CN101626788A - 用紫外光灭活流感病毒和外来因子的装置和方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了用于辐照流体的装置(100)。装置(100)包括细长管(106)，其具有流体注射口(106a)和流体排放口(106b)，其中所述细长管(106)可围绕纵轴(107)旋转。纵轴(107)以与水平线倾斜的角度延伸。辐照源(116)在细长管(106)之内沿着纵轴(107)延伸。套筒(146)在细长管(106)之内延伸并且围绕辐照源(116)的长度，由此限定辐照源(116)和套筒(146)之间的气流通路。气流源(164)与邻近流体注射口(106a)的气流通路流体连通。气流排放(180)与邻近流体排放口(106b)的气流通路流体连通。流体注射口(106a)和流体排放口(106b)与管(106)和套筒(146)之间的空间连通。本发明还公开了灭活病毒的方法以及根据所述方法制造的灭活病毒。

Description

用紫外光灭活流感病毒和外来因子的装置和方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2006年9月26日提出的美国临时专利申请序号60/827,014的优先权，将其通过参考完整地结合于此。

技术领域

本发明一般地涉及灭活传染性病毒的装置和方法，用于减少微生物生物负荷，用紫外(UV)光灭活潜在的外来因子(adventitious agents)。

背景技术

疫苗被设计成通过使用灭活的或弱化的病毒和细菌刺激免疫系统，以致活病毒及其它外来微生物可以被迅速识别，使身体在感染可能到来以前建立免疫反应。某些疫苗是从天然或改造的减活的或非致病性的病原体株产生的。在其它情况下，将毒性的传染性的病原体株杀死或灭活以产生疫苗。已经使用多种方法灭活病毒及其它病原微生物，所述方法包括加热、用化学品诸如福尔马林或丙内酯、γ辐照和紫外光辐照处理，或使用这样的方法的组合。

在病毒疫苗的生产中，紫外光(UV)辐照已经被接受，一般地与化学品(例如，福尔马林)组合，因为紫外光(UV)辐照对于灭活各式各样的病毒以及细菌、病原体是有效的。不像福尔马林，福尔马林靶向蛋白质，紫外光主要靶向核酸，使抗原蛋白质是相对完好的。在UV灭活期间，UV波长辐照的激发能量破坏嘌呤和嘧啶碱基的共价键，导致对于靶病毒以及外来因子和细菌生物负荷(bioburden)的损伤。

虽然UV灭活的方法已经在疫苗诸如流感疫苗的制造中证明是安全的和有效的，但是现有的可用于灭活的装置经受许多操作限制，这已经限制它们在疫苗的工业规模化制造中的应用。本公开内容提供改善的紫外辐照装置，其适于以高通量工业设置制造疫苗。这些改善使UV灭活在集成工业制造过程的环境中是可行的，适于从高传染性病毒生产疫苗，所述高传染性病毒包括大流行性流感毒株和禽流感毒株。

发明内容

本公开内容涉及安全和有效的病毒疫苗的工业化生产，并且提供用于紫外光灭活生物流体中的传染性活病毒的装置。本公开内容还提供用于安全和有效地灭活流体中病毒的操作参数和方法，例如，用于制造疫苗的操作参数和方法。

附图说明

当连同附图阅读时，将更好地理解上述概述以及下列实施方案详述，所述附图显示本发明的例举性实施方案。然而，应该理解，本发明不局限于显示的精密安排和仪器。在不按比例的附图中，相同附图标记在全部数个图中用于指定相同元件。在附图中：

图1是根据例举性实施方案的辐照器组件的透视图；

图2是图1中所示的辐照器组件的侧立面图；

图3是安装在图1和2的辐照器组件上的辐照器设备的侧视图，部分是截面形式；

图4是安装在图3中所示的辐照器设备的注射端上的注射器盒的实施方案的透视图；

图5是图4中所示的注射器盒的侧立面图；

图6是沿着图5的线6--6获取的注射器盒的截面图；

图7是沿着图5的线7--7获取的注射器盒的截面图；

图8是插入到图4-7的注射盒中注射针的例举性实施方案的透视图；

图9是图8中所示的注射针的仰视图；

图10是图8的注射针的侧立面图；

图11是图4-7的注射盒的照片，图8-10的注射针和传感器插入其中；

图12是图4-7的注射盒的照片，显示流体从图8-10的注射针注射到注射盒和辐照器设备中；

图13是图1的辐照器组件的紫外光辐照源的例举性实施方案的分解透视图；

图14是图13中所示的紫外光辐照源的侧立面图；

图15是排放和辐照器设备的放大视图；

图16是图15中所示的收集器轮毂组件的端盖的透视图；

图17是图16中所示端盖的侧立面图；

图18是图16中所示端盖的前端立面图；

图19是图1和2的辐照器组件中使用的轴承组件的例举性实施方案的分解透视图；

图20显示在不同UV强度下对于三个流感株的每一个获得的UV灭活；和

图21显示对于6种外来因子的通过剂量响应曲线的UV灭活。

具体实施方施

紫外(UV)光作用在病毒如流感病毒和其它微生物的DNA上，使它们不能复制，由此使病毒成为非传染性的。在本文公开的制造方法中，将含有活病毒的生物流体进行UV辐照以灭活所述病毒并且使它安全作为疫苗施用。

公开内容概述

本发明提供用于辐照流体的装置。所述装置包括具有流体注射口和流体排放口的细长管，其中所述细长管可围绕纵轴旋转。所述纵轴以倾斜于水平线的一个角度延伸。辐照源在细长管之内沿着纵轴延伸。所述辐射源可以是一个或多于一个的紫外光光源(例如，灯)。在本发明的一个实施方案中，套筒在细长管之内延伸并且围绕辐照源的长度，由此限定辐照源和套筒之间的气流通路。气流源与邻近流体注射口的气流通路流体连通。气流排放与邻近流体排放口的气流通路流体连通。流体注射口和流体排放口与所述管和所述套筒之间的空间是连通的。

在另一个实施方案中，本发明提供注射盒，其安装于细长管的流体注射端。将至少一个传感器配置在细长管的流体注射端上游的注射盒之内，并且目的是从细长辐照源获得数据。将流体注射针连接至注射盒并且定位以将流体注入传感器和细长管的下游，以便避免检测通过细长管流动的流体。流体注射针的排放端延伸到套筒和细长管之间的空间内。

在另一个方面中，本公开内容提供单一轴承组件，其由至少两个轴向间隔分开的轴承构件组成，所述轴向间隔分开的轴承构件围绕并支撑流体注射口和流体排放口之间的细长管并且容许其旋转运动。

在前描述的实施方案的多种特征也可以以其任何组合一起使用。

本发明还提供用于灭活病毒的方法，所述方法包括引入流体的步骤，其包括将活病毒引入到在前描述的装置中，沿着细长管的内部长度分散所述流体；用配置在所述管之内的辐照源辐照所述流体，由此将活病毒转化成灭活病毒，同时通过在辐照源和活病毒之间沿着细长管的长度提供套筒而防止辐照源与活病毒直接接触。在该方法中，通过沿着辐照源和套筒之间的辐照源长度提供气流来保持辐照源的所需温度范围。

例如，公开的方法适于灭活存在于用于生长和培养流感病毒的尿囊液或其它培养基中的流感病毒和潜在的外来因子。描述于此的方法得到灭活流感病毒颗粒，然后可以将其进一步处理(例如，用化学试剂诸如福尔马林)，纯化和/或分离用于最后配制成为可以施用至患者的疫苗。

在例举性的实施方案中，用于灭活病毒的方法包括引入流体，其包括将活病毒引入到相对于水平线是倾斜的细长管；将细长管沿着它的纵轴旋转以分散所述流体并且使它沿着细长管的内部长度流动；并且用配置在所述管之内的辐照源(并且沿着它的纵轴延伸)辐照所述流体以灭活所述病毒。对于病毒灭活，辐照源一般在波长约为254纳米发紫外(UV)光。所述流体在它流过细长管时暴露于辐照源将所述活病毒转化成灭活病毒，这可以通过使含有灭活病毒的流体离开细长管而回收。在操作装置的过程中，通过在辐照源和活病毒之间沿着细长管的长度提供保护性套筒(诸如石英套筒)，防止辐照源与活病毒直接接触。通过在辐照源和套筒之间沿着辐照源长度提供气流，辐照源的所需温度范围保持在保护性套筒之内。

在某些实施方案中，将所述流体引入并且流过所述装置，在那里它暴露于由所述辐照源发射的紫外光。设定引入和流动的速率以确保所述流体保持暴露于紫外光达足以完全地除去生物负荷并且灭活病毒的时期。例如，所述流体一般以至少600ml/min(0.6L/min)的速率引入。可以在不危害灭活的情况下以高达大约3500ml/min的速率引入所述流体。例如，流体可以以高达大约1700，或1900或2200或2800或3500ml/min，或以该范围内任何方便的速率被引入并且流过所述装置。在某些实施方案中，以至少约600ml/min并且不大于约900ml/min的流速沿着细长管的内壁引入流体。更典型地，以至少约650ml/min、诸如至少约675ml/min的流速引入流体。通常所述流体以至少约680ml/min的流速流入细长管。一般地，流速不超过约850ml/min，更普遍地，流速设置在约840ml/min以下，例如小于约830ml/min。有利地，所述方法包括以约755ml/min的流速引入含有活病毒的流体。

在引入所述装置以后，流体通过细长管流动(例如，以上面所指出的速率)。细长管典型地是以圆筒的形状。可以通过相对于水平线倾斜细长管而使所述流体通过重力流过细长管，其中流入被放置在比流出更高的高处。一般地，所述细长管相对于水平线以至少20度的角度倾斜。例如，可以以相对于水平线约20度至40度的角度倾斜细长管。在例举性的实施方案中，所述细长管相对于水平线倾斜约30度。

在一个实施方案中，辐照源包括一个或多个(例如，多个)UV灯。当流体流过旋转的细长管时，辐照源用紫外光以至少约10毫瓦/cm²的强度辐照流体。典型地，紫外光的强度保持在10至14毫瓦/cm²之间，诸如约12毫瓦/cm²的紫外光强度。

公开的方法适于灭活各种各样的病毒，包括非被膜病毒和被膜病毒(诸如正粘病毒科，例如，流感病毒)，包括高致病性的病毒。在一个实施方案中，所述方法包括灭活活流感病毒，诸如大流行性流感毒株或禽流感毒株。同样地，所述方法能够灭活在病毒生长的多种流体中以及来自组织或细胞培养基的病毒，所述流体诸如尿囊液(例如，来自胚鸡或其它家禽的卵)。连同所考虑的病毒一起，在这里公开的方法灭活存在于流体中的外来病毒和细菌(“生物负荷”)。

也公开了通过在这里公开的方法制造的灭活病毒，以及药物组合物，和通过施用灭活病毒而保护受试者免于病毒感染的方法。

UV辐照装置

通常参考图1-19，显示根据本发明的例举性实施方案的辐照器组件100，根据本发明的另一个实施方案，其可以用于灭活尿囊液中的病毒。更具体而言，组件100可以用于辐照包含在流过组件100的流体中的病毒，以便当病毒流过组件100时，病毒被紫外光灭活。将流体从病毒供应(未显示)注射到组件100中，通过组件100处理，然后从组件100排放用于另外的处理，例如福尔马林处理。

具体地关于图1和2，辐照器组件100包括安装在支撑框架104上的一对辐照器设备102。辐照器设备102的每一个可以是另一个辐照器设备102的镜像。一个辐照器设备102中的全部元件也存在于另一个辐照器设备102中，因此，在这里仅论述一个辐照器设备102。

辐照器设备102安装在支撑框架104上。辐照器设备102包括圆柱形形状的细长导管或管106，其具有流体注射端或口106a，流体排放端或口106b，和通过那里从流体注射端106a延伸至流体排放端106b的纵轴107。在例举性实施方案中，管106由不锈钢构成，以便最小化管106与通过管106传输的流体之间的化学反应。在例举性实施方案中，管106具有约23/4英寸(7cm)的内径和约28英寸(约71cm)的长度。注射盒组件108安装于管106流体注射端106a，并且收集器轮毂组件110位于流体排放端106b。

支撑框架104安装在多个脚轮112上，其容许辐照器组件100从一个位置移动到另一个位置，诸如通过在从支撑框架104延伸的手柄114上拉或推。另外，在例举性实施方案中，辐照器设备102以相对于水平线的倾斜角度各自安装在支撑框架104上。本领域技术人员将理解辐照器设备102相对于水平线以一定角度成角度，所述角度足以使流体沿着管106的长度从流体注射端106a到流体排放端106b重力流动。在例举性实施方案中，倾角是约25度至约35度。在另一个例举性实施方案中，倾角是约30度。

现在参考图3，显示辐照器设备102的部分截面图。紫外光源116配置在管106之内并且沿着流体注射端106a和流体排放端106b之间的管106的长度，沿着纵轴107延伸。随着流体从注射盒组件108向下流动到收集器轮毂组件110，管106围绕它的纵轴107旋转以将含有病毒的流体沿着其旋转移动的表面扩展到薄膜中。在例举性实施方案中，管106以约300转/分钟的速度旋转。薄膜提供充分薄的外形以容许紫外光源116穿透所述流体，并由此将尽可能多的病毒暴露于紫外光源116灭活。

紫外光源116也至少部分延伸到注射盒组件108中。当病毒流过管106时，紫外光源116用于灭活病毒。紫外光源116发射波长为约254纳米的光，这是为核酸所吸收的波长。在病毒内产生光化学过程，引起病毒遗传信息的重排，由此干扰细胞复制的能力。不能复制的病毒被认为是无活性的，因为它不能在宿主之内繁殖到传染性数量。

现在参考图4-7，显示作为注射盒组件108的一部分的注射盒118，其下游端左侧在图4中并且其下游端右侧在图5和6中。如图5中所示，缩径管118a从注射盒118的下游端延伸并且经过管106的流体注射端106a连接。

注射盒118在形状上大致是管状的，具有大致圆形的横截面，并且在侧壁中具有多个开口以适应多种特征。一对传感器开口是相互直接相对的并且容纳测量紫外光源116的强度的UV传感器(图4-7中未显示)。传感器开口由从注射盒118外部伸出的突起120限定，稍微穿透到注射盒118的内部中。紫外传感器被插入各自相应的突起120中。盖子(未显示)拧在各自传感器上并且拧到突起120上以将传感器固定在突起120内。这样的构造容许传感器可拆卸地连接到注射盒118，因此传感器的传感器面可以一致地定位在距紫外光源116的预定距离，以便从传感器获得一致的读数。

注射盒118还包括针开口，其尺寸容许将注射针126(部分显示在图5-6的阴影中)插入到注射盒118中。针开口由针突起122限定，其从注射盒118的圆柱状外表面向外延伸。针突起122在突起120下游与突起120隔开，以便从注射针126排放的液流不接触传感器，其将减小从传感器获得的读数。如图7中所示，针突起122位于注射盒118的中心线以下，并且稍微指向下，以便将流体或多或少切线引入到注射盒118的底面。更具体而言，针突起122以相对于管106和注射盒118的中心平面的水平线约3度至约7度的偏角配置。在例举性实施方案中，偏角是约5度。这样的偏角容许流体沿着管106的内表面注射并且使流体喷洒最小化。注射盒118也包括观察口124，其使人诸如操作者凝视到观察口124中以观察来自注射针126的液流。

溢流口突起125从邻近缩径管118a的注射器盒118的底部向外延伸。溢流口突起125可以用于在溢流事件中从注射口118排出液体。备选地，溢流口突起125可以用于将监控装置，诸如温度探头或分光计(未显示)插入到注射盒118中。

现在参考图8-10，显示注射针126。针126由具有供应端128和排放端130的不锈钢管构成。针126延伸进入并且通过注射盒118，以便针126的排放端130延伸进入管106(显示在图5和6的阴影中)，用于将流体注射到细长管106中。

供应端128横截面大致是圆形的并且包括用于确保将含有活性病毒的流体供应到针126(未显示)的夹具132。针126的主体邻近夹具132是弯曲的，以便促进流体供应连接到针126的供应端128。主体126邻近于排放端130是弯曲的，以便使排放端130相对管106的内壁成角度。在例举性实施方案中针126的排放端130以相对于纵轴107约60度角度这样成角度，有助保持相对管106内表面的液流，减少喷洒流体的可能性。另外，排放端130包括大致长方形的开口134以扩展出所述流体并且促进流体沿着管106的内表面排放。流体注射针126的排放端130沿着排放轴131延伸，并且大致长方形的排放口134以相对于排放轴(131)倾斜“α”的角度延伸。这样的角度也有助于减少喷洒流体的可能性，因为所述流体从针126排放。在例举性实施方案中，角度“α”可以是约20度至约60度。

紧固圆筒136可滑动地配置在供应端128和排放端130之间的针126主体周围。在安装期间，针126被插入针突起122中所需的距离，并且紧固圆筒136沿着针126主体滑动直到紧固圆筒136接合针突起122。紧固圆筒136中的螺钉(未显示)啮合针突起122(图7中所示)中带螺纹的开口122a。因为螺钉是向下拧紧的，所以紧固圆筒136围绕针126拧紧，将针126锁定到相对于注射盒118的位置中。

图11是注射盒118的内部视图的照片，显示在注射盒118之内相互直接相对的一对传感器138。传感器138各自可拆除地安装在距紫外光源116(未显示在图11中)预定距离的流体注射口106a上游的注射盒118之内，并且目的是从紫外光源116获得数据。传感器138电连接到紫外光源116以调节从紫外光源116发射的功率量。在例举性实施方案中，如传感器138所测量，紫外光源116发射强度为12mW/cm²±2mW/cm²的光。在例举性实施方案中，强度可以是约10W/cm²至14mW/cm²。在另一个例举性实施方案中，所述强度可以是约12mW/cm²。每个传感器138包括过滤器(未显示)，其确保传感器138在254纳米的灵敏性。

另外，显示针126延伸到注射盒118中。针126的排放端130指向管106中，以便从针126排放的流体沿着管106的内壁压出。针126的排放端130连接到传感器138和管106之间的注射盒118，以便传感器138不暴露于流体并且不检测流过管106的流体。在传感器138不暴露于流体的情况下，传感器138能提供更精确的紫外光源116的强度读数。图12显示当管106围绕它的纵轴旋转时，流体“F”是沿着管106的内壁排放的。

图13和14显示组件100中使用的紫外光源116的例举性实施方案。紫外光源116包括多个以组捆扎并且平行于纵轴107延伸的紫外光管140。虽然图13显示四个(4)紫外光管140，本领域技术人员将理解，可以使用其它数量的紫外光管140。紫外光管140可以由电磁镇流器或电子镇流器(未显示)运行。

支撑棒142在紫外光管140周围内延伸，并且沿着紫外光源116的长度延伸，以对于管106内的紫外光源116提供支撑。每个紫外光管140包括它自身的接地导线144，其沿着平行于支撑棒142的它的相应紫外光管140延伸。为了清楚，仅一个接地导线144显示在图13中。接地导线144与支撑棒142分开。

石英套筒146在管106之内延伸并且在周围配置，并且围绕紫外光管140。通过防止任何流体沿着管106的长度行进而疏忽地喷洒在紫外光管140上，石英套筒146保护紫外光管140，所述喷洒将潜在地损伤和/或污染紫外光管140。套筒146也限定套筒146和管106之间的液流通路。流体注射口106a和流体排放口106b与管106和套筒146之间的空间是连通的。针126的排放端130延伸到套筒146和管106之间的空间内。

套筒146由石英构成，因为石英是UV可透过的屏障并且容许紫外光以最小的损失穿透。套筒146连接到插座固定器组件148以将套筒146支撑在套筒146的流体注射端。插座插头150从插座固定器组件148后端延伸，并且将电和结构连接(未显示)提供到紫外光灯泡140。安装套筒152支持导线覆盖物154和插座固定器156。安装套筒152安装在顶部灯固定器组件158的后部，其支持石英套筒146和插座固定器组件148。相对于顶部灯固定器组件158，垫圈160密封套筒146的流体注射端。凸缘162将顶部灯固定器组件158连接到注射盒118的上游端。顶部灯固定器组件158也包括气流供应164，其将冷却气流提供到紫外光管140。

紫外光源116的下游端包括支持紫外光管140的下游端的底部灯固定器166。螺旋状弹簧168偏压光管140的下游端远离底部灯固定器166。支撑棒142的下游端被插入到底部灯固定器166中并且由底部灯固定器166支撑。石英套筒146的下游端也被插入底部灯固定器166中，垫圈170将石英套筒146与底部灯固定器166密封。垫圈160、170密封石英套筒146的每个末端，防止流过管106的任何流体进入套筒146和潜在地损害紫外光管140。

底部灯固定器166也包括至少一个开口172，其允许来自气流供应164的流过套筒146的气流从套筒146排放。通过套筒146并且围绕紫外光管140的气流带走由紫外光管140产生的热，保持紫外光管140在预定温度范围之内以便减少磨损并且延长紫外光管140的寿命。这样的温度控制也用于调节从紫外光管140发出的紫外光的强度，因而保持所需的UV强度以灭活流体中的病毒。

现在参考图15，显示辐照器设备102的排放端。护罩172在管106的流体排放端106b围绕管106，以便防止操作者在管106旋转时疏忽地啮合管106。护罩172可以由Lexan

或另一种透明材料构成，以便操作者可以能够察看管106的排放端。

收集器轮毂组件110包括收集杯174，其可拆卸地连接到底部灯固定器166以收集从管106排放的已处理的流体。图15中显示流体“F”在管106和石英套筒146之间延伸，然后排放到收集杯174中。收集杯174包括大致角状的室，其收集流体“F”。然后流体“F”通过排放管176从收集杯174重力排放离开辐照器设备102。排放管176可以连接到接收器(未显示)，其收集从排放管176排放的已处理流体用于进一步处理。

收集轮器毂组件110也包括中心管178，其被插入到底部灯固定器166中并且可拆卸地连接到底部灯固定器166，以致整个收集器轮毂组件110可以从辐照器设备102除去，例如以便清洁。中心管178提供空气流过由石英套筒146和紫外光管140限定的空间的通路以离开辐照器设备102。空气排放管180与中心管178流体连通以容许气流从辐照器设备102排空。虽然未显示，排空管180可以连接到空气软管以指引排空空气离开操作者。柄托182从限定中心管178的排放端的凸缘184延伸。柄托182与收集杯174中相应的开口(未显示)配对，以便适当定位排放管176相对于辐照器设备102的相对位置。

在紫外光源116和套筒146之间形成气流通路，以便气流源164与邻近流体注射口106a的气流通路流体连通，并且气流排放，或排空管180，与邻近流体排放口106b的气流通路流体连通。

回来参考图3，辐照器设备102并且特别是管106由电机组件186旋转，其更详细地显示在图19中。如图19所示，电机组件186是由电机188提供动力的，其可以是无刷直流电机。由电机188驱动的驱动皮带轮190，驱动同步皮带192。同步皮带驱动地连接到从动同步皮带轮194，其经由固定到从动同步皮带轮并且通过凸缘198延伸的螺栓196固定连接到管106，其围绕管106圆周配置。螺帽200将螺栓196固定到凸缘198。

如图19中所示，管106可旋转地安装在轴承组件202中，其大约在管106的流体注射口106a和管106的流体排放口106b之间一半处同心地围绕并且支持管106，并且容许管106围绕轴107旋转运动。轴承组件202包括一对球轴承套筒204，其固定安装在外壳206之内并且被环形垫片208相互轴向隔开。通过在外壳206之内安装轴承套筒204，轴承204可以相互对齐。轴承套筒204相互的对齐可以提供许多优点，诸如，例如，减小噪声和振动，轴承套筒204操作寿命延长，和减小维持成本。此外，通过在远离流体的流入和流出的外壳206中含有轴承套筒204，防止轴承润滑剂进入辐照器设备102的任何部分，所述辐照器设备102与要辐照的流体进行接触。

支撑托座210、212支撑轴承外壳206并且各自安装到安装托座214。垫圈216、218密封轴承组件202以免从管106流动的流体与轴承套筒204或任何轴承润滑脂进行接触，所述轴承润滑脂可以用于润滑轴承套筒204。安装托座214固定连接到支撑框架104以将轴承组件202和管106支撑在支撑框架104(图1中所示)上。感应传感器220安装于支撑托座210以检测和调节在操作期间的管106的转速。

在操作中，装置100用于辐照流体，诸如从例如鸡胚卵中获得的尿囊液或细胞培养基，以灭活包含在所述流体之内的活病毒。通过将所述流体供应连接到注射针126的供应端128，包含活病毒的流体以与来自流体供应(未显示)的装置100流体连通的方式放置。另外，将空气供应(未显示)连接到气流供应164。通过给紫外光管140通电激活紫外光源116。通过检测来自紫外光供应116的输出并且将信号传输到控制器(未显示)，传感器138调节紫外光源116的输出功率，所述控制器又调节到达紫外光源116的功率。在例举性实施方案中，紫外光源116的例举性实施方案的输出功率被调节到12mW/cm²±2mW/cm²。作为传感器138和它们相应的突起120之间的螺纹连接的备选方案，可以使用盖子(未显示)将传感器138插入到突起120中，将传感器138固定在突起120之内。

回来参考图3，从空气供应产生气流，通过气流供应164并且进入套筒146和紫外光管140之间限定的空间内，以冷却紫外光管140到预定温度范围之内，诸如，例如，在约35摄氏度至约55摄氏度。在备选例举性实施方案中，温度范围可以是约39摄氏度至约49摄氏度。在另一个备选例举性实施方案中，将温度保持在约42摄氏度至约44摄氏度。在沿着紫外光管140流动以后，空气从空气排空管180中流出，其中空气从辐照器设备102排放。套筒146和管106之间的气流，然后离开排空管180，在图15中是由箭头指示的。

细长管(106)沿着它的纵轴(107)被电机188旋转。电机188又驱动同步皮带192，其又旋转管106。在例举性实施方案中，管106是以300rpm的转速旋转。感应传感器220测量管106的转速，并且将信号传输到控制器(未显示)以调节管106的转速。

当装置以稳态操作时，关于管106的旋转，紫外光源116的功率输出，和冷却紫外光源116的气流，要处理的流体经由针126被引入到装置100。可以将流体以600至900升/分钟的速率引入到装置100中。在本发明的例举性实施方案中，可以以约600至约900升/分钟的速率引入流体。在另一个例举性实施方案中，可以以约700至约800升/分钟的速率引入所述流体。在又一个例举性实施方案中，可以以约755升/分钟的速率引入流体。

针126的长方形形状和它相对于注射盒118的中心线的偏角，在不将流体喷洒到套筒146上的情况下，容许从针126排放的流体沿着管106的流体注射端106a分散在相对薄的膜中，防止紫外光源116与活病毒直接接触。这样的分散显示在图12的照片中。

管106围绕它的纵轴107的旋转用于进一步沿着细长管106的内部长度分散流体。随着流体通过管106的长度，将流体用来自紫外光源116的光辐照，由此将活病毒转化成灭活病毒。

在管106之内灭活病毒以后，含有病毒的流体流入收集杯174中，其中然后将所述流体从收集杯174通过排放管176排放。可以从排放管176将流体收集到收集器(未显示)用于进一步处理。

含有活病毒流体的UV照射方法

在这里公开的方法可用于在生产免疫原性药物组合物(包括疫苗)中灭活病毒。所述方法适合于从高致病性病毒和传染性病毒(包括高致病性的(大流行性和/或禽)流感株)生产疫苗。在一个实施方案中，在这里公开的装置和方法用于制造流感疫苗以灭活活病毒。在流感疫苗的生产中，病毒原料典型地是从鸡胚卵生长和收获的。备选地，病毒原料可以生长在培养细胞中，其中将它从培养基收获(例如，如美国专利公布2004/0029251，6,656,720，6,344,354，6,825,036，6,951,752中所描述，将其通过参考结合于此)。在生物系统诸如鸡卵或培养细胞中生产疫苗病毒期间，存在于卵和/或细胞中的污染生物试剂可以存在于病毒原料中。这样的生物污染物必须连同所考虑的病毒一起灭活以便确保安全的以及有效的疫苗。在本公开内容的上下文中，生物污染物包括“外来因子”。术语“外来因子”指的是哺乳动物或禽类的病毒、支原体、或细菌。这些是在生产适于施用到人类的完成疫苗期间可以存在于过程中间体中的生物污染物。外来因子可以存在于原材料中，这是由于在鸡中未被检出的疾病或在处理期间作为外来污染物引入。另外，如这里所用的术语“生物负荷”指的是存在于流体中的细菌群。生物负荷典型地表示为菌落形成单位(CFU)/毫升(ml)测试流体。在UV处理期间灭活外来因子和生物负荷是在这里公开的方法的重要特征。例如，虽然福尔马林灭活程序能够灭活外来因子，但是细菌对于用福尔马林处理是相对耐受的。在这里公开的用于灭活病毒的程序，也有利地灭活细菌污染物，减少处理早期的生物负荷，并且促进回收病毒用于疫苗生产。

在从卵收获以后，通常将尿囊液通过离心净化以除去颗粒物质，之后进行随后的处理。在净化以后，使含有病毒的流体经受UV照射步骤。如上所公开，UV照射设备由细长管诸如不锈钢圆筒组成，以高速旋转，在其中心定位紫外光源。将尿囊液从收集槽引入到细长管(例如，沿着内壁)，并且靠重力通过旋转管流动，将所述旋转管相对于水平线以30°(例如，20°-40°)的角度设置。转速容许流动的液体沿着圆筒壁的长度形成很薄的层。当流体沿着管内壁的长度通过时，将它暴露于由在细长管长度之内延伸的照射源发射的紫外光。典型地，照射源由一个或多个UV灯组成。通过将灯包在由UV可透过材料诸如石英制成的套筒之内，避免UV照射源与活病毒直接接触。为了确保均匀辐照，通过在套筒内经过空气流，以使它以流体流动的相反方向经过灯，将灯保持在所需温度范围之内)。当流体经过细长管时，对紫外光的暴露灭活所述病毒，以及任何外来因子，并且减少生物负荷。

将UV-灭活的尿囊液收集到无菌(例如，高压灭菌的不锈钢)槽中。在连续流动过程中，将尿囊液注入并且从UV灭活器装置经由在层流下连接的硅管收集。作为典型实例，一个批次卵的收获将得到大约1000L(平均为10mL/卵)并且收集在四至五个槽中。每个槽具有独特的识别数以便监视将它们填充的顺序。

将材料在线取样，同时填充每个槽用于测量HA滴度。在每次使用以后，将UV设备拆卸并且将可拆除的部分(UV圆筒及其它机械部分)机械洗涤并高压灭菌。UV设备和它的泵系统是原位清洁的。在处理每个批次之前，将UV设备再组装，并且在层流下进行连接。将非高压灭菌的产品接触表面用甲醛溶液消毒，接着在使用之前进行PBS漂洗。

下表提供例举性操作参数。

表1：实施例1的UV辐照参数

参数	细节
		圆筒的旋转速度	300-340rpm
流速	680-830mL/min
		转子角度	30°
UV源	254nm灯
		UV强度	10-14mW/cm2
UV-灭活的尿囊液收获物的收集	房间144中的240L不锈钢槽

表2：实施例2的UV辐照参数

参数	细节
		圆筒的旋转速度	320±20rpm
流速	755±75mL/min
		转子角度	30°
UV源	254nm灯
		UV强度	12±2mW/cm2
UV-灭活的尿囊液收获物的收集	3600L不锈钢槽(下述)

虽然前面的操作参数已经证明对于灭活病毒是有效的，但是本领域技术人员可以根据在这里公开的方法确定另外的适合的参数。典型地，流速至少是约600ml/min(诸如至少约650ml/min，或至少约675ml/min，或至少约680ml/min)。通常，流速不超过约900ml/min(诸如速率为至多约850ml/min，或840ml/min，或约830ml/min)。无论如何，如果需要增加处理能力，则可以将流速修改成高达至少约3500ml/min。类似地，可以增加紫外光强度，例如，高达至少约18mw/cm²。

在UV处理以后，一般将收集的尿囊液用福尔马林(甲醛)处理，浓缩并进一步加工以产生洗涤剂分离的抗原，适于作为疫苗施用。

例如，制备和配制抗原的方法，诸如疫苗用的流感HA和NA抗原，是众所周知的，并且例举性的方法描述在下列中，例如，美国专利号3,962,421，4,064,232，4,140,762，4,158,054，和6,743,900中。将这些用于制备抗原和配制疫苗的例举性方法通过参考结合于此。这样的抗原适合于施用到受试者，包括人受试者，用于诱导针对病毒的免疫反应。典型的，将抗原与药用赋形剂或载体配制成药物组合物。这样的载体在本领域是众所周知的，并且许多实例描述在下列中，例如Gennaro：雷明顿药物科学(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，第18版，Mack出版公司，伊斯顿，PA(1995)。任选地，所述药物组合物包括辅剂，其进一步地增强对于病毒抗原的免疫反应。

因此，根据在这里公开的方法，本公开内容包括药物组合物(例如，疫苗)，其包含灭活病毒，和/或从灭活病毒产生的病毒抗原，本公开内容还包括通过施用这样的药物组合物而保护受试者免于病毒疾病的方法。

实施例

下列非限制性实施例举例说明了用于UV灭活生物流体中的病毒的操作参数。

实施例1：通过UV灭活的生物负荷的灭活和减少

进行灭活和清除研究以证明所述方法对于灭活潜在的微生物媒介的能力。将传染性病毒和分支杆菌滴度减少分析如下。

典型地，通过制备测试样品的连续稀释，以及接种到细胞培养物(用于通过TCID₅₀分析)或琼脂板(为了确定支原体克隆数)上，分析样品(处理的和未处理的)的病毒/支原体滴度(这里称为滴定)。在预期将要检测的极低的或没有病毒/支原体生长的情况下，将称为“大体积平皿接种”的技术用于降低测定的检测极限(LOD)。测定LOD是使用泊松分布(在小的代表性样品中检测低滴度的概率)基于样品尺寸的理论滴度的估计。通过增加分析的样品大小而降低LOD。在其中经由滴定以及进行大体积平皿接种而没有观察到生长的样品中，使用大体积滴度测定计算对数减少系数(reductionfactor)。

TCID₅₀终点是根据Spearman

公式计算的，如在联邦公报(Federal Gazette)No.84(4)，1994年5月，和在由Schmidt，N.J.和Emmons，R.W.(用于病毒的、立克次氏体的和衣原体感染的诊断程序(DIAGNOSTICPROCEDURES FOR VIRAL，RICKETTSIAL AND CHLAMYDIALINFECTION)，第6版.(1989)中所描述。对数减少系数(LRF)是使用下式计算的：

Log₁₀(初始病毒滴度/最终病毒滴度)

在由复制或另外的研究产生多个对数减少系数的情况下，LRF的反对数是使用标准平均值计算平均的，如下：

((LRF₁+LRF₂+...LRF_n)/n)

95％置信区间是通过被样品数除的平方和的平方根计算的，如下：

(SQRT(((CL₁ ²)+(CL₂ ²)+...(CL_n ²))/n))

全部这些研究是由BioReliance公司在罗克维尔，MD，美国的研究室中进行的。UV灭活研究是利用商业规模的设备(Dill UV设备转移到BioReliance)进行的。

全部研究设计和LRF计算是基于在ICH文件Q5A中提供的指导和实例，“源自人或动物来源的细胞系的生物技术产品的病毒安全评估(ViralSafety Evaluation of Biotechnology Products Derived from Cell Lines ofHuman or Animal Origin)”，1997年3月，在万维网：www.ich.org/LOB/media/MEDIA425.pdf上找到。

在证实UV设备的资格和校准的预备试验以后，使用A/新Caledonia(New Caledonia)/20/99病毒株，在三个全规模批次的尿囊液中评价用UV辐照的流感灭活。在辐照前后取样品用于评价；这些结果概括在表3中。

表3：例举的UV辐照结果

实施例2：三个流感株的UV灭活

使用制造规模的设备，用多个流感株进行UV灭活研究以证明安全性和功效。选择三个流感株，对应于2004-2005季制造的那些。在两个独立运行中评价每个批次。在五个UV强度设定点(2、6、10、12和14mW/cm²)，预定的生产靶(12mW/cm²)评价灭活。全部其它条件表示上述例举性的制造方法(例如，流速755ml/min，转速320rpm，和圆筒角度30°)。

对于每个运行，收获含有流感病毒的尿囊液，并且在辐照之前取样。将材料通过辐照器在上面列出的多个UV强度设定点处理，并且取第二组的样品。通过EID₅₀评价全部样品的传染性流感病毒的存在，评价全部样品的生物负荷，还分析样品对于HA抗原的潜在损害。灭活研究结果概述显示在图20和表4中。

表4：流感病毒的UV灭活的Log₁₀减少系数

图20中图解的结果证明全部三种株(新Caledonia，怀俄明(Wyoming)，和江苏(Jiangsu))的灭活，其发生在最小平均设定点10mW/cm²。B/江苏株是在设定点为6mW/cm²灭活的。在辐照强度为12mW/cm²(方法设定点)，平均值为9.1logs(7.6至9.7，取决于所述株)，观察流感病毒的减少。通过福尔马林处理，消除UV灭活以后保留的残留感染性。

在更高流速和更高UV强度下进行另外的研究。在下列表中提供对数减少系数数据。表5中显示的数据表明，即使在高流速下UV在灭活流感病毒中也是高度有效的。如通过总蛋白和HA滴度所评价，HA抗原完整性随着增加的UV强度水平而不显示任何损伤。

表5：在高流速和UV强度为18mW/cm²下的流感病毒的UV灭活的Log₁₀减少系数

含有A/新Caledonia流感的尿囊液的UV辐照导致病毒感染性的减小。在UV辐照前后没有观察到细菌生长，并且UV辐照对于病毒的血凝集性质(HA滴度)没有影响。

实施例3：A/纽约(New York)/55/2004和A/新Caledonia株的UV灭活比较

用于本发明的流感病毒制造方法中的灭活步骤对于目前使用的全部菌株是足够的。然而，典型地，灭活步骤在全部年度新流感病毒株上再证实。例如，在2005-2006季，使用一个新式株(A/纽约/55/2004)。所述制造方法提供完全的流感病毒灭活的能力是通过下列实验评价的：

含有A/纽约/55/2004株病毒的尿囊液是通过低速离心(3000rpm，10min，室温)澄清的；该澄清步骤先前显示为不改变病毒浓度。使含有A/新Caledonia株的尿囊液澄清化并用作该实验的对照。将两个样品都使用上述相同条件UV辐照，并且取等分试样用于分析。在制造条件之下，随后用甲醛处理UV辐照的流体。A/新Caledonia和A/纽约株的结果显示在表6中。

表6：用UV辐照灭活A/新Caledonia/20/99和A/纽约/55/2004

含有A/新Caledonia流感的尿囊液的UV辐照导致病毒感染性减少至少8.6个log₁₀，如通过EID₅₀所测量(表6)。该水平的病毒灭活类似于用该菌株在前所观察的并且用作纽约株的实验对照。在UV辐照前后没有观察到细菌生长，并且UV辐照对于病毒的血凝集性质(HA滴度)没有影响。

含有A/纽约株的澄清的尿囊液的UV辐照产生病毒感染性的8.8个log减少，如通过EID₅₀所测量(表6)。该水平的灭活可与A/新Caledonia的失活相比较。再次，当在UV辐照样品中通过病毒灭活测定检测活病毒时，用单独的UV辐照的A/纽约的病毒感染性的8.8个log减少不导致完全灭活。在辐照前或辐照后，在A/纽约测试样品中没有观察到细菌生长，并且UV辐照对于病毒的血凝集性质(HA滴度)没有影响。

结果说明公开的方法对于使用紫外光灭活流感病毒的普遍适用性。

实施例4：用紫外光灭活外来因子和减少生物负荷

外来的病毒或细菌因子可以源自鸡(从该鸡获得卵)(例如，内源逆转录病毒)或在生产期间外来引入。虽然卵中产生的灭活流感疫苗已经不涉及病毒或疾病的传播，但是确保制造的药物产品是无微生物污染的测试策略无论如何是要保证的。该策略中的重要的要素是在制造过程中包括这样的步骤，所述步骤具有清除(通过除去或灭活)在生产过程期间可能发生的任何污染的能力。所述过程的微生物清除能力的定量评价是保证疫苗安全性的证明文件的一部分。通过实验确定污染物的最大量而进行该评价，所述污染物可以通过每个单独步骤灭活，然后作为单独步骤的总和计算总过程灭活能力。

本发明的方法中的外来因子清除是通过感染性的灭活实现的，而不是通过除去实现的。该步骤的灭活能力已经通过在实验室研究中用选择的模式微生物(两种模式病毒和四个支原体物种)掺加适当的处理样品而评价，所述实验室研究复制制造操作的条件。

为了最精确复制灭活研究期间UV步骤的实际制造条件，添加掺加微生物的测试制品由含有流感病毒(A/怀俄明株)的尿囊液收获物组成。选择该病毒株是因为在研究进行时产生的株(2004-2005株)中它包含最高病毒滴度，并且因而提供干扰任何存在的外来因子的UV灭活的最大潜力。为了使用用于这些研究的该测试制品，流感病毒本身是首次灭活的，以致它不会干扰掺加因子的检测。因此，将含有流感病毒的尿囊液经受UV辐照，用指定的外来因子掺加，然后作为灭活研究的一部分再辐照。

使用两种模式病毒和四个支原体物种作为掺加微生物进行清除研究(表7)。选择这些微生物的每一种的理论根据进一步地描述如下。

表7：在掺加研究中使用的模式微生物

生物体	注释
		广宿鼠白血病病毒(XMuLV)	被膜RNA逆转录病毒
2型人腺病毒(Ad-2)	非被膜DNA病毒
		支原体物种：口腔支原体(M.orale)鸡毒支原体(M.gallisepticum)肺炎支原体(M.pneumoniae)鸡滑膜囊支原体(M.synoviae)	已知在禽类物种和人类中感染并引起疾病的物种

将测试材料(UV-处理的尿囊液)的等分部分与已知数量的所考虑的模式病毒或支原体掺加。取等分部分作为处理前样品，将其立即分析，并且保持样品，其没有进一步处理，但是与UV辐照样品一起分析，作为关于任何潜在保持时间作用的对照。将剩余体积的测试材料分成两个等分部分，并且将每个等分部分在选择的UV辐照水平单独处理。对于五个测试的UV剂量的每一个重复该步骤。

全部样品以755±75ml/min的恒定流速相同地运行。使用的UV辐照剂量是2、6、10、12(制造设置点)，和14mW/cm²。在处理以后，分析每个等分样品以通过如上所述的适当方法确定模式因子的滴度，使用滴定和大体积平皿接种。见上述关于通过滴定和大体积平皿接种的测定滴度的讨论。当在滴定样品中没有检测到攻击生物体时，报道了大体积平皿接种值，原因在于改善的检测极限。对数减少系数(LRF)计算为负载在原材料中的病毒与辐照后样品中的病毒的比率的log₁₀。

a.XMuLV和腺病毒2的UV灭活

XMuLV(广宿鼠白血病病毒)是禽类白血病病毒(ALV)的模型，其是一种鸡内源性逆转录病毒，可以垂直地传播并且因而可能出现在卵中。Hussain，等，危急感染疾病(Emerg.Infect.Dis.)7：66-72(2001)。ALV基因组RNA和逆转录酶已经在小鸡细胞培养疫苗中检测到，并且内源性ALV抗原和逆转录酶活性可以在卵中发现，但是缺少由于这些疫苗导致人感染的证据。XMuLV是直径为80-110nm的被膜RNA病毒，其可以在培养物中容易地生长到高滴度并且可靠地检定，这使它适于在这样的掺加研究中使用。选择XMuLV作为ALV的模型，原因在于不能培养ALV到足够高的滴度以促进掺加研究。XMuLV的灭活是由PG-4细胞中的50％组织培养感染剂量(TCID₅₀)终点测定的改变而测量的。

腺病毒2(Ad2)是禽类腺病毒及其它非被膜DNA病毒的模型。腺病毒在自然界中是普遍存在的，并且已经显示感染许多脊椎动物物种，包括鸟类。禽类腺病毒在鸡中具有各种各样的毒性，感染在从亚临床至有症状的爆发的范围内。腺病毒可以经由卵水平地或垂直地传播。病毒脱落可以在尿囊液中产生潜在地高滴度，虽然在血清转化以后通常不能检测到脱落。禽类腺病毒一般不认为具有公共健康重要性，因为它们不能在人细胞中进行生产性复制，并且更多地具有环境关注。Ad2是直径为90nm的非被膜DNA病毒，其可以容易地在培养物中生长到高滴度并且被可靠地检定，这使它适于在这样的掺加研究中使用。Ad2的灭活是通过在A549细胞中的50％组织培养感染剂量(TCID₅₀)终点测定的改变而测量的。

将样品用XMuLV掺加到初始浓度为(log₁₀TCID₅₀/mL)8-9，或用Ad-2掺加到起始浓度为7-8.8。UV辐照以后的平均对数减少系数提供在图21中。在UV处理以后，对于两种病毒都观察到感染性的最小减少(1对数最大值)，甚至在测试的最高UV剂量(14mW/cm²)，证明该步骤对于这些生物不提供显著灭活。

b.支原体物种的UV灭活

已知各种支原体在禽类和哺乳动物宿主中感染并引起疾病。一些种类的支原体，诸如鸡毒支原体(M.gallisepticum)和鸡滑膜囊支原体(M.synoviae)，可能发生在鸡中，但是不已知为哺乳动物病原体。其它种类，诸如口腔支原体(M.orale)和肺炎支原体(M.pneumoniae)，是人源的并且可以经由感染的操作者进入过程流。这些种类可以生长到高滴度(鸡滑膜囊支原体(M.synoviae)除外)并且可靠地检定，这使它们适于掺加研究。支原体的灭活是通过从琼脂板上的CFU计数确定的滴度的改变而测量的。

将样品用支原体种类掺加以实现6.3至9.0的浓度(log₁₀CFU/ml)。与用模式病毒的研究相反，UV辐照导致对于测试的全部四个种类的支原体滴度的显著减少。在全部UV辐照剂量＞10mW/cm²，测试的支原体生物体被减少到检测不到的水平。提供在测试的全部UV剂量下的数据的剂量响应曲线提供在图21中，并且表格形式的数据提供在表8中。结果表明UV处理是稳固的支原体灭活步骤。在UV辐照水平为12mW/cm²的对数减少系数在至少2.28至3.86的范围内，然而计算值受到起始滴度和测定的检测极限的限制，原因在于样品稀释和统计学因素。

表8：外来因子的UV灭活的平均对数减少系数^a

^a显示的全部值为重复运行的平均对数减少系数和95％置信区间。

^b“≥”反映的事实是，清除因子是最小值，因为在测试样品中没有检测到存活的微生物，并且报道值是由关于相对样品大小和测定的检测极限的统计学因素所限制的。

实施例6：灭活外来因子的UV处理能力

关于每个模式微生物的LRF，UV辐照的过程设定点为12mW/cm²的结果概括在下面的表9中。从所述数据明显的是，UV处理在灭活测试的全部模式支原体物种是高度有效的。测试的模式病毒的灭活不是100％有效的。因此，所述流体可以用化学灭活试剂诸如甲醛进一步处理以完全消除在最终药物产品中的外来因子的任何风险。

表9：用紫外光灭活外来因子和生物负荷

在本说明书引用的全部出版物和参考文献，包括但不限于专利和专利申请，通过参考完整地结合于此，好似每个单独的出版物或参考文献被具体地并且单独地表明是通过参考结合于此而被充分地阐述。

虽然参考具体的实施方案在这里说明并且描述了本发明，但是本发明不意欲限于所示的细节。相反地，可以在不背离本发明的情况下，在权利要求的等价物的领域和范围内对细节进行各种改变。

Claims (48)

1.一种用于辐照流体的装置(100)，所述装置(100)包括：

具有流体注射口(106a)和流体排放口(106b)的细长管(106)，其中所述细长管(106)可围绕纵轴(107)旋转，所述纵轴(107)以与水平线倾斜的角度延伸；

在所述细长管(106)之内沿着所述纵轴(107)延伸的辐照源(116)；

在所述细长管(106)之内延伸并且围绕辐照源(116)的长度的套筒(146)，由此限定所述辐照源(116)和所述套筒(146)之间的气流通路；

与邻近所述流体注射口(106a)的气流通路流体连通的气流源(164)；和

与邻近所述流体排放口(106b)的气流通路流体连通的气流排放(180)，

其中所述流体注射口(106a)和所述流体排放口(106b)与所述管(106)和所述套筒(146)之间的空间连通。

2.根据权利要求1的装置，其中所述紫外光辐照源(116)包括沿着所述辐照源(116)的长度延伸的支撑构件(142)和平行于所述支撑构件(142)延伸的接地构件(144)。

3.根据权利要求1的装置，所述装置还包括：

安装于流体注射口(106a)的注射盒(118)；

配置在流体注射口(106a)上游的注射盒(118)之内并且目的是获得来自辐照源(116)的数据的至少一个传感器(138)；和

流体注射针(126)，所述流体注射针(126)连接到所述至少一个传感器(138)和所述细长管(106)之间的注射盒(118)，其中流体注射针(126)的排放端(130)延伸到套筒(146)和细长管(106)之间的空间内。

4.根据权利要求3的装置，其中所述至少一个传感器(138)的每一个可拆除地安装于注射盒(118)中距紫外光辐照源(116)预定的距离处。

5.根据权利要求3的装置，其中所述流体注射针(126)包括大致长方形的排放口(134)，并且其中排放端(130)以离开所述细长管(106)的中心线约3度和约7度之间的偏角连接到所述注射盒。

6.根据权利要求1的装置，所述装置还包括单一轴承组件(202)，所述单一轴承组件(202)由至少两个轴向间隔分开的轴承构件(204)组成，所述轴向间隔分开的轴承构件(204)围绕并且支撑流体注射口(106a)和流体排放口(106b)之间的细长管(106)并且容许其旋转运动。

7.根据权利要求1的装置，其中所述辐照源(116)包括平行于纵轴(107)延伸的多个源(140)。

8.根据权利要求1的装置，其中所述辐照源(116)包括紫外光辐照源(140)。

9.一种用于辐照流体的装置(100)，所述装置包括：

细长管(106)，其具有流体注射端(106a)、流体排放端(106b)和在所述流体注射端(106a)和流体排放端(106b)之间延伸的纵轴(107)；

安装于细长管(106b)的流体注射端(106a)的注射盒(118)；

在管(106)和注射盒(118)之内沿着纵轴(107)延伸的细长辐照源(116)；

至少一个传感器(138)，其配置在细长管(106)的流体注射端(106a)上游的注射盒(118)之内并且目的是获得来自细长辐照源(116)的数据，其中定位所述至少一个传感器(138)以避免检测通过细长管(106)流动的流体；和

流体注射针(126)，其连接到所述至少一个传感器(138)和所述细长管(106)之间的注射盒(118)，其中流体注射针(126)的排放端(130)延伸到套筒(146)和细长管(106)之间的空间内。

10.根据权利要求9的装置，其中所述注射盒(118)包括大致圆形的横截面。

11.根据权利要求9的装置，其中所述流体注射针(126)包括大致长方形的排放口(134)，并且其中排放端(130)以离开所述细长管(106)的中心线约3度和约7度之间的偏角连接到所述注射盒(118)。

12.根据权利要求11的装置，其中流体注射针(126)的排放端(130)沿着排放轴(131)延伸，并且所述大致长方形的排放口(134)以与排放轴(131)倾斜一个角度(α)延伸。

13.根据权利要求9的装置，其中定位所述流体注射针(126)以便从所述流体注射针(126)排放的流体沿着细长管(106)排放。

14.根据权利要求9的装置，其中所述至少一个传感器(138)的每一个可拆除地安装于注射盒(118)中距辐照源(116)预定的距离处。

15.根据权利要求9的装置，其中所述辐照源包括平行于纵轴(107)延伸的多个光源。

16.根据权利要求9的装置，其中所述辐照源(116)包括紫外光辐照源(140)。

17.一种用于辐照流体的装置(100)，所述装置(100)包括：

可旋转的细长管(106)，所述可旋转的细长管(106)具有流体注射端(106a)、流体排放端(106b)和在所述流体注射端和所述流体排放端之间延伸的纵轴；和

通过管(106)沿着管(106)的纵轴(107)延伸的细长辐照源(116)；

包括单一轴承组件(202)的改进，所述单一轴承组件(202)由至少两个轴向间隔分开的轴承构件(204)组成，所述轴向间隔分开的轴承构件(204)围绕并且支撑流体注射口(106a)和流体排放口(106b)之间的细长管(106)并且容许其旋转运动。

18.根据权利要求17的装置，其中所述轴承组件(202)同心安装于细长管(106)。

19.根据权利要求17的装置，其中所述辐照源(116)包括紫外光辐照源(140)。

20.一种用于辐照流体的装置(100)，所述装置包括：

细长管(106)，其具有流体注射口(106a)、流体排放口(106b)和通过其延伸的纵轴(107)，其中所述管(106)可围绕纵轴(107)旋转并且其中纵轴(107)相对于水平线以足够的角度成角度，以给予沿着管(106)长度的流体重力流动；

安装于流体注射口(106a)的注射盒(118)；

沿着纵轴(107)在管(106)之内延伸的紫外光辐照源(116)，其中紫外光辐照源(116)包括沿着管(106)纵向延伸的多个紫外光光源(140)；

围绕并且沿着紫外光辐照源(116)的长度延伸的套筒(146)，其限定紫外光辐照源(116)和套筒(146)之间的气流通路和套筒(146)和管(106)之间的液流通路；

与邻近流体注射口(106a)的气流通路流体连通的气流源(164)；

与邻近流体排放口(106b)的气流通路流体连通的气流排放(180)；

配置在流体注射口(106a)上游的注射盒(118)之内并且目的是获得来自细长紫外光辐照源(116)的数据的至少一个传感器(138)，其中定位所述至少一个传感器(138)以避免检测通过细长管(106)流动的流体；

流体注射针(126)，其连接到所述至少一个传感器(138)和所述细长管(106)之间的注射盒(118)，其中流体注射针(126)的排放端(130)延伸到细长管(106)之内；和

单一轴承组件(202)，所述单一轴承组件(202)由至少两个轴向间隔分开的轴承构件(204)组成，所述轴向间隔分开的轴承构件(204)围绕并且支撑在流体注射口(106a)和流体排放口(106b)之间的细长管并且容许其旋转运动。

21.一种用于灭活病毒的方法，所述方法包括下列步骤：

将包含活病毒的流体引入到细长管(106)，其中所述细长管(106)相对于水平线是倾斜的；

沿着细长管(106)的纵轴(107)旋转所述细长管(106)，由此沿着细长管(106)的内部长度分散所述流体；

用配置在所述管(106)之内并且沿着细长管(106)的纵轴(107)延伸的辐照源(116)辐照所述流体，由此将所述活病毒转化成灭活病毒；

通过在辐照源(116)和所述活病毒之间沿着细长管(106)的长度提供套筒(146)，防止辐照源(116)与活病毒直接接触；

通过在辐照源(116)和套筒(146)之间沿着辐照源(116)的长度提供气流，保持所述辐照源(116)所需的温度范围；和

使含有所述灭活病毒的流体离开细长管(106)。

22.根据权利要求21的方法，其中所述引入步骤包括沿着细长管(106)的内壁引入所述流体。

23.根据权利要求21的方法，其中所述引入步骤包括以约600ml/min至约900ml/min的流速引入所述流体。

24.根据权利要求23的方法，其中所述流速是约650ml/min至约850ml/min。

25.根据权利要求23的方法，其中所述流速是约675ml/min至约840ml/min。

26.根据权利要求23的方法，其中所述流速是约680ml/min至约830ml/min。

27.根据权利要求23的方法，其中所述流速是约755ml/min。

28.根据权利要求21的方法，其中所述细长管(106)是圆筒。

29.根据权利要求21的方法，其中所述细长管(106)相对于水平线倾斜约20度至约40度。

30.根据权利要求21的方法，其中所述细长管(106)相对于水平线倾斜约30度。

31.根据权利要求21的方法，其中所述辐照源(116)发射波长约为254纳米的紫外(UV)光。

32.根据权利要求21的方法，其中所述辐照源(116)包括多个紫外光源(140)。

33.根据权利要求21的方法，所述方法包括用紫外光以至少约10毫瓦/cm²的强度辐照所述流体。

34.根据权利要求21的方法，所述方法包括用紫外光以约10至约14毫瓦/cm²的强度辐照所述流体。

35.根据权利要求34的方法，所述方法包括用紫外光以约12毫瓦/cm²的强度辐照所述流体。

36.根据权利要求21的方法，其中所述套筒(146)是石英套筒。

37.根据权利要求21的方法，所述方法包括使含有所述灭活病毒的流体通过重力离开细长管(106)。

38.根据权利要求21的方法，其中所述活病毒在人类中是高致病性的。

39.根据权利要求21的方法，其中所述活病毒是流感。

40.根据权利要求21的方法，其中所述活病毒是大流行性流感毒株或禽流感毒株。

41.根据权利要求21的方法，其中所述包含活病毒的流体包括尿囊液。

42.根据权利要求41的方法，其中从鸡胚卵获得所述尿囊液。

43.根据权利要求21的方法，其中包含活病毒的流体包含细胞培养基。

44.权利要求21的方法，其中辐照所述包含活病毒的流体将存在于所述流体中的外来病毒和细菌灭活。

45.通过权利要求21的方法制造的灭活病毒。

46.包含权利要求45的灭活病毒的药物组合物，所述药物组合物用药用赋形剂或载体配制。

47.根据权利要求46的药物组合物，所述药物组合物还包含辅剂。

48.一种保护受试者免于病毒感染的方法，所述方法包括将免疫有效剂量的权利要求47的药物组合物施用至所述受试者。

Images