CN101679442B - 用于治疗丙型肝炎的化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涵盖式I化合物及使用这些化合物的组合物和方法。所述化合物具有抗丙型肝炎病毒(HCV)的活性，并可用于治疗被HCV感染的那些患者。

Description

用于治疗丙型肝炎的化合物
对相关申请的交叉参考
本申请要求2007年3月14日提交的美国临时申请顺序号USSN60/894884和2007年11月21日提交的美国临时申请顺序号USSN 60/989470的优先权。
背景技术
丙型肝炎病毒(HCV)是主要的人类病原体，其在世界范围内感染估计一亿七千万人，大致是1型人类免疫缺陷病毒感染数量的5倍。这些HCV感染个体中相当大的部分发展成严重的进行性肝脏疾病，包括肝硬化和肝细胞癌(Lauer，G.M.；Walker，B.D.N.Engl.J.Med.2001，345，41-52)。
HCV是正链RNA病毒。基于对所推断氨基酸序列进行的比较和5’-非翻译区的广泛相似性，已经把HCV归类为黄病毒科中独立的属。黄病毒科的所有成员都具有包封的病毒体，其含有的正链RNA基因组通过翻译单一的连续的可读框而编码所有已知的病毒专属性蛋白质。
在整个HCV基因组的核苷酸和所编码的氨基酸序列中发现了相当程度的异质性。已经表征了至少6种主要的基因型，并且已经描述了多于50种的亚型。HCV的主要基因型在世界范围内的分布是不同的，并且HCV遗传异质性的临床重要性仍然是难以确定的，尽管对基因型对发病和治疗的可能影响行了大量的研究。
单链HCV RNA基因组的长度大约是9500个核苷酸，并且具有单一的可读框(ORF)，其编码由大约3000个氨基酸组成的单一的大的多蛋白。在被感染的细胞中，这种多蛋白在多个位点被细胞蛋白酶和病毒蛋白酶裂解，从而产生结构蛋白和非结构(NS)蛋白。就HCV来说，成熟的非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生受到两种病毒蛋白酶的影响。认为第一种病毒蛋白酶是金属蛋白酶，并且在NS2-NS3接合处进行裂解；第二种病毒蛋白酶是包含在NS3的N-末端区域内的丝氨酸蛋白酶(也称为NS3蛋白酶)，并且介导NS3下游的所有随后裂解，既在NS3-NS4A裂解位点以顺式进行裂解，又在其余的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位点以反式进行裂解。NS4A蛋白似乎具有多种功能，其充当NS3蛋白酶的辅因子，并且可能有助于NS3及其它病毒复制酶组分的膜定位。NS3蛋白与NS4A形成复合物，这似乎是在所有位点进行加工活动由此提高蛋白质水解效率所必需的。NS3蛋白还显示出三磷酸核苷酶和RNA解旋酶活性。NS5B(也称为HCV聚合酶)是依赖于RNA的RNA聚合酶，在HCV的复制中涉及所述酶。在“Structural Analysis ofthe Hepatitis C Virus RNA Polymerasein Complex with Ribonucleotides(Bressanelli；S.et al.，Journal of Virology 2002，3482-3492)和Defrancesco and Rice，Clinics in Liver Disease 2003，7，211-242中描述了HCV NS5B蛋白。
目前，最有效的HCV疗法使用α-干扰素和利巴韦林的组合，其在40％的患者中产生持续的效果(Poynard，T.et al.Lancet 1998，352，1426-1432)。最新的临床结果证明，作为单一疗法，PEG化的α-干扰素优于未修饰的α-干扰素(Zeuzem，S.et al.N.Engl.J.Med.2000，343，1666-1672)。然而，即使就涉及PEG化α-干扰素和利巴韦林组合的实验性治疗方案而言，相当多的患者也没有出现病毒载量的持续减少。因此，就开发用于治疗HCV感染的有效疗法而言，存在明显和迫切的需要。
发明内容
本发明的一方面是式I化合物或其可药用盐：
Figure G2008800163092D00021
其中
R1为-CO2R5或-CONR6R7；
R2为[4.4.0]二环二胺基团、[4.3.0]二环二胺基团或[3.3.0]二环二胺基团，所述二环二胺基团通过一个氮而与羰基相连，并且R2被0-2个R8取代基取代；
R3为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基或烷氧基；
R4为环烷基；
R5为氢或烷基；
R6为氢、烷基、烷基SO2-、环烷基SO2-、卤代烷基SO2-、(R9)(R10)NSO2-或(R11)SO2-；
R7为氢或烷基；
R8为氢、烷基、环烷基、(环烷基)烷基、烷基羰基、(环烷基)羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、(烷基氨基)羰基、(二烷基氨基)羰基、(R12)羰基、苄基或苄基氧基羰基；
R9为氢或烷基；
R10为氢或烷基；
R11为氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、高哌啶基或高吗啉基；且
R12为氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、高哌啶基或高吗啉基。
本发明的另一方面为式I化合物，其中
R1为-CO2R5或-CONR6R7；
R2为[4.3.0]二环二胺基团或[3.3.0]二环二胺基团，所述二环二胺基团通过一个氮而与羰基相连，并且R2被0-2个R8取代基取代；
R3为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基或烷氧基；
R4为环烷基；
R5为氢或烷基；
R6为氢、烷基、烷基SO2-、环烷基SO2-、卤代烷基SO2-、(R9)(R10)NSO2-或(R11)SO2-；
R7为氢或烷基；
R8为氢、烷基、环烷基、(环烷基)烷基、烷基羰基、(环烷基)羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、(烷基氨基)羰基、(二烷基氨基)羰基、(R12)羰基、苄基或苄基氧基羰基；
R9为氢或烷基；
R10为氢或烷基；
R11为氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、高哌啶基或高吗啉基；且
R12为氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、高哌啶基或高吗啉基。
本发明的另一方面为式I化合物，其中R1为-CONR6R7；R6为烷基SO2-、环烷基SO2-、卤代烷基SO2-、(R9)(R10)NSO2-或(R11)SO2-；以及R7为氢。
本发明的另一方面为式I化合物，其中R3为氢。
本发明的另一方面为式I化合物，其中R3为甲氧基。
本发明的另一方面为式I化合物，其中R4为环己基。
本发明的另一方面为式I化合物，其中R6为(R9)(R10)NSO2-或(R11)SO2-。
本发明的另一方面为式I化合物，其满足下面的立体化学：
Figure G2008800163092D00041
本发明的另一方面为式I化合物，其满足下面的立体化学：
Figure G2008800163092D00042
任何变量(包括R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12)的任何范围可独立与任何其它变量的范围一起使用。
除非另有说明，这些术语具有下述意义。“烷基”的意思是由1至6个碳所组成的直链或支链烷基。“烯基”的意思是由2至6个碳所组成且具有至少一个双键的直链或支链烷基。“环烷基”的意思是由3至7个碳所组成的单环环系。“羟基烷基”、“烷氧基”及具有经取代烷基部份的其它术语包括由针对所述烷基部份的1至6个碳原子所组成的直链与支链异构体。“卤代烷基”与“卤代烷氧基”包括所有卤化异构体，从单卤素取代的烷基至全卤素取代的烷基。“芳基”包括碳环芳族取代基与杂环芳族取代基。括号与多重括号术语意在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，如((R)烷基)那样的术语指进一步被取代基R取代的烷基取代基。
[4.4.0]二环二胺、[4.3.0]二环二胺或[3.β.0]二环二胺具有以下所示环系中的一种，其中所述环系中的两个碳原子被氮代替。
Figure G2008800163092D00051
本发明包括所述化合物的所有可药用盐形式。可药用盐为其中抗衡离子不会显著地助长化合物的生理活性或毒性且其本身作为药理等价物的那些可药用盐。这些盐可根据一般有机技术使用商购试剂来制备。一些阴离子盐形式包括醋酸盐、醋硬脂酸盐(acistrate)、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡萄糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵盐、铝盐、苄星(benzathine)盐、铋盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、锂盐、镁盐、葡甲胺盐、4-苯基环己胺盐、哌嗪盐、钾盐、钠盐、丁三醇胺(tromethamine)盐及锌盐。
本发明的一些化合物具有不对称碳原子(参见例如下文中的化合物)。本发明包括所有立体异构形式，包括对映异构体与非对映异构体以及立体异构体的混合物如外消旋体。一些立体异构体可使用本领域中已知的方法来制备。所述化合物的立体异构混合物与相关中间体的立体异构混合物可根据本领域中已知的方法来分离成单独的异构体。当在以下方案和表格中描绘分子结构时使用的楔形线(wedge)或虚线(hash)仅意在表示相对立体化学，而不应该被解释为暗示绝对立体化学指定。
Figure G2008800163092D00052
合成方法
所述化合物可通过本领域已知的方法(包括如下所述的那些方法)来制备。一些试剂和中间体在本领域中是已知的。其它试剂和中间体可通过本领域已知的方法使用容易得到的原料来制备。用于描述化合物合成的变量(例如所编号的“R”取代基)仅意在说明如何制备，而不应该与权利要求书中或本说明书其它段落中所使用的变量相混淆。方案中所使用的缩写通常符合本领域中所使用的惯用意义。
可将2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯水解成2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(参见方案1)。该化合物可在无水THF(四氢呋喃)中使用例如1，1’-羰基二咪唑(CDI)及1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)而与各种磺酰脲(sulfonyl urea)缩合。所得到的酰基硫酰胺(acyl sulfamide)可使用例如苏楚基(Suzuki)偶联反应条件而与各种2-甲酰基苯基硼酸或2-甲酰基苯基硼酸酯进行已知的偶联反应，从而得到所绘类型的环状半缩醛胺中间体(cyclichemiaminal intermediate)。可通过如下方式将这些化合物转化为吲哚并苯并氮杂
Figure G2008800163092D00061
衍生物：这些化合物在DMF(二甲基甲酰胺)中用2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯在碳酸铯的影响下通过连续的麦克尔(Michael)反应和HornerEmmons反应进行处理。
相关的稠合有环丙基的酯衍生物可通过本领域中已知的方法来得到，包括吲哚并苯并氮杂酯在DMSO中在强碱性条件下用碘化三甲基氧化锍(trimethylsulfoxonium iodide)处理。所得到的稠合环丙烷中余下的脂肪族酯残基可被水解，且产物酸可与各种烷基稠合的二胺(alkyl-fused diamine)缩合。例如，DMSO中的O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基
Figure G2008800163092D00063
四氟硼酸盐和二异丙基乙胺可得到烷基稠合的二胺甲酰胺。
方案1
Figure G2008800163092D00071
N经保护的二胺也可与中间体吲哚并苯并氮杂
Figure G2008800163092D00072
酸偶联，且所得到的二胺甲酰胺可使用本领域中已知的方法来脱保护，及使用各种合成方案来衍生化，所述合成方案的一些说明性实例显示在下文中(参见方案2)。
方案2
Figure G2008800163092D00081
可用于合成本发明一些化合物的中间体涉及方案3中所示叔丁酯吲哚并苯并氮杂
Figure G2008800163092D00082
的制备。
方案3
Figure G2008800163092D00091
此方法学涉及对所示吲哚甲酯进行碱催化水解，接着使其与亚硫酰氯及叔丁醇钾反应，或用碳酸银和叔丁基溴进行烷基化反应。所得到的化合物可使用与先前所概述相似的化学方法来转化，从而得到如上所示的混合酯吲哚并苯并氮杂
这些中间体可用于如下可选择的方法，所述可选择的方法可如方案4所示用于制备酰基硫酰胺烷基稠合的二胺和酰基磺酰胺烷基稠合的二胺。中间体叔丁酯吲哚并苯并氮杂
Figure G2008800163092D00093
的环丙烷化及随后叔丁酯基的断裂可得到酸，其可与各种磺酰胺和磺酰脲偶联。随后进行水解，得到相关的脂肪族酸，其可与各种烷基稠合的二胺偶联。例如，DMSO中的O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基
Figure G2008800163092D00094
四氟硼酸盐和二异丙基乙胺可得到烷基稠合的二胺甲酰胺。
方案4
Figure G2008800163092D00101
一些实施例以立体异构混合物的形式存在。本发明涵盖所述化合物的所有立体异构体。分离立体异构混合物的方法是本领域中所熟知的，且包括但不限于制备性手性超临界流体色谱(SFC)和手性高效液相色谱(HPLC)。使用此手段的实例显示在方案5中。
方案5
Figure G2008800163092D00102
实现所述分离的另一种方法涉及制备非对映异构体的混合物，所述混合物可使用本领域中已知的各种方法来分离。此方式的一个实例显示在下文中(方案6)。
方案6
Figure G2008800163092D00111
一些非对映异构的酰胺可使用反相HPLC来分离。在水解作用后，所得到的光学活性酸可与稠合的二胺衍生物偶联(方案7)。例如，DMSO中的O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基
Figure G2008800163092D00112
四氟硼酸盐和二异丙基乙胺可用于得到烷基稠合的甲酰胺。也可使用其它标准的酸-胺偶联方法，从而得到具有光学活性的甲酰胺。
方案7
Figure G2008800163092D00113
生物学方法
当在以下HCV RdRp检测中测定时，所述化合物展现了对抗HCV NS5B的活性。
对HCV NS5B RdRp进行克隆、表达及纯化
将对HCV基因型1b的NS5B蛋白进行编码的cDNA克隆至pET21a表达载体中。将所述蛋白质表达成截掉C末端的18个氨基酸(the protein was expressedwith an 18amino acid C-terminal truncation)以提高溶解度。大肠杆菌感受态细胞系BL21(DE3)用于所述蛋白质的表达。使培养物在37℃生长约4小时，直到培养物达到600纳米处的光密度为2.0。使培养物冷却至20℃，并用1mM IPTG进行诱导。加入新鲜的氨苄青霉素至最终浓度为50微克/毫升，并使细胞在20℃生长过夜。
使细胞沉淀(3升)溶解以供纯化，得到15-24毫克经纯化的NS5B。溶胞缓冲液由20mM Tris-HCl(pH 7.4)、500mM NaCl、0.5％Triton X-100、1mM DTT、1mM EDTA、20％甘油、0.5毫克/毫升溶菌酶、10mM MgCl2、15微克/毫升脱氧核糖核酸酶I及完全TM蛋白酶抑制剂药片(Roche)所组成。加入溶胞缓冲液后，使用组织匀浆器来使经冷冻的细胞沉淀重新悬浮。为了降低样品的粘度，使用与Branson超声波处理器相连的微尖头来使溶胞产物的等分液在冰上接受超声波处理。经超声处理的溶胞产物在4℃以100,000×g离心1小时，并过滤经过0.2微米滤器单元(Corning)。
使用两个连续的色谱步骤来纯化蛋白质：肝素琼脂糖CL-6B和PolyU琼脂糖4B(Pharmacia)。色谱缓冲液与溶胞缓冲液相同，但不含有溶菌酶、脱氧核糖核酸酶I、MgCl2或蛋白酶抑制剂，且缓冲液的NaCl浓度根据将蛋白质加载至色谱柱上的需要而调整。各色谱柱以NaCl梯度液洗脱，所述梯度液的长度在5至50个柱体积之间变化，这取决于色谱柱的类型。在最终色谱步骤后，所得到的酶纯度＞90％(基于SDS-PAGE分析)。将酶分成等分液，并贮存在-80℃。
标准HCV NS5B RdRp酶检测
在96孔板(Corning 3600)中在最终体积为60微升的情况下进行HCVRdRp基因型1b检测。检测缓冲液由20mM Hepes(pH 7.5)、2.5mM KCl、2.5mMMgCl2、1mM DTT、1.6单位RNAse抑制剂(Promega N2515)、0.1毫克/毫升BSA(Sigma B6917)及2％甘油所组成。所有化合物在DMSO中连续稀释(3倍)并在水中进一步稀释，以使DMSO在检测中的最终浓度为2％。HCV RdRp基因型1b酶在最终浓度为28nM时使用。聚A(polyA)模板在6nM时使用，且生物素化的寡dT12引物在最终浓度为180nM时使用。模板是商购得到的(Amersham 27-4110)。生物素化的引物由Sigma Genosys制备。3H-UTP在0.6μCi(0.29μM总UTP)时使用。通过加入酶来引发反应，在30℃孵育60分钟，并通过加入25微升含有SPA珠粒(4微克/微升，Amersham RPNQ 0007)的50mM EDTA来停止。在室温孵育＞1小时后，将板在Packard Top Count NXT上读取。
经修改的HCV NS5B RdRp酶检测
经修改的酶检测基本上按照关于标准酶检测所描述的那样来进行，不同的是，将生物素化的寡dT12引物预捕获在链霉抗生物素(streptavidin)涂覆的SPA珠粒上，其方式是将引物与珠粒在检测缓冲液中混合，并在室温孵育一小时。离心除去未结合的引物。使与引物结合的珠粒重新悬浮在20mM Hepes缓冲液(pH 7.5)中，并在引物的最终浓度为20nM以及珠粒的最终浓度为0.67微克/微升时用于检测。检测中的加入顺序如下：将酶(1.75nM)加到经稀释的化合物中，接着加入模板(0.36nM)、3H-UTP(0.6μCi，0.29μM)及与引物结合的珠粒的混合物，以引发反应，所给浓度为最终浓度。使反应在30℃进行4小时。
化合物的IC50值使用七种不同的[I]([I]为抑制浓度)来确定。使用方程式y＝A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))通过抑制作用来计算IC50值。
FRET检测制剂
在96孔细胞培养板中进行HCV FRET筛选检测。FRET肽(Anaspec，Inc.)(Taliani et al.，Anal.Biochem.1996，240，60-67)在其一端附近含有荧光供体即EDANS，并且在另一端附近含有受体即DABCYL。通过供体与受体之间的分子间共振能量转移(RET)来使所述肽的荧光淬灭，但当NS3蛋白酶使所述肽裂解时，产物不再发生RET淬灭，且供体的荧光变得显而易见。检测试剂如下制备：将得自Promega(#E153A)的5×细胞荧光素酶细胞培养物溶胞试剂(cell Luciferase cell culture lysis reagent)用dH2O稀释至1×，加入NaCl至最终为150mM，并且将FRET肽自2mM储备液稀释至最终为20μM。
为了制备板，带有或不带有海紫罗兰属荧光素酶(Renilla luciferase)报告子基因的HCV复制子细胞用胰蛋白酶处理，并铺于96孔板中，其中将经滴定的测试化合物加到第3列至第12列中；第1列和第2列含有对照化合物(HCV对照抑制剂)，且最底行含有只带有DMSO的细胞。然后，将板置于37℃的CO2培养箱中。
检测
加入上述测试化合物(FRET检测制剂)后，在不同时间将板取出，且加入Alamar蓝色溶液(Trek Diagnostics，#00-100)以测量细胞毒性。在Cytoflour4000仪器(PE Biosystems)中读取后，将板以PBS冲洗，然后通过向每个孔中加入30微升上述FRET肽检测试剂(FRET检测制剂)而用于FRET检测。接着，将板置于Cytoflour 4000仪器中，其已被设定成激发波长为340nm/发射波长为490nm，以自动模式历时高达20次循环，且板在动态模式中读取。典型地，在读取后使用终点分析的信号对噪声为至少三倍。或者，在Alamar蓝色读取后，将板以PBS冲洗，然后用于使用Promega Dual-Glo Luciferase Assay System的荧光素酶检测或用于Promega EnduRen Live Cell Substrate检测。
通过对相对的HCV复制子抑制作用及相对的细胞毒性值进行定量而对化合物进行分析。为了计算细胞毒性值，将得自对照孔的平均Alamar蓝色荧光信号设定为100％无毒性。接着，将各化合物测试孔中的各个信号除以平均对照信号并乘以100％，以确定细胞毒性百分比。为了计算HCV复制子抑制值，平均背景值得自在检测结束时含有最高量HCV对照抑制剂的两个孔。这些值类似于得自天然Huh-7细胞的那些值。然后，将背景值从得自对照孔的平均信号中扣除，且将此值用作100％活性。接着，将各化合物测试孔中的各个信号除以背景扣除后的平均对照值并乘以100％，以确定活性百分比。将EC50值计算成可使FRET或荧光素酶活性降低50％的浓度。针对化合物板所得到的两个值即细胞毒性百分比与活性百分比用于确定有待进一步分析的重要化合物。
化合物的代表性数据报道在表1中。
表1
Figure G2008800163092D00141
Figure G2008800163092D00161
Figure G2008800163092D00171
Figure G2008800163092D00181
Figure G2008800163092D00191
Figure G2008800163092D00201
Figure G2008800163092D00211
Figure G2008800163092D00221
Figure G2008800163092D00231
Figure G2008800163092D00241
A＞0.5μM；B为0.00458μM至0.5μM；C＜0.02μM，但没有确定确切值；
D＞0.04μM，但没有确定确切值；E＜0.07μM，但没有确定确切值；
F＞1.0μM，但没有确定确切值。
药物组合物和治疗方法
所述化合物展现出对抗HCV NS5B的活性，且可用于治疗HCV与HCV感染。因此，本发明的另一个方面为一种组合物，其包含本发明的化合物或其可药用盐及可药用载体。
本发明的另一个方面为一种组合物，其还包含具有抗HCV活性的化合物。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为干扰素。在本发明的另一个方面，所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的(pegylated)干扰素α、同感干扰素(consensus interferon)、干扰素α2A及淋巴细胞样干扰素τ。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素。在本发明的另一个方面，所述环孢菌素为环孢菌素A。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物可有效抑制靶标的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶(HCVmetalloprotease)、HCV丝氨酸蛋白酶(HCV serine protease)、HCV聚合酶(HCVpolymerase)、HCV解螺旋酶(HCV helicase)、HCV NS4B蛋白(HCV NS4Bprotein)、HCV进入(HCV entry)、HCV组装(HCV assembly)、HCV释出(HCVegress)、HCV NS5A蛋白(HCV NS5A protein)、IMPDH及核苷类似物(nucleoside analog)。
本发明的另一个方面为一种组合物，其包含本发明的化合物或其可药用盐、可药用载体、干扰素及利巴韦林。
本发明的另一个方面为一种抑制HCV复制子(HCV replicon)功能的方法，其包括使HCV复制子与本发明的化合物或其可药用盐接触。
本发明的另一个方面为一种抑制HCV NS5B蛋白功能的方法，其包括使HCV NS5B蛋白与本发明的化合物或其可药用盐接触。
本发明的另一个方面为治疗患者中HCV感染的方法，其包括向所述患者给予治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐。在另一个实施方案中，所述化合物可有效抑制HCV复制子的功能。在另一个实施方案中，所述化合物可有效抑制HCV NS5B蛋白的功能。
本发明的另一个方面为治疗患者中HCV感染的方法，其包括向所述患者给予治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐，并且给予(之前、之后或同时)另一种具有抗HCV活性的化合物。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为干扰素的方法。
本发明的另一个方面为其中所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的干扰素α、同感干扰素、干扰素α2A及淋巴细胞样干扰素τ的方法。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素的方法。
本发明的另一个方面为其中所述环孢菌素为环孢菌素A的方法。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺的方法。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑制靶标功能以治疗HCV感染的方法，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白、IMPDH及核苷类似物。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑制HCV生命循环中靶标的功能而非抑制HCV NS5B蛋白的功能的方法。
“治疗有效”的意思是提供有意义的患者益处所需要的药物量，如肝炎与HCV感染领域中的执业医师所理解的那样。
“患者”的意思是被HCV病毒感染且适于治疗的人们，如肝炎与HCV感染领域中的执业医师所理解的那样。
“治疗”、“疗法”、“给药方案”、“HCV感染”及相关术语如肝炎与HCV感染领域中的执业医师所理解的那样来使用。
本发明的化合物一般以药物组合物的形式来给予，所述组合物包含治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐及可药用载体，且可含有常规的赋形剂。治疗有效量为提供有意义的患者益处所需要的量。可药用载体为具有可接受安全性的常规已知载体。组合物涵盖所有常见的固体形式与液体形式，包括胶囊剂、片剂、锭剂与粉末剂以及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂及溶液剂。组合物使用一般制剂技术来制备，且常规的赋形剂(诸如粘合剂与润湿剂)与介质(诸如水与醇)通常用于组合物。
固体组合物通常被配制成剂量单位，且每份剂量提供约1至1000毫克活性成份的组合物是优选的。剂量的一些实例为1毫克、10毫克、100毫克、250毫克、500毫克及1000毫克。一般而言，其它药物可按与临床上所使用的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地，其为0.25-1000毫克/单位。
液体组合物通常在剂量单位范围内。一般而言，液体组合物的单位剂量范围可以是1-100毫克/毫升。剂量的一些实例为1毫克/毫升、10毫克/毫升、25毫克/毫升、50毫克/毫升及100毫克/毫升。一般而言，其它药物可按与临床上所使用的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地，其为1-100毫克/毫升。
本发明涵盖所有常规的给药模式，且口服方法与肠胃外方法是优选的。一般而言，给药方案可类似于临床上所使用的其它药物。典型地，每日剂量可以是每日1-100毫克/公斤体重。一般而言，口服方式需要较多的化合物，而肠胃外方式需要较少的化合物。然而，具体的给药方案可由医师通过合理的医药判断来确定。
本发明也涵盖在组合疗法中给予所述化合物的方法。即所述化合物可与可用于治疗肝炎及HCV感染的其它药物一起使用，但所述化合物与所述其它药物分开使用。在这些组合方法中，所述化合物通常可搭配其它药物而以每日1-100毫克/公斤体重的每日剂量来给予。其它药物一般可按治疗上所使用的量来给予。然而，具体的给药方案可由医师通过合理的医药判断来确定。
适于组合物及方法的化合物的一些实例列在表2中。
表2
  商品名   抑制剂的类型或靶标的类型   来源公司
  Omega IFN   IFN-ω   Intarcia Therapeutics
  BILN-2061   丝氨酸蛋白酶抑制剂   Boehringer Ingelheim PharmaKG，Ingelheim，Germany
  Summetrel   抗病毒   Endo Pharmaceuticals HoldingsInc.，Chadds Ford，PA
  Roferon A   IFN-α2a   F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
  Pegasys   PEG化的IFN-α2a   F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
  Pegasys and Ribavirin   PEG化的IFN-α2a/利巴韦林   F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
  CellCept   HCV IgG免疫抑制剂   F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
  Wellferon   淋巴细胞样IFN-αn1   GlaxoSmithKline plc，Uxbridge，UK
  Albuferon-α   白蛋白IFN-α2b   Human Genome Sciences Inc.，Rockville，MD
  Levovirin   利巴韦林   ICN Pharmaceuticals，CostaMesa，CA
  商品名   抑制剂的类型或靶标的类型   来源公司
IDN-6556 胱天蛋白酶(caspase)抑制剂   Idun Pharmaceuticals Inc.，SanDiego，CA
IP-501 抗纤维变性   Indevus Pharmaceuticals Inc.，Lexington，MA
  Actimmune   INF-γ   InterMune Inc.，Brisbane，CA
Infergen A IFN干扰素α-1(IFN alfacon-1)   InterMune Pharmaceuticals Inc.，Brisbane，CA
ISIS 14803 反义   ISIS Pharmaceuticals Inc，Carlsbad，CA/ElanPhamaceuticals Inc.，New York，NY
  JTK-003   RdRp抑制剂   Japan Tobacco Inc.，Tokyo，Japan
Pegasys and Ceplene PEG化的IFN-α2a/免疫调节剂   Maxim Pharmaceuticals Inc.，SanDiego，CA
Ceplene 免疫调节剂   Maxim Pharmaceuticals Inc.，SanDiego，CA
Civacir HCV IgG免疫抑制剂   Nabi Biopharmaceuticals Inc.，Boca Raton，FL
Intron A and Zadaxin IFN-α2b/α1-胸腺素   RegeneRx B iopharmiceuticalsInc.，Bethesda，MD/SciClone Pharmaceuticals Inc，San Mateo，CA
  Levovirin   IMPDH抑制剂   Ribapharm Inc.，Costa Mesa，CA
  Viramidine   利巴韦林前药   Ribapharm Inc.，Costa Mesa，CA
  Heptazyme   核酶   Ribozyme Pharmaceuticals Inc.，Boulde r，CO
  IntronA   IFN-α2b   Sche ring-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
  PEG-Intron   PEG化的IFN-α2b Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
  Rebetron   IFN-α2b/利巴韦林   Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
  Ribavirin   利巴韦林   Sche ring-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
  PEG-Intron/Ribavirin   PEG化的IFN-α2b/利巴韦林   Schering-Plough Corportion，Kenilworth，NJ
  Zadazim   免疫调节剂   SciClone Pharmaceuticals Inc.，San Mateo，CA
  Rebif   IFN-β1a   Serono，Geneva，Switzerland
IFN-βand EMZ701 IFN-β和EMZ701   Transition Therapeutics Inc.，Ontario，Canada
  Batabulin(T67)   β-微管蛋白抑制剂   Tularik Inc.，South San Francisco，CA
Merimepodib(VX-497) IMPDH抑制剂Cambridge，MA   Vertex Pharmaceuticals Inc.，
NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂   Vertex Pharmaceuticals Inc.，Cambridge，MA/Eli Lilly and Co.Inc.，Indianapolis，IN   Telaprevir(VX-950，LY-570310)Omniferon
  天然IFN-α   Viragen Inc.，Plantation，FL   XTL-6865(XTL-002)
  单克隆抗体   XTL Biopharmaceuticals Ltd.，Rehovot，Isreal HCV-796
  NS5B复制酶抑制剂   Wyeth/Viropharma   NM-283
  NS5B复制酶抑制剂   Idenix/Novartis   GL-59728
  NS5B复制酶抑制剂   Gene Labs/Novartis   GL-60667
  NS5B复制酶抑制剂   Gene Labs/Novartis   2’C MeA
  NS5B复制酶抑制剂   Gilead
  商品名   抑制剂的类型或靶标的类型   来源公司
  PSI 6130   NS5B复制酶抑制剂   Roche
  R1626   NS5B复制酶抑制剂   Roche
  SCH 503034   丝氨酸蛋白酶抑制剂   Schering P lough
  NIM811   亲环蛋白抑制剂   Novartis
  Suvus   亚甲蓝   Bioenvision
  Multiferon   长效(long lasting)IFN   Viragen/Valentis
  Actilon(CPG10101)   TLR9激动剂   Coley
  Interferon-β   干扰素-β-1a   Serono
  Zadaxin   免疫调节剂   Sciclone
  来自WO2005047288(2005年5月26日)的吡唑并嘧啶化合物和盐 HCV抑制剂 Arrow Therapeutics Ltd.
  2’C甲基腺苷   NS5B复制酶抑制剂   Merck
  GS-9132(ACH-806)   HCV抑制剂   Achillion/Gilead
具体实施方式
除非另有说明，使用下述柱和条件来得到下述中间体和实施例的分析性LCMS数据。停止时间：梯度时间+1分钟；起始浓度：0％B，除非另有说明；洗脱剂A：5％CH3CN/95％H2O(含有10mM NH4OAc(乙酸铵))(对于柱A、D和E)，10％MeOH(甲醇)/90％H2O(含有0.1％TFA(三氟乙酸))(对于柱B和C)；洗脱剂B：95％CH3CN/5％H2O(含有10mM NH4OAc)(对于柱A、D和E)，90％MeOH/10％H2O(含有0.1％TFA)(对于柱B和C)；柱A：Phenomenex 10μ4.6×50mm C18；柱B：Phenomenex C1810μ3.0×50mm；柱C：Phenomenex4.6×50mm C1810μ；柱D：Phenomenex Lina C185μ3.0×50mm；柱E：Phenomenex 5μ4.6×50mm C18。
作为图形软件所生成的人为结构式(artifact)，一些结构具有被省略的氢原子。
中间体1
Figure G2008800163092D00291
2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯
在2℃将新重结晶的三溴化吡啶鎓(pyridinium tribromide)(在热AcOH(乙酸)(5mL/lg)中重结晶，用冷AcOH冲洗，并在高真空下用KOH干燥)逐份(历时10分钟)加到搅拌的3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(60g，233mmol)(使用在WO2004/065367中描述的方法来制备)于CHCl3/THF(四氢呋喃)(1∶1，1.25L)中的溶液中。将反应溶液在0-5℃搅拌2.5小时，并用饱和NaHSO3水溶液(1L)、1N HCl(1L)和盐水(1L)洗涤。干燥(MgSO4)有机层并浓缩。将所得红色油状物用Et2O(乙醚)稀释并浓缩。将所得粉色固体溶解在Et2O(200mL)中，用己烷(300mL)处理，并部分浓缩。过滤收集固体，并用己烷冲洗。将母液浓缩至干，并重复上述操作。合并固体，得到2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(64g，190mmol，82％)，其为蓬松粉色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.47(br s，1H)，8.03(d，J＝1.4Hz，1H)，7.74(dd，J＝1.4，8.8Hz，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，1H)，3.92(s，3H)，2.82(tt，J＝3.7，11.7Hz，1H)，1.98-1.72(m，7H)，1.50-1.27(m，3H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ168.2，135.6，130.2，123.1，120.8，120.3，118.7，112.8，110.7，52.1，37.0，32.2(2)，27.0(2)，26.1。LCMS：m/e 334(M-H)-，保留时间3.34分钟，柱A，4分钟梯度。
中间体2
2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸
将2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(20g，60mmol)和LiOH(3.8g，160mmol)于MeOH/THF/H2O(1∶1∶1，300mL)中的溶液在90℃加热2小时。将反应混合物在冰/水浴中冷却，用浓度为1M的HCl溶液(约160mL)中和，用水(250mL)稀释，并在室温搅拌1小时。过滤收集沉淀物，用水冲洗，并干燥，得到2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(定量)，其不经进一步纯化即使用。
可用来提供2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸的可选择方法如下所述。
将2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(117g，349mmol)和LiOH·H2O(26.4g，629mmol)于MeOH/THF/H2O(1∶1∶1，1.8L)中的溶液回流加热3小时。将反应混合物在冰/水浴中冷却至约2℃，用1M HCl(约650mL)中和(加入速度使温度不超过5℃)，用水(1L)稀释，并搅拌，同时温热至环境温度。过滤收集沉淀物，用水冲洗，并干燥，得到2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸的单THF溶剂化物(135.5g，345mmol，99％)，其为黄色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ11.01(br s，1H)，8.77(s，1H)，8.07(d，J＝1.5Hz，1H)，7.82(dd，J＝1.5，8.8Hz，1H)，7.72(d，J＝8.8Hz，1H)，3.84-3.74(m，4H)，2.89(m，1H)，1.98-1.72(m，11H)，1.50-1.24(m，3H)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ172.7，135.5，130.7，122.3，120.9(2)，118.8，113.3，111.1，67.9(2)，37.0，32.2(2)，27.0(2)，26.1，25.5(2)。LCMS：m/e 320(M-H)-，保留时间2.21分钟，柱A，4分钟梯度。
中间体3
Figure G2008800163092D00311
2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-甲酰胺
在22℃将1，1’-羰基二咪唑(1.17g，7.2mmol)加到搅拌的2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(2.03g，6.3mmol)于THF(6mL)中的溶液中。立即有CO2放出，当放出减慢时，将溶液在50℃加热1小时，然后冷却到22℃。加入N，N-二甲基硫酰胺(0.94g，7.56mmol)，然后滴加DBU(1.34g，8.8mmol)于THF(4mL)中的溶液。继续搅拌24小时。将混合物在乙酸乙酯和稀HCl之间分配。乙酸乙酯层先后用水和盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。将萃取物浓缩至干，留下标题化合物，其为浅黄色易碎泡沫状物(2.0g，74％，通过NMR估计纯度＞90％)。1H NMR(300MHz，DMSO-D6)δppm 1.28-1.49(m，3H)1.59-2.04(m，7H)2.74-2.82(m，1H)2.88(s，6H)7.57(dd，J＝8.42，1.46Hz，1H)7.74(d，J＝8.78Hz，1H)7.91(s，1H)11.71(s，1H)12.08(s，1H)。
制备2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-甲酰胺的可选择方法描述如下。
在氮气气氛下向配备有机械搅拌器、温度控制器、氮气进口和冷凝器的1L四颈圆底烧瓶中加入2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(102.0g，0.259摩尔)和无水THF(300mL)。搅拌10分钟后，逐份加入CDI(50.3g，0.31摩尔)。然后将反应混合物加热至50℃并保持2小时。冷却到30℃后，一次性加入N，N-二甲基氨基磺酰胺(41.7g，0.336摩尔)，然后历时1小时滴加DBU(54.1mL，0.362摩尔)。然后将反应混合物在室温搅拌20小时。真空除去溶剂，并将残余物在EtOAc(乙酸乙酯)和1N HCl(1∶1，2L)之间分配。分离有机层，并且水层用EtOAc(500mL)萃取。合并的有机层用盐水(1.5L)洗涤并用MgSO4干燥。过滤溶液，并真空浓缩，得到粗产物(111.0g)。在60℃将粗产物悬浮在EtOAc(400mL)中。向悬浮液中缓慢加入庚烷(2L)。搅拌所得悬浮液并冷却到0℃。然后对其进行过滤。滤饼用少量庚烷冲洗，并真空风干(house vacuum airdry)2天。收集产物，其为白色固体(92.0g，83％)。1H NMR(MeOD，300MHz)δ7.89(s，H)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，7.55(dd，J＝8.4与1.8Hz，1H)，3.01(s，6H)，2.73-2.95(m，1H)，1.81-2.05(m，8H)，1.39-1.50(m，2H)。m/z 429(M+H)+。
中间体4
Figure G2008800163092D00321
3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺
将2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-甲酰胺(4.28g，0.01摩尔)、4-甲氧基-2-甲酰基苯基硼酸(2.7g，0.015摩尔)、2-二环己基膦基-2’，6’-二甲氧基-联苯(41mg，0.0001摩尔)、乙酸钯(11.2mg)和经微细研磨的碳酸钾(4.24g，0.02摩尔)于甲苯(30mL)中的混合物在氮气气氛下回流搅拌30分钟，此时LC/MS分析显示反应完成。然后反应混合物用乙酸乙酯和水稀释，然后用过量稀HCl酸化。然后收集乙酸乙酯层，并用稀HCl、水和盐水洗涤。然后干燥(硫酸镁)有机溶液，过滤并浓缩，得到胶状物。胶状物用己烷(250ml)和乙酸乙酯(25mL)稀释，并将混合物在22℃搅拌20小时，在此期间产物转化成亮黄色颗粒状固体(4.8g)，所述固体不经进一步纯化即直接使用。
制备3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺的可选择方法如下提供。
向浆化的2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-吲哚-6-甲酰胺(54.0g，126mmol)、4-甲氧基-2-甲酰基苯基硼酸(29.5g，164mmol)和LiCl(13.3g，315mmol)于EtOH(乙醇)/甲苯(1∶1，1L)中的溶液中加入Na2CO3(40.1g，379mmol)的水(380mL)溶液。将反应混合物搅拌10分钟，然后加入Pd(PPh3)4(四(三苯基膦)钯)(11.3g，10.0mmol)。反应溶液用氮气冲洗，并在70℃(内部监测)加热过夜，然后冷却至室温。反应混合物用EtOAc(1L)和EtOH(100mL)稀释，用1N HCl水溶液(1L)和盐水(500mL)小心洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。将残余固体与Et2O(乙醚)(600mL)一起搅拌1小时，并过滤收集，得到3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺(52.8g，109mmol，87％)，其为黄色粉末，所述粉末不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ11.66(s，1H)，8.17(s，1H)，7.75(d，J＝8.4Hz，1H)，7.74(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(dd，J＝1.4，8.4Hz，1H)，7.23-7.16(m，2H)，7.08(dd，J＝2.6，8.4Hz，1H)，6.54(d，J＝8.8Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.22-3.08(m，1H)，2.91(s，6H)，2.00-1.74(m，7H)，1.60-1.38(m，3H)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ165.7，158.8，147.2，139.1，134.3，132.0，123.4，122.0，119.2，118.2，114.8，112.3，110.4，109.8，79.6，45.9，37.2(2)，34.7，32.0(2)，25.9(2)，24.9。LCMS：m/e 482(M-H)-，保留时间2.56分钟，柱A，4分钟梯度。
中间体5
11-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-甲酰胺
向配备有温度控制器、冷凝器、氮气进口和机械搅拌器的5L四颈圆底烧瓶中加入甲苯(900mL)、EtOH(900mL)、2-溴-3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1H-吲哚-6-甲酰胺(90g，0.21摩尔)、2-甲酰基-4-甲氧基苯基硼酸(49.2g，0.273摩尔)和LiCl(22.1g，0.525摩尔)。所得溶液用氮气鼓泡15分钟。加入Na2CO3(66.8g，0.63摩尔)的水(675mL)溶液，并且反应混合物用氮气再鼓泡10分钟。加入Pd(PPh3)4(7.0g，6.3mmol)，并将反应混合物加热至70℃并保持20小时。冷却至35℃后，缓慢加入1N HCl溶液(1.5L)。将所得混合物转移到6L分液漏斗中，并用EtOAc(2×1.5L)萃取。合并的有机萃取物用盐水(2L)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色固体，所述黄色固体用20％EtOAc/己烷(450mL，50℃至0℃)研磨，得到3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺(65.9g)，其为黄色固体。HPLC纯度为98％。
将来自研磨的母液真空浓缩。将残余物与EtOH(50mL)一起回流3小时。然后将溶液冷却至0℃。过滤沉淀物，并用经冷却的TBME(叔丁基甲基醚)(5℃)(20mL)洗涤。将滤饼真空风干，得到额外量的标题化合物，其为白色固体(16.0g)。HPLC纯度为99％。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.75(s，1H)，7.96(s，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45(dd，J＝8.4与1.4Hz，1H)，7.09(d，J＝2.2Hz，1H)，6.98(dd，J＝8.4与2.2Hz，1H)，6.50(s，1H)，3.86(s，3H)，3.05(s，6H)，2.92-3.13(m，3H)，1.85-1.93(m，7H)，1.40-1.42(m，3H)，1.05(t，J＝7.1Hz，3H)。m/z 512(M+H)+。
中间体6
Figure G2008800163092D00341
3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺
将11-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-甲酰胺溶解在THF(75mL)中。向溶液中加入2N HCl溶液(300mL)。在室温将混合物在氮气气氛下剧烈搅拌16小时。过滤所得悬浮液，并用经冷却的TBME(2×30mL)洗涤。将滤饼真空风干(vacuum air dry)过夜，得到标题化合物，其为黄色固体。HPLC纯度为99％。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ11.65(s，1H)，8.16(s，1H)，7.76(d，J＝5.9Hz，1H)，7.73(d，J＝5.9Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.5与1.5Hz，1H)，7.17-7.20(m，2H)，7.08(dd，J＝8.5与1.4Hz，1H)，6.55(d，J＝8.6Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.14-3.18(m，1H)，2.91(s，6H)，1.75-1.99(m，7H)，1.48-1.60(m，3H)。m/z 484(M+H)+。
中间体7
Figure G2008800163092D00342
13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00351
-6-甲酸甲酯
将3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺(4.8g，0.01摩尔)、2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(9.7g，0.02摩尔)和碳酸铯(7.1g，0.02摩尔)于DMF(28mL)中的混合物在油浴温度55℃搅拌20小时。将混合物倒入冰-水中并用稀HCl酸化，从而使粗产物沉淀。收集固体，干燥并进行硅胶(110g)快速色谱(使用含有2％乙酸的乙酸乙酯和二氯甲烷(1∶10)溶液)。合并同质的级分(homogeneous fraction)并蒸发，得到标题化合物，其为浅黄色固体(3.9g，71％收率)。MS：552(M+H)+。
制备13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00352
-6-甲酸甲酯的可选择方法如下提供。
将11-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-6-羟基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-甲酰胺(环状半缩醛胺)(63.0g，130mmol)、2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(60g，261mmol)、碳酸铯(106g，326mmol)于DMF(400mL)中的溶液在60℃(浴温)加热4.5小时。加入额外的2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(15g，65mmol)和碳酸铯(21.2g，65mmol)，将反应混合物在60℃加热过夜，然后冷却至室温。搅拌的反应混合物用H2O(1L)稀释，用1N HCl水溶液(800mL)缓慢中和，搅拌3小时，然后过滤收集沉淀物。固体用Et2O(800mL)研磨，并干燥，得到13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00353
-6-甲酸甲酯(70.2g，127mmol，98％)，其为黄色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.67(s，1H)，8.09(s，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，1H)，7.08(dd，J＝2.6，8.8Hz，1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，5.75-5.51(m，1H)，4.29-4.01(m，1H)，3.89(s，3H)，3.82(s，3H)，3.05(s，6H)，2.87-2.73(m，1H)，2.11-1.12(m，10H)。LCMS：m/e 550(M-H)-，保留时间3.21分钟，柱A，4分钟梯度。
中间体8
Figure G2008800163092D00361
(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00362
-1a(2H)-甲酸甲酯
在圆底烧瓶中将DMSO(5毫升)加到碘化三甲基氧化锍(199毫克，0.906毫摩尔)与NaH(38毫克，浓度为60％的油分散液，0.953毫摩尔)的混合物中。将反应混合物在室温搅拌0.5小时。然后加入13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-(甲氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00363
-6-甲酸甲酯(125毫克，0.227毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌3小时，接着在50℃再搅拌3小时。然后以水使反应淬灭，并以1N HCl溶液酸化。然后，粗产物以淡黄色固体的形式沉淀，其通过过滤来收集，及风干(106毫克，83％产率)。接着，6毫克此物质通过制备性HPLC来纯化，得到标题化合物，其为淡黄色固体(1.8毫克)。MS m/z 566(MH+)，保留时间为3.850分钟。1HNMR(500MHz，MeOD)δppm 0.28(m，0.36H)1.19-2.20(m，11.64H)2.70-3.02(m，2H)3.03(s，2.16H)3.05(s，3.84H)3.49(d，J＝15.26Hz，0.64H)3.54(s，1.92H)3.83(s，1.08H)3.91(s，3H)4.08(d，J＝15.26Hz，0.36H)5.29(d，J＝15.26Hz，0.36H)5.50(d，J＝14.95Hz，0.64H)6.98-7.06(m，1H)7.16(d，J＝2.44Hz，0.36H)7.23(d，J＝2.44Hz，0.64H)7.30(d，J＝8.55Hz，0.64H)7.34(d，J＝8.55Hz，0.36H)7.56(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.64H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.36H)7.88(d，J＝8.55Hz，0.64H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.36H)8.12(s，0.36H)8.33(d，J＝1.53Hz，0.64H)。
关于制备标题化合物的可选择操作如下提供。
在N2下向配备有机械搅拌器、N2入口管及温度计的经火焰干燥的1升四颈圆底烧瓶中加入氢化钠(95％)(3.09克，129.2毫摩尔)与无水DMF(200毫升)。在剧烈搅拌下分批加入碘化三甲基氧化锍(32.5克，147.3毫摩尔)，在此期间温度上升至30℃。搅拌30分钟后，迅速加入13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-(甲氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00364
-6-甲酸甲酯(33.8克，61.3毫摩尔)在无水DMF(70毫升)中的溶液。将反应混合物在30℃之下搅拌30分钟，然后分批倒入1N HCl(130毫升)在H2O(2升)中的冰冷溶液中。将所得到的悬浮液以机械方式搅拌1小时后，过滤沉淀物，并以H2O(100毫升)洗涤滤饼。使滤饼在EtOAc与0.5N HCl(1∶1，4升)之间作分配处理。分离有机相，以H2O(1升)与盐水(1升)洗涤，以MgSO4干燥，过滤，及在真空中浓缩。使残留物溶于EtOAc(150毫升)中，并使溶液经过硅胶垫(300克，在己烷中)过滤，且以50％EtOAc/己烷(5升)冲洗。使滤液在真空中浓缩，得到微黄色固体，将其与50℃至0℃的10％EtOAc/TBME(220毫升)一起研磨，得到(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00371
-1a(2H)-甲酸甲酯，其为白色固体(26.1克，75％产率)。HPLC纯度为100％。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ11.61(s，1H)，8.47(s，0.5H)，8.25(s，0.5H)，7.81-7.88(m，1H)，7.57-7.63(m，1H)，7.23-7.29(m，2H)，7.01-7.07(m，1H)，5.43(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.22(d，J＝15Hz，0.5H)，4.04(dd，J＝15.4与6.6Hz，0.5H)，3.83(s，3H)，3.75(s，1H)，3.08-3.47(m，0.5H)，3.29(s，3H)，2.73-2.92(m，8H)，1.11-1.99(m，10.5H)，0.20(m，0.5H)。m/z 566(M+H)+。
中间体9
Figure G2008800163092D00372
(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯
使(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯的样品以50毫克/毫升的浓度溶于EtOH/CH3CN 1/1+0.5％DEA(二乙胺)中。[DEA的加入确保所述化合物在注射过程中留在溶液中]。然后在下文所示的条件下将此溶液注射至Thar SFC-350制备性SFC上。
在Thar SFC-350上的制备条件：色谱柱为Chiralcel OJ-H 5×25厘米；流动相为25％[MeOH/CH3CN(1/1)]/CO2；压力(巴)为100；流速(毫升/分钟)为240；溶液浓度(毫克/毫升)为50；注射量(毫升)为4.5-5；循环时间(分钟/注射)为6.5-7；温度(℃)为45；通量(克/小时)为约2；检测器波长(纳米)为254。
从371.4克外消旋起始原料得到总计177.3克所要第二洗脱的(-)异构体，其含有约1摩尔当量的二乙胺。此物质使用下述程序来纯化。将溶于二氯甲烷(800毫升)中的混合物(24.7克)以0.5N HCl(1×400毫升，1×240毫升)、H2O(2×240毫升)及盐水(2×240毫升)相继洗涤。然后，使有机层干燥(无水Na2SO4)，过滤，并蒸发，得到22.33克(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00381
-1a(2H)-甲酸甲酯，其为黄色固体(92％收率)。HPLC1＞99％(保留时间2.38分钟)；LC/MS(ES+)566.51(M+H，100)。[α]D 25C-194.64°(c 1.03，MeOH)。对C30H35N3O6S·0.33H2O的分析计算值：C，63.04、H，6.29、N，7.35、S，5.61、H2O，1.04；实测值：C，63.07、H，6.01、N，7.24、S，5.58、H2O，1.03。NMR显示不存在Et2NH(二乙胺)。此物质的EE(对映体过量)使用下述分析性HPLC程序来确定(＞99％)。
在Thar分析性SFC上确定对映体过量的分析条件：分析性色谱柱为Chiralcel OJ(0.46×25厘米，10μl)；BPR压力为100巴；温度为35℃；流速为3.0毫升/分钟；流动相为15％[MeOH/CH3CN(1/1)]/CO2；检测器波长为254纳米；保留时间(分钟)为4和6.5。
中间体10
Figure G2008800163092D00382
(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00383
-1a(2H)-甲酸
向(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00384
-1a(2H)-甲酸甲酯(22.33克，39.5毫摩尔)在MeOH(300毫升)中的溶液中历时20分钟缓慢加入1N NaOH(120毫升)，同时保持反应温度＜30℃。在N2下将混合物在室温搅拌18小时。HPLC显示反应完成。向反应溶液中加入1N HCl(130毫升)。加入完成后，反应混合物的pH为约2。对反应混合物中的甲醇进行蒸发。将水(300毫升)加到混合物中，然后将其以CH2Cl2(1×600毫升，1×200毫升)萃取。合并的萃取物以H2O(2×300毫升)及盐水(2×300毫升)洗涤，干燥(Na2SO4)，并蒸发，得到20.82克(96％产率)标题化合物，其为黄色固体。HPLC条件：色谱柱为Phenomenoex SynergiPolar-RP 4微米4.6×50毫米；UV为220纳米；梯度时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；75-100％B；溶剂A为含有0.2％H3PO4的10％MeOH/90％H2O；溶剂B为含有0.2％H3PO4的90％MeOH/10％H2O。HPLC＞99％(保留时间1.80分钟)。LC/MS(ES+)552.25(M+H，100)。[α]D 25C-166.99°(c 1.00，MeOH)。GC(气相色谱)分析：CH2Cl24.94％。对C29H33N3O6S·0.16H2O·0.35CH2Cl2的分析计算值：C，60.37、H，5.87、N，7.20、S，5.49、H2O，0.49、CH2Cl2，5.02；实测值：C，59.95、H，5.89、N，7.03、S，5.38、H2O，0.47、CH2Cl2，4.94。
中间体11
(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00392
-1a(2H)-甲酸
向(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00393
-1a(2H)-甲酸甲酯(100毫克，0.177毫摩尔)在THF/甲醇混合物(2.0毫升/2.0毫升)中的溶液中加入2N NaOH溶液(1.0毫升)。在微波条件下将反应混合物在90℃加热5分钟。然后使其浓缩，以1N HCl溶液酸化，并以乙酸乙酯(2×20毫升)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩。使残留物通过制备性HPLC来纯化，得到所要产物，其为淡黄色固体(59毫克，60％产率)。MS m/z 552(MH+)，保留时间为3.850分钟。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.25(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.69-2.98(m，2H)3.02(s，2.28H)3.02(s，3.72H)3.41(d，J＝15.00Hz，0.62H)3.88(s，3H)4.01(d，J＝15.00Hz，0.38H)5.26(d，J＝15.00Hz，0.38H)5.45(d，J＝14.64Hz，0.62H)6.94-7.02(m，1H)7.13(d，J＝2.56Hz，0.38H)7.21(d，J＝2.20Hz，0.62H)7.26(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.30(d，J＝8.78Hz，0.38H)7.53(dd，J＝8.42，1.46Hz，0.62H)7.61(dd，J＝8.60，1.65Hz，0.38H)7.85(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.89(d，J＝8.42Hz，0.38H)8.10(s，0.38H)8.28(d，J＝1.46Hz，0.62H)。
中间体12
(1aR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00402
-1a，5(2H)-二甲酰胺
将TBTU(437毫克，1.36毫摩尔)与DIPEA(二异丙基乙胺)(0.95毫升，5.436毫摩尔)加到(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00403
-1a(2H)-甲酸(500毫克，0.906毫摩尔)在DMSO(20.0毫升)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入(2S，3R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-醇(280毫克，1.36毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭，并以1N HCl溶液酸化。褐色固体分离出来，其通过过滤来收集。接着，此物质通过制备性HPLC在下述条件下来分离：色谱柱为Waters Sunfire 19毫米×100毫米；溶剂A为10％CH3CN-90％H2O-0.1％TFA；溶剂B为90％CH3CN-10％H2O-0.1％TFA；程序为以65％溶剂B开始，最初保持时间为5分钟，然后历时30分钟逐渐增加至90％溶剂B；流速为25毫升/分钟；加载量为50-60毫克/操作。
在上述HPLC条件下洗脱(1aR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00404
-1a，5(2H)-二甲酰胺，接着洗脱(1aS)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00405
-1a，5(2H)-二甲酰胺。所得产物为淡黄色固体(230毫克，36％产率)。MS m/z 703(MH+)，保留时间为3.936分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.14-0.24(m，2.64H)0.51(s，2.46H)0.72-2.21(m，20.9H)2.49(m，0.18H)2.62(m，0.82H)2.85(m，0.18H)2.96(m，0.82H)3.03(s，6H)3.39(m，0.82H)3.49-3.58(m，1.64H)3.71-3.80(m，0.36H)3.90(s，3H)4.17(d，J＝14.65Hz，0.18H)5.06(d，J＝14.65Hz，0.18H)5.37(d，J＝14.95Hz，0.82H)6.73(d，J＝5.49Hz，0.82H)6.98-7.05(m，1H)7.08(d，J＝4.58Hz，0.18H)7.10(d，J＝2.44Hz，0.18H)7.21(d，J＝2.44Hz，0.82H)7.31(d，J＝8.55Hz，0.82H)7.34(d，J＝8.55Hz，0.18H)7.59-7.64(m，1H)7.87-7.93(m，1H)7.99(s，0.18H)8.09(d，J＝1.22Hz，0.82H)。
中间体13
Figure G2008800163092D00411
(1aS)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00412
-1a，5(2H)-二甲酰胺
将TBTU(437毫克，1.36毫摩尔)与DIPEA(0.95毫升，5.436毫摩尔)加到(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00413
-1a(2H)-甲酸(500毫克，0.906毫摩尔)在DMSO(20.0毫升)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入(2S，3R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-醇(280毫克，1.36毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭，接着以1N HCl溶液酸化。带有褐色的固体分离出来，其通过过滤来收集。接着，将此物质通过制备性HPLC在下述条件下来分离：色谱柱为Waters Sunfire 19毫米×100毫米；溶剂A为10％CH3CN-90％H2O-0.1％TFA；溶剂B为90％CH3CN-10％H2O-0.1％TFA；程序为以65％溶剂B开始，最初保持时间为5分钟，接着历时30分钟逐渐增加至90％溶剂B；流速为25毫升/分钟；加载量为50-60毫克/操作。
在上述HPLC条件下，在(1aR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00414
-1a，5(2H)-二甲酰胺后洗脱(1aS)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00421
-1a，5(2H)-二甲酰胺。所得产物为淡黄色固体(215毫克，34％产率)。MS m/z 703(MH+)，保留时间为4.038分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.20(m，0.38H)0.75(s，1.86H)0.76(s，1.86H)0.84(s，1.86H)0.85(s，1.14H)0.89-2.18(m，18.9H)2.52(m，0.38H)2.70(m，0.62H)2.85(m，0.38H)2.97(m，0.62H)3.03(s，2.28H)3.04(s，3.72H)3.33-3.39(m，0.62H)3.43-3.51(m，1.24H)3.73-3.77(m，0.38H)3.78-3.84(m，0.38H)3.90(s，1.86H)3.90(s，1.14H)4.14(d，J＝14.65Hz，0.38H)5.11(d，J＝14.65Hz，0.38H)5.44(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.68(d，J＝4.88Hz，0.62H)6.96-7.03(m，1H)7.07(d，J＝5.19Hz，0.38H)7.12(d，J＝2.44Hz，0.38H)7.23(d，J＝2.14Hz，0.62H)7.27(d，J＝8.54Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.55(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.62(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.87(d，J＝8.54Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.08(d，J＝1.22Hz，0.38H)8.10(d，J＝1.22Hz，0.62H)。
中间体14
(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00423
-1a(2H)-甲酸
将10N NaOH溶液(2.0毫升，20毫摩尔)与4毫升水加到(1aR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺(160毫克，0.228毫摩尔)在THF/MeOH(7毫升/7毫升)中的溶液中。在微波条件下将反应混合物在120℃加热1小时。然后使其浓缩，以浓HCl溶液酸化，并以乙酸乙酯萃取两次(2×30毫升)。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及在真空中浓缩成橙色油状物。接着，使粗产物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到产物，其为淡黄色固体(80毫克，64％产率)。平均旋光率(average specific rotation)-130.85°；溶剂MeOH；波长589纳米；50厘米样品池。MS m/z 552(MH+)，保留时间为3.760分钟。1HNMR(500MHz，MeOD)δppm 0.27(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.76(m，0.38H)2.80-2.92(m，1H)2.92-3.09(m，6.62H)3.45(d，J＝14.95Hz，0.62H)3.90(s，1.86H)3.91(s，1.14H)4.04(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.28(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.47(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.95-7.05(m，1H)7.15(d，J＝2.75Hz，0.38H)7.23(d，J＝1.83Hz，0.62H)7.28(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.54(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.86(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.11(d，J＝1.22Hz，0.62H)8.29(d，J＝1.22Hz，0.38H)。
中间体15
Figure G2008800163092D00431
(+)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00432
-1a(2H)-甲酸
将10N NaOH溶液(1.8毫升，18毫摩尔)与4毫升水加到(1aS)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00433
-1a，5(2H)-二甲酰胺(130毫克，0.185毫摩尔)在THF/MeOH(7毫升/7毫升)中的溶液中。在微波条件下将反应混合物在120℃加热1小时。使其浓缩，以浓HCl溶液酸化，并以乙酸乙酯萃取两次(2×30毫升)。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及在真空中浓缩，得到橙色油状物。然后，使粗产物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到产物，其为淡黄色固体(68毫克，67％产率)。平均旋光率+174.73°；溶剂MeOH；波长589纳米；50厘米样品池。MS m/z 552(MH+)，保留时间为3.773分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.27(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.76(m，0.38H)2.80-2.92(m，1H)2.92-3.09(m，6.62H)3.45(d，J＝14.95Hz，0.62H)3.90(s，1.86H)3.91(s，1.14H)4.04(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.28(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.47(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.95-7.05(m，1H)7.15(d，J＝2.75Hz，0.38H)7.23(d，J＝1.83Hz，0.62H)7.28(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.54(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.86(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.11(d，J＝1.22Hz，0.62H)8.29(d，J＝1.22Hz，0.38H)。
中间体16
Figure G2008800163092D00441
2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(1，1-二甲基乙基)酯
向机械搅拌的2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(80g，0.24mol)于无水二氯甲烷(1.2L)和THF(100mL)中的溶液中加入活化的分子筛(80g)和碳酸银(275g，0.99mol)。将反应混合物冷却至0℃，并滴加叔丁基溴(142g，1.04mol)。将混合物在室温搅拌过夜，并通过TLC(己烷-乙酸乙酯80∶20，Rf(产物)＝0.7)进行监测。如果留有任何溴代酸未发生转化，则加入额外的10％碳酸银，并再继续搅拌2-4小时。结束后，将反应混合物过滤通过薄的硅藻土床。滤渣(filtrand)用二氯甲烷(500mL)洗涤。真空浓缩合并的滤液，由此得到的粗产物通过硅胶色谱(230-400目)(用0-2％乙酸乙酯/石油醚的梯度进行洗脱)进行纯化。合并同质的级分，并减压蒸发，得到80g(85％)标题化合物。HPLC：90.1％(RT＝6.56分钟)，柱：C18BDS，(50×4.6mm)，流动相：0.1％TFA/水∶ACN(乙腈)的梯度(30→100→30)，流速：0.8mL/分钟。LCMS：99.8％(RT＝4.44min)，柱：Geneis，C1850×4.6mm，流动相：0.1％甲酸/水：ACN的梯度(70→95→70)，流速：0.8mL/分钟，M-1＝376.5。1HNMR(CDCl3)(400MHz)δ1.37-1.40(m，3H，环己基)，1.62(s，9H，叔丁基)，1.80-1.94(两组多重峰，分别是3H和4H，环己基部分)，2.81(m，1H，环己基的CH-苄型的(CH of cyc.Hexyl-benzylic))，7.70-7.75(m，2H，吲哚-H4和H5)，8.04(s，1H，吲哚-H7)，8.52(s，1H，吲哚-NH)。
中间体17
3-环己基-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酸(1，1-二甲基乙基)酯
将2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸叔丁酯(72g，0.19mol)溶解在甲苯和乙醇的1∶1混合物(720mL)中并脱气。然后加入LiCl(23.9g，0.51mol)，接着加入碳酸钠(720mL，经单独脱气的浓度为1.0M的溶液)和Pd-tetrakis(13.1g，0.011mol)。搅拌0.25小时后，加入2-甲酰基-4-甲氧基苯基硼酸(41.1g，0.22mol)，并将反应混合物加热至85℃并保持4小时。然后通过TLC(己烷-乙酸乙酯80∶20，Rf(产物)＝0.55)监测反应。结束后，将反应混合物冷却至室温，加入水(1.0L)，然后加入乙酸乙酯(1.0L)。有机层用盐水洗涤，干燥并真空浓缩，得到标题化合物，其为黄色固体。收率：75g(74％)。HPLC：99.7％(RT＝6.30min)，柱：C18BDS(4.6×50mm)，SC-307，流动相：0.1％TFA/水：ACN的梯度(30→100→30)，流速：0.8mL/分钟。LCMS：98.0％(RT＝5.28min)，柱：Geneis，C18(50×4.6mm)，流动相：0.1％甲酸/水：ACN的梯度(70→95→70)，流速：0.8mL/分钟，M-1＝432.2。1HNMR(DMSO-d6)(400MHz)δ1.40-1.48(m，3H，环己基)，1.57(s，9H，叔丁基)，1.84-1.90(m，7H，环己基部分)，3.09(m，1H，环己基的CH-苄型的)，3.84(s，3H，OCH3)，6.55(d，J＝4Hz，1H，芳基H2’)，7.06(d，1H，芳基H3’)，7.08(s，1H，芳基H6’)，7.23(d，1H，吲哚-H5)，7.53(d，J＝8Hz，1H，吲哚-H4)，7.70-7.75(m，2H，NH+吲哚-H7)，8.06(s，1H，CHO)。
中间体18
Figure G2008800163092D00451
13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00452
-6，10-二甲酸10-(1，1-二甲基乙基)酯·6-甲酯
将3-环己基-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-甲酸叔丁酯(62.5g，0.144mol)溶解在无水DMF(1.2L)中并机械搅拌。然后加入碳酸铯(84g，0.17mol)和2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(GC纯度为65-70％，56.2g，0.18mol)，将反应混合物加热至65℃并保持4小时，并且通过TLC(己烷-乙酸乙酯80∶20，Rf(产物)＝0.7)监测反应。结束后，将混合物冷却至室温，然后用水(1.0L)淬灭。黄色固体沉淀出来，过滤收集所述固体并风干。然后将该物质在甲醇中浆化，过滤，并真空干燥，得到产物，其为黄色粉末(70g，90％)。HPLC：99.1％(RT＝6.45分钟)，柱：C18BDS(4.6×50mm)，流动相：0.1％TFA/水：ACN的梯度(30→100→30)，流速：0.8毫升/分钟。LCMS：100％(RT＝7.00分钟)，柱：Geneis，C 18(50×4.6mm)，流动相：0.1％甲酸/水：ACN的梯度(70→95→70)，流速：0.8毫升/分钟，M+1＝502.2。1H NMR(CDCl3)(400MHz)δ1.10-1.30(m，3H，环己基)，1.64(s，9H，叔丁基)，1.77-2.07(m，7H，环己基部分)，2.80(m，1H，环己基的CH-苄型的)，3.84(s，3H，OCH3)，3.93(s，3H，COOCH3)，4.15和5.65(两个宽峰，各为1H，烯丙酰基的CH2(allylic CH2))，6.95(s，1H，芳基H6’)，7.01(d，1H，芳基H2’)，7.53(d，J＝8Hz，1H，芳基H3’)，7.70(d，J＝4Hz，1H，吲哚-H5)，7.84(s+d，2H，烯基的H+吲哚-H4)，8.24(s，1H，吲哚-H7)。13CNMR(CDCl3)(100.0MHz)δ166.92，165.71，158.96，142.28，136.47，13.50，134.61，132.43，132.01，129.73，124.78，124.68，120.33，119.39，119.04，115.62，115.05，111.27，80.27，55.49，52.50，39.09，36.81，33.40，28.38，27.15，26.28。
中间体19
Figure G2008800163092D00461
2-(二甲氧基氧膦基)-2-丙烯酸甲酯
向配备有机械搅拌器、冷凝器、温度控制器和氮气进口的5L四颈圆底烧瓶中加入低聚甲醛(40.5g，1.35摩尔)、MeOH(甲醇)(2L)和哌啶(2mL)。将反应混合物在氮气气氛下加热至回流并保持3小时。冷却到50℃后，一次性加入2-(二甲氧基磷酰基)乙酸甲酯(150g，0.824摩尔)。将反应混合物继续回流18小时。冷却到室温后，真空浓缩反应溶液，得到透明无色油状物。在配备有温度控制器、氮气进口、磁力搅拌器和迪安-斯托克分水器(Dean-Starkapparatus)的3L四颈圆底烧瓶中将上述油状物溶解在无水甲苯(1L)中。向溶液中加入TsOH·H2O(5.2g)。然后将反应混合物共沸回流18小时，从而除去甲醇。冷却到室温后，将溶液真空浓缩，得到黄色油状物，将其在150-155℃/0.2mm Hg的条件下真空蒸馏，得到产物，其为无色油状物(135.0g)。根据1H NMR确定纯度为90％。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.0(dd，J＝42.4与1.5Hz，1H)，6.73(dd，J＝20.5与1.8Hz，1H)，3.80(s，6H)，3.76(s，3H)。
中间体20
Figure G2008800163092D00471
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-甲酯
在氮气下将氢化钠(96毫克，4毫摩尔)加到搅拌的氯化三甲基氧化锍(567毫克，4.4毫摩尔)在无水DMSO(10毫升)中的悬浮液中。将所得到的混合物在室温搅拌30-45分钟，然后以小份分批加入纯净的13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00473
-6，10-二甲酸10-(1，1-二甲基乙基)酯·6-甲酯(1.0克，2毫摩尔)。悬浮液以DMSO(5毫升)稀释，并在50℃加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温，并加入水。固体分离出来，其通过过滤来收集，并以水洗涤，接着风干过夜，得到1.15克粗产物。使此物质通过快速柱色谱(硅胶，3％MeOH/DCM(二氯甲烷))来纯化，得到纯标题化合物(0.96克)。LC/MS：保留时间3.816分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的旋转异构体(rotamer)的形式存在。
下述程序为对外消旋的(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00474
-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-甲酯进行拆分的方法的实施例。使(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-甲酯的样品溶于异丙醇与乙腈的混合物(8∶2)中，所得到的最终浓度为20毫克/毫升。将此混合物注射至使用下述条件的制备性手性SFC色谱系统上：ChiralcelOJ-H色谱柱，4.6×250毫米，5微米；流动相为8％MeOH/CO2；温度为35℃；流速为2毫升/分钟并保持16分钟；UV监测在260纳米；注射量为5微升浓度为约20.0毫克/毫升的IPA∶ACN(8∶2)溶液。
中间体21
Figure G2008800163092D00481
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00482
-1a，5(2H)-二甲酸1a-甲酯
将TFA(三氟乙酸)(5毫升)加到(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00483
-5-甲酸叔丁酯(515毫克，1毫摩尔)在无水DCM(二氯甲烷)(10毫升)中的溶液中。将所得到的溶液在室温搅拌大约8至12小时。然后，使反应混合物蒸发至干，得到标题化合物(0.47克，100％)。LC/MS：保留时间2.245分钟；m/e 460(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)：基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的旋转异构体的混合物的形式存在。
中间体22
Figure G2008800163092D00484
8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00485
-1a(2H)-甲酸甲酯
将8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00486
-5-甲酸(140毫克，0.31毫摩尔)与CDI(64毫克，0.40毫摩尔)在THF(3毫升)中的溶液在60℃搅拌1小时。加入N-甲基硫酰胺(68毫克，0.62毫摩尔)与DBU(71.6毫克，0.47毫摩尔)，并将混合物在60℃搅拌过夜。然后，将反应混合物倒入冷水中，以稀盐酸酸化，并萃取到乙酸乙酯中。将萃取物以稀盐酸(0.1N)与盐水相继洗涤，接着干燥(无水硫酸钠)，过滤，及蒸发，得到标题化合物，其为褐色固体。ESI-MS m/e 552(MH+)。使用此物质而无需进一步纯化。
中间体23
Figure G2008800163092D00491
8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00492
-1a(2H)-甲酸
使8-环己基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00493
-1a(2H)-甲酸甲酯溶于THF和MeOH的混合物(2毫升，2毫升)中。然后加入2.5M NaOH(水溶液)(1.2毫升，3毫摩尔)，并将反应混合物在22℃振荡2小时。接着以1M HCl(水溶液)(3毫升)使溶液中和，及浓缩，从而除去有机溶剂。残留物以H2O浆化，并通过过滤来收集固体，以H2O洗涤，且干燥，得到标题化合物(160毫克，0.30毫摩尔)。ESI-MSm/e 538(MH+)。使用此物质而无需进一步纯化。
中间体24
Figure G2008800163092D00494
(+/-)-8-环己基-5-[[[(苄基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00495
-1a(2H)-甲酸甲酯
将(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00496
-5-甲酸(200毫克，0.44毫摩尔)与CDI(92毫克，0.57毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液在60℃搅拌1小时。然后加入N-苄基硫酰胺(164毫克，0.88毫摩尔)与DBU(100毫克，0.66毫摩尔)，并将所得到的混合物在60℃搅拌过夜。接着，将反应混合物倒入冷水中，以稀盐酸酸化，并萃取到乙酸乙酯中。将有机相以盐酸(0.1N)及盐水洗涤，并干燥(硫酸钠)，及在真空中蒸发，得到标题化合物，其为褐色固体。ESI-MS m/e 628(MH+)。
中间体25
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-5-[[[[(苯基甲基)氨基]磺酰基]氨基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00502
-1a(2H)-甲酸
标题化合物使用与就8-环己基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00503
-1a(2H)-甲酸所述相似的程序从(+/-)-8-环己基-5-[[[(苄基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00504
-1a(2H)-甲酸甲酯开始来制备。ESI-MS m/e 613(MH+)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 1.22-2.20(m，13H)3.27-3.31(m，1H)3.47(d，J＝14.95Hz，0.6H)3.92(d，J＝2.44Hz，3H)4.04(d，0.4H)4.31(d，J＝2.75Hz，2H)5.24(d，0.4H)5.48(d，0.6H)7.02(d，1H)7.17(d，J＝2.75Hz，1H)7.19-7.35(m，5H)7.39(t，J＝7.48Hz，2H)7.45-7.52(m，1H)7.80(d，J＝1.53Hz，0.4H)7.85(dd，J＝8.39，6.87Hz，1H)8.22(d，J＝1.53Hz，0.6H)。
中间体26
Figure G2008800163092D00505
(+/-)-8-环己基-5-[[(环丙基磺酰基)氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00506
-1a(2H)-甲酸
将(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00507
-5-甲酸(1当量)与羰基二咪唑(1.5当量)在无水THF中的混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续加入1当量的环丙基磺酰胺与1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(2当量)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶液处理后，使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化。接着，使用1N NaOH的THF-MeOH溶液来水解中间体酯，得到标题化合物。LC/MS：保留时间为2.030分钟；m/e 549(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)：基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
除非另有说明，中间体27-38使用以下实验操作。LCMS数据：停止时间：梯度时间+1分钟；开始浓度：0％B，除非另有说明；结束浓度：100％B，除非另有说明；洗脱剂A：5％CH3CN/95％H2O(含有10mM NH4OAc)(用于柱A、D及E)，10％MeOH/90％H2O(含有0.1％TFA)(用于柱B与C)；洗脱剂B：95％CH3CN/5％H2O(含有10mM NH4OAc)(用于柱A、D及E)，90％MeOH/10％H2O(含有0.1％TFA)(用于柱B与C)；柱A：Phenomenex 10μ4.6×50毫米C18；柱B：Phenomenex C1810μ3.0×50毫米；柱C：Phenomenex4.6×50毫米C1810μ；柱D：Phenomenex Lina C185μ3.0×50毫米；柱E：Phenomenex 5μ4.6×50毫米C18。制备性HPLC数据：用于H2O/CH3CN(含有10mM NH4OAc缓冲剂)的条件：梯度：历时20分钟的线性梯度，除非另有说明；开始浓度：15％B，除非另有说明；结束浓度：100％B；洗脱剂A：5％CH3CN/95％H2O(含有10mM NH4OAc)；洗脱剂B：95％CH3CN/5％H2O(含有10mM NH4OAc)；柱：Sunfire Prep C18OBD 5μ30×100毫米；用于H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲剂)的条件：梯度：历时20分钟的线性梯度，除非另有说明；开始浓度：30％B，除非另有说明；结束浓度：100％B；洗脱剂A：10％MeOH/90％H2O(含有0.1％TFA)；洗脱剂B：90％MeOH/10％H2O(含有0.1％TFA)；柱：Phenomenex 21×100毫米C18H2O。
中间体27
Figure G2008800163092D00511
(+/-)-8-环己基-5-[[(环丙基磺酰基)氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸
将(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00513
-5-甲酸(1当量)与羰基二咪唑(1.5当量)在无水THF中的混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续加入1当量的环丙基磺酰胺与1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(2当量)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶液处理后，使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化。接着，使用1N NaOH的THF-MeOH溶液来水解中间体酯，得到标题化合物。LC/MS：保留时间为2.030分钟；m/e 549(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)：基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体28
Figure G2008800163092D00521
13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00522
-10-甲酸
在氮气下将三氟乙酸(30毫升)逐滴加到搅拌的13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00523
-6，10-二甲酸10-叔丁酯·6-甲酯(10克，20毫摩尔)在二氯乙烷(30毫升)中的浆液中。将透明深绿色溶液在室温搅拌2.5小时，浓缩至干，并与EtOAc(乙酸乙酯)(100毫升)一起搅拌过夜。过滤收集固体，以EtOAc与Et2O(乙醚)洗涤，得到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00524
-10-甲酸(8.35克，18.8毫摩尔，94％)，其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.13-2.16(m，10H)，2.74-2.88(m，1H)，3.84(s，3H)，3.89(s，3H)，4.06-4.29(m，1H)，5.54-5.76(m，1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)，7.78(dd，J＝8.8，1.1Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(d，J＝1.1Hz，1H)。LCMS：m/e 446(M+H)+，保留时间3.21分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体29
Figure G2008800163092D00531
13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00532
-6-甲酸甲酯
将1，1’-羰基二咪唑(1.82克，11.2毫摩尔)加到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00533
-10-甲酸(3.85克，8.65毫摩尔)在THF(15毫升)中的浆液中。将反应混合物在60℃加热1.5小时，冷却至室温，以环丙基磺酰胺(1.36克，11.2毫摩尔)处理，搅拌10分钟，然后通过逐滴加入DBU(2.0毫升，13毫摩尔)在THF(3毫升)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌过夜，以EtOAc(100毫升)稀释，并以H2O(约30毫升)、1NHCl(水溶液)(2×50毫升)及盐水(约30毫升)洗涤。将合并的水层以EtOAc(100毫升)萃取，并以1N HCl(水溶液)(约50毫升)洗涤有机层。以盐水(约30毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩。将残留物与Et2O(约100毫升)一起搅拌2小时，并过滤收集固体，以Et2O冲洗，及干燥，得到13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00534
-6-甲酸甲酯(4.24克，7.73毫摩尔，89％)，其为淡黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.08-2.13(m，14H)，2.73-2.87(m，1H)，3.13-3.24(m，1H)，3.82(s，3H)，3.89(s，3H)，4.04-4.27(m，1H)，5.50-5.71(m，1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)，7.44(dd，J＝8.4，1.1Hz，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，8.11(br s，1H)，8.78(br s，1H)。LCMS：m/e 549(M+H)+，保留时间3.79分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体30
Figure G2008800163092D00541
13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00542
-6-甲酸
使13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00543
-6-甲酸甲酯(1.0克，1.8毫摩尔)溶于MeOH/THF(1∶1，24毫升)中，并以1M NaOH水溶液(5毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60℃加热1.5小时，且冷却至室温。以1M HCl水溶液(5毫升)使透明溶液中和，及浓缩，从而除去有机溶剂。过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00544
-6-甲酸(1.0克，1.7毫摩尔，94％)，其为亮黄色固体(含有0.75当量的THF)，所述固体无需进一步纯化即使用。1HNMR(300MHz，CD3OD)δ1.11-2.24(m，17H，3H来自THF)，2.81-2.96(m，1H)，3.17-3.28(m，1H)，3.69-3.79(m，3H，来自THF)，3.94(s，3H)，4.07-4.33(m，1H)，5.55-5.81(m，1H)，7.14-7.24(m，2H)，7.55-7.64(m，2H)，7.88-7.94(m，2H)，8.20(br s，1H)。LCMS：m/e 535(M+H)+，保留时间3.73分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体31
Figure G2008800163092D00545
8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00546
-1a(2H)-甲酸甲酯
向在氮气下搅拌的氢化钠(60％在矿油中的分散液，370毫克，9.2毫摩尔)在DMSO(8毫升)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(2.03克，9.2毫摩尔)。将反应混合物搅拌45分钟，然后加入13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00547
-6-甲酸甲酯(2.2克，4.0毫摩尔)在DMSO(5毫升)中的溶液(以DMSO(2×3毫升)冲洗烧瓶)。将反应混合物搅拌1小时，倒入0.25N HCl(100毫升)中，并以EtOAc(150毫升)萃取。以盐水(20毫升)洗涤有机层，且将合并的水层以EtOAc(100毫升)萃取。以盐水(约20毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩至干。将残留物与EtOAc/Et2O(1∶3，50毫升)一起搅拌，并过滤除去固体。使母液浓缩，及在高真空下干燥，得到8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00551
-1a(2H)-甲酸甲酯(1.92克，3.4毫摩尔，85％)，其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的约2∶1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.19-0.26(m，0.4H)，0.78-2.19(m，15.6H)，2.64-3.02(m，2H)，3.16-3.28(m，1H)，3.41(d，J＝15.0Hz，0.6H)，3.51(s，1.8H)，3.80(s，1.2H)，3.88(s，3H)，4.00(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.22(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.42(d，J＝15.0Hz，0.6H)，6.93-7.01(m，1H)，7.12(d，J＝2.6Hz，0.4H)，7.19(d，J＝2.6Hz，0.6H)，7.25(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.29(d，J＝8.8Hz，0.4H)，7.55(dd，J＝8.8，1.5Hz，0.6H)，7.63(dd，J＝8.8，1.5Hz，0.4H)，7.85(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.88(d，J＝8.8Hz，0.4H)，8.08(d，J＝1.5Hz，0.4H)，8.31(d，J＝1.5Hz，0.6H)。LCMS：m/e 563(M+H)+，保留时间3.75分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体32
Figure G2008800163092D00552
8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸
使8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00554
-1a(2H)-甲酸甲酯(1.92克，3.41毫摩尔)溶于MeOH/THF(1∶1，40毫升)中，并以1M NaOH水溶液(8毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60℃加热2小时，且冷却至室温。用1M HCl水溶液(8毫升)中和透明溶液，及浓缩除去有机溶剂。过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(1.66克，3.03毫摩尔，89％)，其为黄色粉末，所述粉末无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的1∶1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.32(t，J＝6.2Hz，0.5H)，0.71-2.12(m，15.5H)，2.61-2.94(m，2H)，3.16-3.27(m，1H)，3.41(d，J＝15.0Hz，0.5H)，3.82(s，1.5H)，3.86(s，1.5H)，3.99(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.28(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.49(d，J＝15.0Hz，0.5H)，6.85(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.5H)，6.91(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.5H)，6.96(d，J＝2.6Hz，0.5H)，7.08(d，J＝2.6Hz，0.5H)，7.19(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.24(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.61(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.67(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.83(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.85(d，J＝8.4Hz，0.5H)，8.06(s，0.5H)，8.35(s，0.5H)，9.31-10.35(m，1H)。LCMS：m/e 547(M-H)-，保留时间2.06分钟，柱A，4分钟梯度。
中间体33
Figure G2008800163092D00562
13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00563
-6-甲酸甲酯
将1，1’-羰基二咪唑(262毫克，1.62毫摩尔)加到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00564
-10-甲酸(603毫克，1.36毫摩尔)在THF(3毫升)中的浆液中。将反应混合物在60℃加热1.5小时，冷却至室温，以丙-2-磺酰胺(200毫克，1.62毫摩尔)处理，搅拌10分钟，然后通过逐滴加入DBU(0.27毫升，1.8毫摩尔)在THF(0.75毫升)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌过夜，以EtOAc(15毫升)稀释，并以H2O(约5毫升)、1N HCl(水溶液)(2×10毫升)及盐水(约5毫升)洗涤。将合并的水层以EtOAc(15毫升)萃取，并以1N HCl(水溶液)(约10毫升)洗涤有机层。以盐水(约5毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩。将残留物与Et2O(约15毫升)一起搅拌2小时，并过滤收集固体，以Et2O冲洗，及干燥，得到13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(640毫克，1.2毫摩尔，85％)，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.12-2.13(m，10H)，1.47(d，J＝7.0Hz，6H)，2.73-2.86(m，1H)，3.82(s，3H)，3.89(s，3H)，4.06-4.26(m，1H)，4.09(七重峰，J＝7.0Hz，1H)，5.51-5.71(m，1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，7.44(dd，J＝8.4，1.5Hz，1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10(d，J＝1.5Hz，1H)，8.57(s，1H)。LCMS：m/e 551(M+H)+，保留时间3.87分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体34
8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00573
-1a(2H)-甲酸甲酯
向在氮气下搅拌的氢化钠(60％在矿油中的分散液，97毫克，2.4毫摩尔)在DMSO(2毫升)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(530克，2.4毫摩尔)。将反应混合物搅拌45分钟，然后加入13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00574
-6-甲酸甲酯(578克，1.05毫摩尔)在DMSO(1.5毫升)中的溶液(以DMSO(2×0.75毫升)冲洗烧瓶)。将反应混合物搅拌1小时，倒入0.25N HCl(25毫升)中，并以EtOAc(40毫升)萃取。以盐水(10毫升)洗涤有机层，并将合并的水层以EtOAc(25毫升)萃取。以盐水(约10毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩至干。将残留物与EtOAc/Et2O(1∶4，10毫升)一起搅拌，并过滤除去固体。使母液浓缩，及在高真空下干燥，得到8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00575
-1a(2H)-甲酸甲酯(620毫克，1.0毫摩尔，定量)，其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的约2∶1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.32-0.39(m，0.4H)，0.77-2.09(m，17.6H)，2.60-2.96(m，2H)，3.41(d，J＝15.0Hz，0.6H)，3.53(s，1.8H)，3.79(s，1.2H)，3.87(s，3H)，4.02-4.14(m，1.4H)，5.14(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.39(d，J＝15.0Hz，0.6H)，6.89(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.4H)，6.91(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.6H)，7.00(d，J＝2.6Hz，0.4H)，7.11(d，J＝2.6Hz，0.6H)，7.23(d，J＝8.4Hz，0.6H)，7.25(d，J＝8.4Hz，0.4H)，7.38(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.6H)，7.43(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.4H)，7.83(d，J＝8.4Hz，0.6H)，7.86(d，J＝8.4Hz，0.4H)，7.96(d，J＝1.5Hz，0.4H)，8.20(d，J＝1.5Hz，0.6H)，8.39(s，0.4H)，8.43(s，0.6H)。LCMS：m/e 563(M-H)-，保留时间3.00分钟，柱A，4分钟梯度。
中间体35
Figure G2008800163092D00581
8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00582
-1a(2H)-甲酸
使8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00583
-1a(2H)-甲酸甲酯(606毫克，1.07毫摩尔)溶于MeOH/THF(1∶1，14毫升)中，并以1M NaOH水溶液(2.5毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60℃加热2小时，且冷却至室温。以1M HCl水溶液(2.5毫升)使透明溶液中和，及浓缩，从而除去有机溶剂。将残留物与H2O(10毫升)一起搅拌过夜，并过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00584
-1a(2H)-甲酸(530毫克，0.96毫摩尔，90％)，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的约2∶1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.23-0.30(m，0.4H)，0.80-2.24(m，17.6H)，2.70-3.11(m，2H)，3.46(d，J＝15.0Hz，0.6H)，3.95(s，3H)，3.93-4.10(m，1.4H)，5.29(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.48(d，J＝15.0Hz，0.6H)，6.98-7.05(m，1H)，7.16(d，J＝2.6Hz，0.4H)，7.23(d，J＝2.6Hz，0.6H)，7.29(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.33(d，J＝8.8Hz，0.4H)，7.56(dd，J＝8.8，1.5Hz，0.6H)，7.64(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.4H)，7.87(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.92(d，J＝8.4Hz，0.4H)，8.13(d，J＝1.5Hz，0.4H)，8.31(d，J＝1.5Hz，0.6H)。LCMS：m/e 551(M+H)+，保留时间3.74分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体36
10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00592
-6-甲酸甲酯
将1，1’-羰基二咪唑(1.23克，7.60毫摩尔)加到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00593
-10-甲酸(2.6克，5.8毫摩尔)在THF(11毫升)中的浆液中。将反应混合物在60℃加热1.5小时，冷却至室温，以硫酰胺(1.12克，11.7毫摩尔)处理，搅拌10分钟，然后通过逐滴加入DBU(1.8毫升，11.7毫摩尔)在THF(3毫升)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌3小时，以EtOAc(80毫升)与CH2Cl2(100毫升)稀释，及浓缩至干。将残留物以CH2Cl2(100毫升)稀释，并以1N HCl(水溶液)(2×100毫升)洗涤。以CH2Cl2(100毫升)萃取合并的水层，并以1/2饱和的盐水(约50毫升)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩。将残留物与Et2O(约75毫升)一起搅拌1小时，并过滤收集固体，以Et2O冲洗，及干燥，得到10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(2.8克，5.3毫摩尔，91％)，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.08-2.10(m，10H)，2.71-2.84(m，1H)，3.79(s，3H)，3.89(s，3H)，4.00-4.18(m，1H)，5.50-5.64(m，1H)，5.68(s，2H)，6.97(d，J＝2.6Hz，1H)，7.07(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)，7.46(dd，J＝8.4，1.5Hz，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.82(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10(br s，1H)，9.49(s，1H)。LCMS：m/e 524(M+H)+，保留时间3.60分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体37
Figure G2008800163092D00595
10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00601
-6-甲酸
使10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00602
-6-甲酸甲酯(725毫克，1.39毫摩尔)溶于MeOH/THF(1∶1，16毫升)中，并以1M NaOH水溶液(3毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60℃加热0.5小时，且冷却至室温。将反应溶液以MeOH/H2O(2∶1，15毫升)稀释，以1M HCl水溶液(3毫升)中和，及浓缩，从而除去有机溶剂。过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00603
-6-甲酸(650克，1.3毫摩尔，92％)，其为亮黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ1.16-2.22(m，10H)，2.82-2.96(m，1H)，3.94(s，3H)，4.07-4.29(m，1H)，5.57-5.80(m，1H)，7.14-7.23(m，2H)，7.55-7.63(m，2H)，7.88-7.94(m，2H)，8.18(s，1H)。LCMS：m/e 510(M+H)+，保留时间2.85分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体38
Figure G2008800163092D00604
5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00605
-1a(2H)-甲酸甲酯
向在氮气下搅拌的氢化钠(60％在矿油中的分散液，350毫克，8.8毫摩尔)在DMSO(8毫升)中的浆液中分三份加入碘化三甲基氧化锍(1.93克，8.8毫摩尔)。将反应混合物搅拌0.5小时，然后加入10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00606
-6-甲酸甲酯(2.0克，3.8毫摩尔)在DMSO(8毫升)中的溶液(以DMSO(2×2毫升)冲洗烧瓶)。将反应混合物搅拌1小时，倒入0.25N HCl(100毫升)中，并以CH2Cl2(100毫升)稀释。过滤溶液，从而收集固体，并分离母液的有机层，且浓缩至干。使残留物溶于EtOAc(约150毫升)中，以H2O(约50毫升)与盐水(约50毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，及浓缩至干。将残留物与EtOAc/Et2O(4∶1，50毫升)一起搅拌，并过滤收集固体，且以EtOAc洗涤。将这些固体与最初收集的固体合并，得到5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00611
-1a(2H)-甲酸甲酯(1.39克，2.6毫摩尔，68％)，其为黄褐色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的1∶1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.13-0.21(m，0.5H)，1.06-2.12(m，11.5H)，2.64-2.94(m，2H)，3.46(s，1.5H)，3.49(d，J＝15.0Hz，0.5H)，3.75(s，1.5H)，3.85(s，3H)，4.02(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.21(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.42(d，J＝15.0Hz，0.5H)，6.99-7.09(m，1H)，7.17-7.31(m，1H)，7.41(s，0.5H)，7.43(s，0.5H)，7.66-7.56(m，1H)，7.82(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.87(d，J＝8.8Hz，0.5H)，8.25(s，0.5H)，8.47(s，0.5H)，11.62(s，0.5H)，11.69(s，0.5H)。LCMS：m/e538(M+H)+，保留时间3.56分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体39
Figure G2008800163092D00612
5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00613
-1a(2H)-甲酸
使5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00614
-1a(2H)-甲酸甲酯(1.1毫克，2.0毫摩尔)溶于MeOH/THF(1∶1，24毫升)中，并以1M NaOH水溶液(5毫升)处理。将反应混合物搅拌并在60℃加热2小时，且冷却至室温。以1M HCl水溶液(5毫升)使透明溶液中和，及浓缩，从而除去有机溶剂。将残留物与H2O(10毫升)一起搅拌1小时，并过滤收集所得到的固体，以H2O洗涤，及在真空下干燥，得到5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00615
-1a(2H)-甲酸(1.05毫克，2.0毫摩尔，98％)，其为淡黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的1∶1混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.08-0.17(m，0.5H)，0.79-2.13(m，11.5H)，2.65-2.94(m，2H)，3.44(d，J＝14.6Hz，0.5H)，3.85(s，3H)，3.96(d，J＝14.6Hz，0.5H)，5.20(d，J＝14.6Hz，0.5H)，5.40(d，J＝14.6Hz，0.5H)，6.98-7.08(m，1H)，7.17-7.46(m，4H)，7.58(d，J＝8.1Hz，0.5H)，7.62(d，J＝8.1Hz，0.5H)，7.81(d，J＝8.8Hz，0.5H)，7.87(d，J＝8.8Hz，0.5H)，8.25(s，0.5H)，8.44(s，0.5H)，11.48-13.19(m，2H)。LCMS：m/e 524(M+H)+，保留时间3.51分钟，柱B，4分钟梯度。
除非另有说明，中间体40-44使用以下实验操作。
中间体40
Figure G2008800163092D00621
在氮气下将无水氢化钠(96毫克，4毫摩尔)加到搅拌的氯化三甲基氧化锍(567毫克，4.4毫摩尔)在无水DMSO(10毫升)中的悬浮液中。将所得到的混合物在室温搅拌30-45分钟，然后以小份分批加入纯净的烯烃(1.0，2毫摩尔)。悬浮液以DMSO(5毫升)稀释，并在50℃加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温，并加入水。对所沉淀的固体进行过滤，并以水洗涤，接着风干过夜，得到1.15克粗产物，使所述粗产物通过快速柱色谱(硅胶，3％MeOH/DCM(二氯甲烷))来纯化，得到纯的所期望环丙基化合物(0.96克)，其为灰白色固体。LC/MS：保留时间3.816分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体41
Figure G2008800163092D00622
将叔丁酯(515毫克，1毫摩尔)与TFA(三氟乙酸)(5毫升)在无水DCM(二氯甲烷)(10毫升)中的溶液在室温搅拌直至水解完成(8至12小时)。使过量的TFA和DCM蒸发至干，得到所要的酸(0.47克，100％)，其为浅褐色固体。LC/MS：保留时间2.245分钟；m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体42
Figure G2008800163092D00631
一般操作：将酸(1当量)与羰基二咪唑(1.5当量)在无水THF(四氢呋喃)中的混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续加入1当量的硫酰胺(R＝NR2)或磺酰胺(R＝烷基或芳基)与DBU(2当量)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶液处理后，使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到产物。
中间体43
Figure G2008800163092D00632
使用1N NaOH的THF-MeOH溶液来水解甲酯部分，得到相应的酸。
中间体44
Figure G2008800163092D00633
将酸衍生物(1当量)与相应的胺(RRNH，1.2当量)、三乙胺(2至3当量)和TBTU(1.3当量)在无水DMF中混合，并在室温搅拌1至2小时直至酰胺偶联完成。使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到所要的酰胺。
下述中间体45-49通过以下LC/MS方法来分析：分析条件：柱：PHENOMENNEX-LUNA 3.0×50毫米S10；流动相：(A)10∶90甲醇-水，(B)90∶10甲醇-水，缓冲剂为0.1％TFA；梯度范围：0-100％B；梯度时间：2分钟；流速：4毫升/分钟；分析时间：3分钟；检测：检测器1为UV 220纳米，检测器2为MS(ESI+)。
中间体45
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00642
-5-甲酸叔丁酯
LC/MS：保留时间3.816分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体46
Figure G2008800163092D00643
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00644
-5-甲酸
LC/MS：保留时间2.245分钟；m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体47
Figure G2008800163092D00645
(+/-)-8-环己基-5-(吗啉代磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00646
-1a-甲酸
产物通过制备性HPLC来纯化，并分离为米色固体。LC/MS：保留时间：1.968分钟；m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体48
Figure G2008800163092D00651
(+/-)-8-环己基-5-(4-甲基哌嗪-1-基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸
产物通过制备性HPLC来纯化，并分离为米色固体，其为单TFA盐形式。LC/MS：保留时间：1.687分钟；m/e 607(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体49
Figure G2008800163092D00653
(+/-)-8-环己基-5-(环丙基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00654
-1a-甲酸
LC/MS：保留时间：2.030分钟；m/e 549(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
中间体50-60通过以下LC/MS方法来分析：开始％B：0；最终％B：100；梯度时间：3分钟；停止时间：4分钟；流速：4毫升/分钟；波长：220纳米；溶剂A：10％MeOH/90％H2O/0.1％三氟乙酸；溶剂B：10％H2O/90％MeOH/0.1％三氟乙酸；柱：XBridge 4.6×50毫米S5。
中间体50
将酸(1.3g，2.83mmol)和CDI(0.64g，3.97mmol)在THF(20mL)中的混合物在50℃加热0.5小时，冷却下来，并加入甲磺酰胺(0.4g，4.2mmol)和DBU(0.264mL，1.77mmol)。将混合物搅拌20小时，以EtOAc稀释，以冷的1N HCl(2×)洗涤，以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，除去溶剂，并通过快速色谱(Biotage 40M)来纯化，得到化合物1-2(1.28g，85％)，其为浅黄色固体。LC-MS保留时间：3.51；MS m/z 537(M+H)。观察到化合物1-2以相互转化的旋转异构体的形式存在。主要异构体：1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm1.11-2.17(m，12H)，2.84-2.98(m，2H)，3.43(d，J＝14.86Hz，1H)，3.49(s，3H)，3.55(s，3H)，3.89(s，3H)，5.40(d，J＝15.11Hz，1H)，6.91-6.96(m，1H)，7.13(d，J＝2.52Hz，1H)，7.22-7.27(m，1H)，7.39(dd，J＝8.31，1.51Hz，1H)，7.85(d，J＝8.81Hz，1H)，8.23(d，J＝1.26Hz，1H)，8.75(s，1H)。
中间体51
Figure G2008800163092D00662
向酯(1.28g，2.4mmol)在THF(5mL)和MeOH(5mL)中的溶液中加入NaOH(1N，12mL，12mmol)。在室温搅拌3小时后，混合物以EtOAc稀释，以冷的1N HCl洗涤，以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空除去溶剂，得到酸，其为米色固体(1.20g，96％)。LC-MS保留时间：3.46；MS m/z 523(M+H)。观察到酸以相互转化的旋转异构体(约1/1)的形式存在。1H NMR(400MHz，氯仿-D)。
中间体52
Figure G2008800163092D00671
用于胺偶联的典型一般操作：向酸(0.060g，0.11mmol)和含有仲胺基团/叔胺基团的二胺二盐酸盐(0.034g，0.17mmol)在DMC(1.5mL)中的混合物中加入Et3N(三乙胺)(0.096mL，0.69mmol)和HBTU(0.065g，0.17mmol)。将混合物在室温搅拌0.5小时，用MeOH稀释，除去溶剂。将残留物溶于甲醇中，过滤，并通过制备性HPLC来纯化，得到胺1的TFA盐(0.0378g，82％)，其为TFA盐，所述TFA盐通过LC-MS和1H NMR来表征。
中间体53
Figure G2008800163092D00672
产物由酸制得(0.47g，44％)。LC-MS保留时间：3.54分钟；MS m/z551(M+H)。
中间体54
Figure G2008800163092D00673
制得产物(0.43g，94％)。LC-MS保留时间：3.49分钟；MS m/z 537(M+H)。
中间体55
Figure G2008800163092D00681
产物由酸制得(0.96g，59％)。LC-MS保留时间：3.58；MS m/z 578(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体(3/4)的形式存在。主要异构体：1HNMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.16-1.59(m，4H)，1.72(dd，J＝9.44，4.15Hz，3H)，1.88-2.12(m，4H)，2.24-2.36(m，2H)，2.75-2.97(m，2H)，3.44(d，J＝14.86Hz，1H)，3.56(s，3H)，3.89(s，3H)，4.09(d，1H)，4.24-4.37(m，4H)，5.41(d，J＝14.86Hz，1H)，6.92-6.96(m，1H)，7.13(d，J＝2.01Hz，1H)，7.24-7.30(m，1H)，7.39(dd，J＝8.31，1.51Hz，1H)，7.84-7.88(m，1H)，8.24(d，J＝1.51Hz，1H)。
中间体56
Figure G2008800163092D00682
制得产物(0.93g，100％)。LC-MS保留时间：3.51；MS m/z 564(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体(约3/4)的形式存在。主要异构体：1HNMR(400MHz)δppm 0.34-0.42(m，1H)，1.15-2.10(m，11H)，2.22-2.38(m，2H)，2.65-2.78(m，1H)，2.84-2.94(m，J＝3.02Hz，1H)，3.84(s，3H)，4.03(d，J＝15.11Hz，1H)，4.21-4.43(m，4H)，5.34(d，J＝14.86Hz，1H)，6.87(dd，J＝8.56，2.77Hz，1H)，6.98(d，J＝2.52Hz，1H)，7.21(d，J＝8.31Hz，1H)，7.69-7.75(m，1H)，7.86-7.90(m，1H)，8.13(s，1H)。
中间体57
产物由酸制得(0.109g，67％)。LC-MS保留时间：3.60；MS m/z 580(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体(约5/4)的形式存在。主要异构体：1HNMR(400MHz)δppm 1.16-2.09(m，14H)，2.73-2.93(m，2H)，3.07(s，3H)，3.31-3.52(m，3H)，3.76(s，3H)，3.88(s，3H)，4.05-4.10(m，1H)，5.40(d，J＝15.11Hz，1H)，6.88-6.93(m，1H)，7.13(d，J＝2.27Hz，1H)，7.22-7.29(m，1H)，7.33-7.42(m，1H)，7.82-7.86(m，1H)，8.19(d，J＝1.51Hz，1H)。
中间体58
Figure G2008800163092D00692
制得产物(0.108g，100％)。LC-MS保留时间：3.55；MS m/z 566(M+H)。
中间体59
Figure G2008800163092D00693
产物由酸制得(0.127g，67％)。LC-MS保留时间：3.64；MS m/z 594(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1H NMR(400MHz)ppm1.11-2.13(m，18H)，2.64(dd，J＝10.07，6.80Hz，1H)，2.84-2.96(m，1H)，3.34-3.67(m，4H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，4.03-4.10(m，1H)，5.40(d，J＝15.36Hz，1H)，6.90-6.95(m，1H)，7.13(d，J＝2.01Hz，1H)，7.21-7.29(m，1H)，7.33-7.39(m，1H)，7.83(d，J＝8.06Hz，1H)，8.20(d，J＝1.26Hz，1H)。
中间体60
Figure G2008800163092D00701
制得产物(0.126g，100％)。LC-MS保留时间：3.57分钟；MS m/z580(M+H)。
实施例1
Figure G2008800163092D00702
N-(氨基磺酰基)-1a-((5-苄基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00703
-5-甲酰胺
向搅拌的5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00704
-1a(2H)-甲酸(200mg，0.38mmol)和2-苄基八氢吡咯并[3，4-c]吡咯(100mg，0.50mmol)在DMF(4mL)中的溶液中加入HATU(190mg，0.5mmol)和三乙胺(0.21mL)。将反应混合物在室温搅拌1小时，用H2O(15mL)和1M HCl(水溶液)(1.6mL)稀释，并过滤收集沉淀物。将固体溶于MeOH/DMF中，过滤，并通过制备性HPLC(H2O/CH3CN(含有10mMNH4OAc(乙酸铵)缓冲液))来纯化，得到N-(氨基磺酰基)-1a-((5-苄基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00705
-5-甲酰胺(196mg，0.28mmol，72％)，其为白色固体。以旋转异构体或阻转异构体的约1∶3混合物的形式呈现。1HNMR(300MHz，CD3OD)δ0.12-0.21(m，0.25H)，1.03-2.21(m，13.75H)，2.41-3.15(m，9H)，3.25-3.31(m，1H)，3.61(d，J＝15.0Hz，0.75H)，3.55-3.72(m，2H)，3.88(s，0.75H)，3.90(s，2.25H)，4.12(d，J＝15.0Hz，0.25H)，4.79(d，J＝15.0Hz，0.25H)，5.13(d，J＝15.0Hz，0.75H)，6.98(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.25H)，7.02(dd，J＝8.8，2.6Hz，0.75H)，7.20(d，J＝2.6Hz，0.75H)，7.30(d，J＝8.4Hz，0.25H)，7.32(d，J＝8.8Hz，0.75H)，7.34-7.44(m，5.25H)，7.63(d，J＝8.4Hz，0.75H)，7.65(d，J＝8.4Hz，0.25H)，7.86(d，J＝8.4Hz，0.75H)，7.87(d，J＝8.4Hz，0.25H)，7.99(s，0.75H)，8.11(s，0.25H)。LCMS：m/e 708(M+H)+，保留时间2.97分钟，柱B，4分钟梯度。
实施例2
N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00712
-5-甲酰胺
向N-(氨基磺酰基)-1a-((5-苄基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00713
-5-甲酰胺(175mg，0.25mmol)在MeOH/CH2Cl2(4∶1，50mL)中的溶液中加入10％Pd/C(130mg，0.12mmol)。用氮气(3×)真空冲洗反应溶液，然后用氢气(3×)真空冲洗，并在帕尔(Parr)振荡器上在50psi(磅/平方英寸)的氢气下振荡7小时。使溶液过滤通过硅藻土，并浓缩，得到N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00714
-5-甲酰胺(125mg，0.20mmol，80％)，其为白色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。以旋转异构体或阻转异构体的约2∶3混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ-0.02-0.05(m，0.4H)，0.79-2.29(m，9.6H)，2.45-3.77(m，12H)，3.85(s，1.8H)，3.87(s，1.8H)，3.98-4.18(m，3H)，4.91(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.18(d，J＝15.0Hz，0.6H)，7.02(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.4H)，7.05(dd，J＝8.8，2.6Hz，0.6H)，7.13(d，J＝2.6Hz，0.6H)，7.23(d，J＝2.6Hz，0.4H)，7.28(d，J＝8.4Hz，1H)，7.60-7.70(m，1H)，7.79-7.89(m，1H)8.16(s，0.6H)，8.33(s，0.4H)。LCMS：m/e 616(M-H)-，保留时间2.06分钟，柱A，4分钟梯度。
实施例3
Figure G2008800163092D00721
1a-(((4aS，7aS)-6-苄基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺
向搅拌的8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(32mg，0.061mmol)、(4aS，7aS)-6-乙基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶(30mg，0.10mmol)和三乙胺(0.05mL)在DMF(0.5mL)中的溶液中加入HATU(30mg，0.08mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，以MeOH(1毫升)稀释反应混合物，过滤，并通过制备性HPLC(H2O/CH3CN(含有10mM NH4OAc缓冲液))来纯化，得到1a-(((4aS，7aS)-6-苄基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00724
-5-甲酰胺(29mg，0.04mmol，64％)，其为淡黄色固体。非对映异构体的复合混合物(complex mixture)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.93-2.69(m，23H)，2.88-3.05(m，2H)，3.07-3.25(m，2H)，3.29-3.68(m，3H)，3.87-3.92(m，3H)，4.09-4.53(m，3H)，4.69-4.84(m，1H)，5.03-5.15(m，1H)，7.15-7.20(m，1H)，7.27-7.36(m，1H)，7.38-7.53(m，5H)，7.65-7.90(m，2H)，8.03-8.16(m，1H)。LCMS：m/e 747(M+H)+，保留时间3.25分钟，柱B，4分钟梯度。
实施例4
Figure G2008800163092D00731
外消旋-N-(氨基磺酰基)-1a-(((4aR，7aR)-6-苄基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00732
-5-甲酰胺
向搅拌的5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00733
-1a(2H)-甲酸(32mg，0.058mmol)、(4aS，7aS)-6-乙基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶(30mg，0.10mmol)和三乙胺(0.05mL)在DMF(0.5mL)中的溶液中加入HATU(30mg，0.08mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，以MeOH(1毫升)稀释反应混合物，过滤，并通过制备性HPLC(H2O/CH3CN(含有10mM NH4OAc缓冲液))来纯化，得到外消旋-N-(氨基磺酰基)-1a-(((4aR，7aR)-6-苄基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00734
-5-甲酰胺(20mg，0.03mmol，48％)，其为淡黄色固体。非对映异构体的复合混合物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ1.16-3.69(m，25H)，3.86-3.94(m，3H)，4.05-5.09(m，5H)，6.97-7.07(m，1H)，7.13-7.21(m，1H)，7.26-7.36(m，5H)，7.62-7.73(m，1H)，7.77-7.90(m，1H)，7.97-8.10(m，1H)。LCMS：m/e 722(M+H)+，保留时间3.06分钟，柱B，4分钟梯度。
实施例5
Figure G2008800163092D00735
N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-((5-(环丙基羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺
向搅拌的N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00742
-5-甲酰胺(28mg，0.045mmol)、环丙基甲酸(30mg，0.34mmol)和三乙胺(0.05mL)在DMF(0.5mL)中的溶液中加入HATU(30mg，0.08mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时，以MeOH(1毫升)稀释反应混合物，过滤，并通过制备性HPLC(H2O/CH3CN(含有10mM NH4OAc缓冲液))来纯化，得到N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-((5-(环丙基羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00743
-5-甲酰胺(20mg，0.03mmol，65％)，其为白色固体。以旋转异构体和/或阻转异构体的复合混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.13-0.22(m，0.15H)，0.75-2.28(m，15.85H)，2.50-3.86(m，13.85H)，3.88-3.94(m，3H)，4.17-4.26(m，0.15H)，4.83-4.92(m，0.15H)，5.10-5.23(m，0.85H)，6.97-7.07(m，1H)，7.18-7.24(m，1H)，7.34(d，J＝8.8Hz，1H)，7.52-7.68(m，1H)，7.85-7.94(m，1H)，7.95-8.03(m，0.85H)，8.12-8.19(m，0.15H)。LCMS：m/e 684(M-H)-，保留时间2.30分钟，柱A，4分钟梯度。
实施例6
Figure G2008800163092D00744
N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-((5-(二甲基氨甲酰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00745
-5-甲酰胺
向搅拌的N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00746
-5-甲酰胺(29mg，0.047mmol)和二甲基氨甲酰氯(100mg，0.80mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中加入三乙胺(0.1mL)。将反应混合物在室温搅拌1小时，并浓缩至干。将残余物溶于MeOH(1.5mL)中，过滤，并通过制备性HPLC(H2O/CH3CN(含有10mM NH4OAc缓冲液))来纯化，得到N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1a-((5-(二甲基氨甲酰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00751
-5-甲酰胺(24mg，0.03mmol，74％)，其为白色固体。以旋转异构体和/或阻转异构体的复合混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.16-0.23(m，0.2H)，1.06-3.82(m，30.6H)，3.87-3.93(m，3H)，4.20(d，J＝15.0Hz，0.2H)，4.82-4.90(m，0.2H)，5.07-5.20(m，0.8H)，6.95-7.06(m，1H)，7.16-7.26(m，1H)，7.29-7.36(m，1H)，7.58-7.70(m，1H)，7.84-7.93(m，1H)7.95-8.06(m，0.8H)，8.17(s，0.2H)。LCMS：m/e 687(M-H)-，保留时间2.26分钟，柱A，4分钟梯度。
实施例7
Figure G2008800163092D00752
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00753
-5-甲酰胺
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(180mg，0.33mmol)和八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(90mg，0.40mmol)在DMF(3mL)和TEA(0.2mL)中的溶液中加入固体形式的HATU(162mg，0.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时，然后用HCl水溶液(1.0N，1.4mL)和H2O(5mL)稀释，同时搅拌。过滤收集灰白色沉淀物，用H2O洗涤，并干燥，得到粗制中间体，其为黄色固体。将粗制中间体(300mg)溶于CH2Cl2(3mL)和TFA(1mL)中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。真空蒸发挥发性有机溶剂，并且黄色残留物通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00755
-5-甲酰胺(205mg，0.31mmol，94％)，其为亮黄色固体。以旋转异构体或阻转异构体的1∶2混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.04-8.28(m，0.33H)，7.82-8.02(m，1.67H)，7.51-7.66(m，1H)，7.28-7.40(m，1H)，7.20(s，1H)，6.95-7.09(m，1H)，5.06-5.24(m，0.67H)，4.87-5.02(m，0.33H)，3.91(s，3H)，3.02(s，6H)，2.45-4.40(m，11H)，1.05-2.40(m，16.67H)，0.06-0.32(m，0.33H)。LCMS：m/e 660(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.91分钟。
实施例8
Figure G2008800163092D00761
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((1-甲基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00762
-5-甲酰胺
向8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00763
-5-甲酰胺(50mg，0.076mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入甲醛(浓度为37％的水溶液，0.03mL)，接着加入氰基硼氢化钠(sodiumcyanotrihydroborate)(24mg，0.38mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，用DMF和MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((1-甲基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00764
-5-甲酰胺(43mg，0.064mmol，84％)，其为亮黄色固体。1HNMR(300MHz，MeOD)δppm 8.05-8.30(m，0.25H)，7.83-8.04(m，1.75H)，7.53-7.66(m，1H)，7.29-7.39(m，J＝8.42Hz，1H)，7.20(s，1H)，6.96-7.09(m，1H)，5.04-5.27(m，0.75H)，4.86-5.03(m，0.25H)，3.91(s，3H)，3.03(s，6H)，2.47-4.32(m，13H)，0.96-2.43(m，16.75H)，0.03-0.31(m，0.25H)。LCMS：m/e 674(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.89分钟。
实施例9
Figure G2008800163092D00771
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((1-(甲基氨甲酰基)八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00772
-5-甲酰胺
向8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00773
-5-甲酰胺(50mg，0.076mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中加入异氰酸甲酯(isocyanatomethane)(13mg，0.23mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时，并浓缩至干。将残余物溶于DMF和MeOH中，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((1-(甲基氨甲酰基)八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(20mg，0.028mmol，37％)，其为黄色固体。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm8.11-8.16(m，0.2H)，7.85-8.00(m，1.8H)，7.53-7.66(m，J＝8.4，1.5Hz，1H)，7.27-7.38(m，1H)，7.18-7.24(m，J＝2.6Hz，1H)，7.06-6.96(m，J＝8.4，2.6Hz，1H)，5.20(d，J＝15.0Hz，0.8H)，4.75-4.92(m，0.2H)，4.34-4.53(m，0.8H)，4.17(d，J＝15.0Hz，0.2H)，3.91(s，3H)，3.02(s，6H)，2.79-3.86(m，8H)，2.77(s，1H)，2.68(s，2H)，2.35-2.50(m，0.5H)，0.98-2.33(m，16.5H)，0.54-0.67(m，0.5H)，-0.64至-0.47(m，0.5H)。LCMS：m/e 717(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间2.15分钟。
实施例10
Figure G2008800163092D00775
1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00781
-5-甲酰胺
向8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(40mg，0.061mmol)和冰醋酸(37mg，0.62mmol)在DMF(1mL)和TEA(0.13mL)中的溶液中加入HATU(116mg，0.31mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时，用DMF和MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到两组产物：外消旋体对A(第一洗脱产物)即1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00783
-5-甲酰胺(13mg，0.018mmol，30％)，其为黄色固体。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 7.86-8.15(m，2H)，7.55-7.72(m，J＝8.4，1.5Hz，1H)，7.29-7.38(m，J＝8.4，1H)，7.17-7.26(m，1H)，6.98-7.08(m，J＝8.4Hz，1H)，5.09-5.22(m，J＝15.4Hz，1H)，4.65-4.79(m，0.6H)，4.22-4.36(m，0.4H)，3.91(s，3H)，3.03(s，6H)，2.80-4.17(m，8H)，1.96(s，1.2H)，1.95(s，1.8H)，0.95-2.27(m，17.4H)，-0.24至-0.04(m，0.6H)。LCMS：m/e 702(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间2.08分钟。外消旋体对B(第二洗脱产物)即1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(16mg，0.023mmol，38％)，其为黄色固体。LCMS：m/e 702(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间2.14分钟。
实施例11
Figure G2008800163092D00785
外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-((3aR，6aS)-六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00791
-5-甲酰胺
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00792
-1a(2H)-甲酸(180mg，0.33mmol)和2-苄基八氢吡咯并[3，4-c]吡咯(80mg，0.40mmol)在DMF(3mL)和TEA(0.2mL)中的溶液中加入固体形式的HATU(162mg，0.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时，然后在搅拌下加入HCl水溶液(1.0N，1.4mL)和H2O(5mL)。所得到的灰白色沉淀物通过过滤来收集，用H2O洗涤，并干燥，得到粗制中间体，其为黄色固体。将粗制中间体(296mg)溶于MeOH/EtOAc/95％EtOH中，并向该溶液中加入10％Pd-C(催化用)。在室温将混合物在H2(50psi)下剧烈搅拌1天，然后过滤通过硅藻土。浓缩滤液，通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-((3aR，6aS)-六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00793
-5-甲酰胺(163mg，0.25mmol，77％)，其为亮黄色固体。以旋转异构体或阻转异构体的2∶7混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.12(br s，0.22H)，7.99(br s，0.78H)，7.93(d，J＝8.4Hz，0.78H)，7.91(d，J＝8.4Hz，0.22H)，7.62(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.22H)，7.60(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.78H)，7.33(d，J＝8.4Hz，0.78H)，7.32(d，J＝8.4Hz，0.22H)，7.17-7.22(m，1H)，7.03(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.78H)，7.00(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.22H)，5.15(d，J＝15.4Hz，0.78H)，4.84-4.90(m，0.22H)，4.20(d，J＝15.4Hz，0.22H)，3.92(s，0.66H)3.90(s，2.34H)，3.62(d，J＝15.4Hz，0.78H)，3.03(s，6H)，2.51-4.03(m，12H)，1.06-2.21(m，11.78H)，0.13-0.19(m，0.22H)。LCMS：m/e646(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.88分钟。
实施例12
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((5-甲基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00801
-5-甲酰胺
向外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-((3aR，6aS)-六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00802
-5-甲酰胺(40mg，0.062mmol)在MeOH(1mL)和甲醛(浓度为37％的水溶液，0.03mL)中的溶液中加入氰基硼氢化钠(24mg，0.38mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，用DMF和MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((5-甲基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(34mg，0.052mmol，83％)，其为亮黄色固体。以旋转异构体或阻转异构体的1∶4混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 7.85-8.20(m，2H)，7.61(br d，J＝8.4Hz，1H)，7.27-7.38(m，1H)，7.13-7.23(m，1H)，6.95-7.08(m，1H)，5.18(d，J＝15.0Hz，0.8H)，4.93(d，J＝15.0Hz，0.2H)，4.21(d，J＝15.4Hz，0.2H)，3.92(s，0.6H)，3.91(s，2.4H)，3.66(d，J＝15.4Hz，0.8H)，3.04(s，1.2H)，3.03(s，4.8H)，2.46-4.20(m，15H)，1.04-2.25(m，11.8H)，0.15-0.25(m，0.2H)。LCMS：m/e660(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.86分钟。
实施例13
Figure G2008800163092D00804
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((5-(吡咯烷-1-基羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺
向外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-((3aR，6aS)-六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00811
-5-甲酰胺(40mg，0.062mmol)在THF(1mL)中的溶液中滴加吡咯烷-1-甲酰氯(0.02mL)，接着加入TEA(0.04mL)。将反应混合物在室温搅拌16小时，用DMF和MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((5-(吡咯烷-1-基羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00812
-5-甲酰胺(31mg，0.042mmol，67％)，其为黄色固体。以旋转异构体或阻转异构体的1∶4混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.14(s，0.2H)，7.84-8.03(m，1.8H)，7.51-7.65(m，1H)，7.33(d，J＝8.8Hz，1H)，7.20(d，J＝2.6Hz，0.8H)，7.19(d，J＝2.6Hz，0.2H)，7.03(dd，J＝8.8，2.6Hz，0.8H)，6.99(dd，J＝8.8，2.6Hz，0.2H)，5.13(d，J＝15.4Hz，0.8H)，4.80-4.91(m，0.2H)，4.22(d，J＝15.0Hz，0.2H)，4.00(s，1.6H)，3.91(s，0.6H)，3.90(s，2.4H)，3.02(s，1.2H)，3.01(s，4.8H)，1.70-3.83(m，25.2H)，1.08-1.64(m，5.8H)，0.10-0.18(m，0.2H)。LCMS：m/e 743(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间2.19分钟。
实施例14
Figure G2008800163092D00813
外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((4aR，7aR)-八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00815
-1a(2H)-甲酸(180mg，0.33mmol)和外消旋-(4aS，7aS)-6-苄基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶二盐酸盐(114mg，0.40mmol)在DMF(3mL)和TEA(0.2mL)中的溶液中加入HATU(162mg，0.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，然后在搅拌下加入HCl水溶液(1.0N，1.3mL)和H2O(5mL)。沉淀物通过过滤来收集，用H2O洗涤，并干燥，得到粗制中间体，其为橙色固体。将该粗制中间体(270mg)溶于MeOH/EtOAc/95％EtOH中，并向该溶液中加入10％Pd-C(催化用)。在室温将混合物在H2(50psi)下剧烈搅拌16小时，然后过虑通过硅藻土。浓缩滤液，并且残余物通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((4aR，7aR)-八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00821
-5-甲酰胺(142mg，0.22mmol，66％)，其为亮黄色固体。以旋转异构体或阻转异构体的1∶4混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 7.85-8.12(m，2H)，7.52-7.65(m，1H)，7.30-7.38(m，1H)，7.16-7.23(m，1H)，6.99-7.08(m，1H)，3.92(s，0.6H)，3.89-3.92(m，2.4H)，3.04(s，2H)，3.03(s，4H)，2.40-5.18(m，12H)，0.98-2.25(m，15.8H)，0.15-0.27(m，0.2H)。LCMS：m/e 660(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.92分钟。
实施例15
Figure G2008800163092D00822
外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(((4aR，7aR)-6-甲基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00823
-5-甲酰胺
向外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((4aR，7aR)-八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00824
-5-甲酰胺(40mg，0.061mmol)和甲醛(浓度为37％的水溶液，0.03mL)在MeOH(1mL)中的溶液中加入氰基硼氢化钠(24mg，0.38mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，用DMF和MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(((4aR，7aR)-6-甲基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00831
-5-甲酰胺(36mg，0.053mmol，88％)，其为亮黄色固体。以旋转异构体或阻转异构体的1∶9混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm7.84-8.12(m，2H)，7.51-7.65(m，1H)，7.29-7.40(m，1H)，7.16-7.23(m，1H)，6.99-7.09(m，1H)，3.89-3.93(m，3H)，3.02-3.06(m，6H)，2.23-5.33(m，15H)，1.01-2.22(m，15.9H)，0.15-0.26(m，0.1H)。LCMS：m/e 674(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.92分钟。
实施例16
Figure G2008800163092D00832
13-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-3-甲氧基-6-((4aS，7aS)-八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00833
-10-甲酰胺
向13-环己基-10-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00834
-6-甲酸(178mg，0.33mmol)和(4aS，7aS)-6-苄基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶二盐酸盐(114mg，0.40mmol)在DMF(3mL)和TEA(0.2mL)中的溶液中加入HATU(162mg，0.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时，然后在搅拌下加入HCl水溶液(1.0N，1.3mL)和H2O(5mL)。所得到的沉淀物通过过滤来收集，用H2O洗涤，并干燥，得到粗制中间体，其为橙色固体。将该粗制中间体(260mg)溶于MeOH/EtOAc/95％EtOH中，并向该溶液中加入10％Pd-C(催化用)。在室温将混合物在H2(50psi)下剧烈搅拌16小时，然后过虑通过硅藻土。浓缩滤液，并且残余物通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到13-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-3-甲氧基-6-((4aS，7aS)-八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酰胺(129mg，0.20mmol，61％)，其为黄色固体。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.11(s，1H)，7.93(d，J＝8.8Hz，1H)，7.59(dd，J＝8.4，1.5Hz，1H)，7.58(d，J＝8.8Hz，1H)，7.18(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)，7.03-7.11(m，1H)，6.91-7.00(m，1H)，4.99-5.22(m，1H)，4.24-4.54(m，1H)，3.93(s，3H)，3.03(s，6H)，2.75-4.02(m，8H)，1.12-2.47(m，16H)。LCMS：m/e 646(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间1.93分钟。
实施例17
Figure G2008800163092D00841
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基))-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00842
-5-甲酰胺
产物的TFA盐以与在1-1中所述类似的方法由酸7-1(0.062g，0.11mmol)制得(0.063g，73％)。LC-MS保留时间：3.05；MS m/z 657(M+H)。产物通过以下LC/MS方法来分析：开始％B：0；最终％B：100；梯度时间：3分钟；停止时间：4分钟；流速：4毫升/分钟；波长：220；溶剂A：10％MeOH/90％H2O/0.1％三氟乙酸；溶剂B：10％H2O/90％MeOH/0.1％三氟乙酸；柱：XBridge 4.6×50毫米S5。
除非另有说明，以下一般操作属于以下实验操作。使酸(0.055毫摩尔，1当量)溶于无水DMF中，接着加入HATU(0.083毫摩尔，1.5当量)与DIPEA(0.083毫摩尔，1.5当量)。将溶液搅拌2分钟，并在室温加到预称重的胺(0.083毫摩尔，1.5当量)中。将混合物搅拌14小时，并通过制备性HPLC来纯化。HPLC梯度方法：方法A：柱：Agilent SB CN 4.6×100毫米3.5微米；流动相：水-10mM NH4OH-ACN(乙腈)；方法B：柱：Phenomenex Gemini4.6×100毫米5微米C18；流动相：水-10mM NH4OH-ACN；方法C：柱：Waters x-Bidge C18150×4.6毫米5微米；流动相：水-10mM NH4OH-ACN；方法D：柱：Waters Xbridge 2.1×50毫米5微米C18；流动相：水-10mMNH4OH-ACN。
Figure G2008800163092D00851
Figure G2008800163092D00861
Figure G2008800163092D00871
Figure G2008800163092D00882
5-((8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00883
-1a(2H)-基)羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯
将HATU(270mg，0.71mmol)加到搅拌的8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00884
-1a(2H)-甲酸(300mg，0.55mmol)和六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(140mg，0.66mmol)在DMF(5mL)和TEA(0.3mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌1小时。向反应混合物中加入H2O(10mL)，并过滤收集所得到的白色沉淀物，用水冲洗，并干燥，得到粗制黄色固体(476mg)。向该粗制物质在甲醇中的澄清溶液中滴加H2O，并过滤收集所得到的白色沉淀物，用1∶1MeOH/H2O冲洗，干燥，得到5-((8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00885
-1a(2H)-基)羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(212mg，0.29mmol，52％)，其为白色固体。将所述化合物分离为对映异构体的混合物，并以旋转异构体或阻转异构体的1∶4混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)ppm δ8.15-8.08(m，0.2H)，8.00-7.82(m，1.8H)，7.69-7.51(m，1H)，7.33(d，J＝8.8Hz，1H)，7.23-7.16(m，1H)，7.07-6.97(m，1H)，5.11(d，J＝15.4Hz，0.8H)，4.25-4.14(m，0.2H)，3.92(s，0.6H)，3.90(s，2.4H)，3.81-0.73(m，38.8H)，0.17-0.06(m，0.2H)。LCMS：m/e＝743(M+H)+，保留时间＝2.24分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2分钟，保持时间＝1分钟，流速＝5毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00891
6-((8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00892
-1a(2H)-基)羰基)八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯
将HATU(180mg，0.47mmol)加到搅拌的8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00893
-1a(2H)-甲酸(200mg，0.36mmol)和八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.44mmol)在DMF(4mL)和TEA(0.2mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌1小时。向混合物中加入H2O(10mL)，并过滤收集所得到的白色沉淀物，用水冲洗，并干燥，得到粗制黄色固体(285mg)。然后将该粗制品以1∶1MeOH/H2O研磨，并干燥，得到6-((8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00894
-1a(2H)-基)羰基)八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(257mg，0.34mmol，95％)，其为白色固体。将所述化合物分离为4种立体异构体的混合物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.16-7.84(m，2H)，7.70-7.52(m，1H)，7.36-7.25(m，1H)，7.25-7.14(m，1H)，7.06-6.93(m，1H)，5.28-5.04(m，0.8H)，4.56-4.25(m，1H)，4.09-3.94(m，0.2H)，3.91(s，3H)，3.83-2.70(m，7H)，2.43-0.54(m，32.8H)，-0.17至-0.37(m，0.2H)。LCMS：m/e＝757(M+H)+，保留时间＝2.28分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2分钟，保持时间＝1分钟，流速＝5毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00901
8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00902
-5-甲酰胺
将TFA(1.0mL，13mmol)加到搅拌的6-((8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00903
-1a(2H)-基)羰基)八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯87(231mg，0.305mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩，并且残留物以乙醚研磨，得到粗制8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00904
-5-甲酰胺·TFA(257mg)，其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。一部分该粗制产物(16mg，6.2％)通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到产物8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00905
-5-甲酰胺(11.7mg，0.018mmol，95％)，其为白色固体。将所述化合物分离为4种立体异构体的混合物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.24(s，0.1H)，8.12(s，0.2H)，8.04-7.86(m，1.7H)，7.68-7.53(m，1H)，7.40-7.29(m，1H)，7.21(s，1H)，7.10-6.96(m，1H)，5.23-4.82(m，1H)，4.44-2.46(m，12H)，3.92，3.91(s，s，3H)，2.43-1.03(m，20.7H)，0.85-0.67(m，0.1H)，0.33-0.11(m，0.2H)。LCMS：m/e＝657(M+H)+，保留时间＝3.38分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00911
8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00912
-5-甲酰胺
将TFA(1.0mL，13mmol)加到搅拌的5-((8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00913
-1a(2H)-基)羰基)六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(203mg，0.273mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并且残留物以乙醚研磨，得到粗制8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00914
-5-甲酰胺·TFA(240mg，0.373mmol)，其为黄色固体，所述固体无需进一步纯化即使用。一部分粗制品(26mg，11％)通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00915
-5-甲酰胺(13.9mg，0.022mmol，74％)，其为白色固体。将所述化合物分离为对映异构体的混合物，并以旋转异构体或阻转异构体的1∶4混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.16-8.11(m，0.2H)，8.01(br s，0.8H)，7.96-7.87(m，1H)，7.65-7.55(m，1H)，7.37-7.28(m，1H)，7.22-7.16(m，1H)，7.07-6.97(m，1H)，5.16(d，J＝15.4Hz，0.8H)，4.25-4.16(m，0.2H)，4.01-2.47(m，14H)，3.92(s，0.6H)，3.91(s，2.4H)，2.23-1.06(m，16.8H)，0.22-0.10(m，0.2H)。LCMS：m/e＝643(M+H)+，保留时间＝3.30分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00921
8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-((1-甲基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00922
-5-甲酰胺
将氰基硼氢化钠(19.13mg，0.304mmol)加到搅拌的8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00923
-5-甲酰胺(40mg，0.061mmol)和甲醛(0.025mL，0.30mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用MeOH和DMF稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到产物8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-((1-甲基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00924
-5-甲酰胺(21.8mg，0.032mmol，产率53％)，其为灰白色固体。将所述化合物分离为4种立体异构体的混合物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.29-8.04(m，0.3H)，8.04-7.85(m，1.7H)，7.66-7.54(m，1H)，7.38-7.27(m，1H)，7.20(d，J＝2.2Hz，1H)，7.08-6.97(m，1H)，5.23-5.07(m，0.7H)，4.99-4.83(m，0.3H)，4.45-2.46(m，15H)，3.91(s，3H)，2.25-0.98(m，19.7H)，0.31-0.05(m，0.3H)。LCMS：m/e＝671(M+H)+，保留时间＝3.37分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00931
8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-((5-甲基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00932
-5-甲酰胺
将氰基硼氢化钠(20mg，0.31mmol)加到搅拌的8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00933
-5-甲酰胺(40mg，0.062mmol)和甲醛(0.023mL，0.31mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用MeOH和DMF稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-((5-甲基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00934
-5-甲酰胺(23.9mg，0.036mmol，产率59％)，其为灰白色固体。将所述化合物分离为对映异构体的混合物，并以旋转异构体或阻转异构体的1∶4混合物的形式呈现。1HNMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.09-8.22(m，0.2H)，8.01(s，0.8H)，7.87-7.99(m，1H)，7.62(d，J＝8.78Hz，1H)，7.37-7.28(m，1H)，7.23-7.17(m，1H)，7.07-6.96(m，1H)，5.15(d，J＝15.37Hz，0.8H)，4.97-4.82(m，0.2H)，4.24-2.44(m，17H)，3.92，3.90(s，s，3H)，2.21-1.01(m，15.8H)，0.23-0.12(m，0.2H)。LCMS：m/e＝657(M+H)+，保留时间＝3.31分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00941
1a-((5-乙酰基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-N-(二甲基氨磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00942
-5-甲酰胺
将HATU(46mg，0.12mmol)加到搅拌的外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-((3aR，6aS)-六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00943
-5-甲酰胺(60mg，0.093mmol)和乙酸(7μl，0.1mmol)在DMF(1mL)和TEA(0.05mL，0.4mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到1a-((5-乙酰基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-N-(二甲基氨磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(45mg，0.065mmol，产率70％)，其为白色固体。将所述化合物分离为对映异构体的混合物，并以旋转异构体或阻转异构体的约1∶6混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.10(s，0.15H)，8.00-7.84(m，1.85H)，7.63-7.53(m，1H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.23-7.15(m，1H)，7.05-6.95(m，1H)，5.19-5.04(m，0.85H)，4.92-4.74(m，0.15H)，4.29-2.46(m，12H)，3.91(s，0.45H)，3.90(s，2.55H)，3.01(s，6H)，2.24-1.06(m，15.85H)，0.18至-0.05(m，0.15H)。LCMS：m/e＝688(M+H)+，保留时间＝2.05分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2分钟，保持时间1分钟，流速＝5毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00951
1a-((5-乙酰基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00952
-5-甲酰胺
将HATU(54mg，0.14mmol)加到搅拌的8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1a-(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00953
-5-甲酰胺(70mg，0.11mmol)和乙酸(8.0μl，0.14mmol)在DMF(1mL)和TEA(0.06mL，0.4mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到产物1a-((5-乙酰基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1H)-基)羰基)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(49.5mg，0.072mmol，产率66％)，其为白色固体。将所述化合物分离为对映异构体的混合物，并以旋转异构体或阻转异构体的1∶6混合物的形式呈现。1HNMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.11(s，0.15H)，7.96(s，0.85H)，7.94-7.84(m，1H)，7.64-7.54(m，1H)，7.35-7.21(m，1H)，7.23-7.17(m，1H)，7.07-6.96(m，1H)，5.11(dd，J＝15.0，5.9Hz，0.85H)，4.90-4.75(m，0.15H)，4.25-2.42(m，12H)，3.91(s，0.45H)，3.90(s，2.55H)，2.27-1.06(m，20.85H)，0.18-0.07(m，0.15H)。LCMS：m/e＝685(M+H)+，保留时间＝2.05分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2分钟，保持时间＝1分钟，流速＝5毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00961
1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00962
-5-甲酰胺
将HATU(53mg，0.14mmol)加到搅拌的8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00963
-5-甲酰胺(70mg，0.11mmol)和乙酸(8μl，0.14mmol)在DMF(1mL)和TEA(0.06mL，0.4mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺的第一洗脱外消旋非对映异构体(17.5mg，0.025mmol，产率24％)(其为淡黄色固体)和第二洗脱外消旋非对映异构体(24.5mg，0.035mmol，产率33％)(其为淡黄色固体)。第一洗脱外消旋非对映异构体：以旋转异构体或阻转异构体的约1∶5混合物的形式呈现。1HNMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.10(s，0.84H)，8.05-7.83(m，1.16H)，7.73-7.51(m，1H)，7.37-7.27(m，1H)，7.25-7.15(m，1H)，7.07-3.95(m，1H)，5.22-5.01(m，1H)，4.82-4.61(m，0.84H)，4.37-3.97(m，1.16H)，3.92(s，0.48H)，3.91(s，2.52H)，3.84-2.77(m，7H)，2.30-0.93(m，25.16H)，0.25至-0.26(m，0.84H)。LCMS：m/e＝699(M+H)+，保留时间＝3.72分钟(柱：phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，波长＝220纳米，流速＝4毫升/分钟，梯度时间＝4分钟，开始％B＝0，最终％B＝100，停止时间＝5分钟)。第二洗脱外消旋非对映异构体：以旋转异构体或阻转异构体的约1∶5混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.15-8.09(m，0.15H)，8.02-7.85(m，1.85H)，7.67-7.53(m，1H)，7.37-7.26(m，1H)，7.24-7.16(m，1H)，7.07-6.95(m，1H)，5.19(d，J＝15.00Hz，0.85H)，4.79-3.97(m，1.15H)，3.91(s，3H)，3.86-2.52(m，9H)，2.46至-0.67(m，25H)。LCMS：m/e＝699(M+H)+，保留时间＝3.85分钟(柱：phenomenex4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，波长＝220纳米，流速＝4毫升/分钟，梯度时间＝4分钟，开始％B＝0，最终％B＝100，停止时间＝5分钟)。
Figure G2008800163092D00971
(1aR，12bS)-1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00972
-5-甲酰胺
将HATU(143mg，0.377mmol)加到搅拌的(1aR，12bS)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00973
-5-甲酰胺(160mg，0.290mmol)和八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯(85mg，0.377mmol)在DMF(3mL)和TEA(0.16mL，1.2mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌3小时。反应混合物用H2O(5mL)和HCl水溶液(1.0N，1.2mL)稀释，并用EtOAc(15mL)萃取。有机层用HCl水溶液(8mL)和盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并浓缩，得到黄色固体(299mg)。向该固体(220mg，74％)在CH2Cl2(3mL)中的溶液中加入TFA(1mL，12.98mmol)，并将混合物在室温搅拌0.5小时。将反应混合物真空浓缩，并将残余物溶于EtOAc中。溶液用NaHCO3水溶液处理，并过滤收集所得到的白色沉淀物，用EtOAc、H2O和CH2Cl2冲洗，并干燥，得到灰白色固体(172mg)。将HATU(143mg，0.376mmol)加到搅拌的该灰白色固体(172mg，100％)和乙酸(0.03mL，0.5mmol)在DMF(5mL)和TEA(0.2mL，1.4mmol)中的悬浮液中，并将反应混合物在室温搅拌2小时。反应混合物用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到(1aR，12bS)-1a-((1-乙酰基八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶-6-基)羰基)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00981
-5-甲酰胺的第一洗脱非对映异构体(84mg，0.120mmol，产率46％)(其为淡黄色固体)和第二洗脱非对映异构体(84mg，0.120mmol，产率46％)(其为淡黄色固体)。将各化合物分离为单一的对映异构体。第一洗脱非对映异构体(单一的对映异构体)：以旋转异构体或阻转异构体的约1∶6混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.10(s，0.85H)，8.02-7.84(m，1.15H)，7.70-7.51(m，1H)，7.37-7.27(m，1H)，7.25-7.14(m，1H)，7.06-6.94(m，1H)，5.21-5.00(m，1H)，4.84-4.62(m，1H)，4.47-2.74(m，8H)，3.92(s，0.45H)，3.90(s，2.55H)，3.02(s，6H)，2.30-0.92(m，20.15H)，0.22至-0.24(m，0.85H)。LCMS：m/e＝702(M+H)+，保留时间＝3.69分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。第二洗脱非对映异构体(单一的对映异构体)：1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.16-7.86(m，2H)，7.67-7.54(m，1H)，7.38-7.28(m，1H)，7.24-7.18(m，1H)，7.08-6.95(m，1H)，5.22(d，J＝15.0Hz，1H)，5.00-4.68(m，1H)，4.56-2.58(m，8H)，3.91(s，3H)，3.03(s，6H)，2.39至-0.70(m，21H)。LCMS：m/e＝702(M+H)+，保留时间＝3.81分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00982
1a-(((4aS，7aS)-6-乙酰基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-8-环己基-N-(二甲基氨磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00991
-5-甲酰胺
将HATU(37.5mg，0.099mmol)加到搅拌的外消旋-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-((4aR，7aR)-八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00992
-5-甲酰胺(50mg，0.076mmol)和乙酸(0.01mL，0.2mmol)在DMF(1mL)和TEA(0.05mL，0.4mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌1小时。反应混合物用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到产物1a-(((4aS，7aS)-6-乙酰基八氢-1H-吡咯并[3，4-b]吡啶-1-基)羰基)-8-环己基-N-(二甲基氨磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00993
-5-甲酰胺(35mg，0.050mmol，产率66％)，其为淡黄色固体。将所述化合物分离为非对映异构体的混合物，并以旋转异构体或阻转异构体的1∶3混合物的形式呈现。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm 8.11-8.05(m，0.25H)，8.03-7.84(m，1.75H)，7.66-7.52(m，1H)，7.36-7.27(m，1H)，7.22-7.13(m，1H)，7.06-6.96(m，1H)，5.14-4.61(m，2H)，4.20-2.45(m，16H)，3.91(s，0.75H)，3.90(s，2.25H)，2.25-0.98(m，18.75H)，0.27-0.13(m，0.25H)。LCMS：m/e＝702(M+H)+，保留时间＝3.88分钟(柱＝(2)phenomenex 4.6×50毫米C1810微米，溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，开始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4分钟，保持时间＝1分钟，流速＝4毫升/分钟)。
Figure G2008800163092D00994
8-环己基-N-(二甲基氨磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D00995
-5-甲酰胺
将HATU(36mg，0.094mmol)加到搅拌的酸(40mg，0.073mmol)与八氢-1H-吡啶并[1，2-a]吡嗪(20mg，0.15mmol)在DMF(0.5mL)与TEA(0.06mL，0.4mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌1小时。反应混合物用MeOH(约1mL)稀释，过滤，并通过制备性HPLC在以下条件下来纯化：XterraPrep MS C185μ30×100毫米，洗脱剂A：5％乙腈/水(含有10mM乙酸铵)，洗脱剂B：95％乙腈/水(含有10mM乙酸铵)，流速：42毫升/分钟，历时15分钟从15％洗脱剂B至100％洗脱剂B的线性梯度，得到8-环己基-N-(二甲基氨磺酰基)-11-甲氧基-1a-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01001
-5-甲酰胺(38.5mg，0.057mmol，产率79％)，其为灰白色固体。将所述化合物分离为4种立体异构体的混合物。部分(芳族质子)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.86-7.10(m，2H)，7.26(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.27(d，J＝8.8Hz，0.4H)，7.43-7.64(m，1H)，7.83(d，J＝8.8Hz，0.4H)，7.84(d，J＝8.4Hz，0.6H)，7.96(br s，0.4H)，7.99(br s，0.6H)。LC-MS保留时间：2.97分钟；m/z 672(MH-)。在配备有Phenomenex-Luna 10μC184.6×50毫米柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，其中使用检测器波长为220纳米的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件：流速为5毫升/分钟，梯度为100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5％乙腈/95％H2O/10mM乙酸铵，而溶剂B为5％H2O/95％乙腈/10mM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
Figure G2008800163092D01002
8-环己基-11-甲氧基-N-(甲基磺酰基)-1a-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01003
-5-甲酰胺
将HATU(38mg，0.10mmol)加到搅拌的酸(40mg，0.077mmol)与八氢-1H-吡啶并[1，2-a]吡嗪(21mg，0.15mmol)在DMF(0.5mL)与TEA(0.06mL，0.4mmol)中的溶液中，并将反应混合物在室温搅拌3小时。反应混合物用MeOH(约1mL)稀释，过滤，并通过制备性HPLC在以下条件下来纯化：Xterra Prep MSC185μ30×100毫米，洗脱剂A：5％乙腈/水(含有10mM乙酸铵)，洗脱剂B：95％乙腈/水(含有10mM乙酸铵)，流速：42毫升/分钟，历时15分钟从15％洗脱剂B至100％洗脱剂B的线性梯度，得到8-环己基-11-甲氧基-N-(甲基磺酰基)-1a-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(36.2mg，0.056mmol，产率73％)，其为白色固体。将所述化合物分离为4种立体异构体的混合物。以旋转异构体或阻转异构体的约1∶3混合物和非对映异构体的约1∶1混合物的形式呈现。部分1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.36(s，3H)，3.84(s，0.75H)，3.84(s，2.25H)，6.81-7.09(m，2H)，7.15-7.29(m，1H)，7.46-7.78(m，1.2H)，7.83(d，J＝8.4Hz，0.38H)，7.84(d，J＝8.4Hz，0.38H)，7.97(br s，0.75H)，8.01(br s，0.25H)。LC-MS保留时间：2.22分钟；m/z 643(MH-)。在配备有Phenomenex-Luna 10μC184.6×50毫米柱的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录LC数据，其中使用检测器波长为220纳米的SPD-10AV UV-Vis检测器。使用以下洗脱条件：流速为5毫升/分钟，梯度为100％溶剂A/0％溶剂B至0％溶剂A/100％溶剂B，梯度时间为4分钟，保持时间为1分钟，及分析时间为5分钟，其中溶剂A为5％乙腈/95％H2O/10mM乙酸铵，而溶剂B为5％H2O/95％乙腈/10mM乙酸铵。使用Micromass Platform用于LC以电喷雾模式确定MS数据。
除非另有说明，下面实施例中的所有化合物通过以下LC/MS方法来分析：LC/MS方法1：开始％B：0；最终％B：100；梯度时间：3分钟；停止时间：4分钟；流速：4毫升/分钟；波长：220；溶剂A：10％MeOH/90％H2O/0.1％三氟乙酸；溶剂B：10％H2O/90％MeOH/0.1％三氟乙酸；柱：XBridge 4.6×50毫米S5；LC/MS方法2：LC-MS保留时间：4.163；MS m/z 516(M+H)。开始％B：0；最终％B：100；梯度时间：3分钟；停止时间：5分钟；流速：4毫升/分钟；波长：220；溶剂A：10％MeOH/90％H2O/0.1％三氟乙酸；溶剂B：10％H2O/90％MeOH/0.1％三氟乙酸；柱：XBridge 4.6×50毫米S5。
(+/-)-8-环己基-N-甲基磺酰基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01021
-5-甲酰胺
产物通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：2.961分钟；MS m/z(M+H)631。
Figure G2008800163092D01022
(+/-)-8-环己基-N-甲基磺酰基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01023
-5-甲酰胺
产物由酸和(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：2.958分钟；MS m/z(M+H)631。
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01025
-5-甲酰胺
产物由酸和(S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：3.028分钟；MS m/z(M+H)657。
Figure G2008800163092D01026
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01027
-5-甲酰胺
产物由酸和(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：3.035分钟；MS m/z(M+H)657。
Figure G2008800163092D01031
(+/-)-8-环己基-N-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基]环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01032
-5-甲酰胺
产物由酸和(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：3.048分钟；MS m/z(M+H)672。基于以下1H NMR发现产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，所述1HNMR为1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.13-1.64(m，7H)1.68-1.87(m，3H)1.88-2.14(m，6H)2.28(d，J＝7.30Hz，3H)2.43-2.76(m，8H)2.84-3.03(m，1H)3.10-3.32(m，1H)3.44-3.79(m，2H)3.89(s，3H)4.27(dd，J＝14.48，7.18Hz，5H)5.02-5.21(m，0H)6.91-7.00(m，1H)7.04-7.14(m，1H)7.26-7.32(m，1H)7.90(d，J＝8.81Hz，2H)。
Figure G2008800163092D01033
(+/-)-8-环己基-N-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基]环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01034
-5-甲酰胺
产物由酸和(S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间3.110分钟；MS m/z(M+H)672。基于以下1H NMR发现产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，所述1HNMR为1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.12-1.60(m，7H)1.67-1.86(m，3H)1.87-2.13(m，5H)2.18-2.36(m，3H)2.55-2.70(m，1H)2.84-2.99(m，2H)3.08-3.32(m，1H)3.56-3.75(m，2H)3.89(s，3H)3.92-4.39(m，9H)4.67-4.81(m，1H)5.01-5.26(m，1H)6.89-7.02(m，1H)7.03-7.14(m，1H)7.28-7.37(m，1H)7.40-7.76(m，1H)7.81-8.04(m，2H)。
Figure G2008800163092D01041
(+/-)-8-环己基-N-(吗啉代磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01042
-5-甲酰胺
产物由酸和(S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：3.056分钟；MS m/z(M+H)702。
Figure G2008800163092D01043
(+/-)-8-环己基-N-(吗啉代磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基]环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺
产物由酸和(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LCMS方法1：LC-MS保留时间：3.048；MSm/z(M+H)702。
Figure G2008800163092D01045
8-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基]环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01051
-5-甲酰胺
产物由酸和(S)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间3.051分钟；MS m/z(M+H)660。基于以下1H NMR发现产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，所述1HNMR为1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.15-1.62(m，7H)1.62-1.88(m，3H)1.86-2.33(m，8H)2.45-2.81(m，2H)2.82-2.99(m，2H)3.02(s，6H)3.07-3.79(m，4H)3.89(s，3H)4.01-4.93(m，2H)5.13(d，J＝15.11Hz，0H)6.96(dd，J＝8.56，2.52Hz，1H)7.03-7.13(m，1H)7.26-7.32(m，1H)7.69(br.s.，1H)7.81-8.01(m，2H)。
Figure G2008800163092D01052
8-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-1-羰基]环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂
Figure G2008800163092D01053
-5-甲酰胺
产物由酸和(R)-八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪来制备，通过制备性HPLC来纯化，并分离成TFA盐。LC-MS保留时间：3.015分钟；MS m/z(M+H)660。基于以下1H NMR发现产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，所述1HNMR为1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 0.97-1.65(m，7H)1.68-1.84(m，3H)1.86-2.34(m，8H)2.36-2.99(m，6H)3.04(s，6H)3.18(dd，1H)3.38-3.58(m，1H)3.69(d，J＝15.11Hz，1H)3.89(s，3H)4.00-4.19(m，0H)4.63-4.90(m，1H)5.01-5.25(m，1H)6.97(dd，J＝8.69，2.64Hz，1H)7.10(d，J＝2.52Hz，1H)7.29(d，J＝8.56Hz，1H)7.57(br.s.，1H)7.90(dd，J＝18.51，8.44Hz，2H)。

Claims (10)

1.式I化合物或其可药用盐：
Figure FSB00000970063300011
其中
R1为-CONR6R7；
R2为[4.4.0]二环二胺基团、[4.3.0]二环二胺基团或[3.3.0]二环二胺基团，所述二环二胺基团通过一个氮而与羰基相连，并且R2被0-2个R8取代基取代；
R3为烷氧基；
R4为环烷基；
R6为烷基SO2-、环烷基SO2-、(R9)(R10)NSO2-或(R11)SO2-；
R7为氢；
R8为氢、烷基、烷基羰基、(环烷基)羰基、烷氧基羰基、(烷基氨基)羰基、(二烷基氨基)羰基、(R12)羰基或苄基；
R9为氢或烷基；
R10为氢或烷基；
R11为氮杂环丁烷基或吗啉基；且
R12为吡咯烷基；
其中所述烷基及所述烷氧基中的烷基部分为由1至6个碳所组成的直链或支链烷基；
所述环烷基为由3至7个碳所组成的单环环系；和
[4.4.0]二环二胺、[4.3.0]二环二胺或[3.3.0]二环二胺具有以下所示环系中的一种，其中所述环系中的两个碳原子被氮代替，
2.权利要求1的化合物，其中R2为[4.3.0]二环二胺基团或[3.3.0]二环二胺基团，所述二环二胺基团通过一个氮而与羰基相连，并且R2被0-2个R8取代基取代。
3.权利要求1的化合物，其中R3为甲氧基。
4.权利要求1的化合物，其中R4为环己基。
5.权利要求1的化合物，其中R6为(R9)(R10)NSO2-或(R11)SO2-。
6.权利要求1的化合物，其满足下面的立体化学：
Figure FSB00000970063300021
7.权利要求1的化合物，其满足下面的立体化学：
Figure FSB00000970063300022
8.权利要求1的化合物或其可药用盐，所述化合物选自：
Figure FSB00000970063300023
Figure FSB00000970063300031
Figure FSB00000970063300041
Figure FSB00000970063300051
Figure FSB00000970063300071
Figure FSB00000970063300081
9.一种组合物，其包含权利要求1的化合物或其可药用盐以及可药用载体。
10.权利要求1的化合物在制备用于治疗丙型肝炎感染的药物中的用途。
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