CN101926920A - 一种治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制法，以及其在制备风湿、类风湿关节炎药物中的应用。本发明的中药组合物包括下列重量份的组分：白毛藤、小青草、两面针、蒲公英、菝葜、木贼草等中药组分。本发明所得中药组合物可以制备成合剂剂型，与现有工艺相比更简单和经济，并有利于运输和贮存。而且临床实验证明本发明中药组合物对风湿、类风湿关节炎药物有显著疗效。

Description

一种治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，更具体的，本发明涉及一种治疗治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法。

背景技术

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节滑膜炎症为特征的全身性慢性自身免疫性疾病，RA的发病机制至今仍不是很清楚，Trenthem首次发现50％的RA患者血清中存在有抗II型胶原(Collagen type II，C II)的自身抗体，并根据这些发现于1977年首次建立了实验性关节炎动物模型，C II大量存在于关节软骨中，同时也存在于视网膜和玻璃体中，C II是一种与免疫系统隔绝的蛋白质，但在某些病理条件下可作为一种自身抗原呈现出来，20世纪80年代至90年代初期，国外大量重复实验并在临床表现、病理组织学、针对胶原的体液和细胞的免疫反应，以及与主要组织相容性复合物(MHC)的关系等方面进行了广泛深入的研究。

目前，已经有一些关于治疗风湿性关节炎/类风湿关节炎药物的报道。如中国专利200410041715.8，名称为“一种治疗类风湿关节炎的中药及其制备工艺”的发明创造公开了一种中药组合物的制剂，所述的治疗类风湿关节炎的中药包含重量份的原料药为：蚂蚁8-10份，黄芪2-3份，三七1-2份，重楼1-2份，老鹳草0.8-1.2份，千年健0.8-1.2份。专利02128482.2，，名称为“一种治疗风湿、类风湿关节炎的中药组合物”的发明创造公开了一种中药组合物的制剂，该组合物分为粉剂和酒剂两组。粉剂采用土连翘、牛膝、桂枝、没药、血竭加工成细粉；酒剂以制川乌、制草乌、乌梅、木瓜、双花、牛膝、当归、大艽为主药，全虫、蜈蚣为辅药，杜仲、白术为佐药，防风为引药，加入60度白酒、冰糖配制而成。但是这些中药组合物药效不显著，各个组分之间的作用不明显，达到的效果也不理想，而且在制备中药制剂过程中，各组分的没有进行优化安排其步骤，制备的产率不高。

发明内容

本发明为了解决的上述技术问题，提供一种全新的、副作用少、药效好的中药组合物，本发明还提供一种中药组合物的制法和在医药上用途。

本发明的另一个目的是提供的中药组合物能不同程度地抑制滑膜细胞分泌TNF-α、IL-1β，对II型胶原诱导的关节炎具有一定抑制作用，从而减轻关节滑膜的炎症。

在本发明的一个方面，是提供了一种中药组合物，它含有药学上可接受的载体或赋性剂，和以下活性成分：白毛藤、小青草、两面针、蒲公英、菝契、木贼草。

本发明的另一个方面，是提供了一种上述组合物，它含有药学上可接受的载体或赋性剂，和以下重量配比的活性成分：白毛藤5-10份、小青草5-10份、两面针5-10份、蒲公英5-10份，菝葜5-10份、木贼草8-12份。

本发明的另一个方面，是提供了一种上述组合物，它含有药学上可接受的载体或赋性剂，和以下重量配比的活性成分：

白毛藤8份、小青草8份、两面针8份、蒲公英8份，菝葜8份、木贼草10份。

上述组合物，可以被制备成下列剂型：合剂、软膏剂、透皮制剂、外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂。

上述药学和食品学上可接受的载体选自：填充剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、矫味剂、包衣材料或赋形剂。

本发明的另一方面是提供了一种上述组合物的制备方法，它包括下述步骤：总共十味中药，加水煎煮2次，第一次加水2800ml，煎煮2小时，第2次加水2800ml，煎煮1.5小时，煎液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.04(60℃)，加入苯甲酸钠2.5g及甜菊素0.4g，混匀，静置过夜，取上清液，加水使成1000ml，混匀，灌装，灭菌即得。

本发明的上述中药组合物在制备风湿、类风湿关节炎药物中的应用。

白毛藤又名寻骨风，为茄科植物白英的全草。首见于《百草镜》，味甘苦，性寒，人肝、胆、肾。具有清热利湿、解毒消肿、抗癌之功。临床上用于治疗湿性黄疸，胆囊炎，胆石症，风湿性关节痛，湿热带下，痈肿瘰疬等。故是方用此以为君药。

小青草又名爵床，见于《唐本草》：爵床，似香荣，叶长而大，或如茬且细。生平泽熟田近道旁。以及《纲目》：爵床，原野甚多，方茎对节，与大叶香蕾一样，但香蕾搓之气香，而爵床搓之不香，微臭，以此为别。具有清热解毒药；渗湿利尿药的功效。

菝葜首见于《别录》。味甘酸，性平，归肝、肾经，具有祛风利湿、解毒消痈之功。主要用于治疗风湿痹痛、淋浊、带下等。蒲公英为菊花科植物蒲公英的全草，首见于<本草图经>，味苦甘，性寒，人肝、胃经。具有清热解毒、消痈散结之功，为清热解毒之要药，长于治疗痈肿疔疮，掀肿疼痛。与菝葜相伍，共为臣药。

两面针首见于<本草求原>。昧甘苦，微温。具有祛风通络、胜湿止痛、消肿解毒之功。主要用于治疗风寒湿痹，筋骨疼痛诸疾。因其“祛风活络，散瘀止痛，解毒消肿”(《湖南药物志》)，“主风寒湿痹，历节疼，除四肢厥气，膝痛。”(《本经)入方中以为辅助之用。

木贼始载于《嘉佑本草》。味甘，微苦，性平。入肺、肝、胆经。长于疏风散热，明目退翳，止血。因其“去风湿。散火邪”(《本草正》)，“解毒利尿，主治筋骨。”(《湖南药物志》)，“含有疏风，泄化湿热，升散郁火诸义”(《本草正义》)而同两面针共为辅助之药，以增强白毛藤、蒲公英、菝葜之功效。如是，白毛藤、蒲公英、菝葜、两面针、木贼与诸药合之，共奏清热化湿、祛痰活血、通经定痛之功，则湿热之邪得清，经络瘀阻得通，历节之红、肿、热、痛自止。本发明的积极进步效果在于：本发明的中药组合物组分之间具有较好的协同作用，因而疗效好，制备成制剂稳定性强，而且中药组合物制备工艺简单，产品成型性好，无污染，容易操作，且应用在类风湿关节炎领域内有非常好的效果。

白毛藤茎含有甾体糖苷，其提取物甾体皂苷具有抗肿瘤作用。蒲公英全草含蒲公英甾醇、胆碱、菊糖合果胶等。具有抗病原微生物、抗胃溃疡、抗肿瘤等作用。另外具有广谱抑菌、利胆保肝、抗内毒素、健胃和免疫促进等作用。菝契含菝契素、异黄杞苷、薯蓣皂苷元等。具有抗炎、抗肿瘤、抗菌作用。木贼具有降压、降脂、镇静、抗惊厥、抗病毒、抑制血小板聚集等作用。对本方主要药物得现代中药化学合中成药药理研究，虽无直接作用于RA的报道，但从其抗炎、镇痛等作用看，似可间接说明其治疗湿热痹阻证RA的机理。

本药物组方以白毛滕祛风通络为君药，蒲公英、菝葜清热利湿为臣药，辅以两面针、木贼草等清热逐淤、通经定痛，在本院临床上使用效果非常好，对风湿热郁型类风关有较好的疗效。从药效学研究结果显示：中药组合物可明显延长小鼠对热刺激的痛阈值，减少冰醋酸致小鼠的扭体数明显降低二甲苯所致小鼠耳肿胀度和降低角叉菜胶致炎后大鼠足肿胀率，结果表明：中药组合物具有抗炎和镇痛作用。体内动物实验发现中药组合物能减轻II型胶原诱导的大鼠关节炎模型的关节肿胀指数，降低血清IL-1、TNF-α的水平，减轻关节病理的炎症改变。本次实验结果提示：可通过抑制关节滑膜分泌的炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平，从而减轻关节滑膜的炎症，可能是其治疗类风湿关节炎的作用机理之一。为临床上运用中药组合物治疗类风关阐明了部分作用机理。全方组方合理，切中病机，故疗效确切可靠。

具体实施方式

实施例1

处方一

白毛藤8g    小青草8g    两面针8g    蒲公英8g

菝葜8g      木贼草10g

将处方一总共六味中药，加水煎煮2次，第一次加水2800ml，煎煮2小时，第2次加水2800ml，煎煮1.5小时，煎液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.04(60℃)，加入苯甲酸钠2.5g及甜菊素0.4g，混匀，静置过夜，取上清液，加水使成1000ml，混匀，灌装，灭菌即得。

实施例2

处方二

白毛藤6g    小青草6g    两面针7g    蒲公英8g

菝葜8g      木贼草8g

将处方二总共六味中药，加水煎煮2次，第一次加水2800ml，煎煮5小时，第2次加水2800ml，煎煮4小时，煎液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.04(60℃)，加入苯甲酸钠2.5g及甜菊素0.4g，混匀，静置过夜，取上清液，加水使成1000ml，混匀，灌装，灭菌即得。

实施例3

处方三

白毛藤10g    小青草10g    两面针10g    蒲公英9g

菝葜10g      木贼草12g

将处方三总共六味中药，加水煎煮2次，第一次加水2500ml，煎煮2小时，第2次加水2500ml，煎煮1.5小时，煎液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.06(60℃)，加入苯甲酸钠2.5g及甜菊素0.4g，混匀，静置过夜，取上清液，加水使成1000ml，混匀，灌装，灭菌即得。

实施例4

处方四

白毛藤5g    小青草5g    两面针5g    蒲公英5g

菝葜5g      木贼草8g

将处方四总共六味中药，加水煎煮2次，第一次加水2500ml，煎煮2小时，第2次加水2500ml，煎煮1.5小时，煎液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.04(60℃)，加入苯甲酸钠2.5g及甜菊素0.4g，混匀，静置过夜，取上清液，加水使成1000ml，混匀，灌装，灭菌即得。

实施例5

类风湿关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎症为特征的全身性慢性自身免疫性疾病，炎症分泌IL-1β(TPI Inc IR043)和TNF-α(TPI Inc IR0820)是RA发病机制中居中心地位的促炎细胞因子，主要参与激活血管内皮细胞、增加内皮细胞黏附分子表达，使中性粒细胞在滑膜腔内聚集，刺激滑膜细胞和中性粒细胞产生前列腺素等炎性介质，还能刺激软骨细胞和破骨细胞减少糖蛋白合成，增加糖蛋白降解；并产生胶原酶及其他中性蛋白酶，从而导致RA滑膜、软骨和软骨下骨的破坏，在RA炎症中处于中心地位。

雷公藤多甙是卫矛科雷公藤根的提取的一种成分，具有抗炎、镇痛作用和免疫抑制作用，是目前治疗RA起效较快，疗效较肯定和应用广泛的病情缓解药物之一，故本实验将雷公藤多甙作为阳性对照药物。

处方一的中药组合物合剂是治疗类风湿关节炎的中药复方制剂，具有抗炎、镇痛作用，在临床上取得较好的疗效。以下实验采用II型胶原诱导大鼠关节炎模型。

1材料和方法

1.1药物及试剂

药物：中药组合物合剂(白毛滕、木贼草、小青草、蒲公英、两面针、菝契等组成)(光华医院中药制剂室提供)；雷公藤多苷(泰州美通药业有限公司，批号Z32021007)。

主要试剂：弗氏完全佐剂(CALBIOCHEM lot B47895)；醋酸；卡介苗(国产)；鸡II型胶原(由上海本草生物医学工程研究所费桂军老师馈赠)；IL-1β(TPIInc IR0820)Elisa试剂盒。

1.2动物模型制备

1.2.1动物  清洁级雌性Wistar大鼠70只，4～6周龄，体重(180±10)g，由中科院动物中心提供。

1.2.2造模方法  将鸡II型胶原用5g/L的浓度溶于0.01mol/L的醋酸溶液中，与等体积弗氏完全佐剂混合，制成乳剂，加入卡介苗，其中卡介苗的浓度为2g/l；以0.1ml/只的剂量在60只实验大鼠的尾部和背部进行皮内注射免疫；14d后足部皮下加强免疫1次(0.01ml/只)。

1.3分组与治疗  模型完成后随机分组：空白组，生理盐水2ml/100g灌胃，每日1次；模型组，生理盐水2ml/100g灌胃，每日1次(含生雷公藤多苷组，雷公藤多苷溶液2ml/100g)；中药组合物合剂大、中、小剂量组，分别以中药组合物合剂(含生物16g/kg、8g/kg、4g/kg)2ml/100g灌胃，每日1次。

1.4观测标本的采取及含药血清制备造模18d给药，治疗时间为3周；造模后39d取材，将大鼠麻醉后，抽血，分离血清，-70℃保存生化检测备用，其中一部分56℃灭活30min后，过滤除菌，作含药血清备用；同时打开关节腔，取出滑膜组织，70％酒精固定，备用组织切片。

1.5检测项目和方法

1.5.1关节肿胀指数  参考文献采用0-4级关节评分法。0分：无关节炎；1分：小趾关节轻度肿胀；2分：小趾关节和足跖肿胀；3分：踝关节以下的足爪肿胀；4分：包括踝关节在内全部关节肿胀；给药前为观察点1，以后每周1次，共3次。

1.5.2生化检测IL-1β(TPI Inc IR043)和TNF-α(TPI Inc IR0820)Elisa试剂盒购至TPI Inc公司；酶标仪Wellscan MK II型。按说明书操作。

1.5.3CIA大鼠滑膜细胞的分离和培养①将分离的CIA大鼠滑膜组织用含青霉素200Ku/L、链霉素200mg/L的D-Hank’s液漂洗3次；②将剪碎的滑膜小块，先离心洗涤2次，去除脂肪组织，再进行消化；③胰蛋白酶浓度为0.25％，37℃消化30min，10％小牛血清DMEM终止消失后，接种培养。

1.5.4含药血清对滑膜细胞增殖的测定  用含10％小牛血清-DMEM培养液制备模型组大鼠原代滑膜细胞悬液(2×10⁶/ml)^【6】，加至96孔培养板，每孔100ul，置37℃、5％CO₂培养箱培养24h，贴壁后换不含血清的DMEM培养液培养24h，使细胞相对同步化。吸出无血清培养液，加入含10％含药血清-DMEM培养液各100ul，继续培养68h后，各孔加MTT(5mg/L)溶液20ul，继续培养4h后，弃上清液，加入二甲基亚砜200ul，振荡3min后用酶标仪检测每孔OD(λ＝490nm)(光密度，即OD值)，以正常大鼠血清为对照组，每组以6孔的均值表示其结果。

1.5.5病理切片  常规HE染色。

1.6统计方法  结果以x±s表示，计量资料用t检验。

2.结果

2.1关节肿胀指数观察  给药第2周时，各组指数低于模型组，其中雷公藤多苷组、中药组合物合剂高剂量组与模型组有显著性差异(P＜0.05)。给药第3周时，各组指数低于模型组，与模型组均有显著性差异(P＜0.05)。(表1)

表1关节肿胀指数测定(x±s)

注：与模型组比较，^*P＜0.05。

2.2血清TNF-α、IL-1β测定  给药组与模型组相比，TNF-α水平均降低，有极显著性差异(P＜0.01)。中药组合物合剂高剂量组、雷公藤多苷组与模型组相比，IL-1β水平有显著性差异(P＜0.01)。(表2)。

表2血清TNF-α、IL-1β测定(x±s)

组别	n	TNF-α(pg/ml)	IL-1β(pg/ml)
				空白组	10	0.39±0.29	77.08±2.25
模型组	12	254.55±22.37	77.60±3.30
				雷公藤多苷组	12	37.44±12.24**	66.42±5.26**
中药组合物合剂高剂量组	10	36.13±7.66**	66.69±7.24**
				中药组合物合剂中剂量组	12	50.23±10.63**	75.91±4.90
中药组合物合剂低剂量组	12	152.09±16.53**	75.80±5.30

注：与模型组比较，^**P＜0.01。

大鼠膝关节滑膜的组织学观察  正常大鼠滑膜及关节面未见病变，滑膜衬里层由1～2层滑膜细胞组成且部分不连续，滑膜衬里下层则为脂肪细胞核血管，未见炎症细胞侵润、成纤维细胞及胶原纤维；模型组动物膝关节内滑膜组织肿胀，滑膜上层增厚，滑膜细胞增大，数量增多，滑膜下明显炎症。滑膜组织内结缔组织中血管充血，毛细血管明显增多，纤维组织疏松，可见较多的慢性炎细胞侵润，关节软骨可见大小不等的片状坏死灶，边缘不整；中药组合物合剂3个剂量组、雷公藤治疗组上述病变均程度不同地较关节炎模型组为轻，主要表现在关节软组织内炎细胞数量减少；少见血管形成、关节软骨破坏、边缘不整。

用MTT法观测含药血清对滑膜细胞增殖的影响  各组血清均有抑制滑膜细胞生长的趋势，其中又以中药组合物合剂高剂量组合低剂量组与空白组有显著性差异(P＜0.05)。(表3)

表3含药血清对滑膜细胞增殖的影响(x±s)

组别	n	OD值
			空白组	10	0.106±0.014
模型组	12	0.092±0.019
			雷公藤多苷组	12	0.102±0.017
中药组合物合剂高剂量组	10	0.089±0.015*
			中药组合物合剂中剂量组	12	0.097±0.014

中药组合物合剂低剂量组

12

0.084±0.009*

注：与空白组比较，^*P＜0.05。

结论：本实验结果显示：本发明中药组合物合剂能减轻模型大鼠关节肿胀指数，降低IL-1β(TPI Inc IR043)和TNF-α(TPI Inc IR0820)水平，提示中药组合物能调节炎症细胞分泌细胞因子IL-1β(TPI Inc IR043)和TNF-α(TPI IncIR0820)水平，从而减轻关节滑膜的炎症，抑制关节滑膜增殖。

实施例6

类风湿关节炎是以关节组织慢性炎症病变为主要表现的自身免疫性疾病，本实验采用开放随机对照研究的方法对中药组合物合剂+小剂量MTX治疗类风湿关节炎(风湿热郁型)进行临床疗效观察。

1对象和方法

1.1临床资料

1.1.1病例资料：90例均为2002年3月～2003年12月在本院类风关专科门诊和病房诊治的风湿热郁型类风关患者，随机分为两组：治疗组49例，男性13例，女性36例，最大70岁，最小16岁，平均年龄49±13岁，病程最长10年，最短3月，平均病程2.3±2.9年；对照组：41例，男性6例，女性35例，最大69岁，最小26岁，平均年龄49±11岁，病程最长20年，最短3月，平均病程4.7±6.6年。

1.1.2诊断标准：

1.1.2.1中医诊断^[2]：(1)痹证：凡关节、肌肉、筋骨等部位发生肿胀、疼痛、僵硬、屈伸不利，甚至关节肿大、变形、强直者。(2)风湿热郁型：关节或肌肉局部红肿、灼热、重着、触之灼热或有热感，口渴不欲饮，溲黄，或有发热，舌质红，苔黄腻，脉滑数或濡数。

1.1.2.2西医诊断^[1]：根据美国ARA诊断标准，凡符合其中4项可诊断为类风关：

(1)晨僵持续1h以上(至少6周)

(2)三个或三个以上关节肿胀(至少6周)

(3)关节炎症对称性(至少6周)

(4)腕、掌指、近端指间关节肿胀(至少6周)

(5)典型手部的X线改变

(6)血清类风湿因子阳性(滴度超过正常最高值)

(7)皮下小结

1.1.3纳入标准：

(1)符合西医诊断标准和中医辨证标准者

(2)年龄16岁至70岁

(3)符合国家卫生部新药临床标准的类风湿关节炎患者。

1.1.4排除标准：

1、年龄16岁以下或70岁以上者

2、妊娠或哺乳期妇女

3、合并有高血压、心肝肾造血系统严重疾病，精神病患者，消化道溃疡近期活动出血者

4、服用激素者

5、对中药组合物合剂过敏者

1.2治疗方法：

1.2.1治疗组：中药组合物合剂(白毛滕、木贼草、小青草、蒲公英、两面针、菝契等组成)上海光华中西医结合医院药剂科提供，一日3次，每次20ml，口服，MTX 7.5mg，每周一次，口服，疗程为3个月。观察期间：①停用具有清热利湿、活血止痛作用的中成药；②验证期间可维持一种原服用的非甾体药物，但不得更换或增加其他非甾体药物；③不得增加其他二线抗风湿药物和激素。

1.2.2对照组：MTX 10mg，每周一次，口服，疗程同前。

1.3观察指标

1.3.1临床症状、体征：晨僵时间、关节痛、关节肿胀、关节整体功能、握力。

1.3.2理化指标：C-反应蛋白、血沉(治疗前后各一次)

1.3.3安全性指标：血、尿常规及肝肾功能(治疗前后各一次)

1.4疗效评定标准

1.4.1临床症候评分标准：

对关节局部症状予以分级记录：关节晨僵时间、关节疼痛指数、关节肿胀指数、握力。(注：指数为受累关节数×积分数之和)

评分标准如下：

(1)晨僵时间：

0分：无晨僵

1分：晨僵小于30分钟

2分：晨僵小于60分钟

3分：晨僵大于60分钟

(2)关节痛积分：

0分：无疼痛

1分：轻度疼痛，压迫时诉痛

2分：中度疼痛，压迫时显痛苦表情，退缩，不影响睡眠

3分：重度疼痛，拒绝压痛检查，影响睡眠

(3)关节肿胀积分：

0分：无肿胀

1分：轻度肿胀，肿胀低于附近骨突出部位

2分：中度肿胀，肿胀与附近骨突出部位平

3分：重度肿胀，肿胀高出附近骨突出部位

(4)关节整体功能积分：

0分：无关节功能障碍

1分：轻度的功能障碍，虽有一个或多关节的功能受限，但可从事正常活动

2分：中度关节功能障碍，关节功能明显受限，生活尚能自理，但不能从事一般的活动

3分：重度关节功能障碍，卧床或坐轮椅，生活不能自理。

握力：将血压计袖带折叠二次并将它塞在适合的布袋内，检查前首先将袖带充气压30mmHg，然后患者用左右手握压三次，记录所述数值，得出平均值。

注：积分计算：(治疗前积分总和-治疗后积分总和)/治疗前积分总和^*100％，血沉计算：(治疗前值-治疗后值)/(治疗前值-正常值)^*100％；计算出各项指标的改善百分数后相加算出其平均百分数来判断疗效。

1.4.2总体疗效标准

显效：观察指标治疗后积分总和比治疗前积分总和下降≥70％

有效：观察指标治疗后积分总和比治疗前积分总和下降≥50％-＜70％

改善：观察指标治疗后积分总和比治疗前积分总和下降≥30％-＜50％

无效：观察指标治疗后积分总和比治疗前积分总和下降＜30％

注：积分计算：(治疗前积分总和-治疗后积分总和)/治疗前积分总和^*100％

1.5不良反应

严密观察并详细记录服药期间和服药后可能发生的各种不良反应。

1.6统计学处理方法：

根据资料性质不同，分别采用t检验、卡方检验等分析方法，数据结果用X±SD表示。

2结果

2.1临床症状和体征变化见表1

表1.两组药物治疗前后晨僵、关节疼痛、肿胀、握力和关节整体功能的变化(X±SD)

注：与治疗前相比：^**P＜0.01，^***P＜0.001

2.2血沉、C-反应蛋白的变化见表2

表2.两组药物治疗前后血沉、C-反应蛋白的变化(X±SD)

注：与治疗前相比：^*P＜0.05、^***P＜0.001

2.3两组患者总体疗效的比较见表3

表3两组患者总体疗效的比较

注：与对照组相比：^**P＜0.01

2.4不良反应

治疗组患者在整个疗程中均发现腹泻2例，对照组2例出现白细胞下降，肝功能异常3例，口腔溃疡1例，全部患者无一例失访。

结果

本文研究资料表明：中药组合物合剂+小剂量MTX对晨僵、关节疼痛、关节肿胀、握力、关节功能都有明显的改善(P＜0.001)，总有效率为90％，对照组为61％(P＜0.01)，从实验室指标变化来看：治疗组和对照组血沉较治疗前有明显下降(P＜0.01，P＜0.001)，治疗组和对照组C-反应蛋白较治疗前下降但无统计学差异(P＞0.05)。治疗组患者的不良反应仅为少数患者出现轻微的胃肠道反应，而对照组出现肝功能异常、口腔溃疡和白细胞下降的不良反应。

实施例7

中药组合物合剂由白处方一中药组成，具有祛风通络，清热利湿作用，临床疗效观察结果表明其对中医辨证属风湿热郁型活动期类风湿关节炎有显著的治疗作用。为进一步验证中药组合物合剂的抗炎镇痛作用，我们进行药效学动物实验如下：

材料和方法

1材料

1.1药物与试剂

中药组合物合剂，0.8生药/ml，由上海市光华中西医结合医院中药制剂室提供，批号：20020625，

1.2实验动物：昆明种小鼠：20-22克，雌雄皆用，由上海中医药大学实验动物中心提供。医动合格号：02-24-3。SD大鼠：90-110克，雄性。上海西普尔-必凯实验动物有限公司产品。沪动合格证字152号。

2试验方法与结果：

2.1镇痛作用实验⁴(热板法)

室温在20℃环境下，调节恒温水浴温度至55±0.5℃，金属盘的底部接触水面。然后将18-20克雌性小鼠放在热板上，用秒表记录自小鼠投入热板至出现舔后足的反应时间(潜伏期)作为该鼠的痛阈值。给药前先测定筛选小鼠的痛阈值(共测两次，以平均值为5秒-40秒者为合格)。根据合格小鼠痛阈值平均分组，分组及给药剂量(相当人临床用量的20、10、5倍)见表1。然后灌胃给水或给药每次0.2ml/10g，1次/天，连续3天，末次给药给蒸馏水或药物后1.5小时、3小时各测定一次小鼠痛阈值。如痛阈值超过60秒，即停止测试而按60秒计。

结果显示：与空白对照组比，中药组合物合剂16g生药/kg、8g生药/kg、4g生药/kg组均可明显延长小鼠痛阈值(见表1)。

表1中药组合物合剂镇痛作用(热板法)

注：与空白对照组比^*P＜0.05；^**P＜0.01

2.2镇痛作用实验⁴(扭体法)

取昆明种小鼠，雌雄各半，随机分组，分组及给药剂量见表2。然后灌胃给蒸馏水或给药每次0.2ml/10g，1次/天，连续3天。于末次给药后2.5小时，各动物腹腔注射0.8％冰醋酸0.1ml/10g，观察20分钟内小鼠的扭体次数。

结果显示：与空白对照组比，中药组合物合剂16g生药/kg可明显减少20分钟内小鼠的扭体次数(见表2)。

表2中药组合物合剂镇痛(扭体法)

注：与空白对照组比^**P＜0.01

2.3.对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响⁴

取昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分组，分组及给药剂量见表3。然后灌胃每次给蒸馏水或给药0.2ml/10g，1次/天，连续3天，末次给蒸馏水或给药物1小时，在每只动物右耳上涂上二甲苯50uL，1小时后脱颈椎处死小鼠，用打孔器(直径9mm)。打下左、右耳片，称重。计算肿胀度(肿胀度＝右耳片-左耳片重量)。

结果显示：与空白对照组比，中药组合物合剂16g生药/kg、8g生药/kg、4g生药/kg组均可明显减轻二甲苯所致小鼠肿胀。(见表3)

表3中药组合物合剂对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

注：与空白对照组比^**P＜0.01

2.3对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响⁴

取雄性大鼠，测定右足踝关节容积。并依据容积平均分组，分组及给药剂量见表4。然后灌胃给药或蒸馏水每次2ml/100g，1次/天，连续5天。第5天测定各鼠右踝关节容积，为致炎前容积。并于给药后1.5小时在大鼠右足趾皮下注射1％角叉菜胶0.1ml/只。注射1小时、2小时、4小时分别测定大鼠足趾容积。计算肿胀百分率。肿胀率＝(致炎后容积-致炎前容积)/致炎前容积*％。

结果显示：与空白对照组比，中药组合物合剂16g生药/kg、8g生药/kg、4g生药/kg组均可明显降低角叉菜胶致炎后大鼠足肿胀的肿胀度。

表4中药细合物合剂对角叉菜角致大鼠足肿胀的影响

注：与空白对照组比^*P＜0.05；^**P＜0.01

结论

中药组合物合剂是治疗类风湿关节炎(风湿热郁型)的中药复方，组方以清热除湿，祛风通络为治则。白毛滕祛风通络为君药，蒲公英、菝契清热利湿为臣药，辅以两面针、木贼草等清热逐淤、通经定痛，在临床上取得较好的疗效。试验结果显示：在相当于人临床用量的20、10、5倍时，中药组合物合剂可明显延长小鼠对热刺激的痛阈值，大剂量可明显减少冰醋酸致小鼠的扭体次数。在相当于人临床用量20、10、5倍时，中药组合物合剂可明显降低二甲苯所致小鼠耳肿胀的肿胀度和降低角叉菜胶致炎后大鼠足肿胀的肿胀率。上述试验结果表明：中药组合物合剂具有抗炎(急性炎症)与镇痛作用。

Claims (10)

1.一种治疗类风湿关节炎的中药组合物，其特征在于：它含有药学上可接受的载体或赋性剂，和以下活性成分：白毛藤、小青草、两面针、蒲公英、菝契、木贼草。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：它含有药学上可接受的载体或赋性剂，和以下重量配比的活性成分：

白毛藤5-10份、小青草5-10份、两面针5-10份、蒲公英5-10份、菝葜5-10份、木贼草8-12份。

3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于：它含有药学上可接受的载体或赋性剂，和以下重量配比的活性成分：

白毛藤8份、小青草8份、两面针8份、蒲公英8份、菝葜8份、木贼草10份。

4.根据权利要求1至3任一所述的中药组合物，其特征在于：所述的组合物的剂型选自：合剂、软膏剂、透皮制剂、外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂。

5.根据权利要求1至3任一所述的中药组合物，其特征在于：所述的药学和食品学上可接受的载体选自：填充剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、矫味剂、包衣材料或赋形剂。

6.一种如权利要求4所述的中药组合物合剂的制备方法，其特征在于：将白毛藤、小青草、两面针、蒲公英、菝葜和木贼草总共六味中药，加水煎煮1-10小时，煎液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度为1.00-1.10，加入稳定剂，混匀，静置过夜，取上清液，加水使成1000ml，混匀，灌装，灭菌即得。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：该制备方法中加水煎煮2次，第一次加水适量，煎煮1-10小时，第2次加水适量，煎煮1-10小时。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：该制备方法中第一次加水2000-3000ml，煎煮1-5小时，第一次加水2000-3000ml，煎煮1-5小时。

9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的稳定剂选自以下组分：苯甲酸钠或者甜菊素。

10.根据权利要求1至3任一所述的中药组合物在制备风湿、类风湿关节炎药物中的应用。