CN102020640A

CN102020640A - 四氢吲哚酮和四氢吲唑酮衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

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Publication number: CN102020640A
Application number: CN2009101960125A
Authority: CN
Inventors: 邓炳初; 别平彦; 钟峥嵘; 巨明刚; 张蕾; 周颖; 李宜秀
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2009-09-18
Filing date: 2009-09-18
Publication date: 2011-04-20

Abstract

本发明涉及四氢吲哚酮和四氢吲唑酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本发明涉及一种由通式(I)所示的四氢吲哚酮和四氢吲唑酮衍生物或其药学上可以接受的盐，立体异构体或前药，其制备方法及其含有该衍生物的药物组合物，以及作为治疗剂特别是作为热休克蛋白(HSP90)抑制剂的用途，其中通式(I)中的各取代基的定义与说明书中的定义相同。

Description

四氢吲哚酮和四氢吲唑酮衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

技术领域

本发明涉及一种通式(I)所示四氢吲哚酮和四氢吲唑酮衍生物，其制备方法以及含有该衍生物的药物组合物，以及其作为治疗剂特别是作为热休克蛋白(HSP90)抑制剂的用途。

背景技术

热休克蛋白(HSPs)是一类在对热、低氧、氧化应激或毒性物质(如重金属或醇类)等外部应激反应时被增量调节的伴侣蛋白，主要作为分子伴侣参与多种蛋白(客户蛋白)的合成、折叠、积聚、装配、运输和降解。到目前为止，HSPs家族根据它们的分子量大小，主要可分为以下六大家族，即大分子HSPs(100～110kD)，HSP90(83～90kD)，HSP70(66～78kD)，HSP60，HSP40以及小分子HSPs(Alberto J.L.Macario et al.，2005)。

HSP90家族是含量最多的HSP家族之一，在生理条件下占细胞内蛋白质总量的1-2％，在应激条件下会增至总量的4～6％。其均匀的分布在细胞质中，主要以二聚体的形式存在。单独的HSP90在蛋白质折叠中的活性很低，HSP90与其他具有折叠活性的分子伴侣(下称辅助伴侣)协同发挥功能，例如HSP70、P60/Hop/Stil、Hip、Bagl、HSP40/Hdj2/Hsj1、亲免素、p23和p50等(Caplan，A.Trends in Cell Biol.1999，9，262-68)。

HSP90通过结合已获得三级结构的蛋白，参与客户蛋白的激活和成熟过程。HSP90的客户蛋白种类繁多，包括甾体激素受体、螺旋-环-螺旋转录因子、酪氨酸及丝苏氨酸蛋白激酶等(例如Raf-1、EGFR、v-Src家族激酶、Cdk4和ErbB-2等)(Buchner J.TIBS 1999，24，136-141；Stepanova，L.等，Genes Dev.1996，10，1491-502；Dai，K.等，J.Biol.Chem.1996，271，22030-4)。这些客户蛋白多是细胞内信号转导通路的关键蛋白成分，参与肿瘤的发生和演进。因此，通过抑制HSP90，可以达到抗肿瘤的目的，HSP90成为最有希望的抗肿瘤药物的作用靶点之一。

HSP90的空间结构主要由三部分组成：(1)N末端的ATP结合区域，此区对蛋白的ATP酶活性非常重要，N端的ATP结合位点在HSP90家族中是特异和充分保守的，在其他分子伴侣中并不存在；(2)中间的链接区域为客户蛋白结合区；(3)C端是二聚体化功能区和第二ATP结合位点，它也是辅伴侣分子的结合位点，它可以和其它辅助伴侣分子如HSP70、Hip、Hop、p23和p50cdc37等形成复合物相互作用，进一步调节HSP90的活化。HSP90正常的调节作用过程简单的来讲，就是ATP和HSP90的N末端空腔结合，改变了HSP90的构象，从而允许它和其它辅助伴侣分子复合物相互作用。首先，客户蛋白和辅助伴侣分子HSP70/HSP40复合物结合；然后，这种复合物通过Hop与HSP90结合；最后，当ATP和HSP90结合时，HSP90的构象发生改变，Hop和HSP70被释放，ATP水解导致这些辅助伴侣蛋白和客户蛋白从络合物中释放。HSP90抑制剂能和ATP竞争ATP的结合位点，阻滞ATP和HSP90的结合并阻止络合物的产生(Grenert et.al.，1997，J.Biol.Chem.，272，23834)。

X射线结晶学研究显示，天然产物如格尔德霉素(Geldanamycin)或根赤壳菌素(Radicicol)能竞争N末端的ATP结合位点结合(Whitesell，L.等，Proc.Natl.Acad.Sci.美国1994，91，8324-8328；Stebbins，C.等，Cell 1997，89，239-250)，抑制HSP90与辅助伴侣分子如p23的缔合。其结果是，含有客户蛋白和HSP90的伴侣复合物的组成被改变，最终客户蛋白从复合物中释放出来，主要在泛肽(ubiquitin)-蛋白酶体系统中降解。因此，HSP90抑制剂诱导的上述客户蛋白的损失导致某中调节途径的选择性中断，并导致经如此处理的细胞在细胞周期的特定阶段发生生长停止(Muise-Heimericks，R.C.等，J.Biol.Chem.1998，273，29864-72)以及凋亡，和/或分化(Vasilevskaya，A等，Cancer Res.，1999，59，3935-40)，从而能治疗或预防多种类型癌症与增生性疾病。

除了抗癌和抗肿瘤活性外，HSP90抑制剂还有望在其它用途中，包括用做抗炎药、抗传染性疾病的药物、用于治疗自身免疫性的药物、用于中风、局部缺血、多发性脑髓硬化症、心脏病、与中枢神经系统相关的病症的药物和可用于促进神经再生的药物(Rosen等，WO0209696；Degranco等，WO9951223；Gold，US6210974B1；DeFranco等，US6174875)。另外，HSP90抑制剂还可用来治疗纤维化病症，其包括但不限于硬皮病、多发性肌炎、系统狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、瘢痕形成、间质性肾炎和肺纤维化等(Strehlow，WO200202123)。(请注意：如果本案日后进入美国，则需提供上述期刊文章复印件给美国专利局。美国专利局要求本案申请文件中引用的文件和日后国际检索报告中引用的文件都需要在进入国家阶段时提供复印件)

自上世纪90年代开始，相继发现了许多HSP90抑制剂，其中苯醌安沙霉素类抗生素(一类抑制HSP90的天然产物)已在临床试验中被证实具有治疗活性。但是苯醌安沙霉素类衍生物缺点较多，如口服生物可利用度和溶解度较低，毒性较大和合成比较困难，因此迫切需要开发一类新的活性高，毒性低的小分子HSP90抑制剂。

到目前为止，已公开报道的小分子HSP90抑制剂包括：嘌呤类衍生物(专利WO2002036075，WO2005028434和WO2007092496等)，中心环为吡唑，三唑或噁唑环的衍生物(专利WO2004050087，WO2004056782，WO2004072051，WO2004096212，WO2006039977，WO2006055760和US20070155809等)，四氢吲哚酮和四氢吲唑酮衍生物(专利WO2006091963，WO2007101156，WO2008024970和WO2008130879等)。其中，Serenex公司的HSP90抑制剂SNX-2112及其前药SNX-5422显示了良好的HSP90抑制活性，并已于2007年进入临床一期试验阶段。

鉴于现阶段仍无HSP90小分子抑制剂上市使用，本发明的目的就是提供一种具有HSP90抑制活性并且可以用于治疗癌症或类似疾病的药物。

发明内容

为了克服现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的新的四氢吲哚酮和四氢吲唑酮类衍生物，以及它们的互变异构体、对映体、非对映体、消旋体和药学上可接受的盐，以及代谢产物和代谢前体或前药，

其中：

Q选自N或C原子；

R₁选自氢原子、烷基或三氟甲基；

R₂、R₃和R₄各自独立地选自氢原子或烷基；

R₅选自烷基、烷氧基、卤素、羟基、氨基、氰基、硝基、卤代烷基、卤代烷氧基、-C(O)NR₆R₇、-C(O)R₆、-C(O)OR₆、-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇；

R₆和R₇各自独立地选自氢原子、烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环烷基任选进一步被一个或多个选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、烷氧基、环烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、卤素、羟基、氨基、氰基、羟烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、三氟甲基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；

或者，R₆和R₇与其相连的N原子一起形成3～8元的杂环基，其中所述3～8元杂环内进一步含有一个或多个N、O或S(O)_m原子，并且所述3～8元杂环任选进一步被一个或多个选自烷基、芳基、杂芳基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、氨基、氰基、烷氧基、芳氧基、羟烷基、杂环烷基、羧酸、羧酸酯、卤素或-NR₆R₇的取代基所取代；

Z选自N或CR₈，其中R₈选自氢原子或-C(O)OR₆；

n是1或2；

r是1，2，3或4；且

m是0、1或2。

优选地，本发明包括下述通式(IA)表示的化合物或其药学上可接受的盐，立体异构体或前药：

其中：

Q选自N或C原子；

R₁选自氢原子、烷基或三氟甲基；

R₂、R₃或R₄各自独立地选自氢原子或烷基；

Z选自N或CR₈，其中R₈选自氢原子或-C(O)OR₆；

r是1、2、3或4；且

m是0、1或2。

本发明通式(I)所示的优选化合物包括，但不限于：

或其药学上可以接受的盐，立体异构体或前药。

通式(I)化合物的前药是指通过对通式(I)化合物进行设计而得到的化合物，该化合物在体内经酶催化或还原反应后生成通式(I)化合物而起作用。

进一步，本发明包括下述通式(IB)所示的化合物，其作为合成通式(I)化合物的中间体：

其中：

Q选自N或C原子；

R₁选自氢原子、烷基或三氟甲基；

R₂、R₃和R₄各自独立地选自氢原子或烷基；

Z选自N或CR₈，其中R₈选自氢原子或-C(O)OR₆；

n是1或2；

r是1，2，3或4；且

m是0、1或2。

本发明的另一个方面涉及通式(I)的化合物的制备方法，包括以下步骤：

碱性条件下，通式(IC)化合物与取代的双环烷胺在钯络合物催化下进行偶联反应得到通式(IB)，然后偶联产物(IB)中的氰基进一步氧化水解成酰胺产物通式(I)化合物。

其中X选自卤素，基团Z，Q，R₁～R₅和n如通式(I)中所定义，其中n优选为1。

在本发明的另一个方面涉及一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐，及药学上可以接受的载体或赋形剂。此药物组合物在制备HSP90抑制剂中的用途，以及在制备抗癌、抗炎、抗传染性疾病，抗自身免疫性疾病或抗病毒的药物中的用途。

在本发明的另一个方面涉及通式(I)所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备HSP90抑制剂中的用途。

在本发明的另一个方面涉及通式(I)所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗癌、抗炎、抗传染性疾病，抗自身免疫性疾病或抗病毒的药物中的用途。

发明的详细说明

除非有相反陈述，下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。

“烷基”指饱和的脂族烃基团，包括1至20个碳原子的直链和支链基团。优选含有1至10个碳原子的烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基等。更优选的是含有1至4个碳原子的低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基或叔丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自烷基，烷氧基，卤素，羟基，氨基，氰基，硝基，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)NR₆R₇，-C(O)R₆，-C(O)OR₆，-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇。

“环烷基”指3至8元全碳单环基团，其中3至8元全碳单环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。例如环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯、环己烷、环己二烯、环庚烷、环庚三烯等。环烷基可以是取代或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自烷基，烷氧基，卤素，羟基，氨基，氰基，硝基，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)NR₆R₇，-C(O)R₆，-C(O)OR₆，-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇。

“杂环烷基”指3至8元单环基团，其中一个或两个环原子选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。这些环还可以具有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。例如吡咯烷基、哌啶子基、哌嗪子基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪其等，杂环烷基可以是取代的或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自烷基，烷氧基，卤素，羟基，氨基，氰基，硝基，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)NR₆R₇，-C(O)R₆，-C(O)OR₆，-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇。

“芳基”指具有至少一个芳环结构的基团，即具有共轭的π电子体系的芳环，包括碳环芳基、杂芳基和联芳基。芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自烷基，烷氧基，卤素，羟基，氨基，氰基，硝基，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)NR₆R₇，-C(O)R₆，-C(O)OR₆，-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇。

“杂芳基”指具有1至4个杂原子作为环原子，其余的环原子为碳的芳基，杂原子包括氧、硫和氮。所述环可以是5元或6元环。例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。杂芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自烷基，烷氧基，卤素，羟基，氨基，氰基，硝基，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)NR₆R₇，-C(O)R₆，-C(O)OR₆，-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇。

“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(未取代的环烷基)。例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。烷氧基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个，独立地选自烷基，烷氧基，卤素，羟基，氨基，氰基，硝基，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)NR₆R₇，-C(O)R₆，-C(O)OR₆，-OC(O)(CH₂)_rNR₆R₇或-NR₆R₇。

“芳氧基”指-O-芳基和-O-杂芳基，芳基和杂芳基定义同上。代表性实例包括但不限于苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基等及其衍生物。

“卤代烷基”指烷基被卤素取代。代表性实例包括但不限于三氟甲基、三溴甲基等。

“羟烷基”-烷基-OH，其中烷基定义如上所述。

“卤代烷氧基”指-O-(卤代烷基)。代表性实例包括但不限于三氟甲氧基、三溴甲氧基等。

“杂环烷氧基”指-O-(杂环烷基)。

“卤素”指氟、氯、溴或碘。

“硝基”指-NO₂。

“羟基”指-OH基团。

“氨基”指-NH₂。

“氰基”指-CN。

“羧酸”指(烷基)C(＝O)OH。

“羧酸酯”指(烷基)C(＝O)O(烷基)。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/药学上可接受的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/药学上可接受的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

本发明化合物的合成方法

为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种制备通式(I)化合物的合成方法，该方法包括以下步骤：

具体实施方式

以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

实施例

化合物的结构是通过核磁共振(¹HNMR)或质谱(MS)来确定的。¹HNMR位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。¹HNMR的测定是用BrukerAVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代氯仿(CDCl₃)，氘代甲醇(CD₃OD)，六氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)内标为四甲基硅烷(TMS)，化学位移是以10^-6(ppm)作为单位给出；

MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Therm，型号：Finnigan LCQ advantage MAX)；

IC₅₀值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)；

薄层硅胶使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板；

硅胶柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体；

HPLC测试使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)；

微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器；

实施例中无特殊说明，反应均在氮气氛下进行；

氩气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气气球；

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球；

实施例中无特殊说明，反应中的溶液是指水溶液。

实施例1

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺

第一步

(3aR，5R，6aS)-5-羟基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺

冰浴下，将5-氧代-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1a(4g，20.4mmol，根据WO2008089636制备)搅拌下溶解于100mL甲醇中，加入硼氢化钠(1.54g，40.8mmol)，搅拌反应1小时。减压浓缩，残留物用100mL乙酸乙酯溶解，依次用水(30mL×2)，1N盐酸(30mL)和饱和食盐水(30mL×2)洗涤，水相用二氯甲烷(50mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到(3aR，5R，6aS)-5-羟基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1b(2.0g，黄色油状物)，产率：57％。

MS m/z(ESI)：419.1[2M+23]

第二步

(3aR，5R，6aS)-甲磺酸2-二甲氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基酯

冰浴下，将(3aR，5R，6aS)-5-羟基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1b(4g，20.4mmol)搅拌下溶解于100mL无水二氯甲烷中，依次滴加甲磺酰氯(4.7mL，60.5mmol)和三乙胺(17mL，120mmol)，室温搅拌反应1小时。加入45mL饱和碳酸氢钠溶液，静置分液，水相用二氯甲烷(50mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100ml×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5R，6aS)-甲磺酸2-二甲氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基酯1c(4.2g，褐色油状物)，产率：75.1％。

MS m/z(ESI)：277.1[M+1]

第三步

(3aR，5S，6aS)-5-叠氮-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺

将(3aR，5R，6aS)-甲磺酸2-二甲氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基酯1c(4.0g，14.5mmol)搅拌下溶解于30mLN，N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮化钠(2.82g，43.4mmol)，80℃搅拌反应5小时。将反应液倒入100mL冰水中，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(60mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-叠氮-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1d(2.7g，浅黄色油状物)，产率：83.6％。

MS m/z(ESI)：224.2[M+1]

第四步

(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺

将(3aR，5S，6aS)-5-叠氮-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1d(2.22g，10mmol)搅拌下溶解于30mL无水甲醇中，加入0.32g 10％钯/碳，氢气氛下，室温搅拌24小时。过滤，滤饼用甲醇洗涤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1e(1.14g，黄色油状物)，产率：57.8％。

MS m/z(ESI)：198.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ3.60-3.65(m，2H)，3.45-3.53(m，3H)，3.18(d，2H)，2.84(s，6H)，2.81(s，2H)，1.78-1.80(m，2H)，1.65-1.68(m，2H)

第五步

在微波反应管中加入2-溴-4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈1f(309mg，0.75mmol，根据WO2006091963制备)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1e(592mg，3，0mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)(55mg，0.075mmol)，叔丁醇钠(144mg，1.5mmol)和8mL甲苯。115℃微波条件下反应15分钟。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到浅黄色油状物。

冰浴下，将上述浅黄色油状物溶解于1mL二甲亚砜和3mL无水乙醇中，搅拌下滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应4小时，加入20mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1(106mg，白色固体)，产率：15.7％。

MS m/z(ESI)：547.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.48-8.50(d，J＝6.8Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.79-7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.33(s，1H)，6.84-6.85(d，J＝2.0Hz，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，3.95-3.99(m，1H)，3.35-3.41(m，2H)，3.13-3.17(m，2H)，2.98(s，2H)，2.73(s，7H)，2.45(s，2H)，1.87-1.92(m，2H)，1.67-1.74(m，2H)，1.09(s，6H)

实施例2

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺

第一步

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺

在微波反应管中加入2-溴-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈2a(179mg，0.5mmol，根据WO2006091963制备)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1e(395mg，2mmol)，醋酸钯(59mg，0.27mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(255mg，0.46mmol)，叔丁醇钠(192.2mg，2mmol)和10mL甲苯。115℃微波条件下反应30分钟。过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺2b(149mg，黄色油状物)，产率：62.9％。

MS m/z(ESI)：475.4[M+1]

第二步

冰浴下，将(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺2b(149mg，0.3mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和3mL无水乙醇中，滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应4小时，加入20mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺2(189mg，黄色固体)，产率：92.6％。

MS m/z(ESI)：493.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ9.01(d，1H)，8.20(d，1H)，7.09(dd，1H)，6.99(dd，1H)，4.83(s，2H)，3.97(m，1H)，3.25-3.30(m，2H)，3.14-3.17(dd，2H)，2.91(s，2H)，2.65(s，9H)，2.48-2.54(m，2H)，2.36(s，2H)，1.67-1.80(m，4H)，0.92(s，6H)

实施例3

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

第一步

(3aR，5R，6aS)-5-羟基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

将5-氧代-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3a(9g，40mmol)搅拌下溶解于160mL四氢呋喃中，加入硼氢化钠(2.28g，60mmol)，室温搅拌反应24小时。加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，减压浓缩，残留物用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(60mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品(3aR，5R，6aS)-5-羟基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3b，直接用于下一步。

MS m/z(ESI)：228.1[M+1]

第二步

(3aR，5R，6aS)-5-甲磺酰氧基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

冰浴下，将粗产品(3aR，5R，6aS)-5-羟基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3b(9g，40mmol)搅拌下溶解于150mL无水二氯甲烷中，依次滴加甲磺酰氯(4.7mL，60mmol)和三乙胺(11.2mL，80mmol)，室温搅拌反应2小时。加入30mL饱和碳酸氢钠溶液，静置分液，有机相用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品(3aR，5R，6aS)-5-甲磺酰氧基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3c，直接用于下一步。

MS m/z(ESI)：306.1[M+1]

第三步

(3aR，5S，6aS)-5-叠氮-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

将粗产品(3aR，5R，6aS)-5-甲磺酰氧基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3c(12g，40mmol)搅拌下溶解于150mLN，N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮化钠(6.5g，100mmol)，70℃搅拌反应4小时。加入1L水，用乙酸乙酯(800mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(800mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-叠氮-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3d(7.76g，黄色油状物)，产率：77％。

MS m/z(ESI)：252.9[M+1]

第四步

(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

将(3aR，5S，6aS)-5-叠氮-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3d(3.5g，13.9mmol)搅拌下溶解于50mL无水甲醇中，加入1g 10％钯/碳，氢气氛下，室温搅拌24小时。过滤，滤饼用20mL无水甲醇洗涤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3e(2.033g，黄色固体)，产率：64.7％。

MS m/z(ESI)：227.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ3.38-3.41(m，3H)，2.97(dd，2H)，2.70(s，2H)，1.87(s，2H)，1.40-1.60(m，4H)，1.38(s，9H)

第五步

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

在微波反应管中加入2-溴-4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈1f(300mg，0.73mmol)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3e(400mg，1.77mmol)，醋酸钯(10mg，0.04mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(40mg，0.07mmol)，叔丁醇钠(281mg，2.92mmol)和12mL甲苯。110℃微波条件下反应30分钟。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3f(200mg，无色油状物)，产率：49.4％。

LC-MS m/z(ESI)：556.4[M-1]

第六步

冰浴下，将(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3f(200mg，0.36mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和3mL无水乙醇中，滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应30分钟。加入10mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到标题产物(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3(170mg，白色固体)，产率：82.5％。

LC-MS m/z(ESI)：574.4[M-1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.48-8.49(d，J＝6.8Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.78-7.80(d，J＝8.4Hz，1H)，7.32(s，1H)，6.85(s，1H)，6.74-6.76(d，J＝8.0Hz，1H)，4.01-4.03(t，1H)，3.45-3.50(m，2H)，3.07-3.10(m，2H)，2.99(s，2H)，2.76(s，2H)，2.44(s，2H)，1.89-1.93(m，2H)，1.67-1.74(m，2H)，1.35(s，9H)，1.07(s，6H)

实施例4

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

第一步

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯

在微波反应管中加入2-溴-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈2a(251mg，0.7mmol)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3e(634mg，2.8mmol)，醋酸钯(83mg，0.37mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(355mg，0.64mmol)，叔丁醇钠(269mg，2.8mmol)和15mL甲苯。115℃微波条件下反应30分钟。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯4a(344mg，黄色固体)，产率：85.4％。

MS m/z(ESI)：504.3[M+1]

第二步

冰浴下，将(3aR，5S，6aS)-5-[2-氰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯4a(344mg，0.68mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和3mL无水乙醇中，滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应4小时。加入10mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯4(70mg，白色固体)，产率：20％。

LC-MS m/z(ESI)：520.4[M-1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.75(d，1H)，6.85(s，1H)，6.75(d，1H)，4.10-4.13(m，1H)，3.55-3.60(m，2H)，3.26(d，2H)，2.91-2.96(m，4H)，2.52(s，3H)，2.45(s，2H)，1.90-2.06(m，4H)，1.49(s，9H)，1.14(s，6H)

实施例5

1-[3-((3aR，5S，6aS)-2-叔丁氧羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氨基甲酰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

第一步

4，4，4-三氟甲基-2-羟亚氨基-3-氧代-丁酸乙酯

冰浴下，将4，4，4-三氟甲基-3-氧代-丁酸乙酯5a(10.2g，55.4mmol)搅拌下溶解于20mL冰醋酸中。将亚硝酸钠(4.2g，60.9mmol)溶解于15mL水中，控制体系温度在10℃以下，将该溶液滴加到上述反应液中，搅拌反应0.5小时。室温继续搅拌反应3小时。减压浓缩，残留物中加入20mL乙酸乙酯和20mL水，静置分液，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用60mL饱和碳酸氢钠溶液调节pH值至8，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到4，4，4-三氟甲基-2-羟亚氨基-3-氧代-丁酸乙酯5b(8.5g，浅黄色油状物)，产率：72％。

MS m/z(ESI)：211.7[M-1]

第二步

6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

在干燥的500mL三口烧瓶中将5，5-二甲基-环己烷-1，3-二酮(10.5g，0.077mol)和乙酸钠(7.87g，0.096mol)搅拌下溶解于90mL冰醋酸中，加热至60℃。将4，4，4-三氟甲基-2-羟亚氨基-3-氧代-丁酸乙酯5b(8.5g，0.04mol)溶解于26mL冰醋酸中，控制体系温度在75℃以下，将该溶液滴加到上述反应液中，加入锌粉(7.54g，0.116mol)。100℃搅拌反应1小时，分水器除水，继续升温至110℃加热回流3小时。冷却至80℃，过滤，滤液减压浓缩除去一半溶剂，残留物倒入300mL冰水中，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5c(600mg，浅黄色固体)，产率：5％。

MS m/z(ESI)：302.1[M-1]

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)：δ4.34(m，2H)，2.73(s，2H)，2.34(s，2H)，1.32(m，3H)，1.03(m，6H)

第三步

1-(3-溴-4-氰基-苯基)-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5c(3g，9.9mmol)，2-溴-4-氟-苄腈(2.97g，14.9mmol)和碳酸钾(2.73g，19.8mmol)搅拌下溶解于9mL无水N，N-二甲基甲酰胺中，100℃搅拌反应16小时。加入10mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-(3-溴-4-氰基-苯基)-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5d(3.5g，白色固体)，产率：75％。

MS m/z(ESI)：484.0[M+1]

第四步

1-[3-((3aR，5S，6aS)-2-叔丁氧羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氨基甲酰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯在微波反应管中加入1-(3-溴-4-氰基-苯基)-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5d(483mg，1mmol)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3e(678mg，3mmol)，醋酸钯(118mg，0.53mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(509mg，0.92mmol)，叔丁醇钠(384mg，4mmol)和5mL甲苯，在115℃下微波条件下反应20分钟。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到浅黄色油状物。

冰浴下，将上述浅黄色油状物溶解于1mL二甲亚砜和4mL无水乙醇中，搅拌下滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M碳酸钾溶液，室温搅拌反应30分钟。加入30mL水，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-[3-((3aR，5S，6aS)-2-叔丁氧羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氨基甲酰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5(260mg，白色固体)，产率：40％。

LC-MS m/z(ESI)：645[M-1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，6.61(s，1H)，6.51(m，1H)，4.15(m，2H)，3.99(m，1H)，3.52(m，2H)，3.27(m，2H)，2.86(m，2H)，2.59(s，2H)，2.44(s，2H)，1.97(m，2H)，1.86(m，2H)，1.42(m，9H)，1.09(m，9H)

实施例6

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺

第一步

(3a′R，5′S，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-基甲磺酸酯

冰浴下，将(3a′R，5′S，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-醇6a(1.62g，8.79mmol，根据WO2007112669制备)搅拌下溶解于25mL二氯甲烷中，依次加入三乙胺(2.45mL，17.58mmol)和甲磺酰氯(1.02mL，13.19mmol)，室温搅拌2小时。加入10mL水，分出有机层，水相用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到(3a′R，5′S，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-基甲磺酸酯6b(2.2g，黄色固体)，产率：95.5％。

LC-MS m/z(ESI)：263.1[M+1]

第二步

(3a′R，5′R，6a′S)-5′-叠氮-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]

将(3a′R，5′S，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-基甲磺酸酯6b(3.96g，15.84mmol)搅拌下溶解于40mLN，N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮化钠(2.45g，37.8mmol)及2mL水。70℃搅拌反应3小时。加入40mL水，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(60mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到(3a′R，5′R，6a′S)-5′-叠氮-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]6c(3g，橙色油状物)，产率：90.8％。

LC-MS m/z(ESI)：210.2[M+1]

第三步

(3a′R，5′R，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-胺

将(3a′R，5′R，6a′S)-5′-叠氮-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]6c(3g，14.38mmol)搅拌下溶解于30mL甲醇中，加入0.3g 10％钯/碳，氢气氛下，室温搅拌反应24小时。反应液过滤，滤饼依次用10mL乙酸乙酯和10mL甲醇洗涤，滤液减压浓缩，得到粗产品(3a′R，5′R，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-胺6d，直接用于下一步。

MS m/z(ESI)：184.1[M+1]

第四步

(3aR，5R，6aS)-5-氨基-六氢-并环戊二烯-2-酮

将粗产品(3a′R，5′R，6a′S)-六氢-1′H-螺[[1，3]二氧杂环戊烷-2，2′-并环戊二烯]-5′-胺6d(2.63g，14.38mmol)搅拌下溶解于25mL四氢呋喃中，滴加0.1mL 12N盐酸调节pH值至1～2，30℃搅拌反应30分钟。反应液中滴加2mL氨水调节pH值至8。减压浓缩，残留物中加入20mL乙醇，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品(3aR，5R，6aS)-5-氨基-六氢-并环戊二烯-2-酮6e，直接用于下一步。

LC-MS m/z(ESI)：140.1[M+1]

第五步

(2R，3aR，5R，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇

将粗产品(3aR，5R，6aS)-5-氨基-六氢-并环戊二烯-2-酮6e(2g，14.38mmol)搅拌下溶解于30mL甲醇中，加入硼氢化钠(0.65g，17.26mmol)，室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(2R，3aR，5R，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇6f(1.46mg，浅黄色固体)，产率：72.14％。

LC-MS m/z(ESI)：143.1[M+1]

第六步

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苄腈

在微波反应管中加入2-溴-4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈1f(410mg，1mmol)，(2R，3aR，5R，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇6f(423mg，3.0mmol)，醋酸钯(12mg，0.05mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(55mg，0.09mmol)，叔丁醇钠(384mg，4mmol)和16mL四氢呋喃，115℃微波条件下反应25分钟，过滤，滤饼用40mL乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苄腈6g(150mg，浅黄色固体)，产率：31.8％。

LC-MS m/z(ESI)：471.3[M-1]

第七步

冰浴下，将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苄腈6g(150mg，0.32mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和2mL无水乙醇中，滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应30分钟，加入10mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺6(105mg，白色固体)，产率：67.3％。

LC-MS m/z(ESI)：489.3[M-1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.46-8.48(d，J＝7.2Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.77-7.79(d，J＝8.4Hz，1H)，7.29(s，1H)，6.89-6.90(d，J＝1.6Hz，1H)，6.72-6.75(dd，1H)，4.55-4.56(d，J＝3.6Hz，1H)，3.98-4.07(m，1H)，3.90-3.95(m，1H)，2.96(s，2H)，2.45(s，2H)，1.93-1.98(m，2H)，1.87-1.90(m，2H)，1.56-1.63(m，2H)，1.23-1.30(m，2H)，1.07(s，6H)

实施例7

1-[4-氨基甲酰基-3-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

在微波反应管中加入1-(3-溴-4-氰基-苯基)-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5d(483mg，1mmol)，(2R，3aR，5R，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇6f(560mg，4mmol)，醋酸钯(250mg，0.46mmol)，1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(384mg，4mmol)，叔丁醇钠(59mg，0.26mmol)和5mL甲苯，115℃微波条件下反应20分钟。过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到浅黄色油状物。

冰浴下，将上述浅黄色油状物溶解于1mL二甲亚砜和4mL无水乙醇中，搅拌下滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M碳酸钾溶液，室温搅拌反应30分钟，加入20mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物1-[4-氨基甲酰基-3-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯7(30mg，白色固体)，产率：7％。

LC-MS m/z(ESI)：562.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.41(d，1H)，7.95(s，1H)，7.73(d，1H)，7.29(s，1H)，6.69(s，1H)，6.50(d，1H)，4.56(d，1H)，4.12(m，2H)，3.90(m，1H)，2.67(m，2H)，2.40(m，2H)，2.37(m，2H)，1.97(m，2H)，1.82(m，2H)，1.57(m，2H)，1.29(m，2H)，1.09(m，9H)

实施例8

1-[4-氨基甲酰基-3-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯基]-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

第一步

4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将环己烷-1，3-二酮(18.9g，0.17mol)和乙酸钠(15g，0.18mol)搅拌下溶解于150mL冰醋酸中，将体系温度控制在75℃以下，滴加4，4，4-三氟甲基-2-羟亚氨基-3-氧代-丁酸乙酯5b(30g，0.14mol)的100mL冰醋酸溶液，分批加入锌粉(18.3g，0.28mol)。加热回流3小时。冷却至80℃，过滤，滤液中加入碳酸氢钠(100mg，1.19mol)，倒入1000mL冰水中，静置24小时。过滤，烘干滤饼，用95％的乙醇重结晶，得到4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯8a(13.7g，浅黄色固体)，产率：35.3％。

MS m/z(ESI)：274.2[M-1]

第二步

1-(3-溴-4-氰基-苯基)-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯8a(4g，19.8mmol)，2-溴-4-氟-苄腈(4.2g，29.7mmol)和碳酸钾(5.3g，39.6mmol)搅拌下溶解于20mLN，N-二甲基甲酰胺中，100℃搅拌反应16小时。冷却，加入100mL水，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-(3-溴-4-氰基-苯基)-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯8b(4.6g，棕色固体)，产率：60％。

LC-MS m/z(ESI)：457.1[M+1]

第三步

在微波反应管中加入1-(3-溴-4-氰基-苯基)-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯8b(455mg，1mmol)，(2R，3aR，5R，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇6f(420mg，3mmol)，醋酸钯(59mg，0.26mmol)，(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(250mg，0.4mmol)，碳酸铯(1.2g，4mmol)和5mL甲苯，115℃微波条件下反应20分钟，减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到浅红色油状物。

冰浴下，将上述浅红色油状物溶解于1mL二甲亚砜和3mL无水乙醇中，搅拌下滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M碳酸钾溶液，室温搅拌反应15分钟，加入30mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-[4-氨基甲酰基-3-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯基]-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯8(30mg，白色固体)，产率：6％。

MS m/z(ESI)：534.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，6.70(s，1H)，6.52(m，1H)，4.18(m，2H)，4.06(m，1H)，2.76(m，2H)，2.61(m，3H)，2.17(m，4H)，1.94(m，4H)，1.78(m，2H)，1.34(m，2H)，1.09(m，3H)

实施例9

(2R，3aR，5R，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

第一步

(2R，3aR，5R，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺6(320mg，0.65mmol)搅拌下溶解于6mL二氯甲烷中，加入N-叔丁氧羰基-甘氨酸(228mg，1.3mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(250mg，1.3mmol)，室温搅拌5分钟，加入4-二甲氨基吡啶(16mg，1.3mmol)，继续搅拌反应24小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(2R，3aR，5R，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯9a(352mg，浅黄色固体)，产率：83.2％。

MS m/z(ESI)：648.0[M+1]

第二步

冰浴下，将(2R，3aR，5R，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯9a(352g，0.54mmol)搅拌下溶解于5mL二氯甲烷中，加入1mL三氟乙酸，搅拌5分钟后，升至室温，继续搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，所得残留物用60mL乙酸乙酯溶解，加入10mL饱和碳酸钠溶液，静置分液，有机相用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(2R，3aR，5R，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯9(250mg，白色固体)，产率：83.9％。

LC-MS m/z(ESI)：548.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.18-8.20(d，J＝6.4Hz，1H)，7.48-7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，6.80-6.81(d，J＝2.0Hz，1H)，6.62-6.64(dd，1H)，5.68-5.70(brs，2H)，5.10-5.17(m，1H)，4.00-4.05(m，1H)，3.40(s，2H)，2.86(s，2H)，2.71-2.74(m，2H)，2.49(s，2H)，2.21-2.28(m，2H)，1.89-1.92(m，4H)，1.48-1.54(m，6H)，1.14(s，6H)

实施例10

1-[4-氨基甲酰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-二甲氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

在微波反应管中加入1-(3-溴-4-氰基-苯基)-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5d(483mg，1mmol)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酰二甲胺1e(590mg，3mmol)，醋酸钯(33mg，0.12mmol)，(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(120mg，0.19mmol)，碳酸铯(1.2g，4mmol)和5mL甲苯。115℃微波条件下反应20分钟。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到浅黄色油状物。

冰浴下，将上述浅黄色油状物溶解于1mL二甲亚砜和5mL无水乙醇中，搅拌下滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M碳酸钾溶液，室温搅拌反应15分钟，加入20mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-[4-氨基甲酰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-二甲氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯10(25mg，白色固体)，产率：5％。

MS m/z(ESI)：618.2[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，6.19(s，1H)，6.51(m，1H)，4.15(m，2H)，3.98(m，1H)，3.48(m，2H)，2.82(m，9H)，2.65(m，2H)，2.45(m，2H)，1.95(m，2H)，1.83(m，2H)，1.08(m，9H)

实施例11

1-{4-氨基甲酰基-3-(3aR，5S，6aS)-[2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

第一步

1-[3-(3aR，5S，6aS)-(2-叔丁氧羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

在微波反应管中加入1-(3-溴-4-氰基-苯基)-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯5d(483mg，1mmol)，(3aR，5S，6aS)-5-氨基-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3e(452mg，2mmol)，醋酸钯(33mg，0.12mmol)，(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(96mg，0.15mmol)，碳酸铯(1.2g，4mmol)和8mL甲苯，115℃微波条件下反应20分钟。过滤，滤饼用40mL乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-[3-(3aR，5S，6aS)-(2-叔丁氧羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11a(620mg，棕色固体)，产率：35％。

LC-MS m/z(ESI)：627.4[M-1]

第二步

1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

冰浴下，将1-[3-(3aR，5S，6aS)-(2-叔丁氧羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11a(620mg，1mmol)搅拌下溶解于20mL二氯甲烷中，滴加3mL 5N氯化氢的1，4-二氧六环溶液，室温搅拌反应3小时，减压浓缩，得到浅黄色油状物1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11b，直接用于下一步。

LC-MS m/z(ESI)：529.4[M+1]

第三步

1-{4-氰基-3-(3aR，5S，6aS)-[2-(2-乙酰氧基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11b(280mg，0.53mmol)搅拌下溶解于3mL二氯甲烷中，依次加入三乙胺(102mg，1.06mmol)和乙酰氧基乙酰氯(79.1mg，0.58mmol)，室温搅拌反应1小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-{4-氰基-3-(3aR，5S，6aS)-[2-(2-乙酰氧基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11c(240mg，白色固体)，产率：85％。

LC-MS m/z(ESI)：629.4[M+1]

第四步

1-{4-氨基甲酰基-3-(3aR，5S，6aS)-[2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯冰浴下，将1-{4-氰基-3-(3aR，5S，6aS)-[2-(2-乙酰氧基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11c(240mg，0.38mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和2mL无水乙醇中，滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应3小时。加入30mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-{4-氨基甲酰基-3-(3aR，5S，6aS)-[2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11(100mg，白色固体)，产率：45％。

MS m/z(ESI)：605.2[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.74(d，J＝8.4Hz，1H)，6.66(s，1H)，6.52(d，J＝10Hz，1H)，4.2(m，4H)，4.08(m，1H)，3.70(m，2H)，3.44(m，1H)，2.92(m，1H)，2.66(m，1H)，2.47(m，1H)，2.04(m，1H)，1.87(m，1H)，1.10(m，9H)

实施例12

1-[4-氨基甲酰基-3-(3aR，5S，6aS)-(2-氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

第一步

1-[3-((3aR，5S，6aS)-2-氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11b(150mg，0.28mmol)搅拌下溶解于5mL异丙醇中，加入N，N-二异丙基乙胺(109.9mg，0.85mmol)，搅拌5分钟后，加入三甲基硅基异氰酸酯(45.7mg，0.39mmol)，室温搅拌反应24小时。过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-[3-((3aR，5S，6aS)-2-氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯12a(150mg，浅黄色固体)，产率：92％。

LC-MS m/z(ESI)：572.4[M+1]

第二步

1-[4-氨基甲酰基-3-(3aR，5S，6aS)-(2-氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯冰浴下，将1-[3-((3aR，5S，6aS)-2-氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-氰基-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯12a(150mg，0.26mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和2mL乙醇中，加入0.5mL1M碳酸钾和1mL 30％双氧水，室温搅拌反应30分钟。减压浓缩，加入8mL水，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-[4-氨基甲酰基-3-(3aR，5S，6aS)-(2-氨基甲酰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯12(40mg，白色固体)，产率：25.8％。

LC-MS m/z(ESI)：590.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.4(d，J＝6.8Hz，1H)，8.0(s，1H)，7.7(d，，J＝8.4Hz，1H)，7.4(s，1H)，6.7(s，1H)，6.5(d，J＝8.0Hz，1H)，4.0(d，J＝6.8Hz，2H)，3.9(m，1H)，3.4(m，4H)，3.0(dd，J＝3.6Hz，2H)，2.7(s，2H)，2.5(s，2H)，2.3(s，2H)，1.8(m，2H)，1.6(s，2H)，1.0(t，9H)

实施例13

2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-二甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺

第一步

2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-二甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈

在微波反应管中加入2-溴-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈2a(240mg，0.67mmol)，(2R，3aR，5R，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇6f(283mg，2mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(61mg，0.067mmol)，(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(42mg，0.067mmol)，叔丁醇钠(258mg，2.68mmol)和10mL四氢呋喃，115℃微波条件下反应30分钟。过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-二甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈13a(220mg，黄色固体)，产率：78.6％。

MS m/z(ESI)：419.5[M+1]

第二步

冰浴下，将2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-二甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈13a(100mg，0.24mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和4mL乙醇中，加入氢氧化钾(20mg，0.36mmol)，搅拌5分钟，滴加0.1mL 30％双氧水，室温搅拌反应30分钟。减压浓缩，加入20mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-二甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺13(73mg，黄色固体)，产率：70％。

MS m/z(ESI)：437.5[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.73(d，1H)，6.88(s，1H)，6.72(d，1H)，4.12(m，2H)，2.95(s，2H)，2.68(s，2H)，2.43-2.50(m，4H)，2.12-2.23(m，2H)，1.97-2.00(m，2H)，1.75-1.80(m，2H)，1.31-1.45(m，4H)，1.12-1.14(m，4H)，0.95-0.99(m，2H)

实施例14

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-[(3aR，5S，6aS)-2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯甲酰胺

第一步

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺

冰浴下，将(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3(654mg，1.14mmol)搅拌下溶解于5mL二氯甲烷中，滴加1mL 5M氯化氢的1，4-二氧六环溶液，室温搅拌反应1小时。减压浓缩，加入100mL乙酸乙酯和40mL饱和碳酸钠溶液，分出有机相，水相用乙酸乙酯(60mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺14a(410mg，白色固体)，产率：75.6％。

LC-MS m/z(ESI)：476.3[M+1]

第二步

乙酸2-{(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-基}-2-氧代-乙酯

冰浴下，将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺14a(410mg，0.86mmol)搅拌下溶解于5mL二氯甲烷中，依次加入三乙胺(174mg，1.72mmol)和乙酰氧基乙酰氯(124mg，0.91mmol)，室温搅拌反应24小时。减压浓缩，得到粗产品乙酸2-{(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-基}-2-氧代-乙酯14b(495mg，浅黄色固体)，直接用于下一步。

LC-MS m/z(ESI)：574.3[M-1]

第三步

将粗产品乙酸2-{(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-基}-2-氧代-乙酯14b(495mg，0.86mmol)搅拌下溶解于4mL乙醇中。将碳酸钾(178mg，1.29mmol)溶解于1mL水中，加入上述反应体系中，室温搅拌反应1.5小时。加入30mL饱和饱和氯化铵溶液，用乙酸乙酯(80mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(80mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-[(3aR，5S，6aS)-2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯甲酰胺14(250mg，白色固体)，产率：54.5％。

LC-MS m/z(ESI)：532.3[M-1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.51-8.53(d，J＝6.8Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.79-7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.35(s，1H)，6.85-6.86(d，J＝2Hz，1H)，6.74-6.77(dd，1H)，4.46-4.48(t，1H)，4.04-4.06(m，2H)，3.54-3.61(m，2H)，3.18-3.27(m，2H)，2.98(s，2H)，2.84-2.89(m，1H)，2.74-2.79(m，1H)，2.45(s，2H)，1.90-1.96(m，2H)，1.70-1.78(m，2H)，1.04(s，6H)

实施例15

1-[4-氨基甲酰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-乙氧基羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

第一步

1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-乙氧基羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11b(300mg，0.57mmol)搅拌下溶解于5mL二氯甲烷中，加入三乙胺(144mg，1.43mmol)，搅拌5分钟，加入氯甲酸乙酯(73mg，0.68mmol)，室温搅拌反应3小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-乙氧基羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯15a(200mg，白色固体)，产率：58％。

第二步

1-[4-氨基甲酰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-乙氧基羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯冰浴下，将1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-乙氧基羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯15a(200mg，0.33mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和4mL乙醇中，加入0.1mL1M碳酸钾溶液和0.1mL 30％双氧水，室温搅拌反应30分钟。加入50mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-[4-氨基甲酰基-3-((3aR，5S，6aS)-2-乙氧基羰基-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯15(120mg，白色固体)，产率：61％。

LC-MS m/z(ESI)：619.5[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.74(d，1H)，6.64(s，1H)，6.53(m，1H)，4.24(m，4H)，4.01(m，1H)，2.91(s，3H)，2.62(s，2H)，2.47(s，2H)，1.91(m，4H)，1.20(m，3H)，1.07(m，9H)

实施例16

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺

第一步

(2S，3aR，5R，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺6(300mg，0.61mmol)，三苯基膦(787mg，3mmol)和对硝基苯甲酸(438mg，2.62mmol)，搅拌下溶解于14mL无水苯中，滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.46mL，3mmol)，室温搅拌反应24小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(2S，3aR，5R，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯16a(320mg，浅黄色固体)，产率：82.1％。

LC-MS m/z(ESI)：638.4[M-1]

第二步

将产物(2S，3aR，5R，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯16a(320mg，0.5mmol)搅拌下溶解于4mL乙醇中，加入氢氧化钾(28mg，0.5mmol)，室温搅拌反应2小时。加入40mL乙酸乙酯和20mL水，静置分液，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺16(210mg，白色固体)，产率：85.7％。

LC-MS m/z(ESI)：489.3[M-1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.74-7.76(d，J＝8.0Hz，1H)，6.91-6.92(d，J＝2.0Hz，1H)，6.75-6.78(dd，1H)，4.31-4.36(m，1H)，3.94-3.97(m，1H)，3.01(s，2H)，2.82-2.85(m，2H)，2.52(s，2H)，1.83-1.92(m，2H)，1.78-1.81(m，4H)，1.53-1.59(m，2H)，1.17(s，6H)

实施例17

(3aR，5R，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸-(S)-四氢-呋喃-3-基酯

第一步

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺盐酸盐

冰浴下，将(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯3(1g，1.74mmol)搅拌下溶解于10mL二氯甲烷中，滴加2mL 5M氯化氢的1，4-二氧六环溶液，室温反应2小时。减压浓缩，过滤，滤饼用甲苯洗涤，减压下浓缩，得到4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺盐酸盐17a(843mg，白色固体)，产率：94.7％。

LC-MS m/z(ESI)：476.3[M+1]

第二步

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-[(3aR，5S，6aS)-2-(咪唑-1-羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯甲酰胺

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺盐酸盐17a(410mg，0.8mmol)搅拌下溶解于10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(162mg，1.6mmol)，搅拌30分钟，加入N，N′-羰基二咪唑(389mg，2.4mmol)。室温搅拌反应24小时。加入30mL水，用乙酸乙酯(60mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(60mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-[(3aR，5S，6aS)-2-(咪唑-1-羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯甲酰胺17b(350mg，浅黄色固体)，产率：76.8％。

LC-MS m/z(ESI)：570.4[M+1]

第三步

(3aR，5R，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸-(S)-四氢-呋喃-3-基酯冰浴下，将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-[(3aR，5S，6aS)-2-(咪唑-1-羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯甲酰胺17b(350mg，0.61mmol)和(S)-四氢呋喃-3-醇(108mg，1.23mmol)搅拌下溶解于8mL四氢呋喃中，加入60％氢化钠与矿物油混合物(73mg，1.84mmol)，室温反应30分钟。加入25mL饱和氯化铵溶液，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(3aR，5R，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸-(S)-四氢-呋喃-3-基酯17(110mg，白色固体)，产率：30.6％。

LC-MS m/z(ESI)：590.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.49-8.51(d，J＝6.4Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.79-7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.35(s，1H)，6.87-6.87(d，J＝1.6Hz，1H)，6.75-6.77(dd，1H)，5.09-5.12(dd，1H)，4.03-4.07(m，2H)，3.63-3.77(m，6H)，3.51-3.56(m，2H)，3.12-3.16(dd，2H)，2.99(s，2H)，2.79(s，2H)，2.45(s，2H)，1.84-1.90(m，4H)，1.69-1.74(m，2H)，1.05(s，6H)

实施例18

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺

第一步

(2R，3aR，5S，6aS)-5-苄氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇

将(3aR，5S，6aS)-5-羟基-六氢-并环戊二烯-2-酮18a(9.2g，65.7mmol，根据WO2007112669制备)搅拌下溶解于300mL乙腈中，加入苯甲胺(10.8mL，98.6mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(34.8g，164mmol)，室温搅拌反应24小时。加入500mL水，用乙酸乙酯(100mL×11)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(2R，3aR，5S，6aS)-5-苄氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇18b(6g，黄色油状物)，产率：39.5％。

LC-MS m/z(ESI)：232.2[M+1]

第二步

(2R，3aR，5S，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇

将(2R，3aR，5S，6aS)-5-苄氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇18b(3.6g，15.6mmol)搅拌下溶解于50mL甲醇中，加入0.5g 10％钯/碳，氢气氛下，室温搅拌24小时后，50℃加热4小时。过滤，滤饼用10mL乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩，得到(2R，3aR，5S，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇18c(1.8g，浅黄色固体)，产率：81.8％。

LC-MS m/z(ESI)：142.1[M+1]

第三步

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苄腈

在微波反应管中加入2-溴-4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈1f(618mg，1.5mmol)，(2R，3aR，5S，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇18c(635mg，4.5mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(137mg，0.15mmol)，(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(93mg，0.15mmol)，叔丁醇钠(577mg，6mmol)和8mL四氢呋喃。115℃微波条件下反应25分钟。加入30mL水，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苄腈18d(296mg，黄色固体，产率：20.9％)和4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺18(210mg，黄色固体，产率：14.8％)。

第四步

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苄腈18d(290mg，0.61mmol)搅拌下溶解于0.2mL二甲亚砜和2mL无水乙醇中，加入氢氧化钾(52mg，0.92mmol)，室温搅拌5分钟，加入1mL 30％双氧水，继续搅拌反应30分钟。加入10mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺18(240mg，黄色固体)，产率：80.3％。

LC-MS m/z(ESI)：491.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.74-7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，6.91-6.92(d，J＝2.0Hz，1H)，6.72-6.75(dd，1H)，4.21-4.24(m，1H)，3.81-3.86(m，1H)，2.99(s，2H)，2.50(s，2H)，2.41-2.50(m，2H)，2.06-2.12(m，2H)，1.78-1.82(m，4H)，1.14(s，6H)

实施例19

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸乙酯

冰浴下，将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺盐酸盐17a(300mg，0.59mmol)搅拌下溶解于6mL四氢呋喃中，加入三乙胺(179mg，1.77mmol)，搅拌15分钟，滴加氯甲酸乙酯(64mg，0.59mmol)。室温搅拌反应1小时。加入10mL水和20mL二氯甲烷，静置分液，有机相用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸乙酯19(180mg，浅绿色固体)，产率：56％。

LC-MS m/z(ESI)：548.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.50(d，1H)，8.01(s，1H)，7.79(d，1H)，7.34(m，1H)，6.85(t，1H)，6.75(m，1H)，4.02(m，1H)，4.01(m，2H)，3.53(m，2H)，3.14(m，2H)，2.97(d，2H)，2.79(s，2H)，2.45(s，2H)，1.94(m，2H)，1.74(m，2H)，1.20(t，3H)，1.10(s，6H)

实施例20

1-{4-氨基甲酰基-3-[(3aR，5R，6aS)-2-((S)-四氢-呋喃-3-基氧羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

第一步

1-{4-氰基-3-[(3aR，5S，6aS)-2-(咪唑-1-羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

冰浴下，将1-[4-氰基-3-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯基]-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯11b(540mg，1mmol)搅拌下溶解于10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(200mg，2mmol)，搅拌30分钟，加入N，N′-羰基二咪唑(486mg，3mmol)，室温搅拌反应24小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到1-{4-氰基-3-[(3aR，5S，6aS)-2-(咪唑-1-羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯20a(560mg，白色固体)，产率：90％。

LC-MS m/z(ESI)：623.4[M+1]

第二步

1-{4-氰基-3-[(3aR，5R，6aS)-2-((S)-四氢-呋喃-3-基氧羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯

将1-{4-氰基-3-[(3aR，5S，6aS)-2-(咪唑-1-羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯20a(280mg，0.45mmol)和(S)-四氢呋喃-3-醇(79mg，0.9mmol)搅拌下溶解于10mL四氢呋喃中。冰浴冷却下加入60％氢化钠与矿物油混合物(32.4mg，1.35mmol)，室温搅拌反应1小时。加入30mL冰水，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残留物过滤，得到1-{4-氰基-3-[(3aR，5R，6aS)-2-((S)-四氢-呋喃-3-基氧羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯20b(220mg，白色固体)，产率：76％。

LC-MS m/z(ESI)：643.5[M+1]

第三步

冰浴下，将1-{4-氰基-3-[(3aR，5R，6aS)-2-((S)-四氢-呋喃-3-基氧羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯20b(220mg，0.34mmol)溶解于1mL二甲亚砜和4mL无水乙醇中，搅拌下滴加0.1mL 30％双氧水和0.1mL 1M碳酸钾溶液，室温搅拌反应30分钟。加入30mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物1-{4-氨基甲酰基-3-[(3aR，5R，6aS)-2-((S)-四氢-呋喃-3-基氧羰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-苯基}-6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-甲酸乙酯20(80mg，白色固体)，产率：34.7％。

LC-MS m/z(ESI)：661.5[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.74(d，J＝8.4Hz，1H)，6.65(s，1H)，6.52(d，1H)，5.20(s，1H)，4.17(m，2H)，4.04(m，1H)，3.80(m，3H)，3.60(m，2H)，3.28(m，2H)，2.91(m，2H)，2.62(m，2H，)，2.47(m，1H)，2.19(rm，1H)，2.05(m，6H，)，1.10(m，9H)

实施例21

(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸甲酯

冰浴下，将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-苯甲酰胺盐酸盐17a(256mg，0.5mmol)搅拌下溶解于5mL四氢呋喃中，加入三乙胺(151mg，1.5mmol)，搅拌15分钟，缓慢滴加氯甲酸甲酯(47mg，0.5mmol)。室温搅拌反应1小时。加入10mL水和20mL二氯甲烷，静置分液，有机相用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸甲酯21(150mg，浅绿色固体)，产率：57.7％。

LC-MS m/z(ESI)：534.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.50(d，1H)，8.01(s，1H)，7.79(d，1H)，7.34(m，1H)，6.85(t，1H)，6.75(m，1H)，3.56(m，2H)，3.53(m，2H)，3.14(m，2H)，2.99(s，2H)，2.79(s，2H)，2.45(s，2H)，1.94(m，2H)，1.74(m，2H)，1.26(t，3H)，1.10(s，6H)

实施例22

2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺

第一步

2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈

在微波反应管中加入2-溴-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈2a(500mg，1.4mmol)，(2R，3aR，5S，6aS)-5-氨基-八氢-并环戊二烯-2-醇18c(600mg，4.2mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(130mg，0.14mmol)，(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(87mg，0.14mmol)，叔丁醇钠(540mg，5.6mmol)和7mL四氢呋喃。115℃微波条件下反应25分钟。过滤，滤饼用10mL乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈22a(260mg，黄色固体)，产率：44.8％。

LC-MS m/z(ESI)：419.3[M+1]

第二步

冰浴下，将2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苄腈22a(260mg，0.6mmol)搅拌下溶解于1.5mL二甲亚砜和4mL无水乙醇中，加入1.5mL 30％双氧水和1mL 1M碳酸钾溶液，室温搅拌反应30分钟。减压浓缩，所得残留物中加入15mL水，用乙酸乙酯(15mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺22(137mg，白色固体)，产率：50.7％。

LC-MS m/z(ESI)：437.4[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，6.8(d，J＝2.0Hz，1H)，6.6(dd，J＝2.0Hz，1H)，4.2(m，1H)，3.8(m，1H)，2.9(s，2H)，2.5(m，5H)，2.4(s，4H)，2.1(m，2H)，1.4-1.5(m，4H)，1.1(s，6H，)

实施例23

4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺

第一步

(2S，3aR，5S，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺18(250mg，0.51mmol)，三苯基膦(656mg，2.5mmol)和对硝基苯甲酸(366mg，2.19mmol)，搅拌下溶解于12mL无水苯中，滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.38mL，2.5mmol)。室温搅拌反应6小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，减压浓缩，得到的固体用乙醇重结晶，得到(2S，3aR，5S，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯23a(280mg，浅黄色固体)，产率：85.9％。

LC-MS m/z(ESI)：640.4[M+1]

第二步

将(2S，3aR，5S，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯23a(280mg，0.44mmol)搅拌下溶解于5mL乙醇中，加入氢氧化钾(37mg，0.66mmol)，室温搅拌反应1.5小时。加入60mL乙酸乙酯，用20mL饱和氯化铵溶液洗涤，静置分液，有机相用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺23(150mg，浅黄色固体)，产率：69.8％。

LC-MS m/z(ESI)：491.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.74-7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，6.92-6.92(d，J＝2.0Hz，1H)，6.73-6.75(dd，1H)，4.39-4.41(m，1H)，3.780-3.83(m，1H)，2.99(s，2H)，2.68-2.74(m，2H)，2.52(s，2H)，2.35-2.45(m，2H)，1.79-1.86(m，2H)，1.64-1.72(m，2H)，1.13(s，6H)

实施例24

2-((2S，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺

第一步

(2S，3aR，5S，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺22(250mg，0.57mmol)，三苯基膦(736mg，2.8mmol)和对硝基苯甲酸(411.5mg，2.5mmol)，搅拌下溶解于12mL无水苯中，滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.43mL，2.8mmol)。室温搅拌反应4.5小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(2S，3aR，5S，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯24a(310mg，浅黄色固体)，产率：92.5％。

LC-MS m/z(ESI)：586.3[M+1]

第二步

将(2S，3aR，5S，6aS)-4-硝基-苯甲酸5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯24a(310mg，0.53mmol)搅拌下溶解于10mL乙醇中，加入氢氧化钾(44mg，0.79mmol)，室温反应15分钟。减压浓缩，所得残留物中加入15mL水，用乙酸乙酯(15mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物2-((2S，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺24(100mg，白色固体)，产率：43.2％。

LC-MS m/z(ESI)：437.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ7.6(d，J＝8.8Hz，1H)，6.7(d，J＝2.0Hz，1H)，6.5(dd，J＝2.4Hz，1H)，4.2(m，1H)，3.7(m，1H)，2.6(s，2H)，2.5(m，2H)，2.3(s，3H)，2.2(m，4H)，1.7(m，2H)，1.5(m，2H)，1.1(m，2H)，1.0(s，6H)

实施例25

(2R，3aR，5S，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

第一步

(2R，3aR，5S，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5R，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺18(600mg，1.2mmol)搅拌下溶解于15mL二氯甲烷中，加入N-叔丁氧羰基-甘氨酸(1.2g，7.4mmol)，室温搅拌5分钟，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.6mg，8.6mmol)和4-二甲氨基吡啶(200mg，1.6mmol)，继续搅拌反应24小时。减压浓缩，所得残留物中加入20mL水，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品(2R，3aR，5S，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯25a(1.4g，褐色固体)，直接用于下一步。

LC-MS m/z(ESI)：648.3[M+1]

第二步

冰浴下，将(2R，3aR，5S，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯25a(0.7g，1.1mmol)搅拌下溶解于20mL二氯甲烷中，搅拌5分钟，滴加8mL三氟乙酸，室温搅拌反应30分钟。减压浓缩，所得残留物用100mL乙酸乙酯溶解，依次用饱和碳酸钾溶液(20mL×2)，饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用乙酸乙酯重结晶，得到标题产物(2R，3aR，5S，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯25(0.5g，白色固体)，产率：84.7％。

LC-MS m/z(ESI)：548.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.3(d，J＝6.8Hz，1H)，7.5(d，J＝8.4Hz，1H)，6.8(d，J＝1.2Hz，1H)，6.6(dd，J＝1.6Hz，1H)，5.9(s，2H)，5.3(m，1H)，4.1(m，1H)，3.8(m，1H)，3.4(m，2H)，2.8(m，2H)，2.5(m，4H)，2.1(m，4H)，1.7(m，2H)，1.5(m，2H)，1.1(s，6H)

实施例26

2-[(3aR，5S，6aS)-2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺

第一步

2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺盐酸盐

冰浴下，将(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-甲酸叔丁酯4(300mg，0.57mmol)搅拌下溶解于50mL二氯甲烷中，滴加10mL 5M氯化氢的1，4-二氧六环溶液，室温搅拌反应3小时。减压浓缩，得到粗产品2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺盐酸盐26a(620mg，黄色固体)，直接用于下一步。

MS m/z(ESI)：422.2[M+1]

第二步

乙酸2-{(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-基}-2-氧代-乙酯

冰浴下，将2-((3aR，5S，6aS)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基)-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺盐酸盐26a(80mg，0.19mmol)搅拌下溶解于2mL二氯甲烷和2mL甲醇中，依次滴加三乙胺(0.06mL，0.4mmol)和乙酰氧基乙酰氯(0.02mL，0.21mmol)，室温搅拌反应3小时。减压浓缩，加入10mL水，用二氯甲烷(10mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品乙酸2-{(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-基}-2-氧代-乙酯26b(80mg，黄色固体)，直接用于下一步。

MS m/z(ESI)：522.2[M+1]

第三步

将乙酸2-{(3aR，5S，6aS)-5-[2-氨基甲酰基-5-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯基氨基]-六氢-环戊并[c]吡咯-2-基}-2-氧代-乙酯26b(80mg，0.15mmol)搅拌下溶解于1mL二甲亚砜和4mL乙醇中，加入0.3mL 1M氢氧化钠溶液，室温搅拌反应3小时。减压浓缩，加入10mL水，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用HPLC制备色谱法纯化，得到标题产物2-[(3aR，5S，6aS)-2-(2-羟基-乙酰基)-八氢-环戊并[c]吡咯-5-基氨基]-4-(3，6，6-三甲基-4-氧代-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯甲酰胺26(52mg，黄色固体)，产率：70％。

LC-MS m/z(ESI)：478.2[M-1]

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.50(d，1H)，7.75(d，1H)，6.77(s，1H)，6.71(d，1H)，3.99(d，2H)，3.23-3.59(m，7H)，2.94(s，2H)，2.41(s，3H)，2.34(s，2H)，1.88-2.10(m，2H)，1.62-1.80(m，2H)，1.03(s，6H)

实施例27

(2S，3aR，5R，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

第一步

(2S，3aR，5R，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2R，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺16(500mg，1.02mmol)搅拌下溶解于6mL二氯甲烷中，加入N-叔丁氧羰基-甘氨酸(447mg，2.55mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(489mg，2.55mmol)，室温搅拌5分钟，加入4-二甲氨基吡啶(26mg，0.21mmol)，继续搅拌反应24小时。减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到(2S，3aR，5R，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯27a(556mg，白色固体)，产率：84.2％。

MS m/z(ESI)：648.0[M+1]

第二步

冰浴下，将(2S，3aR，5R，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯27a(556g，0.86mmol)搅拌下溶解于5mL二氯甲烷中，加入1.5mL三氟乙酸，室温搅拌反应0.5小时。减压浓缩，所得残留物用80mL乙酸乙酯溶解，加入20mL饱和碳酸钠溶液，静置分液，有机相用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(2S，3aR，5R，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯27(380mg，白色固体)，产率：80.9％。

LC-MS m/z(ESI)：548.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.24(d，J＝6.4Hz，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，1H)，6.80(d，J＝2.0Hz，1H)，6.69(dd，1H)，5.74(brs，2H)，5.33(m，1H)，3.94(m，1H)，3.43(s，2H)，2.90(s，2H)，2.54(s，2H)，2.06(m，3H)，1.81-1.96(m，4H)，1.62-1.70(m，6H)，1.18(s，6H)

实施例28

(2S，3aR，5S，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

第一步

(2S，3aR，5S，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯

将4-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-2-((2S，3aR，5S，6aS)-5-羟基-八氢-并环戊二烯-2-基氨基)-苯甲酰胺23(290mg，0.6mmol)搅拌下溶解于12mL二氯甲烷中，加入N-叔丁氧羰基-甘氨酸(300mg，1.8mmol)，搅拌5分钟，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(400mg，2.1mmol)和4-二甲氨基吡啶(50mg，0.4mmol)，继续搅拌反应2.5小时。减压浓缩，加入30mL水，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗产品(2S，3aR，5S，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯28a(500mg，黄色固体)，直接用于下一步。

第二步

冰浴下，将(2S，3aR，5S，6aS)-叔丁氧羰基氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯28a(500mg，1.7mmol)搅拌下溶解于10mL二氯甲烷中，搅拌10分钟，加入6mL三氟乙酸，室温搅拌反应15分钟。减压浓缩，加入20mL饱和碳酸钾溶液，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到标题产物(2S，3aR，5S，6aS)-氨基-乙酸5-[2-氨基甲酰基-5-(6，6-二甲基-4-氧代-3-三氟甲基-4，5，6，7-四氢-吲唑-1-基)-苯胺基]-八氢-并环戊二烯-2-基酯28(250mg，浅黄色固体)。产率：62.5％。

LC-MS m/z(ESI)：548.3[M+1]

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.2(d，J＝6.0Hz，1H)，7.5(dd，J＝6.0Hz，1H)，6.8(d，J＝1.2Hz，1H)，6.6(dd，J＝1.6Hz，1H)，5.8(s，2H)，5.4(m，1H)，3.8(m，1H)，3.4(s，2H)，2.8(s，2H)，2.7(s，2H)，2.4(m，4H)，2.1-1.9(m，4H)，1.2-1.3(m，4H)，0.9(s，6H)

测试例：

生物学评价

测试例1、抑制细胞增殖测试

下面的体外试验是用来测定本发明化合物对于不同肿瘤细胞中HSP90活性的抑制而引起的增殖抑制活性。

下面所述的体外细胞试验可确定受试化合物对HSP90抑制而引起的人乳腺癌细胞SK-BR-3和MCF-7增殖抑制活性，其活性可用IC₅₀值来表示。此类试验的一般方案如下：首先选择候选人类肿瘤细胞，以适宜细胞浓度下(exp 5000个细胞/mLmedium)接种在96孔培养板上，然后将细胞在二氧化碳恒温箱内进行培养过夜，更换培养基为加有一系列浓度递度(一般7到9个浓度)受试化合物溶液的培养基，将培养板重新放回培养箱，连续培养72个小时。72小时后，可用磺酰罗丹明B(SRB)方法进行测试化合物对于抑制细胞增殖活性。IC₅₀值可通过一系列不同浓度下，受试化合物对于细胞的抑制数值进行计算。

本发明化合物的活性

本发明化合物的生化学活性通过以上的试验进行测定，测得的IC₅₀值见下表。

结论：本发明测试的大部分化合物对于人乳腺癌细胞SK-BR-3和MCF-7增殖抑制的IC₅₀值低于阳性对照SNX-2112，故对人乳腺癌细胞的增值抑制活性高于阳性对照SNX-2112，其中实施例6的细胞抑制活性明显高于SNX-2112。

药代动力学评价

测试例2 本发明化合的药代动力学测试

1、研究目的

以大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了大鼠分别灌胃给予实施例6、16和阳性对照SNX-2112后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明的化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。

2、试验方案

2.1、试验药品

实施例6、实施例16化合物和阳性对照SNX-2112

2.2、试验动物

健康成年SD大鼠12只，雌雄各半，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2003-0002。

2.3、药物配制

称取适量样品加0.5％羧甲基纤维素钠制成5mg/mL混悬液，临用时配制。

2.4、给药

健康成年SD大鼠12只，每组4只，雌雄各半，禁食过夜后分别灌胃给药，给药剂量均为50.0mg/kg，给药体积10mL/kg。

2.5、样品采集

SD大鼠8只，雌雄各半，禁食一夜后灌胃给药，剂量为50.0mg/kg。于给药前及给药后0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，8.0，11.0，14.0，24.0，36.0小时由眼眶采血0.2mL，置于肝素化试管中，3500rpm离心10分钟分离血浆，于-20℃保存给药后2小时进食。

3、分析方法

3.1、仪器设备

API 4000Q-trap线性离子阱质谱仪，美国Applied Biosystems公司；

Agilent 1200高效液相色谱系统，美国Agilent公司。

3.2血浆样品预处理

取给药后各时刻的大鼠血浆50μL，加入内标溶液50μL，甲醇100μL，涡旋混合3分钟，离心10分钟(13500转/分钟)，取上清液10μL进行LC/MS/MS分析。

3.3、标准曲线制备

取大鼠空白血浆50μL，分别加入标准系列溶液，使血药浓度为1.0，5.0，25.0，50.0，100.0，250.0，500.0和1000ng/mL，加入内标溶液50μL，甲醇50μL，按“血浆样品预处理”项下进行操作。以血药浓度为横坐标，样品与内标色谱峰面积比为纵坐标，以加权最小二乘法(w＝1/x²)进行线性回归，获得典型标准曲线方程。

3.4、药代动力学参数计算

对受试化合物的药代动力学行为进行房室模型拟合，并计算主要药代动力学参数，其中C_max、t_max采用实测值。

4、药代动力学参数结果

本发明化合物的药代动力学参数如下：

试验结果表明，大鼠分别灌胃给予上述化合物后，实施例6、16与阳性对照SNX-2112相比，大鼠体内吸收良好，药代动力学性质明显得到改善，是阳性对照的8～13倍。

Claims

1.通式(I)所示的化合物或其药学上可以接受的盐，立体异构体或前药：

其中：

Q选自N或C原子；

R₁选自氢原子、烷基或三氟甲基；

R₂、R₃和R₄各自独立地选自氢原子或烷基；

Z选自N或CR₈，其中R₈选自氢原子或-C(O)OR₆；

n是1或2；

r是1，2，3或4；且

m是0、1或2。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可以接受的盐，立体异构体或前药，其中包括下述通式(IA)表示的化合物或其药学上可接受的盐，立体异构体或前药：

其中：

Q选自N或C原子；

R₁选自氢原子、烷基或三氟甲基；

R₂、R₃或R₄各自独立地选自氢原子或烷基；

Z选自N或CR₈，其中R₈选自氢原子或-C(O)OR₆；

r是1、2、3或4；且

m是0、1或2。

3.根据权利要求1和2所述的化合物或其药学上可以接受的盐，立体异构体或前药，其中所述的化合物包括：

4.通式(IB)所示的化合物，所述化合物为合成如权利要求1所述的通式(I)化合物的中间体：

其中：

Q选自N或C原子；

R₁选自氢原子、烷基或三氟甲基；

R₂、R₃和R₄各自独立地选自氢原子或烷基；

Z选自N或CR₈，其中R₈选自氢原子或-C(O)OR₆；

n是1或2，优选为1；

r是1，2，3或4；且

m是0、1或2。

5.一种制备根据权利要求1所述的通式(I)化合物的方法，该方法包括以下步骤：

碱性条件下，通式(IC)化合物与取代的双环烷胺在钯络合物催化下进行偶联反应得到通式(IB)，然后偶联产物(IB)中的氰基进一步氧化水解成酰胺产物通式(I)化合物，

其中X选自卤素，基团Z，Q，R₁～R₅和n如权利要求1中所定义。

6.根据权利要求5所述的方法，其中n是1。

7.一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的根据权利要求1～3任何一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，及药学上可以接受的载体或赋形剂。

8.根据权利要求1～3任何一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，根据权利要求7所述的药物组合物在制备抗癌、抗炎、抗传染性疾病，抗自身免疫性疾病或抗病毒的药物中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其中所述癌症是乳腺癌。

10.根据权利要求1～3任何一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，根据权利要求7所述的药物组合物在制备HSP90抑制剂中的用途。