CN101879308A - 人尿激肽原酶在制备治疗急性肾衰药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及人尿激肽原酶的新医药用途，即人尿激肽原酶在制备治疗急性肾衰药物中的应用。

Description

人尿激肽原酶在制备治疗急性肾衰药物中的应用

技术领域

本发明涉及药物化学领域。具体而言，本发明涉及人尿激肽原酶的新医药用途，即人尿激肽原酶在制备治疗急性肾衰药物中的应用。

背景技术

人尿激肽原酶(Human Urinary Kallidinogenase)，是从健康男性人尿中提取精制的糖蛋白，分子量约54000道尔顿，具有激活人血浆激肽原转化为激肽，扩张血管增加血流量，改善血液循环的作用，并且还有增加红细胞的变形性和抑制血小板聚集，延长再钙化时间改善血液粘稠的作用。本申请人的在先专利申请“02116783.4人尿激肽原酶在制备治疗和预防脑梗塞药物中的应用”公开了它的一种医药用途。本发明人经过认真研究和动物试验证明，人尿激肽原酶对急性肾衰疾病也有明显的治疗作用。

急性肾功能衰竭(Acute Renal Failure，ARF)是由多种原因引起的临床综合征，可见于临床各科病人，发病率高且往往带来严重后果，其特点为短期内(数小时至数天)肾功能急剧下降，临床表现为急性少尿(尿量＜400mLPd)或无尿(尿量＜100mLPd)，体内氮质代谢产物排出产生障碍，迅速出现氮质血症，水及电解质、酸碱平衡紊乱，并引起全身各系统相应功能失调。引起急性肾衰的主要因素是肾血流量的急剧减少，以及由于肾组织缺血引起的氧化应激和细胞损伤，最终导致肾脏组织结构的破坏和功能的恶化。目前临床上尚无公认的治疗急性肾衰有效的药物，仅能通过纠正水电解质平衡，纠正酸中毒等对症治疗措施改善症状，后期还需要通过血液透析维持机体机能。在改善肾脏血流灌注障碍和减轻肾组织损伤方面有明显疗效的临床药物少见。

人尿激肽原酶是在肾小球远曲小管和血管极的上皮细胞产生的一种内源性血管活性物质，对维持肾脏及其它器官正常血流发挥重要作用，此外，人尿激肽原酶还具有一定的肾脏保护作用。

发明内容

本发明的目的是提供人尿激肽原酶用于治疗急性肾衰的用途，即用于制备治疗急性肾衰药物的用途。本发明的另一目的是提供一种用于治疗急性肾衰的含有人尿激肽原酶的药物组合物。

本发明的人尿激肽原酶对急性肾衰疾病有明显的治疗作用，一般以药物组合物的形式使用，这种组合物含有治疗有效量的作为活性成分的人尿激肽原酶和可药用辅料，其每计量单位中含有15～25μg的人尿激肽原酶和10～50mg的可药用辅料，主要剂型包括冻干粉针剂和注射液剂，通常以静脉注射途径给药。

经静脉注射给药的人尿激肽原酶组合物，一般是固体的灭菌组合物形式，即冻干粉针剂型，这些组合物含有的可药用辅料是甘露醇、右旋糖苷、水解明胶、柠檬酸钠、甘氨酸等中的一种或多种。在使用时溶解于灭菌注射用水或其它注射用灭菌介质中。

经静脉注射给药的人尿激肽原酶组合物也可以是水溶液形式，即注射液剂，这些组合物含有的可药用辅料是甘露醇、氯化钠、葡萄糖等中的一种或多种。

人尿激肽原酶组合物治疗急性肾衰的剂量根据病情的严重程度、治疗时间而定，一般静脉注射给药每次0.1-0.2PNA单位，每天给药1-2次。

通过我们的研究发现，人尿激肽原酶能够改善急性肾衰时的无尿或少尿症状，保护肾脏的功能。人尿激肽原酶通过激活体内的激肽原酶-激肽系统，释放血管活性物质如NO、EDHF和前列环素等，舒张肾血管，增加肾血流量，改善肾血流动力学，抑制肾小球滤过功能的衰退。同时，人尿激肽原酶能减轻急性肾衰后氧化应激反应，保护肾组织，对急性肾衰疾病起到良好的治疗作用。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1  制备人尿激肽原酶干粉针

取过滤灭菌的人尿激肽原酶150PNA单位，加7.5克甘露醇、2克右旋糖酐40、5克柠檬酸钠溶解，调节PH至中性，加注射用水至500毫升，无菌过滤，分装1000个安瓿瓶中，无菌条件下冷冻干燥，即得。

实施例2  制备人尿激肽原酶注射液

取过滤灭菌的人尿激肽原酶水溶150PNA单位，调节PH至中性，加注射用水至500毫升，加氯化钠调节等渗，无菌过滤，分装1000个安瓿瓶中，即得。

实施例3  人尿激肽原酶对急性肾衰大鼠的治疗作用

实验方法

采用肌肉注射甘油致急性肾功能衰竭大鼠动物模型。选用180～220g健康雄性SD大鼠60只，随机分为5组：假手术组(肌肉注射生理盐水)；模型组(肌肉注射甘油)；人尿激肽原酶I组(3.85×10^-3PNAu)；人尿激肽原酶II组(8.75×10^-3PNAu)；人尿激肽原酶III组(17.5×10^-3PNAu)，各组大鼠在甘油造模后立即尾静脉注射生理盐水或人尿激肽原酶，12和24小时后再给药一次。

观察指标

60只大鼠末次给予人尿激肽原酶或生理盐水后放入代谢笼收集24小时尿，留尿后6小时用4％水合氯醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流仪测定造模后及治疗后双侧肾脏血流量，取平均值作为单只动物肾血流量；取血制备血清，测定血BUN和Cre；取肾脏，制备10％肾皮质匀浆，测定肾皮质匀浆MDA、GSH和NO(均按试剂盒说明书操作)。

实验结果

1.人尿激肽原酶可增加急性肾衰大鼠肾血流量

*p＜0.05vs急性肾衰模型组

2.人尿激肽原酶对急性肾衰大鼠肾功能具保护作用

模型组大鼠较假手术组大鼠24小时尿量显著减少，分别为4.57±0.74ml和11.82±2.36ml；中、高剂量人尿激肽原酶组大鼠24小时尿量显著高于模型组(p＜0.05)，三个药物治疗组的尿量具有剂量依赖性，分别为I组5.38±0.87ml，II组7.62±1.32ml，III组9.38±1.50ml。说明人尿激肽原酶能改善急性肾衰大鼠的少尿症状。

急性肾衰大鼠静脉注射生理盐水24小时后，血清BUN为25.63±1.62mmol/L，Cre为168.26±13.01umol/L，明显高于假手术组，说明模型组动物肾功能损害严重。中、高剂量人尿激肽原酶能剂量依赖性地改善急性肾衰大鼠的肾功能(p＜0.05)。见表1。

表1  各试验组大鼠肾功能指标比较

*p＜0.05vs急性肾衰模型组

3.人尿激肽原酶能抑制大鼠急性肾衰后氧化应激反应

急性肾衰大鼠肾皮质匀浆中MDA含量为11.83±0.26nmol/mgprot，明显高于假手术组，说明模型组动物肾皮质氧化应激严重。中、高剂量人尿激肽原酶能剂量依赖性地减轻氧化应激(p＜0.05)。急性肾衰大鼠肾皮质匀浆中GSH含量为265.15±25.32mg/gprot，明显低于假手术组，说明模型组动物肾皮质内源性抗氧化因子减少。中、高剂量人尿激肽原酶能剂量依赖性地增强抗氧化应激作用(p＜0.05)。急性肾衰大鼠肾皮质匀浆中NO含量为9.07±0.75umol/gprot，明显低于假手术组，中、高剂量人尿激肽原酶能剂量依赖性地增加肾皮质NO的含量(p＜0.05)。见表2。

表2  各试验组大鼠氧自由基损伤和炎症反应指标比较

*p＜0.05vs急性肾衰模型组

讨论

甘油引起急性肾功能衰竭涉及如下病理机制：肾小管阻塞，肾血管收缩和氧化应激，该模型能较好的模拟动物急性肾衰状态，被国内外广泛采用，是研究肾衰药物治疗较好的动物模型。本实验动物造模后24小时尿量显著减少，符合临床少尿或无尿的表现，反映肾功能的两个指标血BUN和Cre也显著升高，提示肾功能损害严重。人尿激肽原酶能剂量依赖性地增加肾血流量和排尿量，改善肾功能指标，说明人尿激肽原酶对急性肾衰大鼠具有治疗作用。

氧化应激是急性肾衰的重要病理过程之一。MDA是氧自由基与生物膜多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物，其产量与氧自由基的量相平行，因此测定MDA可反映氧自由基的水平，间接反映细胞损伤的程度。还原型谷胱甘肽(GSH)是重要的防护自由基损伤的巯基化合物，是研究药物抗氧化损伤的一种常用的重要指标。一氧化氮(NO)在多种病理生理过程中如血管扩张、神经传递、铁代谢和免疫防御中起重要作用。大量的证据表明不仅肾血管内皮细胞产生一氧化氮，系膜细胞、致密斑和肾小管细胞也能产生一氧化氮。NO不仅在调节肾血流动力学方面起重要作用，还可减轻氧化损伤，保护肾组织。人尿激肽原酶在血液中能促进激肽的生成，作用于激肽受体，促进内皮细胞释放NO。在本实验中，高剂量人尿激肽原酶组肾皮质NO含量甚至高于假手术组，证明人尿激肽原酶确实能促进NO的释放，人尿激肽原酶治疗急性肾衰的部分机制与促进内皮源性NO释放有关。

Claims (6)

1.人尿激肽原酶在制备治疗急性肾衰药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述药物的给药量是每天给药1-3次，每次给药0.01～0.2PNA单位/支(瓶)。

3.根据权利要求2所述的用途，其中所述药物是冻干粉针剂。

4.根据权利要求2所述的用途，其中所述药物是注射液。

5.根据权利要求3所述的用途，其中所述的药物还含有选自甘露醇、右旋糖苷、水解明胶、柠檬酸钠或甘氨酸的添加剂。

6.根据权利要求4所述的用途，其中所述的药物还含有选自甘露醇、氯化钠或葡萄糖的添加剂。