CN101892311A - 高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试剂盒 - Google Patents
高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101892311A CN101892311A CN2010101891912A CN201010189191A CN101892311A CN 101892311 A CN101892311 A CN 101892311A CN 2010101891912 A CN2010101891912 A CN 2010101891912A CN 201010189191 A CN201010189191 A CN 201010189191A CN 101892311 A CN101892311 A CN 101892311A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gene
- hypertension
- site
- mfn2
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 title description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 title description 8
- 101150050341 Mfn2 gene Proteins 0.000 claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 17
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims description 12
- 230000001631 hypertensive effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 10
- 208000007530 Essential hypertension Diseases 0.000 abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000004927 fusion Effects 0.000 abstract description 4
- 108700025695 Suppressor Genes Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 3
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 abstract description 3
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 abstract description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 14
- 238000011160 research Methods 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000015889 Mitofusin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108050004120 Mitofusin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- NZCHHEFOTMKOJX-UHFFFAOYSA-K [6-[[3-carboxy-4-(3-oxido-6-oxoxanthen-9-yl)phenyl]carbamothioylamino]hexoxy-oxidophosphoryl] [5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound O1C(COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OCCCCCCNC(=S)NC=2C=C(C(=CC=2)C2=C3C=CC(=O)C=C3OC3=CC([O-])=CC=C32)C(O)=O)C(O)C(O)C1N1C=CC(=O)NC1=O NZCHHEFOTMKOJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000012098 association analyses Methods 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000029865 regulation of blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011706 wistar kyoto rat Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于分子生物学和医学领域,涉及一种检测高血压易感性基因的方法及其检测试剂盒。本发明提供了一种检测原发性高血压易感性基因的方法,它包括检测线粒体融合基因2(Mfn2)/增殖抑制基因(HSG)rs7550536位点的基因型,rs7550536带有T基因型的个体,高血压的易感性显著高于普通人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒,该试剂盒含有扩增rs7550536位点的引物,还可以包括扩增Mfn2基因第14号内含子内包含rs7550536位点的区域的引物。利用本发明检测rs7550536位点的基因型,方法简单易行,快速高效,成本低廉,为高血压的诊断和治疗提供了一个简捷的新途径。
Description
技术领域
本发明涉及分子生物学和医学领域。更具体地,涉及人线粒体融合基因2(Mfn2 gene)的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs7550536及其与原发性高血压相关性的检测。本发明还涉及检测这个SNP位点的方法和试剂盒。
背景技术
原发性高血压(essential hypertension,EH)是一种多因素、多基因疾病,由环境与遗传因素共同致病的常见而多发的心血管病症,对人类健康造成了极大的影响。随着分子医学的发展,目前已经发现的高血压相关基因已经有150余种,但是EH的发病机制仍然不完全清楚,高血压的早期诊断和预防问题仍然未能完全解决。EH是遗传因子和环境共同作用的结果,血压的变化30%-60%归因于遗传。由于环境因素是可以控制和确认的,而对高血压遗传学因素却是固定不变的。因此,对可变因素的控制,如对高血压危险因素的预防,可以在一定程度上延缓和防止高血压的发病,但是对固定不变的遗传因素的认识不足却在一定程度上严重影响着对高血压发病、诊断和治疗。因此对高血压遗传学的研究十分必要(王佐广,温绍君,吴兆苏.高血压、易感基因与单核苷酸多态性[J].高血压杂志,2001,9:259-264)。
近二十余年来,有关高血压治疗的研究更多地集中在对血压的控制和对靶器官的保护,并已取得突飞猛进的发展。但是,这些手段并不能从根本上控制血压,目前对人类内源性抗高血压基因的研究还很少,因此,研究内源性抗高血压机制是今后高血压防治研究的主要方向之一,具有重要的研究价值和应用前景,如果通过调节内源性抗高血压机制治疗高血压病,将会促进我国生物医疗技术的发展,并为我国每年节省巨大的医疗费用。
目前所发现的高血压相关基因,归结起来可以概括为促高血压基因和抗高血压基因,Mfn2属于后者。Mfn2的前身是我国学者陈光慧等[Chen GH,Zhang CH,Zhu YQ,et al.Expression of a novel gene related to hypertension[J].Natl Med J China,1997,77:823-828.]于1997年对培养的自发性高血压大鼠(SHR)和正常Wistar Kyoto(WKY)大鼠的血管平滑肌细胞进行差异显示,克隆出一个新基因——增殖抑制基因(hyperplasia suppressorgene,HSG)。它包含有4160bp的碱基对,共编码661个氨基酸(NM_014874,GeneBank AccessU41803)。后经一系列体内、体外实验发现[Chen KH,Guo XM,Dalong Ma,et al.Dysregulationof HSG triggers vascular proliferative disorders[J].Nature Cell Biol,2004,6,872-883.],HSG可以明显地抑制Ras-Raf蛋白-丝裂素活化蛋白激酶基因表达,并且可以激活抗癌基因的表达,有效地阻遏细胞周期和抑制多种细胞的增殖,且这种抑制作用是通过细胞凋亡的方式实现的。因此HSG基因是原发性高血压的候选基因之一,后经基因功能研究表明,HSG基因参与线粒体融合,因此正式命名为线粒体融合基因2(mitofusin 2,Mfn2)但是目前对Mfn2与EH的研究较少,没有证实rs7550536与EH相关性的报道。
综上所述,为了最终实现治疗高血压,本领域迫切需要寻求原发性高血压易感基因,并开发检测原发性高血压易感基因的方法、试剂盒,以及相关的治疗药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测(包括早期诊断)高血压易感基因单核苷酸多态性位点的方法及检测试剂盒。
本发明提供了一种高血压易感性基因单核苷酸多态性位点的检测方法,即检测Mfn2基因rs7550536位点的基因型,rs7550536带有T基因型的个体高血压的发病风险显著高于普通人群。
所述的rs7550536,位于Mfn2的内含子14中(片段重叠群contig:NT_021937.19位置8071776T/G)其中,脱氧核糖核酸(DNA)序列编号:rs7550536位置基于SEQ ID NO:1/6;引物1基于SEQ ID NO:2/6;引物2基于SEQ ID NO:3/6;探针1基于SEQ ID NO:4/6;探针2基于SEQ ID NO:5/6;扩增产物基于SEQ ID NO:6/6。
具体而言,该方法包括步骤:(a)抽提样品的基因组DNA,扩增获得Mfn2基因内含子14;(b)检测步骤(a)产物中单核苷酸多态性位点rs7550536的基因型。
所述的扩增Mfn2基因内含子14的引物序列如SEQ ID NO 2和SEQ ID NO 3所示。
所述的检测rs7550536的基因型的探针序列如SEQ ID NO 4和SEQ ID NO 5所示。
上述方法中涉及的测序、扩增、抽提基因组DNA等技术均可采用本领域的常规操作方法。
本发明提供了一种检测高血压易感基因的试剂盒,它含有与位点rs7550536结合的探针。
在本发明的一个实施例中,与位点rs7550536结合的探针的序列如SEQ ID NO:4和SEQID NO:5所示。
上述试剂盒还可以包括特异性扩增Mfn2基因内含子14中包含rs7550536位点的区域的引物。
在本发明的一个实施例中,与特异性扩增Mfn2基因内含子14中包含rs7550536位点的区域的引物的序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。
本发明经过多年研究,首次证明了Mfn2基因单核苷酸多态性位点rs7550536(位于Mfn2内含子14中,片段重叠群contig:NT_021937.19位置8071776T/G)与高血压密切相关,而且发现了它的新功能:Mfn2基因单核苷酸多态性位点rs7550536位于Mfn2,内含子14中(片段重叠群contig:NT_021937.19位置8071776T/G)基因型的改变将导致高血压的发病风险升高,其中关联研究结果显示,在Mfn2基因rs7550536T→G在病例和对照组中的分布存在显著性差异(p<0.05),该SNP多态性可改变转录因子结合位点。在此基础上完成了本发明。
本发明提供了一种对个体的高血压易感性进行诊断的方法,它包括步骤:检测该个体的Mfn2基因rs7550536位点的基因型,以此判断该个体患高血压的发病风险是否高于普通人群。
在一优选例中,所述的差异是选自rs7550536的单核苷酸多态性。rs7550536位于Mfn2,内含子14中(片段重叠群contig:NT_021937.19位置8071776T/G)。其中,脱氧核糖核酸(DNA)序列编号:rs7550536位置基于SEQ ID NO:1/6。
本发明提供了一种检测样品是否存在Mfn2基因的单核苷酸多态性的方法,包括步骤:
(a)用Mfn2基因内含子14特异性引物扩增样品的基因组DNA,得到扩增产物;和
(b)检测扩增产物中单核苷酸多态性位点rs7550536的基因型。
Mfn2基因的详细序列可参见登录号为rs7550536的核苷酸序列(可参见网址http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)。
本发明人对Mfn2基因中的内含子14中(片段重叠群contig:NT_021937.19位置8071776T/G)区域进行了测序。
Mfn2基因rs7550536位点的多态性可直接用于高血压的个性化治疗。在使用本发明Mfn2基因rs7550536位点的多态性时,还可同时使用其他治疗高血压的药剂。
本发明还提供了一种药物组合物,它含有安全有效的本发明Mfn2蛋白以及药学上可接受的载体或赋形剂。这类载体包括(但并不限于):盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其组合。药物制剂应与给药方式相匹配。本发明的药物组合物可以被制成针剂形式,例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。诸如片剂和胶囊之类的药物组合物,可通过常规方法进行制备。药物组合物如针剂、溶液、片剂和胶囊在无菌条件下制造。活性成分的给药量是治疗有效量,例如每天0.1微克/千克体重-约10毫克/千克体重。此外,本发明的多肽还可与其他治疗剂一起使用。
使用药物组合物时,是将安全有效量的Mfn2蛋白或其拮抗剂、激动剂施用于普哺乳动物,其中该安全有效剂量通常至少约0.1微克/千克体重,而且在大多数情况下不超过约10毫克/千克体重,较佳地该剂量是约0.1微克/千克体重-约100毫克/千克体重。当然,具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素,这些都是熟练医师技能范围之内。
检测Mfn2基因的rs7550536的基因型也可用于诊断高血压。检测可以针对基因组DNA,也可针对Mfn2基因的扩增片段。Mfn2基因的rs7550536的基因型可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。
本发明提供了一种检测原发性高血压易感性基因的方法,它包括检测线粒体融合基因2(Mfn2)的rs7550536位点的基因型,rs7550536带有T基因型的个体,高血压的易感性显著高于普通人群。本发明还公开了相应的检测试剂盒,该试剂盒含有扩增rs7550536位点的引物,还可以包括扩增Mfn2基因第14号内含子区域的引物。利用本发明检测rs7550536位点的基因型,方法简单易行,快速高效,成本低廉,为高血压的诊断和治疗提供了一个简捷的新途径。
附图说明
图1是MFn2基因rs7550536位点基因型的检测结果。
图2是测序结果截图。显示了rs7550536的一种SNP基因型的测序结果。rs7550536位于Mfn2,内含子14中(片段重叠群contig:NT_021937.19位置8071776T/G)。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件如Sambrook等人,分子克隆;实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1荧光PCR检测
一、实验材料
7900HT荧光定量PCR仪购自美国ABI公司,聚合酶链反应液(TaqMan EXPress Master Mix)由美国应用生物系统公司(ABI)定制合成。
二、引物及探针设计与合成:
以MFn2基因内含子14的部分序列为模板,使用Primer ExpressTM 2.0软件分析TaqMan引物和探针位点,并由美国应用生物系统公司(ABI)定制合成。
检测用引物:
MFn2基因rs7550536上游引物序列:5′-AACATGAAGGCTCCTTGGCT-3′(SEQ ID NO 2)
MFn2基因rs7550536下游引物序列:5′-ACACCTGCAGAGCACATGGT-3′(SEQ ID NO 3)荧光探针:
MFn2基因rs7550536荧光探针1:5′-VIC-CCTGGTAGGGATGGG-TAMRA-3′(SEQ ID NO 4)
MFn2基因rs7550536荧光探针2:5′-FAM-CCTGGTAGTGATGGGC-TAMRA-3′(SEQ ID NO 5)
三、样本检测:
实验共检测915例高血压病例和493例正常对照人群,每例收集血样标本约2ml,用酚/氯仿抽屉基因组DNA,抽提结果用微量紫外/可见光分光光度计(INFINIGEN公司)检测。
按如下体系进行荧光PCR扩增,最后用SDS 2.3扫描并聚类分析
384孔板(ul) | |
TaqMan EXPress Master Mix(2X) | 2.5 |
20X working stock of SNP Genotyping Assay | 0.25 |
gDNA(3ng/ul左右) | 2.25 |
反应总体积 | 5 |
四、型检测结果:
基因组DNA抽提的检测结果:
所有样本的基因组DNA符合检测要求(260/280>1.8,浓度>10ng/ul,如图1所示样本1175号的检测结果)
MFn2基因rs7550536位点基因型的检测结果
实施例2
用测序法检测原发性高血压易感基因MFn2基因的rs7550536位点。挑选上述高血压病例-对照组样本各10例进行测序判断rs7550536的基因型。
一、实验方法
PCR测序引物仍采用上述荧光PCR用引物,扩增的产物经纯化后直接测序。测序的仪器是ABI公司的3130xl遗传分析仪,用sequence analysis 5.2分析软件进行分析,结果用chromas也可以查看。
二、实验结果
测序结果截图如图2所示。
最终,20例的测序结果与7900荧光PCR的基因型分析结果完全一致。
三、MFn2基因rs7550536基因型和高血压易感的关联分析
MFn2基因rs7550536在高血压病人和对照中分布的比较采用RxCχ2检验.用SPSS软件进行统计分析,检测结果的SPSS软件分析结果如下表所示:
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用做参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本发明的上述讲述内容之后,本领域技术人员可以对本发明做各种改动或修改,这些形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
序列表
SEQUENCE LISTING
<110>首都医科大学附属北京安贞医院
复旦大学
<120>高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试
剂盒
<130>1044
<160>6
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>52
<212>DNA
<213>Homo sapiens
<220>
<221>misc_feature
<222>(27)..(27)
<223>n=g or t
<400>1
tggggccctt cagatggccc tggtagngat gggccccaga ggagggtggg cc
52
<210>2
<211>20
<212>DNA
<213>Artificial
<400>2
aacatgaagg ctccttggct 20
<210>3
<211>20
<212>DNA
<213>Artificial
<400>3
acacctgcag agcacatggt 20
<210>4
<211>15
<212>DNA
<213>Artificial
<400>4
cctggtaggg atggg 15
<210>5
<211>16
<212>DNA
<213>Artificial
<400>5
cctggtagtg atgggc 16
<210>6
<211>115
<212>DNA
<213>Artificial
<400>6
aacatgaagg ctccttggct ggggcccttc agatggccct ggtagtgatg ggccccagag
60
gagggtgggc cacagagagg ctgcactcca ggctgaccat gtgctctgca ggtgt
115
Claims (9)
1.一种高血压易感性基因的检测方法,其特征在于,检测Mfn2基因rs7550536位点的基因型,rs7550536带有T基因型的个体高血压的发病风险显著高于普通人群。
2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,rs7550536位点位于Mfn2基因内含子14内。
3.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,该方法包括步骤:
(a)抽提样品的基因组DNA,扩增获得Mfn2基因内含子14中包含rs7550536位点的区域;
(b)检测步骤(a)产物中单核苷酸多态性位点rs7550536的基因型。
4.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,扩增Mfn2基因内含子14中包含rs7550536位点的区域的引物序列如SEQID NO 2和SEQ ID NO 3所示。
5.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,检测rs7550536的基因型的探针序列如SEQ ID NO 4和SEQ ID NO 5所示。
6.一种检测高血压易感基因的试剂盒,其特征在于,它含有与位点rs7550536结合的探针。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,与位点rs7550536结合的探针的序列如SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示。
8.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,它还包括特异性扩增Mfn2基因内含子14中包含rs7550536位点的区域的引物。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,特异性扩增Mfn2基因内含子14中包含rs7550536位点的区域的引物的序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010189191 CN101892311B (zh) | 2010-06-01 | 2010-06-01 | 高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201010189191 CN101892311B (zh) | 2010-06-01 | 2010-06-01 | 高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试剂盒 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101892311A true CN101892311A (zh) | 2010-11-24 |
CN101892311B CN101892311B (zh) | 2013-02-27 |
Family
ID=43101654
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201010189191 Expired - Fee Related CN101892311B (zh) | 2010-06-01 | 2010-06-01 | 高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101892311B (zh) |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104099329A (zh) * | 2013-04-02 | 2014-10-15 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因位点及其检测方法 |
CN104450688A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因变异位点及其检测方法 |
CN104450690A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种原发性高血压易感基因变异位点及其检测方法 |
CN104450884A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感性相关基因的变异位点及其检测方法 |
CN104450689A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因位点及其检测方法 |
CN105349629A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因位点rs11587948及其检测方法 |
CN105349630A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因位点rs11553681及其检测方法 |
CN105349633A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2459位点变异及其检测方法 |
CN105349635A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2500位点变异及其检测方法 |
CN105349639A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因位点rs61776496及其检测方法 |
CN105349634A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因变异位点及其检测方法 |
CN105349631A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2380位点变异及其检测方法 |
CN105349628A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因Mfn2的变异位点及其检测方法 |
CN105349638A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2786位点变异及其检测方法 |
CN105349636A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种原发性高血压易感基因变异位点及其检测方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004070057A2 (de) * | 2003-02-07 | 2004-08-19 | Florian Lang | Verwendung eines neuen polymorphismus im hsgk1-gen zur diagnose der hypertonie und verwendung der sgk-genfamilie zur diagnose und therapie des long-q/t-syndroms |
CN101608219A (zh) * | 2008-06-20 | 2009-12-23 | 上海主健生物工程有限公司 | 高血压遗传检测试剂盒 |
-
2010
- 2010-06-01 CN CN 201010189191 patent/CN101892311B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004070057A2 (de) * | 2003-02-07 | 2004-08-19 | Florian Lang | Verwendung eines neuen polymorphismus im hsgk1-gen zur diagnose der hypertonie und verwendung der sgk-genfamilie zur diagnose und therapie des long-q/t-syndroms |
CN101608219A (zh) * | 2008-06-20 | 2009-12-23 | 上海主健生物工程有限公司 | 高血压遗传检测试剂盒 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
王佐广等: "高血压相关基因HSG上游调控序列单核苷酸多态性的发现及其与高血压的关联", 《首都医科大学学报》, vol. 25, no. 4, 31 December 2004 (2004-12-31), pages 464 - 468 * |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104099329A (zh) * | 2013-04-02 | 2014-10-15 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因位点及其检测方法 |
CN104450688A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因变异位点及其检测方法 |
CN104450690A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种原发性高血压易感基因变异位点及其检测方法 |
CN104450884A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感性相关基因的变异位点及其检测方法 |
CN104450689A (zh) * | 2014-10-28 | 2015-03-25 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因位点及其检测方法 |
CN105349629A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因位点rs11587948及其检测方法 |
CN105349630A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因位点rs11553681及其检测方法 |
CN105349633A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2459位点变异及其检测方法 |
CN105349635A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2500位点变异及其检测方法 |
CN105349639A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因位点rs61776496及其检测方法 |
CN105349634A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种与高血压易感性相关的基因变异位点及其检测方法 |
CN105349631A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2380位点变异及其检测方法 |
CN105349628A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 高血压易感基因Mfn2的变异位点及其检测方法 |
CN105349638A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 线粒体融合基因2的-2786位点变异及其检测方法 |
CN105349636A (zh) * | 2015-10-23 | 2016-02-24 | 首都医科大学附属北京安贞医院 | 一种原发性高血压易感基因变异位点及其检测方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101892311B (zh) | 2013-02-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101892302B (zh) | 高血压易感基因的rs2336384位点的用途及检测试剂盒 | |
CN101892311B (zh) | 高血压易感基因的单核苷酸多态性位点rs7550536的检测方法及检测试剂盒 | |
CN101892305B (zh) | 高血压易感基因的rs2295281位点的检测方法及检测试剂盒 | |
CN102586408B (zh) | 高血压易感基因Mfn2单核苷酸多态性位点rs3820189的检测方法及检测试剂盒 | |
Ryu et al. | − 759 C/T polymorphism of 5-HT2C receptor gene and early phase weight gain associated with antipsychotic drug treatment | |
KR20120093297A (ko) | 심혈관 병폐의 약리유전학적 치료를 위한 방법들 및 시스템들 | |
Pawlik et al. | Involvement of C3435T and G2677T multidrug resistance gene polymorphisms in release of cytokines from peripheral blood mononuclear cells treated with methotrexate and dexamethasone | |
CA2964667A1 (en) | Methods and compositions for treating a subject with a smad7 antisense oligonucleotide | |
Ertugrul et al. | No association of the T102C polymorphism of the serotonin 2A receptor gene (HTR2A) with suicidality in schizophrenia | |
CN101886125B (zh) | 高血压易感基因单核苷酸多态性位点rs2236058的检测方法及检测试剂盒 | |
CN101886121B (zh) | 高血压易感基因的rs873457位点的检测方法及检测试剂盒 | |
CN101892297B (zh) | 高血压易感基因单核苷酸多态性位点的检测方法及其试剂盒 | |
CN101886129B (zh) | 高血压易感基因AGTR1单核苷酸多态性位点rs388915的检测方法及检测试剂盒 | |
CN101892298B (zh) | 高血压易感基因单核苷酸多态性位点rs2236055的检测方法及其试剂盒 | |
CN101892296B (zh) | 一种检测高血压易感基因的方法及检测试剂盒 | |
CN101892303B (zh) | 高血压易感基因的rs4846085位点的检测方法及检测试剂盒 | |
CN101979657B (zh) | 高血压易感基因的rs2878677位点的检测试剂盒 | |
CN101892301B (zh) | 一种高血压易感基因的检测方法及检测试剂盒 | |
Frezza et al. | Allelic frequencies of 3'Ig heavy chain locus enhancer HS1, 2-A associated with Ig levels in patients with schizophrenia | |
CN101805784B (zh) | 人wnk4基因的单核苷酸多态性及其用途 | |
Yan et al. | Analysis of the 14 bp insertion and deletion polymorphism in human leukocyte antigen‐G gene in two Chinese ethnic populations | |
CN102732602A (zh) | 高血压易感基因WNK1基因rs2255390位点的检测方法及其检测试剂盒 | |
CN104099329A (zh) | 一种与高血压易感性相关的基因位点及其检测方法 | |
EP2839281A1 (en) | Compositions and methods for identifying and diagnosing salt sensitivity of blood pressure | |
CN104450688A (zh) | 一种与高血压易感性相关的基因变异位点及其检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130227 Termination date: 20170601 |