CN101724072A - 一种抗肿瘤的单克隆抗体的序列及应用 - Google Patents
一种抗肿瘤的单克隆抗体的序列及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种能特异性结合多种肿瘤的单克隆抗体及其治疗多种肿瘤的功用。该单克隆抗体稳定性好、特异性强，特别适用于肝癌；肺癌；结肠癌；胰腺癌；乳腺癌；卵巢癌等肿瘤的治疗。本发明提供了该抗体的可变区序列。本发明还提供了一种药物组合物和一种肿瘤的诊断方法。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体而言本发明提供一种单克隆抗体，该抗体能特异识别肝癌；肺癌；结肠癌；胰腺癌；乳腺癌；卵巢癌等恶性肿瘤等恶性肿瘤组织，并能抑制肝癌；肺癌；结肠癌；胰腺癌；乳腺癌；卵巢癌等恶性肿瘤细胞和组织的生长；以及所述抗体在制备用于治疗结肠肿瘤的药物中的应用，本发明还提供药物组合物，其包含所述单克隆抗体作为活性成分。
背景技术
抗体作为疾病预防、诊断和治疗的制剂已有上百年的发展历史。随着基因工程抗体技术的发展和完善，抗体药物已从鼠单克隆抗体发展到人鼠嵌合抗体、人源化抗体及人源抗体。截至2007年美国FDA已批准36个抗体药物。此外还有超过120种抗体药物处于临床研究，超过500种抗体药物处于临床前研究。这些抗体主要应用于自身免疫性疾病、感染性疾病以及肿瘤的治疗。
在肿瘤治疗中，由于抗体的精确靶向性和高效低毒的特点弥补了传统放化疗途径特异性差、副反应强的缺点，已成为肿瘤生物治疗最重要的应用领域。1997年Rituximab成为首个经FDA认证的用于肿瘤治疗的抗体药物，在此之后，肿瘤抗体药物的研究发展迅速，截至2007年，已有9种肿瘤抗体药物上市。预计2011年，肿瘤抗体药物的销售额将达到140亿美元，占所有抗体药物销售额的47.1％。
原发性肝癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一，死亡率高，严重危害人类的健康和生命。目前，就世界范围而言，其发病率呈上升趋势，作为一种高死亡率的疾病，肝癌的病因、发生、演化、诊断、治疗都越来越引起人们的关注。其中，肝癌的早期诊断对于患者的转归以及预后都具有十分重要的意义。目前，肝癌诊断的标志物首推AFP，用于肝癌的血清学诊断已沿用多年，最近又用于肝癌血液转移的基因诊断。但此方法在特异性和敏感性上仍存在问题。就特异性而言，对于HCC患者，干扰诊断准确性的因素主要是因为部分伴有肝硬化或慢性肝炎的患者血中可检出AFP蛋白以及mRNA。由于目前尚缺特异性强的检测和/或治疗肝癌的有效方法，因此，本领域迫切需要开发特异性抗人肝癌单克隆抗体，以及检测和治疗肝癌的有效方法。
结直肠癌指大肠内膜上皮细胞的恶性改变，包括异常分化，异常增殖以及细胞代谢和分泌异常等。其发生原因、诊断治疗和预防一直是基础医学和临床医学的研究重点。结直肠癌的死亡率居肿瘤死亡的第二位。美国每年诊断为结直肠癌的病例超过13万，死亡大于5万，死亡率约40％。结直肠癌在我国是第三位常见消化道肿瘤，位于食管癌和胃癌之后，但每年死于结直肠癌的病例估计超过4万人，约占肿瘤5.8％。我国结直肠癌发病一个明显特点是平均发病年龄45岁左右，比欧美等国提前12-18年，其中直肠癌较多，约占60％。近二十年，随着我国经济增长和人们生活水平的逐步提高，我国结直肠癌的发病人数逐年增加，发病更趋于年轻化。
胰腺癌为恶性程度极高的消化道肿瘤，其死亡率占我国恶性肿瘤的第六位，在美国位于第四位。近年来，胰腺癌的发病率呈上升趋势，五年生存率仍很低，在诊断后的中位生存期为4～6个月(Coppola，2000)。胰腺癌因其独特的解剖位置，症状隐匿，早期诊断非常困难，目前尚无有效的早期诊断方法。目前，用于临床的肿瘤抗原检测，均为非特异性的肿瘤相关抗原，只能通过选择适当的肿瘤标志物进行联合检测，来提高检测的灵敏性和有效性。
本发明的特色之一是运用人结肠癌组织的分离成份直接在非免疫鼠源ScFv噬菌体表面呈现表达库中筛选。
本发明的另一个特色是，虽然是用的结肠癌组织作为筛选抗原。但所筛到的抗体能特异结合多种肿瘤组织，包括肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等。动物实验证明，该抗体能有效抑制肿瘤的生长。
本发明提供的单克隆抗体命名为CR1G，经过检测单克隆抗体对结肠癌细胞的选择性结合，而与正常结肠细胞不结合特性，显示出CR1G单克隆抗体在肿瘤的治疗和诊断方面的高效广谱应用价值。
发明内容
本发明的目的是提供一种单克隆抗体，所述单克隆抗体可与癌症抗原特异性结合，从而可以用于制备治疗癌症的药物或试剂盒。
具体地，本发明提供以下：
1.一种单克隆抗体，其特征在于，它的重链可变区由124个氨基酸残基组成，序列如下：
Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys IleSer Cys Lys Thr Ser Phe Trp Ile Glu Trp Val Lys Ile His Trp Val Lys Gln SerHis Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly Thr Glu Ile Leu Pro Gly Ser Asp Asn ThrAsn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala ThrLeu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr SerGlu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr Cys Lys Asn Arg Asn Tyr Tyr Gly Asn Tyr Val ValTrp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val SerAla
其轻链可变区由113个氨基酸残基组成，序列如下：
Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly Gln ArgAla Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Ser Val Ser Tyr Met Tyr Met His Trp Asn GlnGln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala SerAsn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr AspPhe Thr Leu Asn Ile His Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys GlnHiS Ile Arg Glu Leu Thr Arg Ser Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys ArgAla
2.一种单克隆抗体，其特征在于，它的序列与权利要求书1所述的单克隆抗体的氨基酸序列有80％或80％以上的序列同源性。
3.一种基因工程抗体，其特征在于，它所含有的重链和轻链可变区序列是与以上1和2所述的可变区的序列是一致的；该基因工程抗体可以是：人--鼠嵌合抗体(chimeric antibodies)；或者是人源化抗体(humanized antibody，HAb)或改形抗体(Reshaped antibody，RAb)；或者是抗体的功能性片段Fab；或者是单链抗体(single chain FV fragment，SCFv)；或者是重链可变区和完整轻链的融合的抗体功能性片段VH-L：或者是重链和轻链的一个或多个CDR的排列、串联或组合而成的抗体功能性片段；或者是上述抗体或抗体功能片段和其他各种蛋白或多肽进行连接、拼接、融合而得到的类抗体的功能性的融合蛋白。
4.以上1-3所述的单克隆抗体或基因工程抗体，其特征在于，它们与多种肿瘤组织具有特异的结合能力，这些肿瘤组织包括：肝癌肿瘤；肺癌；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
5.以上1-3所述的单克隆抗体或基因工程抗体，其特征在于，它们具有特异的广谱的抗多种肿瘤的作用，它可用于治疗多种肿瘤，这些肿瘤包括：肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
6.一种药物组合物，其特征在于，它含有以上1-4所述的单克隆抗体或基因工程抗体；以及药学上可接收的载体或缓冲液或添加剂或赋形剂。
7.以上6所述的药物组合物，其特征在于，它可用于治疗各种肿瘤，这些肿瘤包括：肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
8.一种肿瘤的诊断方法及试剂，其特征在于，它含有如以上1-5所述的单克隆抗体或基因工程抗体；并用于诊断肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
本发明是运用人结肠癌组织的分离成份直接在非免疫鼠源ScFv噬菌体表面呈现表达库中筛选。经过检测单克隆抗体对结肠癌细胞的选择性结合，而与正常结肠细胞不结合特性，显示出该抗体在肿瘤的治疗和诊断方面的高效广谱应用价值。虽然是用的结肠癌组织作为筛选抗原。但所筛到的抗体能特异结合多种肿瘤组织，包括肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等。动物实验证明，该抗体能有效抑制肿瘤的生长。因此可以用于治疗肝癌；肺癌；结肠癌；胰腺癌；乳腺癌；卵巢癌等恶性肿瘤。
附图表说明：
图1.CR1G抗体的可变区扩增鉴定。
图2.与恒定区连接后表达的全长CR1G抗体的SDS-PAGE检测。
图3.抗体治疗荷人结肠癌肿瘤裸鼠的实验结果。
表1：免疫组化鉴定抗体CR1G与人体正常组织和肿瘤组织的反应。
具体实施方式
为了更全面地理解和应用本发明，下文将参考实施例和附图详细描述本发明，所述实施例仅是意图举例说明本发明，而不是意图限制本发明的范围。本发明的范围由后附的权利要求具体限定。
实施例一、结肠癌细胞膜抗原粗提物的制备
取新鲜胃癌手术切除标本：病理诊断为低分化胃癌，用高浓度裂化钾的方法，提取细胞膜抗原，制备膜抗原粗提物。用4℃灭菌生理盐水洗净血迹，冰浴下仔细剪切并研磨，边研磨边加入3M KCl溶液，研磨至匀浆，过筛网，置4℃过夜搅拌过夜3小时，4℃10000rpm离心20min，吸取上清液，加等体积饱和硫酸铵沉淀，4℃10000rpm离心20min。将沉淀用10mMPBS完全溶解后，对10mMPBS透析，透析毕，分装后-80℃保存备用。
实施例二、Panning筛选
噬菌体表面呈现文库是专利申请者之前构建的一个非免疫鼠源ScFv表达库。本专利就是从该文库中筛选能特意识别结肠癌的抗体。用结肠癌细胞膜抗原包被塑料培养皿后，将重组噬菌体上清倾至其上，37℃培养2h，先后用PBS和PBST各洗板20次。然后将培养至对数生长期的TG1倾至免疫吸附后的培养皿上，37℃培养1小时。如此“吸附一洗脱一繁殖”的过程即为Panning筛选，再以M13K07超感染，就可生成富集克隆的噬菌体表面呈现文库。以后按上述方法进行7轮筛选。
实施例三、单个重组噬菌体克隆的抗原结合活性的鉴定
1.制备单克隆重组噬菌体
Panning筛选后，将TGI茵液按原液；1∶10；1∶100；1∶10004个稀释度稀释，铺于SOBAG琼脂板上，30℃倒置培养过夜。挑选90个单菌落，分别接种于100ul的2×YTAG中，30℃培养过夜，取20ul培养物，加入200ul含5×10pfu/ml M13K07的2×YTAG中，37℃振荡培养2h，离心，用2×YTAK 200ul重悬沉淀，30℃培养过夜.离心后的上清即为单个重组噬菌体。
2.ELISA检测抗原结合活性(Douillard，et al.，Enzyme-linkedImmunosorbent Assay for Screening monoclonal antibody production usingenzyme-labeled second antibody，Meth.Enzymol，.92：168-74，1983)
设1个阴性对照孔，1个阳性对照孔，90个待测孔。100u l0.5％BSA包被阴性对照孔，100u l羊抗M13噬菌体抗体包被阳性对照孔，100ul/孔(10ug/ml)结肠癌细胞膜抗原包被待测孔。1％BSA 37℃封闭1小时。对照孔加M13噬菌体，待测孔加50ul待测上清与50ul封闭液的混合物，37℃孵育1h。用PBST洗板3次，各孔加100ul工作浓度的HRP/羊抗M13噬茵体抗体，37℃反应1小时。PBST洗板4次，加新鲜配制的H202-ABTS，在410nm测每孔OD值。
实施例四、阳性克隆的ScFv基因序列测定，真核表达和纯化
选择筛选获得的阳性克隆分别送公司进行DNA测序。设计引物将阳性克隆的轻重链可变区与鼠源IgG的对应的轻重链恒定区连接后插入到真核表达；然后分别转染CHO细胞筛选稳定表达株。
取1ml的ProteinG-sepharose FF介质到柱子中，经PBS平衡后，将收集的细胞培养上清经ProteinG-sepharose FF柱子纯化，然后用PBS清洗50柱体积后，用100mM Glycine(pH3)将目的蛋白洗脱到1M Tris，pH8.5平衡液中。在分别透析到PBS缓冲液中。10％SDS-PAGE鉴定纯化得到的抗体纯品。
实施例五、抗体的活性鉴定
设1个阴性对照孔，1个阳性对照孔，4个待测孔。100ul 10.5％BSA包被阴性对照孔，100ul羊抗鼠抗体包被阳性对照孔，100ul/孔(10ug/ml)结肠癌细胞膜抗原包被待测孔。1％BSA 37℃封闭1小时。对照孔加IgG，待测孔加50ul待测抗体与50ul封闭液的混合物，37℃孵育1h。用PBST洗板3次，各孔加100ul工作浓度的HRP/羊抗鼠抗体，37℃反应1小时。PBST洗板4次，加新鲜配制的H202-ABTS，在410nm测每孔OD值。结果发现只有一株抗体与抗原有很强的反应。命名为CR1G。
实施例六、单克隆抗体CR1G的肿瘤结合免疫组化实验
利用冷冻组织切片和免疫组化方法(Immunology Methods Manual，Edited by Ivan Lefkovits，1997)鉴定抗体CR1G与人体正常组织和肿瘤组织的反应，结果表明抗体CR1G与许多肿瘤组织高特异反应，而与正常组织的没反应或极低反应。表1反应了抗体CR1G对多种肿瘤组织和正常组织的免疫组化染色情况。在免疫组化切片上，清楚可见抗体只与肿瘤组织反应，而不与正常组织反应(表1)。
实施例七、单克隆抗体CR1G抑制肿瘤生长实验
传代荷人结肠癌肿瘤鼠皮下肿瘤生长至直径约2-3cm时，无菌条件下取出瘤块，将瘤块切割成1mm3小瘤块，参照《动物细胞培养基本技术指南》(科学出版社，R.I.弗雷谢尼，2000年，第四版)方法制备原代结肠癌移植瘤细胞HCT-8。用套管针接种到裸鼠右侧腋部皮下。待接种的肿瘤体积生长到100-300mm左右时，依瘤体积随机分组，开始给药。1周两次按10mg/kg给药，观察3周；统计分析数据。动物实验结果表明，CR1G抗体对结肠癌的生长具有显著抑制作用。
序列表：
SEQ.ID.NO：1
Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr Ser Phe Trp Ile Glu Trp Val
20 25 30
Lys Ile His Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Thr Glu Ile Leu Pro Gly Ser Asp Asn Thr AsnTyr Asn
50 55 60
Glu Lys Phe Lys Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr
65 70 75
Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg
80 85 90
Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr Cys Lys Asn Arg
95 100 105
Asn Tyr Tyr Gly Asn Tyr Val Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
110 115 120
Thr Val Ser Ala
SEQ.I D.NO：2
Glu Leu Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu
1 5 10 15
Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Ser Val Ser Tyr
20 25 30
Met Tyr Met His Trp Asn Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Arg
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
65 70 75
Thr Leu Asn Ile His Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr
80 85 90
Tyr Cys Gln His Ile Arg Glu Leu Thr Arg Ser Phe Gly Gly Gly
95 100 105
Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala
110
参考文献
Bresalier，R.R.S.，Y.Niv，J.C.Byrd，Q.Y.Duh，N.W.Toribara，R.W.Rockwell，R.Dahiya，and Y.S.Kim，1991，Mucin production by human colonic
carcinoma cells correlates with their metastatic potential in animal models ofcolon cancer metastasis，J.Clin.Invest，87(3)：1037-1045.
Cherchi PL，Capobianco G，Ambrosini G，Fadda GM，Piga MD，Ruiu G，Fattorini F，Dessole S，2002，Intracystic evaluation of tumor markers in benignand malignant ovarian pathology，Eur J Gynaecol Oncol.，23(2)：163-5.
Coppola D，2000，Molecular prognostic markers in pancreatic cancer，CancerControl，7(5)：421-427
Finkelstein，S.D.，R.Przygodzki，V.E.Pricolo，S.A.Sakallah，P.A.Swalsky，A.Bakker，R.Lanning，K.I.Bland，and D.L.Cooper，1996b，Prediction ofBiologic Aggressiveness in Colorectal Cancer by p53/K-ras-2TopographicGenotyping，Mol.Diagn.，1(1)：5-28.
Finkelstein，S.D.，R.Przygodzki，V.E.Pricolo，S.A.Sakallah，P.A.Swalsky，A.Bakker，R.Lanning，K.I.Bland，and D.L.Cooper，1996a，Prediction ofBiologic Aggressiveness in Colorectal Cancer by p53/K-ras-2TopographicGenotyping，Mol.Diagn.，1(1)：5-28.
Hammel，P.，and T.Soussi，2000，Serum p53antibody assay：evaluation incolorectal cancer，Rev.Med.Interne，21(2)：167-173.
Hareyama，H.，Sakuragi，N.，Makinoda，S.，and Fujimoto，S.1996，Serum andtissue measurements of CA72-4in patients with endometrial carcinoma，J ClinPathol.，49(12)：967-970.
Ho，S.B.，N.W.Toribara，R.S.Bresalier，and Y.S.Kim，1988，Biochemicaland other markers of colon cancer，Gastroenterol.Clin.North Am.，17(4)：811-836.
Lassmann，S.，M.Bauer，R.Soong，J.Schreglmann，K.Tabiti，J.Nahrig，R.Ruger，H.Hofler，and M.Werner，2002，Quantification of CK20gene andprotein expression in colorectal cancer by RT-PCR and immunohistochemistryreveals inter-and intratumour heterogeneity，J.Pathol.，198(2)：198-206.
Lo SS，Khoo US，Cheng DK，Ng TY，Wong LC，Ngan HY.1999，Role of serialtumor markers in the surveillance for recurrence in endometrial cancer，CancerDetect Prev.，23(5)：397-400.
Mathews，H.L.，M.J.Brunda，and P.Minden，1980，The use of cellularimmunoadsorbents to prepare antibody that distinguishes between syngeneicsurface antigens on two guinea pig hepatocarcinomas，J.mmunol.，124(3)：1141-1147.
Ni XG，Bai XF，Mao YL，Shao YF，Wu JX，Shan Y，Wang CF，Wang J，Tian YT，Liu Q，Xu DK，Zhao P.2005，The clinical value of serum CEA，CA 19-9，andCA242in the diagnosis and prognosis of pancreatic cancer，Eur J Surg Oncol.，31(2)：164-9.
Rammohan，K.W.，H.F.McFarland，W.J.Bellini，J.Gheuens，and D.E.McFarlin，1983，Antibody-mediated modification of encephalitis induced byhamster neurotropic measles virus，J.Infect.Dis.，147(3)：546-550.
Sanduleanu，S.，and R.W.Stockbrugger，2003，Screening for colorectal cancer：medical and economic aspects，Scand.J.Gastroenterol.Suppl.，239：73-77.
Winawer，S.J.，2005，Screening of colorectal cancer：progress and problems，Recent Results Cancer Res.，166：231-244.
Claims (8)
1.一种单克隆抗体，其特征在于，它的重链可变区由124个氨基酸残基组成，序列如序列表SEQ ID NO：1所显示；其轻链可变区由113个氨基酸残基组成，序列如序列表SEQ ID NO：2所显示。
2.一种单克隆抗体，其特征在于，它的序列与权利要求书1所述的单克隆抗体的氨基酸序列有80％或80％以上的序列同源性。
3.一种基因工程抗体，其特征在于，它所含有的重链和轻链可变区序列是与权利要求书1和2所述的可变区的序列是一致的；该基因工程抗体可以是：人--鼠嵌合抗体(chimeric antibodies)；或者是人源化抗体(humanizedantibody，HAb)或改形抗体(Reshaped antibody，RAb)；或者是抗体的功能性片段Fab；或者是单链抗体(single chain FV fragment，SCFv)；或者是重链可变区和完整轻链的融合的抗体功能性片段VH-L；或者是重链和轻链的一个或多个CDR的排列、串联或组合而成的抗体功能性片段；或者是上述抗体或抗体功能片段和其他各种蛋白或多肽进行连接、拼接、融合而得到的类抗体的功能性的融合蛋白。
4.如权利要求书1-2所述的单克隆抗体或权利要求书3-4所述的基因工程抗体，其特征在于，它们与多种肿瘤组织具有特异的结合能力，这些肿瘤组织包括：肝癌肿瘤；肺癌；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
5.如权利要求书1-2所述的单克隆抗体或权利要求书3-4所述的基因工程抗体，其特征在于，它们具有特异的广谱的抗多种肿瘤的作用，它可用于治疗多种肿瘤，这些肿瘤包括：肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤
6.一种药物组合物，其特征在于，它含有如权利要求书1-4所述的单克隆抗体或基因工程抗体；以及药学上可接收的载体或缓冲液或添加剂或赋形剂。
7.如权利要求书7所述的药物组合物，其特征在于，它可用于治疗各种肿瘤，这些肿瘤包括：肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
8.一种肿瘤的诊断方法及试剂，其特征在于，它含有如权利要求书1-5所述的单克隆抗体或基因工程抗体；并用于诊断肝癌肿瘤；肺癌肿瘤；结肠癌肿瘤；胰腺癌肿瘤；乳腺癌肿瘤；卵巢癌等恶性肿瘤。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106432490A (zh) * | 2016-09-14 | 2017-02-22 | 北京大学 | 一种abcg2单克隆抗体及其用途 |
| CN113203858A (zh) * | 2021-05-06 | 2021-08-03 | 北京保图生物技术有限公司 | 一种肿瘤检测试剂盒 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1051389A (zh) * | 1989-06-30 | 1991-05-15 | 翁科根两合公司 | 作用于人体癌的新型抗体 |
| US5185432A (en) * | 1986-02-26 | 1993-02-09 | Oncogen | Monoclonal antibodies and antigen for human non-small cell lung carcinoma and other certain human carcinomas |
| CN1584028A (zh) * | 2004-06-10 | 2005-02-23 | 上海富纯中南生物技术有限公司 | 用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆及其制备方法和用途 |
| US20050063967A1 (en) * | 2003-01-21 | 2005-03-24 | Arius Research, Inc. | Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of MCSP |
| CN101084013A (zh) * | 2004-09-15 | 2007-12-05 | 阿里乌斯研究公司 | 癌症调节抗体 |
-
2008
- 2008-10-27 CN CN 200810171904 patent/CN101724072B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5185432A (en) * | 1986-02-26 | 1993-02-09 | Oncogen | Monoclonal antibodies and antigen for human non-small cell lung carcinoma and other certain human carcinomas |
| CN1051389A (zh) * | 1989-06-30 | 1991-05-15 | 翁科根两合公司 | 作用于人体癌的新型抗体 |
| US20050063967A1 (en) * | 2003-01-21 | 2005-03-24 | Arius Research, Inc. | Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of MCSP |
| CN1584028A (zh) * | 2004-06-10 | 2005-02-23 | 上海富纯中南生物技术有限公司 | 用于筛选肿瘤坏死靶向抗体的克隆及其制备方法和用途 |
| CN101084013A (zh) * | 2004-09-15 | 2007-12-05 | 阿里乌斯研究公司 | 癌症调节抗体 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| MIKAEL DOHLSTEN等: "Immunotherapy of human colon cancer by antibody-targeted superantigens", 《CANCER IMMUNOLOGY，IMMUNOTHERAPY》》 * |
| RM SHAHEEN等: "Inhibited growth of colon cancer carcinomatosis by antibodies to vascular endothelial and epidermal growth factor receptors", 《BRITISH JOURNAL OF CANCER》 * |
| 曲娴等: "EGFR 单克隆抗体抗结肠癌作用的实验研究", 《中国病理生理杂志》 * |
| 朱建高等: "全人源化抗结肠癌单链抗体基因的克隆和表达", 《生物工程学报》 * |
| 王荣福等: "结肠癌单克隆抗体的制备和鉴定", 《中国免疫学杂志》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106432490A (zh) * | 2016-09-14 | 2017-02-22 | 北京大学 | 一种abcg2单克隆抗体及其用途 |
| CN106432490B (zh) * | 2016-09-14 | 2020-01-07 | 北京大学 | 一种abcg2单克隆抗体及其用途 |
| US10611847B2 (en) | 2016-09-14 | 2020-04-07 | Peking University | ABCG2 monoclonal antibody and uses thereof |
| CN113203858A (zh) * | 2021-05-06 | 2021-08-03 | 北京保图生物技术有限公司 | 一种肿瘤检测试剂盒 |
| CN113203858B (zh) * | 2021-05-06 | 2021-12-07 | 潍坊三维生物工程集团有限公司 | 一种肿瘤检测试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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Addressee: Gu Weiyue Document name: the First Notification of an Office Action |
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Address after: 100029, Room 201, North building, miracle Fortune Plaza, Chaoyang District, Beijing Applicant after: Gu Weiyue Address before: 101400, room 1, gate 601, building 31, Qingchun Road, Huairou District, Beijing Applicant before: Gu Weiyue |
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Effective date of registration: 20151228 Address after: 100176 Beijing City Economic and Technological Development Zone Branch Street 88 Hospital No. 6 Building 3 unit 507 room Patentee after: Beijing card Medical Technology Co., Ltd. Address before: 100029, Room 201, North building, miracle Fortune Plaza, Chaoyang District, Beijing Patentee before: Gu Weiyue |
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
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Granted publication date: 20131009 Termination date: 20181027 |