CN101886094A - 制备高光学纯度l-乳酸钠的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种利用生产高光学纯度L-乳酸的嗜热菌株连续发酵生产L-乳酸钠的新型工艺。本发明用基因克隆的方法选育出L-乳酸高产菌株RY-18，利用淀粉质或葡萄糖类原料发酵生产L-乳酸，L-乳酸的光学纯度可以达到99.5％以上；发酵液采用MgCO₃做中和剂，生成的乳酸镁在pH为9.5～10.8条件下与NaOH反应生产L-乳酸钠和Mg(OH)₂，氢氧化镁经过处理之后可以作为新的中和剂MgCO₃循环利用；L-乳酸钠浆料经过脱色、纳滤和减压蒸馏纯化、浓缩后可以制得浓度≥99.5％的L-乳酸钠产品，产品的光学纯度≥99.5％。另外，本发明的葡萄糖转化率≥92％，发酵水平≥170g/L，发酵周期35h。本发明采用的多为可连续操作的生产工艺，发酵液中和剂能够循环利用，可以实现低耗能、环境友好型生产高光学纯的L-乳酸钠。

Description

制备高光学纯度L-乳酸钠的方法

技术领域

本发明涉及用微生物合成光学纯度高的L-乳酸并连续生产L-乳酸钠盐的方法，属于生物技术领域。

背景技术

乳酸钠是乳酸与氢氧化钠中和反应后得到的有机酸盐，有吸湿性。能与水、乙醇或甘油任意混合，纯品为无色或微黄色透明粘稠液体。市面出售的乳酸由于生产工艺的差别和用途的不同具有40％～80％间不同浓度的产品，也有少部分产品含量在90％以上。一般市售乳酸钠多为外消旋DL-型乳酸钠，也有光学纯度不高的L-乳酸钠。

乳酸钠自开发以来，在食品、化妆品和医疗行业上具有重要的作用。在食品行业，乳酸钠可以用作调味料、pH值调节剂(如用于酒精)、风味改进剂、焙烤食品(蛋糕、蛋卷、饼干等)的品质改进剂、保湿剂、干酪增塑料、防冷剂、抗氧化增效剂、乳化剂，还可以用作具有防腐作用的食品添加剂。乳酸钠不仅可抑制大多数腐败菌的繁殖，而且对许多致病菌，如李斯特单核增生菌、沙门氏菌、肉毒梭状芽孢杆菌等均有不同程度的抑制作用，从而有效地延长肉制品的货架期。L-乳酸钠已成功地应用于熟火腿、烤牛肉、鸡胸肉等整块肉产品和热狗肠、鲜香肠、熏肠和腊肠等碎肉产品。化妆品行业可以用作保湿剂作为甘油替代品；吸湿性好，作调理剂和皮肤或头发的柔润剂，用于护肤膏箱、乳液、香波、护发素，透气性好，保湿保润效果好，延展性和铺展性能好。医疗方面，用于解除因腹泻脱水、糖尿病、肾炎等症所产生的酸中毒现象，还可用于急性泌尿系感染需要碱化尿液者。在高钾血症或普鲁卡因胺等引起的心律失常伴有酸血症时，用本品较适宜。1/6摩尔乳酸钠不但具有纠正代谢性酸中毒的效能，还有制酸、止痛作用。

研究发现人体和动物体内不能代谢D-乳酸。D-乳酸摄入过多可以引起D-乳酸血症，表现为恶心呕吐；对思维有害，引起神经症状——语言模糊不清，意识错乱，不能集中精力，嗜睡，幻觉、行动笨拙、无力，共济失调，步态不稳等症状。研究表明D-乳酸对小鸡的记忆力具有抑制作用，对小牛神经具有毒性，也会对小鼠的神经中枢有负面影响，给空腹48h的小鼠静脉注射外消旋的DL-乳酸可以造成严重的心率失调导致的死亡。大剂量的D-乳酸也可以使兔子死亡。

为此，世界卫生组织规定，成人每天摄入的D-乳酸量每公斤体重不得超过100mg，并禁止在婴儿食品中添加D-乳酸。从人类的长远生存考虑，D/DL-乳酸在食品、化妆品行业的应用也应该进行限制，更应当杜绝在医疗方面的应用。因此开发具有高光学纯度的L-乳酸钠生产具有重要的现实意义。

目前世界上以葡萄糖、淀粉质原料经根霉、细菌发酵生产乳酸。国内大多利用根霉发酵生产L-乳酸，与细菌发酵相比，具有发酵快、菌体生长营养要求简单、可以使用无机氮源、发酵液含杂质较少等优点。但是其最大的缺点是发酵对糖的转化率较低通常只有70％左右，并且发酵过程需要供氧设备并且能量消耗大使投资成本增高，发酵过程容易染菌造成产酸低、光学纯度低，甚至会造成倒灌报废，生产过程的操作性较差。申请号为96121927.0的专利公开了用凝结芽孢杆菌来发酵生产L-乳酸，但是该菌对培养基的要求高，不适合工业化应用。也可以采用乳杆菌生产L-乳酸，但是发酵时容易混入产D-乳酸的德氏乳杆菌。专利号为CN 1306091A公开一种利用嗜热性乳杆菌在高温下厌氧发酵生产L-乳酸，所采用的嗜热性乳杆菌(Lactobacillus thermophillus)Lt616对糖转化率高于90％、产L-乳酸7.0％以上、光学纯度大于95％。卡吉尔公司从基因改造的酵母中生产L-乳酸，其申请的专利CN 101157930A公开重组酵母在低pH的条件下生产L-乳酸，pH为2.8～3.0时细胞收率仍然可达75～81％、0.1～0.4g/g小时的比生产率和14～40g/L的滴度，可以减少乳酸后续纯化处理工序，降低成本。

但是，这些发明中所产生的L-乳酸光学纯度都不能用来生产高光学纯度、具有特殊用途特别是医用的L-乳酸钠。医疗方面最好用纯度在99％以上的L-乳酸钠。

L-乳酸钠的生产研究比较早，常规的方法是采用成品乳酸(含量60～80％)与氢氧化钠溶液(40～50％)中和反应，再利用活性炭脱色、过滤、真空浓缩后可以得到乳酸钠含量为72～78％的成品。乳酸钠成品多为水溶液，pH为6.5～7.5。连续发酵法生产乳酸钠的普通方法是向发酵液中加入Ca(OH)₂作为中和剂，后续中加入硫酸从乳酸钙中得到纯乳酸，与氢氧化钠反应制得乳酸钠。这样的生产方法工序多、过程繁多、费力、耗时，并且生产过程利用大量的硫酸、生成的大量硫酸钙固体废物，对环境造成很大的负担。

专利CN 1249301A公布一种酯化法替代常规通过中和、酸解反应生产乳酸钠的方法。采用食用级、精制级乳酸和醇反应先酯化再与氢氧化钠进行皂化反应，经吸附、脱色、离子交换、净化，最后调pH值得到最终的产品。该方法可以解决酸用量大和固体废弃物多等环境方面的压力，但是中间产物乳酸酯需要经过蒸馏分离，能耗高，也不适用于大规模的生产应用。

美国专利US 3429777描述了由粗乳酸溶液用可溶性蛋白和可溶性磷酸盐制备乳酸镁，通过向乳酸镁溶液中加入苛性钠制得乳酸钠的可能性。然而没有提供详细的实施过程及在何种条件下进行。为了最佳的利用镁做乳酸发酵中和剂的所有益处，应该能够容易的将由乳酸镁形成的乳酸盐与其副产物分离。优选副产物可以循环利用，以获得没有固体或液体废物排放条件下实施、环境友好型工艺。

专利CN 101018756A公开一种利用乳酸镁为介质生产其他乳酸盐和乳酸的方法。发酵过程中以乳酸镁作为中和剂，以乳酸镁盐为中间产物进一步与钠、钙、铵的氢氧化物或碳酸盐反应，形成相对应的乳酸盐，也可以进一步处理制备高纯度、高品质的乳酸。这个发明给生产乳酸盐提供了一种很好的思路。

尽管乳酸镁作为发酵中和剂制备其他乳酸盐具有可行性，但是用Mg(OH)₂作为中和剂，由于其同届度小于发酵生成的乳酸反应需要在剧烈搅拌下进行，并且生成的乳酸镁与碱反应后生成新的乳酸盐的分离纯化步骤详细介绍甚少，尤其是从乳酸发酵液为起始生产乳酸盐的连续制备工艺没有提及。

为了解决已有高纯度L-乳酸发酵生产以及乳酸钠生产中存在的问题，通过多方探索和工艺优化，得到本发明的新型L-乳酸钠连续生产工艺。

本文所用的术语“高纯度”是指L-乳酸的纯度至少为95％，更佳的在98％以上，本发明的方法可以达到99.5％以上。

本发明中所采用的分析方法：

发酵液总糖：费林氏法进行测定；

发酵液总酸：生物传感分析仪测定；

L-乳酸光学纯度检测方法：高压液相色谱法；

发酵液pH检测方法：pH计；

乳酸钠pH值测定方法：以阳离子交换树脂(药典法)做对照，进行氧化还原法测定。

发明内容

本发明提供一种利用嗜热凝结芽孢杆菌发酵生产光学纯度大于99.5％的L-乳酸并且连续生产乳酸钠的环境友好、低成本投入的新型生产工艺。

本发明的另一目的是提供一种高光学纯度菌株发酵生产L-乳酸的生产工艺。

本发明的又一目的是提供一种分离纯化乳酸盐的新工艺。

为了达到上述目的，本发明所采用的工艺方法包括以下步骤：

1.生产菌种的遗传改良：由江南大学中国高校工业微生物资源和信息中心(CICIM-CU)提供菌株CICIM B1820(田康明 石贵阳 王正祥.食品研究与开发2009，30(8)：1-5)，通过多聚酶链反应，以人工合成的寡核苷酸(序列No.1和No.2)为引物，从菌株CICIM B1820的染色体DNA中克隆出其中编码L-乳酸脱氢酶的基因，将其插入到克隆载体如pET-28a中，获得重组质粒pET-ldhL，再通过原生质体转化法(莫静燕 陈献忠 王正祥.生物技术2009，19(5)：75-77)将重组质粒pET-ldhL转化入菌株CICIM B1820中，通过筛选获得重组菌RY-18。

2.发酵：将淀粉质原料在115～120℃的温度下蒸煮20～30min灭菌，输送入液化罐在80～90℃加入0.1％的中温α-淀粉酶液化60～70min，将充分糖化后的料液输送到发酵罐，冷却至65℃，加入0.1％～0.3％的糖化酶和重组嗜热菌生长所需营养物质，厌氧条件下于50～56℃、pH值5.0～6.5，更适合的为5.1～5.6条件下接入5％～7％的重组嗜热菌RY-18，发酵32～35h生产L-乳酸。

3.陶瓷膜过滤：将发酵液用陶瓷膜进行过滤，除去发酵液中的菌体、多糖胶体及蛋白等大分子杂质，过滤陶瓷膜孔径为0.01～1.0μm。

4.乳酸镁介质分离：将经过步骤4处理的发酵液冷却至20～25℃，乳酸镁从发酵液中结晶析出。

5.置换反应：将乳酸镁的介质经过预处理后与氢氧化钠反应，生成L-乳酸钠和氢氧化镁沉淀。

6.过滤：对步骤6中反应后的介质流进行过滤，得到含有L-乳酸钠的清液，滤渣Mg(OH)₂经过处理后生成MgCO₃可以作为新的中和剂在步骤3加入，循环利用。

7.脱色：含有乳酸钠的发酵液经过活性炭过滤、脱色。

8.pH值调节：用少量的HCl调节pH值为7.0，以获得中性产品。

9.纳滤：料液在压力为1.0～2.0MPa，频率为30～50Hz，温度18～28℃的条件下进行纳滤膜过滤。

10.减压蒸馏：降低压强，蒸馏除去多余水分，即得到乳酸钠产品。

其中步骤2所述的发酵培养基中采用的淀粉质原料包括玉米粉、玉米淀粉、薯干粉、土豆粉、土豆淀粉或木薯粉中的一种或一种以上；糖包括葡萄糖、蔗糖、麦芽糖或乳糖等的一种或多种；氮源包括米糠、鼓皮、麦芽、麦根、硫酸铵、尿素、玉米浆等的一种或多种；其他营养物质即包括：磷酸盐、硫酸镁、氯化钠等；培养基的pH值为5.5～6.5之间；

其中步骤2所述发酵后得到的L-乳酸光学纯度≥99.5％(以L-乳酸镁的光学纯度计)；

其中步骤2所述pH条件需要在发酵过程中不断加入MgCO₃进行调节、保持；

其中步骤2反应后得到乳酸镁以浆料的形式存在，浓度为16～43wt.％(以总浆料为基础，按无水物计算)；

其中步骤3所述陶瓷膜过滤是在压力0.1～0.3MPa、过滤温度为50～80℃条件下进行；

其中步骤3所述陶瓷膜过滤出的含菌体、蛋白等浓缩截留液可作饲料回收，生产高蛋白饲料；

其中步骤4所述的结晶需要用水洗，该水可以是热的可以是冷的，以得到更纯的乳酸镁浆料；

其中步骤5所述的预处理过程包括将析出的乳酸镁过滤、分离、水洗后进行浓缩，使介质中的乳酸镁含量增加为17～45wt.％的浆料；反应后获得的乳酸钠浆料为30～38wt.％的浆料；

其中步骤5所述，乳酸镁在反应介质的液体部分中以至多45wt.％的浆料(以无水物计)，优选在反应介质的液体部分中以至多30～40wt.％的浆料与氢氧化钠反应。本方法可以容易的操作反应介质的液体部分中浓度至多33wt.％的所得乳酸钠溶液；

其中步骤5所采用的氢氧化钠是质量分数为54～56％的水溶液；

其中步骤5所述反应在搅拌槽反应器中，剧烈搅拌使两种反应物充分的接触进行反应；

其中步骤5所述反应在pH为9～12条件下进行，更有选在pH为9.5～10.8此条件下氢氧化镁为沉淀的颗粒大小形态易与乳酸钠溶液分离；pH＞12时形成多孔的、体积大的Mg(OH)₂颗粒，所形成的滤饼固体含量低不利于过滤，并且乳酸钠溶液中将含有过量的碱需要中和；pH＜9时形成的氢氧化镁颗粒太小，形成凝胶状层，不易被过滤；

其中步骤5中反应在20～100℃条件下进行，优选在45～50℃温度下进行。反应温度与火的具有最佳颗粒大小和形态的氢氧化镁颗粒有关。当温度＜20℃时分离时间太长，＞100℃时滤饼固体含量太低。更优选地在45～50℃进行，因为此温度下乳酸镁和氢氧化钠的溶解度都相对较大促进反应进行，又不造成加热过程能量的过度消耗；

其中步骤6过滤前将介质的pH升高至10.5～12，以利于氢氧化镁和反应介质的分离；

其中步骤6中采用连续水平带式过过滤机过滤，浆料水平布置在过滤介质上，利用浆料重力和真空吸力实现氢氧化镁的分离，并且，错做过程实现卸料的自动化、连续化；

其中步骤6所述经过滤使Mg(OH)₂与反应介质分离，分离之后用水洗涤，除去其它杂质离子，然后将浆料在加热、搅拌的条件下通入空气反应，得到碳酸镁、碳酸氢镁和少量没有反应的氢氧化镁，将混合物干燥结晶之后连续的加入步骤2中的发酵液做为新的中和剂；

其中步骤7中所述脱色过程采用芯式活性炭过滤器直接过滤脱色。发酵液由由滤器侧入进口压入，经活性炭滤芯自外向里透过滤层而被过滤成清澄液体，然后经出口底出排出。从而液体被达到过滤的目的；

其中步骤7中所述脱色过程，脱色率≥80％；

其中步骤8所述方法采用3M～5M的HCl调节含有乳酸钠浆料的pH值；

其中步骤9所述的纳滤膜为截留分子量为50～500Dalton纳滤膜，可以过滤除去步骤8中没有脱掉的小分子色素物质、多糖、抗生素物质，还可以除去Mg²⁺、C^l-等杂离子；

其中步骤10所述减压浓缩大批量生产时在在双效浓缩罐中进行，真空度为0.04～0.05Mpa；

其中步骤10所述工艺浓缩后得到浓度为≥99.5％的L-乳酸钠产品。

本发明的技术方案的主要进步主要体现在：

(1)采用新型的L-乳酸发酵菌株嗜热凝结芽孢杆菌，可以生产光学纯度≥99.5％的L-乳酸。

(2)本工艺利用的发酵原料来源广，糖化率高，发酵水平高。能够以玉米、甘薯、木薯、马铃薯等为原料发酵生产高光学纯度的L-乳酸，葡萄糖转化率≥92％，发酵水平≥170g/L，发酵周期35h，乳酸生成L-乳酸钠的转化率≥91％。

(3)选用陶瓷膜过滤发酵液，过滤膜孔径分布率窄，分离提高了提取除杂的效率，还省去了絮凝工序，大幅缩短提取时间，更有效的出去了发酵液中的蛋白质，废水排放量及COD显著降低，促进实现清洁生产。因此，本工艺的采用具有良好的经济、环境效益。

(4)脱色中选用活性炭过滤器连续脱色，避免了传统工艺中向滤液中加入活性炭进行搅拌、过滤步骤，简化了工艺并降低了能耗，还可以连续化生产。

(5)以MgCO₃作为发酵液的中和剂，搅拌条件下反应在制得乳酸钠的同时置换得到Mg(OH)₂，经过进一步通气与CO₂反应又生成MgCO₃，将得到的产物又循环到反应中，减少了传统方法中的固体副产物、废弃物的产出，减少了后续处理工艺，节约成本的同时也实现了生产过程的绿色化，减轻了环境负担。

本发明制的的高浓度乳酸钠溶液其质量标准如下：

性状：无色或近乎无色的透明粘稠液体

旋光度：左旋|α|b²⁵≥99.5％

含量：≥99.5％

液性(pH)：6.5～7.5

确认试验：呈钠盐、乳酸盐的定性反应

色号：≤50APHA

氯化物：≤0.05％

砷(以As计)：3ppm以下

重金属(以pb计)：10ppm以下

镁：2ppm以下

铁：2ppm以下

醛：5min内不呈暗褐色

甲醇、甲酯：≤0.025％

苹果酸盐、酒石酸盐及柠檬酸盐：液体澄明

挥发性脂肪酸盐：无脂肪酸味的臭气发生

附图说明

图1高光学纯度L-乳酸钠生产工艺流程

具体实施方式

实施例1：嗜热型高产L-乳酸的凝结乳杆菌的选育

(1)培养基组成

种子培养基(g/L)：葡萄糖20，酵母膏10，蛋白胨10，无水MgSO₄ 0.25，轻质MgCO₃7.5～8.2，pH 5.0～6.0。

发酵培养基(g/L)：葡萄糖170～190，酵母膏1～5，蛋白胨0.5～5，无水MgSO₄ 0.25～0.5，轻质MgCO₃ 65～75，pH 5.0～6.0。

(2)遗传育种

出发菌种CICIM B1820(田康明 石贵阳 王正祥.食品研究与开发2009，30(8)：1-5)，通过多聚酶链反应，以人工合成的寡核苷酸(序列No.1和No.2)为引物，从菌株CICIM B1820的染色体DNA中克隆出其中编码L-乳酸脱氢酶的基因，将其插入到克隆载体如pET-28a中，获得重组质粒pET-ldhL，再通过原生质体转化法(莫静燕 陈献忠 王正祥.生物技术2009，19(5)：75-77)，将重组质粒pET-ldhL转化入菌株CICIMB1820中。转化混合物在含5～50μg/mL卡那霉素的培养基上筛选，获得重组菌RY-18。

对重组菌RY-18进行15L发酵罐发酵实验进行确认。用生物传感分析仪测定L-乳酸产量，高效液相确定总乳酸产量以及光学构型分析。三个批次的重组菌RY-18的L-乳酸产酸水平分别为186g/L、176g/L和170g/L，光学纯度分别为：99.5％、99.6％、99.5％。

实施例2发酵生产L-乳酸钠

实施例1筛选获得的重组嗜热凝结芽孢杆菌55-65℃静止培养48h后用于发酵生产的种子。

(1)一级5L自控玻璃罐培养

将甘薯粉在115℃的温度下蒸煮20min灭菌，在80℃加入0.1％的中温α-淀粉酶(江阴百圣龙生物工程公司)液化60min，将充分液化后的料液4L输送到发酵罐，冷却至65℃，加入0.1％～0.3％的糖化酶和重组嗜热菌生长所需营养物质，厌氧条件下于50～56℃、pH值至5.0～6.5，更适合的为5.0～5.5条件下接入5％～7％的重组嗜热菌RY-18，发酵32h，分析得乳酸的含量为172g/L，L-乳酸的光学纯度为99.6％，葡萄糖转化率为92.2％。

发酵过程流加MgCO₃以确保发酵液pH为5.0～6.0之间，发酵结束后经过过滤、活性炭脱色等后续纯化、回收工艺，得到99.6％的L-乳酸钠793.4g，分析得L-乳酸钠光学纯度为99.6％，L-乳酸制备L-乳酸钠的转化率为92.3％。

(2)二级500L发酵罐培养

将淀粉质原料在120℃的温度下蒸煮30min灭菌，输送入液化罐在80℃加入0.1％的中温α-淀粉酶液化70min，将充分糖化后的料液400L输送到发酵罐，冷却至65℃，加入0.1％～0.3％的糖化酶和重组嗜热菌生长所需营养物质，厌氧条件下于50～56℃、pH值至5.0～6.0，条件下接入1％～5％的重组嗜热菌RY-18，发酵35h，分析乳酸含量为176g/L，L-乳酸光学纯度为99.7％，葡萄糖转化率93％。

发酵过程流加MgCO₃，发酵结束过后将发酵也用0.01～1.0μm陶瓷膜进行过滤除去菌体、多糖交替以及大分子的杂质，得到乳酸镁介质，冷却至25℃使乳酸镁析出成为浓度较高的浆料，再添加56％的NaOH在剧烈搅拌下反应，将介质流进行过滤除去沉淀Mg(OH)₂，即得到含有38wt.％乳酸钠的浆料。滤渣Mg(OH)₂水洗除杂，再加热、搅拌下通入空气生成MgCO₃，可以作为新的中和剂利用。L-乳酸钠清液经过芯式活性炭过滤器脱色，用3M的HCl调节pH为7.0，料液在压力为1.0～2.0MPa，频率为30～50Hz，温度18～28℃的条件下进行纳滤膜过滤除去色素等小分子杂质。最后0.04～0.05Mpa条件减压蒸馏即得到99.6％的乳酸钠80.1kg，L-乳酸钠的光学纯度为99.7％，L-乳酸生产L-乳酸钠的转化率为91％。

序列：

No.1：5’-CCCGGATCCGGGCTTGCAAAACTGCTTTCATA-3’

No.2：5’-GCCGAATTCGGCTTCCGGCAACACACAGAGA-3’

Claims (12)

1.一种生产高光学纯度L-乳酸并连续生产高光学纯度L-乳酸钠的新工艺，其特征在于主要工艺包括：筛选高光学纯度L-乳酸的生产菌种，以淀粉类、葡萄糖类物质为原料发酵生产L-乳酸并以MgCO₃做中和剂，以乳酸镁为介质在pH为9～12条件下与氢氧化钠反应，经过脱色、调pH值、纳滤、减压蒸馏制得中性的高光学纯度L-乳酸钠产品。

2.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于采用的生产菌种为重组嗜热型凝结芽孢杆菌RY-18。

3.根据权利要求2所述的生产工艺，其特征在于所选用的生产菌株发酵周期为32～35h，发酵液中L-乳酸含量不低于170g/L、光学纯度不低于99.5％。

4.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于发酵结束后直接利用孔径为0.01～1.0μm陶瓷膜在压力0.1～0.3MPa、过滤温度为50～80℃条件下过滤除去菌体和其他大分子杂质。

5.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于过滤后的含有乳酸镁介质的发酵液需要冷却至20～25℃，乳酸镁从发酵液中结晶析出，经过过滤、水洗处理后得到16～43wt.％的乳酸镁浆料。

6.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于乳酸镁浆料与氢氧化钠进行置换反应，得到浓度至多为30wt.％的乳酸钠。

7.根据权利要求6所述的生产工艺，其特征在于反应在pH为9～12，温度为20～75℃条件下进行，在搅拌槽反应器中剧烈搅拌条件进行。

8.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于置换反应后生成的Mg(OH)₂过滤后经过水洗除杂，通入空气搅拌反应，生成碳酸镁浆料，可以重新加入权利要求3中的发酵周期中循环使用。

9.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于用3M～5M的HCl调节脱色后的L-乳酸钠浆料pH值为7.0。

10.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于减压蒸馏是在真空度为0.04～0.05Mpa条件下的双效浓缩罐中进行。

11.根据权利要求10所述的生产工艺，其特征在于减压蒸馏浓缩后得到含量≥99.5％的L-乳酸钠产品。

12.一种根据权利要求2所使用的重组嗜热型凝结芽孢杆菌RY-18，其特征在于该菌株的L-乳酸脱氢酶编码基因被有效扩增，该菌的生长条件为：50～65℃，pH值为5.0～7.5；更适合的为52～62℃，pH5.1～5.6条件下生存。

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