CN101579002B - 一种萹蓄提取物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高效、低毒、低残留、与环境及与其它生物和谐的萹蓄提取物农药，在提取过程中采取浸提、渗漉或回流提取等步骤，它对环境保护与解决害螨的抗药性都具有深远意义。与化学制备的农药相比，本发明具有以下的特点和优点：由于萹蓄为自然界中的植物，因此其提取物在自然条件下易于分解，对环境和周围的生态系统安全，没有环境污染问题；萹蓄提取物是一种多成分的混合物，对朱砂叶螨有多个作用位点，因此不易产生抗药性；实验证明，萹蓄提取物有显著的杀螨效果，具有化学农药高效的特点；萹蓄中活性成分的提取简单易行，十分有利于进行工业化生产。
Description
发明领域
本发明涉及一种植物提取物，特别涉及一种萹蓄提取物及其制备方法和用途。
技术背景
螨类，特别是植食性害螨，是严重为害我国农业生产的一类重要生物。它具有个体小、繁殖快、种群密度高、危害重等特点，可危害150余种作物。据不完全统计，我国每年用于柑橘、苹果、梨、桃、棉花、蔬菜、小麦、茶等8类主要作物的杀螨剂防治费用就达90多亿元，而且随着螨类对化学药剂抗药性的逐年增加，防治费用也逐年加大。鉴于化学农药所产生的种种问题以及常规研发途径研发新的杀螨剂变得日益艰难，天然生物活性产物将成为植物保护的新手段。植物源杀螨剂不但具有选择性高、低毒、易降解、害螨不易产生抗性等优点，而且它对目标害螨的天敌昆虫伤害较小。近年来从植物中筛选出高活性的物质，直接开发新的植物源杀螨剂，或以其为先导化合物合成新的更安全高效的农药，已成为国内外农药研究开发领域的一个热点。
朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)是一种世界范围的重要经济害虫，严重影响作物的产量和品质。朱砂叶螨在中国分布广泛，因其具有繁殖力强、世代周期短、近亲交配率高等特点，它比其他害螨更易对常规化学杀螨剂产生抗性。因此，寻找更加安全的高效杀螨剂势在必行。
发明内容
本发明目的在于公开一种萹蓄(Herba Polygoni Avicularis，Polygonaceae)提取物，本发明的目的还在于公开该提取物的制备方法，本发明的目的还在于公开该提取物的用途。
本发明目的是通过如下方案实现的：
本发明萹蓄提取物由如下方法中的一种制备而成：
A.将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入2-8体积倍的氯仿，温浸或冷浸3-5天，过滤，重复2-4次，合并滤液，低压浓缩，得本发明萹蓄提取物；
B.将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入2-8体积倍的氯仿，渗漉提取2-5次，或连续回流提取4-10小时，过滤，低压浓缩，得本发明萹蓄提取物。
本发明萹蓄提取物优选如下方法中的一种制备而成：
A.将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入5体积倍的氯仿，温浸或冷浸4天，过滤，重复3次，合并滤液，低压浓缩，得本发明萹蓄提取物；
B.将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入5体积倍的氯仿，渗漉提取3次，或连续回流提取7小时，过滤，低压浓缩，得本发明萹蓄提取物。
还可以将上述本发明萹蓄提取物制备为萹蓄提取液，具体方法为：取萹蓄提取物，用总体积的10~20％的氯仿溶解，挥发溶剂氯仿，待大部分氯仿挥发后加入总体积0.5-2％的吐温-80混匀，等氯仿挥发干后，用蒸馏水稀释所得溶液，配成浓度为2mg/mL的萹蓄提取液。
还可以将上述本发明萹蓄提取物制备为萹蓄提取液，优选方法为：取萹蓄提取物，用总体积的15％的氯仿溶解，挥发溶剂氯仿，待大部分氯仿挥发后加入总体积1％的吐温-80混匀，等氯仿挥发干后，用蒸馏水稀释所得溶液，配成浓度为2mg/mL的萹蓄提取液。
本发明提供了一种高效、低毒、低残留、与环境及与其它生物和谐的新型的萹蓄提取物农药，它对环境保护与解决害螨的抗药性都具有深远意义。与化学制备的农药相比，本发明具有以下的特点和优点：
(1)由于萹蓄为自然界中的植物，因此其提取物在自然条件下易于分解，对环境和周围的生态系统安全，没有环境污染问题。(2)萹蓄提取物是一种多成分的混合物，对朱砂叶螨有多个作用位点，因此不易产生抗药性。(3)实验证明，萹蓄提取物有显著的杀螨效果，具有化学农药高效的特点。(4)萹蓄中活性成分的提取简单易行，十分有利于进行工业化生产。
下面实验例或实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1萹蓄提取物的杀朱砂叶螨活性测定实验
1、实验材料
(1)萹蓄提取物的制备：按实施例1所述方法得到不同溶剂(石油醚、氯仿和甲醇)萹蓄提取物；
(2)将上述三种萹蓄提取物按照实施例2所述方法制备得到2mg/mL的萹蓄提取液；
(3)朱砂叶螨的准备：在如下条件下室内饲养朱砂叶螨：温度25±1℃，相对湿度50±10％，光照18∶6h(L∶D)。
2、成螨触杀活性的测试
将双面胶带粘贴于玻片一端，揭去上面的纸片。用零号毛笔挑取大小一致、颜色鲜艳的活泼雌成螨，将其背部粘在双面胶带上，不可粘住螨足、口器及须肢，保证螨足自由活动，每片粘30头。用双目解剖镜检查粘好的玻片，剔除不活动、受伤和粘的不合格的螨。随后将供试螨浸入待测萹蓄提取液中，轻轻摇动5s后取出，用吸水纸条小心吸去螨体周围的多余萹蓄提取液。每个处理设3个重复，以蒸馏水加1％吐温-80为空白对照。48h后在双目解剖镜下检查螨虫的死亡情况，用毛笔轻触螨体，以螨足不动者认定为死亡。测定毒力时，萹蓄提取液样品设置5个浓度梯度。每个处理设3个重复，以蒸馏水加1％吐温-80为空白对照。
3、处理数据
采用SPSS软件按几率值分析法进行线性回归分析，计算毒力回归方程、致死中浓度(LC50)和LC50值的95％置信限。采用Duncan’s法进行方差分析，用abbott公式计算校正死亡率。
4、实验结果
(1)三种萹蓄提取液对朱砂叶螨成螨的触杀活性
采用玻片浸渍法测定了三种萹蓄提取液对朱砂叶螨的触杀活性，结果见表1。当萹蓄提取液浓度为2mg/mL时，萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液对试虫表现出较高的触杀活性，此外，从表中可以看出三种萹蓄提取液对朱砂叶螨24h的校正死亡率普遍较低，48h的校正死亡率大大提高。
表1三种萹蓄提取液对朱砂叶螨成螨的触杀活性
注：表中同列数据中相同字母表示为5％水平的不显著。
(2)根据三种萹蓄提取液对朱砂叶螨的触杀活性的初筛结果
选取萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液进行进一步研究，进一步确定萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液对朱砂叶螨的触杀活性。采用玻片浸渍法测定了活性较高的萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液的致死中浓度LC50和相对毒力，结果见表2。
表2萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液对朱砂叶螨的触杀毒力
注：以具有最大LC50值的药剂的相对毒力为1，其他各药剂的相对毒力用最大LC50有误值除以该药剂的LC50值。
5、实验结论
实验结果表明萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液对朱砂叶螨表现出较高的触杀活性。在萹蓄提取液浓度达到2mg/mL时，萹蓄氯仿提取液和萹蓄石油醚提取液均表现出较理想的杀螨效果，尤其萹蓄的氯仿提取液的杀螨效果尤为突出。
本发明下面实施例均能实现上述效果。
具体实施方式
实施例1：本发明萹蓄提取物的制备
将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入5体积倍的氯仿，温浸或冷浸4天，过滤，重复3次，合并滤液，低压浓缩，得本发明萹蓄提取物。
实施例2：本发明萹蓄提取液的制备
取将实施例1中的提取物，用总体积的15％的氯仿溶解，挥发溶剂氯仿，待大部分氯仿挥发后加入总体积1％的吐温-80混匀，等氯仿挥发干后，用蒸馏水稀释所得溶液，配成浓度为2mg/mL的萹蓄提取液。
实施例3：本发明萹蓄提取物的制备
将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入5体积倍的氯仿，渗漉提取3次，或连续回流提取7小时，过滤，低压浓缩，得本发明萹蓄提取物。
Claims (1)
1.一种萹蓄提取液在制备杀螨药物中的应用,其中所述的杀螨是指朱砂叶螨;其特征在于，该提取液由如下方法制备：
将萹蓄粉碎，置入多功能提取罐，加入5体积倍的氯仿，温浸或冷浸4天，过滤，重复3次，合并滤液，低压浓缩，得萹蓄提取物；
取上述提取物，用总体积的15 %的氯仿溶解，挥发溶剂氯仿，待大部分氯仿挥发后加入总体积1%的吐温-80混匀，等氯仿挥发干后，用蒸馏水稀释所得溶液，配成浓度为2 mg/mL的萹蓄提取液。
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