持续释放至眼表面和/或眼组织，这取决于活性剂的吸收性质。

前面的概述提供了本发明一些方面的示例性综述。它不意欲是广泛的或绝对地规定本发明的任何主要/关键元素。

附图简述

参考附图解释了前面的概述和随后的详述。但是，应当理解，本发明不限于所显示的确切安排和手段。

图1显示了本发明的一项实施方案的0.5％荧光素ISGV制剂的体外延时释放图。

图2显示了本发明的一项实施方案的0.5％荧光素ISGV制剂采用兔模型进行的体内延时释放图。

图3显示了本发明的另一项实施方案的3％ASM 981ISGV制剂的体外延时释放图。

发明详述

本文所述的制剂用于眼部使用，其包括作为胶凝聚合物的具有约35％-45％古洛糖醛酸含量的海藻酸钠连同赋形剂、优选硬葡聚糖或结冷胶以及掺入(溶于或混悬于)其中的治疗活性剂。

在一项实施方案中，海藻酸盐连同赋形剂的原位胶凝基质可特别用于以持续、控制的方式历经延长的时间将活性剂递送至需要其的患者的眼前部或眼组织长达和超过24小时。

在另一项实施方案中，在胶凝组合包含其中古洛糖醛酸含量是35％-45％的海藻酸钠和赋形剂的眼用制剂中的原位胶凝基质提供了治疗眼疾病的方法。

定义

在描述和要求保护原位胶凝系统和方法中，将根据下文阐述的定义使用以下术语。

如本文所用的“制剂”和“组合物”可互换使用，指两种或多种元素或物质的组合。在一些实施方案中，组合物可以包括活性剂、另外的赋形剂或者增加递送或凝胶形成的载体。

如本文所用的“活性剂”指能够掺入(溶于或混悬于，取决于活性剂的溶解度)原位胶凝基质中的有治疗益处的任意化合物或药物。适宜的活性剂包括但不限于：青光眼药物；抗菌剂；抗感染剂；疏水性和亲水性药物，以及通过本公开内容的益处对于本领域技术人员而言可以变得显而易见的其它活性剂。

如本文所用的“有效量”指当包括在组合物中时足以获得预期的组成性或生理性作用的成分的量。因此，“治疗有效量”指无毒的、但是在治疗已知活性剂对其有效的病症时足以获得治疗结果的活性剂量。有效量的确定属于药物科学和医学领域的常规技术。

如本文所用的“载体”或“惰性载体”指药物可以与之组合以获得用于递送至受治疗者的具体剂量制剂的物质。在一些实施方案中，所用的载体可以或不可以增加药物递送。作为一般原则，载体必须不以使药物显著降解或不利地影响药物的方式与药物发生作用，例外的是，载体可以与药物发生作用以阻止药物在从载体释放前发挥治疗作用。而且，载体或至少一部分载体必须适于与药物一起施用于受治疗者中。另外，载体可用于增加药物的溶解度，由此作为增溶剂起作用。

如本文所用的“眼睛”、“眼前部”和“眼”指受治疗者的周围视觉器官。

如本文所用的“受治疗者”和“患者”可以互换使用，指可以从施用本文所述的组合物或方法中获益的哺乳动物。最通常而言，患者是人，但是也可以是其它动物如狗、猫和马。

如本文所用的“施用”指将活性剂或含有其的组合物给予受治疗者的方式。

如本文所用的“约35％-45％”指与海藻酸钠中甘露糖醛酸相比的古洛糖醛酸的近似百分数。例如，含约35％古洛糖醛酸的海藻酸盐也可以定义为含约65％的甘露糖醛酸。本领域技术人员可以理解，“约”35％指充分接近该量、但是可以由于测定方法不精确而略微低于或高于该量的量。

本文对“一项实施方案”、“实施方案”或类似方式的称谓意味着结合该实施方案描述的特定特征、结构、操作或特点被包括在至少一项本发明的实施方案中。因此，本文中出现这类短语或方式不一定全部涉及同一实施方案。而且，各种特定特征、结构、操作或特点可以在一项或多项实施方案中以任意适宜的方式组合。

原位胶凝系统

当与经典的海藻酸盐原位胶凝系统相比时，还包含亲水性或疏水性药物的本文所述的优化原位胶凝系统制剂产生了良好地适应体外和体内延长释放治疗活性剂长达24小时的药物递送机制。

如本文所用的“原位胶凝基质”(ISGV)或“原位胶凝系统”(ISGS)指包含下述成分的制剂：古洛糖醛酸含量为约35％-45％的原位形成凝胶的聚合物海藻酸钠连同赋形剂、理想地连同生物粘附性化合物如硬葡聚糖或者另一种原位胶凝聚合物如结冷胶以及溶于或混悬于其中的治疗活性剂，其适用于将治疗活性剂持续递送至需要其的患者的眼前部或眼组织。

ISGV制剂是生物相容的。因而，因为它们可以与动物组织相互作用而没有有害的免疫作用，所以可以将任何可递送给患者的活性剂或分子掺入到生物相容性的ISGV中用于递送至眼前部。

本发明的一项实施方案的制剂包括海藻酸盐连同赋形剂，其中，当与海藻酸盐的甘露糖醛酸的百分数相比时，海藻酸盐的古洛糖醛酸含量是约35％-45％。因此，与以前所显示的用于眼应用的经典海藻酸盐系统(要求古洛糖醛酸含量最低为50％)不同，理想的制剂具有较高的甘露糖醛酸对古洛糖醛酸的百分数。已经发现，较高的甘露糖醛酸含量显著地影响原位胶凝系统的胶凝性质和支架，并且有助于提供附图中所看到的延时释放图。

适宜的海藻酸盐包括海藻酸钠，例如可从FMC biopolymer(费城，PA，美国)得到。适宜制剂中海藻酸盐的浓度为0.5％重量至3％重量。但是，如本领域技术人员所理解的那样，可以使用和从不同的制造商获得其它适宜的海藻酸盐。

适宜的赋形剂包括生物粘附性化合物如硬葡聚糖或胶凝聚合物如结冷胶，当与包含单独海藻酸盐的原位凝胶系统相比时，它们与海藻酸盐的组合提供了活性剂的持续、延时释放。

适宜的结冷胶赋形剂包括

(例如可从Sigma St.Louis，MO，USA获得)，但是其它适宜的结冷胶也可以用于ISGV中。在一项实施方案中，制剂包含0.015％-0.06％、理想地是0.03％浓度范围的结冷胶。

适宜的硬葡聚糖赋形剂包括1％(例如可从CibaSpecialty Chemicals Corp.，Tarrytown，NY，USA获得)。在一项实施方案中，制剂包含0.25％-0.5％、理性地是0.25％浓度范围的硬葡聚糖。

在一项实施方案中，以对于应用于眼穹窿(结膜囊)而言适当的粘度配制原位胶凝基质。在与眼泪液接触之前，制剂是粘稠的，即“非胶凝化的”。在应用数分钟内迅速发生胶凝，胶凝化的制剂提供了历经数小时或数天时间的活性剂至眼的稳定、安全递送机制。

ISGV制剂可用于宽治疗范围的药物递送，并且对于递送活性剂用于在眼前部局部治疗(例如干眼、炎性反应、微生物感染)以及支持活性剂递送至眼用于治疗青光眼是尤其有利的。

在一项实施方案中，ISGV提供了在有需要的患者中治疗眼疾病如青光眼的方法。在一项实施方案中，以液体眼用制剂施用ISGV，所述制剂包含海藻酸盐和赋形剂以及治疗有效量的用于治疗青光眼的活性剂，其中，海藻酸盐具有约35％-约45％的古洛糖醛酸含量。在另一项实施方案中，滴入眼穹窿引起了眼用制剂的胶凝，导致活性剂从胶凝化制剂中控制释放到眼睛的眼组织。

在获知本公开内容的益处之后，本领域技术人员将认识到，可以以本文公开的方式配制各种其它适宜的活性剂。因此，上文所讨论的建议性的活性剂仅仅是代表性的。

在另一项实施方案中，除了它们可用于将治疗剂递送至眼外，ISGV在不含有治疗活性剂的情况下还可用于防止眼睛干燥。眼睛干燥通常与老化、环境刺激、临床状况如营养不良或临床治疗(例如接受化疗的癌症患者中所见到的眼睛干燥)有关或者由它们引发。

在另一项实施方案中，制剂还可以包含其它眼用可接受的物质，包括缓冲剂、防腐剂、张度剂和消毒剂。

现在参考以下实施例。提供这些实施例仅仅是为了解释说明，无论如何不应当理解为限于这些实施例，而是应当理解为包括任意和所有的变通，这些变通由于本文提供的教导而变得显而易见。

实施例1

采用下列操作体外测试一项实施方案的制剂用于递送亲水性活性剂的有效性。

优化制剂包括包含海藻酸盐(1.5％)/结冷胶(0.03％)与0.5％荧光素(作为活性剂)以及包含海藻酸盐(1.5％)/硬葡聚糖(0.25％)与0.5％荧光素(作为活性剂)的ISGV测试制剂，它们按照实施例3的方案制得。

将含有0.5％荧光素的ISGV在水性释放介质中温育，通过RP HPLC用225nm紫外检测周期性分析溶出。释放介质由含有葡萄糖、NaHCO₃、腺苷和谷胱甘肽的模拟泪液组成。用Rainin移液管等分出参比溶液和测试溶液的100μl样品，通过HPLC进行测试。仪器包括Agilent 1100Series装置，其具有内径4.6mm、长250mm的Nulceosil 100-5C18柱，通过柱的流速是1.0ml/min。HPLC小瓶是具有插管的Infochroma，溶出容器是具有螺旋盖的30ml玻璃瓶。

在溶出前进行系统适应性检查。每批含有3至6个样品。将样品在模拟泪液的测试介质中以约1cm半径的圆周运动以60rpm振摇。温育包括用30ml测试介质填充溶出容器和将温度调至37℃。

用分析天平在称重盘上称取约180mg荧光素参比物，精确度为0.1mg，然后转移到溶出容器中。当与测试介质接触时，含海藻酸盐的样品在称量盘内固化。盖上容器并将其放置于恒温箱的实验室摇床上。然后将100μl测试介质样品转移到HPLC小瓶中进行测试。

将参比溶液的色谱图与测试溶液进行比较，计算峰面积以得到释放曲线。如下进行评估以测定测试溶液和参比溶液的色谱图中的荧光素峰面积：

计算 M＝所释放荧光素的mg/100mg ISGS

M = \frac{{PA}_{T} \times m_{R} \times C_{R} \times V_{T} \times V_{D}}{{PA}_{R} \times m_{T} \times V_{RS} \times V_{R}}

其中

PA_T 测试溶液中的荧光素的峰面积

m_R 参比储备液中荧光素参比物的质量，mg表示

C_R 参比物的标称含量，以百分比表示

V_T 测试溶液的体积，ml表示

V_D 用移液管移取供进一步稀释的参比储备液的体

积，以ml表示

PA_R 参比溶液中的荧光素的峰面积

m_T 受试物的质量，mg表示

V_RS 参比储备液的体积，ml表示

V_R 参比溶液的最终体积，ml表示

计算 C＝所释放的荧光素，以理论值的％表示

C = \frac{M \times 100}{C_{T}}

其中

M 所释放荧光素的mg/100mg ISGS

100 转换为％的转换系数

C_T ISGS中荧光素的以％mg/100mg表示的标称含量

结果绘于图1中，图1显示了0.5％w/v荧光素ISGV的释放图。海藻酸盐/结冷胶ISGV和海藻酸盐/硬葡聚糖ISGV均在历经8小时的时间出现了荧光素的释放，而荧光素从经典海藻酸盐原位胶凝系统中的释放仅仅在小于2小时内出现。与经典的单独海藻酸盐相比，添加结冷胶或硬葡聚糖作为赋形剂与古洛糖醛酸含量为35％-45％的海藻酸盐一起使荧光素体外释放增加了4倍以上。

实施例2

通过Schirmer测试用兔受试者进行了进一步试验以测试实施例1所述的制剂的体内有效性。Schirmer测试用于测定泪液产生。该测试通过将滤纸放在下眼睑内侧进行。数分钟后，取下滤纸并测试其含湿量。还可以使用荧光素滴眼剂来测试泪液是否可经由泪管流入鼻子。

简言之，由Novartis畜牧场供应雌性新西兰白兔，每只重3kg至5kg，在标准条件下圈养。在开始研究前对动物进行全面的眼科和体格检查，以便在研究中仅包括没有发现病状的动物。

采用校准的自动移液管将50μl ISGV制剂受试物质滴到接受处理的兔的球结膜的外上部。对侧眼用作未经处理的对照。使眼睑轻轻闭合一秒钟。每种制剂使用三只兔子，在2、4、6、8和12小时对每种制剂进行Schirmer测试泪液取样。对泪液进行取样，通过HPLC进行分析。此外，在滴入前、滴入后的最初15分钟、1、2和7天使用笔灯对兔进行眼部检查。根据Draize方法对前段情况进行评价和计分。对任何不适也进行计分。

通过RP HPLC用225nm紫外检测对Schirmer条上的残留物进行测试。用Rainin移液管等分出参比溶液和测试溶液的100μl样品，通过HPLC进行测试。仪器包括Agilent 1100Series装置，其具有内径4.6mm、长250mm的Nulceosil 100-5C18柱，通过柱的流速是1.0ml/min。

在评价Schirmer条之前进行系统适应性检查。将含有THF的盲溶液(blind solution)(参比)与含有Schirmer条的盲溶液(测试溶液)进行比较。

将参比溶液的色谱图与测试溶液进行比较，计算峰面积以得到荧光素含量，以每条Schirmer的μg量表示。如下进行评估以测定测试溶液和参比溶液的色谱图中的荧光素峰面积：

计算

分析 M＝以μg表示的荧光素含量/滤纸条

M = \frac{{PA}_{T} \times m_{R} \times C_{R} \times V_{T} \times V_{D} \times V_{D} \times 1000}{{PA}_{R} \times V_{RSS 1} \times V_{RSS 2} \times V_{RS} \times C_{F}}

其中

PA_T 测试溶液中的荧光素的峰面积

m_R 参比储备液中荧光素参比物的质量，以mg表示

C_R 参比物的标称含量，以百分比表示

V_T 测试溶液的体积，以ml表示

V_D1 用移液管移取供进一步稀释的参比储备液1resp.2

的体积，以ml表示

V_D2 用移液管移取供进一步稀释的参比储备液1.1resp.

2.1的体积，以ml表示

1000 mg转换为μg的转换系数

PA_R 参比溶液中的荧光素的峰面积

V_RSS1 参比储备液的体积，以ml表示

V_RSS2 参比储备液1resp.2的最终体积，以ml表示

V_RS 参比储备液1.1resp.2.1的最终体积，以ml表示

C_F 转换为mg的转换系数

分析以μg表示的荧光素含量/100mg泪液

C = \frac{M \times 100}{M_{T}}

其中

M 每条滤纸条的荧光素含量，以μg表示

100 转换为％的转换系数

M_T 以mg表示的泪液质量/滤纸条

图2显示了0.5％荧光素(活性剂)ISGV制剂的Schirmer测试的结果。采用经典海藻酸盐胶凝系统，荧光素在所测试兔子的角膜上存在至多30分钟。在海藻酸盐/结冷胶ISGV的Schirmer滤纸条上可检测到荧光素一直到滴在兔眼上后8小时。在海藻酸盐/硬葡聚糖ISGV的Schirmer滤纸条上可检测到荧光素一直到滴在兔眼上后4小时。体内结果证实了体外研究：与单独的海藻酸盐相比，含有海藻酸盐/硬葡聚糖和海藻酸盐/结冷胶的优化制剂显示出更长的、持续的活性剂体内释放。

实施例3

表1详细列出了用于测定释放动力学的优化测试制剂组成，按照常规实验方法和以下方案进行制备。

表1：ISGV制剂组成

制备方法：

1.5％海藻酸钠，0.5％荧光素钠

在160ml玻璃瓶中称取约0.50g荧光素钠，加入95g超纯水(nanopure water)和氯化钠中。将混合物搅拌约30分钟。采用RW 16基本型搅拌器在1000rpm下加入海藻酸钠。搅拌2.5小时直到海藻酸钠完全溶解。用0.1N盐酸将pH调至7.4。加入超纯水至100.00g。

1.5％海藻酸钠，0.03％结冷胶，0.5％荧光素钠

在160ml玻璃瓶中加入96g超纯水，然后加入结冷胶，然后在1000rpm搅拌下于80℃搅拌4h。将混合物在搅拌下冷却至室温(RT)。加入荧光素钠(0.50g)，然后搅拌约15分钟。随后，加入氯化钠并搅拌10分钟。然后，采用RW 16基本型搅拌器在1000rpm下加入海藻酸钠。搅拌2.5小时直到海藻酸钠完全溶解。用0.1N盐酸将pH调至7.4。加入超纯水至100.00g。

1.5％海藻酸钠，0.25％硬葡聚糖，0.5％荧光素钠

在160ml玻璃瓶中加入96g超纯水，然后加入氯化钠，搅拌10分钟。加入荧光素钠(0.50g)，搅拌约15分钟。然后，采用RW 16基本型搅拌器在1000rpm下加入海藻酸钠。搅拌2.5小时直到海藻酸钠完全溶解。加入Tinocare GL 1％(25g)并同时在1000rpm下搅拌10分钟。加入超纯水至100.00g。

实施例4

进行类似于实施例1中所述释放图的释放图，这次使用疏水性模型化合物ASM 981(3％w/v)作为掺入/混悬于海藻酸盐ISGV的活性剂。下表2详细给出了用于体外释放研究的测试制剂。

将含有3％(w/v)ASM981的ISGV在水性释放介质中温育，通过RPHPLC用210nm紫外检测周期性分析溶出。释放介质由含有葡萄糖、NaHCO₃、腺苷和谷胱甘肽和1％SDS的模拟泪液组成。用Rainin移液管等分出参比溶液和测试溶液的100μl样品，通过HPLC进行测试。仪器包括Agilent 1100Series装置，其具有内径3.0mm、长150mm的ZorbaxEclipse XDB-C18柱，通过柱的流速是1.3ml/min。HPLC小瓶是具有插管的Infochroma，溶出容器是具有螺旋盖的30ml玻璃瓶。

在溶出前进行系统适应性检查。每批含有3至6个样品。将样品在模拟泪液+1％SDS的测试介质中以约1cm半径的圆周运动以60rpm振摇。温育包括用30ml测试介质填充溶出容器和将温度调至37℃。用分析天平在称重盘上称取约300mg ASM981测试ISGV，精确度为0.1mg，然后转移到溶出容器中。当与测试介质接触时，含海藻酸盐的样品在称量盘内固化。盖上容器并将其放置于60℃恒温箱的实验室摇床上。然后将100μl测试介质样品转移到HPLC小瓶中进行测试。

将参比溶液的色谱图与ASM981测试溶液进行比较，计算峰面积以得到释放曲线。如下进行评估以测定测试溶液和参比溶液的色谱图中的ASM981峰面积：

计算 M＝所释放ASM981的mg/100mg ISGS

M = \frac{{PA}_{T} \times m_{R} \times C_{R} \times V_{T} \times V_{D}}{{PA}_{R} \times m_{T} \times V_{RS} \times V_{R}}

其中

PA_T 测试溶液中的ASM981的峰面积

m_R 参比储备液中ASM981参比物的质量，以mg表示

C_R 参比物的标称含量，以百分比表示

V_T 测试溶液的体积，以ml表示

V_D 用移液管移取供进一步稀释的参比储备液的体积，

以ml表示

PA_R 参比溶液中的ASM981的峰面积

m_T 受试物的质量，以mg表示

V_RS 参比储备液的体积，以ml表示

V_R 参比溶液的最终体积，以ml表示

计算 C＝所释放的ASM981，以理论值的％表示

C = \frac{M \times 100}{C_{T}}

其中

M 所释放ASM981的mg/100mg ISGS

100 转换为％的转换系数

C_T ISGS中ASM981的以mg/100mg表示的标称含量

在图3中可以看到结果，图3显示了ASM981-ISGV制剂具有24小时以上的体外释放速率。

实施例5

表2详细列出了用于疏水性活性剂的体外释放研究的优化制剂组成，按照常规实验方法和以下方案进行制备。

表2：ASM981ISGV制剂组成

制备方法：

1.5％海藻酸钠和0.3％ASM 981

在200ml玻璃瓶中称取约70g超纯水，将氯化钠溶于其中。加入ASM981，采用Ultra turrax于800rpm下搅拌15分钟以使ASM981混悬。加入海藻酸钠，用RW 16基本型搅拌器搅拌2.5小时直到海藻酸钠完全溶解。将pH调至7.0，加入超纯水至100.00g。

1.5％海藻酸钠，0.03％结冷胶和0.3％ASM 981

在1000ml玻璃瓶中称取约380g超纯水，将3.2g氯化钠溶于其中。采用RW 16基本型搅拌器在1000rpm下加入海藻酸钠(8.002g)。搅拌3小时直到看见海藻酸钠完全溶解。加入超纯水至400.00g。在另一个100ml玻璃瓶中称取约20g超纯水，将氯化钠溶于其中。加入结冷胶，于70℃以800rpm搅拌3小时，然后冷却至室温(RT)。加入ASM981，在800rpm下搅拌1小时。向含有结冷胶混合物的第二个玻璃瓶中加入75g溶液A，用Ultra turrax使ASM981混悬。用RW 16基本型搅拌器在1000rpm下搅拌2.5小时。将pH调至7.4，加入超纯水至100g。

1.5％海藻酸钠，0.25％硬葡聚糖和0.3％ASM 981

在200ml玻璃瓶中称取约70g超纯水，将氯化钠溶于其中。加入ASM981，用Ultra turrax在800rpm下搅拌15分钟以使ASM981混悬。加入海藻酸钠，用RW 16基本型搅拌器搅拌2.5小时直到海藻酸钠完全溶解。加入硬葡聚糖，搅拌1小时。加入超纯水至100.00g。

所述实施方案在所有方面将被认为仅仅是示例性的，而非限制性的。因此，本发明的范围由所附的权利要求书而非前述描述来指明。在权利要求的等价含义和范围内的所有变化将包括在其范围中。

Claims

1.用于持续药物递送的眼用原位胶凝基质，所述原位胶凝基质包含：其中古洛糖醛酸含量为约35％-45％的海藻酸钠连同赋形剂以及掺入其中的活性剂。

2.权利要求1的原位胶凝基质，其中所述海藻酸钠以约0.5％-约3％的重量百分比范围存在。

3.权利要求1的原位胶凝基质，其中所述赋形剂包含结冷胶或硬葡聚糖或它们的组合。

4.眼用制剂，在用于将活性剂持续递送至眼前部的胶凝组合中包含其中古洛糖醛酸含量为约35％-45％的海藻酸钠和赋形剂。

5.权利要求4的眼用制剂，其中所述海藻酸钠以约0.5％-约3％的重量百分比范围存在。

6.权利要求4的眼用制剂，其中所述赋形剂包含结冷胶或硬葡聚糖或它们的组合。

7.权利要求4的眼用制剂，其中所述活性剂溶于或混悬于制剂中。

8.在需要其的患者中治疗眼疾病的方法，该方法包括：施用包含海藻酸盐和赋形剂以及治疗有效量的活性剂的液体眼用制剂，其中海藻酸盐具有约35％-约45％的古洛糖醛酸含量；

在滴入患者的眼穹窿时引发眼用制剂的胶凝；和

活性剂从胶凝化制剂中控制释放到眼睛内以治疗疾病。

9.权利要求8的方法，其中所述海藻酸盐具有约0.5％-3％的重量百分比范围。

10.权利要求8的方法，其中所述赋形剂包含结冷胶或硬葡聚糖或它们的组合。

11.用于活性剂至眼前部的持续药物递送的原位胶凝系统，所述原位胶凝系统包含：具有约35％-约45％的古洛糖醛酸含量的海藻酸钠连同赋形剂和活性剂。

12.权利要求11的原位胶凝系统，其中所述海藻酸钠以约0.5％-约3％的重量百分比范围存在。

13.权利要求11的原位胶凝系统，其中所述赋形剂包含结冷胶或硬葡聚糖或它们的组合。