CN101787351A - 处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种及其制备方法，该微生物菌种异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉、枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌的质量比为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4。其制备方法的步骤为：选取微生物、活化、一级扩大、二级摇床扩大、吸附载体、配制、低温干燥、检测、计量包装。本发明可无害化处理钢渣、醋糟和风化煤，利用发酵过程中产生的有机酸中和了钢渣的强碱性，形成有机酸金属络合物，减少了养分的固定，提高了养分的有效利用率，高效地利用了钢渣、醋糟和风化煤等有机资源，减少了环境污染。
Description
技术领域
本发明属于一种微生物菌种，具体涉及一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种及其制备方法。
背景技术
微生物技术是生物学与工程学原理相结合的一门应用技术。它从自然界的土壤和水体中将微生物菌种提取出来，通过试验室各种严格的测试，确定它们分解各种有机物的能力，然后挑选有实际用途的菌株进行培养、繁殖，并且达到商业规模的应用以解决特定的问题。每种菌株均能产生某种或某几种降解某类特定有机物的生物酶，而不同种类的菌株共同作用，可以有效地将复杂的有机物系统地分解成简单的小分子，最终转变为无毒无害的产物。
钢渣是钢铁生产中经过1500-1700℃高温处理的废弃物，数量庞大，循环利用上以建材、公路建设上较多，局限性较大。钢渣主要有钙、铁、硅、镁和少量铝、锰、磷等氧化物组成。主要的矿物质为硅酸三钙、硅酸二钙、钙镁橄榄石、钙镁蔷薇灰石、铁铝酸钙以及硅、镁、铁、锰、磷的氧化物形成的固溶体，还含有少量的游离氧化钙以及金属铁、氟磷辉石等。可用作钢渣肥或复合肥料的填充料使用，也可用作土壤调理剂用于农业生产，但多用作酸性土壤的硅、钙肥使用，局限性较大。
山西老陈醋是“中国四大名醋”之一，山西大大小小的醋厂有上千家，产生的醋糟的应用方式多种多样，主要用于饲料企业，用作饲料添加剂原料，但由于其中含水量大，极易造成微生物污染引起腐败造成畜禽的病害，且其中粗蛋白、粗脂肪含量少，其利用价值不大，社会效益也不是很明显，且用量有限。
风化煤(Weathered coals)俗称“露头煤”、“煤逊”、“引煤”等，是地表或浅层的褐煤、烟煤和无烟煤长期经受大气、阳光、雨雪、地下水以及矿物质侵蚀等综合作用的产物。风化煤水分增加，颜色变浅，光泽变暗，挥发分增加，机械强度、粘结性、发热量、着火点都降低；元素组成中氧增加，碳和氢含量减少。风化煤中的风化煤总含量一般在30-70％，最高可达80％以上，其化学活性(离子交换性、络合性能等)甚至高于褐煤和泥炭风化煤。我国风化煤储量非常丰富，估计近千亿吨，可以说凡有煤矿的地方就有风化煤。据上世纪80年代初煤炭地质部门初步普查，估计山西省储量约为80亿吨。山西晋城等地的某些煤风化程度很深，使部分煤有机质转化成分子量更低的黄腐酸，甚至可以直接用酸提取出来，其在农业和医药中有更独特的应用前景。
上述几种有机物质的存在，长期堆放，不仅占用大量的土地，而且对环境造成了污染，目前尚未见到有处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，从而实现处理钢渣、醋糟和风化煤等有机废物的相关报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种及其制备方法，该方法可无害化处理钢渣、醋糟和风化煤，利用发酵过程中产生的有机酸中和了钢渣的强碱性，形成有机酸金属络合物，减少了养分的固定，提高了养分的有效利用率，高效地利用了钢渣、醋糟和风化煤等有机废物资源，减少了环境污染。
本发明的技术方案：一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，该微生物菌种异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉、枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌的质量比为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4。
所述微生物菌种为灰褐色，呈松散状。
所述微生物菌种有效活菌总数≥6亿个/g，水分≤20％，pH值为6.8-7.5。
所述各微生物载体均为经粉碎过80目筛并经高温灭菌后的硅藻土和米糠，硅藻土和米糠的质量比为2∶1。
上述处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种的制备方法，包括以下步骤：
(1)选取微生物，分别选取异常汉逊酵母〔Hensenula anomala(E.C.Hansen)Syd.&P.Syd.〕、压膜汉逊酵母(Hansenula subpelliculosa Bedford)、粉状毕赤酵母〔Pichia farinosa(Lindner)Sacc.〕、酿酒酵母(Saccharomyescerevisiae Meyen ex E.C.Hansen)、白地霉(Geotrichum candidum Link)、枯草芽孢杆菌枯草亚种〔Bacillus subitilissubsp.Subtilis(Ehrenberg)Cohn〕、地衣芽孢杆菌〔Bacilluslicheniformis(Weimann)Chester〕、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium deBary)、嗜酸乳酸菌〔Lactobacillus acidophilus(Moro)Hansen and Mocquot〕和细黄链霉菌〔Streptomyces microflavus(Krainsky)Waksman and Henriciemend.Lanoot et al.〕，上述所用菌种均在中国科学院微生物研究所中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)保藏，其保藏编号分别为CGMCC2.296，CGMCC2.770，CGMCC2.1908，CGMCC2.53，CGMCC2.361，CGMCC1.892，CGMCC1.813，CGMCC1.2393，CGMCC1.2686和CGMCC4.891；
(2)活化，在无菌条件下，用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安醅管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使其破裂，用镊子敲下已经破裂的安醅管顶端，用无菌吸管吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基，滴入安醅管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状，吸取全部菌体悬浮液，分别移植于2支斜面培养基试管中培养激活，使之具有良好的繁殖能力；
(3)一级扩大，对于酵母菌，培养基：磷酸氢二铵1g，氯化钾0.2g，硫酸镁0.2g，豆芽汁10ml，琼脂18-20g，水1000ml，pH值7.0，加12ml 0.04％溴甲酚绿(pH值5.2-6.8，颜色由黄色变紫色，作指示剂)于1.05kg/cm2，121.3℃下灭菌20分钟；取出后放成斜面，无菌下接种经筛选鉴定的酵母菌原种，放置在恒温箱中，保持温度32℃，培养48-72小时；菌苔表面菌丝生长丰满，呈现乳白色，即可取出用作二级菌种生产；对于细菌，选用牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂18-20g，水1000ml，pH值7.2～7.4，培养温度30℃，其它同上；对于放线菌，培养基：马铃薯200g，葡萄糖50g，硫酸镁0.4g，磷酸氢二钾0.4g，蛋白胨1g，琼脂18g，水1000ml，pH值7.2～7.4，于1.05kg/cm2，121.3℃下灭菌30分钟；取出后放成斜面，无菌下接种经筛选鉴定的细黄链霉菌原种CGMCC4.891，放置在恒温箱中，保持温度32℃，培养48～72小时，菌苔表面孢子生长丰满，呈现银灰色，并有露珠，即可取出用作二级菌种生产；
(4)二级摇床扩大，对于酵母菌，选用PD培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，水1000ml，pH值自然；高压灭菌技术同上，培养温度35℃±0.5℃，培养时间24-48小时；对于细菌，选用马铃薯葡萄糖(PD)培养基或马铃薯蔗糖(PS)培养基，其它同上；对于放线菌，二级扩大培养基：淀粉20g，葡萄糖10g，花生饼粉20g，硫酸镁0.25g，磷酸氢二钾0.2g，蛋白胨4g，硫酸铵2.5g，水1000ml，用5％NaOH溶液调节pH值7.5～8；先将培养基配好，开始用少量水调成糨糊状，加足水放在不锈钢中煮开，装在1000ml三角瓶中，每瓶装200ml，用二层纱布中间包一层棉花扎好瓶口经121.3℃高温灭菌30分钟，取出降温至40℃，从一级菌种中接种，放置在摇床上振荡培养16～24小时，此时孢子从萌发进入菌丝形成阶段，在正常情况下，菌丝生长良好，菌液黏稠，有少量泡沫，呈微红色，有冰片气味，即可进入摇床扩大；摇床扩大，培养基：玉米粉10g，甘薯粉20g，葡萄糖10g，花生饼粉30g，蛋白胨1g，硫酸铵2.5g，碳酸钙5g，采用种子罐培养，高温灭菌同上，接种二级菌种，接种量0.5％～1％；发酵罐温度32℃±0.5℃，通气量1∶0.5(体积比)连续搅拌，经常检查各阀门是否严密，否则使蒸汽水进入罐内造成菌丝生长不良，培养36小时，菌液黏稠，有泡沫呈微红色即可使用；
(5)载体吸附，在无菌条件下，将菌液分别导入经粉碎过80目筛并经高温灭菌后的硅藻土和米糠吸附，硅藻土和米糠的质量比为2∶1，保证其有效活菌数在10亿个/g；
(6)配制，微生物菌种组配是按照质量比异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉，枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4的比例进行配制；
(7)低温干燥，为了保证微生物的活力，干燥时，物料温度不高于50℃，干燥时间不超过15分钟；
(8)检测，有效活菌数采用平板计数法测定；
(9)计量包装，采用电子或磅秤计量，误差500±0.05g，1000±0.1g，采用塑料袋真空包装，在0-4℃下保存。
本发明与现有技术相比具有以下有益效果：(1)该微生物菌种由10株不同的菌株组成，其作用效果显著，相互间无明显的拮抗作用，微生物代谢产物多，发酵充分；(2)最大程度发挥微生物代谢产物的作用，高效地利用钢渣中金属离子和醋糟中的小分子有机物以及风化煤中腐殖酸、黄腐酸等营养物质，物料发酵温度高，生产周期短，产品质量稳定可靠；(3)可无害化处理钢渣、醋糟和风化煤，利用发酵过程中产生的有机酸中和了钢渣的强碱性，形成有机酸金属络合物，减少了养分的固定，提高了养分的有效利用率，高效地利用了钢渣、醋糟和风化煤等资源，减少了环境污染，无二次污染，节能，实现了资源的循环利用，可推广应用于多种工农业废弃物，如电厂粉煤灰、酿酒厂酒糟、制药厂药渣、城市垃圾等的无害化处理。
具体实施方式
实施例1
一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，该微生物菌种异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉、枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌的质量比为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4。所述微生物菌种为灰褐色，呈松散状。所述微生物菌种有效活菌总数≥6亿个/g，水分≤20％，pH值为6.8。所述各微生物载体均为经粉碎过80目筛并经高温灭菌后的硅藻土和米糠，硅藻土和米糠的质量比为2∶1。
上述处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种的制备方法，包括以下步骤：
(1)选取微生物，分别选取异常汉逊酵母〔Hensenula anomala(E.C.Hansen)Syd.&P.Syd.〕、压膜汉逊酵母(Hansenula subpelliculosa Bedford)、粉状毕赤酵母〔Pichia farinosa(Lindner)Sacc.〕、酿酒酵母(Saccharomyescerevisiae Meyen ex E.C.Hansen)、白地霉(Geotrichum candidum Link)、枯草芽孢杆菌枯草亚种〔Bacillus subitilissubsp.Subtilis(Ehrenberg)Cohn〕、地衣芽孢杆菌〔Bacilluslicheniformis(Weimann)Chester〕、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium deBary)、嗜酸乳酸菌〔Lactobacillus acidophilus(Moro)Hansen and Mocquot〕和细黄链霉菌〔Streptomyces microflavus(Krainsky)Waksman and Henriciemend.Lanoot et al.〕，上述所用菌种均在中国科学院微生物研究所中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)保藏，其保藏编号分别为CGMCC2.296，CGMCC2.770，CGMCC2.1908，CGMCC2.53，CGMCC2.361，CGMCC1.892，CGMCC1.813，CGMCC1.2393，CGMCC1.2686和CGMCC4.891；
(2)活化，在无菌条件下，用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安醅管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使其破裂，用镊子敲下已经破裂的安醅管顶端，用无菌吸管吸取0.5ml适宜的液体培养基，滴入安醅管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状，吸取全部菌体悬浮液，分别移植于2支斜面培养基试管中培养激活，使之具有良好的繁殖能力；
(3)一级扩大，对于酵母菌，培养基：磷酸氢二铵1g，氯化钾0.2g，硫酸镁0.2g，豆芽汁10ml，琼脂18-20g，水1000ml，pH值7.0，加12ml 0.04％溴甲酚绿(pH值5.2-6.8，颜色由黄色变紫色，作指示剂)于1.05kg/cm2，121.3℃下灭菌20小时；取出后放成斜面，无菌下接种经筛选鉴定的酵母菌原种，放置在恒温箱中，保持温度32℃，培养48小时；菌苔表面菌丝生长丰满，呈现乳白色，即可取出用作二级菌种生产；对于细菌，选用牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂20g，水1000ml，pH值7.4，培养温度30℃，其它同上；对于放线菌，培养基：马铃薯200g，葡萄糖50g，硫酸镁0.4g，磷酸氢二钾0.4g，蛋白胨1g，琼脂18g，水1000ml，pH值7.2，于1.05kg/cm2，121.3℃下灭菌30分钟；取出后放成斜面，无菌下接种经筛选鉴定的可用于生物除臭的细黄链霉菌原种GS12-7-12，放置在恒温箱中，保持温度32℃，培养72小时，菌苔表面孢子生长丰满，呈现银灰色，并有露珠，即可取出用作二级菌种生产；
(4)二级摇床扩大，对于酵母菌，选用马铃薯葡萄糖(PD)培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，水1000ml，pH值自然；高压灭菌技术同上，培养温度35℃，培养时间48小时；对于细菌，选用马铃薯葡萄糖(PD)培养基，其它同上；对于放线菌，二级扩大培养基：淀粉20g，葡萄糖10g，花生饼粉20g，硫酸镁0.25g，磷酸氢二钾0.2g，蛋白胨4g，硫酸铵2.5g，水1000ml，用5％NaOH溶液调节pH值7.5～8；先将培养基配好，开始用少量水调成糨糊状，加足水放在不锈钢中煮开，装在1000ml三角瓶中，每瓶装200ml，用二层纱布中间包一层棉花扎好瓶口经121.3℃高温灭菌30分钟，取出降温至40℃，从一级菌种中接种，放置在摇床上振荡培养24小时，此时孢子从萌发进入菌丝形成阶段，在正常情况下，菌丝生长良好，菌液黏稠，有少量泡沫，呈微红色，有冰片气味，即可进入摇床扩大；摇床扩大，培养基：玉米粉10g，甘薯粉20g，葡萄糖10g，花生饼粉30g，蛋白胨1g，硫酸铵2.5g，碳酸钙5g，采用种子罐培养，高温灭菌同上，接种二级菌种，接种量1％；发酵罐温度32℃，通气量1∶0.5(体积比)连续搅拌，经常检查各阀门是否严密，否则使蒸汽水进入罐内造成菌丝生长不良，培养36小时，菌液黏稠，有泡沫呈微红色即可使用；
(5)载体吸附，在无菌条件下，将菌液分别导入经粉碎过80目筛并经高温灭菌后的硅藻土和米糠吸附，硅藻土和米糠的质量比为2∶1，保证其有效活菌数在10亿个/g；
(6)配制，微生物菌种组配是按照质量比异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉，枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4的比例进行配制；
(7)低温干燥，为了保证微生物的活力，干燥时，物料温度不高于50℃，干燥时间不超过15分钟；
(8)检测，有效活菌数采用平板计数法测定；
(9)计量包装，采用电子磅计量，误差1000±0.1g，采用塑料袋真空包装，在4℃下保存。
Claims (5)
1.一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，其特征是该微生物菌种异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉、枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌的质量比为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4。
2.根据权利要求1所述的处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，其特征是微生物菌种为灰褐色，呈松散状。
3.根据权利要求1所述的处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，其特征是微生物菌种有效活菌总数≥10亿个/g，水分≤20％，pH值为6.8-7.5。
4.根据权利要求1所述的处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种，其特征是上述各微生物载体均为经粉碎过80目筛并经高温灭菌后的硅藻土和米糠，硅藻土和米糠的质量比为2∶1。
5.一种处理钢渣、醋糟和风化煤的专用微生物菌种的制备方法，其特征是它包括以下步骤：
(1)选取微生物，分别选取异常汉逊酵母〔Hensenula anomala(E.C.Hansen)Syd.&P.Syd.〕、压膜汉逊酵母(Hansenula subpelliculosa Bedford)、粉状毕赤酵母〔Pichia farinosa(Lindner)Sacc.〕、酿酒酵母(Saccharomyescerevisiae Meyen ex E.C.Hansen)、白地霉(Geotrichum candidum Link)、枯草芽孢杆菌枯草亚种〔Bacillus subitilissubsp.Subtilis(Ehrenberg)Cohn〕、地衣芽孢杆菌〔Bacilluslicheniformis(Weimann)Chester〕、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium deBary)、嗜酸乳酸菌〔Lactobacillus acidophilus(Moro)Hansen and Mocquot〕和细黄链霉菌〔Streptomyces microflavus(Krainsky)Waksman and Henriciemend.Lanoot et al.〕，上述所用菌种均在中国科学院微生物研究所中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)保藏，其保藏编号分别为CGMCC2.296，CGMCC2.770，CGMCC2.1908，CGMCC2.53，CGMCC2.361，CGMCC1.892，CGMCC1.813，CGMCC1.2393，CGMCC1.2686和CGMCC4.891；
(2)活化，在无菌条件下，用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安醅管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使其破裂，用镊子敲下已经破裂的安醅管顶端，用无菌吸管吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基，滴入安醅管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状，吸取全部菌体悬浮液，分别移植于2支斜面培养基试管中培养激活，使之具有良好的繁殖能力；
(3)一级扩大，对于酵母菌，培养基：磷酸氢二铵1g，氯化钾0.2g，硫酸镁0.2g，豆芽汁10ml，琼脂18-20g，水1000ml，pH值7.0，加12ml 0.04％溴甲酚绿(pH值5.2-6.8，颜色由黄色变紫色，作指示剂)于1.05kg/cm2，121.3℃下灭菌20分钟；取出后放成斜面，无菌下接种经筛选鉴定的酵母菌原种，放置在恒温箱中，保持温度32℃，培养48-72小时；菌苔表面菌丝生长丰满，呈现乳白色，即可取出用作二级菌种生产；对于细菌，选用牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂18-20g，水1000ml，pH值7.2～7.4，培养温度30℃，其它同上；对于放线菌，培养基：马铃薯200g，葡萄糖50g，硫酸镁0.4g，磷酸氢二钾0.4g，蛋白胨1g，琼脂18g，水1000ml，pH值7.2～7.4，于1.05kg/cm2，121.3℃下灭菌30分钟；取出后放成斜面，无菌下接种经筛选鉴定的可用于生物除臭的细黄链霉菌原种GS12-7-12，放置在恒温箱中，保持温度32℃，培养48～72小时，菌苔表面孢子生长丰满，呈现银灰色，并有露珠，即可取出用作二级菌种生产；
(4)二级摇床扩大，对于酵母菌，选用PD培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，水1000ml，pH值自然；高压灭菌技术同上，培养温度35℃±0.5℃，培养时间24-48小时；对于细菌，选用PD培养基或PS培养基，即葡萄糖可用蔗糖代替，其它同上；对于放线菌，二级扩大培养基：淀粉20g，葡萄糖10g，花生饼粉20g，硫酸镁0.25g，磷酸氢二钾0.2g，蛋白胨4g，硫酸铵2.5g，水1000ml，用5％NaOH溶液调节pH值7.5～8；先将培养基配好，开始用少量水调成糨糊状，加足水放在不锈钢中煮开，装在1000ml三角瓶中，每瓶装200ml，用二层纱布中间包一层棉花扎好瓶口经121.3℃高温灭菌30分钟，取出降温至40℃，从一级菌种中接种，放置在摇床上振荡培养16～24小时，此时孢子从萌发进入菌丝形成阶段，在正常情况下，菌丝生长良好，菌液黏稠，有少量泡沫，呈微红色，有冰片气味，即可进入摇床扩大；摇床扩大，培养基：玉米粉10g，甘薯粉20g，葡萄糖10g，花生饼粉30g，蛋白胨1g，硫酸铵2.5g，碳酸钙5g，采用种子罐培养，高温灭菌同上，接种二级菌种，接种量0.5％～1％；发酵罐温度32℃±0.5℃，通气量1∶0.5(体积比)连续搅拌，经常检查各阀门是否严密，否则使蒸汽水进入罐内造成菌丝生长不良，培养36小时，菌液黏稠，有泡沫呈微红色即可使用；
(5)载体吸附，在无菌条件下，将菌液分别导入经粉碎过80目筛并经高温灭菌后的硅藻土和米糠吸附，硅藻土和米糠的质量比为2∶1，保证其有效活菌数在10亿个/g；
(6)配制，微生物菌种组配是按照质量比异常汉逊酵母、压膜汉逊酵母、粉状毕赤酵母、酿酒酵母、白地霉，枯草芽孢杆菌枯草亚种、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜酸乳酸菌、细黄链霉菌为2∶2∶2∶2∶1∶5∶3∶2∶1∶4的比例进行配制；
(7)低温干燥，为了保证微生物的活力，干燥时，物料温度不高于50℃，干燥时间不超过15分钟；
(8)检测，有效活菌数采用平板计数法测定；
(9)计量包装，采用电子或磅秤计量，误差500±0.05g，1000±0.1g，采用塑料袋真空包装，在0-4℃下保存。
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2010
- 2010-03-23 CN CN201010130284A patent/CN101787351A/zh active Pending
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