CN102007104A

CN102007104A - 4-苯胺喹唑啉衍生物多晶型物及其制法和应用

Info

Publication number: CN102007104A
Application number: CN2009801104043A
Authority: CN
Inventors: 郭建辉; 姜勇
Original assignee: Shanghai Allist Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Shanghai Allist Medicine Polytron Technologies Inc
Priority date: 2008-03-25
Filing date: 2009-03-25
Publication date: 2011-04-06
Anticipated expiration: 2029-03-25
Also published as: CN103382183B; CN103382183A; US8338438B2; CN103420925A; US9102629B2; EP2269994A1; CA2719523A1; US8937079B2; KR20110040746A; US20120004249A1; EP2269994A4; AU2009229433B2; EP2269994B1; AU2009229433A1; KR101579148B1; CN101544609A; JP2011515421A; US20150133476A1; WO2009117899A1; US20130137711A1

Abstract

本发明提供M-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基)-丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的多晶型物，其具有如说明书所述的X-射线粉末衍射数据特征。本发明还提供了该多晶型物的制备方法、包含该多晶型物的药物组合物及其应用。

Description

4-苯胺喹唑啉衍生物多晶型物及其制法和应用技术领域

本发明涉及 4-苯胺喹唑啉衍生物的多晶型物。具体地说，本发明涉及式（I )化合物（化学名为 V-{4-[3-氯- 4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺）的对曱苯磺酸盐的多晶型物、其制备方法、包含该多晶型物的药物组合物及其应用。背景技术

蛋白酪氨酸激酶 (PTK)是一类在正常细胞生长中起重要作用的酶，它能够催化磷酸基团从 ATP转移到蛋白底物的残基上。许多表皮生长因子受体 (EGFR)蛋白都具有蛋白酪氨酸激酶的作用，而且这些受体和生长因子的相互作用也是正常调节细胞生长所必需的。然而 EGFR的过度表达，通过其自身酪氨酸激酶的作用，会引起细胞的过度增殖，最终导致肿瘤的生成。

表皮生长因子受体家族按其结构不同可以分为 EGFR(Erb-B l)、 Erb-B2 (HER-2/neu), Erb-B3和 Erb-B4。这些表皮生长因子受体目前均已经被证实与大部分的癌症疾病相关。

基于失调的受体激酶在癌症病理中所起的重要作用，特异性的

PTK抑制剂作为潜在的抗癌治疗剂的开发是目前抗癌剂的研究热点，其中喹唑啉衍生物作为 PTK抑制剂进而用于癌症治疗的研究引起了人们的广泛关注。

WO 96/30347 (中国专利申请 CN 96102992 ) 、 WO 96/33980涉及一些 4- (取代苯胺基) -喹唑啉衍生物、其前药和其药学上可接受的盐，以及它们在治疗细胞过度增生导致的疾病中的应用。

WO 99/06378、 WO 2000/31048和 WO 2000/06555(中国专利申请 CN 99808949)也涉及某些取代的喹唑啉的衍生物具有不可逆的 PTK抑制剂活性。

WO2006/071017提及了某些能抑制癌细胞生长的喹唑啉衍生物。 WO2007/082434描述了一类新型的 4-苯胺喹唑啉衍生物，以及其作为 PTK抑制剂的应用。其中，实施例 8 制备的化合物为 N- {4-[3- 氯—4_(3_氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 _6-基} -丙烯酰胺，实验证明其对人表皮样鳞癌细胞 A431、人乳腺癌细胞 BT- 474有较好的抑制生长的作用，对移植于裸鼠的人表皮样鳞癌 A431的抑瘤作用明显。体外实验证明该化合物对 Erb-B2激酶有优越的抑制活性。

晶型对化合物的物理性质有一定影响。对于具有多种晶型的药用化合物，因其晶格结构不同，除可能具有不同的外观（颜色、形状如针晶、片晶、块晶等）外，也会引起某些物理性质（如熔点、溶解性、密度、稳定性和吸湿性）不同，进而导致其在体内呈现出不同的溶出和吸收行为，这可能在一定程度上会影响药用化合物的临床疗效和安全性。

特定的晶型可产生与无定形物质或者另一种晶型不同的热力学行为。在实验室中用诸如熔点仪、热重分析 (TGA)或者差示扫描量热 (DSC) 技术测量热性质可将某特定晶型与无定形或者另一晶型区别开来。而且特定的晶型可产生特定的光谱性盾，如粉末 X衍射图谱数据和红外光谱数据均可用于表征特定的晶型。

上述文献通过引用以全文并入本文。发明内容

本发明提供新颖的 N- {4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺（如下式结构 I )的对甲苯磺酸盐的多晶型物、其制备方法，包含该多晶型物的药物组合物及其在制备用于治疗和 /或预防肿瘤的药物中的用途，以及治疗和 /或预防哺乳动物肿瘤的方法。概括而言，本发明提供以下技术方案：

1. 结晶的式 (I)所示化合物 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] - 喹唑啉 -6-基 } -丙烯酰胺的对曱苯磺酸盐：

2. N-{4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐 A型结晶，即晶型 A, 其特征在于粉末 X衍射图在衍射角 2Θ(⁰)值为 5.92±0.10、 8.64±0.10、 11.86±0.10、 16.58±0.10、 16.94 ±0.10、 17.86 ±0.10、 19.12 ±0.10、 19.66 ±0.10、 20.12 ±0.10、 23.42 ±0.10、 24.14±0.10、 24.80±0.10、 26.76 ± 0.10处具有峰。

3. 如技术方案 2所述的晶型 Α, 其特征在于所述的晶型 Α提供的粉末 X-衍射图还包含衍射角 2Θ(⁰)值为 9·80±0.10、 13,28±0.10、 14.78 ±0.10、 17.36±0.10、 18.62±0.10、 21.62 + 0.10 22,12±0.10、 22.38 ±0.10、 23.14 ±0.10、 25.20 ±0.10、 27.24 ±0.10、 28.34 ±0.10、 28.78 ±0.10、 33.12±0.10、 41.70±0.10的峰。

4. 如技术方案 2或 3所述的晶型 Α, 其特征在于所述的晶型 Α具有基本如图 1所示的粉末 X-衍射图。

5. 如技术方案 4所述的晶型 A, 其特征在于所述的晶型 A还具有基本如图 5所示的红外图谱。

6. 制备技术方案 2-5任一项所述的晶型 A的方法，包括步驟： a): 将下式 (I)所示的化合物：

溶于有机溶剂中形成溶液，

b) : 搅拌下滴加对曱苯磺酸在该有机溶剂中形成的溶液，并控制式 (I)所示的化合物和对甲苯磺酸的摩尔比为 1:1 ~ 6, 优选 1:3~6；及 c) : 析出晶体，过滤、水洗得到目标晶体。

7. 如技术方案 6所述的方法，其特征在于所述有机溶剂选自四氢呋喃、曱醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、乙腈、 DMSO、 DMF 和丙二醇，以及它们的混合物，优选四氢呋喃、甲醇、乙醇、四氢呋喃 /甲醇的混合溶剂和四氢呋喃 /乙醇的混合溶剂。

8. 如技术方案 7所述的方法，其中所述有机溶剂为四氢呋喃 /甲醇的混合溶剂，其中四氢呋喃和曱醇的体积比为 1:1~3, 优选 1:2~3。 9. 如技术方案 6-8之任一项所述的方法，其特征在于，步骤 a) 中式 (I)化合物溶液的浓度为 3 ~ 8g/100mL, 优选 4 - 6g/100mL。

10. 如技术方案 6- 9之任一项所述的方法，其特征在于，步骤 b) 中对曱苯石黄酸溶液的浓度为 10~30g/100mL, 优选 15 ~ 25g/100mL。

11. N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉- 6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐 B型结晶，即晶型 B , 其特征在于粉末 X衍射图在衍射角 2 Θ (。)值为 4.72 ±0.10、 17.04 ±0.10、 19.32 ±0.10、 24.12 ±0.10处具有峰。

12. 如技术方案 11所述的晶型 B, 其特征在于粉末 X-衍射图还包含射角 2Θ(⁰)值为 7.92±0.10、 9.54±0.10、 11·90±0.10、 12,94±0.10、

14.34 ±0.10、 15.32 ±0.10、 17.88 ±0,10、 20.00 ±0.10、 21.80 ±0.10、 22.42 ±0.10、 25.08 ±0.10、 25.80 ±0,10、 27.28 ±0.10、 28.00 ±0.10、 28.44 ±0.10的峰。

13. 如技术方案 11或 12所述的晶型 Β, 其特征在于所述的晶型 Β 具有基本如图 2所示的粉末 X-衍射图谱。

14，如权利要求 13所述的晶型 Β, 其特征在于所述的晶型 Β还具有基本如图 6所示的红外图谱。

15. 制备权利要求 11-14任一项所述晶型 Β的方法，包括步骤： a) : 加热下将技术方案 2-5任一项所述的 N-{4- [3-氯- 4-(3-氟 -苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基}-丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A溶于质子溶剂和非质子溶剂的混合溶剂中形成溶液；

b) : 在 40~80°C下保温 1~2小时；及

c) : 冷却、析出晶体，静置、过滤、水洗得到目标晶体。

16，如技术方案 15的方法，其中质子溶剂是水或水与醇的混合物。 17. 如技术方案 15或 16的方法，其中非质子溶剂选自四氢呋喃、乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙腈和 DMF, 以及它们的混合物。

18. 如技术方案 15- 17之任一项的方法，其中步骤 a)中 N- {4-[3- 氯- 4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲笨磺酸盐晶型 A溶液的浓度为 2~ lOg/lOOmL, 优选 4 ~ 8g/100mL。

19. 如技术方案 15-18之任一项所述的方法，其特征在于所述质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为 1:2~4, 优选 1:3 ~ 4。 20. N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐 c型结晶，即晶型 C, 其特征在于粉末 X衍射图在衍射角 2Θ (0)值为 3.40 ±0.10、 6·82±0·10、 7·58±0.10、 11.30±0.10、 14.84 ±0,10、 15.24 ±0.10、 17.28 ±0.10、 17.86 ±0.10、 18.34 ±0.10、 20.32 ±0,10、 22.96 ±0.10、 23.50 ±0.10、 24.12 ±0.10、 24.62 ±0.10、 25.86 ±0.10处有峰。

21. 如技术方案 20所述的晶型 C, 其特征在于粉末 X-衍射图还包含衍射角 2 Θ (0)值为 9.04土 0.10、 10.26土 0.10、22.44士 0.10、25.06土 0.10、 26.98 ±0.10、 28.62 ±0.10、 29.98 ± 0.10的峰。

22. 如技术方案 20或 21所述的晶型 C, 其特征在于所述的晶型 C 具有基本如图 3所示的粉末 X-衍射图谱。

23. 如技术方案 22所述的晶型 C, 其特征在于所述的晶型 C还具有基本如图 7所示的红外图谱。

24. 制备技术方案 20-23任一项所述的晶型 C的方法，包括步骤： a): 将技术方案 2-5任一项所述的 N-{4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基}-丙烯酰胺对曱苯磺酸盐晶型 A溶于质子溶剂和非质子溶剂的混合溶剂中；

b) :搅拌下滴加对曱苯磺酸在该质子溶剂和非质子溶剂的混合溶剂中形成的溶液，并控制所述晶型 A和对曱苯磺酸的摩尔比为 1:1~6, 优选 1:3 ~ 6；及

c) : 析出晶体，静置、过滤、水洗得到目标晶体。

25. 如技术方案 24的方法，其中质子溶剂是水或水与醇的混合物。

26. 如技术方案 24或 25的方法，其中非质子溶剂选自四氢呋喃、乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙腈和 DMF, 以及它们的混合物。

27. 如技术方案 24- 26之任一项的方法，其中步骤 _a)中 N-{4-[3- 氯 _4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A溶液的浓度为 3 ~ 7g/100mL, 优选 4 ~ 6g/100mL。

28. 如技术方案 24- 27之任一项的方法，其中步骤 b)中对甲苯礒酸溶液的浓度为 10~30g/100mL, 优选 15 ~ 25g/100mL。

29. 如技术方案 24-28之任一项所述的方法，其特征在于所述质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为 1:1 ~ 5, 优选 1:3 ~ 4。 30. 包含技术方案 1-5、 11-14和 20-23任一项所述的结晶和药学上可接受的载体的药物组合物。

31. 如技术方案 30所述的药物组合物，其还包含一种或多种的其他用于治疗和 /或预防肿瘤的药物。

32. 技术方案 1-5、 11-14和 20-23任一项所述的结晶在制备用于治疗和 /或预防肿瘤的药物中的用途。

33. 治疗和 /或预防哺乳动物肿瘤的方法，包括给予需要的哺乳动物治疗 /或预防有效量的技术方案 1-5、 11-14和 20-23任一项所述的结曰

曰 EJ

34. 如技术方案 32所述的用途或技术方案 33所述的方法，其中所述肿瘤选自乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌和表皮样鳞癌。具体而言，本发明的第一方面，提供了式 (I)所示化合物的对甲苯磺酸盐的结晶，还提供了式 (I)所示化合物的对甲苯磺酸盐的三种多晶型物，分别命名为晶型 A, 晶型 B和晶型 C。

首先，本发明提供一种具有包含衍射角 2Θ(⁰)值为 5.92 ±0.10、 8.64 ±0.10、 11.86 + 0.10, 16.58 ±0.10、 16,94±0.10、 17.86±0.10、 19.12 ±0.10、 19.66 ±0.10、 20.12 ±0.10、 23.42 ±0.10、 24.14 ±0.10、 24.80 ±0.10、 26.76 ±0.10的高强度峰的粉末 X-衍射图的结晶，在本申请中定义为晶型 Α。

除上述特征的高强度衍射峰外，该晶型 Α的粉末 X-衍射图还包含衍射角 2Θ(⁰)值为 9.80 ±0.10、 13.28 ±0.10、 14.78 ±0.10、 17.36 ±0.10、 18.62±0.10、 21.62±0.10、 22.12±0.10、 22,38 ±0.10、 23.14±0.10、 25.20 ±0.10、 27.24 ±0.10、 28.34 ±0.10、 28.78 ±0.10、 33.12 ±0.10、 41.70 ±0.10的中强度峰。

该晶型 Α的粉末 X-衍射图基本如图 1所示，各峰相对强度如下表所示：

2Θ(°) Ι/Ιο 2Θ(°) I/Io 2Θ(°) I/Io 2Θ(°) I/Io

5.92 vs 8.64 vs 9.80 m 10.24 w

11.86 s 13.28 m 14.78 m 15.36 w

16.58 vs 16.94 s 17.36 m 17.86 s 18.62 m 19.12 s 19.66 s 20.12 vs

21.62 m 22.12 m 22.38 m 23.14 m

23.42 s 24.14 s 24.80 s 25.20 m

25.90 w 26.76 s 27.24 m 28.34 m

28.78 m 30.14 w 32.06 w 33.12 m

34.94 w 37.58 w 38.94 w 41.70 m

42.74 w 44.22 w

该晶型 A还具有基本如图 5所示的红外图谱。

该晶型 A为黄绿色结晶性粉末，熔点为 245°C。此外，本发明提供另一种具有包含衍射角 2 θ(⁰)值为 4.72 ±0.10、 17.04±0.10、 19.32±0.10、 24.12 ± 0.10的高强度峰的粉末 X-衍射图的结晶，在本申请中定义为晶型 Β。

除上述特征的高强度衍射峰外，该晶型 Β的粉末 X-衍射图还包含射角 2 θ(⁰)值为 7.92 ±0.10、 9.54±0.10、 11.90±0.10、 12.94±0.10、 14.34 ±0,10、 15.32 ±0.10、 17.88 ±0,10、 20.00 ±0.10、 21.80 ±0.10、 22.42 ±0.10、 25.08 ±0.10、 25.80 ±0.10、 27.28 ±0.10、 28.00 ±0.10、 28.44 ±0.10的中强度峰。

该晶型 Β的粉末 X-衍射图基本如图 2所示，各峰相对强度如下表所示：

该晶型 B还具有基本如图 6所示的红外图谱。

该晶型 B为浅黄色结晶性粉末，熔点为 235.4°C。再则，本发明还提供又一种具有包含衍射角 2Θ(⁰)值为 3.40 ±0.10、 6.82±0.10、 7.58±0.10、 11,30±0.10、 14.84±0.10、 15.24±0.10、 17.28 ±0.10、 17.86±0.10、 18.34±0.10、 20.32±0.10、 22.96 ±0.10、 23.50 ±0.10、 24,12 ±0.10、 24,62 ±0.10、 25,86 ± 0.10的高强度峰的粉末 X- 衍射图的结晶，在本申请中定义为晶型 C。

除上述特征的高强度衍射峰外，该晶型 C的粉末 X-衍射图还包含 ^"射角 2 Θ (0)值为 9.04 ±0.10、 10.26 ±0.10、 22.44 ±0.10、 25.06 ±0.10、 26.98 ±0.10、 28.62 ±0.10、 29.98 ± 0.10的中强度峰。

该晶型 C的粉末 X-衍射图基本如图 3所示，各峰相对强度如下表所示：

该晶型 C还具有基本如图 7所示的红外图谱。

该晶型 C为黄色结晶性粉末，熔点为 244C。在本发明中，上述三种结晶的粉末 X衍射图是通过本领域的已知方法，使用 RIGAKUD/MNX2550VB/PCX射线衍射仪获得。

在粉末 X-衍射图中，各峰通过 Bragg公式计算来识别，各峰的位置由衍射角 2 Θ (° 角定。峰的强度的划分仅仅反映了各位置上峰的近似大小，在本发明中，各晶型均以其峰高最高的衍射峰作为基峰，定义以其相对强度为 100%, 作为 Io (如晶型 A以附图 1中 2Θ (^G)值为 5.92 的峰为基峰，晶型 B以附图 2中 2Θ(°)值为 4.72的峰为基峰，晶型 C 以附图 3中 2Θ(⁰)值为 25.86的峰为基峰），其他各峰以其峰高与基峰峰高的比值作为其相对强度 I/I_Q; 各峰相对强度的划分定义如下表所相对强度 I/I_Q ( % ) 定义

50 ~ 100 Vs (很强）

20 - 50 S (强）

5 ~ 20 M (中等）

1 ~ 5 W (弱）上述三种结晶的红外图谱是通过本领域的已知方法，使用岛津

FTIR - 8400S 红外分光光度计，以 KBr压片方式获得；上述结晶的熔点是通过本领域已知的方法，使用 WRS-2A/2微机熔点仪获得。

由于仪器的误差或者操作者的区别，本领域的技术人员能理解以上用于表征晶体的物理性质的参数可能有微小的差别，所以上述的参数仅用于辅助表征本发明提供的多晶型物，而不能视为对本发明提供的多晶型物的限制。本发明的第二方面，提供制备本发明所述的三种多晶型物的方法。首先，本发明提供制备晶型 A的方法，包括步骤：

a): 将式 (I)所示的化合物

(!)

溶于有机溶剂中形成溶液，

b) : 搅拌下滴加对曱苯磺酸在所述有机溶剂中形成的溶液，并控制式 (I)所示的化合物和对曱苯磺酸的摩尔比为 1 : 1 ~ 6，优选 1 :3 ~ 6；及 c) : 析出晶体，过滤、水洗得到目标晶体， N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉 -6-基丙烯酰胺）的对甲苯磺酸盐晶型 A。

其中所述的有机溶剂选自四氢呋喃、曱醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、乙腈、 DMSO、 DMF和丙二醇，以及它们的混合物，优选四氢呋喃、甲醇、乙醇、四氢呋喃 /曱醇的混合溶剂和四氢呋喃 /乙醇的混合溶剂，特别是四氢呋喃 /甲醇的混合溶剂。混合溶剂中四氢呋喃和曱醇的体积比对结晶有一定的影响，优选的体积比为 1:1 ~ 3, 特别是 1:2~3。

上述步驟 a)中，式 (I)化合物溶液的浓度为 3~8g/100mL, 优选 4 ~ 6g/100mL。

上述步骤 b)中，对甲苯磺酸溶液的浓度为 10~30g/100mL, 优选 15~25g/100mL。

通常，上述制备过程可以在冷却、常温或者加热条件下进行，值得注意的是反应温度的选择对不同的结晶的形成有一定影响，这也是在本领域技术人员知识范畴内的。本发明的结晶温度为 -10°C〜所用溶剂的沸点，优选 0~40°C。此外，本发明提供制备晶型 B的方法，包括步骤：

a) : 加热下将上述的 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺）的对甲苯磺酸盐晶型 A溶于质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中形成溶液；

b) : 在 40~80°C下保温 1~2小时；及

c) : 冷却、析出晶体，静置、过滤、水洗得到目标晶体， N-{4-[3- 氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基 } -丙烯酰胺）的对曱苯磺酸盐晶型 B。

其中所述的质子溶剂是水或水与醇例如甲醇、乙醇等的混合物。特别优选水。所述非质子溶剂选自四氢呋喃、乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙腈和 DMF, 以及它们的混合物，优选四氢呋喃。

其中所述的质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为 1:2~4, 优选 1:3 ~4。

上述步骤 a)中，晶型 A 溶液的浓度为 2〜： l0g/100mL, 优选 4〜8g/100mL。

通常，上述冷却应冷至室温以下，上述静置时间应以晶型 B完全析出为佳，本领域技术人员通过多次实验就能容易的确定较佳的静置时间。再则，本发明提供制备晶型 c的方法，包括步驟： a) : 将上述的 V- {4-[3 -氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺）的对曱苯磺酸盐晶型 A溶于质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中形成溶液；

b) : 搅拌下滴加对甲苯磺酸在该质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中形成的溶液，并控制晶型 A和对甲苯磺酸的摩尔比为 1 : 1 ~ 6, 优选

1 :3 ~ 6；及

c) : 析出晶体，静置、过滤、水洗得到目标晶体。

其中所述的质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为 1 : 1 - 5 , 优选为 1 :3 ~ 4。

上述步骤 a)中，晶型 A 溶液的浓度为 3~7g/100mL , 优选 4〜6g/100mL。

上述步骤 b)中，对甲苯横酸溶液的浓度为 10 ~ 30g/100mL, 优选

15 ~ 25g/100mL。

在本发明中，术语质子溶剂指诸如水、醇类例如甲醇、乙醇等一类具有羟基（即- OH )的溶剂，优选水或水与醇例如曱醇、乙醇等形成的混合物，特别优选水。非质子溶剂指诸如四氢呋喃、乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙腈、 DMF或它们的混合物之类的无羟基的有机溶剂，优选四氢呋喃。本发明的第三方面，提供药物組合物，它含有本发明所述的结晶 / 多晶型物和药学上可接受的载体。此外，本发明还提供治疗和 /或预防哺乳动物肿瘤的方法，包括给予需要的哺乳动物治疗 /或预防有效量的按照本发明的结晶 /多晶型物。

所述的药物組合物可给药于哺乳动物（如人），可以口服、直肠、肠胃外 (静脉内、肉内或皮下）、局部等方式给药。使用药物组合物时，将含有治疗或预防有效量的本发明所述的结晶 /多晶型物的药物组合物施用于需要治疗或预防的哺乳动物 (如人)。术语 "治疗或预防有效量" 指的是足以在哺乳动物（如人）体内引起兽医或临床医师所探求的生物或医学反应的活性化合物的量。普通的医师、兽医和临床医师可容易地确定治疗或预防指定疾病所需的本发明所述的结晶 /多晶型物的有效量。一般，为每天 0.01 ~ 20mg/kg患者体重，优选每天 0.1 ~ 10mg/kg 患者体重。更具体而言，对于 60kg体重的人，日给药剂量通常为 1 ~ lOOOmg, 优选 20 ~ 500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径，患者的年龄、性别、体重和健康状况，以及被治疗的特定状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。在本文中使用的术语 "哺乳动物" 包括但不限于猫、狗、兔、山羊、绵羊、大鼠、小鼠和人等，特别优选人。

本发明提供的药物组合物还可以包含一种或者多种其他的用于治疗和 /或预防肿瘤的药物，所述其他的用于治疗和 /或预防肿瘤的药物选自作用于 DNA化学结构的药物如顺铂，影响核酸合成的药物如甲氨蝶呤 (MTX)、 5-氟尿嘧啶 (5- FU)等，影响核酸转录的药物如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、光辉霉素等，作用于微管蛋白合成的药物如紫杉醇、长春瑞滨等，芳香化酶抑制剂'如氨鲁米特、兰特隆、来曲唑、瑞宁德等，细胞信号通路抑制剂如伊马替尼（ Imatinib ) 、吉非替尼 ( Gefitinib ) 、埃罗替尼（ Erlotinib ) 等。

所述的本发明结晶 /多晶型物和药物组合物均可以配制为用于口服给药的固体剂型，包括胶嚢剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂和糖丸等。在这些固体剂型中，本发明提供的结晶 /多晶型物可以与至少一种常规惰性赋形剂（或载体)混合，所述惰性赋形剂（或载体）包括但不限于：（a) 填料或增溶剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；（b) 粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；（c) 保湿剂，例如，甘油；（d) 崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、聚乙烯基聚吡咯烷酮和碳酸钠；（e)緩溶剂，例如石蜡；（f) 吸收加速剂，例如，季胺化合物；（g) 润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；（h) 吸附剂，例如，高岭土；和 (i) 润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸鎂、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶嚢剂、片剂和丸剂剂型中也可包含緩冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶嚢剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并一部分中释放。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶嚢形式。

所述的本发明结晶 /多晶型物和药物组合物也可以配制为用于口服给药的液体剂型，包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂等。除了本发明提供的结晶形式作为活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、 1,3 -丁二醇、二甲基甲酰胺或者植物油，特別是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油，或这些物质的混合物等。除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

当所述的药物組合物以悬浮液存在时，除了本发明提供的结晶 /多晶型物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

所述的本发明结晶 /多晶型物和药物组合物还可以配制为用于肠胃外注射的剂型，包括生理上可接受的无菌含水或非水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂可用于制备所述无菌含水或非水溶液、分散液、悬浮液或乳液。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

所述的本发明结晶 /多晶型物和药物组合物可以配制为用于局部给药的剂型，包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。本发明提供的结晶 /多晶型物可在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、緩冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

另一方面，本发明提供的结晶 /多晶型物可用于制备由蛋白酪氨酸激酶介导的疾病的治疗和 /或预防药物，所述的疾病包括肿瘤，特别是恶性肿瘤，例如乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、表皮样鳞癌等。

本发明所述的结晶 /多晶型物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的治疗剂联合给药，特别是与其他抗肿瘤药物组合。所述治疗剂包括但不限于：作用于 DNA化学结构的药物如顺铂，影响核酸合成的药物如甲氨蝶呤 (MTX)、 5-氟尿嘧啶 (5- FU)等，影响核酸转录的药物如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、光辉霉素等，作用于微管蛋白合成的药物如紫杉醇、长春瑞滨等，芳香化酶抑制剂如氨鲁米特、兰特隆、来曲唑、瑞宁德等，细胞信号通路抑制剂如伊马替尼（Imatinib ) 、吉非替尼（Gefitinib ) 、埃罗替尼（Erlotinib ) 等。待组合的各成分可同时或顺序地给予，以单一制剂形式或以不同制剂的形式给予。所述组合不仅包括本发明提供的结晶 /多晶型物和一种其它活性剂的组合，而且包括本发明的结晶 /多晶型物和两种或更多种其它活性剂的组合。

本发明多晶型物的主要优点包括：

(a) 本发明提供的 N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉 -6- 基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐多晶型物不易吸潮，具有较好的热稳定性、光稳、定性；

(b) 所迷本发明提供的多晶型物经实验证明在动物体内具有优异的生物利用度；

(C) 所述本发明提供的多晶型物经实验证明具有优异的抗肿瘤活性；

(d) 所述本发明提供的多晶型物经实验证明在动物体内毒性低、给药安全性高。

从上述制备多晶型物的方法的描述中可以得知，本发明利用式 I 化合物的对甲苯磺酸盐在不同溶剂中溶解性的差异来获取式 I化合物的对甲苯磺酸盐的各个多晶型物，达到纯化式 I化合物的对甲苯磺酸盐的目的。该純化方法操作简便、易行、适合规模工业化生产。附图说明

附图 1是 ΛΜ4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 Α的粉末 X衍射图；

附图 2是 N- {4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉 -6-基 } -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 B的粉末 X衍射图；

附图 3是 {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 C的粉末 X衍射图；

附图 4是 N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基 } -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型八、晶型 B、晶型 C的粉末 X衍射图的叠加图，其中晶型 A的衍射峰以粗实线表示，晶型 B的衍射峰以细实线表示，晶型 C的衍射峰以虛线表示；

附图 5是 iV-{4-[3-氯- 4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A的红外光谱；

附图 6是 V- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙埽酰胺对曱苯磺酸盐晶型 B的红外光语；

附图 7是 N- {4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 C的红外光谱；

下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于举例说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件，或按照制造厂商所领域技术人员根已知文献方 ^得的 ^于^涉的、缩写， THF 指四氢呋喃， DMSO指二甲亚砜， DMF指二曱基曱酰胺， PVPP指聚乙烯基聚吡咯烷酮， PVP指聚乙烯基吡咯烷酮， ig指灌胃， iv指静脉注射。除非另有说明，否则份数和百分比为重量份数和重量百分比。具体实施方式

实施例 1： N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉 -6-基丙烯酰胺的制备

步骤 A: 4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -6-硝基喹唑啉的制备将 4-氯 -6-硝基 -喹唑啉 1.20g ( 5.7mmol ，其制备参照 WO2007/082434 )和 4-(3-氟苄氧基) -3-氯苯胺 1.37g ( 5.6mmol, 其制备参照 WO2007/082434 ) 溶于 80mL异丙醇中，回流反应 3h, 当体系中析出大量黄色固体，过滤，滤饼用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤至 pH=8。真空干燥，得到黄色固体 1.62g ( 3.75mmol )。经鉴别该化合物为 4-[3- 氯 _4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -6-硝基喹唑啉，收率 61 %。

¹H-NMR(400MHz, CDC1₃): δ 11.30(1H, br), 9·54-9.48(1Η, m), 8.45-8.41(1Η, m), 8.31-8.25(1Η, m), 7.98-7.89(1Η, m), 7.50-7.47(1Η, m), 7.35-7.26 (1Η, m)， 7.05-6.96(lH₃ m), 6.90-6.80(2H₅ m), 7.74-7.60(2H_; m)， 4.84(2H, s)。步骤 B: 4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -6-胺基喹唑啉的制备在一个装有回流冷凝装置的烧瓶中加入按照步骤 A的方法制备的 4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -6-硝基喹唑啉 1.60g ( 3.77mmol ) , 还原铁粉 1.05g ( 18.85mmol, 5eq ) , 冰醋酸 2mL, 曱醇 40mL, 85 °C 油浴下回流反应 2,5h后，过滤除去铁粉，滤液用乙酸乙酯稀释，碳酸氢钠溶液洗涤，水洗，有机相干燥、浓缩，得到黄色固体 900mg ( 2.28mmol )。经鉴别该化合物为 4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -6- 胺基喹唑啉，收率 61 %。

¹H-NMR(400MHz, DMSO): δ 9.32(1H, s), 8.31(1H, s)， 8.04(1H, d， J=2.64Hz), 7.73(1H, dd, J=2.64Hz, 8,80Hz), 7.54-7.43(2H₅ m), 7.36-7.28(3H, m), 7.26-7.14(3H, m)， 5.57(2H, br), 5.27(2H, s)。步骤 C: N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺的制备

在冰浴下冷却下加按照步骤' B的方法制备的 4-[3-氯 -4-(3-氟 -苄氧基)苯基胺基] -6-胺基喹唑啉 1.2g( 3.04mmol )，三乙胺 0.6mL( 4.58mmol, 1.5eq ) , 丙烯酰氯 0.28mL ( 3.33mmol， l.leq ) , THF 40mL, 逐渐升至室温反应， 3h后，停止反应，过滤，滤饼水洗至中性，干燥，得到黄色固体 l .Og ( 2.23mmol ) 。经鉴别该化合物为 N- {4-[3-氯 -4-(3-氟- 苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺，收率 67%。 MS: 449。 mp: 222-225。C。

¹H-NMR(400MHz, CDCl₃+DMSO): δ 8.75(1H, s), 8.60-8.52(2H, m): 7.81(1H, d, J=2.44Hz), 7.69(2H, s)， 7.54(1H, dd, J=2.56Hz, 8.92Hz), 7.30-7.22(2H₅ m), 7.18-7.08(2H₅ m), 6.96-6.86(2H, m)， 6.37(2H, d， J=5.86Hz), 5.67(1H, t， J=5.86Hz), 5.06(2H, s)。实施例 2 制备 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对曱苯磺酸盐结晶

将按照实施例 1 所述的方法制备的 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙浠酰胺 3g ( 6.68mmol ) 溶于 30mL四氢呋喃 / 甲醇的混合溶剂 ( THF/CH₃OH=2/l ) 中，向体系中緩慢滴加对曱苯磺酸（leq， 1.27g)的四氢呋喃 /甲醇的混合溶液（ THF/CH₃OH=l/l ) 24mL, 滴加完毕后，体系緩慢析出大量黄色固体，过滤，用水洗涤固体。真空干燥得黄色结晶性粉末 2.6g ( 4.19mmol )，收率 63 °/。，纯度 92.5 %。实施例 3: 制备 N- {4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 A

将按照实施例 1 所述的方法制备的 N-{4-[3-氯- 4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺 3g ( 6.68mmol ) 溶于 50mL四氢呋喃 / 甲醇的混合溶剂（ THF/CH₃OH=l/l ) 中，向体系中緩慢滴加对曱苯磺酸 ( 6eq, 7.62g )的四氢呋喃 /甲醇混合溶液 ( THF/CH₃OH=l/l ) 38mL，在滴加过程中，体系緩慢析出大量黄绿色固体，过滤，滤饼水洗。真空干燥得黄绿色结晶性粉末 2.93g, 收率 70 %。所得结晶的粉末 X衍射图如附图 1所示，红外图谱如附图 5所示，熔点为 245°C。在本申请中定义该晶型为晶型 A。实施例 4: 制备 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 A

将按照实施例 1 所述的方法制备的 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺 3g ( 6.68mmol ) 溶于 60mL四氢呋喃 / 曱醇的混合溶剂（ THF/CH₃OH=l/3 ) 中，向体系中緩慢滴加对甲苯磺酸（ 6eq, 7.62g ) 的四氢呋喃 /甲醇混合溶液（ THF/CH₃OH=l/l ) 38mL, 在滴加过程中，体系緩慢析出大量黄绿色固体，过滤，滤饼水洗。真空干燥得黄绿色结晶性粉末 2,52g，收率 61 %。所得结晶的粉末 X衍射图如附图 1所示，红外图谱如附图 5所示，熔点为 245 °C。在本申请中定义该晶型为晶型 A。实施例 5: 制备 N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 B

将按照实施例 3或 4所述的方法制备的 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基) 苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 A 3g ( 4.84mmol )加至 70mL四氢呋喃 /水的混合溶剂（ THF/H₂0=4/1 ) 中，緩慢升温至 65 °C , 继续保温 20min后緩慢冷却至室温，然后在 2°C下静置 16h。过滤、滤饼水洗。真空干燥得浅黄色结晶性粉末 1.68g, 收率 56 %。所得结晶的粉末 X衍射图如附图 2所示，红外图谱如附图 6 所示，熔点为 235.4°C。在本申请中定义该晶型为晶型 B。实施例 6: 制备 N- {4-[3-氯- 4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯横酸盐的晶型 B

将按照实施例 3或 4所述的方法制备的 N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基）苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 A 3g ( 4.84mmol )加至 70mL四氢呋喃 /水的混合溶剂（ THF/H₂0=2/1 ) 中，緩慢升温至 65 °C , 继续保温 20min后緩慢冷却至室温，然后在 2 °C下静置 16h。过滤、滤饼水洗。真空干燥得浅黄色结晶性粉末 2.30g，收率 76 %。所得结晶的粉末 X衍射图如附图 2所示，红外图谱如附图 6 所示，熔点为 235.4°C。在本申请中定义该晶型为晶型 B。实施例 7: 制备 N-{4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 C

将按照实施例 3或 4所述的方法制备的 N- {4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基) 苯基胺基 ]-喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 A 3g ( 4.84mmol )加至 60mL四氢呋喃 /水的混合溶剂 ( THF/H₂0=3/1 ) 中，向体系中緩慢滴加对甲苯磺酸（6eq, 7.62g ) 的四氢呋喃 /甲醇混合溶液（THF/CH₃OH 2/l ) 38mL, 在滴加过程中，体系緩慢析出大量黄色固体，过滤，滤饼水洗。真空干燥得黄色结晶性粉末 2.85g, 收率 95

%。所得结晶的粉末 X衍射图如附图 3所示，红外图谱如附图 7所示，熔点为 244°C。在本申请中定义该晶型为晶型 C。 ' 实施例 8: 制备 N- {4-[3-氯- 4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的晶型 C

将按照实施例 3或 4所述的方法制备的 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基) 苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对曱苯磺酸盐的晶型 A 3g ( 4.84mmol )加至 60mL四氢呋喃 /水的混合溶剂 ( THF/H₂0=4/1 ) 中，向体系中緩慢滴加对甲苯磺酸（6eq， 7.62g ) 的四氢呋喃 /曱醇混合溶液（THF/CH₃OH=2/l ) 38mL, 在滴加过程中，体系緩慢析出大量黄色固体，过滤，滤饼水洗。真空干燥得黄色结晶性粉末 1.95g, 收率 65 %。所得结晶的粉末 X衍射图如附图 3所示，红外图谱如附图 7所示，熔点为 244°C。在本申请中定义该晶型为晶型 C。实施例 9 热稳定性实验

取少量晶型 A, 置于 60°C高温环境下保存一个月，并于第 0、 10 和 30天检测晶型 A的纯度，以此为依据导出晶型 A的热稳定性，同法导出晶型 B和晶型 C的热稳定性。实验结果如下表所示：

从上述实验结果可知在 60°C高温环境下保存，晶型 A和晶型 B的纯度几乎不变，晶型 C的纯度稍有下降。这表明了本发明提供的晶型 A和晶型 B具有优异的热稳定性，晶型 C具有良好的热稳定性。实施例 10 光稳定性实验

取少量晶型 A,置于照度为 45001x ± 5001x光照环境下保存一个月，并于第 0、 10和 30天检测晶型 A的纯度，以此为依据导出晶型 A的光稳定性，同法导出晶型 B和晶型 C的光稳定性。实验结果如下表所

从上述实验结果可知在照度为 4500k ± 5001x光照环境下保存，晶型 B的纯度几乎不变，晶型 A和晶型 C的纯度稍有下降。这表明了本发明提供的晶型 B具有优异的光稳定性、晶型 A和晶型 C具有良好的光稳定性。实施例 1 1 吸湿性实验

取少量晶型 A, 置于湿度为 92.5 %高湿环境下保存一个月，并于第 0、 10和 30天检测晶型 A的纯度，以此为依据导出晶型 A的吸湿性，同法导出晶型 B和晶型 C的吸湿性。实验结果如下表所示：

从上述实验结果可知在湿度为 92.5 %高湿环境下保存，晶型 A和晶型 B的純度几乎不变，晶型 C的纯度稍有下降。这表明了本发明提供的晶型 A和晶型 B在高湿环境下非常稳定、晶型 C在高湿环境下较稳定。

上述实施例 9-1 1的实验结果表明本发明提供的多晶型物在高温、光照或高湿的环境下均比较稳定。实施例 12 SD大鼠（ Sprague Dawley大鼠）药物吸收实验

灌胃给药（i_g): 健康 SD大鼠 16只，雄性，体重 200 ~ 250g, 随机分成四組。分别灌胃给予上述实施例 1所得的化合物（21.68 mg/kg ) 、其对甲苯磺酸盐的晶型八、晶型 B、或晶型 C ( 30mg/kg ) , 于给药后 0.5、 1.0、 1.5、 2.0、 3.0、 5,0、 7.0、 9.0、 12和 24小时采集血样，分离制备血浆，采用液相色谱 /串联质谱法测定血浆中药物的浓度，得到药物浓度 -时间曲线。

其主要的药物动力学参数如下表所示:

静脉注射 (iv): 健康 SD大鼠 4 只，雄性，体重 200 ~ 250g, 静脉给予式（ I )化合物的对甲苯磺酸盐（ 5 mg/kg ) , 于给药后 5min、 15min、

0.5、 1.5、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0和 7.0小时采集血样，分离制备血浆，采用液相色谱 /串联质谱法测定血浆中药物的浓度，得到药物浓度-时间曲线。其主要的药物动力学参数如下表所示：经剂量校正后，按 AUC_Q__t计算，实施例 1 所得的式（I )化合物灌胃给药的绝对生物利用度为 0.95 % , 晶型 A灌胃给药的绝对生物利用度为 8,75%, 晶型 B灌胃给药的绝对生物利用度为 8,76%, 晶型 C灌胃给药的绝对生物利用度为 5.17% 实施例 13

对移植于 BALB/cA裸鼠的人体表皮样鳞癌 A431的抑瘤作用取生长良好的 A431 实体瘤，无菌条件下切割成 2-3mm大小的均匀小块，用套管针于每只 BALB/cA棵鼠右腋皮下接种一块，接种后 7 日起随机分组，开始连续经口灌胃给药 13天，并用游标卡尺每 4天测瘤块的长径（ a )、短径（ b ) ,根据公式 V=ab²/2计算肿瘤体积（ mm³ ) ，接种后 23天脱颈处死动物，解剖取瘤块，称瘤重，计算抑瘤率。

结果如下表所示，表明式（ I )化合物的对曱苯磺酸盐的晶型 A具有明显的抑瘤作用。

对移植于 BALB/cA棵鼠的人卵巢癌 SKOV-3的抑瘤作用。

取生长旺盛期的 SKOV- 3瘤组织剪切成 1，5 mm³左右均匀小块，在无菌条件下，用套针管接种于 BALB/cA棵鼠右侧腋窝皮下。棵鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至 80-100 mm³后将动物随机分组。受试物实验组剂量如上述经口灌胃每日一次，连续用药 3周。阳性对照药 MMC (丝裂霉素）的剂量为 5mg/kg于第 1天静脉给药 1次。阴性对照组为 0.5%CMC-Na (羧甲基纤维素钠） 0.2mL/只。每周 2次测量肿瘤长径 ) 、短径（b ) , 同时称棵鼠体重。根据公式 V=ab²/2计算肿瘤体积（ mm³ )。根据测量的结果计算出相对肿瘤体积（ relative tumor volume, TV ) (计算公式为： RTV = V_t/V。，其中 V₀为分笼给药时测量所得肿瘤体积， ¼为每一次测量时的肿瘤体积）。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率 T/C ( % ) ₅ 计算公式如下：

T/C ( % ) = ( T_RTV / CRTV ) ^X 100

T_RTV: 治疗组 RTV ； C_RTV: 阴性对照组 RTV。

疗效评价标准： T/C(%)〉60%为无效， T/C(%) < 60%为有效。结果如下表所示，表明式（I )化合物的对甲苯磺酸盐的晶型 A具有明显的抑瘤作用。

V₀指给药前肿瘤体积； V₂₁指连续用药 3周后肿瘤体积参照上述实验方法，分别于移植人卵巢癌 SKOV-3、人肺癌 Calu-3、人肺癌 A549的荷瘤棵小鼠，灌胃口服给予本发明晶型 B ( 100 mg/kg, 一天两次，连续 3周），得到相对肿瘤增值率 T/C值分别为 28.5 %、 35.1 % 56.3%。

参照上述实验方法，分别于移植人卵巢癌 SKOV-3、人肺癌 Calu-3、人肺癌 A549的荷瘤裸小鼠，灌胃口服给予本发明晶型 C ( 100 mg/kg, 一天两次，连续 3周），得到相对肿瘤增值率 T/C值分别为 23.2 %、 39.4 % 58.7%。表明式（I )化合物的对甲苯磺酸盐的晶型 B和晶型 C同样具有明显的抑瘤作用。实施例 14 长期给药毒性试验

健康 SD大鼠 80只，雄性，体重 200 ~ 250g, 随机分成 16组。分别灌胃给予式（I )化合物对甲苯磺酸盐晶型 A、晶型 B、晶型 C或空白溶剂（设 20、 50、 100、 500 、 800mg/(kg ·天） 5个剂量组和 1个溶剂对照组）。连续给药 4周结果显示：给予 20、50、 100、500、800mg/(kg '天）的晶型 A、晶型 B或者晶型 C的大鼠体征、外观、行为、活动、粪便形状未见异常，进食量正常，体重和体重增长与溶剂对照组基本相似，无统计学差异。血液学、血液生化学、心电图、体温和尿液检查结果显示，各项检查指标与对照组相似，均在正常值范围内波动。表明式（ I ) 化合物的对甲苯磺酸盐的多晶型物毒性低、给药安全性高。实施例 15 药物组合物

由以下组分制备 N-{4-[3-氯- 4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6- 基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐的胶嚢：晶型 A 15g

淀粉 15g

乳糖 30g

PVPP 2.5g

PVP 2-5g

滑石粉 3g

十二烷基硫酸钠 4g 按常规方法，将 N-{4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6- 基丙烯酰胺对曱苯磺酸盐晶型 A、淀粉混合过筛，再与上述其他组分混合均勾，装入普通明胶胶嚢。实施例 16 药物组合物

由以下组分制备 N-{4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6- 基} -丙烯酰胺对曱苯磺酸盐的片剂：晶型 B 20g

淀粉 20g

乳糖 40g

PVPP 3g

PVP 3g

滑石粉 1.6g

十二烷基^ ^酸钠 5g 按常规方法，将 N- {4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6- 基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 B、淀粉混合过筛，再与上述其他组分混合均匀，直接压片。

'在本申请提及的所有文献都通过引用被全文并入本申请中，就如同每一篇文献被单独引用并入本申请那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述内容之后，本领域技术人员可以在不违背本发明精神的范围内对本发明作各种各样的改动或修改，这些变化形式同样落于本申请的权利要求书所限定的范围。

Claims

权利要求

1. 结晶式 (I)所示 TV- {4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6- 基}_丙烯酰胺的对甲苯磺酸盐：

2， N-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐 A型结晶，即晶型 A, 其特征在于粉末 X衍射图在衍射角 2Θ(⁰)值为 5.92±0.10、 8.64±0.10、 11.86±0.10、 16.58±0.10、 16.94 ±0,10、 17.86±0.10、 19.12±0.10、 19.66±0·10、 20.12±0.10、 23.42 ±0.10、 24.14±0，10、 24.80±0.10、 26.76 ± 0.10处具有峰。
3. 如权利要求 2所述的晶型 Α, 其特征在于粉末 X-衍射图还包含衍射角 2Θ(<sup>0</sup>)值为 9.80±0·10、 13.28±0.10、 14.78±0.10、 17,36±0.10、 18.62 ±0.10、 21,62 ±0.10、 22.12 ±0.10、 22.38 ±0.10、 23.14 ±0.10、 25.20 ±0.10、 27.24 ±0.10、 2834 ±0,10、 28.78 ±0.10、 33.12 ±0.10、 41.70 ±0.10的峰。
4. 如权利要求 2或 3所述的晶型 Α，其特征在于所述的晶型 Α具有基本如图 1所示的粉末 X-衍射图谱。
5. 如权利要求 4所述的晶型 A，其特征在于所述的晶型 A还具有基本如图 5所示的红外图谱。
6. 制备权利要求 2-5任一项所述的晶型 A的方法，包括步骤： a): 将下式 (I)所示的化合物：

溶于有机溶剂中形成溶液，

b) : 搅拌下滴加对甲苯磺酸在该有机溶剂中形成的溶液，并控制式 (I)所示的化合物和对甲苯磺酸的摩尔比为 1:1 ~ 6，优选 1:3~6；及

c) : 析出晶体，过滤、水洗得到目标晶体。

7，如权利要求 6所述的方法，其特征在于所述有机溶剂选自四氢呋喃、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、乙腈、 DMSO、 DMF 和丙二醇，以及它们的混合物，优选四氢呋喃、甲醇、乙醇、四氢呋喃 /甲醇的混合溶剂和四氢呋喃 /乙醇的混合溶剂。
8. 如权利要求 7所示的方法，其特征在于所述有机溶剂为四氢呋喃 /甲醇的混合溶剂，其中四氢呋喃和甲醇的体积比为 1:1 ~ 3, 优选

1:2 ~ 3。
9. 如权利要求 6所述的方法，其特征在于，步骤 a)中式 (I)化合物溶液的浓度为 3 ~ 8g/100mL, 优选 4 ~ 6g/100mL。
10. 如权利要求 6- 9之任一项所述的方法，其特征在于，步骤 b) 中对曱苯磺酸溶液的浓度为 10~30g/100mL, 优选 15 ~ 25g 00mL。
11. 如权利要求 6所述的方法，其特征在于，步骤 a)中式 (I)化合物溶液的浓度为 3~8g/100mL，优选 4~6g/100mL, 步骤 b)中对曱苯磺酸溶液的浓度为 10~30g/100mL,优选 15 ~ 25g/100mL ) , 并且所述有机溶剂为四氢呋喃 /曱醇的混合溶剂，其中四氢呋喃和甲醇的体积比为 1:1 ~3, 优选 1:2~3。

12. iV-{4- [3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对曱苯磺酸盐 B型结晶，即晶型 B , 其特征在于粉末 X衍射图在衍射角 2Θ (。)值为 4.72 ±0.10、 17.04 ±0.10、 19.32 ±0.10、 24.12 ±0.10处具有峰。
13. 如权利要求 12所述的晶型 B, 其特征在于粉末 X-衍射图还包含于射角 2Θ(。)值为 7.92 ±0.10、 9.54 ±0.10、 11.90 ±0.10、 12.94 ±0.10、 14.34±0.10、 15.32±0,10、 17.88±0.10、 20.00±0.10、 21.80±0.10、 22.42 ±0.10、 25.08 ±0.10、 25.80 ±0.10、 27.28 ±0.10、 28.00 ±0.10、 28.44 ±0.10的峰。
14. 如权利要求 12或 13所述的晶型 Β, 其特征在于所述的晶型 Β 具有基本如图 2所示的粉末 X-衍射图谱。
15. 如权利要求所述的晶型 Β, 其特征在于所述的晶型 Β还具有基本如图 6所示的红外图谱。
16. 制备权利要求 12-15任一项所述晶型 B的方法，包括步骤： a) : 加热下将权利要求 2-5任一项所述的 -{4-[3-氯 -4- (3-氟 -苄氧基)苯基胺基]—喹唑啉 -6-基丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A溶于质子溶

5 剂和非质子溶剂的混合溶剂中形成溶液；

b) : 在 40~ 80°C下保温 1 ~2小时；及

c) : 冷却、析出晶体，静置、过滤、水洗得到目标晶体。
17. 如权利要求 16的方法，其中质子溶剂是水或水与醇的混合物。
18. 如权利要求 16或 17的方法，其中非质子溶剂选自四氢呋喃、 10 乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙腈和 DMF，以及它们的混合物。
19. 如权利要求 16的方法，其中步骤 a)中 N-{4-[3-氯 -4-(3-氟 -苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基}-丙烯酰胺对曱苯磺酸盐晶型 A溶液的浓度为 2〜10g/100mL, 优选 4~8g/100mL。
20. 权利要求 16-19任一项所述的方法，其特征在于所述质子溶剂 15 /非质子溶剂的混合溶剂中，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为 1:2 ~ 4, 优选 1:3 ~ 4。
21. 权利要求 16所述的方法，其特征在于所述质子溶剂是水，所述非质子溶剂是四氢呋喃，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为 1:2 ~ 4, 优选 1:3 ~ 4,步骤 a)中 V-{4-[3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-

20 基}-丙晞酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A溶液的浓度为 2〜10g/100mL, 优选 4〜8g胸 mL。

22. -{4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐 C型结晶，即晶型 C, 其特征在于粉末 X衍射图在衍射角 2Θ (0)值为 3.40 ±0.10、 6.82±0.10、 7,58 ±0.10、 11.30±0.10、 14.84

25 ±0.10、 15.24±0.10、 17.28 ±0.10、 17,86±0.10、 18.34±0.10、 20.32 ±0.10、 22.96 ±0,10、 23.50 ±0.10、 24.12 ±0.10、 24.62 ±0.10、 25.86 ±0.10处有峰。
23. 如权利要求 22所述的晶型 C, 其特征在于粉末 X-衍射图还包含4汙射角 2 Θ (。)值为 9.04士 0.10、 10.26土 0.10、22.44土 0.10、25.06土 0.10、

30 26.98 ±0.10、 28.62 ±0.10、 29.98 ± 0.10的峰。

, 24. 如权利要求 22或 23所述的晶型 C, 其特征在于所述的晶型 C 具有基本如图 3所示的粉末 X-衍射图谱。
25. 如权利要求 24所述的晶型（，其特征在于所述的晶型 C还具有基本如图 7所示的红外图谱。
26. 制备权利要求 22-25任一项所述的晶型 C的方法，包括步骤： a) : 将权利要求 2-5任一项所述的 ΛΜ4-[3-氯 -4- (3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 Α溶于质子溶剂和非质子溶剂的混合溶剂中；

b) :搅拌下滴加对甲苯磺酸在该质子溶剂和非质子溶剂的混合溶剂中形成的溶液，并控制所述晶型 A和对甲苯磺酸的摩尔比为 1 :1 ~ 6, 优选 1 :3 ~ 6; 及

c): 析出晶体，静置、过滤、水洗得到目标晶体。
27. 如权利要求 26的方法，其中质子溶剂是水或水与醇的混合物。
28. 如权利要求 26或 27的方法，其中非质子溶剂选自四氢呋喃、乙醚、二氯甲烷、丙酮、乙腈和 DMF，以及它们的混合物。
29. 如权利要求 26的方法，其中步骤 a)中 V-{4-[3-氯 -4-(3-氟 -苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基} -丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A溶液的浓度为 3〜7g 00mL, 优选 4〜6g八 00mL。
30. 如权利要求 26的方法，其中步骤 b)中对甲苯磺酸溶液的浓度为 10〜30g/100mL, 优选 15~25g八 00mL。
31. 如权利要求 26 - 30之任一项所述的方法，其特征在于所述质子溶剂 /非质子溶剂的混合溶剂中，质子溶剂和非质子溶剂的体积比为

1 : 1 ~ 5 , 优选 1 :3 ~ 4。
32. 如权利要求 26的方法，其中步骤 a)中 iV- {4- [3-氯 -4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基] -喹唑啉 -6-基}-丙烯酰胺对甲苯磺酸盐晶型 A溶液的浓度为 3~7g/100mL, 优选 4〜6g/100mL，步骤 b)中对甲苯磺酸溶液的浓度为 10~30g/100mL, 优选 15~25g/100mL，所述质子溶剂是水，非质子溶剂是四氢呋喃，并且四氢呋喃和水的体积比为 1 ~ 5: 1 , 优选 3 ~ 4: 1。
33. 包含权利要求 1-5、 12-15和 22-25任一项所述的结晶和药学上可接受的载体的药物组合物。
34. 如权利要求 33所述的药物组合物，其还包含一种或多种的其他用于治疗和 /或预防肿瘤的药物。
35. 权利要求 1-5、 12- 15和 22- 25任一项所述的结晶在制备用于治疗和 /或预防肿瘤的药物中的用途。
36. 如权利要求 35所述的用途，其中所述肿瘤选自乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌和表皮样鳞癌。
37. 治疗和 /或预防哺乳动物肿瘤的方法，包括给予需要的哺乳动物治疗 /或预防有效量的权利要求 1-5、 12-15和 22-25任一项所述的结