CN101633616A - 一种丹参素的制备方法及其医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种丹参素的制备方法及其医药用途,经过大量实验研究,在提取丹参素过程中采用三种孔径不同规格的无机陶瓷膜分别经过初滤、超滤、纳滤对有效成分进行提取、分离、过滤,实验结果显示本发明的制备方法能够显著提高有效成分丹参素的含量,收率大于82%,动物实验表明本发明制备方法提取的丹参素药理作用显著。
Description
所属技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种丹参素的制备方法及其医药用途。
背景技术
心脑血管疾病是一种严重威胁人类,特别是影响50岁以上中老年人健康的常见病。目前既使应用最先进、完善的治疗手段,仍有50%以上的心脑血管患者生活不能完全自理。全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人,居各种死因首位,仅在我国每年就有300万人死于心脑血管疾病,心脑血管疾病已成为人类死亡病因最高的头号杀手。据最新的医学资料显示心脑血管疾病的发生在逐年上升,并且年龄年轻化,30岁以上的发病几率为17%,40-50岁为37%,50-60岁为54%,70岁以上为67%。由此可见随年龄的增长心脑血管疾病发生率越高,心脑血管疾病具有高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率的特点,因此对于心脑血管疾病的患者具有重复用药、持续用药的特点。中医药在心脑血管疾病的预防和治疗中发挥着重要的作用,尤其是以丹参为主要原料的单方或中西复方制剂均有着确切的疗效,如丹参川芎嗪注射液、复方丹参片、精制冠心颗粒、乐麦胶囊等这些制剂中丹参发挥主要作用。
丹参(Radix S alvia Miltiorrhiza Bge)为唇形科(Labiatae)鼠尾草属植物,味苦,性微温。具有活血祛瘀,安神宁心等功效。其主要含脂溶性二萜类成分和水溶性酚酸类成分,二萜类成分包括丹参酮I、丹参酮II A、丹参酮II B、隐丹参酮、异丹参酮I、异丹参酮II、异隐丹参酮、丹参新酮;水溶性酚酸类成分有丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸及丹参素与咖啡酸的衍生物或二聚物酯化而成的缩酚酸等。
以往丹参制剂中有效成分丹参素提取工艺存在很多缺点,导致丹参素收率很低,尤其在提取、浓缩、干燥过程中有效成分损失较多,致使丹参素制成制剂后质量不稳定,不良反应多。传统工艺的丹参素提取多以水为提取溶剂,虽然适合工业生产,并且成本较低容易实现,环境污染小,但是用水做溶剂提取的丹参素含有多种杂质,降低丹参素的药效。专利申请号为01126883.2以水为提取溶剂,用树脂或离子交换树脂等吸附的方法去除杂质,虽然提取率很高,但是操作工程繁琐,稳定性差,不适合工业生产。专利申请号为200410021414.9提取得到的丹参素用超滤膜过滤,去除大分子物质,仍需用正相色谱分离,不适合产业化。
本发明研究人员经过长期的实验研究,用三种不同规格的无机陶瓷膜对丹参素进行初滤、超滤、纳滤达到提取、分离、过滤的作用,不但具有操作简单,环境污染小,成本低的常规优点,而且能够提高丹参素的提取率,具有显著的药理作用。
发明内容
本发明研究人员经过大量实验研究,在提取丹参素过程中采用三种孔径不同规格的无机陶瓷膜分别经过初滤、超滤、纳滤对有效成分进行提取、分离、过滤,实验结果显示本发明的制备方法能够显著提高有效成分丹参素的含量,收率大于82%。
本发明的目的在于提供一种丹参素的制备方法。
本发明的目的在于进一步提供丹参素的提取、分离、过滤、浓缩的方法。
本发明的目的还在于提供丹参素在医药领域中的应用
本发明是通过以下技术方案实现的:
丹参素的制备方法:
取丹参药材300~500g,加8~10倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,每次1.5~2小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度40~50℃,过滤压力0.1~0.3mpa,膜面流速4.0~6.0m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度70~80℃,过滤压力0.15~0.25mpa,膜面流速4.0~5.0m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度80~90℃,过滤压力0.5~1.5mpa,膜面流速3.0~4.0m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在70~90℃,压力-0.05~-0.15mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.2~1.3,即得丹参素提取物,提取得到的收率大于82%。
本发明制备方法中使用孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤的目的在于滤去悬浮物和沉淀。
本发明制备方法中使用孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤的目的在于滤去溶液中细菌、热原、病毒及胶体蛋白质、大分子有机物。
本发明制备方法中使用孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤的目的在于分离提取液中脂溶性成分和水溶性成分,并除去溶液中的色素。
具体实施方式
实施例1
取丹参药材300g,加8倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,每次1.5小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度40℃,过滤压力0.1mpa,膜面流速4.0m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度70℃,过滤压力0.15mpa,膜面流速4.0m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度80℃,过滤压力0.5mpa,膜面流速3.0m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在70℃,压力-0.05mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.2,即得丹参素提取物,提取物的收率为84%。
实施例2
取丹参药材500g,加10倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,每次2小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度50℃,过滤压力0.3mpa,膜面流速6.0m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度80℃,过滤压力0.25mpa,膜面流速5.0m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度90℃,过滤压力1.5mpa,膜面流速4.0m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在90℃,压力-0.15mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.3,即得丹参素提取物,提取物的收率为87%。
实施例3
取丹参药材400g,加9倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,每次1.8小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度45℃,过滤压力0.2mpa,膜面流速5.0m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度75℃,过滤压力0.20mpa,膜面流速4.5m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度85℃,过滤压力1.0mpa,膜面流速3.5m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在80℃,压力-0.10mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.25,即得丹参素提取物,提取物的收率为84.5%。
实施例4
取丹参药材450g,加8.5倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,每次1.6小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度40℃,过滤压力0.3mpa,膜面流速4.5m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度80℃,过滤压力0.25mpa,膜面流速4.0m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度90℃,过滤压力0.9mpa,膜面流速3.8m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在85℃,压力-0.07mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.28,即得丹参素提取物,提取物的收率为83%。
实施例5
取丹参药材400g,加8倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,第一次2小时,第二、第三次各1.5小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度45℃,过滤压力0.23mpa,膜面流速4.8m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度80℃,过滤压力0.22mpa,膜面流速4.2m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度85℃,过滤压力1.0mpa,膜面流速3.2m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在80℃,压力-0.18mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.25,即得丹参素提取物,提取物的收率为85%。
实施例6
取丹参药材450g,加9倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,第一次1.5小时,第二、第三次各2小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度45℃,过滤压力0.23mpa,膜面流速4.8m/s,初滤完毕;将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度80℃,过滤压力0.22mpa,膜面流速4.2m/s,超滤完毕;将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度85℃,过滤压力1.0mpa,膜面流速3.2m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在80℃,压力-0.17mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.27,即得丹参素提取物,提取物的收率为83%。
用以上实施例中制备方法得到的丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤组织中的一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)变化的影响,以验证用本发明制备方法提取得到的丹参素的药理作用。
1.材料和方法
1.1仪器与试剂752C型紫外分光光度计;丹参素(用本发明制备方法研制而成,使用时用无菌生理盐水溶解配制成1g/L注射液);测定NO、NOS、iNOS的试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.2分组:7天龄SD大鼠,性别不限,体质量10~15g,随机平均分成3组,每组10只:空白对照组;缺氧缺血模型组;丹参素治疗组。
1.3NO、NOS、iNOS测定:动物分别在缺氧缺血后6,24,48h断头处死,取结扎侧脑组织称重,用无菌生理盐水作为匀浆介质,按1g∶10mL在冰浴中充分匀浆制成10%组织匀浆,离心后取上清液,测定NO、NOS、iNOS。NO采用硝酸还原酶法测定;NOS、iNOS应用比色法测定。
1.4统计学方法:应用SAS 8.0软件进行统计分析;经方差齐性检验后,多组均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用q检验。
2.结果
2.1丹参素对新生大鼠脑组织NO的影响
新生大鼠经缺氧缺血造模后6,24,48h,与空白对照组相比,模型组脑组织各相应时点NO含量升高,差异有显著性(P<0.05)。与模型组相应时点比较,丹参素治疗组相应时点NO含量回降,且呈一定的量效关系,差异有显著性(P<0.05)。
2.2丹参素对新生大鼠脑组织NOS的影响
新生大鼠经缺氧缺血造模后6,24,48h与空白对照组相比,模型组脑组织各时点NOS含量升高,差异有显著性(P<0.05)。与模型组相应时点比较,丹参素组相应时点NOS含量回降,且呈一定的量效关系,差异有显著性(P<0.05)。
2.3丹参素对新生大鼠脑组织iNOS的影响
新生大鼠经缺氧缺血造模后6h,与空白对照组相比,脑组织iNOS含量变化不大,差异无显著性(P>0.05);而在造模24,48h脑组织iNOS含量升高,差异有显著性(P<0.05)。与模型组比较,应用丹参素治疗后6h,iNOS含量变化不大,差异无显著性(P>0.05);而应用丹参素治疗后24,48h,iNOS含量回降,且呈一定的量效关系,差异有显著性(P<0.05)。
Claims (6)
1.一种丹参素的制备方法,其特征在于该制备方法采用三种孔径规格不同的无机陶瓷膜对丹参素进行初滤,超滤,纳滤,丹参素的收率大于82%。
2.如权利要求1所述的一种丹参素的制备方法,其特征在于该制备方法中初滤的无机陶瓷膜孔径为0.44微米。
3.如权利要求1所述的一种丹参素的制备方法,其特征在于该制备方法中超滤的无机陶瓷膜孔径为0.22微米。
4.如权利要求1所述的一种丹参素的制备方法,其特征在于该制备方法中纳滤的无机陶瓷膜孔径为0.16微米。
5.如权利要求1所述的一种丹参素的制备方法,其特征在于该制备方法包括如下步骤:
(1)取丹参药材300~500g,加8~10倍药材重量的水,在100℃加热提取3次,每次1.5~2小时,滤过,合并三次提取液,将提取液倒入孔径为0.44微米的无机陶瓷膜过滤器进行初滤,容器内温度40~50℃,过滤压力0.1~0.3mpa,膜面流速4.0~6.0m/s,初滤完毕;
(2)将初滤后的滤液倒入孔径为0.22微米的无机陶瓷膜进行超滤,容器内温度70~80℃,过滤压力0.15~0.25mpa,膜面流速4.0~5.0m/s,超滤完毕;
(3)将超滤后的溶液到孔径为0.16微米的无机陶瓷膜中进行纳滤,容器内温度80~90℃,过滤压力0.5~1.5mpa,膜面流速3.0~4.0m/s,纳滤完毕;将纳滤溶液倒入浓缩器内,温度在70~90℃,压力-0.05~-0.15mpa,进行浓缩,浸膏密度至1.2~1.3,即得丹参素提取物。
6.如权利要求1所述的一种丹参素的制备方法,其特征在于该制备方法得到的丹参素主要用于治疗心脑血管方面的疾病。
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