CN101863893B

CN101863893B - Salinosporamide A及其类似物的不对称全合成

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Publication number: CN101863893B
Application number: CN2010102039652A
Authority: CN
Inventors: 李卫东; 白迎军; 陈莉
Original assignee: Nankai University
Current assignee: Nankai University
Priority date: 2010-06-21
Filing date: 2010-06-21
Publication date: 2012-07-25
Anticipated expiration: 2030-06-21
Also published as: CN101863893A

Abstract

本发明涉及Salinosporamide A及其类似物不对称全合成。本发明以合适保护的光学活性的丝氨酸为原料，反应得到多取代的中间体酰胺，然后通过异构化转化、脱保护、氧化-分子内A1dol串联反应得到环化产物环化中间体，再通过1，2-加成得到二醇以及脱保护、内酯化过程实现Salinosporamide A及其类似物的全合成。该合成路线原料易得、反应步骤少、操作简便，适用于大量制备，同时该路线具有很好的灵活性，可方便地制备不同位置的类似物。Salinosporamide A作为高效的蛋白酶体抑制剂已用于癌症治疗的临床试验，对Salinosporamide A及其类似物高效方便地制备必将有助于其临床研究以及进一步的构效关系研究。

Description

Salinosporamide A及其类似物的不对称全合成

技术领域：

本发明涉及一种Salinosporamide A及其类似物的不对称全合成，它是灵活高效的全合成方法。

背景技术：

天然产物直接成药或者作为先导化合物通过构效关系研究寻找到合适的药物分子在药物研究中具有重要意义。由于天然产物来源的有限性，常导致成药成本过高或者结构改造困难很难进行构效关系研究，因此发展高效实用、并且具有很好的灵活性可用于合成不同位置类似物的全合成路线具有重要的现实意义。

蛋白酶体的主要作用是降解细胞不需要的或受到损伤的蛋白质，蛋白酶体降解途径对于许多细胞进程，包括细胞的增殖和凋亡都是必不可少的。因此，蛋白酶体成为药物研发中重要的生物靶点，蛋白酶体抑制剂作为潜在的抗癌药物被广泛研究。

Salinosporamide A(1)是2003年Fenical小组在海洋放线菌Salinospora中分离得到的高效蛋白酶体抑制剂(Feling et al，Angew.Chem.Int.Ed.2003，42，355-357)，其结构与同是蛋白酶体抑制剂的Lactacystin(3)和Omuralide(2)(Omura et al，J.Antibiot.1991，44，113-116；Omura et al，J.Antibiot.1991，44，117-118；Groll et al，Nature 1997，386，463-471；Bogyoetal，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1997，94，6629-6634；Corey et al，Chem.Pharm.Bull.1999，47，1-10；Masse et al，Eur.J.Org.Chem.2000，2513-2528)具有很大的相似性。更多的Salinosporamide A类似物被分离到(Williams et al，J.Org.Chem.2005，70，6169-6203；Stadler et al，J.Nat.Prod.2007，70，246-252；Reed et al，J.Nat.Prod.2007，70，269-276)，并且很多都具有蛋白酶体抑制活性，如Cinnabaramide A(4)。

Salinosporamide A对于很多肿瘤细胞具有非常强的体外细胞毒性(IC₅₀为10nM或更低)，其作用靶点为20S蛋白酶体：通过β-内酯开环将20S蛋白酶体活性部位的苏氨酸残端羟基酰化实现不可逆地抑制(Groll et al，J.Am.Chem.Soc.2006，128，5136-5141)。氯的存在使得Salinosporamide A对20S蛋白酶体的抑制活性远远高于其脱氯类似物SalinosporamideB(Williams et al，J.Org.Chem.2005，70，6196-6203)。Salinosporamide A对于20S蛋白酶体的抑制作用(IC₅₀为1.3nM)是Omuralide的约35倍，作为治疗固体瘤、难治性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、非小细胞肺癌、疟疾、阿尔茨海默病的药物已进入I期临床研究(Chauhan et al，Cancer Cell 2005，8，407-419；Williams et al，Trends in Biotechnology 2009，27，45-52)。

Moore小组系统研究了Salinosporamide A的生源合成(Beer et al，Org.Lett.2007，9，845-848；Eustaquio et al，Nature Chemical Biology 2008，4，69-74；Eustaquio et al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 2009，106，12295-12300；Liu et al，J.Am.Chem.Soc.2009，131，10376-10377)。其中最关键的在于：a.由氯代酶SalL通过亲核取代过程构建氯乙基；b.通过分子内Aldol反应形成C₃-C₄键，实现γ-内酰胺骨架及两个季碳中心的构筑；c.通过羧基的活化实现分子内β-内酯化。

许多课题组对Salinosporamide A及其类似物进行了全合成工作(Reddy et al，J.Am.Chem.Soc.2004，126，6230-6231；Endo et al，J.Am.Chem.Soc.2005，127，8298-8299；Mulholland et al，Org.Biomol.Chem.2006，4，2845-2846；Ma et al，Org.Lett.2007，9，2143-2146；Ling et al，Org.Lett.2007，9，2289-2292；Caubert et al，Tetrahedron.Lett.2007，48，381-384；Margalef et al，Tetrahedron 2008，64，7896-7901；Takahashi et al，Angew.Chem.Int.Ed.2008，47，1-4；Fukuda et al，Org.Lett.2008，10，4239-4242；Struble et al，Tetrahedron2009，65，4957-4967；Mosey et al，Tetrahedron Lett.2009，50，295-297；Momose et al，Synthesis 2009，17，2983-2991。专利文献报道：Corey et al，US 2005/0228186A1；Danishefskyet al，WO 2006/124902A2；Myers et al，WO 2007/021897A1；Ling et al，WO 2007/117591A2(CN 101460457A)；Romo et al，US 2009/0062547A1)。

鉴于Salinosporamide A作为新颖的蛋白酶体抑制剂的重要性以及针对多种重要疾病的成药前景，迫切需要对于Salinosporamide A高效、低成本地大量制备(克级以上)以及可灵活的用于不同位置类似物合成的全合成方法。

发明内容：

本发明旨在提供一种Salinosporamide A及其类似物的不对称全合成方法。以合适保护的光学活性的丝氨酸为原料，反应得到多取代的中间体酰胺，然后通过异构化转化、脱保护、氧化-分子内Aldol串联反应得到环化产物环化中间体，再通过1，2-加成得到二醇以及脱保护、内酯化过程实现Salinosporamide A及其类似物的全合成。该合成路线原料易得、反应步骤少、操作简便，适用于大量制备，同时该路线具有很好的灵活性，可方便地制备不同位置的类似物。

本发明提供的Salinosporamide A及其类似物的结构如式5和6所示：

其合成步骤为：通过化合物7或化合物8与化合物9反应得到酰胺11，酰胺11通过脱保护、氧化得到醛12和13，再与R₃负离子反应生成二醇14和15，二醇14和15分别通过脱保护，内酯化得到化合物5和6。

其中X独立地为卤素、-OC(＝O)R_A、-OS(＝O)₂R_A以及其它羧酸活化基团，当R_A出现时独立地为C₁-C₆取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基、C₁-C₆取代或非取代的烷氧基；

R₁独立地为氢、C₁-C₈取代或非取代的烷基、C₂-C₈取代或非取代的烯基、C₂-C₈取代或非取代的炔基、C₃-C₈取代或非取代的环烷基、C₃-C₈取代或非取代的环烯基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基；

R₂独立地为氢、C₁-C₈取代或非取代的烷基、C₂-C₈取代或非取代的烯基、C₂-C₈取代或非取代的炔基、C₃-C₈取代或非取代的环烷基、C₃-C₈取代或非取代的环烯基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基；

R₃独立地为氢、C₁-C₈取代或非取代的烷基、C₂-C₈取代或非取代的烯基、C₂-C₈取代或非取代的炔基、C₃-C₈取代或非取代的环烷基、C₃-C₈取代或非取代的环烯基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基；

R₄独立地为氢、C₁-C₈取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基、-C(＝O)R_B，当R_B出现时独立地为C₁-C₆取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基、C₁-C₆取代或非取代的烷氧基；

R₅独立地为氢、C₁-C₈取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基；

R₆独立地为氢、C₁-C₈取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基、-Si(R_C)₃、-C(＝O)R_C，当R_C出现时独立地为C₁-C₆取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基、C₁-C₆取代或非取代的烷氧基。

本发明的另一方面化合物9的可选结构如下所示，构型为R或S：

化合物9-1：R₅＝CH₂CCl₃，R₆＝TBS；化合物9-2：R₅＝Me，R₆＝TBS；化合物9-3：R₅＝^tBu，R₆＝TBS；化合物9-4：R₅＝Bn，R₆＝TBS；化合物9-5：R₅＝CH₂CCl₃，R₆＝TBDPS；化合物9-6：R₅＝CH₂CCl₃，R₆＝TMS.

本发明的另一方面是反应步骤优选为：

步骤一：化合物7或化合物8在惰性溶剂中-50℃到100℃范围内碱存在下与光学活性的化合物9反应生成非对映异构体10和11。所说的化合物7可以是现场制备的；所说的惰性溶剂包括卤代烃、醚类、酯类、芳烃、非质子极性溶剂，其优选为卤代烃，如二氯甲烷、1，2-二氯乙烷和氯仿等；所说的碱包括有机碱和无机碱，其优选为亲核性的有机碱，如吡啶、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(DABCO)等。

步骤二：化合物11在惰性溶剂中-50℃到100℃范围内脱去羟基保护基团后得到伯醇化合物11a，然后在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内在氧化剂作用下生成内酰胺醛12和13。所说的惰性溶剂包括卤代烃、醚类、酯类、芳烃、非质子极性溶剂，其优选为二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯、乙腈等(把两个反应的惰性溶剂一起定义的，下面也一样)；所说的氧化剂其优选为戴斯-马丁试剂(Dess-Martin periodinane)、柯林斯试剂(Collins reagent)和吡啶铬酐盐酸盐(PCC)等。

步骤三：醛12和13(分离或未经分离)在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内与R₃负离子反应分别生成二醇14和15。所说的惰性溶剂指醚类溶剂，其优选为四氢呋喃；所说的R₃负离子来源于有机锌试剂、有机镁试剂、有机锂试剂、有机铜试剂、有机锡试剂、有机硼试剂、有机钯试剂、有机硅试剂，其优选为有机锌试剂和有机镁试剂。

步骤四：化合物14或15在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内与脱保护试剂反应，脱去R₄、R₅保护基，然后在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内活化试剂存在下进行内酯化，分别得到化合物5或6。所说的惰性溶剂包括卤代烃、醚类、酯类、芳烃、非质子极性溶剂、质子性溶剂，其优选为二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯、乙腈、乙酸或水。所说的脱去R₅保护基的脱保护试剂：当R₅＝CH₂CCl₃时为锌粉、二碘化钐(SmI₂)、镉粉、硒粉/硼氢化钠等，其优选为锌粉；当R₅＝Me时为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、三氯化硼、三溴化硼、三氯化铝、二甲基甲碲基铝(Me₂AlTeMe)、二甲基甲硒基铝(Me₂AlSeMe)、二甲基甲硫基铝(Me₂AlSMe)，其优选为二甲基甲碲基铝(Me₂AlTeMe)、二甲基甲硒基铝(Me₂AlSeMe)、二甲基甲硫基铝(Me₂AlSMe)；当R₅＝ ^tBu时其优选为三氯化硼；当R₅＝Bn时其优选为三氯化硼、三氯化铝。

本发明的另一方面X其优选为卤素，如氯；R₁其优选为烷基，如甲基、氯乙基、正己基等；R₂其优选为氢、甲基、三氟甲基、苯基等；R₃其优选为2-环己烯基、异丙基、环戊基等。

本发明中的术语：

Salinosporamide A，其结构为化合物1所示。

Iso-salinosporamide A，其结构为化合物6-1所示。

Salinosporamide A类似物，其结构通式为化合物5和化合物6所示。

本发明提供了结构为5和6的Salinosporamide A类似物以及不对称全合成方法。合成路线原料易得、反应步骤少、操作简便，适用于大量制备，同时该路线具有很好的灵活性，可方便地制备不同位置的类似物，有助于其临床研究以及进一步的构效关系研究。Salinosporamide A作为高效的蛋白酶体抑制剂已用于癌症治疗的临床试验，对Salinosporamide A及其类似物高效方便地制备必将有助于其临床研究以及进一步的构效关系研究。

附图说明

图1是化合物1的单晶结构图。

图2是化合物6a-1的单晶结构图。

具体实施方式

以下再通过实施例对本发明的上述内容作进一步详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。下述实施例中，熔点未经校正，收率未经优化。

实施例1化合物11-1的制备

新鲜制备的7a-1(42mmol)溶于二氯甲烷(84mL)中，室温加入吡啶(3.4mL，42mmol)后升温回流1小时。然后加入9-1(42mmol)的二氯甲烷溶液，反应完成后加入二氯甲烷稀释，依次用1M盐酸、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱纯化得到两个非对映异构体10-1和11-1(33.6mmol，80％，dr＝2∶3)。10-1和11-1的绝对立体化学由最终产物Salinosporamide A确定。

化合物10-1：mp.67-68℃；[α]_D ²⁰＝-44.6°(c 1.09，CHCl₃)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.34(d，2H，J＝8.4Hz)，6.89(d，2H，J＝8.0Hz)，4.95(d，1H，J＝16.4Hz)，4.80(d，1H，J＝12.0Hz)，4.66(d，1H，J＝16.8Hz)，4.62(d，1H，J＝12.0Hz)，4.30-4.17(m，3H)，3.98(t，1H，J＝6.8Hz)，3.80(s，3H)，3.58-3.44(m，2H)，2.40(m，1H)，2.22(m，1H)，2.19(m，3H)，0.89(s，9H)，0.05(s，3H)，0.04(s，3H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₅H₃₈Cl₄NO₆SiNa640.1010，found for[M+Na]⁺ 640.1000。

化合物11-1：mp.89-91℃；[α]_D ²⁰＝-26.9°(c 1.23，CHCl₃)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.40(d，2H，J＝8.4Hz)，6.91(d，2H，J＝8.8Hz)，4.97(d，1H，J＝16.8Hz)，4.87(d，1H，J＝12.0Hz)，4.73(d，1H，J＝16.8Hz)，4.67(d，1H，J＝12.0Hz)，4.59(m，1H)，4.27-4.18(m，2H)，3.96(t，1H，J＝6.4Hz)，3.81(s，3H)，3.61(m，2H)，2.42(m，1H)，2.19(m，1H)，1.96(m，3H)，0.88(s，9H)，0.06(s，3H)，0.03(s，3H)；HRMS(ESI)m/z calcd.forC₂₅H₃₈Cl₄NO₆SiNa 640.1010，found for[M+Na]⁺640.1000。

实施例2化合物11-2的制备

使用同实施例1相同的操作，不同的是使用丝氨酸衍生物9-2，制备得到化合物11-2。

化合物10-2：[α]_D ²⁰＝-72.4°(c 0.50，MeOH)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.19(d，2H，J＝7.6Hz)，6.77(d，2H，J＝7.2Hz)，4.78(d，1H，J＝16.4Hz)，4.57(d，1H，J＝16.8Hz)，4.32-4.31(m，1H)，4.12-4.08(m，1H)，4.00-3.97(m，1H)，3.79(t，1H，J＝6.0Hz)，3.66(s，3H)，3.56(s，3H)，3.43-3.27(m，2H)，2.29-2.21(m，1H)，2.04(bs，4H)，0.75(s，9H)，-0.09(s，3H)，-0.11(s，3H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₄H₃₉ClNO₆Si 500.2230，found for[M+H]⁺500.2222.

化合物11-2：[α]_D ²⁰＝-22.8°(c 0.50，MeOH)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.32(d，2H，J＝8.8Hz)，6.85(d，2H，J＝8.4Hz)，4.86(d，1H，J＝16.8Hz)，4.66(d，1H，J＝17.2Hz)，4.53-4.51(m，1H)，4.17-4.06(m，2H)，3.86(t，1H，J＝8.4Hz)，3.74(s，3H)，3.65(s，3H)，3.56-3.52(m，2H)，2.32(m，1H)，2.14(m，1H)，1.88(s，3H)，0.81(s，9H)，-0.02(s，3H)，-0.05(s，3H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₄H₃₉ClNO₆Si 500.2230，found for[M+H]⁺500.2225.

实施例3化合物10-3和11-3的制备

使用同实施例1相同的操作，不同的是使用丝氨酸衍生物9-3，制备得到化合物10-3和11-3。10-3和11-3的绝对立体化学未进一步确定。

化合物10-3(或11-3)：R_f＝0.55(PET∶AcOEt＝4∶1)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.30(d，2H，J＝8.7Hz)，6.88(d，2H，J＝8.7Hz)，4.86(d，1H，J＝16.8Hz)，4.62(d，1H，J＝16.8Hz)，4.22-4.05(m，3H)，3.86(m，1H)，3.80(s，3H)，3.51(m，2H)，2.37(m，1H)，2.17(s，3H)，2.15(m，1H)，1.43(s，9H)，0.86(s，9H)，0.01(s，3H)，0.00(s，3H)。

化合物11-3(或10-3)：R_f＝0.50(PET∶AcOEt＝4∶1)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ 7.41(d，2H，J＝8.4Hz)，6.91(d，2H，J＝8.7Hz)，4.90(d，1H，J＝16.8Hz)，4.67(d，1H，J＝17.1Hz)，4.45(m，1H)，4.14(m，2H)，3.89(m，1H)，3.82(s，3H)，3.60(m，2H)，2.38(m，1H)，2.21(m，1H)，1.94(s，3H)，1.46(s，9H)，0.86(s，9H)，0.04(s，3H)，0.01(s，3H)。

实施例4化合物10-4和11-4的制备

使用同实施例1相同的操作，不同的是使用7a-2与丝氨酸衍生物9-1反应得到化合物10-4和11-4。10-4和11-4的绝对立体化学未进一步确定。

化合物10-4(或11-4)：R_f＝0.50(PET∶AcOEt＝4∶1)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.92(d，1H，J＝7.6Hz)，7.59(m，1H)，7.48(m，2H)，7.37(d，2H，J＝8.4Hz)，7.31(d，1H，J＝8.0Hz)，6.89(d，2H，J＝8.0Hz)，4.93-4.13(m，8H)，3.80(s，3H)，3.77(m，1H)，3.66(m，1H)，2.59(m，1H)，2.56(m，1H)，0.86(s，9H)，0.07(s，3H)，0.04(s，3H).

化合物11-4(或10-4)：R_f＝0.45(PET∶AcOEt＝4∶1)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.59(d，2H，J＝8.0Hz)，7.49(m，1H)，7.39(d，2H，J＝8.4Hz)，7.30(m，2H)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz)，4.97(d，1H，J＝16.8Hz)，4.85(d，1H，J＝12.0Hz)，4.84(m，1H)，4.75(d，1H，J＝16.8Hz)，4.52(m，1H)，4.35(d，1H，J＝12.0Hz)，4.19(m，2H)，3.77(s，3H)，3.74(m，1H)，3.60(m，1H)，2.60(m，1H)，2.39(m，1H)，0.86(s，9H)，0.05(s，3H)，0.02(s，3H)。

实施例5化合物14-1和15-1的制备

化合物11-1(12.34g，20mmol)与40％氢氟酸水溶液(5mL)在乙腈(100mL)中反应，反应完成后旋除大部分乙腈后加二氯甲烷稀释，依次用水、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂得伯醇11a-1(9.96g，99％)为白色固体。

伯醇11a-1(7.55g，15mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中，加入Dess-Martin试剂(7.62g，18mmol)，反应完成后加乙醚(150mL)稀释，然后加入饱和碳酸氢钠溶液与1M硫代硫酸钠溶液混合溶液(1∶1，150mL)淬灭。乙醚萃取，萃取液用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥。过滤后旋除溶剂，柱层析得到醛12-1和13-1混合物(6.54g，87％)。该混合物直接用于下一步反应。

向-78℃下新鲜制备的2-环己烯基溴化锌四氢呋喃溶液(14.4mmol)，滴加醛12-1和13-1混合物(6.54g，13.1mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液，反应完成后加入酒石酸钠钾淬灭反应，加乙酸乙酯稀释，过滤，浓缩后柱层析得到二醇14-1和15-1。

化合物14-1：白色固体(2.51g，33％，95.5％ee)。使用乙酸乙酯/正己烷重结晶，消旋体析出，母液中为高光学纯度的14-1(2.38g，＞99.9％ee)。HPLC条件：Chiralpak AD-Hcolumn；Hexane∶i-PrOH＝70∶30，1.0mL/min，225nm UV detector；t_R(major)＝5.80min，t_R(minor)＝11.87min。mp.187-189℃；[α]_D ²⁰＝+11.1°(c 0.56，CHCl₃)；¹H NMR(600MHz，CDCl₃)：δ：7.28(d，2H，J＝9.0Hz)，6.85(d，2H，J＝8.4Hz)，5.97(d，1H，J＝9.6Hz)，5.63(d，1H，J＝10.2Hz)，4.99(d，1H，J＝12.0Hz)，4.77(d，1H，J＝15.6Hz)，4.61(d，1H，J＝15.6Hz)，4.60(d，1H，J＝12.0Hz)，4.22(m，1H)，3.89(m，2H)，3.79(s，3H)，3.12(m，1H)，2.38(m，2H)，2.14(m，2H)，2.02(m，2H)，1.94(m，1H)，1.80(s，3H)，1.77(m，2H)，1.51(m，2H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₅H₃₁Cl₄NO₆Na 606.0770，found for[M+Na]⁺606.0758.

化合物15-1：白色固体(2.05g，27％)。mp.191-193℃；[α]_D ²⁰＝+29.8°(c 0.52， CHCl₃)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ：7.36(d，2H，J＝8.4Hz)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz)，6.02(d，1H，J＝10.0Hz)，5.93(d，1H，J＝10.4Hz)，4.81(d，1H，J＝12.0Hz)，4.78(d，1H，J＝14.8Hz)，4.59(d，1H，J＝15.2Hz)，4.06(d，1H，J＝7.2Hz)，3.94(d，1H，J＝11.6Hz)，3.92(m，2H)，3.79(s，3H)，2.95(m，1H)，2.87(m，1H)，2.59(m，1H)，2.28(m，1H)，2.03(m，2H)，1.95(m，1H)，1.76(m，2H)，1.58(m，2H)，1.52(s，3H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₅H₃₁Cl₄NO₆Na606.0769，found for[M+Na]⁺606.0758.

实施例6化合物14-2的制备

使用同实施例5相同的操作，不同的是单一的醛12-2用于加成反应。二醇14-2使用乙酸乙酯/正己烷重结晶，析出消旋体，母液中二醇14-2ee＞99.9％。HPLC条件：Chiralpak AD-H column；Hexane∶EtOH＝75∶25，1.000mL/min，225nm UV detector；t_R(major)＝9.85min，t_R(minor)＝18.20min.mp.171～172℃；[α]_D ²⁰＝+21.2°(c 0.50，MeOH)； ¹H NMR(600MHz，CDCl₃)：δ：7.29(d，2H，J＝6.6Hz)，6.84(d，2H，J＝6.6Hz)，5.84(m，1H)，5.67(m，1H)，4.71(d，1H，J＝15.0Hz)，4.51(d，1H，J＝15.0Hz)，4.09(m，1H)，3.92(m，2H)，3.79(s，3H)，3.69(s，3H)，3.12(m，1H)，2.98(m，1H)，2.30(m，1H)，2.26(m，1H)，2.11(m，1H)，1.99(m，2H)，1.92(m，1H)，1.71(m，1H)，1.66(s，3H)，1.48(m，1H)，1.36(m，1H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₄H₃₃ClNO₆466.1991，found for[M+H]⁺466.1995。

实施例7化合物12-2和13-2的制备

吡啶(10.5mL，130.8mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中降至0℃，分批加入干燥的三氧化铬(6.54g，65.4mmol)，加完升至室温，20min后滴加11a-2(4.20g，10.9mmol)的10mL二氯甲烷溶液，反应完成后将上层反应液倒出，二氯甲烷充分洗涤后浓缩，粗品溶于乙醚后过滤浓缩，得到醛12-2和13-2混合物(1.909g，45％).

实施例8化合物12-2和13-2的制备

室温下向11a-2(3.85g，10mmol)、活化的4

分子筛(5g)、二氯甲烷(50mL)的混合物中分批加入PCC(12.93g，60mmol)，反应完成后加入乙醚洗涤，抽滤，浓缩柱层析得到醛12-2和13-2混合物(2.37g，62％)。

实施例9Salinosporamide A(1)的制备

将二醇14-1(2.1g，3.60mmol，＞99.9％ee)溶于乙腈(90mL)中，0℃下滴加硝酸铈铵(5.92g，10.8mmol)水溶液(23mL)。反应完成后加入乙酸乙酯稀释，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱层析得到脱PMB产物14a-1(1.40g，84％)为白色固体。mp.186～187℃；[α]_D ²⁰＝-42.0°(c 1.29，CHCl₃)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ：8.01(s，1H)，6.15(d，1H，J＝10.4Hz)，5.71(d，1H，J＝10.4Hz)，5.46(brs，1H)，5.00(d，1H，J＝12.0Hz)，4.69(d，1H，J＝11.6Hz)，4.28(d，1H，J＝9.6Hz)，3.83(m，2H)，2.95(m，1H)，2.35(m，1H)，2.18(m，1H)，2.03(m，2H)，1.98-1.89(m，2H)，1.83-1.70(m，2H)，1.66(s，3H)，1.57(m，1H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₁₇H₂₃Cl₄NO₅Na 486.0102，found for[M+Na]⁺486.0108.

14a-1(1.40g，3.02mmol)、锌粉(7.91g，120.8mmol)和醋酸(30mL)混合搅拌，反应完成后加乙酸乙酯稀释，抽滤，残留物用乙酸乙酯洗涤。滤液依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂。粗产物分散于二氯甲烷中(30mL)，然后依次加入吡啶(3.8mL)和双(2-氧代-3-恶唑烷基)次磷酰氯(BOPCl，1.54g，6.04mmol)。反应完成后加乙酸乙酯稀释，依次用0.1M盐酸、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱层析得SalinosporamideA 1(907mg，96％)为白色固体。mp.171-172℃；[α]_D ²⁰＝-73.6°(c 0.47，MeOH)；¹H NMR(600MHz，Pyridine-D₅)：δ：10.61(s，1H)，6.39(d，1H，J＝10.2Hz)，5.87(m，1H)，5.01(brs，1H)，4.23(d，1H，J＝9.0Hz)，4.11(m，1H)，3.99(m，1H)，3.15(t，1H，J＝6.6Hz)，2.83(m，1H)，2.46(m，1H)，2.29(m，2H)，2.05(s，3H)，1.88(m，2H)，1.67(m，2H)，1.37(m，1H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₁₅H₂₁ClNO₄314.1154，found for[M+H]⁺314.1157.

实施例10Salinosporamide A(1)的制备

将二醇14-2(1.86g，4.0mmol，＞99％ee)溶于乙腈(20mL)中，0℃下滴加硝酸铈铵(6.6g，12mmol)水溶液(7mL)。反应完成后加入乙酸乙酯稀释，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱层析得到脱PMB产物14a-2(1.03g，75％)为白色固体。mp.182-183℃；[α]_D ²⁰＝+1.0°(c 0.50，MeOH)；¹H NMR(600MHz，CDCl₃)：δ：8.42(s，1H)，6.08(d，1H，J＝9.6Hz)，5.75(d，1H，J＝9.0Hz)，5.63(s，1H)，4.13(d，1H，J＝9.6Hz)，3.83(s，3H)，3.80(m，2H)，2.90(m，1H)，2.19(m，2H)，2.00(m，2H)，1.92(m，2H)，1.79(m，1H)，1.72(m，1H)，1.61(m，1H)，1.56(s，3H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₁₆H₂₄ClNO₅Na368.1235，found for[M+Na]⁺368.1239。

14a-2(194mg，0.56mmol)用Me2AlTeMe(1.8mL，2.52mmol，1.4M甲苯溶液)处理，反应完后加乙酸乙酯稀释，盐酸淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩所得粗产品分散于二氯甲烷中(4mL)，然后依次加入吡啶(1mL)和双(2-氧代-3-恶唑烷基)次磷酰氯(BOPCl，286mg，1.12mmol)。反应完成后加乙酸乙酯稀释，依次用0.1M盐酸、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱层析得SalinosporamideA 1(137mg，78％)为白色固体。

实施例11Salinosporamide A(1)的制备

使用同实施例10相同的操作，不同的是使用Me₂AlSeMe水解甲酯。

实施例12Salinosporamide A(1)的制备

使用同实施例10相同的操作，不同的是使用Me₂AlSMe水解甲酯。

实施例13Iso-Salinosporamide A(6-1)的制备

二醇15-1(292mg，0.50mmol)、锌粉(1.31g，20.0mmol)和醋酸(5mL)混合搅拌，反应完成后加乙酸乙酯稀释，抽滤，残留物用乙酸乙酯洗涤。滤液依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂。粗产物分散于二氯甲烷中(5mL)，然后依次加入吡啶(0.6mL)和双(2-氧代-3-恶唑烷基)次磷酰氯(BOPCl，256mg，1.0mmol)。反应完成后加乙酸乙酯稀释，依次用0.1M盐酸、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱层析得β-内酯6a-1(-NH为-NPMB，169mg，78％两步，96.2％ee)为白色固体。使用乙酸乙酯/正己烷重结晶，消旋体析出，母液中为高光学纯度的6a-1(158mg，＞99.9％ee)。HPLC条件：Chiralpak AD-H column；Hexane∶i-PrOH＝85∶15，1.000mL/min，225nm UV detector；t_R(major)＝7.17min，t_R(minor)＝14.78min.mp.99-101℃；[α]_D ²⁰＝+158.6°(c 0.59，CHCl₃)；¹H NMR(600MHz，CDCl₃)：δ：7.15(d，2H，J＝7.2Hz)，6.85(d，2H， J＝7.2Hz)，5.85(m，1H)，5.63(d，1H，J＝9.6Hz)，4.97(d，1H，J＝15.6Hz)，4.51(d，1H，J＝11.4Hz)，4.10(d，1H，J＝15.6Hz)，3.95(m，2H)，3.78(s，3H)，2.92(m，1H)，2.82(m，1H)，2.31(m，1H)，1.95(m，1H)，1.86(m，3H)，1.57(s，3H)，1.22(m，1H)，1.00(m，1H)，0.85(m，1H)；HRMS(ESI)m/z calcd.for C₂₃H₂₉ClNO₅434.1729，found for[M+H]⁺434.1724。

将β-内酯6a-1(85mg，0.20mmol，＞99.9％ee)溶于乙腈(0.65mL)中，滴加硝酸铈铵(329mg，0.60mmol)的水溶液(0.65mL)。反应完成后加入乙酸乙酯稀释，用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤后旋除溶剂，柱层析得到Iso-Salinosporamide A 6-1(49mg，78％)为白色固体。mp.183-185℃；[α]_D ²⁰＝+180.5°(c 0.87，CHCl₃)；¹H NMR(600MHz，Pyridine-D₅)：δ：10.23(s，1H)，7.69(s，1H)，5.97(d，1H，J＝10.2Hz)，5.84(d，1H，J＝9.6Hz)，4.85(d，1H，J＝10.2Hz)，4.12(t，2H，J＝6.6Hz)，3.43(m，1H)，3.17(m，1H)，2.62(m，1H)，2.28(m，2H)，1.86(s，3H)，1.82(m，2H)，1.57(m，1H)，1.48(m，1H)，1.37(m，1H)；HRMS(ESI)m/zcalcd. for C₁₅H₂₀ClNO₄Na 336.0973，found for[M+Na]⁺336.0979。

Claims

1.一种式5所示结构的化合物的不对称全合成方法，

包括以下步骤：通过化合物7或化合物8与化合物9反应得到酰胺10和11，酰胺11通过脱保护、氧化得到醛12，再与R₃负离子反应生成二醇14，二醇14通过脱保护、内酯化得到化合物5；

其中X为卤素；

R₁为C₁-C₈的烷基、氯乙基；

R₂独立地为氢、C₁-C₈的烷基；

R₃独立地为C₃-C₈的环烷基、C₃-C₈的环烯基、苯基；

R₄为取代或非取代的苄基；

R₅为C₁-C₈取代或非取代的烷基、取代或非取代的苄基；

R₆为-Si(R_C)₃，R_C独立地为C₁-C₆取代或非取代的烷基、取代或非取代的苯基、取代或非取代的苄基。

2.按照权利要求1所述的合成方法，其特征在于所述的式9化合物的结构如下所示：

化合物9-2：R₅＝Me，R₆＝TBS；化合物9-3：R₅＝^tBu，R₆＝TBS。

3.按照权利要求1所述的合成方法，其特征在于所述的化合物10和11的制备步骤是：化合物7或化合物8在惰性溶剂中-50℃到100℃范围内碱存在下与光学活性的化合物9反应生成非对映异构体10和11；所说的化合物7是原位生成的；所说的惰性溶剂为二氯甲烷、1，2-二氯乙烷或氯仿；所说的碱为吡啶、4-二甲氨基吡啶(DMAP)或1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(DABCO)：

其中X、R₁、R₂、R₄、R₅、R₆的定义与权利要求1中的定义相同。

4.按照权利要求1所述的合成方法，其特征在于所述的化合物12的制备步骤：化合物11在惰性溶剂中-50℃到100℃范围内脱去R₆后得到伯醇化合物11a，然后在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内在氧化剂作用下生成内酰胺醛12；所说的惰性溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯或乙腈；所说的氧化剂为戴斯-马丁试剂(Dess-Martin periodinane)、柯林斯试剂(Collins reagent)和吡啶铬酐盐酸盐(PCC)：

其中R₁、R₂、R₄、R₅的定义与权利要求1中的定义相同。

5.按照权利要求1所述的合成方法，其特征在于化合物14的制备步骤：醛12在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内与R₃负离子反应生成二醇14；所说的惰性溶剂为四氢呋喃；所说的R₃负离子来源于有机锌试剂、有机镁试剂、有机锂试剂、有机铜试剂、有机锡试剂、有机硼试剂、有机钯试剂、有机硅试剂；

其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅的定义与权利要求1中的定义相同。

6.按照权利要求1所述的合成方法，其特征在于化合物5的制备步骤：化合物14在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内与脱保护试剂反应脱去R₄、R₅保护基，然后在惰性溶剂中-80℃到100℃范围内活化试剂存在下进行内酯化，得到化合物5；

7.按照权利要求6所述的合成方法，其特征在于所说的惰性溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯、乙腈、乙酸或水；所说的脱去R₅保护基的脱保护试剂：当R₅＝Me时为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、三氯化硼、三溴化硼、三氯化铝、二甲基甲碲基铝(Me₂AlTeMe)、二甲基甲硒基铝(Me₂AlSeMe)、二甲基甲硫基铝(Me₂AlSMe)。