CN101762412B - 肥皂包埋植物切片方法 - Google Patents
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Abstract
一种肥皂包埋植物切片方法，该方法用肥皂作为包埋材料，克服了传统的石蜡切片方法的速度慢、操作复杂、细胞变形大、费用昂贵、徒手切片难于得到薄的切片、二甲苯危害人体健康等缺陷，具有制作周期短，一般只需要5小时左右、对植物标本处理步骤少、切片标本细胞变形小、切片制作费用低廉、对实验者身体无伤害，而且无环境污染等优点。
Description
技术领域
本发明涉及生物显微技术领域，特别是涉及一种肥皂包埋植物切片方法。
背景技术
在植物解剖学研究领域，植物显微技术普遍采用的是石蜡切片生物技术，这种技术存在十分明显的缺点：
①制作周期长：常规石蜡切片的整个制作过程一般至少需要4天时间；
②对植物标本处理步骤多：常规石蜡切片对植物材料及切片标本的物理、化学处理步骤繁多：
材料洗涤→脱水处理(包括30％、50％、70％、80％、90％、100％酒精重复三遍；每次半小时)→脱酒精和透明(包括1/2二甲苯+100％酒精处理一遍、纯二甲苯处理2遍；每次半小时)→浸蜡和包埋(1/2石蜡+1/2二甲苯→纯二甲苯，重复2遍；每次半小时)→旋转切片机切片→粘片(需要烘片台)→烘干(1小时)→封片。
③易于引起细胞变形：鉴于石蜡切片对植物材料的上述物理、化学处理过程，每一次处理，都会或多或少地导致切片标本的细胞变形、萎缩，从而导致切片标本的失真。这一缺陷对于科研而言，是十分致命的。
④耗费人力、物力、财力量大：由于上述石蜡切片的周期长、制作步骤多，需要众多的化学试剂、实验器材等特点，所以，石蜡切片制作所需人力、物力、财力量大；
⑤对切片制作者身体造成伤害和环境污染：由于此切片过程需要大量、长时间接触使用化学试剂——二甲苯。二甲苯属于芳香烃类，是有毒有害并有强烈挥发性的化学试剂。人在短时间内吸入高浓度的二甲苯，会出现中枢神经麻醉的症状，轻者头晕、恶心、胸闷、乏力，严重的会出现昏迷甚至因呼吸循环衰竭而死亡；在制片过程中的大量使用会导致两方面的污染：第一，空气污染，气味难闻，经久不散；第二，二甲苯废液倒入下水道，造成水体污染。
发明内容
本发明的目的在于克服传统的石蜡切片方法的速度慢、操作复杂、细胞变形大、费用昂贵、徒手切片难于得到薄的切片、二甲苯危害人体健康等缺陷，提供一种肥皂包埋植物切片方法，该方法用肥皂作为包埋材料，克服了石蜡切片制作的种种弊端，在植物学研究领域具有广阔的应用前景。
本发明肥皂包埋植物切片方法通过下列步骤实现：
取新鲜植物材料，包埋于肥皂后，放入冰箱冷冻2～4小时，然后取出切片。
上述方法中：
植物材料包埋于肥皂前，也可以先在固定液中固定。
进一步，将植物材料需要解剖的部分修剪成合适大小，圆柱体材料切成约0.8cm的段，扁平材料切成约0.8cm×0.6cm的块，包埋材料肥皂修整成约2×1.5×0.8cm的方块，在方块一端的中部切口，将植物材料放入切口中，经切口滴水、切口抹平、压紧切口后放入冰箱中冷冻2～4小时，然后取出切片。
更进一步，冰箱冷冻温度为-5～-18℃。
将切片洗净后上片，滤纸吸水，显微镜观察。
通过本方法制作的植物切片标本，厚度在10-20μ，符合常规植物解剖研究需要。
本发明的优点是：
(1)制作周期短：由于采用水溶性包埋材料而非传统的石蜡有机试剂包埋材料，所以省去了传统切片制作过程中的脱水、复水和再脱水等繁琐的实验步骤，大大缩短了切片制作的时间，一般只需要5小时左右，最快3小时可以得到切片标本；
(2)对植物标本处理步骤少、切片标本细胞变形小、切片制作费用低廉；
(3)对实验者身体无伤害，而且无环境污染：由于此切片过程不需要使用二甲苯，因此可以长期、大量制作切片标本，而对切片制作者身体无害；制片过程不会导致空气和水体污染。
具体实施方式
实施例1：
鹅耳栎枝条切成约0.8cm的段，包埋材料肥皂修整成约2×1.5×0.8cm的方块，在方块一端的中部切口，将鹅耳栎枝条放入切口中，经切口滴水、切口抹平、压紧切口后放入冰箱中于-5℃冷冻2小时，然后取出切片。
实施例2：
麻花杜鹃叶片切成约0.8cm×0.6cm的块，包埋材料肥皂修整成约2×1.5×0.8cm的方块，在方块一端的中部切口，将麻花杜鹃叶片放入切口中，经切口滴水、切口抹平、压紧切口后放入冰箱中于-10℃冷冻3小时，然后取出切片。
实施例3：
白刺花树根切成约0.8cm的段，包埋材料肥皂修整成约2×1.5×0.8cm的方块，在方块一端的中部切口，将白刺花树根放入切口中，经切口滴水、切口抹平、压紧切口后放入冰箱中于-18℃冷冻4小时，然后取出切片。
Claims (3)
1.一种肥皂包埋植物切片方法，其特征在于，取新鲜植物材料，包埋于肥皂后，放入冰箱冷冻2～4小时，然后取出切片。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法的具体步骤是：将植物材料需要解剖的部分修剪成合适大小，圆柱体材料切成约0.8cm的段，扁平材料切成约0.8cm×0.6cm的块，包埋材料肥皂修整成约2×1.5×0.8cm的方块，在方块一端的中部切口，将植物材料放入切口中，经切口滴水、切口抹平、压紧切口后放入冰箱中冷冻2～4小时，然后取出切片。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，冰箱冷冻温度为-5～-18℃。
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