CN101490029A - 药物的4-羟基硫代苯甲酰胺衍生物 - Google Patents

Abstract

提供了药物的衍生物，所述衍生物包含与H₂S有关的部分4－羟基硫代苯甲酰胺，其通常与药物共价结合或与药物形成盐。本发明的化合物显示了较强的活性或者降低了副作用，或者两者兼有。

Description

药物的4-羟基硫代苯甲酰胺衍生物

本申请是作为2006年3月31日提交的PCT/CA2006/000484的后续部分提交的，后者要求2005年5月27日提交的PCT/CA2005/000819的优先权。本申请还是美国专利申请11/759,154的后续部分，后者是PCT/CA2006/000484的后续部分，并要求2006年6月6日提交的美国临时专利申请60/804,067的优先权。本申请还要求2006年7月18日提交的美国临时专利申请60/807,639和2007年1月30日提交的60/887,188的优先权。

技术领域

本发明涉及药物的与硫化氢(H₂S)释放有关的衍生物，其具有改善的活性和/或减小的副作用。特别地，本发明涉及包含与药物共价结合或与药物形成盐的H₂S-释放部分4-羟基硫代苯甲酰胺的药物衍生物。

背景技术

分别通过NO合酶由L-精氨酸和通过血红素加氧酶由血红素合成的一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)是众所周知的神经递质，其也涉及血管紧张度的调节。近来的研究表明，硫化氢(H₂S)在哺乳动物中是第三气体介质。H₂S是通过胱硫醚β-合酶(CBS)或胱硫醚γ-裂解酶(CSE)，由L-半胱氨酸合成的，其中这两种酶都使用吡哆醛5′-磷酸酯(维生素B₆)作为辅助因子。

据信，在血管平滑肌细胞、神经元、心肌细胞和胰脏β-细胞中，H₂S刺激ATP-敏感性钾通道(K_ATP)。此外，H₂S可以与活性氧和/或氮物质反应，这限制了它们的毒性效果，但是也减弱了它们的生理学功能，这与一氧化氮是类似的。

近来的研究表明，H₂S与血管紧张度、心肌收缩性、神经传递和胰岛素分泌有关。在动脉和肺动脉高压、阿尔茨海默病、胃粘膜损伤和肝硬化的各种动物模型中观测到了H₂S的缺乏。据信，外源性H₂S能够改善与缺血/再灌注损伤有关的心肌功能障碍，并减小抗炎药诱导的胃粘膜损害。

更特别地，已经观测到，H₂S发挥抗炎和止痛活性。H₂S是一种内源性物质，是由很多组织产生的，并影响很多的功能(Wang，Two’scompany，three’s a crowd：can H₂S be the third endogenous gaseoustransmitter？FASEB J 2002；16：1792 1798)。它已经显示出是一种血管扩张剂，可以抑制白血球在血管内皮上的附着(Wang，2002；Fiorucci等人，Inhibition of hydrogen sulfide generationcontributes to gastric injury caused by anti-inflammatorynonsteroidal drugs.Gastroenterology.2005；129：1210-1224)。此外，Fiorucci等人(2005)已经证明了，在大鼠中用H₂S供体预治疗可以减小NSAID-诱导的胃损害的严重程度。

据信，在很多疾病中会改变内源性H₂S的产生。此外，现在使用的药物可以影响H₂S的水平。例如，乙酰水杨酸和非甾体抗炎药(NSAIDs)已经显示出在胃肠粘膜中对于CSE-H₂S途径具有抑制效果(Fiorucci，S.等人)。这种效果可以加重这些药物诱导的对胃粘膜的损害。因此，H₂S水平的药理学调节可能具有潜在的治疗价值。

人们也认为，H₂S对于心血管病理学也具有作用，这样的话，就应当在具有各种动脉粥样硬化的各种危险因子例如动脉高血压、高脂血症、糖尿病等等的患者中检查H₂S水平。人们证明了活性氧物质(ROS)会抑制H₂S(Whiteman，M.等人，The novel neuromodulator hydrogensulfide：an endogenous peroxynitrate′scavenger′？，J Neurochem.2004；90：765-768)，考虑到氧化应激在很多疾病例如动脉粥样硬化、动脉高血压、阿尔茨海默病等等中的重要作用，认为过量的ROS产生可以导致H₂S不足。

用于咽峡炎、高血压和心律失常治疗的β-阻滞剂显示了呼吸方面的副作用，例如呼吸困难、支气管收缩等等，因此可能在受哮喘、支气管炎等等影响的患者中导致出现问题。因此，β-阻滞剂进一步使呼吸疾病例如哮喘恶化。因此，在哮喘患者中必须使用较低的所述药物剂量，以免进一步危害呼吸功能。因此，降低了β-阻滞剂的效力。

用于预防血栓形成现象的抗血栓药例如双嘧达莫，阿司匹林等等具有很多的副作用，例如胃痛、恶心和其他胃肠道并发症。在受到与氧化应激有关的病理影响的患者中，极大地降低了这些药物，例如阿司匹林的治疗作用或耐受性。

支气管扩张药，例如沙丁胺醇等等用于哮喘和支气管炎的治疗，对于胆碱能系统具有活性的药物用于病理例如尿失禁。它们的施用可以产生副作用，影响患者的心血管系统，导致心脏病和高血压患者出现问题。

在治疗呼吸器官的炎症状态中使用的祛痰药和粘痰溶解药会引起胃灼热和胃刺激，特别是在老年人中。

骨吸收抑制剂，例如二膦酸盐类(例如阿仑膦酸盐等等)是显示很高的胃肠毒性的药物。

用于治疗心血管和呼吸系统疾病的磷酸二酯酶抑制剂，例如西地那非、扎普司特的特征在于对于耐受性和/或效力方面出现类似的问题，特别是在氧化应激的病理学病症中。

抗过敏药，例如西替利嗪、孟鲁司特等等在所述的病理学病症中显示类似的问题，特别是在它们的效力方面。

抗血管紧张素药例如ACE-抑制剂例如依那普利、卡托普利等等，和受体抑制剂例如氯沙坦等等用于心血管疾病的治疗。这些药物可以产生呼吸方面的副作用(即，咳嗽等等)，特别是在氧化应激的病理学病症中。

胰岛素敏感型和低血糖型的抗糖尿病药，例如磺酰脲、甲苯磺丁脲、格列美脲、格列齐特、格列苯脲、烟酰胺等等在糖尿病并发症的预防中是没有效果的。它们的施用可以导致副作用，例如胃损害。这些现象在氧化应激的病理学病症中会变得更为强烈。

抗生素，例如氨苄西林、克拉霉素等等，和抗病毒药，例如阿昔洛维等等在它们的耐受性方面显示问题，例如它们会导致胃肠刺激。

抗肿瘤药，例如多柔比星、柔红霉素、顺铂等等在很多器官例如胃和肠中具有更高的毒性。所述毒性在氧化应激的上述病理中进一步恶化。

抗痴呆药，例如尼古丁和拟胆碱能药的特征是，特别是在氧化应激的病理情况中耐受性差。

因此，需要显示改善的治疗性质的可用药物，即其显示较低的毒性和/或更高的效力，以使得它们可以施用于氧化应激的疾病情况和/或内皮机能障碍，同时不会显示本领域药物的缺点。

令人惊奇地，本发明人已经发现，4-羟基硫代苯甲酰胺(本文也称作4-HTB或TBZ)在组织中是一种有效的H₂S释放部分，当与药物共价结合或它与药物形成盐时，形成了具有较低副作用的药物衍生物。例如，本发明的药物衍生物产生了足够低的胃肠和/或心血管副作用。

发明内容

在本发明的一个方面，提供药物的衍生物，所述衍生物包含与药物共价结合或与药物形成盐的H₂S-释放部分4-羟基硫代苯甲酰胺(本文也称作4-HTB或TBZ)。令人惊奇的是，当与单用药物，单用4-羟基硫代苯甲酰胺以及分别施用药物和4-羟基硫代苯甲酰胺的组合相比时，本发明的化合物显示了较强的活性，但是同时或显示了较小的副作用，或者两者兼有。

本发明的化合物使得血浆H₂S浓度有适度、短期的升高。不与理论相联系，仍然在生理学范围内的血浆H₂S浓度的短期升高可以导致药物的活性增强，减小了胃肠损害和/或降低了心血管毒性。

此外，令人惊奇地，当施用于高血压大鼠时，与只施用药物本身时所观测到的相比，本发明的化合物使得收缩血压的升高程度显著较小。血压升高的倾向减小可以降低心血管的副作用，而这种副作用是在长期使用一些药物时常见的。

根据本发明，提供了具有下列通式的化合物：

A—Y—X                  (式I)

其中A是药物基团，Y是选自由-C(O)O-、-C(O)NH-、-C(O)OC(O)-、-C(O)NHCH₂C(O)-、O、S、N、

或0组成的组，和X是

或

和该化合物的药学可接受的盐，其中当Y是0时，该药物衍生物可以是A和X的盐。在一个优选的实施方案中，A和X是通过酯键、酐键、硫酯键、酰胺键或偶氮键连接。在一个实施方案中，使用硫代氨甲酰基苯甲酸酯，而不是4-羟基硫代苯甲酰胺来与药物基团形成盐。

该药物可以选自很多已知种类的药物，包括，例如蛋白质、肽、核苷酸、减肥药、营养制品、皮质激素、弹性酶抑制剂、镇痛药、抗真菌剂、肿瘤治疗剂、止吐药、镇痛药、心血管剂、抗炎剂、驱虫药、抗心律失常药、抗生素(包括青霉素类)、抗凝血剂、抗抑郁药、抗糖尿病剂、抗癫痫药、抗组胺剂、抗高血压剂、抗毒蕈碱剂、抗分支杆菌剂、抗肿瘤剂、免疫抑制剂、抗甲状腺剂、抗病毒剂、抗焦虑镇静剂(安眠药和神经镇静药)、收敛剂、β-肾上腺素受体阻滞剂、心肌收缩剂、皮质甾类、镇咳药(祛痰药和粘液溶解药)、利尿剂、多巴胺能药(抗帕金森综合征剂)、止血剂、免疫剂、调血脂剂、肌肉松弛剂、拟副交感神经药、副甲状腺降钙素和二膦酸盐、前列腺素、性激素(包括甾类)、抗过敏剂、兴奋药和减食欲剂、拟交感神经剂、甲状腺剂、血管扩张剂和黄嘌呤。

下列药物在本发明中是特别有用的：

非甾体抗炎剂(NSAIDs)：乙酰水杨酸(ASA)、双氯芬酸、萘普生、吲哚美辛、氟比洛芬、舒林酸、布洛芬、醋氯芬酸、阿西美辛、苯噁洛芬、苄芬酸、溴芬酸、布氯酸、丁布芬、卡洛芬、塞来考昔、环洛芬、桂美辛、clidenac、氯吡酸、diflusinal、依托度酸、艾托考昔、芬布芬、芬氯酸、苯克洛酸、非诺洛芬、芬替酸、氟诺洛芬、呋喃洛芬、呋罗布芬、furafenac、异丁芬酸、吲哚洛芬、伊索克酸、酮洛芬、酮咯酸、洛索洛芬、氯那唑酸、芦米考昔、甲嗪酸、甲芬那酸、甲氯芬那酸、美洛昔康、萘丁美酮、吡咯米酸、双水杨酯、咪洛芬、奥沙普秦、奥昔平酸、帕瑞考昔、保泰松、吡洛芬、吡罗昔康、pirozolac、丙替嗪酸、罗非考昔、水杨酸钠、舒洛芬、噻洛芬酸、托美丁、伐地考昔、佐美酸等等；

止痛药：对乙酰氨基酚、醋氨沙洛、氨氯苯噁嗪、乙酰水杨酸2-氨基-4-甲基吡啶酸、乙酰水杨酰水杨酸、阿尼利定、苯噁洛芬苄吗啡、5-溴水杨酰醋酸、布西丁、丁丙诺啡、布托啡诺、辣椒素、辛可芬、西拉马朵、氯美辛、氯尼辛、可待因、地素吗啡、地佐辛、双氢可待因、双氢吗啡、地美庚醇、地匹乙酯、依他佐辛、乙托沙秦、乙基吗啡、丁香酚、夫洛非宁、磷柳酸、格拉非宁、氢可酮、氢吗啡酮、羟基哌替啶、异丁芬酸、对乳酰乙氧苯胺、左啡诺、美普他酚、美他佐辛、美托酮、吗啡、纳布啡、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲吗啡、羟考酮、羟吗啡酮、喷他佐辛、非那佐辛、非诺可、苯哌利定、保泰松、水杨酸苯酯、非尼拉朵、水扬苷、水杨酰胺、tiorphan、曲马多、双醋瑞因、阿克他利等等；

抗结肠炎药：4-或5-氨基水杨酸、曲美布汀等等；

呼吸和泌尿生殖管药(支气管扩张剂和对胆碱能系统有活性的药物，祛痰剂/抗变应性抗组胺药)：支气管扩张剂和对胆碱能系统有活性的药物：醋茶碱、沙丁胺醇、班布特罗、巴米茶碱、甲硫贝弗宁、比托特罗、卡布特罗、克仑特罗、氯丙那林、二羟西君、difylline、麻黄碱、肾上腺素、依普罗醇、etafredine、乙基去甲肾上腺素、乙羟茶碱、非诺特罗、氟托溴铵、海索那林、异丙托溴铵、异他林、异丙肾上腺素、马布特罗、奥西那林、奥昔布宁、氧托溴铵、吡布特罗、丙卡特罗、普罗托醇、丙羟茶碱、瑞普特罗、利米特罗、沙美特罗、索特瑞醇、特布他林、1-teobromine乙酸、噻托溴铵、曲托喹酚、妥洛特罗、扎普司特、环戊君、NS-21、2-羟基-2，2-二苯基-N-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基甲基)乙酰胺等等；

祛痰药/粘液溶解药：氨溴索、溴己新、多米奥醇、厄多司坦、愈创木酚、愈创甘油醚、碘化甘油、来托司坦、美司钠、索布瑞醇、司替罗宁、萜二醇、硫普罗宁等等；

止喘药/抗变应性抗组胺药：阿伐斯汀、阿洛拉胺、氨来呫诺、西替利嗪、氯苯西泮、色甘酸酯、色甘酸钠、依匹斯汀、非索非那定、福莫特罗、组胺、羟嗪、左卡巴斯汀、洛度沙胺、马布特罗、孟鲁司特、奈多罗米、瑞吡司特、塞曲司特、甲磺司特、托磺沙星、特非那定、噻拉米特、漆酚、溴己新等等；

ACE-抑制剂：阿拉普利、贝那普利、卡托普利、西罗普利、西拉普利；地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、氯沙坦、莫维普利、naphthopidil、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利、群多普利、乌拉地尔等等；

β-阻滞剂：醋丁洛尔、阿普洛尔、氨磺洛尔、阿罗洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、贝凡洛尔、布库洛尔、布非洛尔、丁呋洛尔、布尼洛尔、布拉洛尔、butolfilol、卡拉洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、塞利洛尔、塞他洛尔、地来洛尔、依泮洛尔、艾司洛尔、茚诺洛尔、拉贝洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、美托洛尔、莫普洛尔、纳多洛尔、萘肟洛尔、奈比洛尔、硝苯洛尔、nipridalol、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普拉洛尔、丙萘洛尔、普萘洛尔、索他洛尔、硫氧洛尔、他林洛尔、特他洛尔、替利洛尔、噻吗洛尔、托利洛尔、希苯洛尔等等；

抗血栓药和血管扩张剂：醋托芬、乙酰水杨酸、阿加曲班、巴美生、琥珀苯呋地尔、苯碘达隆、倍他司汀、溴长春胺、丁苯碘胺、胞磷胆碱、氯苄呋醇、氯吡格雷、环扁桃酯、达肝素、双嘧达莫、dropenilamine、依诺肝素、芬地林、艾芬地尔、伊洛前列素、吲哚布芬、伊波格雷、异克舒令、肝素、拉米非班、midrodine、那屈肝素、烟酰醇、布酚宁、奥扎格雷、哌克昔林、苯丙醇胺、普尼拉明、罂粟林、瑞肝素钠盐、利多格雷、舒洛地尔、替诺非君、亭扎肝素、三氟柳、尼可占替诺等等；

抗糖尿病药：阿卡波糖、氨磺丁脲、格列波脲格列噻唑、米格列醇、瑞格列奈、曲格列酮、1-丁基-3-溴本辛-脲、托瑞司他、烟酰胺等等；

抗肿瘤药：安西他滨、安曲霉素、阿扎胞苷、偶氮丝氨酸、6-氮尿苷、比卡鲁胺、卡柔比星、嗜癌霉素、苯丁酸氮芥、氯脲菌素、阿糖胞苷、柔红霉素、地磷酰胺、秋水仙胺、二甲叶酸、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多西他赛、去氧氟尿苷、多柔比星、屈洛昔芬、依达曲沙、依氟鸟氨酸、依诺他滨、表柔比星、环硫雄醇、依他硝唑、依托泊苷、芬维A胺、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、己烷雌酚、伊达比星、氯尼达明、甘露莫司汀、美法仑、美诺立尔、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、二溴甘露醇、二溴卫矛醇、丝裂霉素、米托蒽醌、莫哌达醇、麦考酚酸、甲叶酸、诺拉霉素、紫杉醇、喷司他汀、吡柔比星、吡曲克辛、普卡霉素、鬼臼酸、卟吩姆钠、泊非霉素、丙帕锗、嘌罗霉素、雷莫司汀、维甲酸、罗喹美克、链黑霉素、链佐星、替尼泊苷、细交链子包菌酮酸、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤、雷替曲塞、托泊替康、三甲曲沙、杀结核菌素、乌苯美司、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、佐柔比星等等；

抗溃疡药：ε-乙酰亮氨酸、阿巴前列素、西曲酸酯、西咪替丁、依卡倍特、恩前列素、艾沙拉唑、伊索拉定、米索前列醇、奥美拉唑、奥诺前列素、泮托拉唑、普劳诺托、利奥前列素、罗沙前列醇、罗曲酸、索法酮、曲莫前列素等等；

抗高血脂症药(他汀类)：阿托伐他汀、西司他汀、制皮菌素、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、制霉菌素、喷司他汀、胃酶菌素、普伐他汀钠、辛伐他汀等等；

抗生素：氮卓西林、阿莫西林、氨苄西林、阿帕西林、阿哌环素、阿扑西林、叠氮氯霉素、阿度西林、阿洛西林、氨曲南、苯沙酸、苄基青霉酸、比阿培南、二环霉素、卷曲霉素、羧苄西林、卡茚西林、卡芦莫南、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢孟多、西替利嗪、头孢西酮、头孢唑林、头孢拉腙、头孢克定、头孢地尼、头孢托仑、头孢吡肟、头孢他美、头孢克肟、头孢甲肟、头孢美唑、头孢米诺、头孢地秦、头孢尼西、头孢哌酮、头孢雷特、头孢噻肟、头孢替坦、头孢替安、头孢西丁、头孢唑兰、头孢咪唑、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢丙烯、头孢沙定、头孢磺啶、头孢他啶、头孢特仑、头孢替唑、头孢布烯、头孢噻呋、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑南、头孢赛曲钠、头孢氨苄、头孢甘酸、头孢噻啶、头孢菌素C、头孢噻吩、头孢匹林钠、头孢拉定、氯霉素、金霉素、西诺沙星、克拉维酸、氯甲西林、氯唑西林、环青霉素、环丝氨酸、地美环素、双氯西林、依匹西林、fenbecillin、氟氧头孢、氟氯西林、海他西林、亚胺培南、仑氨西林、氯碳头孢、赖甲环素、磺胺米隆、甲氯环素、美罗培南、美坦西林、美他环素、甲氧西林钠、美洛西林、米诺环素、拉氧头孢、莫匹罗星、堆囊粘菌素、负霉素、新生霉素、苯唑西林、帕尼培南、青霉素G钾盐、阿地西林、阿美西林、青霉素V、非奈西林钾盐、匹哌环素、哌拉西林、吡利霉素、泊非霉素、丙匹西林、喹那西林、利替培南、罗利环素、山环素、西地霉素、大观霉素、舒巴坦、磺苄西林、替莫西林、四环素、替卡西林、替吉莫南、杀结核菌素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、恩维霉素、红霉素、交沙霉素、麦迪霉素、美欧卡霉素、竹桃霉素、利福布汀、利福米特、fiamycin、利福昔明、罗他霉素、螺旋霉素、醋竹桃霉素、紫霉素、维吉霉素；阿米卡星、安普霉素、阿贝卡星、地贝卡星、双氢链霉素、福提霉素、庆大霉素、小诺米星、新霉素、奈替米星、巴龙霉素、核糖霉素、西索米星、大观霉素、链霉素、妥布霉素、丙大观霉素；巴氨西林、头孢卡品酯、头孢泊肟酯、帕尼培南、匹氨西林、pivcefalexin、舒他西林、酞氨西林；卡波霉素、克林霉素、林可霉素、米卡霉素、罗沙米星、环丙沙星、克林沙星、二氟沙星、依诺沙星、恩氟沙星、氟罗沙星、氟甲喹、格帕沙星、洛美沙星、那氟沙星、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、帕珠沙星、培氟沙星、吡哌酸、吡咯米酸、芦氟沙星、沙氟沙星、tosulfoxain、曲伐沙星、氯莫环素、胍甲环素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪；对氨基水杨酸、对氨基水杨酸酰肼、氯法齐明、去氧双氢链霉素、乙胺丁醇、葡烟综、异烟肼、奥匹烟肼、非那米柳、利福平、利福喷汀、水杨烟肼、4-4′-磺基二苯胺、氨苯砜乙酸、氨苯砜、琥珀氨苯砜、对磺胺酰苄胺、噻唑砜、乙酰磺胺林、磺胺米隆、4′-(甲基氨磺酰基)sulfanilanilide、柳氮磺嘧啶、苯酰磺胺、磺胺醋酰、磺胺氯达嗪、磺胺柯定、磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺戊烯、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺乙二唑、磺胺脒、磺胺胍诺、磺胺林、磺胺甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲氧甲嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺甲噻唑、磺胺美曲、磺胺米柯定、磺胺噁唑、磺胺、2-对磺胺酰苯氨基乙醇、N，4-磺胺酰磺胺、磺胺酰脲、N-磺胺酰-3，4-丙谷胺、磺胺培林、磺胺苯吡唑、磺胺普罗林、磺胺吡嗪、磺胺吡啶、磺胺异噻唑、磺胺均三嗪、磺胺噻唑、磺胺硫脲、磺胺索嘧啶、磺胺异噁唑、4-磺胺基水杨酸；负霉素、卡芦莫南、氯羟喹、硝羟喹啉、精氨酸、甲硝唑等等；

抗病毒药：阿昔洛维、金刚烷胺、西多福韦、阿糖胞苷、去羟肌苷、双脱氧腺苷、依度尿苷、泛昔洛韦、氟尿苷、更昔洛韦、碘苷、印地那韦、乙氧丁酮醛、拉米夫定、MADU、喷昔洛韦、鬼臼毒素、利巴韦林、金刚乙胺、沙奎那韦、索立夫定、司他夫定、曲氟尿苷、伐昔洛韦、阿糖腺苷、珍那佐酸、扎西他滨、齐多夫定；等等；

骨吸收抑制剂(二膦酸盐)：阿伦膦酸、布替膦酸、依替膦酸、奥昔膦酸、帕米膦酸、利塞膦酸等等；

抗痴呆药：阿米利定、拉扎贝胺、莫非吉兰、沙贝鲁唑、奥拉西坦、伊匹达克林、奈拉西坦、他克林、维吖啶等等。

根据本领域已知的方法来制备上述前体药物。参见，例如TheMerck Index，13^th Edition(2001)，Merck & Co.，Whitehouse Station，N.J.，作为参考引入本文。当可用时，可以使用相应的异构体，包括旋光异构体。

本发明的化合物的药学可接受的盐，例如与碱金属和碱土金属，无毒性的胺和氨基酸的盐也是本发明的一部分。本发明的化合物的优选盐是与精氨酸和胍丁胺的盐。也包括药学可接受的酸加成盐。

根据本发明的衍生物可以在前体药物所治疗的适应症中使用，这可以得到这些药物如下文所例举的优点。

本发明的NSAID的衍生物的耐受性是非常好的并且非常有效的，甚至是在生物体非常疲惫并且在氧化应激的条件下时。NSAID衍生物可以在那些其中炎症发挥显著的病理作用的病理中使用，所述病理是例如，但不限于，癌症、哮喘、心肌梗塞。

更特别地，本发明的NSAID的衍生物可以用于，但不限于，在患者中治疗炎症，和用于治疗与炎症有关的疾病，例如，在治疗疼痛和头痛中作为止痛药，或者在治疗发烧中作为退热药。例如，本发明的化合物可以用于治疗关节炎，包括但不限于，类风湿性关节炎、脊椎关节炎、痛风性关节炎、骨关节炎、全身性红斑狼疮和幼年型关节炎。本发明的这些化合物可以用于治疗哮喘、支气管炎、经期痉挛、腱炎、滑囊炎，与皮肤有关的病症例如牛皮癣、湿疹、烧伤和皮肤炎，手术后的炎症包括由眼外科手术例如白内障外科手术和屈光外科手术导致的炎症。本发明的化合物也可以用于治疗胃肠病症，例如炎性肠病、克劳恩病、胃炎、过敏性肠综合征和溃疡性结肠炎，用于预防或治疗癌症，例如结肠直肠癌。本发明的化合物可以用于治疗在一些疾病中的炎症，所述疾病是例如血管疾病、偏头痛、结节性动脉周围炎、甲状腺炎、再生障碍性贫血、何杰金病、硬化病、风湿热、I型糖尿病、神经肌节点疾病包括重症肌无力、白质病包括多发性硬化、结节病、肾病综合征、贝切特综合征、多肌炎、龈炎、肾炎、过敏症、损伤后发生的肿胀、心肌缺血等等。该化合物也可以用于治疗眼部疾病，例如视网膜炎、视网膜病、葡萄膜炎、眼畏光和眼组织的急性损伤。该化合物也可以用于治疗肺部炎症，例如与病毒感染有关的那些和囊性纤维化。该化合物也可以用于治疗某些中枢神经系统疾病，例如皮质性痴呆例如阿尔茨海默病。本发明的化合物可以作为抗炎剂，用于例如治疗关节炎，并且具有副作用显著更小的附加益处。这些化合物可以用于治疗变应性鼻炎、呼吸窘迫综合征、内毒素休克综合征、动脉粥样硬化和由中风、缺血和创伤导致的中枢神经损害。该化合物也可以用于治疗疼痛，但不限于术后痛、牙痛、肌肉痛、和癌症导致的疼痛。除了用于人类的治疗，这些化合物可以用于治疗哺乳动物，包括马、狗、猫、大鼠、小鼠、羊、猪等等。

本发明的抗结肠炎药物的衍生物，例如4-或5-氨基水杨酸衍生物、曲美布汀衍生物等等可以用于预防或治疗各种疾病，特别是胃肠道的炎症病症，包括但不限于，口部的炎症，例如粘膜炎、感染性疾病(例如，病毒、细菌和真菌疾病)和克劳恩病；食道的炎症，例如食道炎、化学性损伤(例如，吞下碱液)导致的病症、胃食管返流疾病、胆汁酸返流、Barrett食管、克劳恩病和食管狭窄；炎症例如胃炎(例如，幽门螺旋杆菌、酸-消化性疾病和萎缩性胃炎)、乳糜泻、消化性溃疡病、胃的癌前期病变、非溃疡性消化不良和克劳恩病；胃部的炎症，例如克劳恩病、细菌生长过度、消化性溃疡病和肠的裂隙；结肠的炎症，例如克劳恩病、溃疡性结肠炎、过敏性肠综合征、传染性结肠炎(例如，假膜性结肠炎例如艰难梭菌结肠炎、沙门菌肠炎、志贺菌感染、耶尔森菌病、隐孢子虫病、微孢子虫感染和病毒感染)、辐射诱发的大肠炎、免疫妥协的宿主中的大肠炎(例如，盲肠炎)、结肠的癌变前病症(例如，肠的发育不良、炎症和结肠息肉)、直肠炎、与痔疮有关的炎症、痉挛性肛部痛和直肠裂；肝胆囊和/或胆道病症，例如胆管炎、硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬变和胆囊炎；和肠痈。

他汀类药物用于预防和治疗动脉粥样硬化，其会在具有动脉粥样硬化或有动脉粥样硬化风险的个体中导致胸痛、心脏病发作、中风和间歇性跛行。动脉粥样硬化的危险因素包括胆固醇水平异常升高、心脏病发作的家族史(特别是在年轻时)、年龄增加和糖尿病。大多数个体是由于胆固醇水平升高而使用他汀类。尽管胆固醇减少是重要的，心脏病是复杂的并且其他因素例如炎症也可以发挥作用。但是，已知他汀类显示了副作用，例如，肝病、可能的致癌潜力、肌肉副作用和肌病。

本发明的他汀衍生物可以减小与他汀类有关的副作用和/或具有增强的药理活性。令人惊奇地，当与单用相应的他汀相比较时，辛伐他汀衍生物，琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰基氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯在3，10和30μM的浓度下显著减少了血小板聚集。此外，当与单用相同浓度的辛伐他汀相比，本发明的辛伐他汀衍生物导致血小板cAMP显著增加。

本发明的肾上腺素能阻滞剂，α-或β-阻滞剂可以用于预防或治疗高血压、咽峡炎、二尖瓣脱垂、充血性心力衰竭、心肌梗塞、青光眼、偏头痛、心动过速和震颤，同时减小了副作用。

本发明的抗凝血药物衍生物，例如阿司匹林的衍生物具有抗血小板活性，并具有增强的胃耐受性。抗凝血药物的主要适应症是预防和治疗静脉血栓栓塞(VTE)，在心房颤动的患者中预防中风，预防和治疗急性冠状动脉综合征(ACS)。

支气管扩张剂的衍生物和对胆碱能系统具有活性的药物的衍生物可以通过松弛固定在气管周围的肌肉带来缓解哮喘症状。在短期的作用方式中，支气管扩张剂的衍生物缓解或停止哮喘症状，并且在哮喘发作期间是非常有帮助的。在长期作用方式中，支气管扩张剂的衍生物有助于控制哮喘症状并预防哮喘发作。该衍生物降低了影响心血管系统的副作用，例如心动过速、高血压等等。

本发明的祛痰剂和粘液溶解药的衍生物可以用于松弛和清洁来源于呼吸道的粘液和痰液。当如本发明所述与4-羟基硫代苯甲酰胺衍生时，可以改善祛痰剂和粘液溶解药的胃肠耐受性。

本发明的二膦酸盐的衍生物可以用于治疗或预防钙代谢障碍或疾病，例如骨质疏松症、别赫捷列夫病、骨转移、尿石病、异向骨化、类风湿性关节炎、骨关节炎或变性关节炎。本发明的衍生物可以减小与胃肠道有关的毒性。

本发明的磷酸二酯酶(PDE)抑制剂(支气管扩张剂)的衍生物的治疗效力得以改善，并减小了副作用。已经证明了PDE抑制剂具有与抗炎药相同的潜力，特别是在气管疾病中。它们抑制炎症信号、例如细胞因子的释放，并抑制活性氧物质的产生。在炎性气管疾病例如，哮喘、COPD和鼻炎中，PDE抑制剂具有与非甾体疾病控制剂相同的很高的治疗和商业上的潜力。

对于抗白血病药物、ACE抑制剂、抗糖尿病药、抗生素、抗病毒和抗肿瘤药的衍生物，也可以观测到更好的效力和/或较小的副作用。

可以如下制备本发明的化合物：

方案1

方案1如下所示，在实施例NSAID衍生物，[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯的合成中使用。在该方案中，在硫化氢释放部分与NSAID共价结合后，使用Lawesson试剂在该H₂S释放部分上加入硫基。

双氯芬酸(1)，具有一个游离的羧基，首先将其溶解于二甲基甲酰胺，并加入羟基苯并三唑(HOBt)和1，3-二环己基碳二亚胺(DCC)。在适合形成本发明的化合物的前体(例如，4-氨甲酰基苯基2-(2-(2，6-二氯苯基氨基)苯基)乙酸酯(2))的条件下，向该混合物中加入4-羟基苯甲酰胺，其中该前体缺少一个硫。加入可以添加一个硫基的适当化合物，例如Lawesson试剂来形成本发明的化合物(例如，[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(3)。

根据要治疗的具体病症或疾病状态，患者可以以任何适当的治疗有效和安全剂量来施用本发明的化合物，这是本领域技术人员很容易即可确定的。最期望的是，这些化合物以每天约1到约2000mg的剂量范围，以单次或分次剂量施用，尽管必要时根据所要治疗的患者的体重和情况以及所选择的特定施用途径可以进行改变。应当理解的是，用于形成本发明的化合物的特定化合物会影响剂量。然而，最期望的剂量水平是，约0.1到约100mg/kg，优选约5到90mg/kg，更优选约5到50mg/kg的范围。然而，根据所要治疗的人的体重和情况，它们对所述药物的个体应答，以及所选则的药物制剂的类型和进行所述施用的时间和间隔，可以进行改变。在一些情况中，比上述范围的下限更低的剂量水平可以是更适当的，而在另一些情况中，可以使用更大的剂量而不导致任何有害的副作用，条件是，首先将所述大剂量分成在全天施用的几个小剂量。

本发明的化合物可以以任何药物制剂的形式施用，其性质将取决于施用的途径。可以通过常规方法，使用相容的、药学可接受的赋形剂或载体来制备这些药物制剂。这些组合物的例子包括胶囊、片剂、透皮贴剂、锭剂、含片、喷雾剂、糖浆、粉剂、颗粒剂、凝胶剂、酏剂、栓剂等等，用于制备临时的溶液，可注射的制剂、直肠、鼻、眼部、阴道的制剂。优选的施用途径是口服和直肠途径。

对于口服，包含各种赋形剂例如微晶纤维素、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸二钙和甘氨酸的片剂可以与各种崩解剂例如淀粉(优选玉米、马铃薯和木薯淀粉)、海藻酸和某些复合硅酸盐，以及颗粒粘合剂例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯胶一起使用。此外，润滑剂例如硬脂酸镁、月桂硫酸钠和滑石可以用于制片目的。在明胶胶囊中也可以使用相似类型的固体组合物作为填充剂；在这个方面优选的物质包括乳糖或奶糖；以及高分子量聚乙二醇。当需要口服水性混悬液和/或酏剂时，可以将活性成分与增甜剂或调味剂、着色物质，以及如果需要乳化剂和/或混悬剂，并与稀释剂例如水、乙醇、丙二醇、甘油以及其各种组合联合。

剂型可以设计成用于立即释放、控制释放、延长释放、缓释或定向缓释。这些术语的定义是本领域技术人员已知的。此外，聚合物混合物的组合物、包衣的基质组合物、多颗粒组合物、包衣的多颗粒组合物、基于离子交换树脂的组合物、基于渗透的组合物或生物可降解的聚合物组合物可以影响剂型的释放性质。不希望与理论相联系，据信通过良好的扩散、溶解、浸蚀、离子交换、渗透或其组合可以影响释放。

对于胃肠外施用，可以使用活性化合物在芝麻或花生油中或在水性丙二醇溶液中的溶液。如果必要，水性溶液应当是适当缓冲的(优选pH大于8)，液体稀释剂首先具有等张性。水性溶液适合用于静脉注射的目的。通过本领域技术人员公知的标准制药技术很容易即可实现在无菌条件下所有这些溶液的制备。

下面的实施例进一步描述，并使本领域的普通技术人员能够实施和使用本发明。然而，应当认识到，这些实施方案是用于解释本发明的目的，而不应解释为限制由权利要求所定义的本发明的范围。

附图简述

附图1显示的是在用5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)，单用美沙拉秦，单用4-羟基硫代苯甲酰胺和美沙拉秦和4-羟基硫代苯甲酰胺(4-HTB)的混合物治疗后，具有TNBS-诱导的结肠炎的小鼠的疾病活动得分。

附图2显示的是在用5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)，单用美沙拉秦，单用4-羟基硫代苯甲酰胺(4-HTB)和美沙拉秦和4-HTB的混合物治疗后，在具有TNBS-诱导的结肠炎的小鼠中的髓过氧化酶(MPO)活性。

附图3显示的是与或不与格列苯脲使用时，美沙拉秦和5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)的痛觉得分。

附图4显示的是5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)、美沙拉秦和4-羟基硫代苯甲酰胺(4-HBT)的痛觉得分。

附图5是在阿斯匹林或阿斯匹林加格列苯脲存在下，在60-65分钟时5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)的白血球附着的柱图。

附图6的柱图，显示的是半胱氨酸、5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)和4-羟基硫代苯甲酰胺(4-HBT)的H₂S产生。

附图7a显示了在内脏痛觉的大鼠模型中，使用载体、马来酸曲美布汀和曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯(化合物III)的知觉得分(AWR得分)。

附图7b显示了在在内脏痛觉的大鼠模型中，仅使用载体和硫代氨甲酰基苯甲酸酯的的知觉得分(AWR得分)。

附图8显示了在用载体、双氯芬酸、4-羟基硫代苯甲酰胺(TBZ)和[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)治疗的大鼠中测定的胃损害得分。

附图9显示了在用载体、双氯芬酸、4-羟基硫代苯甲酰胺(TBZ)和[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)治疗的大鼠中产生的胃前列腺素E₂(PGE₂)的量。

附图10显示了在用载体、萘普生和2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)治疗的大鼠中测定的胃损害得分。

附图11显示了在附图10的大鼠的血中促凝血素B₂合成。

附图12显示了当用载体、双氯芬酸和[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)治疗时，用大鼠气袋方法在大鼠的皮下袋中产生的渗出PGE₂的量。

附图13显示了在附图12的大鼠中全血血栓烷B₂(TXB₂)的量。

附图14显示了在用载体、双氯芬酸和[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)治疗的大鼠中，对爪体积增大的抑制。

附图15显示了当用载体、萘普生和2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)治疗时，用大鼠气袋方法在大鼠的皮下袋中产生的渗出PGE₂的量。

附图16显示了作为吲哚美辛和[1-(4-氯-苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1-H-吲哚-3-基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XIX)浓度的函数的由人血导致的血栓烷合成(ng/ml)(体外)。

附图17显示了在用载体、双氯芬酸、2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)、萘普生和2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)每日治疗，共1周后，在大鼠中胃溃疡的表面积，单位为mm²。

附图18显示了在用载体、萘普生和2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)治疗的大鼠中收缩期血压(mm Hg)的升高。

附图19显示了当在缓冲液和在肝匀浆中培养时，4-羟基硫代苯甲酰胺(TBZ)和[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)产生的硫化氢的量。

附图20显示了辛伐他汀和琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢-吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物I)对于ADP-诱导的人血小板聚集的作用。

附图21显示了辛伐他汀和琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢-吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物I)对于人血小板cAMP浓度的作用。

具体实施方式

化合物的制备

在具有荧光指示剂的Macherey-Nagel硅胶50板上进行薄层色谱法，用UV光(254nm)使该板可视化。Kieselgel 60是用于柱色谱法。所有合成试剂都购自Aldrich-Sigma Chemical Company，并且无需纯化即可使用。溶剂是分析纯试剂级的或具有更高的纯度，并如所提供时使用。Buchi R-114旋转蒸发仪用于真空下除去溶剂。通过质子¹H-NMR和¹³C-NMR光谱学地来鉴定结构。将光谱记录在Varian Mercuryplus 400仪器上。化学位移参照的是作为内标物的Me₄Si。所合成的产物的质谱是在Applied Biosystem API 2000质谱仪上进行测定的。熔点是在Buchi B-540设备上进行测定的。通过RP-HPLC确定最终化合物的纯度。将柱与Rheodyne model 7725注射器、Waters 600 HPLC系统，设置为215或235nm的Waters 486可调的吸光度检测器和Waters 746图表记录器相连。所合成的化合物给出了令人满意的元素分析；其中仅通过元素的符号来表示分析结果，结果在理论值的±0.4％内。

实施例1

[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(也称作化合物XVII)的合成

4-氨甲酰基苯基2-[2-(2，6-二氯苯基氨基)-苯基]乙酸酯(5)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(双氯芬酸，890mg，3.0mmol)的50mL的N，N-二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(445mg，3.3mmol)和DCC(680mg，3.3mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(4，616mg，4.5mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌3小时。在过滤后，减压蒸发滤液，将这样得到的油性残留物溶解于氯仿中；用盐水洗涤有机层，在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品5负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9/1)洗脱，从其中获得了4-氨甲酰基苯基2-(2-(2，6-二氯苯基氨基)苯基)乙酸酯(5)(212mg，17％收率)。

[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(6)的合成

将4-氨甲酰基苯基2-(2-(2，6-二氯苯基氨基)苯基)乙酸酯(5，480mg，1.14mmol)和Lawesson试剂(460mg，1.14mmol)溶解于20ml的无水苯中。加热反应至50℃，并搅拌6小时。减压除去溶剂；通过硅胶柱(二氯甲烷/甲醇9.5/0.5)纯化粗残留物，以提供纯化合物6(446mg，91％收率)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ 4.07(s，2H)，6.59(d，1H)，6.67(s，1H)，6.98(t，1H)，7.14(t，1H)，7.19(d，1H)，7.28(t，1H)，7.33(d，2H)，7.63(s，1H)，7.97(d，2H)；

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 38.8，118.8，121.8，122.6，123.7，124.4，128.7，129.1，129.6，131.2，137.2，137.8，142.9，153.5，170.5，193.2，201.7

MS(EI)，m/e 431(M⁺)；

m.p.：170-172℃。

实施例2

4-硫代氨甲酰基苯基2-(2-(2-氯-6-氟苯基氨基)-5-甲基苯基)乙酸酯(也称作化合物XVIII)的合成

4-氨甲酰基苯基-2-(2-(2-氯-6-氟苯基氨基)-5-甲基苯基)乙酸酯(5)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(芦米考昔，223mg，0.75mmol)的15mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(111mg，0.825mmol)和DCC(170mg，0.825mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(4，154mg，1.125mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌3小时。在过滤后，减压蒸发滤液，将这样得到的油性残留物溶解于氯仿中；用盐水洗涤有机层，在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品5负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9/1)洗脱，从其中获得了4-氨甲酰基苯基-2-(2-(2-氯-6-氟苯基氨基)-5-甲基苯基)乙酸酯(5)(111mg，35％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基-2-(2-(2-氯-6-氟苯基氨基)-5-甲基苯基)乙酸酯(6)的合成

将4-氨甲酰基苯基-2-(2-(2-氯-6-氟苯基氨基)-5-甲基苯基)乙酸酯，5(110mg，0.27mmol)和Lawesson试剂(109mg，0.27mmol)溶解于15ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌3小时。减压除去溶剂；通过硅胶柱(二氯甲烷/甲醇9.5/0.5)纯化粗残留物，以提供纯化合物6(59mg，51％收率)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ 2.32(s，3H)，4.01(s，2H)，6.46(s，1H)，6.70(d，1H)，6.92(t，1H)，7.01(d，2H)，7.11(d，2H)，7.19(d，1H)，7.62(s，NH)，7.84(d，2H)；

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 20.8，30.7，115.1，119.2，122.0，122.3，124.1，124.9，126.1，128.2，129.2，132.3，134.8，138.6，140.9，153.7，154.6，156.2，170.4，201.7

MS(EI)，m/e 429(M⁺)；

m.p.：120-122℃。

实施例3

2-乙酰氧基-苯甲酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(也称作化合物XVI)的合成

4-氨甲酰基苯基2-乙酰氧基苯甲酸酯(5)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(乙酰水杨酸，500mg，2.77mmol)的15mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(412mg，3.05mmol)和DCC(628mg，3.05mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(4，418mg，3.05mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌3小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于氯仿中；用盐水洗涤有机层，在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品5负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9/1)洗脱，从其中获得4-氨甲酰基苯基2-乙酰氧基苯甲酸酯(5)(410mg，47％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基-2-(2-(2-氯-6-氟苯基氨基)-5-甲基苯基)乙酸酯(6)的合成

将4-氨甲酰基苯基2-乙酰氧基苯甲酸酯，5(410mg，1.37mmol)和Lawesson试剂(554mg，1.37mmol)溶解于35ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌3小时。减压除去溶剂；通过硅胶柱(二氯甲烷/甲醇9.5/0.5)纯化粗残留物，以提供470mg的粗化合物6。通过制备型RP-HPLC来纯化所得到的化合物，所述制备型RP-HPLC是通过两种溶剂系统来进行的：A：在0.1％TFA中的100％乙腈，B：在0.1％TFA中的100％H₂O(在35分钟内的线性梯度为10％A到60％A，在254nm处进行UV检测，流速30mL/分钟)，得到了纯化合物6(324mg，71％收率)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ 2.30(s，3H)，7.17(d，1H)，7.21(d，2H)，7.40(t，1H)，7.66(t，1H)，7.94(d，2H)，8.2(d，1H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 21.2，121.9，122.4，124.3，126.4，128.7，132.4，135.1，137.3，151.5，153.7，162.7，169.8，201.8

MS(EI)，m/e 316(M⁺)；

m.p.：154-156℃。

实施例4

[1-(4-氯-苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1-H-吲哚-3-基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(也称作化合物XIX)的合成

4-氨甲酰基苯基-2-[1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸酯(5)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(吲哚美辛，3g，8.38mmol)的60mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(1.25g，9.22mmol)和DCC(1.9g，9.22mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(4，1.72g，12.6mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌2小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于乙酸乙酯中；用盐水、NaHCO₃ 5％、柠檬酸10％洗涤有机层，然后在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品5负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，从其中获得4-氨甲酰基苯基-2-[1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸酯(5)(479mg，12％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基-2-[1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸酯(6)的合成

将4-氨甲酰基苯基-2-[1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-吲哚-3-基]-乙酸酯，5(340mg，0.71mmol)和Lawesson试剂(287mg，0.71mmol)溶解于15ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌4小时。减压除去溶剂；通过硅胶柱(二氯甲烷/甲醇9.5/0.5)纯化粗残留物，以提供178mg的粗化合物6。通过制备型RP-HPLC来纯化所得到的化合物，所述制备型RP-HPLC是通过两种溶剂系统来进行的：A：在0.1％TFA中的100％乙腈，B：在0.1％TFA中的100％H₂O(在30分钟内的线性梯度为10％A到80％A，在254nm处进行UV检测，流速30mL/分钟)，得到了纯化合物6(56mg，16％收率)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ 2.45(s，3H)，3.83(s，3H，OCH₃)，3.91(s，2H)，6.70(d，1H)，6.88(d，1H)，7.04(s，1H)，7.11(d，2H)，7.47(d，2H)，7.67(d，2H)，7.88(d，2H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 13.6，30.8，56.0，101.5，111.9，112.0，115.3，121.7，128.6，129.4，130.8，131.2，131.4，134.0，136.8，137.1，139.7，156.2，157.9，167.6，169.8，201.8

MS(EI)，m/e 493(M⁺)；

m.p.：224-226℃。

实施例5

2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(也称作化合物XX)的合成

4-氨甲酰基苯基2-(2-甲氧基萘-6-基)丙酸酯(5)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(萘普生，4g，17.4mmol)的80mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(2.59g，19.14mmol)和DCC(2.59g，19.14mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(4，3.58g，26.1mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌2小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于乙酸乙酯中；用盐水、NaHCO₃ 5％、柠檬酸10％洗涤有机层，然后在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品5负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，从其中获得4-氨甲酰基苯基2-(2-甲氧基萘-6-基)-丙酸酯(5)(1.91g，32％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基2-(2-甲氧基萘-6-基)丙酸酯(6)的合成。

将4-氨甲酰基苯基2-(2-甲氧基萘-6-基)-丙酸酯，5(1.80g，4.34mmol)和Lawesson试剂(1.75g，4.34mmol)溶解于130ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌4小时。减压除去溶剂；通过硅胶柱(二氯甲烷/甲醇9.75/0.25)纯化粗残留物，以提供2.9g的粗化合物6。通过硅胶开放柱纯化所得到的化合物并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，获得化合物6(970mg，61％收率)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ 1.59(d，3H)，3.86(s，3H，OCH₃)，4.24(dd，1H)，7.06(d，2H)，7.18(d，1H)，7.31(s，1H)，7.50(d，1H)，7.84(s，1H)7.85(d，1H)，7.86(s，1H)，7.89(d，2H)，9.47和9.84(s，2H，NH₂).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 19.1，45.2，55.9，106.5，119.6，121.6，126.6，126.9，128.0，129.4，129.9，134.2，135.6，137.8，153.4，158.1，173.3，199.7.

MS(EI)，m/e 366(M⁺)；

m.p.：196-198℃。

实施例6

4-硫代氨甲酰基苯基2-(4-异丁基苯基)丙酸酯的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(布洛芬，3.87g，18.8mmol)的80mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(2.8g，20.7mmol)和DCC(4.27g，20.7mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(2，3.9g，28mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌2小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于乙酸乙酯中；用盐水、NaHCO₃ 5％、柠檬酸10％洗涤有机层，然后在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品3负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，从其中获得4-氨甲酰基苯基2-(4-异丁基苯基)丙酸酯(3)(2.48g，40％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基2-(4-异丁基苯基)丙酸酯(4)的合成

将4-氨甲酰基苯基2-(4-异丁基苯基)丙酸酯，3(2.48g，7.62mmol)和Lawesson试剂(3.1g，7.62mmol)溶解于130ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌4小时。减压除去溶剂。通过硅胶开放柱纯化所得到的化合物并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，获得纯化合物4(1.45g，55％收率)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ 0.84(d，6H)，1.48(d，3H)，1.79-1.82(m，1H)，2.42(d，2H)，4.05(dd，1H)，7.05(d，2H)，7.15(d，2H)，7.28(d，2H)7.88(d，2H)，9.49和9.87(s，2H，NH₂).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 19.2，22.9，30.3，44.9，121.6，127.9，129.5，130.0，137.8，138.0，140.8，153.3，173.3，199.6.

MS(EI)，m/e 341(M⁺)；

m.p：121-123℃.

实施例7

4-硫代氨甲酰基苯基2-(4-氧代苯基)-苯基丙酸酯的合成

4-氨甲酰基苯基2-(4-氧代苯基)-苯基丙酸酯(3)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(酮洛芬，3g，11.8mmol)的80mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(1.76g，13mmol)和DCC(2.68g，13mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(2，2.43g，17.7mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌2小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于乙酸乙酯中；用盐水、NaHCO₃ 5％、柠檬酸10％洗涤有机层，然后在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品3负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，从其中获得4-氨甲酰基苯基2-(4-氧代苯基)-苯基丙酸酯(3)(1.84g，42％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基2-(4-氧代苯基)-苯基丙酸酯(4)的合成.

将4-氨甲酰基苯基2-(4-氧代苯基)-苯基丙酸酯(3)(1.84g，4.93mmol)和Lawesson试剂(2g，4.93mmol)溶解于100ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌4小时。减压除去溶剂。通过硅胶开放柱纯化所得到的化合物并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，获得化合物4(0.45g，23％收率)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ 1.53(d，3H)，4.25(dd，1H)，7.08(d，2H)，7.54-7.73(m，9H)，7.90(d，2H)，9.51和9.88(s，2H，NH₂).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 19.2，44.9，121.6，129.3，129.5，129.8，130.3，132.6，133.5，137.6，137.9，138.1，141.2，153.3，154.5，156.1，163.8，172.9，199.6.

MS(EI)，m/e 390(M⁺)；

m.p：114-116℃.

实施例8

4-硫代氨甲酰基苯基2-(3-氟，4-苯基)苯基丙酸酯的合成

4-氨甲酰基苯基2-(3-氟，4-苯基)苯基丙酸酯(3)的合成

在0℃搅拌1小时下，向1(氟比洛芬，2g，8.2mmol)的80mL的二甲基甲酰胺溶液中，加入羟基苯并三唑(1.22g，9.02mmol)和DCC(1.86g，9.02mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基苯甲酰胺(2，1.7g，12.2mmol)，并在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌2小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于乙酸乙酯中；用盐水、NaHCO₃ 5％、柠檬酸10％洗涤有机层，然后在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。将粗产品3负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，从其中获得4-氨甲酰基苯基2-(3-氟，4-苯基)苯基丙酸酯(3)(1.09g，37％收率)。

4-硫代氨甲酰基苯基2-(3-氟，4-苯基)苯基丙酸酯(4)的合成

将4-氨甲酰基苯基2-(3-氟，4-苯基)苯基丙酸酯，3(1.09g，3mmol)和Lawesson试剂(1.21g，3mmol)溶解于70ml的无水苯中。加热反应至60℃，并搅拌4小时。减压除去溶剂。通过硅胶开放柱纯化所得到的化合物并用CH₂Cl₂/MeOH(9.5/0.5)洗脱，获得纯化合物4(0.35g，31％收率)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ 1.55(d，3H)，4.21(dd，1H)，7.32-7.55(m，8H)，7.90(d，2H)，9.51和9.88(s，2H，NH₂).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 19.1，44.7，115.9，116.2，121.7，124.8，128.6，129.3，129.4，129.5，131.7，135.8，137.7，142.6，153.7，158.3，163.5，173.1，199.6.

MS(EI)，m/e 380(M⁺)；

m.p：142-144℃。

实施例9

4-或5-氨基-2-羟基-苯甲酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(8)(也称作化合物XXVII)的一般合成方法

4-或5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-苯甲酸(1)的合成

在0℃和搅拌0.5小时下，向4-或5-氨基水杨酸(10.0mmol)的25mL的二噁烷和12.5mL的水的溶液中，加入三乙胺(15.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(15.0mmol)。将反应混合物在室温下机械搅拌24小时。在蒸发溶剂后，向残留物中滴加3M HCl(15mL)。过滤沉淀物，用水洗涤并干燥。将残留物负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(9/1)洗脱，从其中获得4-或5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-苯甲酸(1)(80％收率)。

4-或5-叔丁氧基羰基氨基-2-叔丁氧基-苯甲酸(2)的合成

室温下，在异丁烯气(5psi)下，将化合物(1)(12.0mmol)、浓H₂SO₄(6.0mmol)和DCM(100mL)搅拌6小时。用冷10％NaHCO₃(2 x 100mL)和盐水(100mL)洗涤该溶液，干燥(Na₂SO₄)并蒸发。将残留物溶解于1:1 MeOH/CCl₄(400mL)，用水(300mL)洗涤，然后用1:1 MeOH/水(2 x 200mL)萃取。干燥(Na₂SO₄)萃取物，并蒸发成白色固体(2)。通过DCM/己烷重结晶(83％收率)。

4-或5-氨基-2-羟基-苯甲酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(8)的合成

在0℃搅拌1小时下，向4-或5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-苯甲酸(2)(3.0mmol)的在50mL的二甲基甲酰胺中的溶液中，加入羟基苯并三唑(3.3mmol)和DCC(3.3mmol)。向该反应混合物中加入4-羟基-硫代苯甲酰胺(3.0mmol)，并在0℃下机械搅拌3小时，在室温下机械搅拌72小时。在过滤后，减压蒸发滤液以除去溶剂。将这样得到的油性残留物溶解于乙酸乙酯中；用盐水洗涤有机层，然后在无水MgSO₄上干燥，过滤并蒸发溶剂。用40％TFA的CH₂Cl₂溶液处理粗中间体(7)。2小时后，除去溶剂，得到作为粗残留物的化合物(8)。将该残留物负载于硅胶开放柱上并用CH₂Cl₂/MeOH(8/2)洗脱，从其中获得4-或5-氨基-2-羟基-苯甲酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(8)，式XXVII的化合物(48％收率)。

实施例10

曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯的合成

3，4，5-三甲氧基苯甲酸2-(二甲基氨基)-2-苯基丁基酯4-硫代氨甲酰基苯甲酸酯(曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯)的制备

向4-(硫代氨甲酰基)苯甲酸(0.1mol)和曲美布汀(0.1mol)的混合物中，加入了水(200mL)和乙醇(20mL)，在室温下搅拌所得到的混悬液至澄清。然后冷冻该溶液并冻干，得到所需的盐(定量收率)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ 0.60(t，3H)，1.45-1.75(m，4H)，1.80-1.90(m，2H)，2.28(s，6H)，2.90-3.40(m，2H)，3.69(s，9H)，3.95(m，1H)，4.73(dd，2H)，7.01(s，2H)，7.22(t，1H)，7.35(t，2H)，7.46(d，2H)7.93(dd，4H)，9.65(bs，1H，NH)，10.05(bs，1H，NH).

¹³C-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ 9.07，28.9，56.5，60.8，64.5，65.7，107.1，125.3，127.4，128.1，128.6，129.5，129.7，132.3，141.8，142.5，148.5，153.4，154.8，165.9，169.4，172.5，188.6.

mp 66-68℃(dec)。

4-(硫代氨甲酰基)苯甲酸的合成

根据在文献(Fairfull，E.S.，Lowe J.L.，Peak D.A.J.Chem.Soc.1952，742)中已经报道过的方法来合成该化合物，将其作为参考引入本文。

4-(硫代氨甲酰基)苯甲酸(2)

将3g的4-氰基苯甲酸1(20.4mmol)溶解于40mL的吡啶，并加入2.1mL的三乙胺(20.4mmol)。让干燥硫化氢以稳定的气流通过该溶液4小时。然后将该混合物倒入水中，过滤收集固体。在石油醚中重结晶得到2.51g的纯化合物2(68％收率)。

MS(ESI)，m/e 182.2(M⁺)。

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ 7.92(dd，4H)，9.68(s，1H，NH)，10.12(s，1H，NH)，13.25(s，1H，OH)。

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ 127.3，129.6，132.0，148.5，169.4，188.6

m.p.296-298℃(dec.)

实施例11

琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯(3)(也称作化合物I)的合成

琥珀酸4-氨甲酰基-苯基酯2-{2-[8-(2，2-二甲基丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯(2)的合成

用110mg的琥珀酸酐和10mg的DMAP处理420mg(0.001摩尔)的辛伐他汀(1)的在3ml的二氯甲烷中的溶液。在36小时后，搅拌下加入210mg(0.001摩尔)的EDCI和170mg(0.0012摩尔)的4-羟基-苯甲酰胺。

1小时后，减压除去溶剂，通过硅胶柱纯化粗残留物，用二氯甲烷/甲醇(9.5/0.5)洗脱，得到呈白色固体的化合物2(350mg；55％收率)。

MS(EI)，m/e 638(M⁺)；

¹H NMR(DMSO)δ 0.831(m，6H，2-Me)，1.075(m，9H，3-Me)，1.53(m，6H)，1.97(m，2H)，2.27(m，5H)，2.52(d，2H)，2.62(d，2H)，3.68(m，1H)，4.07(m，1H)，5.52(m，1H)，5.50(bt，1H)，5.77(dd，1H)，5.96(d，1H)；7.08(d，2H)，7.87(d，2H)，7.94(bs，2H)。

琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯(3)的合成

将琥珀酸4-氨甲酰基-苯基酯2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯(2)(0.35g，0.000548mol)和Lawesson试剂(0.221g，0.000548mol)溶解于30ml的无水苯中。加热反应至50℃，并搅拌6小时。减压除去溶剂；通过硅胶柱(二氯甲烷/甲醇9.5:0.5)纯化所得到的粗残留物，获得35mg的纯化合物3(10％收率)。

MS(EI)，m/e 654(M⁺)；

¹H NMR(DMSO)δ 0.831(m，6H，2-Me)，1.075(m，9H，3-Me)，1.53(m，6H)，1.97(m，2H)，2.27(m，5H)，2.52(d，2H)，2.62(d，2H)，3.68(m，1H)，4.07(m，1H)，5.52(m，1H)，5.50(bt，1H)，5.77(dd，1H)，5.96(d，1H)；7.11(d，2H)，7.9(d，2H)，9.48(s，1H)，9.86(s，1H).

化合物的试验

实施例12

5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸的疾病活动指数和MPO活性的比较

在下列实施例中使用对小鼠结肠内施用2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎的标准实验动物模型。该模型的详述已经公开(Santucci等人(2003)Gastroenterology 124：1381-94)，将其作为参考引入本文。简言之，以1.5mg的剂量将在0.1mL的30％乙醇中的TNBS通过结肠内给予6-8周大的Balb/c小鼠。将小鼠随机分为各种治疗组(n＝6/组)。在开始1小时后以及接着每12小时，共5天，对小鼠口服给予用载体(1％羧甲基纤维素(CMC))，单用5-ASA(美沙拉秦)(100mg/kg)，4-羟基硫代苯甲酰胺(在附图中作4-HTB)(100mg/kg)，5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(100mg/kg)(下文称作化合物XXVII)以及等摩尔剂量的美沙拉秦(50mg/kg)和(4-HTB)(50mg/kg)口服治疗小鼠。相对于载体-治疗组，*p<0.05。每组包括至少5只大鼠。

在研究的最后一天，评价(“盲性地”)小鼠的腹泻和大便潜血的存在，并测定它们的体重。基于这些数据计算“疾病活动得分”(如上述引用的文献所示，为0-4级)。在处死后，切除结肠的样品以测定髓过氧化酶(MPO)活性，所述活性是粒细胞渗透的标示物。将所有结果与用健康小鼠得到的结果进行比较。

附图1表明，在减轻疾病症状方面，化合物XXVII的有效性是单用美沙拉秦、单用4-HTB或美沙拉秦和4-HTB的混合物的3倍。此外，附图2表明，如粒细胞渗透减少(MPO活性减小)所证明的那样，化合物XXVII显著减小了炎症。

实施例13

在内脏痛觉的大鼠模型中，5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸与美沙拉秦的效果比较

在下列实施例中使用内脏痛觉的大鼠模型，过敏性肠综合征的临床前模型。将大鼠(雄性，Wistar，200-250g，从Charles River，Monza，Italy获得)置于塑料笼中，并保持在7.00AM开灯的12小时亮/暗循环的可控条件下，自由取用自来水和标准实验室食物。在实验前，在有机玻璃笼中每天花费2-3小时，共2-3天来对大鼠进行个体训练。这使得它们能够适应活动-受限的环境。在进行结肠直肠膨胀(CRD)记录前禁食12小时。在清醒的大鼠中进行实验，并以“盲性”方式进行实验，以所述方式时观测者不知道施用于每个动物的药物是否相同。

在试验日时，用吸入醚剂使大鼠服镇静，从肛外缘直肠内插入2cm长的乳胶气球，共插入2cm，并固定在尾根处。通过双管式插管将气球连接到压力传感器上，以便通过计算机连续检测直肠的压力(PowerLab PC，A.D.Instruments，Milford，MA，USA)，并通过双管式插管将气球连接到用于给气球打气或放气的注射器上。然后将大鼠放置于抬高的Plexiglas平台上的小笼(20 x 8 x 8cm)中，使其醒来并适应1小时。在从镇静状态恢复后，动物经受CRD方法，并测定行为反应。在实验前的晚上，给气球打气，并保持过夜，以使橡胶拉伸并且气球变得适应。

以0.4ml的增量，从0.4ml加到1.6ml水来用于每5分钟进行20秒的CRD。为了实现结肠参数和知觉的准确测定，每个强度下将膨胀重复2次，将每个动物的数据平均以用于分析。每只动物经受2组CRD。在完成CRD的第一序列(0.4mL-1.6ml水)后20分钟，腹腔内(i.p.)施用药物并进行第二组的CRD。评价并比较第一和第二组的CRD期间的行为反应。

通过使用半定量得分(1)测定腹部停药反射(AWR)来评价对CRD的行为反应。AWR是一种与内脏运动反射类似的无意识运动反射，但是它具有很大的优点，与内脏运动反射相反，它不需要腹部外科手术来向腹肌壁中植入记录电极和电线，这种手术可能会导致附加的致敏作用(参见Ness，T.J.和Gebhart，G.F.(1990)Pain 41：167-234，作为参考引入本文)。

AWR的测定包括“盲性的”观测者对动物对分级CRD的反应进行目测，并根据在A1-Chaer，E.D.等人(2000)Gastroenterology 19：1276-85中所述的行为分级来评价AWR得分，上述文献作为参考引入本文，其中0级对应的是对CRD没有行为反应，1级对应的是在刺激开始时短暂的头部活动然后不动，2级对应的是腹肌的轻度收缩，尽管大鼠没有将腹部抬离该平台，3级对应的是腹肌的强烈收缩，同时腹部抬离了该平台，4级对应的是如身体成弓形以及腹部、骨盆结构和阴囊抬高所显示的腹肌的严重收缩。

如上所述的内脏痛觉的大鼠模型用于比较在有或没有格列苯脲的情况下5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)的痛觉得分，其中格列苯脲是ATP-敏感性K⁺(K_ATP)通道的抑制剂。

附图3显示了在用载体、美沙拉秦(100mg/kg)和化合物XXVII(100mg/kg)处理的大鼠组(每组至少5只)中，对0.8mL的结肠直肠膨胀应答的痛觉得分。化合物XXVII显著减小了痛觉(相对于载体处理组，*p<0.05)，而用美沙拉秦没有显著的效果。用格列苯脲(10mg/kg i.p.30分钟前)预处理则逆转了化合物XXVII的痛觉减小作用，而格列苯脲预处理不会影响载体或美沙拉秦处理组的痛觉，提示化合物XXVII的抗感受伤害作用可能是由ATP-敏感性K⁺(K_ATP)通道介导的。附图4显示了单用4-羟基硫代苯甲酰胺(4-HTB)(100mg/kg)对于痛觉没有显著的效果。

实施例14

5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸对于体内白血球附着到血管内皮的效果

如现有详述(Wallace等人，(1993)Am.J.Physiol.265：993-998，将其作为参考引入本文)所述，用活体显微镜检查来研究白血球附着。用戊巴比妥钠(60mg/kg i.p.)麻醉大鼠，沿腹部制出烧灼性切口、进行气管切开术以促进呼吸。将大鼠以仰卧位放置，通过剖腹术取出肠系膜的一段。将该肠系膜小心地放置在眼睛可以清楚地观测的操作台上，这样就能透视2-cm²的组织片段。用盐水浸湿的纱布覆盖所有暴露的组织，以使脱水化最小。将操作台的温度保持在37℃，用温热的碳酸氢盐缓冲盐水(pH 7.4)对肠系膜进行表面灌流。使用活体显微镜(Nikon L25/0.35)和×10目镜来观测肠系膜的微循环。选择直径范围20到40μm的毛细血管后微静脉进行研究。架在显微镜上的摄像机(Panasonic digital 5000)将影像投射到检测器上，用盒式磁带录像器记录影像，用于重放分析。在施用阿司匹林前5分钟(基线)、施用阿司匹林时(时间0-5)和每15分钟，共60分钟时记录肠系膜微循环的影像。由所制作的5分钟的血管录像磁带影像来“盲性地”定量血管白血球附着，定量值为30秒或更长时间内沿血管壁保持固定的白血球的数量(表示为每100μm血管长度)。在施用阿司匹林(或载体)前60分钟，用5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)(100mg/kg)，美沙拉秦(50mg/kg)或载体预处理各组大鼠(每组至少5只)。这些药物是通过灌胃给予的。在一些实验中，在施用这些化合物前30分钟，用格列苯脲(10mg/kg i.p.)或载体处理大鼠。

附图5显示了在实验的最后时刻(第60-65分钟)的白血球附着。该图表明了化合物XXVII抑制阿斯匹林-诱导的白血球附着的能力，以及格列苯脲预处理会逆转该抑制剂对于白血球附着效果的能力。

实施例15

5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸导致的H₂S产生

在三种不同的条件下测定5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸(化合物XXVII)的H₂S产生作用。测定1mM浓度的L-半胱氨酸，4-HBT(4-羟基硫代苯甲酰胺)和5-氨基-2-(4-硫代氨甲酰基-苯氧基羰氧基)-苯甲酸在1小时内产生的H₂S的浓度。在三种不同的条件下测定H₂S释放：(i)当化合物在缓冲液中时，(ii)当化合物在肝匀浆中时，和(iii)当化合物与胱硫醚γ-裂解酶(PAG＝DL-炔丙基甘氨酸；2mM)一起在肝匀浆中时。结果如附图6所示。与载体组的释放相比，*p<0.05。与对应的“匀浆组”相比，^Ψp>0.05。用如先前(Khan等人(1980)Microchem J.25：388-395，作为参考引入本文)所述的相同的反应器确定H₂S产生的酶能力。将2ml的分析反应混合物引入到反应器中。该混合物包含1mM L-半胱氨酸(或化合物)，2mM吡哆醛5’-磷酸盐，100mM磷酸钾缓冲液(pH＝7.4)。让氮气的恒定气流经进气毛细管通过该混合物。通过将该管从冰浴移到37℃水浴中来开始反应。第二个反应器中的氮气流携带有硫酸，该第二反应器中包含4ml的硫化物抗氧化缓冲剂(SAOB)溶液，该溶液由2M KOH，1M水杨酸和0.22M抗坏血酸组成，pH 12.8[5]。在37℃下培养90分钟后，向该混合物中加入10％三氯乙酸溶液以停止反应。将该混合物中残余的H₂S经氮气流再在37℃下培养60分钟。用硫化物敏感性电极(Model9616 S^2-/Ag⁺电极，Orion Research，Beverly，MA，USA)测定SAOB溶液中硫化物的浓度。对于其中受试化合物在肝匀浆中培养的研究，将100-150mg的分离的大鼠肝脏在1ml冰冷却的T-PER蛋白质提取器中进行匀质化处理。将该匀浆以10％(wt/vol)的浓度加入到反应混合物中。在酶反应前，将DL-炔丙基甘氨酸2mM与肝匀浆在37℃下培养5分钟。Khan，S.U.Morris，G.F.和Hidiroglou，M.(1980)Rapidestimation of sulfide in rumen and blood with a sulfide-specificion electrode.Microchem J.25：388-395，作为参考引入本文。

如附图6所示的结果提示，化合物XXVII具有下列不同的特征：

1.化合物XXVII自发地释放H₂S(在缓冲液中)，这是消化道的局部效应所需要的。当仅在缓冲液中培养时，4-HTB和L-半胱氨酸不会显著释放H₂S；

2.当组织存在时，H₂S的释放增加；

3.从化合物XXVII的H₂S释放不依赖于这两种用于内源性H₂S合成的主要的酶(胱硫醚β-合酶和胱硫醚-γ-裂解酶)的活性。这是通过那些酶的抑制剂(PAG；DL-炔丙基甘氨酸)对于从化合物XXVII的H₂S产生没有效果而得以证实的。相反，PAG显著抑制了从L-半胱氨酸的H₂S释放；

4.当使用1mM的化合物XXVII时，该化合物产生的H₂S浓度在10-20uM范围内。在患者服用常用剂量的该药物后，可以在结肠腔中测定到浓度高达5mM的美沙拉秦(Dig.Dis.Sci.1989；34：573-578)。内源性H₂S的浓度可以高达160μM(Antioxid.Redox Signal.2003；5，493501)。化合物XXVII释放浓度在生理学范围内的H₂S，因此，使与H₂S有关的毒性变化最小。

实施例16

在内脏痛觉的大鼠模型中，曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯与单用曲美布汀和单用硫代氨甲酰基苯甲酸酯的效果比较

如实施例13所述进行实验，不同的是，用载体，马来酸曲美布汀(10mg/kg)或用等摩尔剂量的曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯(化合物III)或单用硫代氨甲酰基苯甲酸酯处理5只大鼠的组。

附图7(a)和7(b)表明，在减轻对结肠直肠膨胀应答的内脏痛方面，曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯比马来酸曲美布汀或硫代氨甲酰基苯甲酸酯更为有效。

因此，曲美布汀硫代氨甲酰基苯甲酸酯可以用于治疗与消化道的各种炎症有关的腹痛，以及特征在于内脏伤害感受增强(伴有或不伴有炎症)的功能性胃肠病症，例如过敏性肠综合征、消化不良等等。

实施例17

本发明的NSAID化合物的胃肠安全性

本发明的双氯芬酸衍生物，[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯在本文中也称作化合物XVII，在大鼠中评价其胃肠安全性。特别地，测定胃损害、胃PGE₂合成、小肠溃疡和红细胞比容。

在单口服1％羧甲基纤维素(载体；0.2mL)或溶解于该载体的下列一种药物：双氯芬酸(20mg/kg)，[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)(27.3mg/kg)，4-羟基硫代苯甲酰胺(TBZ)(7.3mg/kg)或双氯芬酸加TBZ前18小时，让体重175-200g的雄性Wistar大鼠禁食。化合物XVII的剂量与20mg/kg剂量的双氯芬酸是等摩尔的。类似的，TBZ的剂量与化合物XVII的剂量是等摩尔的。

每组有5只大鼠。在施用受试化合物3小时后，处死大鼠，“盲性地”测定胃出血损害的程度(单位mm)。将胃中所有损害的长度相加，得到“胃损害得分”，首先参考附图8，在“载体”或“化合物XVII”组中没有观察到胃损害。化合物XVII引发了比双氯芬酸显著更小的胃损害。此外，如果分别而不是同时施用NSAID部分(双氯芬酸)和TBZ，则观察不到胃损害效果。

这些观测通过随后“盲性的”组织学测定得以证实。如先前详述(Wallace等人，Cyclooxygenase 1 contributes to inflammatoryresponses in rats and mice：implications for gastrointestinaltoxicity.Gastroenterology 1998；115：101-109，作为参考引入本文)所述，切出胃组织的样品(100-200)用于前列腺素E₂(PGE₂)合成的测定。简言之，在30分钟的时间里，用剪刀将组织样品切碎，然后置于1mL的磷酸钠缓冲液(pH 7.4)中，并置于振荡的水浴(37℃)中20分钟。然后立即将样品以9,000g离心1分钟，立即将上清液在-80℃下冷冻，以用于随后用特异性ELISA进行的PGE₂浓度测定(Wallace等人，1998)。

参考附图9，可以看出，双氯芬酸(和或不和TBZ一起施用)和化合物XVII显著减少了胃PGE₂合成的量，表明了对COX-1和/或COX-2的抑制。与载体相比，单用TBZ不会减少胃PGE₂合成。因此，如附图1所示，用化合物XVII处理的大鼠不发生胃损害不是由于这些药物抑制胃前列腺素合成的能力有改变。对胃PGE₂合成的抑制几乎完全是由这些药物，以及等摩尔剂量的双氯芬酸完成的。

附图10显示了本发明的萘普生衍生物，2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)，引起了比萘普生本身显著更小的损害。以与附图8所示几乎相同的方式来进行这些实验。以60μmol/kg的剂量分别口服萘普生和化合物XX，在3小时后“盲性地”评价胃损害。在用化合物XX处理的任意大鼠中都检测不到胃损害。每组包含5只大鼠。这些观测可以通过随后“盲性的”组织学测定得以证实。

还用相同的大鼠测定了COX-1的抑制。如先前所述(Wallace等人，Gastroenterology 1998)，在收集袋的渗出物后，立即从各只大鼠的下腔静脉中抽取1mL的血，并放置在玻璃管中，并凝结45分钟。然后将样品以9,000g离心3分钟，将上清液在-80℃下冷冻，以用于随后用特异性ELISA进行的血栓烷B₂浓度测定。如附图11所示，与载体处理组相比，萘普生和化合物XX都显著(*p<0.05)抑制了COX-1的活性。

实施例18

[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯对环氧合酶-2(COX-2)和环氧合酶-1(COX-1)的抑制

用先前所述的模型(Wallace等人，Limited anti-inflammatoryefficacy of cyclo-oxygenase-2 inhibition incarrageenan-airpouch inflammation.Br J Pharmacol 1999；126：1200-1204，作为参考引入本文)的改进版测定体内COX-2的抑制。简言之，通过在数天内重复注射气体来产生皮下“袋”。一旦产生，注射1mL的1％酵母多糖可以在袋中诱导出炎症。这导致袋中前列腺素E₂(PGE₂)极大地增加，据显示其几乎完全是由COX-2衍生的。在角叉菜胶注射前30分钟，让各组的5只大鼠口服载体(1％羧甲基纤维素)，双氯芬酸(3mg/kg)或[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯化合物XVII(4.1mg/kg)。另一组的5只大鼠用载体处理，但是在袋中接受0.9％无菌盐水而不是酵母多糖的注射。

从附图12可以看出，用双氯芬酸或化合物XVII预处理显著降低了袋中PGE₂的浓度，其中PGE₂是对注射酵母多糖应答而产生的。相对于用载体+酵母多糖处理的组，*p<0.05。这些结果表明，这两种化合物显著抑制COX-2。相反，单用TBZ不会显著影响COX-2的活性。

用相同的大鼠使用如图11所描述的相同的方法测量了COX-1抑制。如附图13所示，双氯芬酸和化合物XVII分别抑制了超过80％的全血的血栓烷合成，所述合成是通过COX-1发生的。相反，TBZ没有显著影响COX-1的活性。

实施例19

NSAID衍生物对胃损害、体内COX-1和COX-2活性的效果

用上述分析比较很多化合物的抗炎效果(COX-2和COX-1抑制)和胃安全性。结果概述于表1中。所有的母体NSAIDs导致了显著的胃损害。但是与母体药物相比，本发明的TBZ衍生物显示了改善的胃安全性。从表1中也可以看出，与母体药物相比，TBZ衍生物维持或者实际上增强了它们抑制COX-1和/或COX-2的能力。

表1

NSAID衍生物对胃损害、体内COX-1和COX-2活性的效果

实施例20

NSAID衍生物对于炎症的效果

用先前Wallace等人，Gastroenterology 1998所述的角叉菜胶后爪水肿模型来评价[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XVII)以及双氯芬酸的抗炎效果。给体重175-200g的雄性Wistar大鼠口服受试化合物，30分钟后跖肌下注射100ul的1％λ角叉菜胶。在注射角叉菜胶和其后以1小时的间隔，共5小时，用Ugo Basile hydroplethysmometer测定爪的体积。包含5只大鼠的各组是用1，3或10mg/kg剂量的双氯芬酸，或与3mg/kg的双氯芬酸等摩尔剂量的化合物XVII处理的。

如附图14所示，双氯芬酸剂量依赖性地减轻了跖肌下注射角叉菜胶诱导的爪水肿。以与3mg/kg的双氯芬酸等摩尔剂量给予的化合物XVII更大程度地减轻了爪水肿。确实，化合物XVII对于爪水肿的效果相当于10mg/kg剂量的双氯芬酸的效果。

由于化合物XVII以与双氯芬酸相同的程度抑制前列腺素合成，本发明的新化合物在爪水肿模型中的较强活性很可能涉及该化合物的另一种特性。先前已经证明了，硫化氢供体可以在大鼠中显著减轻角叉菜胶诱导的爪水肿(Zanardo等人，Hydrogen sulphide is anendogenous modulator of leukocyte-mediated inflammation.FASEBJ 2006；20：2118-2120，作为参考引入本文)，因此，不与理论相联系，可能的是，与双氯芬酸相比，化合物XVII中H₂S的释放可以解释其抗炎效果的增强。

不与理论相联系，也可能的是，本发明的化合物在炎症模型中的某些附加活性是由于对COX-2活性的抑制的增强。在大鼠气袋模型中(如附图12所示)比较载体，萘普生和2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)的效果。每组包含5只大鼠。分别以60μmol/kg的剂量施用萘普生和化合物XX。如附图15所示，与载体处理组相比，萘普生和化合物XX显著抑制了COX-2的活性(*p<0.05，**p<0.01)。

不与理论相联系，也可能的是，本发明的NSAID衍生物在炎症模型中的某些附加活性是由于对COX-1活性的抑制的增强。比较载体、吲哚美辛和[1-(4-氯-苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1-H-吲哚-3-基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XIX)对于体外人全血血栓烷B₂合成的效果。将来自人血志愿者的等份的血(0.5mL)加入到玻璃管中，其中该玻璃管仅包含10uL的甲醇或者受试化合物中的一种，使得最终浓度是0.1，0.3，1或3μM。将该管置于轻微振荡的水浴(37℃)中45分钟，然后将它们离心(1,000xg)10分钟。然后如附图11的研究所示，用特异性ELISA确定各样品中血栓烷B₂的浓度。如附图16所示，与载体处理组相比，吲哚美辛和化合物XIX都对COX-1的活性产生了浓度-依赖性的抑制。但是，在1和3μM的浓度下，与吲哚美辛所产生的效果相比，化合物XIX对COX-1的活性产生了显著更大的抑制作用(*p<0.05)。

实施例21

本发明的NSAID衍生物对白血球对血管内皮的附着的效果

在炎症反应中，白血球附着到血管内皮上是一种早期事件，并导致血栓形成。硫化氢供体已经显示出可以减少由阿斯匹林或促炎症反应三肽fMLP诱导的白血球附着(Zanardo等人，FASEB J 2006；20：2118-2120)。如Zanardo等人FASEB J 2006；20：2118-2120所详述，在大鼠中用活体显微镜检查来评价本发明的数种NSAIDs衍生物对于白血球附着的效果。

简言之，在光学显微镜下检查麻醉后大鼠的毛细管后的肠系膜微静脉。在5分钟的基础记录期后，将下表2所列的一种受试化合物通过灌胃以30μmol/kg的剂量施用，但是萘普生和2-(6-甲氧基-萘-2-基)-丙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物XX)除外，它们是以60μmol/kg的剂量施用的。在1％羧甲基纤维素的载体中制备所有受试化合物。用与显微镜相连的摄像机记录微静脉内的白血球附着的改变，并以“盲性”的方式通过评价录像磁带影像来进行附着的白血球数量的定量。每组包含5只重150-175g的雄性Wistar大鼠。如果白血球在30秒或更长时间保持固定，则认为它是“附着的”(下面的结果表示为平均值±SEM)。在实验结束时，打开胃，并在解剖显微镜下检查是否存在胃损害。

表2

在血管内皮上的白血球附着

 

受试化合物	附着的白血球的数量(每100μm血管长度)	胃损害的发病百分比
			载体(1％)	2.0±0.2	0
阿斯匹林	7.1±0.4*	80
			化合物XVI	2.3±0.3	0
双氯芬酸	8.6±0.6*	100
			化合物XVII	2.8±0.5	20
芦米考昔	9.3±1.0*	0
			化合物XVIII	2.3±0.4	0
吲哚美辛	14.4±0.7*	100
			化合物XIX	3.0±0.4	0
萘普生	10.2±0.4*	100
			化合物XX	2.3±0.5	0

相对于载体处理组，*p<0.05(ANOVA和Dunnett’s多重比较检验)。

从表2中可以看出，与单用阿司匹林相比，本发明的阿斯匹林TBZ衍生物，即化合物XVI显著降低了每100μm血管长度附着的白血球的数量。此外，与单用阿司匹林相比，化合物XVI显著降低了胃损害的发病率。类似地，表2还表明，与单用双氯芬酸相比，本发明的双氯芬酸TBZ衍生物，即化合物XVII显著降低了每100μm血管长度附着的白血球的数量，并显著降低了胃损害的发病率。类似地，表2还表明，与单用萘普生相比，本发明的萘普生TBZ衍生物，即化合物XX显著降低了每100μm血管长度附着的白血球的数量，并显著降低了胃损害的发病率。

有趣的是，胃的副作用较小的COX-2的选择性抑制剂芦米考昔的TBZ衍生物，化合物XVIII仍然显示了没有胃损害发病率，但是与单用芦米考昔相比，显著降低了每100μm血管长度附着的白血球的数量。因此，将TBZ与COX-2选择性NSAIDs共价结合可以降低这些COX-2抑制剂的心血管副作用。

因此，本发明的NSAID衍生物可以通过减少白血球附着而降低NSAID的心血管副作用。

实施例22

本发明的NSAID衍生物对于胃溃疡愈合的效果

NSAIDs，包括对COX-2具有选择性的那些，通常会抑制先前存在的胃溃疡的愈合(Stadler等人，Diclofenac delays healing ofgastroduodenal mucosal lesions.Double-blind，placebo-controlled endoscopic study in healthy volunteers.Digestive Diseases和Sciences 1991；36：594-600)。为了确定本发明的两种化合物(化合物XVII和化合物XX)，分别与双氯芬酸和萘普生相比较时的对于溃疡愈合的效果，在大鼠胃中诱导出溃疡后，用这些药物处理大鼠。如Elliott等人，A nitric oxide-releasingnonsteroidal anti-inflammatory drug accelerates gastric ulcerhealing in rats.Gastroenterology 1995；109：524-530所述，通过浆膜上使用乙酸来诱导胃溃疡。在开始3天后，用载体，双氯芬酸(30μmol/kg)，化合物XVII(30μmol/kg)，萘普生(60μmol/kg)或化合物XX(60μmol/kg)口服处理包含5只大鼠的各组，每日2次。在这样处理4天后，处死大鼠，切除胃并照相。通过不知道给予大鼠何种处理的人来从平面上确定溃疡的面积(单位mm²)。在，在诱导胃溃疡3天后(即开始药物处理前)处死的5只大鼠的亚组中，溃疡的平均面积是24±2mm²。如附图17所示，用载体，双氯芬酸或萘普生处理的大鼠显示了程度类似的愈合。但是用化合物XVII或化合物XX处理的大鼠，显示了显著更好的愈合(分别与双氯芬酸和萘普生相比，*p<0.05)。与载体处理组相比，单用TBZ处理没有显著影响胃溃疡的愈合。

实施例23

本发明的NSAID衍生物对于血压的效果

NSAIDs，包括对COX-2显示选择性的那些，可以加重已存在的高血压，并干扰某些抗高血压药物的有效性(Whelton，A.Nephrotoxicity of nonsteroidal anti-inflammatory drugs：physiologic foundations and clinical implications.Am.J.Med.1999；106(5B)：13S-24S)。为了确定本发明的萘普生衍生物，即化合物XX与单用萘普生相比时对于血压的效果，在首先诱导出高血压以后通过腹膜内给予大鼠这些药物。如以前Ribeiro等人(Chronicinhibition of nitric oxide synthesis：A new model or arterialhypertension.Hypertension 1992；20：298-303)所述，在实验前7天大鼠饮用补充有Nω-硝基-L-精氨酸甲基酯(400mg/L)的水。用氟烷麻醉大鼠(每组5-8只)，将插管插入颈动脉测定血压，血压连续记录于图表记录器上。在测定到至少15分钟的稳定血压后，以60μmol/k通过腹膜快速推注萘普生或化合物XX。在注射后记录60分钟内血压的变化。平均基础血压是150±6mm Hg。附图18表明萘普生导致收缩压有实质性的升高。相反，与载体处理组相比，化合物XX不会升高收缩压，血压的变化显著低于分别由双氯芬酸和萘普生诱导的血压变化。

实施例24

[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯产生的H₂S的测定

为了比较[2-(2，6-二氯-苯基氨基)-苯基]-乙酸4-硫代氨甲酰基-苯基酯，化合物XVII和TBZ诱导的体外H₂S释放，将100-150mg分离的肝在1ml的冰冷却的T-PER蛋白质提取器中匀质化。将2ml的分析反应混合物引入到密封的3-颈反应器中的冰冷却的NaOH 0.1N中的250μl。该混合物包含溶解于PEG和100mM磷酸钾缓冲液(pH＝7.4)中的1mM化合物XVII或1mM TBZ。在10％(w/v)肝匀浆和2mM吡哆醛5’-磷酸盐存在或不存在下开始培养。让氮气的恒定气流通过进气毛细管通过该混合物。将反应器保持在37℃下，通过引入1ml的10％三氯乙酸溶液开始H₂S提取。另一个反应器中的氮气流通过冷却了的连接器携带有硫酸，并在2ml的硫化物抗氧化缓冲剂(SAOB)溶液中起泡，该溶液由2M KOH，1M水杨酸和0.22M抗坏血酸组成，pH 12.8。30分钟后，除去SAOB溶液，用硫化物敏感性电极(Model 9616S^2-/Ag⁺电极，Orion Research，Beverly，MA，USA)测定硫化物浓度，用H₂S表示(Ubuka，2002；Khan等人，1980)。通过将该管从冰浴移到37℃水浴中来开始反应。第二个反应器中的氮气流携带有硫酸，该第二反应器中含有2ml的如前所述的SAOB溶液。在37℃下培养90分钟后，向该混合物中加入1ml的50％三氯乙酸溶液以停止反应。将该混合物中残余的H₂S经氮气流再在37℃下培养30分钟。用如前所述的硫化物敏感性电极测定SAOB溶液中硫化物的浓度(Ubuka，2002；Khan等人，1980)。

如附图19所示，在缓冲液中培养化合物XVII导致比等摩尔量的TBZ释放出显著更多的H₂S。类似地，当与肝匀浆培养时，从化合物XVII中释放出了比TBZ更多的H₂S。

实施例25

琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯(化合物I)和辛伐他汀对于人血小板聚集(体外)的效果

如以先前详述(Ma L，Elliott SN，Cirino G，Buret A，IgnarroLJ，Wallace JL.Platelets modulate gastric ulcer healingthrough release of endostatin and VEGF.Proc Natl Acad Sci USA98：6470-6475，作为参考引入本文)的描述制备富含血小板的血浆(PRP)。通过Tyrode′s缓冲液(pH 7.4)将PRP中的血小板浓度调节至每mL 1 x 10⁸。将血小板的等份部分(400μL)置于玻璃试管中，并插入到ChronoLog血小板集合度计。在5分钟的时间里检测向试管中加入腺苷二磷酸(ADP)时应答的聚集。首先构建ADP的浓度-应答曲线，然后将产生70-80％最大聚集时的ADP浓度用于所有随后的研究。在37℃下将PRP的混悬液与不同浓度(3-30μM)的辛伐他汀或化合物I，或与载体(甲醇)预培养10分钟。然后评价对ADP的聚集应答。将各种药物的各种浓度重复实验4-6次。

附图20显示了辛伐他汀和化合物I对于ADP-诱导的人血小板聚集的效果。浓度为30μM的辛伐他汀仅减少了血小板聚集，而浓度为3，10和30μM的化合物I导致血小板聚集显著减少(星号表示与对应的载体处理组相比，血小板聚集显著减少；p<0.05)。

实施例26

化合物I和辛伐他汀对于人血小板cAMP(体外)的效果

如上制备富含血小板的血浆(PRP)。将等份的400μL的PRP置于玻璃管中，其中该玻璃管包含IBMX(异丁基-1-甲基黄嘌呤；0.5mM)，这是一种非选择性磷酸二酯酶抑制剂。2分钟后，将载体(甲醇)或各种浓度(3-100μM)的辛伐他汀或化合物I加入到该管中。作为阳性对照，用福斯高林(10μM)处理一些等份的血小板，其中福斯高林是一种已知的腺苷酸环化酶的刺激物。10分钟后，以9,000g将PRP的样品离心2分钟，弃去上清液。将沉淀再悬浮在缓冲液中，超声处理2分钟，然后用与特异性酶连接的免疫吸附剂测定来确定cAMP浓度(Cayman Chemical Co.，Ann Arbor，MI，USA)。将各种药物的各种浓度重复实验4-6次。

附图21显示了辛伐他汀和化合物I对于人血小板cAMP浓度的效果。虚线表示在用福斯高林(10μM)处理的血小板中cAMP的水平。最高浓度(100μM)的辛伐他汀仅显著增加了血小板cAMP，而浓度为10，30和100μM的化合物I导致血小板cAMP显著增加。(星号表示与对应的载体处理组相比，血小板聚集显著减少；p<0.05)。

Claims (7)

1.一种具有下列通式的化合物或它的盐：

A—Y—X  (式I)

其中A是药物基团，Y选自由-C(O)O-、-C(O)NH-、-C(O)OC(O)-、-C(O)NHCH₂C(O)-、O、S、N、

或0组成的组，并且X是选自由硫代氨甲酰基苯甲酸酯、或组成的组，其中当Y是O时，该化合物是A和X的盐。

2.根据权利要求1的化合物，其中该药物是选自由蛋白质、肽、核苷酸、减肥药、营养制品、皮质激素、弹性酶抑制剂、抗真菌剂、肿瘤治疗剂、止吐药、镇痛药、心血管剂、抗炎剂、驱虫药、抗心律失常药、抗生素、抗凝血剂、抗结肠炎剂、抗抑郁药、抗糖尿病剂、抗癫痫药、抗组胺剂、抗高血压剂、抗毒蕈碱剂、抗分支杆菌剂、抗肿瘤剂、免疫抑制剂、抗甲状腺剂、抗病毒剂、抗焦虑镇静剂、收敛剂、β-肾上腺素能受体阻滞剂、心肌收缩剂、皮质甾类、镇咳药、利尿剂、多巴胺能药、止血剂、免疫剂、调血脂剂、肌肉松弛剂、拟副交感神经药、副甲状腺降钙素、副甲状腺二膦酸盐、前列腺素、性激素、抗过敏剂、兴奋药、减食欲剂、拟交感神经剂、甲状腺剂、血管扩张剂和黄嘌呤组成的组。

3.根据权利要求1的化合物，其中该药物是选自由乙酰水杨酸(ASA)、双氯芬酸、萘普生、吲哚美辛、氟比洛芬、舒林酸、布洛芬、醋氯芬酸、阿西美辛、苯噁洛芬、苄芬酸、溴芬酸、布氯酸、丁布芬、卡洛芬、塞来考昔、环洛芬、桂美辛、clidenac、氯吡酸、diflusinal、依托度酸、艾托考昔、芬布芬、芬氯酸、苯克洛酸、非诺洛芬、芬替酸、氟诺洛芬、呋喃洛芬、呋罗布芬、furafenac、异丁芬酸、吲哚洛芬、伊索克酸、酮洛芬、酮咯酸、洛索洛芬、氯那唑酸、芦米考昔、甲嗪酸、甲芬那酸、甲氯芬那酸、美洛昔康、萘丁美酮、吡咯米酸、双水杨酯、咪洛芬、奥沙普秦、奥昔平酸、帕瑞考昔、保泰松、吡洛芬、吡罗昔康、pirozolac、丙替嗪酸、罗非考昔、水杨酸钠、舒洛芬、噻洛芬酸、托美丁、伐地考昔、佐美酸、对乙酰氨基酚、醋氨沙洛、氨氯苯噁嗪、乙酰水杨酸2-氨基-4-甲基吡啶酸、乙酰水杨酰水杨酸、阿尼利定、苯噁洛芬苄吗啡、5-溴水杨酰醋酸、布西丁、丁丙诺啡、布托啡诺、辣椒素、辛可芬、西拉马朵、氯美辛、氯尼辛、可待因、地素吗啡、地佐辛、双氢可待因、双氢吗啡、地美庚醇、地匹乙酯、依他佐辛、乙托沙秦、乙基吗啡、丁香酚、夫洛非宁、磷柳酸、格拉非宁、氢可酮、氢吗啡酮、羟基哌替啶、异丁芬酸、对乳酰乙氧苯胺、左啡诺、美普他酚、美他佐辛、美托酮、吗啡、纳布啡、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲吗啡、羟考酮、羟吗啡酮、喷他佐辛、非那佐辛、非诺可、苯哌利定、保泰松、水杨酸苯酯、非尼拉朵、水扬苷、水杨酰胺、tiorphan、曲马多、双醋瑞因、阿克他利、4-或5-氨基水杨酸、曲美布汀、醋茶碱、沙丁胺醇、班布特罗、巴米茶碱、甲硫贝弗宁、比托特罗、卡布特罗、克仑特罗、氯丙那林、二羟西君、difylline、麻黄碱、肾上腺素、依普罗醇、etafredine、乙基去甲肾上腺素、乙羟茶碱、非诺特罗、氟托溴铵、海索那林、异丙托溴铵、异他林、异丙肾上腺素、马布特罗、奥西那林、奥昔布宁、氧托溴铵、吡布特罗、丙卡特罗、普罗托醇、丙羟茶碱、瑞普特罗、利米特罗、沙美特罗、索特瑞醇、特布他林、1-teobromine乙酸、噻托溴铵、曲托喹酚、妥洛特罗、扎普司特、环戊君、NS-21、2-羟基-2，2-二苯基-N-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基甲基)乙酰胺、氨溴索、溴己新、多米奥醇、厄多司坦、愈创木酚、愈创甘油醚、碘化甘油、来托司坦、美司钠、索布瑞醇、司替罗宁、萜二醇、硫普罗宁、阿伐斯汀、阿洛拉胺、氨来呫诺、西替利嗪、氯苯西泮、色甘酸酯、色甘酸钠、依匹斯汀、非索非那定、福莫特罗、组胺、羟嗪、左卡巴斯汀、洛度沙胺、马布特罗、孟鲁司特、奈多罗米、瑞吡司特、塞曲司特、甲磺司特、托西酸盐、特非那定、噻拉米特、漆酚、溴己新、阿拉普利、贝那普利、卡托普利、西罗普利、西拉普利；地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、氯沙坦、莫维普利、naphthopidil、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利、群多普利、乌拉地尔、醋丁洛尔、阿普洛尔、氨磺洛尔、阿罗洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、贝凡洛尔、布库洛尔、布非洛尔、丁呋洛尔、布尼洛尔、布拉洛尔、butolfilol、卡拉洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、塞利洛尔、塞他洛尔、地来洛尔、依泮洛尔、艾司洛尔、茚诺洛尔、拉贝洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、美托洛尔、莫普洛尔、纳多洛尔、萘肟洛尔、奈比洛尔、硝苯洛尔、nipridalol、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普拉洛尔、丙萘洛尔、普萘洛尔、索他洛尔、硫氧洛尔、他林洛尔、特他洛尔、替利洛尔、噻吗洛尔、托利洛尔、希苯洛尔、醋托芬、阿加曲班、巴美生、琥珀苯呋地尔、苯碘达隆、倍他司汀、溴长春胺、丁苯碘胺、胞磷胆碱、氯苄呋醇、氯吡格雷、环扁桃酯、达肝素、双嘧达莫、dropenilamine、依诺肝素、芬地林、艾芬地尔、伊洛前列素、吲哚布芬、伊波格雷、异克舒令、肝素、拉米非班、midrodine、那屈肝素、烟酰醇、布酚宁、奥扎格雷、哌克昔林、苯丙醇胺、普尼拉明、罂粟林、瑞肝素钠盐、利多格雷、舒洛地尔、替诺非君、亭扎肝素、三氟柳、尼可占替诺、阿卡波糖、氨磺丁脲、格列波脲、格列噻唑、米格列醇、瑞格列奈、曲格列酮、1-丁基-3-溴本辛-脲、托瑞司他、烟酰胺、安西他滨、安曲霉素、阿扎胞苷、偶氮丝氨酸、6-氮尿苷、比卡鲁胺、卡柔比星、嗜癌霉素、苯丁酸氮芥、氯脲菌素、阿糖胞苷、柔红霉素、地磷酰胺、秋水仙胺、二甲叶酸、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多西他赛、去氧氟尿苷、多柔比星、屈洛昔芬、依达曲沙、依氟鸟氨酸、依诺他滨、表柔比星、环硫雄醇、依他硝唑、依托泊苷、芬维A胺、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、己烷雌酚、伊达比星、氯尼达明、甘露莫司汀、美法仑、美诺立尔、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、二溴甘露醇、二溴卫矛醇、丝裂霉素、米托蒽醌、莫哌达醇、麦考酚酸、甲叶酸、诺拉霉素、紫杉醇、喷司他汀、吡柔比星、吡曲克辛、普卡霉素、鬼臼酸、卟吩姆钠、泊非霉素、丙帕锗、嘌罗霉素、雷莫司汀、维甲酸、罗喹美克、链黑霉素、链佐星、替尼泊苷、细交链子包菌酮酸、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤、雷替曲塞、托泊替康、三甲曲沙、杀结核菌素、乌苯美司、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、佐柔比星、ε-乙酰亮氨酸、阿巴前列素、西曲酸酯、西咪替丁、依卡倍特、恩前列素、艾沙拉唑、伊索拉定、米索前列醇、奥美拉唑、奥诺前列素、泮托拉唑、普劳诺托、利奥前列素、罗沙前列醇、罗曲酸、索法酮、曲莫前列素、阿托伐他汀、西司他汀、制皮菌素、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、制霉菌素、喷司他汀、胃酶菌素、普伐他汀钠、辛伐他汀、氮卓西林、阿莫西林、氨苄西林、阿帕西林、阿哌环素、阿扑西林、叠氮氯霉素、阿度西林、阿洛西林、氨曲南、苯沙酸、苄基青霉酸、比阿培南、二环霉素、卷曲霉素、羧苄西林、卡茚西林、卡芦莫南、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢孟多、西替利嗪、头孢西酮、头孢唑林、头孢拉腙、头孢克定、头孢地尼、头孢托仑、头孢吡肟、头孢他美、头孢克肟、头孢甲肟、头孢美唑、头孢米诺、头孢地秦、头孢尼西、头孢哌酮、头孢雷特、头孢噻肟、头孢替坦、头孢替安、头孢西丁、头孢唑兰、头孢咪唑、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢丙烯、头孢沙定、头孢磺啶、头孢他啶、头孢特仑、头孢替唑、头孢布烯、头孢噻呋、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑南、头孢赛曲钠、头孢氨苄、头孢甘酸、头孢噻啶、头孢菌素C、头孢噻吩、头孢匹林钠、头孢拉定、氯霉素、金霉素、西诺沙星、克拉维酸、氯甲西林、氯唑西林、环青霉素、环丝氨酸、地美环素、双氯西林、依匹西林、fenbecillin、氟氧头孢、氟氯西林、海他西林、亚胺培南、仑氨西林、氯碳头孢、赖甲环素、磺胺米隆、甲氯环素、美罗培南、美坦西林、美他环素、甲氧西林钠、美洛西林、米诺环素、拉氧头孢、莫匹罗星、堆囊粘菌素、负霉素、新生霉素、苯唑西林、帕尼培南、青霉素G钾盐、阿地西林、阿美西林、青霉素V、非奈西林钾盐、匹哌环素、哌拉西林、吡利霉素、泊非霉素、丙匹西林、喹那西林、利替培南、罗利环素、山环素、西地霉素、大观霉素、舒巴坦、磺苄西林、替莫西林、四环素、替卡西林、替吉莫南、杀结核菌素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、恩维霉素、红霉素、交沙霉素、麦迪霉素、美欧卡霉素、竹桃霉素、利福布汀、利福米特、fiamycin、利福昔明、罗他霉素、螺旋霉素、醋竹桃霉素、紫霉素、维吉霉素；阿米卡星、安普霉素、阿贝卡星、地贝卡星、双氢链霉素、福提霉素、庆大霉素、小诺米星、新霉素、奈替米星、巴龙霉素、核糖霉素、西索米星、大观霉素、链霉素、妥布霉素、丙大观霉素；巴氨西林、头孢卡品酯、头孢泊肟酯、帕尼培南、匹氨西林、pivcefalexin、舒他西林、酞氨西林；卡波霉素、克林霉素、林可霉素、米卡霉素、罗沙米星、环丙沙星、克林沙星、二氟沙星、依诺沙星、恩氟沙星、氟罗沙星、氟甲喹、格帕沙星、洛美沙星、那氟沙星、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、帕珠沙星、培氟沙星、吡哌酸、吡咯米酸、芦氟沙星、沙氟沙星、tosulfoxain、曲伐沙星、氯莫环素、胍甲环素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪；对氨基水杨酸、对氨基水杨酸酰肼、氯法齐明、去氧双氢链霉素、乙胺丁醇、葡烟综、异烟肼、奥匹烟肼、非那米柳、利福平、利福喷汀、水杨烟肼、4-4′-磺基二苯胺、氨苯砜乙酸、氨苯砜、琥珀氨苯砜、对磺胺酰苄胺、噻唑砜、乙酰磺胺林、磺胺米隆、4′-(甲基氨磺酰基)sulfanilanilide、柳氮磺嘧啶、苯酰磺胺、磺胺醋酰、磺胺氯达嗪、磺胺柯定、磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺戊烯、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺乙二唑、磺胺脒、磺胺胍诺、磺胺林、磺胺甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲氧甲嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺甲噻唑、磺胺美曲、磺胺米柯定、磺胺噁唑、磺胺、2-对磺胺酰苯氨基乙醇、N，4-磺胺酰磺胺、磺胺酰脲、N-磺胺酰-3，4-丙谷胺、磺胺培林、磺胺苯吡唑、磺胺普罗林、磺胺吡嗪、磺胺吡啶、磺胺异噻唑、磺胺均三嗪、磺胺噻唑、磺胺硫脲、磺胺索嘧啶、磺胺异噁唑、4-磺胺基水杨酸；负霉素、卡芦莫南、氯羟喹、硝羟喹啉、精氨酸、甲硝唑、阿昔洛维、金刚烷胺、西多福韦、阿糖胞苷、去羟肌苷、双脱氧腺苷、依度尿苷、泛昔洛韦、氟尿苷、更昔洛韦、碘苷、印地那韦、乙氧丁酮醛、拉米夫定、MADU、喷昔洛韦、鬼臼毒素、利巴韦林、金刚乙胺、沙奎那韦、索立夫定、司他夫定、曲氟尿苷、伐昔洛韦、阿糖腺苷、珍那佐酸、扎西他滨、齐多夫定；阿伦膦酸、布替膦酸、依替膦酸、奥昔膦酸、帕米膦酸、利塞膦酸、阿米利定、拉扎贝胺、莫非吉兰、沙贝鲁唑、奥拉西坦、伊匹达克林、奈拉西坦、他克林和维吖啶组成的组。

4.根据权利要求1的化合物，其中药物是选自由非甾体抗炎药(NSAIDs)、抗结肠炎药、镇痛药和抗高血脂症药。

5.根据权利要求4的化合物，其中抗高血脂症药是他汀类药物。

6.根据权利要求5的化合物，其中他汀类药物是选自由阿托伐他汀、西司他汀、制皮菌素、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、制霉菌素、喷司他汀、胃酶菌素、普伐他汀钠和辛伐他汀组成的组。

7.根据权利要求6的化合物，其中该化合物是琥珀酸2-{2-[8-(2，2-二甲基-丁酰氧基)-2，6-二甲基-1，2，6，7，8，8a-六氢萘-1-基]-乙基}-6-氧代-四氢吡喃-4-基酯4-硫代氨甲酰基-苯基酯。

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