CN101801423A - 用基于小微滴过氧化氢的气雾剂进行广谱低残留消毒的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了对空间进行消毒的方法，所述方法通过应用作为精细气雾剂的水性消毒组合物并将所述空间晾干来完成，所述精细气雾剂的微滴尺寸为其中50％的微滴直径至多100μm，所述水性组合物包含：a.浓度1％到10％(w/w)的过氧化氢；b.浓度0.01％到2％(w/w)的环状羧酸或其盐；c.浓度0.05％到15％(w/w)的润湿剂。

Description

用基于小微滴过氧化氢的气雾剂进行广谱低残留消毒的方法
本发明涉及通过应用作为精细气雾剂(aerosol)的具有广谱抗微生物活性的低残留杀生物组合物，对空间进行消毒的方法。
抗性细菌如Methicillin-Resistant Staphylcococcus aureus(MRSA)和Vancomycin-Resistant Enterococcus(VRE)，病毒如SARS-病毒、流感A病毒H5N1和Norovirus，和细菌内生孢子如Bacillus subtilis、Clostridiumsporogenes、Clostridium difficile和Bacillus anthracis的内生孢子，对人类健康带来重大威胁。在紧急状况区域中，需要从物品或房间中有效地除去这些相当顽固的病原体而不对人类健康造成负担。非常不希望使用刺激性化学品、对人类而言不安全的化学品或留下不想要的并且难以去除的残余的化学品。
对材料表面(特别例如食物表面和健康护理表面或设施表面和与食物接触的表面，其典型地为硬表面，包括金属、玻璃、复合材料等等)上和大房间内的细菌孢子、真菌孢子和真菌进行杀伤、灭活或减少其活性种群也是一个难以解决的问题。具体地，细菌孢子具有孢子层的独特化学组成，所述组成使得它们比营养性细菌更加抗化学和物理药剂的抗微生物作用。一个尤其困难的问题涉及形成细菌孢子的Bacillus cereus类微生物的杀微生物处理。Bacillus cereus类微生物包括Bacillus cereus、Bacillusmycoides、Bacillus anthracis和Bacillus thuringiensis。这些微生物共享许多表型特性，具有高水平的染色体序列相似性，并且是已知的肠毒素生产者。与细菌孢子类似，真菌细胞(特别是霉菌孢子)的独特组成使得它们比其他微生物更加抗化学和物理药剂。
通常，消毒包括两步骤的过程，其中在应用消毒剂后冲洗要被消毒的底物。然而，在一些情况下，不希望甚至不可能进行冲洗步骤，例如在消毒房间或不容易到达的空间时。另一个例子是医疗设施灭菌，其中期望在灭菌后进行最低限度的冲洗。
在不应用冲洗的这种情况下，需要使用在要被处理的空间中留下尽可能少残留的消毒组合物。
低残留或无残留仅可通过如下方法实现：使用在应用后不在表面上留下任何痕迹的成分，或者大幅降低所用成分的浓度范围。另一方面，活性成分应当提供足够的消毒活性(意味着活性成分的浓度不应当过低)，并且组合物应当允许足够的接触时间(意味着组合物不应当过快蒸发)。
一些无残留的抗微生物组合物含有醛，如戊二醛或甲醛，醛常常与其他抗微生物化合物组合。例如，对大区域消毒而言最广泛使用的方法是用甲醛熏蒸消毒。甲醛是可疑的致癌物和强力的过敏原，这严重限制其在人居住的结构中的有用性。在一些国家中，甲醛由于其致癌性质已被禁止用于空气的消毒。因此，在消毒应用中减少或去除醛是明确有利的。
具有低残留的其他非常有效和快速的抗微生物剂以过乙酸和衍生物为基础。除了刺激性气味和使用者呼吸道的问题以外，过乙酸是高度腐蚀性和氧化性的，因此不适合于许多情况。当表面或物体由金属制成和/或应用之后不对其冲洗时，腐蚀性引起较大的问题。
在本领域中已知为有效的抗微生物化合物的若干其他化合物在气雾剂或非擦拭型(non-wipe)应用中完全无用。季铵化合物、氯己定、双胍、三氯生、螯合剂、精油和卤素会留下大量残留，所述残留通常是粘性并难以去除的，并且有时甚至是腐蚀性的。另外，它们的效力谱不够宽。
因为醛组合物在许多国家被禁止用于房间和空气消毒，所以提出了若干基于低浓度季铵化合物的组合物，大部分与其他抗微生物活性物质组合。然而，即使低浓度的季铵化合物也会留下残留，所述残留即使在冲洗后仍然存在，并且是非常不想要的，特别是在食物加工环境中。因为长期性的残留，甚至在大部分地区中禁止在食物加工环境中不经冲洗地使用季铵化合物。这些组合物也不提供足够宽的抗微生物谱，特别是对未包封的病毒、分枝杆菌和细菌内生孢子没有抗性。用这些类型的化合物对大空间消毒有重大的缺点和严重的限制。
因此，毫无疑问对有效并安全地处理大空间的新解决方案仍然存在需要。
从健康和环境的观点来看，基于过氧化氢的区域消毒剂是更加优选的。在已知的消毒剂和杀生物剂中，过氧化氢似乎具有特殊的潜能，因为分解产物水和氧是无毒并且对环境无害的。过氧化氢是一种无残余的消毒剂。另外，其趋向于具有广谱的杀生物活性。例如在存在有害生物但是其身份未知的情况下，广谱活性是重要的。然而，过氧化氢需要长的接触时间，这在将液体雾化为小微滴的区域消毒中通常难以实现。
另外，过氧化氢以相对高的浓度(8-10％和更高)在可接受的接触时间中仅对真菌和酵母有效。只有在使用甚至更高(通常高于10％)的过氧化氢浓度时才杀死细菌内生孢子、未包封的病毒和分枝杆菌。在这些高浓度下，过氧化氢具有强腐蚀性和氧化性，抵消了其与目前使用的杀生物剂相比的积极有利的方面。
US 6,500,465公开了一种无残留组合物的用途，所述组合物包含过氧化氢、叔丁基过氧化氢和与水相容的二醇或二醇醚，例如丙二醇。过氧化氢和叔丁基过氧化氢以10％、14％和17％(w/w)的示例总浓度使用。该浓度被认为对材料和皮肤具有强腐蚀性，并且具有强氧化性。
EP 0 948 892公开了包含过氧化氢、聚(亚烷基二醇)烷基醚和抗微生物精油的组合物。示例组合物还包含作为溶剂的苯甲醇和水杨酸。可以将组合物包装在手动操作的喷雾分散容器中。该发明中没有提到喷雾组合物的微滴尺寸，也没有提到所述组合物的杀分枝杆菌或杀孢子活性。应用这些组合物后不进行冲洗只有在稀释组合物之后才是可行的。然而，稀释产生了对广谱抗微生物活性而言过低的过氧化氢浓度。已知精油留下大量并难以去除的残留。
EP 0 949 325公开了适用于清洁和消毒毯子的、包含过氧漂白剂的液体组合物，所述组合物被包装在适合以微滴喷雾形式将组合物释放在毯子上的容器中，所述喷雾的颗粒尺寸分布为平均直径D(v，0.9)小于1500μm、优选地在350μm和10μm之间。
WO 2007/014437公开了对空间或受空间限制的表面消毒的方法，包括对水性过氧化氢进行超声喷雾(nebulization)，形成喷雾剂(nebulant)。所述喷雾剂被赋予一种能量，并且其持续时间足以使溶剂(水)比灭菌剂(过氧化氢)优先汽化，从而提高喷雾剂颗粒中灭菌剂的浓度。
本发明的目的是提供使用杀生物组合物对空间消毒的方法，所述杀生物组合物可以在环境条件下作为精细气雾剂应用，尤其是作为气雾(fog)或干燥尘雾(dry mist)来应用，对于粘附在无生命表面(例如房间墙壁或置于房间中的物品)的微生物及其孢子和对于空气中的微生物和微生物孢子而言，其具有优秀的消毒强度。
本发明的目的还在于提供一种使用下述组合物的方法，所述组合物要作为穿透性和持久的精细气雾剂被应用，其不留下大量残留，并且之后不需要冲洗。
本发明的目的还在于提供消毒表面和环境空气的安全有效的方法，所述方法如下完成：杀死致病微生物和霉菌或降低或延迟其生长，但不使用对人有毒的物质，并且不留下任何持久的残留。
本发明的目的还在于提供用于使病毒、分枝杆菌和优选地使细菌内生孢子灭活的方法。该方法应当适用于被危险的微生物或其孢子感染的建筑和空间的紧急消毒，或适用于生物恐怖主义攻击的情况。
因此，提供了通过对空间应用作为精细气雾剂的水性消毒组合物并将所述空间晾干来消毒空间的方法，所述水性组合物包含：a.浓度1％到10％(w/w)的过氧化氢；b.浓度0.01％到2％(w/w)的环状羧酸或其盐；c.浓度0.05％到15％(w/w)的润湿剂。
该水性组合物还优选地包含至多2％(w/w)、更优选地至多1％(w/w)、最优选地至多0.5％(w/w)水平的残留产生物质。
如本文所述要消毒的空间可以是任何空间，包括其中含有的任何表面和/或物品。要被消毒的空间可以是房间或舱室，例如海运集装箱、医院病房、航空器内部、购物广场、地铁系统、仓库、地窖(silo)或其他封闭或半封闭的空间。要消毒的空间中包含的暴露表面可以例如为限制所述空间的墙壁或天花板或隔断的表面，或存在于所述空间内的物品表面，例如操作台表面、机器表面、空调管道或其他表面，所述其他表面是内部的，或者可以是封闭或半封闭的。
与环状羧酸和润湿剂组合的过氧化氢在空间中作为精细气雾剂(例如气雾或干燥尘雾)应用时提供了高度有效的杀生物剂。为了控制过氧化氢分解，尽管仍然产生精细气雾剂，但是惊讶地发现包含润湿剂特别地引起与组合物的其他成分(即过氧化氢和环状羧酸)的协同效应，并且在气雾剂应用(特别是较大房间中和要消毒的空间中存在的竖直物品或物品的下表面上)中提供了微生物的大幅减少。减少竖直物品或下表面上的微生物数量是难以实现的。在研究期间还惊讶地发现可以使用相对低的过氧化氢浓度，同时仍然保持微生物(甚至在竖直物品和物品的下表面上)的高度减少，导致组合物既在气雾剂应用中高度有效，又具有低腐蚀性。
本发明的方法包括将本文所述的组合物作为精细气雾剂递送，所述精细气雾剂在本文中被定义为具有小微滴尺寸的气雾剂。小微滴尺寸是其中50％的微滴、优选地70％的微滴、更优选地90％的微滴具有至多100μm、优选地至多70μm、更优选地至多50μm、进一步更优选地至多25μm、最优选地至多10μm的直径。微滴尺寸的下限可适当地低至1-2μm。
我们发现这样小的微滴尺寸提供了更高程度的抗微生物杀伤力。还发现使用这样小的微滴尺寸，不采取本文所述手段时过氧化氢会更快速地分解，因为微滴周围有过量的与过氧化氢反应的空气。因此，过氧化氢不能够作为活性分子达到空间中较远的区域。
特别是在大房间中、竖直结构(例如墙壁)和下部水平结构(例如桌面)上，常见过氧化氢气雾剂的抗微生物杀伤效率往往不足。更高的过氧化物浓度(如US 6,500,465中所提出的)提供更好的消毒结果，但是也导致组合物有更高的腐蚀性。
我们发现在组合物中包含润湿剂有利地确保了本文定义的小微滴尺寸的产生，同时引起与组合物的其他特定成分的协同效应，从而提供精细气雾剂应用中微生物的大幅减少。另外，发现与不含有环状羧酸的组合物相比，作为精细气雾剂提供组合物时，组合物中环状羧酸的存在提供了更稳定的空气中过氧化氢浓度。本文所述方法中使用的组合物有利地确保使用25ppm-100ppm、优选地约50ppm-100ppm的空气中过氧化氢浓度获得良好的消毒结果，这可以在10到15分钟的相对短的接触时间内获得。通过组合本发明方法中使用的组合物中的成分，能够获得气雾剂微滴大小以及成分在空气中稳定性的优化，从而提供高消毒强度和低残留。
使用房间雾化设备，将组合物作为本文定义的精细气雾剂喷雾来应用。能够产生这类精细气雾剂的设备的例子是热雾化器(fogger)、电雾化器、加压空气雾化器、超声雾化器和低能量汽化器(vaporizers)。热雾化器的例子是Curtis Dynafog的Patriot系列和Dr.Stahl的Pulsfog系列。加压空气雾化器的例子是Frans veugen的ColdFogger。电雾化器的例子是CITC的Fogmax，The Fogmaster Corporation的Fogmaster系列，Igeba的Nebulo Fogger，Swintec的Fontan Turbostar。超声雾化器的例子是Shira的FG 620和4-MFG6R02，和Frans Veugen的Ultra-fogger。低能量汽化器的例子公开于US 2007/0098591中。雾化器可以以下述形式出现：单机或组装的雾化机器，或者可携带的雾化器或气雾喷雾器，例如背包型(例如SPsystems Yard Tender或Birchmeier Spraymatic 10B)或手提型(例如Birchmeier Spraymatic 5P、5S或10SP或Hudson)。
为了获得具有至多50μm或25μm或10μm的非常小微滴尺寸的精细气雾剂，优选地使用超声雾化器。
在本文所述方法中要使用的特定组合物因此被精细调节为产生小的微滴尺寸，但是在另一方面不由于过低的表面张力通过蒸发损失微滴。要使用的组合物被进一步调节为具有相当低的蒸发速率和更大的润湿能力。要使用的组合物可取决于使用的雾化设备而被进一步精细调节。
在本文所述的方法和组合物中，过氧化氢浓度的下限可以是1％、优选地为2％、更优选地为3％(w/w)。过氧化氢可作为约3-55％、典型地约35％的水溶液而商业获得，随后可以用水和组合物的其他组分将其稀释至想要的水平。还可考虑以等摩尔量产生过氧化物离子的其他过氧化物来源。例如，可以通过包含下述试剂来制备水性组合物，所述试剂在混合(例如固体过氧化物化合物在水中混合)时形成过氧化物离子。
本发明考虑了过氧化氢浓度高达50％的浓缩组合物的使用，所述浓缩组合物在其应用前被稀释为使用组合物。主要出于经济的原因，通常会出售浓缩物，并且最终用户会用水或水性稀释剂将浓缩物稀释为具有适当过氧化氢浓度的使用组合物。
环状羧酸优选地选自呋喃甲酸、水杨酸和/或苯甲酸，并且以0.01％到2％(w/w)、优选地从0.05％到1％(w/w)、更优选地从0.1％到0.5％(w/w)的浓度存在。
另外，组合物包含润湿剂。在本发明的上下文中，润湿剂是促进水分停留并且延迟添加了润湿剂的组合物蒸发的化合物。对本文所述的组合物而言，适当地选择润湿剂以确保本文所述的气雾剂的小微滴尺寸，同时对气雾剂提供提高的润湿能力和降低的蒸发速率。通过降低气雾剂微滴的蒸发，延长了杀生物活性的接触时间。
合适的润湿剂包括多羟基化合物，例如三羟基或二羟基化合物，如甘油、丙二醇、乙二醇、二丙二醇、丁二醇、己二醇和/或芳香醇，例如苯甲醇、苯甲氧乙醇、苯氧乙醇、苯氧丙醇、苯氧异丙醇、苯丁醇、甲基异丙基苯酚、邻-苯基苯酚、1-苯氧基-2-丙醇、2-苯氧基-1-丙醇、3-苯氧基-1-丙醇、1-苯氧基-2-丁醇、2-苯氧基-1-丁醇、1-苯基乙醇、2-苯基乙醇、3-苯基-1-丙醇、α-4-二甲基苯甲醇，及其混合物。润湿剂优选地以0.1％到15(w/w)、更优选地0.2％到10％(w/w)的浓度存在。
优选的润湿剂是甘油、丙二醇、丁二醇、苯氧乙醇、苯氧丙醇和/或苯甲醇。如果选择了不挥发或较少挥发的润湿剂例如甘油，则浓度可以在至多2％的较低范围内，从而在应用气雾剂和随后干燥后提供适当低的残留水平。
为了产生本文所述含有足够小微滴的精细气雾剂，可以对组合物任选地补充挥发性C2-C6脂肪醇。挥发性C2-C6脂肪醇包括脂肪族、直链和/或支链的、单醇和/或二醇。这类脂肪醇的例子是乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、仲丁醇、异丁醇、正戊醇、正己醇等等，或其组合。在特别优选的实施方案中，挥发性C2-C6醇选自乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、正丁醇。
醇或醇的组合可以以0.05％到15％(w/w)、优选地0.1％和10％(w/w)范围内的浓度存在。
某些芳香醇具有多重功能。这些功能包括减小气雾剂微滴尺寸，从而增强组合物的活性和效率，和提高组合物的润湿能力，以及其他功能。因此可以通过选择醇及其浓度水平来优化组合物。另外，某些芳香醇提高某些优选的羧酸在较低pH下的溶解度，从而通过用尽可能少的成分优化组合物来获得更少的残留。
惊讶地发现，作为具有本文所述小微滴尺寸的气雾剂应用的、含有低浓度环状羧酸(与过氧化氢组合，进一步与润湿剂组合)的组合物提供了具有减少的接触时间的广谱消毒剂。这类气雾剂组合物不仅是杀细菌的，而且也是杀真菌、杀分枝杆菌和杀病毒的，并且在可接受的接触时间下甚至是杀孢子的。这样的广谱抗微生物活性先前只可能通过使用醛或更高浓度的过乙酸或应用非常长的暴露时间来实现。长的暴露时间在喷雾或气雾剂应用中是不可行的，因为组合物在达到所需的接触时间之前会从表面上蒸发，所述接触时间通常需要多达30-60分钟或甚至若干小时，对杀孢子活性而言多达6-24小时。
在本发明通篇中，重量百分比(w/w)以组合物的总重为基础。
可以如下测量水性组合物的残留水平：(1)对惰性、清洁、平滑和非多孔的物品(例如惰性玻璃平板)称重，(2)将已知量的水性组合物应用于物品上，并使其散开而不流出，(3)使物品晾干一段时间，允许液体全部蒸发(典型地，这段时间可以从30分钟到240分钟)，和(4)对物品称重。在本发明的实施方案中，优选的最大可允许重量增加可以是所应用的水性组合物重量的2％。
水性组合物可具有1和12之间的pH，特别是对用于需要朊病毒(prion)失活的情况而言在更高碱性条件下，但是优选地在1.5和8之间，更优选地在2和5之间。可以通过适当量的酸或碱调节组合物的pH。
水性组合物可还含有任选的化合物，例如过氧化氢稳定剂、表面活性剂、抗腐蚀剂。这些化合物是本领域已知用于掺入过氧化氢组合物中的。
稳定剂以下述量存在，所述量足以将组合物中过氧化氢的稳定性维持至使用，并在存在污物时将稳定性维持在足以允许过氧化氢破坏微生物的浓度下。存在的稳定剂的量取决于使用的稳定剂类型，和组合物要在使用前立即形成还是要储存数周或数月。另外，如果在组合物中使用自来水而不是去离子水，则适当更高的稳定剂浓度可能是合适的。
组合物可包含一种或多种腐蚀性抑制剂，特别是在酸性pH范围中和更高的过氧化氢浓度下使用时。通常优选在组合物中具有一种或多种腐蚀性抑制剂，使得组合物可以被应用于多种金属基质上。腐蚀性抑制剂以足以抑制医疗仪器或其他设备在暴露于组合物期间被腐蚀的浓度存在。
另外，组合物优选地含有表面活性剂。可以在组合物中使用的表面活性剂包括任何下述组分，所述组分在本领域中已知提高组合物表面活性，提高进入被处理的物品缝隙中的渗透。优选的表面活性剂确保组合物的提高的润湿和渗透能力。这些优选的表面活性剂包括非离子表面活性剂和两性表面活性剂。优选的非离子表面活性剂是直链或分支的C8-C18脂肪醇乙氧基化物和/或烷基聚葡萄糖苷。优选的两性表面活性剂为氧化胺、甜菜碱、羟磺酸甜菜碱(hydroxysultaines)、烷基胺、烷基酰胺和/或两性咪唑啉衍生物。
优选使用超声雾化器提供可能的最小微滴尺寸，例如至多50μm或25μm或10μm。然而，使用超声雾化器时，应当注意组合物应当不含有下述浓度的表面活性剂，所述浓度在生产这样的精细气雾剂时产生泡沫。例如，形成泡沫的表面活性剂如硫酸烷基酯、磺基琥珀酸烷基酯、烷基醚硫酸酯、乙氧基化的醇、乙氧基化的脂肪酸、氧化胺等等仅可以低浓度例如至多0.05％或0.1％或0.2％(w/w)存在，或者完全不存在。
在组合物中掺入任何任选的化合物时，应当注意不超过使用的组合物所要求的残留水平。
组合物的剩余部分可适当地为水。
本文所述的组合物和方法针对多种微生物是有效的，所述微生物例如革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、酵母、霉菌、细菌孢子、病毒等等。组合物和方法有效杀死多种人病原体，例如Salmonella typhimurium、Staphylococcus aureus、Pseudomonas aeruginosa、Mycobacteria、Legionella、Campylobacter jejuni、Listeria monocytogenes和Escherichia coli0157:H7。对空气消毒(例如在存在病毒或细菌或真菌孢子的情况下)而言它们非常有效。组合物可以是杀孢子的，并可被有效地用于从空气和/或表面去除Bacillus anthracis(炭疽)孢子。所述组合物和方法能够在食物加工表面、健康护理表面、或房间消毒中，通过气雾剂应用杀死多种微生物。
优选地，在受控悬浮液测试中，水性组合物在2分钟内对Staphylococcus aureus产生log 5的减少，在10分钟内对Aspergillus niger产生log 5的减少。
本文所述的组合物和方法也可以对朊病毒具有活性。它们可与下述空间的处理一起应用，所述空间含有被朊病毒污染的表面和/或设备，例如医疗和食物表面和装置，和医疗和手术设施。术语“朊病毒”被用于描述蛋白质性传染物(proteinaceous-infectious agent)，其在人和/或动物中引起相对类似的脑疾病，所述疾病常常是致命的。朊病毒非常抗失活。与微生物不同，朊病毒不含要被破坏或破裂的DNA或RNA。朊病毒由于其疏水性质而趋向于聚集在一起成为不溶簇。在导致微生物成功灭菌的许多条件下，朊病毒形成更紧密的簇，所述簇保护自身和下面的感染性蛋白不受灭菌过程的作用。因为本文所述的组合物的小微滴尺寸和润湿能力以及过氧化氢的氧化能力，朊病毒可以被成功灭活。
目的是使朊病毒灭活的组合物优选地处于较高pH下，并且可还含有特定的表面活性剂和溶剂，所述表面活性剂和溶剂增强蛋白质溶解和组合物进入蛋白质簇的渗透。优选地，在这类组合物中使用具有高溶解能力的特定挥发性溶剂。优选的溶剂的例子是丙二醇醚，例如1-乙氧基-2-丙醇、1-丁氧基-2-丙醇、1-(2-甲氧基-2-甲基乙氧基)-2-丙醇、二丙二醇甲基醚、1-(2-丁氧基-2-甲基乙氧基-2-丙醇)等等。
在一个实施方案中，组合物被用作多组分的组合物。例子是含有水、过氧化氢、羧酸和任选的稳定剂的一种组分。第二组分含有湿润剂和其他挥发性成分。另外，可以针对朊病毒使用两种组分体系。用过氧化氢使朊病毒失活发生在更高的pH和具有支持物质时。因此基础组分可以在更低的pH下(维持稳定的过氧化氢组合物)，其中第二组分具有更高的pH并且含有支持物质和任选地含有活化剂。
本发明要求组合物与被污染的空间有一定的最小接触时间，以实现显著的抗微生物效应。接触时间可随着应用类型、使用的组合物的浓度、使用的组合物的温度、存在的污物量、存在的微生物数量而变化。通常，暴露时间可以从5或10分钟到约60分钟。在房间消毒应用中，暴露时间可以为至少10分钟，但是被处理的房间在暴露于精细气雾剂后可便利地放置12到24小时。
本发明的方法尤其适用于大空间的消毒。通过使用小微滴尺寸气雾剂，优选地通过使用超声雾化器来提供所谓的“干燥尘雾”，所述方法提供了大幅改进的消毒结果。本文所述方法在微滴尺寸、相对于过氧化氢稳定性的蒸发和降解速率、低残留和仍然广谱的抗微生物效力之间提供了精细的平衡。发现使用所述组合物时，能够有效地将惊人高的消毒能力与非常低的残留和简单并且相对较短的操作步骤有效地组合。
实施例
悬浮液测试
使用符合化学消毒剂和防腐剂欧洲规范EN 1276(EN 1276：评价食物、工业、化妆品和公共区域中使用的化学消毒剂和防腐剂杀菌活性的定量悬浮液测试：测试方法和要求)的受控杀菌悬浮液测试来测试示例的组合物的杀生物活性。将每ml含有约108cfu测试微生物的1ml测试悬浮液添加进8ml要测试的组合物中，并添加1ml milli-Q水。数分钟的接触时间后，如下文所示，测定活细菌量。EN 1276规范规定了在5分钟的接触时间后活力计数的log 5的减少。
类似地，在EN 1650悬浮液测试中测试杀真菌活性，在EN 14348悬浮液测试中测试杀分枝杆菌活性，并在EN 13704悬浮液测试中测试杀孢子活性。
在一些实验中，根据EN 1276或EN 1650步骤向悬浮液中添加蛋白质负荷，从而模拟不干净的实施条件。为了提供干净条件，添加0.3％牛血清白蛋白，为了提供脏污条件)，添加3％牛血清白蛋白。
在将组合物通过喷雾或雾化作为精细气雾剂应用并且之后不擦去或冲洗的特定应用中，最具抗性的微生物是细菌Staphylococcus aureus和真菌Aspergillus niger。怀疑在这一类型的应用中，Staphylococcus aureus是尤其具有抗性的生物，因为其过氧化氢酶的生产有效地降解了过氧化氢。申请人进行的实践测试证明，使用相对短的接触时间对Staphylococcus aureus(ATCC 6538)和Aspergillus niger(ATCC 16404)进行的悬浮液测试得到了在精细气雾剂应用中预测针对全微生物谱(细菌、病毒、真菌、分枝杆菌、细菌内生孢子等等)的抗微生物剂杀伤效率的有效模型。在脏污条件(分别根据欧洲规范EN 1276和EN 1650)下进行了一系列悬浮液测试，以证明多种组合物(见下表)对这两种微生物的效力。
所有组合物具有2.5和3.5之间的pH。
  Log减少
  Staphylococcus Aureus ATCC 6538   2分钟
  II   5％H2O2+0.5％呋喃甲酸   2.3
  III   3％H2O2+0.3％呋喃甲酸   ＜2.0
  IV   2％H2O2+2.5％苯甲醇   3.5
  V   3％H2O2+2％苯氧乙醇   ＞6.5
  IX   5％H2O2+1％苯氧乙醇+0.3％水杨酸+2％丙二醇   ＞6.5
  X   5％H2O2+1％苯氧乙醇+0.3％苯甲酸+2％丙二醇   ＞6.5
  XI   5％H2O2+1％苯氧乙醇+0.3％乳酸+2％丙二醇   ＞6.5
  XII   5％H2O2+2％苯氧乙醇+0.3％呋喃甲酸   ＞6.5
  XIII   5％H2O2+5％丙醇+0.3％呋喃甲酸+5％丙二醇   ＞6.5
  XIV   5％H2O2+10％异丙醇+0.4％水杨酸+1％丁二醇   ＞6.5
  XV   5％H2O2+10％乙醇+0.5％呋喃甲酸+0.5％丙三醇   ＞6.5
  Aspergillus Niger ATCC 16404   15分钟
  I   5％H2O2+2.5％苯甲醇   2.2
  II   5％H2O2+0.5％呋喃甲酸   ＞5.5
  III   3％H2O2+0.3％呋喃甲酸   ＞5.4
  10分钟
  Log减少
  IV   2％H2O2+2.5％苯甲醇   ＜1
  V   3％H2O2+2％苯氧乙醇   ＜1
  IX   5％H2O2+1％苯氧乙醇+0.3％水杨酸+2％丙二醇   ＞5.2
  X   5％H2O2+1％苯氧乙醇+0.3％苯甲酸+2％丙二醇   ＞5.2
  XI   5％H2O2+1％苯氧乙醇+0.3％乳酸+2％丙二醇   ＜1
  XII   5％H2O2+2％苯氧乙醇+0.3％呋喃甲酸   ＞5.2
  XIII   5％H2O2+5％丙醇+0.3％呋喃甲酸+5％丙二醇   ＞5.2
  XIV   5％H2O2+10％异丙醇+0.4％水杨酸+1％丁二醇   ＞5.2
  XV   5％H2O2+10％乙醇+0.5％呋喃甲酸+0.5％丙三醇   ＞5.2
  Bacillus subtilis孢子   90分钟
  XVI   7％H2O2+0.3％呋喃甲酸+2％丙二醇+5％丙醇   3.8
含有H2O2、环状羧酸和润湿剂(苯甲醇、苯氧乙醇、丙二醇，和/或丁二醇，见组合物IX、X、XII、XIII、XIV、XV)的组合物与缺乏这些组分之一的组合物(见组合物I、II、III、IV、V和XI)的低杀生物活性相比，对S.aureus以及A.niger二者显示高的杀生物活性。另外，获得了良好的杀孢子活性(组合物XVI)。
使用＜100μm气雾剂的气雾剂应用
使用Fogmaster Corporation制造的电子房间雾化设备，所述设备产生微滴尺寸约100μm的气雾剂。将气雾剂以12ml/m3的量应用。对40m3的房间喷雾20分钟。喷雾后将房间放置3小时，使过氧化氢浓度降低至可以进入房间的安全水平。在距离房间雾化设备2-3米处，放置含有每毫升106到108个微生物的干燥接种物的若干个培养皿。应用后，使房间不通风3小时，之后测量微生物计数的减少。这通过从培养皿中洗掉微生物残留、将其悬浮于已知体积的液体培养基(生理盐水或琼脂)中、将所述悬浮液涂布在含生长培养基的培养皿上并孵育适当的时间段(取决于微生物)来完成。之后，对平板计数并计算存活率。
在该气雾剂应用中针对Pseudomonas aeruginosa、E.coli、Bacillussubtilis、Clostridium sporogenes、Staphylococcus aureus、Enterococcushirae、Candida albicans和Aspergillus niger测试若干组合物(见下表)。
 A   5％H2O2+2.5％苯甲醇+0.1％呋喃甲酸
 B   8％H2O2+6％丙二醇+0.3％呋喃甲酸
 C   6％H2O2+2％苯氧乙醇+0.2％呋喃甲酸+5％丙醇
 D   5％H2O2+2％苯氧乙醇+0.2％呋喃甲酸+0.2％C12氧化胺
 E   4％H2O2+2％苯氧乙醇+0.2％苯甲酸+5％丙二醇
 F   7％H2O2+0.2％水杨酸+5％丙二醇+5％异丙醇+0.05％C10脂肪醇
 G   6％H2O2+0.3％呋喃甲酸
组合物A(应用后有5小时接触时间)在Pseudomonas aeruginosa、E.coli、Bacillus subtilis、Staphylococcus aureus中提供了至少log 5的减少。然而，Aspergillus niger未被充分减少。
组合物B也提供了Aspergillus niger的log 4的减少。
组合物C在所有测试的生物(范围从细菌到真菌和细菌内生孢子)中提供了大于log 6的减少。
组合物D在所有测试的生物中提供了大于log 6的减少。
组合物E在所有测试的生物(范围从细菌到真菌和细菌内生孢子)中提供了大于log 6的减少。
组合物F在所有测试的生物中提供了大于log 5的减少。
并非本发明范围内的组合物G对Aspergillus niger、Staphylococcusaureus和Bacillus subtilis提供了不足的减少。
使用＜10μm气雾剂的气雾剂应用
使用Frans Veugen BV制造的超声房间雾化设备，所述设备产生微滴尺寸8μm左右(高斯分布，＞90％小于10μm)的气雾剂。房间体积40m3。将气雾剂以5ml/m3的量应用15分钟。15分钟后，房间完全是尘雾，并且尘雾的密度程度如下文所示。
在房间中放置若干10x 10cm的镜面平板，用于评价组合物引起的残留。10次喷雾循环后，通过接触和不接触平板时评价镜面平板上的残留来视觉观察残留。
另外，用
Figure GPA00001058766400151
过氧化氢测量设备(
Figure GPA00001058766400152
Chip MeasurementSystem)测量过氧化氢浓度，从而追踪雾化期间和关闭雾化设施后空气中的过氧化氢浓度。实际测试表明，良好的消毒结果需要至少25ppm的空气中浓度。在这一情况下，使浓度达到50-60ppm左右，并在50ppm左右保持至少10分钟。在表中“浓度稳定性”下提到这一方面。
雾化后，将房间放置2小时，使过氧化氢浓度降低至可以进入房间的安全水平。
在距离房间雾化设备1和2米处，放置含有每毫升106到108个微生物的干燥接种物的若干个培养皿。应用后，使房间不通风2小时，之后测量微生物计数的减少。这通过从培养皿中洗掉微生物残留、将其悬浮于已知体积的液体培养基(生理盐水或琼脂)中、将所述悬浮液涂布在含生长培养基的培养皿上，并将平板孵育适当的时间段(取决于微生物)来完成。之后，对平板计数并计算存活率。
在该气雾剂应用中针对Staphylococcus aureus和Bacillus cereus与Aspergillus niger的孢子测试了若干组合物(见下表)。
组合物综述
A 4％过氧化氢+1％单丙二醇+0.1％水杨酸+5％乙醇
B 5％过氧化氢+3％单丙二醇+0.2％呋喃甲酸
C 4％过氧化氢+0.5％单丙二醇+0.2％水杨酸+2％丙醇
D 5％过氧化氢
E 5％Huwa San(可商业获得的用胶体银稳定的过氧化氢产品。制造商为比利时的Roam Chemie NV)
F 5％Sanosil(可商业获得的用硝酸银稳定的过氧化氢产品。制造商为瑞士的Sanosil Ltd)
TNC＝太多而不能计数(平板过度生长，没有可测量的减少)
以上证明了不含有环状羧酸和润湿剂的组合物不产生高密度的尘雾，并且显示低浓度稳定性和低抗微生物杀伤力。
本文使用的组合物提供了提高的空气中过氧化氢浓度的稳定性，并且能够在短时间段(数分钟)中在空气中产生相对高的浓度(50-60ppm)。这大幅改进了消毒结果。

Claims (17)

1.对空间进行消毒的方法，所述方法通过应用作为精细气雾剂的水性消毒组合物并将所述空间晾干来完成，所述精细气雾剂的微滴尺寸为其中50％的微滴直径至多100μm，所述水性组合物包含：a.浓度1％到10％(w/w)的过氧化氢；b.浓度0.01％到2％(w/w)的环状羧酸或其盐；c.浓度0.05％到15％(w/w)的润湿剂。
2.根据权利要求1的方法，其中所述水性组合物包含的残留产生物质的水平少于2％(w/w)，更优选地少于1％(w/w)，最优选地少于0.5％(w/w)。
3.根据权利要求1或2的方法，其中70％、更优选地90％的微滴具有至多100μm的直径。
4.根据权利要求1到3中任一项的方法，其中所述微滴的直径至多70μm、更优选地至多50μm、最优选地至多10μm。
5.根据权利要求1到4中任一项的方法，其中所述环状羧酸选自呋喃甲酸、水杨酸和/或苯甲酸。
6.根据权利要求1到5中任一项的方法，其中所述润湿剂选自多羟基化合物和/或芳香醇。
7.根据权利要求6的方法，其中所述多羟基化合物选自丙二醇、二丙二醇、乙二醇、丁二醇和/或甘油。
8.根据权利要求6的方法，其中所述芳香醇选自苯甲醇、苯氧丙醇和/或苯氧乙醇。
9.根据权利要求1到8中任一项的方法，其中所述组合物还包含挥发性C2-C6脂肪醇。
10.根据权利要求9的方法，其中所述挥发性C2-C6脂肪醇选自乙醇、异丙醇、丙醇、正丁醇和/或正戊醇中的至少一个。
11.根据权利要求1到10中任一项的方法，其中所述水性组合物还包含非离子表面活性剂和/或两性的表面活性剂。
12.根据权利要求11的方法，其中所述非离子表面活性剂选自C8-C18脂肪醇烷氧基化物和/或烷基聚葡萄糖苷。
13.根据权利要求11的方法，其中所述两性表面活性剂选自氧化胺、甜菜碱、羟磺酸甜菜碱、烷基胺、烷基酰胺和两性咪唑啉衍生物。
14.根据前述权利要求中任一项的方法，其中所述组合物不含有下述表面活性剂，所述表面活性剂在用超声雾化器生产精细气雾剂时产生泡沫。
15.根据前述权利要求中任一项的方法，其中所述水性组合物在受控悬浮液测试中于2分钟内对Staphylococcus aureus产生log 5的减少，在10分钟内对Aspergillus niger产生log 5的减少。
16.根据前述权利要求中任一项的方法，其中所述消毒包括使朊病毒失活。
17.根据前述权利要求中任一项的方法，其中通过自动化房间雾化设备、优选地通过超声雾化设备产生所述气雾剂。
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