CN101708210A - 槐花总黄酮提取物在制备抑制皮肤色素沉着药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种槐花总黄酮提取物在制备抑制皮肤色素沉着药物中的应用。本发明以槐花总黄酮为研究对象,对其进行了酪氨酸酶抑制作用的研究,结果显示它对酪氨酸酶活性有明显下调作用,表明槐花总黄酮具抑制皮肤色素沉着及增白美容的作用,可作为色素增加性皮肤病的预防和治疗或外用化妆品的增白祛斑功能。槐花总黄酮提取物是一种纯天然植物提取物,其毒性低,不会影响人体健康。
Description
技术领域
本发明涉及植物药用活性成分技术领域,具体涉及总黄酮提取物的药用,尤其涉及槐花总黄酮提取物在制备抑制皮肤色素沉着药物中的应用。
背景技术
酪氨酸酶是皮肤黑素生物合成过程的主要限速酶,为铜及蛋白质的复合物。它能将机体内制造黑素的主要原料酪氨酸羟化,产生L-多巴,然后再将多巴氧化成多巴醌,多巴醌经一系列代谢过程,重排并聚合,最后与蛋白质结合生成一系列引起褐化的黑素。黑素是决定人体肤色最重要的因素,合成过多可引起雀斑、黄褐斑、老年斑、黑色素瘤等色素增加性皮肤病的形成。因此通过对酪氨酸酶活力抑制研究,可以筛选出抑制皮肤色素沉着的有效成分。通过抑制酪氨酸酶活性可以抑制黑色素的生成,因而酪氨酸酶抑制剂具有重要的应用前景,可应用于抑制色素沉着及皮肤增白美容。
槐花(Sophora japonica L.)为豆科槐属植物槐的干燥花及花蕾。前者习称为“槐花”,后者习称为“槐米”,我国大部分地区均有生长。中医医学书籍中记载了槐花的医药及保健功能,有治疗便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、肝热目赤、头痛眩晕、痈疽疮毒等。
近年来,已从槐花中分离得到到多种化合物,主要成分为黄酮类化合物,包括芦丁、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、异黄酮苷元染料木素、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素,以及皂苷类化合物等。
槐花提取物具有多种生物活性,具有抗炎、抗病毒、杀菌、抗肿瘤作用、降低血脂、治疗心血管疾病等,但是对于槐花总黄酮类提取物对酪氨酸酶的抑制作用还未见有相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种槐花总黄酮提取物在制备抑制皮肤色素沉着药物中的应用。
本发明的上述目的是通过如下方法予以实现的:
本发明人以槐花总黄酮提取物作为研究对象,用酪氨酸酶多巴速率氧化法观察槐花总黄酮对酪氨酸酶的抑制作用,结果显示它对酪氨酸酶活性有明显下调作用,而酪氨酸酶是皮肤黑素生物合成过程的主要限速酶,通过抑制酪氨酸酶活性可以抑制黑色素的生成,因此本发明利用槐花总黄酮对酪氨酸酶活性的抑制,具有抑制皮肤色素沉着及增白美容的作用,提供一种可将槐花总黄酮提取物用于制备抑制皮肤色素沉着的药物,如可制备预防或治疗色素增加型皮肤病的药物,或者可制备具有增白祛斑功能的化妆品等等。
本发明的槐花总黄酮提取物是指本领域技术人员采用常规的任何一种总黄酮提取方法从豆科槐属植物槐的干燥花及花蕾(Sophora japonica L.)提取得到的混合物,通常都包括芦丁、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、异黄酮苷元染料木素、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等黄酮或黄酮苷等几种主要成分。
本发明的总黄酮提取物在应用的时候可与药学上可以接受的助剂制备任何剂型的药物或化妆品,如可以为片剂、丸剂、胶囊、膏体或乳剂等,其中总黄酮提取物在产品中的质量百分比为5~10.0%。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
1.本发明以槐花总黄酮为研究对象,对其进行了酪氨酸酶抑制作用的研究,结果显示它对酪氨酸酶活性有明显下调作用,表明槐花总黄酮具抑制皮肤色素沉着及增白美容的作用,可作为色素增加性皮肤病的预防和治疗或外用化妆品的增白祛斑功能;
2.本发明提供一种植物活性成分的新应用,不但扩充了槐花总黄酮提取物的药用价值,而且植物提取物毒性低,也不会影响人体健康。
附图说明
图1为槐花总黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制作用曲线图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步地描述,但具体实施例并不对本发明做任何限定。
实施例1槐花总黄酮提取物的制备
本发明的槐花总黄酮提取物可以采用本领域技术人员进行植物中总黄酮提取时的任何一种常用方法,本实施例选择乙醇-超声波方法,从槐花中提取总黄酮,其具体步骤为:
取干燥的槐花,以料液比为1∶20的重量比例加入体积百分比为60%的乙醇,在75℃的条件下超声辅助提取30min,连续提取两次,抽滤,合并提取液。
用旋转蒸发器浓缩提取液,真空干燥24小时,通过分光光度法测定提取物中黄酮含量。
实施例2槐花总黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制作用
本实施例选择实施例1制备的槐花总黄酮提取物,研究其对酪氨酸酶的抑制作用。
酪氨酸酶反应活性的测定条件:以0.5mol/L L-DOPA为底物,在3mL 0.05mol/L磷酸缓冲液(pH 6.8)的测活体系中,分别加0.1mL含0.01g/L、或0.025g/L、或0.05g/L、或0.075g/L、或0.10g/L等不同浓度的槐花总黄酮于比色杯中,再加2.8mL预先在30℃恒温水浴保温的底物L-DOPA溶液,然后加0.1mL酪氨酸酶水溶液,立刻混匀,在30℃恒温下测定波长为475nm的吸光值随时间的增长直线,从直线斜率求得酶活力。
在上述测活体系中,酶的终质量浓度为6mg/L,根据酶反应活性的定义,在一定的抑制剂浓度下,酶反应活性表示为Ui,在没有抑制剂时酶反应活性表示为U0,相对酶活性(UR)则按下式(I)的公式进行计算:
式(I)中:
A1是指含有底物、酪氨酸酶和槐花总黄酮提取物的测活体系的吸光度;
A2是指含有底物和酪氨酸酶,但不含槐花总黄酮提取的测活体系的吸光度;
A0是指含有底物,但不含酪氨酸酶和槐花总黄酮提取物的测活体系的吸光度。
IC50表示酶活性被抑制50%时抑制剂的浓度。
熊果苷能抑制酪氨酸酶的活性,近年来被广泛应用为美白剂,本实施例选择熊果苷作为阳性对照,同时也对熊果苷的IC50进行测试。
通过测定不同浓度的槐花提取物对酪氨酸酶活性的影响(如图1所示),结果表明槐花提取物对酪氨酸酶具有显著的抑制作用,抑制率随着提取物浓度的增大而增大,酶活力抑制达到50%,即半抑制时槐花提取物浓度(IC50)为0.03g/L。
阳性对照物熊IC50为1.60g/L。说明槐花提取物对酪氨酸酶的抑制作用比熊果苷强近50倍。
实施例3槐花总黄酮提取物用于美白化妆品实验
本实施例将实施例1制备的槐花总黄酮提取物进行美白化妆品试验,对其是否具有抑制皮肤色素沉着和增白祛斑功效,进行检测。
将实施例1制备的槐花总黄酮提取物和化妆品中常用的助剂进行搭配,制成5%的软膏剂(槐花总黄酮提取物占软膏剂总质量的5%)。
随机选择50名自愿者试用上述软膏剂,要求早晚一次涂抹脸部,连续使用28天。
通过目测和问卷方式统计,结果表明:有明显美白亮肤效果的为41名,占82%;有效果反应的为9名,占18%,其中有黄褐斑的试用者使用后均有不同程度的减淡的反应。
Claims (5)
1.一种槐花总黄酮提取物在制备抑制皮肤色素沉着药物中的应用。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于所述抑制皮肤色素沉着药物是预防或治疗色素增加型皮肤病的药物。
3.根据权利要求1所述应用,其特征在于所述抑制皮肤色素沉着药物是具有增白祛斑功能的化妆品。
4.根据权利要求1所述应用,其特征在于槐花总黄酮提取物在制备药物时的用量0.1~10.0%。
5.根据权利要求1所述应用,其特征在于所述药物为片剂、丸剂、胶囊、膏体或乳剂。
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