CN101585721A - 一种紫云英复合微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种紫云英复合微生物菌剂,其是由紫云英根瘤菌、圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌各自的发酵菌液按照15-20%重量百分比的比例分别吸附到吸附剂上制成紫云英根瘤菌菌剂、圆褐固氮菌菌剂、巨大芽孢杆菌菌剂和胶质芽孢杆菌菌剂,然后复配而成;本发明提供的复合微生物菌剂,除了单一的紫云英根瘤菌外,还复合入圆褐固氮菌,巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌,提供紫云英氮,磷,钾更全面的养分。其用于紫云英种植接种,可以显著提高紫云英产量。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于紫云英的肥料,特别是涉及一种紫云英复合微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
接种紫云英根瘤菌可以使紫云英产量大大提高,还可以提高其质量。一般接种紫云英根瘤菌可以使产量提高20%以上。氮、磷、钾是植物生长所必需的三大元素。土壤中的磷和钾都以有机或无机磷和钾化合物形态存在,植物不能直接吸收利用,通过具有解磷作用的巨大芽孢杆菌和解钾作用的胶质芽孢杆菌,能分别将植物难以吸收的磷和钾转化为植物可以直接利用的磷和钾。圆褐固氮菌的自生固氮作用,将分子氮转化成为氨,供植物直接吸收利用。根瘤菌共生固氮也可将分子氮转化成为氨,供植物直接吸收利用。
目前用来接种紫云英根瘤菌的产品一般都为单一的紫云英根瘤菌产品,通过紫云英根瘤菌共生固氮作用,为紫云英提供氮素养分。本发明在于除了单一的紫云英根瘤菌外,还复合入圆褐固氮菌,巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌,提供紫云英氮,磷,钾更全面的养分。
发明内容
本发明的目的是提供一种紫云英复合微生物菌剂及其制备方法。
一种紫云英复合微生物菌剂,其是由紫云英根瘤菌、圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌各自的发酵菌液按照15-20%重量百分比的比例分别吸附到吸附剂上制成紫云英根瘤菌菌剂、圆褐固氮菌菌剂、巨大芽孢杆菌菌剂和胶质芽孢杆菌菌剂,然后按以下重量百分比复配而成:
紫云英根瘤菌菌剂:40-95%;
圆褐固氮菌菌剂:2-20%;
巨大芽孢杆菌菌剂:1-10%;
胶质芽孢杆菌菌剂:2-30%;
其中所述发酵菌液中含菌数不低于1.0×109个/mL。
本发明的紫云英复合微生物菌剂,其中所述吸附剂为褐煤、蛭石、草炭、麸皮、秸秆或动物粪便等有机物料中的一种或几种。
本发明的紫云英复合微生物菌剂,其中所述复配比例优选为:紫云英根瘤菌60-70%,圆褐固氮菌剂10-15%,巨大芽孢杆菌剂10-15%,胶质芽孢杆菌剂10-15%。
本发明的紫云英复合微生物菌剂,其中所述复配比例优选为:紫云英根瘤菌65%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。
本发明的紫云英复合微生物菌剂的制备方法,所述四种菌种经菌种复壮后接种种子培养液培养至对数生长期后,分别接种发酵培养液中发酵得发酵菌液,再吸附至吸附剂上得各自的菌剂后按所述比例复配。
其中所述种子培养液与发酵培养液相同。
其中所述四种菌种的发酵菌液的发酵条件分别为:紫云英根瘤菌接种量1%-3%,无菌风量控制在60-80m3/小时;圆褐固氮菌接种量3%-5%,无菌风量控制在45-60m3/小时;巨大芽孢杆菌接种量0.2%-1%,无菌风量控制在90-110m3/小时;胶质芽孢杆菌接种量0.5%-1%,无菌风量控制在80-100m3/小时;发酵温度均在30-40℃之间;发酵时间为18-24小时;其中所述接种量为种子液与发酵液之间的比例。
本发明的紫云英复合微生物菌剂用于紫云英根部施肥。
本发明提供了专用于紫云英种植的复合微生物菌剂。除了单一的紫云英根瘤菌外,还复合入圆褐固氮菌,巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌,提供紫云英氮,磷,钾更全面的养分。其用于紫云英种植接种,可以显著提高紫云英产量。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例1:发酵菌液的制备和复合菌剂的制备
1、紫云英根瘤菌(ACCC13196)发酵菌液制备:发酵液灭菌121℃,30分钟,降温至32-33℃接种根瘤菌种子液,接种量为1%-3%。发酵过程中,温度控制32-34℃,无菌风量控制在60-80m3/小时。发酵终结时间:18-24小时。培养液配方为:K2HPO4 0.25-0.8g,NaCl0.1-0.5g,MgSO4 0.1-0.4g,甘露醇5-20g,酵母粉0.4-1.5g,CaCO31-5g,水1000ml,pH 6.8-7。发酵结束后发酵液中的活菌数维持在10-60×109个/mL之间。
2、圆褐固氮菌(ACCC10098)发酵菌液制备:发酵液灭菌121℃,30分钟,降温至32-33℃接种圆褐固氮菌种子液,接种量为3%-5%。发酵过程中,温度控制30-33℃,无菌风量控制在45-60m3/小时。发酵终结时间:18-24小时。培养液配方为:K2HPO40.20-1.0g,NaCl 0.1-0.5g,MgSO4 0.2-0.6g,甘露醇5-20g,酵母粉0.4-2.0g,CaCO3 0.1-0.5g,CaSO4 0.005-0.002g,(NH4)2SO4 0.1-2.0g,水1000ml,pH 6.8-7。发酵结束后发酵液中的活菌数维持在5-25×109个/mL之间。
3、巨大芽孢杆菌(ACCC10011)发酵菌液制备:发酵液灭菌121℃,30分钟,降温至35-36℃接种巨大芽孢杆菌种子液,接种量为0.2%-1%。发酵过程中,温度控制35-38℃,无菌风量控制在90-110m3/小时。发酵终结时间:18-24小时。培养液配方为:玉米粉2-12g,酵母粉0.1-5g,豆饼粉0.4-8g,NaCl0.1-0.5g,MgSO4 0.2-0.8g,K2HPO41.0-5g,CaCO3 0.5-3g,水1000ml,pH 7.0-7.2。发酵结束后发酵液中的活菌数维持在1-10×109个/mL之间。
4、胶质芽孢杆菌(ACCC01429)发酵菌液制备:发酵液灭菌121℃,30分钟,降温至35-36℃接种胶质芽孢杆菌种子液,接种量为0.5%-1%。发酵过程中,温度控制35-37℃,无菌风量控制在80-100m3/小时。发酵终结时间:18-24小时。培养液配方为:玉米粉2-12g,淀粉1-5g,豆饼粉0.4-8g,NaCl 0.1-0.5g,MgSO40.2-0.8g,K2HPO41.0-5g,(NH4)2SO40.3-0.8g,CaCO30.5-3g,水1000ml,pH 7.0-7.2。发酵结束后发酵液中的活菌数维持在1-8×109个/mL之间。
注:接种量为种子液与发酵液之间的比例。
5、复合菌剂制备:
将发酵好的菌液分别按照15-20%(重量百分比)左右的比例吸附到吸附剂上(比例视吸附剂的含水率而定),吸附剂可以使用褐煤、蛭石、草炭、麸皮、秸秆或动物粪便等有机物料中的一种或几种。吸附了发酵菌液的吸附剂制成的产品就是菌剂。此时,将菌剂按照紫云英根瘤菌60-70%,圆褐固氮菌剂10-15%,巨大芽孢杆菌剂10-15%,胶质芽孢杆菌剂10-15%进行混合,制出复合微生物菌剂。
6、选取4种菌剂的12种配比比例在紫云英上进行了大田试验得出数据。
表1
本试验14个处理,3次重复,共42个小区,小区面积为0.1亩,随机区组排列。实验地区:江西,广西,浙江,福建,安徽。处理内容如下:
处理1:常规施肥(常规对照)
处理2:常规施肥,拌种施灭菌草炭1kg/亩(基质对照)
处理3:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第一组配比比例)
处理4:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第二组配比比例)
处理5:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第三组配比比例)
处理6:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第四组配比比例)
处理7:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第五组配比比例)
处理8:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第六组配比比例)
处理9:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第七组配比比例)
处理10:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第八组配比比例)
处理11:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第九组配比比例)
处理12:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第十组配比比例)
处理13:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第十一组配比比例)
处理14:常规施肥,拌种施复合微生物菌剂1kg/亩(第十二组配比比例)
表2 江西试验结果
处理编号 | 处理内容 | 出苗率(%) | 株高(cm) | 茎粗(cm) | 产量(公斤/亩) |
1 | 常规对照 | 68.0 | 86.5 | 0.5 | 2101 |
2 | 基质对照 | 68.1 | 86.7 | 0.5 | 2135 |
3 | 第一组配比 | 87.8 | 114.2 | 0.55 | 2857 |
4 | 第二组配比 | 88.1 | 116.9 | 0.55 | 2923 |
5 | 第三组配比 | 88.1 | 117.3 | 0.55 | 2933 |
6 | 第四组配比 | 88.5 | 118.6 | 0.55 | 2969 |
7 | 第五组配比 | 90.0 | 122.5 | 0.55 | 3070 |
8 | 第六组配比 | 90.1 | 119.7 | 0.55 | 3002 |
9 | 第七组配比 | 90.2 | 119.3 | 0.55 | 2974 |
10 | 第八组配比 | 90.4 | 117.3 | 0.55 | 2931 |
11 | 第九组配比 | 91.1 | 117.4 | 0.55 | 2976 |
12 | 第十组配比 | 91.0 | 116.8 | 0.52 | 2899 |
13 | 第十一组配比 | 91.1 | 115.7 | 0.52 | 2841 |
14 | 第十二组配比 | 90.9 | 114.1 | 0.52 | 2796 |
在江西省紫云英接种复合微生物菌剂,最佳菌剂配比比例为紫云英根瘤菌剂60%,圆褐固氮菌剂15%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。在此比例下,所得到的亩产量为3070公斤,较紫云英根瘤菌剂比例占95%的第十二组配比方法产量要高了274公斤,植株也高了8.4cm,茎粗了0.03cm。
表3 广西试验结果
处理编号 | 处理内容 | 出苗率(%) | 株高(cm) | 茎粗(cm) | 产量(公斤/亩) |
1 | 常规对照 | 70.1 | 90.3 | 0.52 | 2307 |
2 | 基质对照 | 70.0 | 90.2 | 0.52 | 2296 |
3 | 第一组配比 | 88.9 | 120.4 | 0.56 | 3652 |
4 | 第二组配比 | 89.3 | 122.7 | 0.56 | 3804 |
5 | 第三组配比 | 89.2 | 122.8 | 0.56 | 3789 |
6 | 第四组配比 | 89.6 | 125.3 | 0.56 | 3897 |
7 | 第五组配比 | 91.2 | 129.1 | 0.56 | 3967 |
8 | 第六组配比 | 91.5 | 130.5 | 0.56 | 4126 |
9 | 第七组配比 | 91.2 | 128.6 | 0.56 | 3945 |
10 | 第八组配比 | 90.9 | 128.6 | 0.56 | 3947 |
11 | 第九组配比 | 92.1 | 128.3 | 0.54 | 3897 |
12 | 第十组配比 | 92.0 | 124.5 | 0.54 | 3873 |
13 | 第十一组配比 | 91.9 | 121.8 | 0.54 | 3801 |
14 | 第十二组配比 | 91.7 | 120.1 | 0.53 | 3738 |
在广西紫云英接种复合微生物菌剂,最佳菌剂配比比例为紫云英根瘤菌剂65%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。在此比例下,所得到的亩产量为4126公斤,较紫云英根瘤菌剂比例占95%的第十二组配比方法产量要高了388公斤,植株也高了10.4cm,茎粗了0.03cm。
表4 浙江试验结果
处理编号 | 处理内容 | 出苗率(%) | 株高(cm) | 茎粗(cm) | 产量(公斤/亩) |
1 | 常规对照 | 71.3 | 59.7 | 0.44 | 1519 |
2 | 基质对照 | 71.3 | 59.7 | 0.44 | 1573 |
3 | 第一组配比 | 88.7 | 80 | 0.47 | 2508 |
4 | 第二组配比 | 88.8 | 80.9 | 0.47 | 2551 |
5 | 第三组配比 | 89.5 | 81.6 | 0.47 | 2547 |
6 | 第四组配比 | 90.1 | 82.7 | 0.47 | 2599 |
7 | 第五组配比 | 90.2 | 82.9 | 0.47 | 2608 |
8 | 第六组配比 | 90.7 | 83.6 | 0.47 | 2662 |
9 | 第七组配比 | 90.7 | 83.1 | 0.47 | 2630 |
10 | 第八组配比 | 91.1 | 82.3 | 0.46 | 2641 |
11 | 第九组配比 | 91.1 | 82.4 | 0.46 | 2586 |
12 | 第十组配比 | 91.2 | 82.6 | 0.46 | 2591 |
13 | 第十一组配比 | 91.2 | 80.8 | 0.45 | 2534 |
14 | 第十二组配比 | 91.1 | 79.1 | 0.45 | 2488 |
在浙江省紫云英接种复合微生物菌剂,最佳菌剂配比比例为紫云英根瘤菌剂65%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。在此比例下,所得到的亩产量为2662公斤,较紫云英根瘤菌剂比例占95%的第十二组配比方法产量要高了174公斤,植株也高了4.5cm,茎粗了0.02cm。
表5 福建试验结果
处理编号 | 处理内容 | 出苗率(%) | 株高(cm) | 茎粗(cm) | 产量(公斤/亩) |
1 | 常规对照 | 69.2 | 105 | 0.5 | 3104 |
2 | 基质对照 | 69.3 | 106 | 0.5 | 3056 |
3 | 第一组配比 | 80.5 | 127.1 | 0.51 | 4332 |
4 | 第二组配比 | 80.6 | 127.2 | 0.51 | 4319 |
5 | 第三组配比 | 80.6 | 126.8 | 0.51 | 4394 |
6 | 第四组配比 | 81.1 | 126.4 | 0.52 | 4355 |
7 | 第五组配比 | 81.2 | 128.5 | 0.52 | 4377 |
8 | 第六组配比 | 81.1 | 130.8 | 0.52 | 4457 |
9 | 第七组配比 | 81.2 | 130.5 | 0.52 | 4470 |
10 | 第八组配比 | 80.5 | 130.1 | 0.52 | 4324 |
11 | 第九组配比 | 80.6 | 128.5 | 0.52 | 4371 |
12 | 第十组配比 | 81.3 | 127.6 | 0.51 | 4357 |
13 | 第十一组配比 | 80.3 | 126.8 | 0.5 | 4283 |
14 | 第十二组配比 | 80.3 | 126.7 | 0.5 | 4340 |
在福建省紫云英接种复合微生物菌剂,最佳菌剂配比比例为紫云英根瘤菌剂70%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂10%。在此比例下,所得到的亩产量为4470公斤,较紫云英根瘤菌剂比例占95%的第十二组配比方法产量要高了130公斤,植株也高了3.8cm,茎粗了0.02cm。
表6 安徽试验结果
处理编号 | 处理内容 | 出苗率(%) | 株高(cm) | 茎粗(cm) | 产量(公斤/亩) |
1 | 常规对照 | 67.5 | 117.3 | 0.51 | 3527 |
2 | 基质对照 | 67.3 | 117.5 | 0.51 | 3561 |
3 | 第一组配比 | 81.1 | 132.2 | 0.51 | 4505 |
4 | 第二组配比 | 81.4 | 133.1 | 0.52 | 4631 |
5 | 第三组配比 | 81.6 | 132.9 | 0.52 | 4394 |
6 | 第四组配比 | 81.9 | 133.5 | 0.52 | 4683 |
7 | 第五组配比 | 81.9 | 133.6 | 0.52 | 4710 |
8 | 第六组配比 | 82.3 | 135.7 | 0.53 | 4843 |
9 | 第七组配比 | 82.1 | 134.8 | 0.53 | 4796 |
10 | 第八组配比 | 81.7 | 133.9 | 0.53 | 4691 |
11 | 第九组配比 | 81.6 | 133.8 | 0.52 | 4610 |
12 | 第十组配比 | 81.6 | 133.2 | 0.52 | 4594 |
13 | 第十一组配比 | 81.2 | 132.7 | 0.52 | 4533 |
14 | 第十二组配比 | 81.3 | 132.2 | 0.52 | 4541 |
在安徽省紫云英接种复合微生物菌剂,最佳菌剂配比比例为紫云英根瘤菌剂65%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。在此比例下,所得到的亩产量为4843公斤,较紫云英根瘤菌剂比例占95%的第十二组配比产量要高了302公斤,植株也高了3.4cm,茎粗了0.01cm。
根据以上实例,得出紫云英最佳接种复合微生物菌剂配比比例为:紫云英根瘤菌65%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1、一种紫云英复合微生物菌剂,其特征在于,其是由紫云英根瘤菌、圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌各自的发酵菌液按照15-20%重量百分比的比例分别吸附到吸附剂上制成紫云英根瘤菌菌剂、圆褐固氮菌菌剂、巨大芽孢杆菌菌剂和胶质芽孢杆菌菌剂,然后按以下重量百分比复配而成:
紫云英根瘤菌菌剂:40-95%;
圆褐固氮菌菌剂:2-25%;
巨大芽孢杆菌菌剂:1-10%;
胶质芽孢杆菌菌剂:2-25%;
其中所述发酵菌液中含菌数不低于1.0×109个/mL。
2、如权利要求1所述的紫云英复合微生物菌剂,其特征在于,所述吸附剂为褐煤、蛭石、草炭、麸皮、秸秆或动物粪便中的一种或几种。
3、如权利要求1或2所述的紫云英复合微生物菌剂,其特征在于,所述复配比例为:紫云英根瘤菌60-70%,圆褐固氮菌剂10-15%,巨大芽孢杆菌剂5-10%,胶质芽孢杆菌剂10-15%。
4、如权利要求3所述的紫云英复合微生物菌剂,其特征在于,所述复配比例为:紫云英根瘤菌65%,圆褐固氮菌剂10%,巨大芽孢杆菌剂10%,胶质芽孢杆菌剂15%。
5、权利要求1-4任一项所述的紫云英复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于:所述四种菌种经菌种复壮后接种种子培养液培养至对数生长期后,分别接种发酵培养液中发酵得发酵菌液,再吸附至吸附剂上得各自的菌剂后按所述比例复配。
6、权利要求5中所述的制备方法,其特征在于:所述种子培养液与发酵培养液相同。
7、权利要求5或6中所述的制备方法,其特征在于:所述四种菌种的发酵菌液的发酵条件分别为:紫云英根瘤菌接种量1%-3%,无菌风量控制在60-80m3/小时;圆褐固氮菌接种量3%-5%,无菌风量控制在45-60m3/小时;巨大芽孢杆菌接种量0.2%-1%,无菌风量控制在90-110m3/小时;胶质芽孢杆菌接种量0.5%-1%,无菌风量控制在80-100m3/小时;发酵温度均在30-40℃之间;发酵时间为18-24小时;其中所述接种量为种子液与发酵液之间的比例。
8、权利要求1-4任一项所述的紫云英复合微生物菌剂在紫云英根部施肥中的应用。
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2009
- 2009-07-03 CN CN2009100881624A patent/CN101585721B/zh not_active Expired - Fee Related
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