CN101609098A - 一种检测生物样本中是否存在被分析物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种检测生物样本中是否存在被分析物的方法，该方法包括用第一和第二用检测元件来检测生物样本中被分析物质，其中，第一和第二检测元件对该被分析物质水平的最低检测阀值不同。在一个优选方式中，被分析物质为周期性变化物质，例如HCG，LH或FSH，检测元件为免疫试剂条。利用这种检测方法可以检测出这些周期性变化物质的最大峰值的变化范围，从而为下一个周期检测提供重要参考和指导。

Description

一种检测生物样本中是否存在被分析物的方法

技术领域

本发明属于医疗诊断领域，特别的，属于快速诊断领域。

背景技术

人促黄体生成激素(LH)是随女性月经周期而含量呈周期性变化的激素，其作用是刺激卵巢内成熟卵子的释放。其峰值出现时，LH在女性血液和尿液中大量存在，所以从尿液中检测LH含量是诊断是否是排卵的可靠指标。在妇女月经周期中期，LH分泌量急剧增加，形成LH分泌峰，峰后48小时内即可促发排卵。因此LH峰后1-3天时间内妇女最易受孕，因此检测LH在尿液或血液标本中的水平，可以预测排卵时间。如图1所示为某个女性在月经周期内随着时间的变化LH在尿液中浓度的变化，其中A表示基础的LH水平，B表示在箭头所指的时间LH达到峰值水平，C表示从峰值水平回落到基础水平。

不同女性之间LH的分泌峰值有很大的差异。研究表明，在小于20mIU到200mIU之间不等。约有88％女性其LH峰值大于22mIU/ml，65％女性的峰值大于36mIU/ml而约有20-25％女性的峰值大于91mIU/ml。同时，不同女性的基础黄体生成激素(LH)也有很大的差异，即每个女性个体的最低LH值也不相同。目前，很多女性选择基于免疫技术而制造的免疫试剂条在家中自己检测LH水平的变化来判断自己的排卵期。在现有市场上提供的产品只有单一的cutoff(阀值)的试剂条，这样对那些并不了解自己的分泌峰值和最低LH值的女性个体来讲，很难实际选择适合自己的cutoff(阀值)试剂条来长期重复地检测自己的LH分泌水平，这样就不能确定自己的排卵期。因为，如果始终选择了那些cutoff(阀值)高于自己分泌峰值的试剂条来检测LH水平就会导致假阴性的产生(有的用户在连续一个周期甚至几个周期内检测都呈阴性结果，实际上应该有阳性结果出现)，即不能准确的判断自己黄体生成激素(LH)的最高值是多少和LH峰值出现的时间，这样就很难确定自己的排卵期，相反，如果始终选择了那些cutoff(阀值)低于自己分泌峰值的试剂条来检测LH水平就会导致假阳性的产生(有的用户在连续几天甚至十几天检测都呈阳性结果，实际上可能LH的峰值还没有到)。这样也会导致对自己的排卵期判断不准确的问题。  这些问题特别对那些初次确定自己排卵期的女性来讲更为重要，因为只有确定了自己的基础LH水平和LH最高水平后，这样在下一个周期内检测自己的LH水平的时候，就更能方便选择适合自己cutoff(阀值)的检测装置来检测。

另外，当女性怀孕后，不同女性个体的基础HCG值也不同，如果采用单一的最低检测阀值的检测元件进行检测，常常不能提早告诉检测者是否怀孕。所以，需要提供一种新的检测装置和检测方法来解决以上问题。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种检测方法来检测生物样本中的被分析物变化水平，特别地，可以初步检测出那些周期性变化的被分析物在某个周期内的变化水平，这样为以后周期性检测提供选择检测元件的依据。

一方面，本发明提供一种检测装置，这种检测装置包括用来检测生物样本中被分析物质是否存在的第一检测元件和第二检测元件，其中第一检测元件和第二检测元件对被分析物质水平的最低检测阀值不相同。在一个实施方式中，第一检测元件和第二检测元件为免疫试剂条，第一检测元件的最低检测阀值小于第二检测元件的最低检测阀值。

在一个具体的实施方式中，被分析物为雌性哺乳动物的黄体生成激素或人黄体生成激素(LH)，第一检测元件的最低检测阀值小于第二检测元件的最低检测阀值。在另一个优选的实施方式中，第一检测元件的最低检测阀值大于0mIU/ml而小于20mIU/ml，第二检测元件的最低检测阀值大于或等于20mIU/ml，小于80mIU/ml。在一个更优选的方式中，第二检测元件的最低检测阀值大于40mIU/ml，小于80mIU/ml，第一检测元件的最低检测阀值大于20mIU/ml，小于或等于40mIU/ml。

在另一个优选的实施方式中，该检测装置还包括用来检测生物样本中被分析物质是否存在的第三检测元件，其中，第三检测元件与第一和第二检测元件对该被分析物平的最低检测阀值不相同。在一个较优的实施方式中，第二检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值大于第一检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值，同时小第三检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值。在一个更优的实施方式中，被分析物为雌性哺乳动物的黄体生成激素或人黄体生成激素(LH)，第一检测元件的最低阀值为1-20mIU/ml，第二检测元件的最低阀值为21-60mIU/ml，第三检测元件的最低阀值为61-80mIU/ml。

在另一个具体的实施方式中，被分析物质为人绒毛膜促性腺激素(hCG)或雌性哺乳动物的绒毛膜促性腺激素，第一检测元件的最低检测阀值为20mIU/ml第二检测元件的最低检测阀值25mIU/ml。

另一方面，本发明还提供一种检测生物样本中被分析物质是否存在的方法，包括用第一检测元件和第二检测元件检测来检测被分析物在样本中的含量，其中第一检测元件和第二检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值不同。在一个优选的实施方式，用第一检测元件检测的样本与用第二检测元件检测样本为同一个样本，被分析物为雌性哺乳动物的黄体生成激素或人黄体生成激素(LH)。

在一个具体的实施方式中，第一检测元件的最低检测阀值小于第二检测元件的最低检测阀值，用第一检测元件和第二检测元件检测来源于同一个人或同一雌性哺乳动物的第一周性样本，参考第一检测元件和第二检测元件上的检测结果来选择适合在第二周期内检测该被分析物变化水平的检测元件，其中被分析物质为人黄体生成激素(LH)。在一个优选的方式中，当第一检测元件上的检测结果和第二检测元件的结果对第一周期内的本都相同的时候，表示应该选择最低检测阀值大于第二检测阀值或小于第一检测阀值的检测元件来进行第二周期内的被分析物质检测；当第一检测元件的检测结果始终都为阳性，第二检测元件始终为阴性的时候，表示应该选择最低检测阀值位于第二检测阀值和第一检测阀值之间的检测元件来进行第二周期的检测。在一个更优选的方式中，在用第一检测和第二检测元件检测第一周期内不同时间样本的同时，还用第三检测元件检测该样本，其中第三检测元件的最低检测阀值大于第二检测元件的最低检测阀值。

在另一个具体的实施方式中，被分析物为人绒毛膜促性腺激素(hCG)，同时用第一检测元件和第二检测元件对一样本进行检测，只要任何一个检测元件出现阳性结果，就可以用来表示整个检测装置的检测结果为阳性。

一方面，本发明还提供一种试剂盒，该试剂盒包括可以检测人或雌性哺乳动物样本中被分析物含量的第一检测元件和第二检测元件，其中第一检测元件和第二检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值不相同，以及一个检测结果对照表，依据该表可以指导如何选择合适的最低检测阀值的检测元件来进行第二周期对该被分析物水平进行检测。

在一个具体的实施方式中，该检测试剂盒还包括可以检测人或雌性哺乳动物样本中该被分析物的第三检测元件，其中，第三检测元件与第一和第二检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值不相同。在一个优选的实施方式中，第二检测元件的最低检测阀值大于第一检测元件的最低检测阀值，同时小于第三检测元件的最低检测阀值。

有益效果：利用本发明提供的装置和方法可以很容易找出在人或雌性哺乳动物某种被分析物质在一个周期内的变化范围，为下一个周期检测准确选取最低检测阀值的检测元件提供重要参考，这样可以帮助检测者准确检测自己的激素变化水平。特别地，可以帮助女性或雌性哺乳动物准确判断自己的黄体生成激素最大和基础数值，而避免下一个周期检测出现假阴性或假阳性结果。另外，利用本发明的装置和方法可以提早检测出是否怀孕。

附图说明

图1为女性LH周期内LH水平变化示意图。箭头表示LH峰值的时间。

图2表示系列1和系列2所表示的两位不同女性在LH周期内的LH水平随着时间不同而出现的变化趋势图。

图3表示系列1和系列2所表示的两位不同女性在LH周期内的LH水平随着时间不同而出现的变化趋势图。

图4A为本发明一个实施例子的示意图。100检测装置，包括护套103和测试壳体101和支撑体102。图4B为壳体101的下壳体300，下壳体300包括开有在壳体300上的卡曹30，301，302，303，304和放置在卡曹里的试剂条31，32，33，35，35。图4C为试剂条31的一个示意图，试剂条31包括样本接受区域311，试剂区域322，检测区域333和吸水区域334，在检测区域333上包括被分析物结合区域45和阳性控制区域45。

图5为本发明另一个具体实施例子中检测装置500的示意图。

详细描述

在下面的详细描述中，图例附带的参考文字是这里的一个部分，它以举例说明本发明可能实行的特定具体方案的方式来说明。我们并不排除本发明还可以实行其它的具体方案和在不违背本发明的使用范围的情况下改变本发明的结构

检测装置

一方面，在一个具体方案中，本发明的检测装置包括可以检测生物样本中是否存在被分析物质的检测元件。如图3所示，检测装置包括可以容纳检测元件的壳体，检测元件为试剂条31。壳体101由上下两个壳体组成，在下壳体300上开有多个卡槽30，301，302，303，304，每个卡槽放置一个试剂条，31，32，33，34，35。在试剂条上包括完成检测被分析物质的必要物质来完成检测或化验。每个卡槽上放置的试剂条对某种相同的被分析物质的最低检测阀值不相同。类似这样卡片式的检测装置在现有公开的中国专利，专利号码为200720005145.6，200620140826.9，200620140827.3200620140828.8中都有详细的描述，这些卡片式的壳体以及内部结构都置都可以被运用到本发明中来作为本发明所描述的检测装置的壳体。

在一个更具体的实施方式中，试剂条为免疫试剂条30包含一个将液体样品应用于装置的样品应用区311，一个试剂区322，一个检测区333和样品吸收区域334。试剂区322包含进行试验所需要的试剂。根据要进行的特定试验的要求，试验条上可以有不止一个试剂区。检测区333包括一个阳性对照区45，一个被分析物结合区40。当生物样本中存在被分析物质时，在被分析物结合区域40上有颜色或带颜色的线条出现，表示阳性结果，在阳性对照区域45上有变色变化或带颜色的线条出现表示化验结果正常，有效。试剂条上样品应用区311的一端位于壳体的外面用来和生物样本接触，在未使用前，有一个护套103保护样品应用区域。在一个更好的实施方式中下壳体300上开有3个卡槽302，303，304，每个卡槽上放置一个试剂条31，32，33，这三个试剂条对某一种被分析物质的最低检测阀值不相同。  在该实施方式中，被分析物质为人黄体生成素(LH)，试剂条31对人黄体生成素的最低检测阀值为20mIU/ml，试剂条32对人黄体生成素的最低检测阀值为40mIU/ml，试剂条33对人黄体生成素的最低检测阀值为80mIU/ml，利用这种检测装置来检测时，把三个试剂条的样品应用区域311直接和生物样本同时接触，生物样本由于毛细作用从样本接受区域311依次流过试剂区域322，检测区域333和吸收区域334。由于样本中的被分析物质的水平不同，两个或多个不同最低检测阀值的试剂条上出现不同的化验结果。当样本中的被分析物质的浓度高于最低检测阀值的时候，在检测元件的被分析物结合区域40出现颜色线条或者出现的条的颜色比阳性对照区45线条的颜色要深或浓，检测结果被判断为阳性。当样本中的被分析物质的浓度低于最低检测阀值的时候，在检测元件的被分析物结合区域不出现颜色线条或者出现线条的颜色比阳性对照区线条的颜色要浅或淡，检测结果判断为阴性。这种颜色线条的出现或他们的深浅可以直接通过人的肉眼观察来判断检测结果。特别的，当用这样的检测装置来周期性检测某中特定的被分析物质的时候，很容易检测出周期性变化的被分析物质的最大浓度或最低浓度的范围，这样可以指导下一个周期检测时候如何选择最低检测阀值的检测元件。该方法将在下面进行详细的描述。

另一方面，这种颜色线条的出现和深浅可以通过光学电子的方式以数字化的形式显示出来，利用该技术在美国和欧洲专利或专利申请中有详细的描述，例如US 5,580,794，EP 0 653 625，US2006/008896，这些公开的技术方案都可以运用到本发明中来。例如，在检测壳体500中放置两个对某种被分析物有不同最低检测阀值的试剂条。在一个更优选的方式中，试剂条为早孕检测试剂条，每个试剂条对样本中，例如尿液或血液，HCG的最低检测阀值不同。只要有任何一个试剂条上的检测结果为阳性就可以用来表示整个检测装置的检测结果。

如何进行试剂条的组装以及如何让试剂条上的检测区域出现颜色变化为现有技术，一般的本领域的人员都可以根据本发明所描述的内容制造出。

检测阀值

检测阀值(CUT-OFF值)是指检测元件可以检测出样本中被分析物质的最大或最低浓度的能力。最低检测阀值就是指检测元件可以检测出样本中某种被分析物质的最低浓度。例如，当检测元件的最低检测阀值设定为20mg/ML(毫克/毫升)，表示当样本中某种或某几种被分析物质的浓度小于20mg/ML的时候，利用该检测元件检测的结果为阴性，相反，如果当样本中某种或某几种被分析物质的浓度大于20mg/ML的时候，利用该检测元件检测的结果为阳性。检测元件的检测阀值的设定可以根据不同要求进行多样化，宽范围的选择。例如，当被分析物质为女性的人黄体生成激素(LH)的时候，可以将检测元件的最低检测阀值在0-300mIU/ml内进行选择，或者更高的浓度范围内进行选择。这种检测元件的最低检测阀值可以是1mIU/ml，5mIU/ml，10mIU/ml，15mIU/ml，20mIU/ml，25mIU/ml，30mIU/ml，40mIU/ml，45mIU/ml，50mIU/ml，60mIU/ml，70mIU/ml，80mIU/ml，100mIU/ml，150mIU/ml或200mIU/ml。当检测装置中包括至少两个以上的检测元件的时候，其中每个检测元件的最低检测阀值是不相同的。这样，在女性LH水平呈周期性变化的过程中，利用不同的检测阀值的检测元件对女性样本中的LH进行检测，可以有效的检测出女性LH水平在一个周期内的变化范围，这样为检测下一个周期的LH水平提供参考。

例如，如图2所示两个女性LH在一个周期内的变化水平，他们的基础LH值相差不大，但是他们的LH最大峰值不相同，系列1的最大峰值为20mIU/ml，系列2的最大峰值40mIU/ml。假定这两为女性事先并不知道自己的LH水平处于什么水平，利用本发明的所描述的装置可以很容易检测出来。利用两个检测元件来同时对系列1和系列2所示的女性进行一个周期内的LH水平检测，两个检测元件的最低检测阀值可以设定为15和35mIU/ml。在刚开始检测的时候，例如对第一天尿液样本，两位女性的检测结果应该都为阴性，随着连续检测天数的增加，系列1所代表的女性的检测结果中，检测阀值为15mIU/ml的检测元件出现阳性结果，但是检测阀值为35mIU/ml的检测元件一直为阴性结果。这样就表明系列1所代表的女性的LH峰值水平处于至少大于或等于15mIU/ml，但小于35mIU/ml。这样，当系列1所代表的女性在进行下一个周期LH水平检测的时候，可以选择那些最低检测阀值在15-35mIU/ml之间的检测元件进行LH最大峰值的检测来准确预测自己的排卵期。对于系列2所代表女性的检测结果，检测阀值为15mIU/ml的检测元件刚开始检测的结果为阴性，但是早于检测阀值为35mIU/ml的检测元件出现阳性结果，同时检测阀值为35mIU/ml的检测元件也会在随后天数的检测中出现阳性结果。这就说明系列2所代表女性的LH峰值水平处于至少大于或等于35mIU/ml。这样，系列2所代表的女性在进行下一个周期检测自己的LH峰值水平的时候，她就可以选择那些最低检测阀值大于35的检测元件来进行检测。

这种检测装置还可以包括第三个检测元件，该检测元件的最低检测阀值与第一和第二个检测元件的最低检测阀值不同。在一个具体的实施方式中，例如检测女性一个周期LH水平的变化，第三个检测元件的最低检测阀值可以设定为50mIU/ml，这样使用这样的检测装置对系列2所代表的女性进行一个周期内的检测，第三个检测元件的检测结果都为阴性。表示系列2所代表女性的LH峰值水平处于至少大于或等于35mIU/ml，而小于50mIU/ml。这样，系列2所代表的女性在进行下一个周期检测自己的LH峰值水平的时候，她就可以选择那些最低检测阀值大于35mIU/ml而小于50mIU/ml的检测元件来进行检测(例如最低检测阀值为40的检测元件)，而不去选择那些检测阀值小于35mIU/ml的检测元件进行检测。

检测装置中检测元件的个数至少是2个或2个以上，每个检测元件的最低检测阀值为不相同的。除了检测元件个数为2或3个以外，还可以设置更多的检测元件，例如4，5，6，7，8，9，10或10个以上。随着检测元件的增加，让每两个检测元件的最低检测阀值的梯度更小些，例如梯度为10，10个检测元件可以检测10-110范围内的变化。

确定了检测元件的最低检测阀值，至于在检测元件上如何进行试剂的配方和调节来完成检测元件的制备不是本发明的重点，依据现有技术提供的方法和设备对本领域一般技术人员来说是很容易完成的。

利用本发明的装置和方法除了可以检测女性或雌性哺乳动物样本中的LH变化水平和最大峰值外，还可以检测女性或雌性哺乳动物样本中的HCG水平来判断是否受孕。通常，女性或雌性哺乳动物从开始受孕起，HCG水平在受孕体内逐渐增加，达到一定的最高峰值，然后维持在一定的水平下直到分娩。但是，由于每个女性个体原因，不同的女性个体可能有不同的最低HCG水平，如果只用一个最低检测阀值的检测元件检测女性个体是否怀孕，常常因为漏检或不能提早告诉检测者是否怀孕。例如，当某个女性尿液中的HCG水平处于20mIU/ml的时候可以认为怀孕，用最低检测阀值为25mIU/ml的检测元件来检测该女性是否怀孕的时候，只有当该女性的HCG水平到达25mIU/ml的时候才能得到阳性的结果，实际上，该女性在HCG水平未到达25mIU/ml之前就可以检测出是否怀孕。为了解决以上问题，可以在检测装置中在增加一个检测元件，该检测元件的对HCG水平的最低检测阀值与第一检测元件的检测阀值不相同，例如一个是20mIU/ml，另一个是25mIU/ml。利用包括至少两个检测元件的装置对怀疑受孕的女性进行检测的时候，只要其中任何一个检测元件的检测结果为阳性，都可以判断被检测的女性可能怀孕，这样就可以提前检测出被测试这是否怀孕的结果。

被分析物

用本发明可以分析任何被分析物质。能够用本发明稳定检测的被分析物的例子包括(但是不仅仅包括)人绒毛膜促性腺激素(hCG)，黄体生成素(LH)，卵巢刺激素(FSH)，丙肝病毒(HCV)，乙肝病毒(HBV)，乙肝表面抗原，艾滋病病毒和任何滥用的药物。被分析物能够在任何的液体或者液化样品中检测到，例如尿液，唾液，口水，血液，血浆，或者血清。其它的被分析物的例子还有肌氨酐酸，胆红素，亚硝酸盐，蛋白质(非特异性的)，血液，白细胞，血糖，重金属和毒素，细菌成分(例如，特定类型的细菌的特殊的蛋白质和糖分，例如大肠杆菌0157:H7，金黄色葡萄球菌，沙门氏菌，产气荚膜梭菌，  弯曲杆菌，单核增生李斯特菌，肠炎弧菌，或者腊状芽孢杆菌)。任何其它的适合侧流试验形式的被分析物都可以用本装置检测

样品的类型

任何类型的样品都能够用本发明的装置进行试验，包括体液(例如，尿液和其它体液，以及临床样品)。液体样品可能源自固体的或者半固体的样品，包括粪，生物组织和食物样品。这些固体的和半固体的样品可以通过任何适合的方法转变成液体样品，例如在一种适当的液体中混合，跺碎，浸软，孵育，溶解或者酶解固体样品(例如，水，磷酸盐缓冲液或者其它缓冲液)。“生物样品”包括源自活的动物、植物和食物的样品，也包括尿液、唾液、血液和血液成分、脑脊液、阴道拭子，精液、粪便、汗液、分泌物、组织、器官、肿瘤、组织和器官的培养物，细胞培养物和那里的条件介质，不管是人的还是动物的。食物样品包括加工过的食物成分和最后的产品，肉，奶酪，酒，牛奶和饮用水。植物样品包括源自任何植物、植物组织、植物细胞培养物和那里的条件介质的样品。“环境样品”是那些源自环境的样品(例如，湖水样品或者其它水体的样品，污水样品，土壤样品，地下水样品，海水样品，废物废水的样品)。污水和相关的废物也可以包含在环境样品中。

周期

这里所说的“周期”是一个时间概念，在某一特定的时间范围内，某种被分析物质在生物体内的水平不稳定，处于变化状态或者至少在周期内某一特定时间段内处于变化。“周期性的被分析物质”是指被分析物质的水平或数量在特定的一段时间内处于连续不断变化，或者至少在一定时间范围有波动。被分析物质的周期性变化可能是生物体自身的一种生理反应，可能在一定时间内重复出现，例如女性的LH水平，几乎每个月都出现一个周期性的变化。“周期性样本”是指在周期时间内或包括周期内的特定一段时间内收集的样本，收集样本的次数可以是1次或至少1次，当多次收集样本的时候，每一次收集样本之间有一定的时间间隔。这种间隔可以是几分钟，几个小时，也可以是一天。例如，女性体内的LH水平从停止月经开始到下一次月经到来之前有一个波动的变化过程，刚开始的时候LH水平较低，然后到达最高水平，最后又回到刚开始的水平(如图1所示)。LH从低水平到达高水平，然后又回到低水平所持续的时间可以认为为一个周期。一般每个女性在每个月都会出现LH水平变化的一个周期。不同个体的人LH周期所持续的时间可能不同，例如有的是5天，有的是10天，15天不等，但是他们在各自的周期内，都有一个从低水平到高水平，然后又回落到低水平的过程。而LH变化的周期是和女性月经周期相关的。相对于LH，人体内的HCG水平从受孕到分娩也有一个周期变化的过程，正常的妊娠期间，尿中人绒毛膜促性腺激素含量在妊娠的前8周迅速上升，在妊娠60～70天达高峰，但不超过10天，以后就急剧下降，在妊娠晚期保持低水平，在产后(胎盘娩出后)4～6天，尿中这种激素消失。HCG的周期一般为9-11个月。这种呈周期性变化的被分析物质包括人类或哺乳动物体内的激素，它们可以是人或哺乳动物体内的黄体生成素(LH)或绒毛促性腺激素(HCG)。这种在生物体内呈周期性变化的被分析物质的水平常常在周期性样本中得到，检测周期性样本中的被分析物质可以说明生物体内的被分析物质的变化水平。本说明书和权利要求所说的“被分析物水平”可以理解为被分析物在生物体内或生物样本中的数量，浓度或者含量等意思。

检测方法

本发明提供一种检测生物样本中是否存在被分析物质的方法，包括用第一检测元件和第二检测元件检测样本中的被分析物质，其中第一检测元件和第二检测元件对该被分析物质的最低检测阀值不同。在一个具体的实施方式中，被分析物质可以是在样本中呈周期性变化的一类物质，同时用第一检测元件和第二检测元件对周期性样本进行至少一次检测。例如，如图3所示，系列1代表的女性的最大LH峰值期是第4天，那么她至少收集第3天和第4天的尿液样本进行检测才能预测自己的排卵期，也可以连续收集4天或5天的尿液样本来检测LH的水平。什么时间开始收集尿液进行LH检测是和每个人的月经周期天数有关。如何确定自己开始收集尿液进行LH检测的时间是现有技术，一般在LH检测操作说明书中有清楚的描述，例如在中国专利ZL00112780.2和ZL00112779.9中有详细描述如何进行LH检测以及检测的时间。

在一个具体的实施方案中，如图2所示，现假设系列1和2所代表的女性从来没有检测过自己在LH周期内的LH变化水平，不知道自己的具体排卵期。利用本发明的检测装置(图3)可以比较容易检测出自己LH水平所处于的范围，为以后下一个周期准确检测LH水平提供指导。例如，她可以选择含有三个检测试剂条的检测装置对自己LH周期内7天的样本连续检测，每天检测1次；这三个试剂条对LH水平的最低检测阀值依次是20mIU/ml，40mIU/ml，80mIU/ml。检测的结果见下表：

表1：系列1所表示的女性的检测结果

表2：系列2所表示的女性的检测结果

从表1直接可以看出，系列1的基础LH水平至少处于20mIU/ml左右，最大LH峰值大于或等于40mIU/ml小于80。这样，系列l在进行下一个周期内的LH水平检测的时候，就可以选择那些检测阀值位于40mIU/ml到80mIU/ml之间的检测元件进行检测。同样，从表2直接可以看出，对于系列2在进行下一个周期内的LH水平检测的时候，就可以选择最低检测阀值至少大于或等于80mIU/ml的检测元件进行检测，这样可以准确的检测出自己的最大LH水平的时间，从而准确的确定排卵期。

具体实施方式

为了进一步说明本发明的效果和实施方式，现以实验加以说明。这些具体的实施例子仅仅是在不违背本发明精神下的有限列举，并不排除本领域的一般技术人员把现有技术和本发明结合而产生的其他具体的实施方案。

实验1，用最低检测阀值为20mIU/ml，40mIU/ml，80mIU/ml的检测装置检测女性LH水平预测排卵期。

本实验参考附图4来制作检测装置。

实验1.1以40mIU/ml作为cutoff值的LH试剂条的制备。

检测区域333的准备。参考附图4C，试剂条上的检测区域333为硝酸纤维素膜(NC)。在Millipore NC膜上点上C/T线，其中以浓度为0.25mg/ml的羊抗兔IgG，喷量为1.1μl/cm来制作C线(位于检测结果对照区域45)，浓度为0.8mg/ml的鼠抗人β-LH抗体，喷量为1.1μl/cm作为T线(检测区域40上)，两条线相距5mm。点膜后在37℃烘2小时。

样本接受垫311的准备。用pH8.6的磷酸缓冲系统的缓冲液处理玻纤。37℃干燥过夜。

标记垫322的准备。用含有磷酸缓冲系统的缓冲溶液pH7.4处理聚脂膜。37℃烘干后在聚脂膜上喷点上金标溶液。喷点的金标溶液为：金溶胶颗粒标记的兔IgG的金标，OD＝15，喷量为2.0μl/cm；金标为金溶胶颗粒标记的另一个鼠抗人β-LH抗体，OD＝50，喷量2.0μl/cm。最后在37℃烘干过夜。

实验1.2：20mIU/ml和80mIU/ml作为cutoff值的LH试剂条的制备。

和40mIU/ml为cutoff值的试剂条比较，仅在硝酸纤维素膜上C/T线的浓度和标记垫上的金标溶液浓度做了相应的改变。cutoff值为20mIU/ml的试剂条上，硝酸纤维素膜上的T线浓度为：1.3mg/ml，喷量为1.1μl/cm；标记垫上的T金标的OD＝60，喷量为2.0μl/cm。同理，cutoff值为80mIU/ml的试剂条上，硝酸纤维素膜上的T线浓度为0.5mg/ml，喷量为1.1μl/cm，标记垫上的T金标的OD＝45，喷量为：2.0μl/cm。

实验1.3：检测装置的组装。将相应的金标垫，硝酸纤维素膜，样品接受垫，吸水垫按照图4C所示意的顺序层叠组合在一起，并将三个不同CUTOFF值的试剂条组合装配在同一面板300上的不同卡槽里，303上是CUTOFF为20mIU/ml的试剂条，302为40mIU/ml的试剂条，301为80mIU/ml的试剂条，然后覆盖上另一个透明的面板组装成如图3A所示的检测装置。通过透明的面板可以观察检测区域上的检测结果。按照上面介绍的方法被制作35个同样的检测装置。

实验1.4。检测方法。

寻找5位(A，B，C，D，E)处于月经期内的妇女，每位妇女每天用1个检测装置检测当天的晨尿，连续检测7天，每天收集好尿液后，把检测装置的护套103取下，露出试剂条的样本接受区域311，用手握住壳体101，把三个试剂条的样本接受区域311同时浸入尿液样本10秒钟，然后把样本接受区域插入到护套中，放置在实验台上，3分钟后读取检测区域上的检测结果。如果T线的颜色比C线的颜色要浅，表示为阴性结果(-)，如果T线的颜色比C线的颜色要深或者和C线的颜色一样，表示阳性结果(+)。

开始检测的时间因为不同的月经周期不同而不同，按照下表进行。第一列表示月经周期的天数，第二列表示从月经停止到可以开始检测LH水平的天数。

3：表3：开始LH检测的天数和月经周期的关系

21	22	23	24	25	26	27	2 8	29	30	31	32	33	34	35	36	37	38
																		6	6	7	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20	21

例如，月经周期为28天，那么开始收集尿液进行检测的时间应该为月经停止后的11天开始检测(包括月经停止的当天)。例如某人的月经周期为28天，在某月的3号停止了月经，那么开始检测的时间为该月的13号(包括13号当天的尿液)，连续检测5-10天。

实验1.5检测结果

表4：5位女性的检测结果

由上表可以知道，A女性在LH周期内，最大峰值的区间为大于或等于20mIU/ml但小于40mIU/ml。这样，在她进行下一个周期LH水平检测的时候，就可以选择那些最低检测阀值在20mIU/ml到40mIU/ml之间，例如测试检测阀值为20mIU/ml，25mIU/ml或30mIU/ml的检测元件进行检测，这样就避免了选择那些不合适的检测元件来检测(例如检测检测阀值为50mIU/ml)，从而不能准确判断自己的排卵期。同样，B女性在进行下一个周期内LH水平检测的时候，就可以选择那些最低检测阀值在40mIU/ml(包括40)到80mIU/ml(不包括80)之间，例如测试检测阀值为40mIU/ml或60mIU/ml的检测元件进行检测。C女性在进行下一个周期内LH水平检测的时候，就可以选择那些最低检测阀值在80mIU/ml包括80)以上的检测元件进行检测。D女性在进行下一个周期内LH水平检测的时候，就可以选择那些最低检测阀值在80(包括80)以上的检测元件进行检测，但是她的基础LH水平至少大于20mIU/ml。E女性在进行下一个周期内LH水平检测的时候，就可以选择那些最低检测阀值在20mIU/ml(不包括20)以下的检测元件进行检测。

Claims (11)

1.一种检测生物样本中是否存在被分析物的方法，其特征在于：包括用第一检测元件和第二检测元件检测被分析物在生物样本中的含量，其中第一检测元件和第二检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值不同。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的被分析物在生物体内呈周期性变化。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的被分析物质为人促黄体生成激素。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：用所述的第一检测元件和第二检测元件对第一周期性样本中的人促黄体生成激素进行检测。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：该方法还包括，依据对第一周性样本的检测结果来选择最低检测阀值的检测元件来进行第二周期性样本的检测。

6.如权利要求3所述的方法，其特征在于：每天同时用所述的第一检测元件和第二检测元件对第一周期性样本进行检测，依据对第一周性样本的检测结果来选择最低检测阀值的检测元件来进行第二周期性样本的检测。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的被分析物质为人绒毛膜促性腺激素，当任何一个检测元件的检测结果为阳性的时候，就可以判断整个检测结果为阳性。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于：该方法还包括，同时每天用第三检测元件对所述的周期性样本进行检测，其中，第三检测元件的最低检测阀值与第一和第二检测元件的最低检测阀值不相同。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的第一检测元件和第二检测元件位于一壳体内，让第一和第二检测元件的样本接受区域同时接触样本。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于：所述的壳体内还包括第三检测元件，其中第三检测元件对所述的被分析物水平的最低检测阀值与第一和第二检测元件对该被分析物水平的最低检测阀值都不同，让第三检测元件的样本接受区域与第一和第二检测元件的样本接受区域同时接触样本。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的生物样本为尿液，唾液，血液或汗液。

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