CN101612215B - 一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的应用。本发明中药组合物由人参、水蛭、蜈蚣、全蝎、土鳖虫、蝉蜕、赤芍、冰片等组成，具有益气活血、化瘀通络的功效。临床实验研究显示，该中药组合物可以有效降低硝酸酯耐药性。

Description

一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地说，本发明涉及一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的应用。

背景技术

硝酸酯类药物是治疗冠心病心绞痛及充血性心力衰竭等很有效的常用药物，可迅速缓解心绞痛发作，改善心衰患者的运动耐力，但其临床效益受到耐药性的限制。

硝酸酯耐药性是指患者对某一定剂量的硝酸酯疗效下降，甚至疗效消失，或需不断增加剂量以维持疗效。大多认为硝酸酯的耐药性是时间依赖和剂量依赖的，即长时间、大剂量容易发生耐药现象。

硝酸酯类耐药的可能机制主要如下：(1)细胞机制：研究认为，硝酸酯在体内必须脱硝基形成具有活性的一氧化氮(NO)，此过程需要巯基(-SH)参与，而SH主要来自半胱氨酸、蛋氨酸。NO与-SH可进一步相互作用后形成亚硝基硫醇，其半衰期很短。亚硝基硫醇使血管平滑肌细胞中鸟苷酸环化酶激活，此酶使环-磷酸胞有活化因而促使cGMP生成。cGMP可加速细胞内半胱氨酸的耗竭；硝酸酯类持续应用可使巯基消耗增加，NO的生成受到影响，表现为药物的作用减低。(2)血容量扩张学说：硝酸酯类药物的应用可继发血容量扩张，增加心脏前负荷，使血压升高，心肌耗氧量增加，削弱药物作用。但是用硝酸醋类药物出现耐药后血容量反恢复到用药前水平。因此，血容量扩张可能是硝酸酯类耐药的一伴随现象，而非始动因素。(3)神经、体液机制：硝酸酯类药物主要作用于静脉及冠状动脉。静脉扩张后，心脏前负荷降低，血压下降，刺激血管壁压力感受器，引起交感神经系统、肾素、血管紧张素-醛固酮(RAAS)激活，血中儿茶酚胺、肾素及血管紧张素I与II、醛固酮(RAAS)浓度升高，血管收缩。同时这些交感缩血管物质增多，无疑会反向调节机体对硝酸酯类的反应，从而参与硝酸酯类耐药的产生。(4)超氧阴离子增加学说：已有研究发现，硝酸酯类耐药时可能有下列2种情况：一是血管局部有一种缩血管物质或血管对几种缩血管活性物质的敏感性增高，从而削弱了NO的扩血管作用；一是血管组织局部产生了一种使NO失活增加的超氧阴离子。(5)血管对缩血管物质反应性增高学说：硝酸酯类耐药血管对儿茶酚胺，5-羟色胺及Ang II敏感性增高，削弱了硝酸酯类的作用，参与了耐药的形成(雷晓宁，唐光宁.硝酸酯类药物的耐药性及影响因素与对策.石河子大学学报.2002年9月第6卷第3期.)。

预防硝酸酯耐药性的发生通常采取间歇治疗法、避免大剂量给药和无间隙地使用缓释剂、减少投药次数及联合用药等方法。近年来研究，中药在降低硝酸酯耐药性上具有良好的疗效，值得临床上推广应用。

本发明是在第01131203.3号中国专利和第200410048292.2号专利申请的基础上进行的改进发明，在此全文引用该两专利文件记载的内容。本发明提供了一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的新应用。

发明内容

本发明目的是提供一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的应用。

优选地，本发明中药组合物在制备降低冠心病患者硝酸酯耐药性的药物中的应用。

本发明所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参3-10  水蛭3-11  土鳖虫5-10  乳香(制)1-5  赤芍3-9  降香1-5

檀香1-5  全蝎3-9  蝉蜕3-12  蜈蚣1-3  冰片1-7  酸枣仁(炒)3-10；优选地，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参6  水蛭10  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎7  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5；

或：

人参10  水蛭8  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎9  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5；

或：

人参6  水蛭11  土鳖虫7  乳香(制)2  赤芍5  降香2

檀香2  全蝎3  蝉蜕7  蜈蚣1  冰片5  酸枣仁(炒)5；

更优选地，上述中药组合物的活性成分由下列成分组成：

a平均粒径小于100μm的全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫、蝉蜕及制乳香药粉；

b冰片药粉；

c由降香和檀香提取的挥发油；

d人参用乙醇提取后的醇提液经浓缩后的醇提浸膏；

e提取成分c后的降香和檀香药渣的水提液、赤芍和炒酸枣仁加水煎煮后的水提液以及提取成分d后的人参药渣的水提液过滤、混匀后浓缩成的水提浸膏。

本发明还公开了含有上述中药组合物作为活性组分的药物制剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊或滴丸剂。

本发明中药组合物中，作为活性组分的原料药的拉丁名及其加工方法来自《中药大辞典》(1977年7月，第一版，上海科学技术出版社)和《中国药典》(2005年版，化学工业出版社)。

本发明中药组合物还可以按常规的制剂工艺，例如，范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊、滴丸等。

本发明的应用中，所述中药组合物为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、软胶囊、滴丸制剂中的一种，为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料)。

本发明胶囊剂优选通过以下制备方法制成：将上述配比的水蛭、全蝎、蝉蜕、土鳖虫、蜈蚣等五味药洗净，低温烘干，备用；檀香、降香提取挥发油，药渣及水溶液备用；人参用70％乙醇加热回流提取二次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味；人参药渣与檀香、降香的药渣以水溶液合并，加入赤芍、酸枣仁(炒)，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的清膏，加入上述人参醇提液，混匀，低温干燥，粉碎成细粉；乳香(制)与水蛭等五味共粉碎成细粉；冰片研细，分别与上述细粉配研，混匀，喷入挥发油，混匀，制粒，装入胶囊，即得。

或者，本发明胶囊剂优选通过以下制备方法制成：

a)按照重量份比例称取各原料药；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。

或者，本发明胶囊剂优选通过以下制备方法制成：

a)按照重量份比例称取各原料药；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏，将浸膏直接喷雾干燥成喷雾粉；

d)制剂工艺：

将超微粉碎粉与步骤c)所得喷雾干燥粉一起加到沸腾制粒干燥机中，再喷溶媒制成颗粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。

本发明药物的用量，折算成原料药的重量计，为每次0.8-3克，每日服用2-4次，优选为每次1.11-2.22克，每日服用三次。

为阐明本发明中药组合物降低硝酸酯耐药性的活性，用按实施例1方法所制得的药物(以下称本发明药物)进行了下列实验。

1一般资料

1.1诊断标准

按照国际心脏病学会协会(ISFC)及世界卫生组织(WTO)临床命名标准化联合专题组对缺血性心脏病的命名和诊断标准。

1.2病例入选

按照上述标准，选择河北医科大学附属以岭医院冠心病患者，排除急性心肌梗死、心绞痛持续发作，女性均为绝经后。所有入选者先进入4天导入期，予消心痛15mg，每日4次，能耐受者120例进入试验，纳入者随机分为三组，分为A组、B组和C组，每组40例。治疗前3天停用阿司匹林，硝酸酯类药物。三组患者性别构成、年龄、血压、血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白的胆固醇(LDL-C)、肌酐等资料比较差异均无显著性(P＞0.05)。见表1。

表1  3组受试者一般资料比较(x±s)

2方法

2.1治疗方法

三组患者均予冠心病常规治疗，但硝酸酯类药物均采用消心痛，用法为每次15mg，每天4次。B组在此基础上加服本发明药物(石家庄以岭药业股份有限公司生产)，每次4粒，每天3次；C组加服维生素C片(上海辛帕斯制药有限公司)，每次0.1g，每天3次。

2.2观察指标

2.2.1一般情况及临床耐药的观察

治疗前采血检测血脂、血糖、尿酸、肌酐、尿素氮等。分别于治疗前、治疗第5天、治疗第10天结束时监测患者血压、观察收缩压的变化情况。观察患者服药后有无静息状态下心绞痛继续发作或发作已停止又重新发作或心绞痛加重(按CCSC心绞痛分级标准)的情况，若有上述情况视为临床耐药，计算各组耐药发生率。

2.2.2血管舒张功能的检测

仪器使用彩超诊断仪(美国百胜公司EK-ATL-SonoSite)，探头选用7.5MHZ线阵探头。根据celermajer的方法，测量肱动脉的内皮舒张功能。患者仰卧位，将探头置于右肘上2～15cm处，于心电图R波测量肱动脉内径，每位受试者测定肱动脉内径基础值(D0)后进行反应性充血试验。将前臂袖带加压至39.9Kpa，维持约5分钟，突然放松袖带，导致反应性充血，于90秒内再次测量肱动脉内径D1，内皮依赖性舒张功能(EDD)以D1较D0增加的百分数表示。休息至少10分钟，再舌下含服硝酸甘油0.5mg，4分钟后第三次测量肱动脉内径D2，(非内皮依赖舒张功能，EID)以D2较D0增加的百分数表示，然后按{[D1(或)D2-D0]/D0}×100％，计算肱动脉内径变化率。测量过程中，探头始终处于固定位置，血管内径测量取同一部位。

3结果

3.1三组患者临床耐药的发生情况比较

A组耐药发生率为65.00％(26/40例)，B组为22.50％(9/40例)，C组为37.50％(15/40例)，B、C组较A组低(P＜0.05)，B、C组间差异无显著性(P＞0.05)。

3.2三组SBP变化情况比较，见表2。

表2  3组患者治疗前后收缩压变化情况(mmHg，x±s)

注：与本组治疗前比较，^*p＜0.05；与A组同期比较，°p＜0.05；与B组同期比较，#p＜0.05

三组治疗前收缩压比较差异无显著性，治疗5天后血压均较治疗前下降，但B、C组较A组降低更明显(P＜0.05)。至第10天时，A组血压回升，与治疗前比较差异无显著性；B组无明显回升；C组虽有回升，但仍较治疗前低(P＜0.05)。B、C组间差异有显著性(P＜0.05)。

3.3三组治疗前后肱动脉内径测量结果比较，见表3。

表3  3组治疗前后肱动脉内径变化比较(x±s)

注：与本组治疗前比较，^*p＜0.05；与A组治疗后比较，°p＜0.05；与B组治疗后比较，#p＜0.05。

治疗前D0、D1、EDD、D2、EID三组之间比较差异无显著性，治疗后A组EID降低，B、C组EDD提高(P＜0.05)，B、C两组EDD、EID高于A组(P＜0.05)，B组EDD高于C组(P＜0.05)。

4结论：

用超声法测定的肱动脉内皮依赖性舒张功能和用介入方法测定的冠状动脉内皮依赖性舒张功能呈高度正相关，故冠心病患者肱动脉对硝酸酯类扩血管反应能在一定程度上反映硝酸酯类抗心肌缺血的疗效。以上试验研究，结合临床疗效、SBP的变化和肱动脉EID来评价硝酸酯耐药。研究结果显示加服本发明药物和加服维生素C片，硝酸酯耐药发生率显著低于仅服消心痛，而进一步研究显示本发明药物降低硝酸酯耐药性作用显著强于维生素C。

通过以上临床试验可以证明，本发明中药组合物可以有效降低硝酸酯耐药性，对于降低冠心病患者硝酸酯耐药性具有更好的疗效。

具体实施方式

实施例1：胶囊剂的制备

a)原料药配方为：

人参39.6g    水蛭72.6g    土鳖虫46.2g  乳香(制)13.2g

赤芍33g      降香13.2g    檀香13.2g    全蝎19.8g

蝉蜕46.2g    蜈蚣6.6g     冰片33g      酸枣仁(炒)33g；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于30-40μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水煎液，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70％的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为0.9～1.1醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为0.9～1.1的清膏，备用；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成1000粒胶囊。

本发明药物的用量，为每次2-4粒，每日服用三次。

实施例2：片剂的制备

a)原料药配方为：

人参66g    水蛭52.8g   土鳖虫46.2g    乳香(制)13.2g

赤芍33g    降香13.2g   檀香13.2g      全蝎59.4g

蝉蜕46.2g  蜈蚣6.6g    冰片33g        酸枣仁(炒)33g

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于70-90μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70％的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成相对密度在60℃测定为1.0～1.05醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.0～1.1的清膏，备用；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，按常规制剂工艺压制成1000片。

本发明药物的用量，为每次2-4片，每日服用三次。

实施例3：丸剂的制备

a)原料药配方为：

人参39.6g  水蛭66g    土鳖虫46.2g  乳香(制)13.2g

赤芍33g    降香13.2g  檀香13.2g    全蝎46.2g

蝉蜕46.2g  蜈蚣6.6g   冰片33g      酸枣仁(炒)33g

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径10-20μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70％的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为0.9～1.0醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.0～1.1的清膏，备用；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，按常规制剂工艺，制成1000粒丸剂。

本发明药物的用量，为每次2-4粒，每日服用三次。

Claims (4)

1.一种中药组合物在制备降低硝酸酯耐药性的药物中的应用，其特征在于：

所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

人参6    水蛭11    土鳖虫7    制乳香2    赤芍5    降香2

檀香2    全蝎3     蝉蜕7      蜈蚣1      冰片5    炒酸枣仁5，所述中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、片剂、丸剂或口服液，所述胶囊剂由以下步骤制成的：

a)按照重量份比例称取各原料药；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏；

d)制剂工艺：

在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述中药组合物的活性成分由下列成分组成：

a平均粒径小于100μm的全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫、蝉蜕及制乳香药粉；

b冰片药粉；

c由降香和檀香提取的挥发油；

d人参用乙醇提取后的醇提液经浓缩后的醇提浸膏；

e提取成分c后的降香和檀香药渣的水提液、赤芍和炒酸枣仁加水煎煮后的水提液以及提取成分d后的人参药渣的水提液过滤、混匀后浓缩成的水提浸膏。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述胶囊剂由以下步骤制成的：

a)按照重量份比例称取各原料药；

b)药材粉碎工艺：

将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；

c)提取浓缩和干燥工艺：

降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏，将浸膏直接喷雾干燥成喷雾粉；

d)制剂工艺：

将超微粉碎粉与步骤c)所得喷雾干燥粉一起加到沸腾制粒干燥机中，再喷溶媒制成颗粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物在制备降低冠心病患者硝酸酯耐药性的药物中的应用。