CN101869675A - 一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂及其制备方法，采用传统的六和茶处方，经现代提取工艺制成浸膏，再和相应剂型的药用辅料制成颗粒。本发明克服中药粗粉煎煮后汤液不清、不易服用的缺点，药材经合理的工艺提取后，因有效成分得以提取，挥发性有效成分避免了挥逸而得以保留，包括薄荷与荆芥药材中的挥发油、26味药材中的生物碱盐、甙类、有机酸类、氨基酸、多糖等，同时除去了淀粉、粘液质、蛋白质、树脂、鞣质等对人体无效的药渣杂质，从而使药品的质量更为优良，减少用药量，提高了生物利用度，能更好地发挥药效。

Description

一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂，具体是指采用中药提取的一种治疗暑湿感冒引起的发热、头痛身倦、四肢不适、食滞饱胀的中药组合物颗粒剂六和颗粒，本发明还涉及该中药组合物颗粒的制备方法。

背景技术

感冒是一种疾病，临床可见恶寒、发热、头身疼痛等症状，由于引发疾病的原因和机体反应性有所不同，只有辨清了感冒属于何种证型，才能正确选择不同的治疗原则，分别采用辛温解表、辛凉解表或清暑祛湿解表等治疗方法给予适当的治疗。中医的辨证施治与头痛止痛、发热退烧这种仅针对某一症状采取具体对策的西医治疗完全不同，中医认为，感冒主要是感受风寒、风热或时行疫毒所致，因而将感冒分为风寒感冒、风热感冒、暑湿感冒和流行性感冒四类，它们各自的症状不同，根据现代医家论述，其病因可能是风兼寒或风兼热或湿兼热，另外还有夏季感受暑湿引起的暑湿感冒，及体虚感受上述病邪引起的体虚感冒等几大类型。据现代研究证明，许多疏表清热解毒中药还具有一定的抗病毒和提高人体免疫力的作用。西药感冒药的特点是在缓解症状方面针对性较强、作用较快，缺点是大多对病毒无治疗作用和消炎作用(除阿司匹林外)，即所渭治标不治本。与西药相比，辨证求本是中药治疗感冒的优势，其可缩短病程，在预防感冒方面也有积极作用。

暑湿感冒发生于夏季多雨季节，为暑与湿邪相兼致病，暑湿感冒的病因是夏季感冒夹湿冒寒，又称为“寒伏暑”或是“夏日伤寒”。暑湿感冒的症状特点既有寒湿郁于肌表，卫气不和的表证表现；又有湿浊中阻、脾胃不和而致的消化系统功能障碍的症象，应用中医辨证施治，能够标本兼治，较之西药，独具一格。暑湿感冒宜治以清暑化湿，解表达邪，应选用芳香化湿、宣达透表的药物。

一种治疗暑湿感冒的中药六和颗粒的原剂型茶剂(六和茶)试行标准是由中华人民共和国国家药品监督管理局颁发的，标准号为WS-11296(ZD-1296)-2002，六和茶的处方及制备方法为：【处方】岗梅96.3g，鬼羽箭11.6g，贯众34.6g，倒扣草77.1g，连翘9.6g，毛麝香34.6g，金银花11.6g，金锦香11.6g，荆芥23.2g，土茵陈34.6g，香薷11.6g，蠄蟧草106.0g，薄荷34.6g，地胆草106.0g，青蒿115.6g，木棉花11.6g，淡竹叶34.6g，苍术11.6g，栀子11.6g，布渣叶9.6g，夏枯草92.5g，山楂23.2g，黄芩11.6g，水翁花34.6g，白茅根28.9g，甘草11.6g，制成1000g。【制法】以上二十六味，青蒿，夏枯草，金银花，布渣叶，水翁花，木棉花粉碎成粗粉；连翘，栀子和山楂先破碎后，再粉碎成粗粉；其余岗梅等十七味先切成片段再粉碎成粗粉。以上述粗粉混匀，60℃干燥，分装，即得。【功能主治】清热祛湿，解暑消食。用于感冒发热，头痛身倦，四肢不适，食滞饱胀。【用法用量】水煎服，一次18.8g，一日2～3次。

六和茶方中不但有常用的金银花、薄荷等，还加入了广东特有的清热祛湿、解暑消食、治疗感冒的中草药如岗梅、蠄蟧草、地胆草、倒扣草、木棉花、水翁花，使其清热祛湿、解暑消食的功能大为增强，全面调理，是夏天暑湿感冒的良药。

夏日气候炎热，阴雨霖霖，天暑下逼，地湿上蒸，致暑湿肆疟。暑性大热，毛窍开泄，加之贪凉饮冷，以致暑湿为风寒所遏而常发感冒，六和茶处方中岗梅、金银花、黄芩、连翘、土茵陈、贯众配以木棉花、白茅根清热解毒、利尿泻火；倒扣草、地胆草、蠄蟧草清热去湿、消食化滞，配以苍术、淡竹叶、毛麝香、金锦香燥湿健脾，祛风，祛风消瘀；青蒿、鬼羽箭、香薷清热解暑、化湿调中，配以水翁花、布渣叶、山楂消暑清热、去湿、消食滞；荆芥、薄荷祛风、解表；故感暑夹湿周身困重乏力、胸闷湿滞可解，甘草调和诸药，六和茶组方合理，全方共奏清热祛湿，解暑消食之功效。组方独特，集疏风解表、清热解毒、化湿消暑、行气导滞的中药溶为一体，符合中医中药理论，对于暑湿感冒发热，头痛身倦，四肢不适，食滞饱胀有很好的疗效，开发六和制剂，有良好的市场前景。

六和茶是由炮制好的中药材粉碎成细粉分装而成，是一种传统制剂，原工艺剂型存在的缺点及其机理：

A.原茶剂的使用方法为煎煮法，薄荷、荆芥药材中挥发性有效成分(薄荷含薄荷油，油中主含薄荷醇、薄荷酮。荆芥药材中的挥发油主要成分为右旋薄荷酮、消旋薄荷酮、左旋胡薄荷酮及少量右旋柠檬烯)在煎煮过程中容易挥发损失，挥发性有效成分难以保持，造成药效损失；

B.原剂型茶剂用法为“用水煎服”，不同患者掌握的煎煮时间、煎煮水量不同，造成原剂型茶剂在不同患者身上的疗效不同；

C.原剂型为中药材粉碎成粗粉分装而成的茶剂，是一种传统的成方制剂，用时需加水煎煮，弃去药渣，服用药汁，存在着药物粗粉煎煮后汤液不清，过滤困难、不易服用的缺点；

D.原剂型茶剂煎煮液中含多种对人体无效的药渣杂质如淀粉、粘液质、蛋白质、树脂、鞣质。

发明内容

为解决上述问题，本发明的其中一个目的在于提供一种药效高、用药量小，使用方便的治疗暑湿感冒发热、头痛身倦、四肢不适、食滞饱胀的中药组合物颗粒剂。

本发明的另一个目的在于提供一种该中药组合物颗粒剂的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：

一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按处方准备药材，重量份数计算，处方为：岗梅94-98份，鬼羽箭10-13份，贯众33-35份，倒扣草76-78份，连翘9-11份，毛麝香33.5-35.5份，金银花10-13份，金锦香10-13份，荆芥22-24份，土茵陈33-35份，香薷10-13份，蠄蟧草103-109份，薄荷33-35份，地胆草103-109份，青蒿112-118份，木棉花10-13份，淡竹叶33-35份，苍术10-13份，栀子10-13份，布渣叶9-11份，夏枯草91-94份，山楂22.5-24份，黄芩10-13份，水翁花33-35份，白茅根27-30份，甘草10-13份；

(2)将薄荷，荆芥，加水浸泡后，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的溶液另器收集；

(3)将步骤(2)药渣与其余青蒿等二十四味加水煎煮二次，合并煎液，滤过得滤液；

(4)步骤(3)滤液与步骤(2)水溶液合并浓缩，放凉；

(5)加入95％乙醇使含醇量至50-70％，搅匀，静置后过滤、滤液回收乙醇，浓缩成清膏；

(6)加入辅料制成软材，制粒，干燥，整粒，喷入步骤(2)的挥发油，混匀，即得。

所述步骤(2)中，薄荷、荆芥置提取罐中，加7-9倍量水浸泡0.5-1.5小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油4-6小时，挥发油用密闭容器盛装，蒸馏后的水溶液另器收集，留药渣。

所述步骤(3)中，步骤(2)药渣与其余青蒿等二十四味药材置多功能提取罐中加水煮沸提取二次，第一次1.5-2.5小时，加水9-11倍量，第二次0.5-1.5小时，加水7-9倍量，合并两次煎液，过滤得滤液。

所述步骤(4)中，浓缩时控制真空度为-0.01～-0.08Mpa，温度80～50℃；或通过双效蒸发器浓缩，控制蒸汽压力≤0.2MPa，真空度：一效-0.04～-0.08MPa，二效-0.04～-0.08MPa，浓缩至每毫升含生药量2g。

所述步骤(5)中，加入95％乙醇使含醇量为60％。

所述步骤(6)中，加入先混匀的辅料糊精111.7份、蔗糖粉383.1份，制成软材，制粒，颗粒于恒温鼓风干燥箱55～60℃干燥，或用沸腾干燥器干燥，其中进风温度80～100℃、出风温度70～80℃，最后整粒。

由上述制备方法制得的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂。

本发明通过改变原方的工艺方法，开发出新的剂型，克服中药粗粉煎煮后汤液不清、不易服用的缺点，药材经合理的工艺提取后，因有效成分得以提取，挥发性有效成分避免了挥逸而得以保留，包括薄荷与荆芥药材中的挥发油、26味药材中的生物碱盐、甙类、有机酸类、氨基酸、多糖等，同时除去了淀粉、粘液质、蛋白质、树脂、鞣质等对人体无效的药渣杂质，从而使药品的质量更为优良，减少用药量，提高了生物利用度，能更好地发挥药效。通过对本发明的中药组合物颗粒剂进行的药效研究、急性毒性及长期毒性试验，结果表明，本品疗效确切，副作用少，与原剂型相比，药效更强、用药量更小、使用更方便。

具体实施例

本发明是一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按六和茶的处方准备药材；

(2)将薄荷，荆芥，加水浸泡后，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的溶液另器收集。处方中荆芥、薄荷含挥发油，挥发油亦为中药活性成分，为防止水煎过程中挥发性组分的挥散逸失，采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，然后在制粒后喷入，保存了药材中挥发性有效成分的疗效。通过采用正交设计法，对提取时间、浸泡时间、加水量进行条件筛选，以挥发提取量为指标，得出提取挥发油的最佳工艺为：加水量8倍，浸泡1小时，提取5小时。

(3)将步骤(2)药渣与其余青蒿等二十四味加水煎煮二次，合并煎液，滤过得滤液。利用方中其他24味药材中的大多数有效成分如生物碱盐、甙类、有机酸类、氨基酸、多糖等易溶于水和醇中的特性，采用水提法提取24味药材中的有效成分。用统一先进工艺水提取有效成分，避免了不同患者掌握的煎煮时间、煎煮水量不同，造成原剂型茶剂在不同患者身上的疗效差异。按处方比例，称取青蒿等24味药材，按正交设计表L⁹(3⁴)进行试验，根据预试验，对加水倍数(A/min)、浸泡时间(B)、提取时间(C)、提取次数(D)4因素，每个因素3水平进行考察。选择最佳煎煮工艺条件为：加水18倍，浸泡1小时，共提取2次，第一次2小时，第二次1小时，此时绿原酸含量最高。

(4)步骤(3)滤液与步骤(2)水溶液合并浓缩，放凉。较好的，采用双效蒸发器浓缩，控制蒸汽压力≤0.2MPa，真空度：一效-0.04～-0.08MPa，二效-0.04～-0.08MPa。经水提液浓缩量的筛选，选用浓缩比例为“每毫升含生药2g”，浸膏流动性好，易于工业生产管道化作业。

(5)加入95％乙醇使含醇量至50-70％，搅匀，静置后过滤、滤液回收乙醇，浓缩成清膏。水煎煮液提取出有效成分的同时亦提出蛋白质、粘液质、淀粉、树脂、鞣质等无效成分，这些成分影响制剂成型，增加服用量，且使制剂吸湿性增大，导致吸湿结块、变质、影响质量。采用乙醇沉淀工艺，可除去淀粉等杂质，改善产品性状。去除煎煮液中多种对人体无效的药渣杂质如淀粉、粘液质、蛋白质、树脂、鞣质。颗粒剂冲服药液澄明，味甜；避免了原剂型煎煮后汤液不清，过滤困难、不易服用的缺点。一般认为，醇沉浓度过高，会使有效成分损失多，过低则沉淀物疏松，难以过滤，沉淀效果差，因此选择合适的醇沉浓度，既能最大限度地除去杂质，又可减少有效成分的损失。经醇沉工艺的优选，得醇沉浓度为60％时，绿原酸的含量最高，既能最大限度地除去杂质，又减少有效成分的损失，故绿原酸的含量最高。然后轻取醇沉溶液，减压回收乙醇至无醇味，蒸汽压力为0.02～0.08Mpa，真空度为-0.01～-0.08Mpa，药液浓缩至1700g的清膏。(工艺中1000袋六和颗粒即10000g需用药材总量18800g制成的清膏为1700g)。

(6)加入辅料制成软材，制粒，干燥，整粒，喷入步骤(2)的挥发油，混匀，即得。在保证制剂质量的前提下，尽量减少辅料的用量，以减少服用量，因此，以制剂颗粒抗湿性指标对糊精用量进行筛选，试验得糊精∶清膏＝21∶17的配比时，颗粒抗湿性能良好，质量稳定，颗粒在暴露状态下的水分仅略高于密闭状态。本品为颗粒剂，口感较为重要，由于六和颗粒的提取物其味酸且苦，应加入矫味剂改善制剂口感，蔗糖口感纯正，能提高颗粒硬度，经过预试验，每10000g六和颗粒蔗糖用量7200g时颗粒口感最好，颗粒硬度满意。

实施例1：本发明中组合物颗粒剂实验室样品制备

称取薄荷65.04g、荆芥43.60g、青蒿217.34g、岗梅181.04g、夏枯草173.90g、倒扣草144.96g、蠄蟧草199.28g、地胆草199.28g、金银花21.80g、连翘18.04g、香薷21.80g、毛麝香65.04g、白茅根54.34g、淡竹叶65.04g、土茵陈65.04g、黄芩21.80g、栀子21.80g、贯众65.04g、布渣叶18.04g、水翁花65.04g、金锦香21.80g、木棉花21.80g、鬼羽箭21.80g、山楂43.60g、苍术21.80g、甘草21.80g、辅料蔗糖粉720g、糊精210g。

薄荷和荆芥净药材置2000ml烧瓶中，加入相当于药材量8倍的水(870ml)，装好蒸馏提取挥发油装置，浸泡1小时，蒸馏提取挥发油，药液经120目过滤，取滤液备用。按处方量称取24味药材，加蒸馏后的薄荷、荆芥药渣，加入10倍量的水(19L)煮沸，加热蒸汽压力为0.2～0.25Mpa，沸腾蒸汽压力为0.05～0.1Mpa，保持微沸2小时，倾出煎煮液经120目过滤，药渣加水8倍量的水(15L)煮沸，保持微沸1小时，倾出煎煮液经120目过滤，合并两次煎煮液和蒸馏后的滤液，备用。滤液浓缩至每毫升含生药2g(950ml)，真空度为-0.01～-0.08Mpa，温度80～50℃。浓缩液加95％乙醇1880ml，使含醇量达到60％，药液搅拌均匀后在18～24℃静置24小时。取上清液减压回收乙醇至无醇味，蒸汽压力为0.02～0.08Mpa，真空度为-0.01～-0.08Mpa。滤液浓缩至170g的清膏，称取蔗糖720g，糊精210g，均匀加入清膏，搅拌均匀，制成软材，用16目筛制粒，颗粒于恒温鼓风干燥箱55～60℃干燥，干颗粒通过16目筛整粒，喷入上述挥发油，混匀，分装即得。批号：030101、030102、030103、030204、030205、030206、030215、030216、030217、030218。

绿原酸含量：

批号    030101  030102  030103  030204  030205  030206  030215  030216  030217  030218

绿原酸  3.6     3.8     3.8     3.7     3.6     3.6     3.6     3.8     3.7     3.7

(mg/包)

实施例2：本发明中药组合物的颗粒剂的制备

a)称取青蒿21.73kg、岗梅18.10kg、夏枯草17.39kg、倒扣草14.50kg、蠄蟧草19.93kg、地胆草19.93kg、金银花2.18kg、连翘1.81kg、薄荷6.50kg、香薷2.18kg、荆芥4.36kg、毛麝香6.50kg、白茅根5.43kg、淡竹叶6.50kg、土茵陈6.50kg、黄芩2.18kg、栀子2.18kg、贯众6.50kg、布渣叶1.81kg、水翁花6.50kg、金锦香2.18kg、木棉花2.18kg、鬼羽箭2.18kg、山楂4.36kg、苍术2.18kg、甘草2.18kg、蔗糖粉72.00kg、糊精21.00kg备用；

b)薄荷、荆芥加入相当于药材量的8倍的水(87L)用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集，留药渣；

c)药渣与其余青蒿等二十四味药材加入10倍量的水(1880L)煮沸，加热蒸汽压力为0.2～0.25Mpa，沸腾蒸汽压力为0.05～0.1Mpa，保持微沸2小时，倾出煎煮液，药渣加水8倍量的水(1504L)煮沸，保持微沸1小时，倾出煎煮液，合并两次煎煮液和蒸馏后的水溶液，板框压滤器过滤至滤液无杂质、沉淀，得滤液；

d)滤液浓缩，蒸汽压力0.02～0.08Mpa，真空度-0.01～-0.08Mpa，温度80～50℃。浓缩至每毫升含生药2g(95L)，放凉；

e)浓缩液加入95％乙醇188L使含醇量达60％，搅匀，18～24℃静置24小时，取上清液过滤、减压回收乙醇至无醇味，蒸汽压力0.02～0.08Mpa，真空度-0.01～-0.08Mpa。浓缩成浸膏17kg；

f)加入先混匀的糊精21kg、蔗糖粉72kg，均匀加入清膏，搅拌均匀，制成软材，通过16目筛制粒，颗粒于恒温鼓风干燥箱55～60℃干燥，干颗粒通过16目筛整粒；

g)干颗粒中喷入上述挥发油，混匀，分装成10000包颗粒。

上述颗粒剂的常用服法及用量：开水冲服，一次10克(一袋)，一日2～3次。

实例批号：20030301、20030302、20030303。

            绿原酸含量

批号        取样量(g)    绿原酸含量mg/袋

20030301    1            3.8

20030302    1            4.0

20030303    1            3.9

实施例3：本发明中组合物浸膏制备

将上述质量比批量的荆芥、薄荷净药材置提取罐中，加8倍量水(87L)浸泡1小时，煮沸提取5小时，并收集挥发油，挥发油用密闭容器盛装，药液120目过滤，贮罐贮存，药渣另器存放。将质量比批量的青蒿等其余二十四味净药材置多功能提取罐中，并加入荆芥、薄荷两味药渣。第一次加10倍量水(1880L)，浸泡1小时，煮沸提取2小时，第二次加8倍量水(1504L)，煮沸提取1小时，水提液120目过滤，合并两次滤液及收集挥发油后的水溶液，得提取液，药渣弃去。将提取液泵入双效蒸发器中浓缩，控制蒸汽压力≤0.2MPa，真空度：一效-0.04～-0.08MPa，二效-0.04～-0.08MPa，浓缩至约400L，转至200L浓缩器中，控制蒸汽压力≤0.09MPa，真空度：-0.04～-0.08MPa，浓缩至每毫升含生药2g(约95L)，得浓缩液，待醇沉。将浓缩液转至周转罐中，冷却至40℃以下，边搅边加入乙醇，搅拌均匀，使含醇量达到60％±2％，静置24小时以上使沉淀完全。吸取醇沉上清液，药渣用180目滤布滤过，滤液与上清液合并，控制蒸汽压力≤0.1MPa，回收乙醇至药液无醇味，待浓缩。将上述药液转至200L浓缩器中，浓缩至约17kg，用200绢布过滤，即得本发明中组合物颗粒剂浸膏。

实例浸膏批号：2009201、20090202、20090203。

实施例4：本发明中组合物颗粒剂制备

将20090201、20090202、20090203批浸膏，按每槽量称取组合物浸膏，按每槽量将蔗糖粉碎粉、糊精加入湿法混合颗粒机内，I速搅拌I速切碎3分钟，加入六和颗粒浸膏，I速搅拌1～2分钟，I速切碎10秒，出料，用双滚筒制粒机过16目筛制成颗粒。将制好的湿颗粒用高效沸腾干燥机干燥，控制干燥进风温度为80～100℃，干燥出风温度为70～80℃，干燥至水分为3％以下。用振动筛分机整粒。先取约10kg颗粒喷入组合物挥发油，再其余颗粒干颗粒用真空上料机加入多向运动混合机中混合15分钟，分装即得组合物浸膏颗粒。实例批号：20090301、20090302、20090303。

实施例5：本发明的中药组合物颗粒剂中青蒿、岗梅、山银花、黄芩及栀子药味的薄层鉴别：

①取本发明的中药组合物颗粒剂10g，加水20ml微热使溶解，置分液漏斗中，用醋酸乙酯20ml振摇提取，分取醋酸乙酯层，挥至约1ml，作为供试品溶液。另取青蒿对照药材0.2g，加水100ml小火煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约20ml，放冷，置分液漏斗中，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

②取本发明的中药组合物颗粒剂20g，加水100ml加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至30ml，加乙醇30ml，静置，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇30ml使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醚40ml使溶解，置分液漏斗中，加1mol/L盐酸溶液10ml振摇，弃去酸液，乙醚液加5％碳酸氢钠溶液振摇2次，每次10ml，弃去碳酸氢钠液，再用水10ml洗涤，弃去水液，分取乙醚层，蒸干，残渣加乙醚0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取岗梅对照药材3g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

③取本发明的中药组合物颗粒剂20g，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml水浴上微热溶解并转移至已处理好的D-101型大孔吸附树脂柱(内径：1.5cm，柱长25cm，湿法装柱；用前依次用乙醇、丙酮、甲醇、水预洗)上，先用水50ml洗脱，弃去水洗液，继用20％乙醇50ml洗脱，洗脱液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，静置，取上清液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺层析薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

④取本发明的中药组合物颗粒剂10g，加水50ml微热使溶解，置分液漏斗中，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，弃去醋酸乙酯液，水液用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺层析薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

⑤取本发明的中药组合物颗粒剂60g，研细，加无水乙醇100ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水适量使溶解，加入预先处理好的D101大孔吸附树脂柱上(内径1～1.5cm，长15cm)，以水20ml洗脱，弃去水液，再用20％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，放置，取上清液作为供试品溶液。另取取栀子对照药材1g，加无水乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。另取栀子阴性样品60g，研细，同法制成栀子阴性样品溶液。照薄层色谱法，吸取上述4种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(12∶8∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显示清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱图和对照药材色谱图相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例6：本发明的中药组合物颗粒剂中绿原酸含量测定：

取本发明的中药组合物颗粒剂50g，混匀，粉碎成细粉，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％甲醇20ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，滤液用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。另精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液。在用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)为流动相；检测波长为327nm；理论板数按绿原酸峰计算应不得少于3000色谱条件下：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

            绿原酸含量

批号        取样量(g)绿      原酸含量mg/袋

20090301    1                4.2

20090302    1                4.0

20090303    1                3.9

实验例1药理药效实验

本发明的中药组合物颗粒剂的实验结果如下：

1.经灌胃给药，观察本发明的中药组合物颗粒剂对感染FMI病毒小鼠的保护作用；应用细胞培养技术，在传代细胞上进行六和颗粒抗流感甲3、乙型、腺病毒3型、单纯疱疹1型4种病毒的抑制试验。结果表明：本发明能降低感染FMI动物的死亡率，延长生存时间(P＜0.05)，降低病毒感染小鼠肺指数(P＜0.05)，表明该药能减轻感染小鼠肺部病变，对感染FMI病毒小鼠具有保护作用；六和颗粒对流感甲3、乙型、腺病毒3型、单纯疱疹1型4种病毒均有治疗作用，对单纯疱疹1型有中和作用。

2.用培养板微量法测定本发明的中药组合物颗粒剂8种58株常见致病菌的抑制作用；用金黄色葡萄球菌以80％的致死量、绿脓杆菌以85％的致死剂量给小鼠腹腔注射感染后，观察本发明对被感染小鼠的保护作用。结果显示：对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌及大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、肺炎杆菌等均有抑制作用，对链球菌无抑制作用，总抑制率为75.9％，MIC50为24.6mg/ml；该药能降低金黄色葡萄球菌感染小鼠的死亡率，对金黄色葡萄球菌感染小鼠有显著的保护作用(P＜0.01)，对绿脓杆菌感染小鼠有一定的保护作用。

3.用大肠杆菌内毒素给家兔耳缘静脉注射致热后，观察本发明对体温变化的影响；以酵母菌为致热源给大鼠皮下注射后，灌胃给药，观察本发明对致热大鼠体温的作用。结果显示：本发明的中药组合物颗粒剂能明显降低家兔体温的变化值(P＜0.05～0.001)；明显抑制由酵母菌致大鼠体温的升高(P＜0.05～0.001)。提示该药对内毒素致热和酵母菌致热动物体温升高有较强的退热作用。

4.试验观察了本发明对巴豆油致炎合剂致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响。结果表明：连续给药3天，本发明的中药组合物颗粒剂明显抑制巴豆油致炎合剂致小鼠耳朵肿胀，对急性浅层组织炎症有较好的抗炎作用，其大、中、小三个剂量组的耳肿胀度均明显低于对照组(P＜0.05～0.001)；六和颗粒大、中、小三个剂量分别在致炎后1～6h、1～6h、1～3h明显降低致炎动物足跖的肿胀程度，与对照组比较差异显著(P＜0.05～0.001)。提示该药对急性炎症有明显抑制作用，具有较好的抗炎消肿作用。

5.通过给小鼠腹腔注射0.7％冰醋酸(10ml/kg)引起疼痛刺激，观察本发明的镇痛作用；采用热板法，观察本发明对小鼠痛阈的影响。结果表明：本发明的中药组合物颗粒剂大、中、小三个剂量组的扭体次数均明显少于对照组(P＜0.01～0.001)，对醋酸所致小鼠扭体反应有明显抑制作用；六和颗粒明显提高小鼠痛阈值(P＜0.05～0.01)。提示该药具有镇痛作用。

6.采用甲基橙定量法，定量给小鼠灌胃甲基橙溶液，一定时间后测定胃中甲基橙的光密度，以甲基橙的胃内残留百分率为指标，观察本发明对小鼠胃排空运动的影响；采用肠内容物推进速度测定法观察本发明对肠推进功能的影响。结果显示：本发明的中药组合物颗粒剂大、中剂量组甲基橙胃残留率明显低于对照组(P＜0.05～0.01)；该药明显提高正常小鼠肠推进功能，其大、中剂量组的推进率明显高于对照组(P＜0.05～0.01)。提示六和颗粒具有促进胃排空、增强肠推进功能的作用。

综上所述，本发明的中药组合物颗粒剂具有抗病毒、抑菌、退热、抗炎、止痛的作用，并能促进胃肠功能。

实验例2急性毒性实验

根据中药新药研究的有关规定，对本发明的中药组合物颗粒剂进行了小鼠急性毒性试验观察，因无法测出LD₅₀，故进行了最大给药量的测定。结果显示，以药物最大给药浓度11.11g生药/ml，最大给药体积40ml/kg于24小时内给小鼠灌胃给药两次，小鼠最大给药量为888.8g生药/kg，相当于临床用量的1103倍(临床用量56.4g生药/人/日，人以70kg计算)，动物未出现不良反应及死亡。解剖观察各脏器未见异常。

实验例3长期毒性试验

本试验应用SD大鼠80只，设对照组及六和颗粒14.5g、29g、58g生药/kg剂量组，为临床用量18、36、72倍(临床用量56.4g生药/人/日)，连续灌胃给药4周，观察本发明的中药组合物颗粒剂对动物各项指标的影响。试验结果表明，连续给药4周，本发明的中药组合物颗粒剂对大鼠的体重、摄食量、外周血象、凝血时间、心电图、脏器指数等均无明显影响；血液生化十二项指标测定结果，给药4周低剂量组BiLi值高于对照组(P＜0.05)，可能与其中三个血清样本溶血有关；低剂量组、中剂量组TP值高于对照组(P＜0.05)，但均在正常生理范围之内，其它指标与对照组比较无明显差异。恢复期各给药组各项指标测定值与对照组比较均无明显差异。各组各脏器大体观察未见异常。

综上所述，本发明的中药组合物颗粒剂的小鼠急性毒性试验未见毒性反应，大鼠长期毒性试验亦未见明显毒性反应。

Claims (10)

1.一种治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按处方准备药材，重量份数计算，处方为：岗梅94-98份，鬼羽箭10-13份，贯众33-35份，倒扣草76-78份，连翘9-11份，毛麝香33.5-35.5份，金银花10-13份，金锦香10-13份，荆芥22-24份，土茵陈33-35份，香薷10-13份，蠄蟧草103-109份，薄荷33-35份，地胆草103-109份，青蒿112-118份，木棉花10-13份，淡竹叶33-35份，苍术10-13份，栀子10-13份，布渣叶9-11份，夏枯草91-94份，山楂22.5-24份，黄芩10-13份，水翁花33-35份，白茅根27-30份，甘草10-13份；

(2)将薄荷，荆芥，加水浸泡后，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的溶液另器收集；

(3)将步骤(2)药渣与其余青蒿等二十四味加水煎煮二次，合并煎液，滤过得滤液；

(4)步骤(3)滤液与步骤(2)水溶液合并浓缩，放凉；

(5)加入95％乙醇使含醇量至50-70％，搅匀，静置后过滤、滤液回收乙醇，浓缩成清膏；

(6)加入辅料制成软材，制粒，干燥，整粒，喷入步骤(2)的挥发油，混匀，即得。

2.根据权利要求1所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，薄荷、荆芥置提取罐中，加7-9倍量水浸泡0.5-1.5小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油4-6小时，挥发油用密闭容器盛装，蒸馏后的水溶液另器收集，留药渣。

3.根据权利要求1所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，步骤(2)药渣与其余青蒿等二十四味药材置多功能提取罐中加水煮沸提取二次，第一次1.5-2.5小时，加水9-11倍量，第二次0.5-1.5小时，加水7-9倍量，合并两次煎液，过滤得滤液。

4.根据权利要求1所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，浓缩时控制真空度为-0.01～-0.08Mpa，温度80～50℃；或通过双效蒸发器浓缩，控制蒸汽压力≤0.2MPa，真空度：一效-0.04～-0.08MPa，二效-0.04～-0.08MPa，浓缩至每毫升含生药量2g。

5.根据权利要求1所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中，加入95％乙醇使含醇量为60％。

6.根据权利要求1所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)中，加入先混匀的辅料糊精110-113份、蔗糖粉380-386份，制成软材，制粒，颗粒于恒温鼓风干燥箱55～60℃干燥，或用沸腾干燥器干燥，其中进风温度80～100℃、出风温度70～80℃，最后整粒。

7.根据权利要求1所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)中，加入辅料糊精，按重量比计算，糊精∶清膏＝21∶17。

8.权利要求1-7中任一权利要求所述的制备方法制得的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂。

9.根据权利要求8所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂，每10克颗粒剂含绿原酸不少于2.8mg。

10.根据权利要求8所述的治疗暑湿感冒的中药组合物颗粒剂，每袋10g的颗粒剂是由薄荷0.6504g、荆芥0.4360g的挥发油提取物；薄荷与荆芥提取挥发油后药渣、青蒿2.1734g、岗梅1.8104g、夏枯草1.7390g、倒扣草1.4496g、蠄蟧草1.9928g、地胆草1.9928g、金银花0.2180g、连翘0.1804g、香薷0.2180g、毛麝香0.6504g、白茅根0.5434g、淡竹叶0.6504g、土茵陈0.6504g、黄芩0.2180g、栀子0.2180g、贯众0.6504g、布渣叶0.1804g、水翁花0.6504g、金锦香0.2180g、木棉花0.2180g、鬼羽箭0.2180g、山楂0.4360g、苍术0.2180g、甘草0.2180g的水提物；辅料蔗糖粉7.2000g、糊精2.1000g制成。