CN101432001A - 取代或激动p53功能的小分子 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了用于鉴定p53模拟物/激动剂的新筛选系统。还提供了作为有效p53模拟物/激动剂起作用的小有机分子。

Description

取代或激动P53功能的小分子
相关申请的交叉引用
本申请要求2004年8月20日提交的USSN 60/603,308的权益和优先权，为此通过引用将该文献完整地并入本文。
有关在联邦政府资助的研究和开发中完成的发明的权利声明
[不可应用]
技术领域
本发明涉及肿瘤学领域。具体地，本发明提供了取代和/或激动(agonize)p53功能的化合物和鉴定这类化合物的方法。
背景技术
所有乳腺癌中的三分之二显示肿瘤阻抑物p53中的突变(Lai等(2004)Breast Cancer Res.Treat.，83：57-66)，并且所有晚期的人乳腺癌中有三分之一表现出前-细胞凋亡Bcl-2家族成员Bax表达的显著下降(Krajewski等(1995)Cancer Res.，55：4471-4478)。Bax和p53突变以所有人类肿瘤的高百分比相关。显示p53突变或Bax表达减少的患者亚组一般对治疗应答很差并且表现出肿瘤快速生长和较短的生存中值(median survival)(Lai等，同上文；Reed(1996)J.Clin.Invest.，97：2403-2404)。尽管进行了深入探求，但是Bax表达在正常、恶性或濒死细胞中得到调节的机制仍是未知的。唯一已知的Bax表达的内源性激活物为p53转录因子，其为诱导癌性细胞和受损细胞中的细胞死亡的原因(Miyashita和Reed(1995)Cell，80：293-299)。
发明内容
本发明提供了充分适合于鉴定作为p53模拟物/激动剂起作用的试剂的新筛选系统。还提供了有效的p53模拟物/激动剂。
因此，在一些实施方案中，本发明提供了促进p53稚细胞(例如肿瘤细胞)的细胞死亡的化合物。一些优选的化合物为本文式I的那些化合物或其可药用的酯或盐，其中R1和R4独立地选自下组：氨基、氰基、硝基、羧基、卤素、羟基、SO2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-8烷氧基、C1-11烷氧基烷基、C1-6烷基氨基和C1-6氨基烷基等；R2和R3独立地选自C、N等组成的组；R5为C或O；R6和R7独立地选自下组：H、H、卤素、CN、NO2、C1-10支链或非支链饱和或不饱和烷基、C1-10支链或非支链烷氧基、C1-10支链或非支链酰基、C1-10支链或非支链酰氧基、C1-10支链或非支链烷硫基、氨基磺酰基、芳基、芳酰基、芳氧基、芳基磺酰基、杂芳基和杂芳氧基等；R8选自NO2、OH、COOH等组成的组；R9选自H、CH3等组成的组。在一些实施方案中，R6和R7均为卤素。在不同的实施方案中，R1和R4均为氨基。在不同的实施方案中，R2和R3均为N。在不同的实施方案中，R8为NO2。在一些实施方案中，化合物具有式II的化学式。
还提供了促进p53稚细胞的细胞死亡的方法(例如癌细胞，包括实体瘤、转移细胞和非-实体瘤癌)。该方法一般包括使细胞接触诱导ras转录的化合物。在不同的实施方案中，化合物为如本文所述的式I的化合物。在不同的实施方案中，化合物在可药用的赋形剂中。在一些实施方案中，细胞为肝癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞、肺癌细胞、子宫癌细胞、卵巢癌细胞、前列腺癌细胞或结肠癌细胞。
还提供了用于筛选试剂的细胞系，所述试剂促进p53稚细胞的细胞死亡。该细胞系一般包含含有核酸构建体的哺乳动物细胞，所述的核酸构建体包含包括5′UTR、TATAA序列和一个或多个结合p53的共有序列的bax启动子元件，其中所述的bax启动子元件可操作地与报道基因连接，使得p53蛋白与一个或多个所述共有序列的结合可诱导或增加所述报道基因的转录。在一些实施方案中，报道基因为荧光蛋白、荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶(CAT)、β-半乳糖苷酶(β-gal)、碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶(HRP)或生长激素(GH)。在一些实施方案中，报道基因包含荧光素基因或cDNA。在不同的实施方案中，哺乳动物细胞为p53稚细胞(例如HEK293T细胞)。
本发明还提供了鉴定试剂的方法，所述试剂促进p53稚细胞的细胞死亡。该方法一般包括：使来自本文所述的细胞系的一种或多种细胞接触一种或多种测试剂；检测来自所述细胞中的报道基因的信号，其中来自所述报道基因的信号增加表示所述的试剂为可能促进p53稚细胞中细胞死亡的试剂。在一些实施方案中，使多种测试剂同时接触所述细胞。在一些实施方案中，使单一测试剂接触所述的细胞。在不同的实施方案中，所述的增加是相对于缺乏所述测试剂或包含较低浓度的所述测试剂的对照而测定的。在一些实施方案中，通过机器人系统进行所述的方法。在不同的实施方案中，所述的测试剂来自选自下组的库：Chem Bridge DiverSet E、Bionet 1、CEREP、Maybridge 1、Maybridge 2、Peakdale 1、Peakdale 2、ChemDiv Combilab and International、Mixed Commercial Plate 1、Mixed Commercial Plate 2、Mixed Commercial Plate3、Mixed Commercial Plate 4、ChemBridge Microformat、Commercial DiversitySet1、NCI Structural Diversity Set version 1、NCI Structural Diversity Set version2、NCI Mechanistic Diversity Set、NCI Open Collection 1、NCI Open Collection2、NINDS Custom Collection、SpecPlus Collection、BIOMOL ICCB KnownBioactives、ICCB Discretes Collections、ICCB2、ICCB3、ICCB4、NCI MarineExtracts、含水级分-NCI Plant and Fungal Extracts、有机级分-NCI Plant andFungal Extracts、Philippines Plant Extracts 1、Philippines Plant Extracts 2和StarrFoundation Extracts 1。
定义
＂p53稚细胞＂指表达缺陷型p53和/或具有降低活性的p53的细胞，和/或正常p53表达不足的细胞等。一般而言，p53稚细胞与＂正常＂细胞相比显示降低的p53肿瘤阻抑物活性。
术语＂报道基因(reporter)＂或＂报道基因(reporter gene)＂指表达可通过光谱、光化学、生物化学、免疫化学、电、光学和/或化学的方式检测的产物的基因或cDNA。在这方面有用的报道基因/标记包括，但不限于发光蛋白、荧光蛋白(例如绿色荧光蛋白(GFP)、红色荧光蛋白(RFP)等)、酶(例如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶和常用于ELISA的其它酶)等。
术语＂可操作地与启动子连接的报道基因＂指将启动子和报道基因排列以使启动子调节报道基因的转录。
术语＂测试剂＂指将在本文所述的一个或多个试验中筛选的试剂。该试剂实际上可以为任意的化合物。它可以作为单一分离的化合物存在或可以为化学(例如组合)库的成员。在特别优选的实施方案中，所述的测试剂为小有机分子。
术语＂小有机分子＂指其大小可与一般用于药物的那些有机分子相比的分子。该术语排除了生物大分子(例如蛋白质、核酸等)。优选的小有机分子的大小多达约5000Da，更优选多达2000Da，且最优选多达约1000Da。
附图说明
图1图示了Bax 5′UTR中的p53结合元件。
图2A显示Rp53-1(G6)的结构。图2B显示Rp53-1(G6)将HEK293T细胞中的p53/Bax报道基因活化至与瞬时过表达的p53相关的水平。
图3显示p53-突变体(MDA-435)，而不是野生型(MCF-7)乳腺癌细胞对于p53-模拟物化合物Rp53-1(G6)是敏感的。
图4图示了导致Bax/Bcl-2表达失调的p53突变。
图5图示了bax表达由p53诱导并导致编程性细胞凋亡。
图6图示了p53模拟物/激动剂的筛选。
图7显示使用G6单脉冲处理乳腺癌细胞产生了完全的药效。
图8显示G6诱导p53Mt和缺失细胞(Null Cell)中的p53报道基因。
图9图示了用G6处理HT-29细胞的结果。
图10显示植入了人骨肉瘤组织的裸鼠的G6处理导致肿瘤完全消退。
发明详述
本发明部分基于如下想法：筛选在活化bax表达中起p53模拟物作用的小分子化合物可以产生用于许多乳腺瘤形成的治疗剂。
I.p53模拟物/激动剂的筛选系统
为了鉴定p53模拟物，我们研发了报导前-细胞凋亡Bax蛋白表达促进的活哺乳动物细胞系统。所述bax启动子由372个核苷酸5′UTR、TATAA序列和若干结合p53的共有序列组成，从而产生Bax表达的上调(参见，例如，图1)。通过表达这些编码HEK293T细胞中荧光素酶的基因上游的位点(参见，例如，图5)，我们建立了一组新的报道细胞系。这些细胞提供了能够鉴定Bax表达的直接激活物和p53细胞凋亡功能的替代物的系统(参见，例如，图6)。
A)p53模拟物/激动剂的高通量筛选
本文所述的细胞系特别有效地用于筛选p53模拟物/激动剂。此外，这些细胞系还充分适合于＂高通量＂方式。通常通过下列步骤产生具有有用特性(例如调节转运蛋白活性或表达或被本发明的转运蛋白转运的能力)的新的化学个体(chemical entity)：鉴定具有某些所需特性或活性的化合物(称作＂前导化合物(lead compound)＂)；产生前导化合物的变体；并且评价那些变体化合物的特性和活性。然而，目前的趋势在于缩短药物发现所有方面的时间范围(timescale)。凭借快速和有效进行大量测试的能力，高流通量筛选(HTS)方法正在取代常规的前导化合物鉴定方法。
在一个优选的实施方案中，高流通量筛选方法包括提供含有大量可能具有所需活性的化合物的库(候选化合物/测试剂)。然后在如本文所述的一个或多个试验中筛选这类＂化学库＂，以便鉴定那些显示所需特征活性的库成员(特别是化学形式(chemical species)或亚类)。可以将由此鉴定的化合物用作常规的＂前导化合物＂或可以将它们自身用作潜在或实际的治疗剂。
1)用于筛选作为D53模拟物/激动剂起作用的试剂的库
当用于筛选系统的测试剂的数量和类型增加时，鉴定作为p53模拟物/激动剂起作用的试剂的试验可能性增加。近来，注意力已经集中在使用组合化学库来辅助产生新的化合物前导(chemical compound lead)。组合化学库为通过组合许多化学＂结构单元(building block)＂如试剂，以化学合成或生物合成产生的不同化合物的集合。例如，对于给定的化合物长度(即多肽化合物中氨基酸的数目)，通过以每种可能的方式组合一组称作氨基酸的结构单元来形成线性组合化学库，诸如多肽文库。可以通过这类化学结构单元的组合混合来合成数以百万计的化合物。例如，一位评论者已经观察到系统性地组合混合100种可互换的化学结构单元导致在理论上合成100000000种四聚体化合物或100亿种五聚体化合物(Gallop等(1994)37(9)：1233-1250)。
组合化学库的制备和筛选是本领域技术人员众所周知的。这类组合化学库包括，但不限于：肽文库(参见，例如，美国专利5,010,175，Furka(1991)Int.J.Pept.Prot.Res.，37：487-493，Houghton等(1991)Nature，354：84-88)。肽合成决非关注和用于本发明的唯一手段。还可以使用用于产生化学多样性库的其它化学物质。这类化学物质包括，但不限于：类肽(PCT公开号WO 91/19735，1992年12月26日)；编码的肽(PCT公开号WO 93/20242，1993年10月14日)；随机双-寡聚物(PCT公开号WO 92/00091，1992年1月9日)；苯二氮卓类(benzodiazepine)(美国专利No.5,288,514)；diversomers，诸如乙内酰脲类(hydantoin)、苯二氮卓类和二肽类(Hobbs等(1993)Proc.Nat.Acad.Sci USA 90：6909-6913)；插烯多肽类(Hagihara等(1992)J.Amer.Chem.Soc.114：6568)；具有β-D-葡萄糖支架的非肽的肽模拟物(Hirschmann等(1992)J.Amer.Chem.Soc.114：9217-9218)；小化合物库的类似的有机合成物(Chen等(1994)J.Amer.Chem.Soc.116：2661)；寡聚氨基甲酸酯类(Cho，等(1993)Science 261：1303)；和/或膦酸肽酯类(Campbell等(1994)J.Org.Chem.59：658)。一般参见Gordon等(1994)J.Med.Chem.37：1385；核酸文库(参见，例如，Strategene，Corp.)；肽核酸文库(参见，例如，美国专利5,539,083)；抗体文库(参见，例如，Vaughn等(1996)Nature Biotechnology，14(3)：309-314)；和PCT/US96/10287)；碳水化合物文库(参见，例如，Liang等(1996)Science，274：1520-1522；和美国专利5,593,853)；和小有机分子库(参见，例如，苯二氮卓类，Baum(1993)C&EN，1月18日，第33页；类异戊二烯，美国专利5,569,588；噻唑烷二酮类(thiazolidinones)和间噻嗪烷酮(metathiazanones)，美国专利5,549,974；吡咯烷类，美国专利5,525,735和5,519,134；吗啉代化合物，美国专利5,506,337，苯二氮卓类，5,288,514，等等)。
此外，许多库为商业上可得到的。这类库包括，但不限于：Chem BridgeDiverSet E(16,320种化合物)；Bionet 1(4,800种化合物)；CEREP(4,800种化合物)；Maybridge 1(8,800种化合物)；Maybridge 2(704种化合物)；Peakdale1(2,816种化合物)；Peakdale 2(352种化合物)；ChemDiv Combilab andInternational(28,864种化合物)；Mixed Commercial Plate 1(352种化合物)；Mixed Commercial Plate 2(320种化合物)；Mixed Commercial Plate 3(251种化合物)；Mixed Commercial Plate 4(331种化合物)；ChemBridge Microformat(50,000种化合物)；Commercial Diversity Set1(5,056种化合物)；各种NCI集合(例如Structural Diversity Set，version 1(1,900种化合物)；Structural DiversitySet，version 2(1,900种化合物)；Mechanistic Diversity Set(879种化合物)；OpenCollection 1(90,000种化合物)；Open Collection 2(10,240种化合物)等；NINDSCustom Collection(1,040种化合物)；ICCB Bioactives 1(489种化合物)；SpecPlus Collection(960种化合物)；BIOMOL ICCB Known Bioactives(480种化合物)；各种ICCB Discretes Collections(例如ICCB1(190种化合物)；ICCB2(352种化合物)；ICCB3(352种化合物)；ICCB4(352种化合物)等)；各种天然产物提取物(例如NCI Marine Extracts(352个孔)；含水级分-NCI Plant andFungal Extracts(2,112个孔)；有机级分-NCI Plant and Fungal Extracts(1,408个孔)；Philippines Plant Extracts 1(200个孔)；Philippines Plant Extracts 2(648个孔)；Starr Foundation Extracts 1(1024个孔))等。
2)高通量筛选装置
许多高通量筛选系统为商业上可得到的(参见，例如，Zymark Corp.，Hopkinton，MA；Air Technical Industries，Mentor，OH；Beckman Instruments，Inc.Fullerton，CA；Precision Systems，Inc.，Natick，MA等)。这些系统一般可使整个操作步骤自动化，所述步骤包括吸移所有的样品和试剂，分配液体，定时温育和最终读取适合于试验的检测器中微量平板。这些可配置的系统提供了高通量和快速启动以及高度的灵活性和用户化。这类系统的制造商提供了各种高通量的详细规程。因此，例如，Zymark Corp.提供了描述用于检测基因转录、配体结合等的调节的筛选系统的技术公报。
II.P53模拟物/激动剂
在一些实施方案中，本发明提供了许多p53模拟物/激动剂。这些化合物通常促进p53稚细胞(例如癌细胞)的细胞死亡。在一些实施方案中，所述的化合物包含下式：
Figure A200580036012D00111
其中R1和R4独立地选自下组：氨基、氰基、硝基、羧基、卤素、羟基、SO2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-8烷氧基、C1-11烷氧基烷基、C1-6烷基氨基和C1-6氨基烷基；R2和R3独立地选自C、N组成的组；R5为C或O；R6和R7独立地选自下组：H、H、卤素、CN、NO2、C1-10支链或非支链饱和或不饱和烷基、C1-10支链或非支链烷氧基、C1-10支链或非支链酰基、C1-10支链或非支链酰氧基、C1-10支链或非支链烷硫基、氨基磺酰基、芳基、芳酰基、芳氧基、芳基磺酰基、杂芳基和杂芳氧基；R8选自NO2、OH、COOH组成的组；R9选自H、CH3组成的组。还包括或这类化合物的可药用的酯或盐。在一些实施方案中，R6和R7均为卤素。在一些的实施方案中，R1和R4均为氨基。在一些的实施方案中，R2和R3均为N。在一些的实施方案中，R8为NO2。在某些实施方案中，化合物具有下式：
例如，易于使用式II的化合物作为起点配制这类化合物。
III.药物制剂
在一些实施方案中，将本发明的p53模拟物/激动剂作为药物制剂提供和/或作为药物制剂施用。一般而言，例如，将本发明的一种或多种p53模拟物/激动剂施用于被诊断为具有一种或多种癌症症状的个体。可以将p53模拟物/激动剂以＂纯的＂形式施用，或如果需要，以盐、酯、酰胺、前药(prodrug)、衍生物等的形式施用，只要该盐、酯、酰胺、前药或衍生物为药理学上合适的，即在本发明方法中有效。可以使用合成有机化学领域的技术人员公知的标准步骤制备活性试剂的盐、酯、酰胺、前药和其它衍生物，并且所述的标准步骤由例如March(1992)Advanced Organic Chemistry；Reactions，Mechanisms and Structure，4th Ed.N.Y.Wiley-Interscience描述。
例如，使用通常涉及与合适的酸反应的常规方法由游离碱制备酸加成盐(acid addition salt)。一般而言，将药物的碱形式溶于极性有机溶剂，诸如甲醇或乙醇并且向其中加入酸。所得的盐可沉淀或可以通过添加极性较小的溶剂使其从溶液中移出(bring out of)。用于制备酸加成盐的合适的酸既包括有机酸，又包括无机酸，所述的有机酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸(glycolic acid)、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸(cinnamic acid)、扁桃酸(mandelic acid)、甲磺酸(methanesulfonic acid)、乙磺酸(ethanesulfonic acid)、对-甲苯磺酸(p-toluenesulfonic acid)、水杨酸(salicylic acid)等，所述的无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以通过用合适的碱处理将酸加成的盐重新转化成游离碱。本文活性剂的特别优选的酸加成的盐为卤化物盐，如可以使用盐酸或氢溴酸制备。相反，使用可药用的碱，诸如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙、三甲胺等以类似的方式制备p53模拟物/激动剂的碱式盐。特别优选的碱式盐包括：碱金属盐例如钠盐；和铜盐。
酯类的制备通常涉及可以存在于药物分子结构中的羟基和/或羧基的官能化。酯类一般为游离醇基的酰基-取代的衍生物，即来源于式RCOOH的羧酸的部分，其中R为烷基，并且优选为低级烷基。如果需要，可以使用常规的氢解或水解步骤将酯类再转化成游离酸。
还可以使用本领域技术人员公知的或相关文献中描述的技术制备酰胺和前药。例如，可以使用合适的胺反应物由酯类制备酰胺，或可以通过与氨或低级烷基胺反应由酸酐或酰基氯来制备它们。一般通过使产生化合物的部分共价结合来制备前药，所述化合物直到被个体代谢系统修饰才是治疗上有活性的。
本文鉴定的模拟物/激动剂用于非肠道、局部、口服、鼻内(或以另外的方式吸入)、直肠或局部施用，诸如通过气溶胶或透皮，用于预防和/或治疗动脉粥样硬化(atherosclerosis)和/或其症状。可以通过各种单位剂型施用药物组合物，这取决于施用方法。合适的单位剂型包括，但不限于粉剂、片剂、丸剂、胶囊、锭剂、栓剂、贴剂、鼻腔喷雾剂、注射剂(injectable)、可植入缓释制剂、脂质复合物等。
一般将本发明的模拟物/激动剂与可药用的载体(赋形剂)组合以形成药物组合物。可药用的载体可以含有一种或多种生理可接受的化合物，例如，它们起稳定组合物或增加或减少活性剂的吸收的作用。生理可接受的化合物可以包括：例如碳水化合物，诸如葡萄糖、蔗糖或葡聚糖；抗氧化剂，诸如抗坏血酸或谷胱甘肽；螯合剂；低分子量蛋白质；保护和吸收增强剂如脂质；减少活性剂的清除或水解的组合物；或赋形剂或其它稳定剂和/或缓冲剂。
其它生理可接受的化合物包括湿润剂、乳化剂、分散剂或特别用于防止微生物生长或机能(action)的防腐剂。各种防腐剂为众所周知的并且包括：例如苯酚和抗坏血酸。本领域技术人员可以理解对可药用的载体，包括生理可接受的化合物的选择取决于活性剂的给药途径和活性剂的具体物理-化学特性。
赋形剂优选为无菌的且一般不含不需要的物质。可以通过常规的众所周知的灭菌技术给这些组合物灭菌。
在治疗应用中，对患有动脉粥样硬化的一种或多种症状或处于动脉粥样硬化风险中的患者施用本发明的组合物，其用量足以治愈或至少部分预防或阻止疾病和/或其并发症。将足以达到该目的的用量定义为＂治疗有效剂量＂。有效用于该用途的量取决于疾病的严重程度和患者的一般健康状况。根据所需的和患者耐受的剂量和频率，可以进行组合物的单次或多次施用。在任何情况下，组合物应提供足以有效治疗(改善一种或多种症状)患者的本发明制剂中的活性剂用量。
p53模拟物/激动剂的浓度可以广泛改变，并且主要基于流体体积、粘度、体重等的不同，按照选择的具体施用方式和患者的需要进行选择。然而，一般选择的浓度可提供约0.1或1mg/kg/天至约50mg/kg/天且有时更高的剂量。通常剂量范围是约3mg/kg/天至约3.5mg/kg/天，优选约3.5mg/kg/天至约7.2mg/kg/天，更优选约7.2mg/kg/天至约11.0mg/kg/天，且最优选约11.0mg/kg/天至约15.0mg/kg/天。在一些优选的实施方案中，剂量范围是约10mg/kg/天至约50mg/kg/天。可以理解的是这些剂量可以改变以优化具体受试者或受试者组中的治疗方案。
在一些优选的实施方案中，通过口服(例如通过片剂或按照本领域的技术人员众所周知的标准方法作为注射剂施用本发明的p53模拟物/激动剂。在其它优选的实施方案中，还可以使用透皮递药系统，即透皮＂贴剂＂通过皮肤递送p53模拟物/激动剂，在所述递药系统中活性剂一般包含在用作固定于皮肤的递药装置的层状结构内。在这类结构中，药物组合物一般包含在上背面层(upper backing layer)之下的层或＂贮库(reservoir)＂中。可以理解本文上下文中的术语＂贮库＂指最终用于递送到皮肤表面的＂活性组分＂的用量。因此，例如，＂贮库＂可以包括在贴剂背面层上的粘合剂中或本领域技术人员公知的各种不同基质配制物中的活性组分。贴剂可以含有单一贮库或其可以含有多个贮库。
在一个实施方案中，贮库包含用于在递药过程将系统固定于皮肤的可药用的接触胶粘材料的聚合物基质。合适的皮肤接触胶粘材料的实例包括，但不限于聚乙烯类、聚硅氧烷类、聚异丁烯类、聚丙烯酸酯类、聚氨酯类等。或者，含药物的贮库和皮肤接触粘合剂作为单独和不同的层存在，粘合层在贮库之下，在这种情况中，所述的贮库可以为如上所述的聚合物基质或可以为液体或水凝胶贮库，或可以采取某些其它形式。在这些叠层中用作装置的上表面的背面层优选作为＂贴剂＂的主要结构单元起作用，并且提供了具有其较多灵活性的装置。选择用于表面层的材料优选基本上不能透过活性剂和存在的任意其它材料。
在一些情况中，尤其是在全身用药生物利用度低的情况中，将p53模拟物/激动剂直接施用于肿瘤部位或对手术后的肿瘤部位。例如，在手术操作过程中，可以通过套管或通过注射或放置定时释放制剂导引这类递送。
用于局部递药系统的其它优选的制剂包括，但不限于软膏剂(ointment)和霜剂(cream)。软膏剂为一般基于凡士林(petrolatum)或其它石油衍生物的半固体制剂。含有所选活性剂的霜剂一般为粘性液体或半固体乳剂，通常为水包油型或油包水型的。霜剂基质一般为可水洗的并且含有油相、乳化剂和水相。油相有时也称作＂内＂相，一般包含凡士林和脂肪醇，诸如鲸蜡醇(cetyl alcohol)或硬脂醇(stearyl alcohol)；水相通常，但不一定在体积上超过油相，并且一般含有保湿剂(humectant)。霜剂中的乳化剂一般为非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂。正如本领域技术人员可以理解的，所用具体的软膏剂或霜剂基质为提供最佳递药的一种基质。作为其它载体或媒介物，软膏剂基质应为惰性的、稳定的、无刺激性的和非致敏性的。
IV.癌症的缓解/治疗
在一些情况中，施用本发明的p53模拟物/激动剂以缓解癌症的一种或多种症状(例如诱导癌细胞的细胞死亡)。可以施用p53模拟物/激动剂以减缓肿瘤生长/增殖，抑制转移，预防复发(例如术后、放疗后等)，或作为多程式疗法(multiple-modality therapy)中的组成部分。
一般而言，以足以产生生物作用(例如抑制癌细胞生长和/或增殖)的用量施用p53模拟物/激动剂。预期在以p53稚细胞为特征的癌中有最大功效。
V.试剂盒
在另一种实施方案中，本发明提供了用于筛选p53模拟物/激动剂的试剂盒。这类试剂盒一般包含含有如本文所述的细胞系的容器。
在其它实施方案中，本发明提供了促进p53稚细胞的细胞死亡的试剂盒。这些试剂盒一般包含含有一种或多种本发明p53模拟物/激动剂的容器。
试剂盒可以任选包括一种或多种用于本发明方法中的试剂。这类＂试剂＂可以包括，但不限于细胞和/或细胞系、转染试剂(例如CaPO4、lipofectin)、可检测的标记、用于检测标记的用具、缓冲剂、抗-转运蛋白抗体、编码持家基因(housekeeping gene)的核酸构建体、生物反应器、注射器和其它装置。
此外，试剂盒可以包括含有用于实施本发明方法的说明(即规程)的指导材料。一些优选的指导材料提供了使用筛选p53模拟物/激动剂或促进p53稚细胞的细胞死亡的试剂盒内含物的规程。尽管指导材料一般包含了书面或印刷的材料，但是它们并不限于此。本发明预期能够保存这类说明书并将它们传达给最终用户的任何介质。这类介质包括，但不限于电子储存介质(例如磁性的盘、带、盒(cartridge)、芯片)、光学介质(例如CD ROM)等。这类介质可以包括提供这类指导材料的互联网站点的地址。
实施例
提供下列实施例是为了解释，但并非用来限制要求保护的本发明。
实施例1
P53模拟物的鉴定
为了鉴定p53模拟物，我们研发了报导前-细胞凋亡Bax蛋白表达促进的活哺乳动物细胞系统。所述bax启动子由372个核苷酸5′UTR、TATAA序列和结合p53的若干共有序列组成，从而产生对Bax表达的上调(参见，例如，图1)。通过表达这些在HEK293T细胞中编码荧光素酶的基因上游的位点，我们建立了一组新的报道细胞系。这些细胞提供了能够鉴定Bax表达的直接激活物和p53细胞凋亡功能的替代物的系统。
取代p53功能的小分子的发现
在最初的研究中，p53表达质粒与具有寡聚化共有结合位点的报道基因的共转染产生了强烈发光细胞，而与无关质粒的共转染则不发光。我们的系统表现出足够高的信号和足够低的背景以允许从化合物库中分离小分子。通过使用多-探针II液体处理机器人系统和超灵敏的Top-Count发光计，在BuckInstitute能够进行数以千计的化合物的高速筛选。
在HEK293T细胞中的我们的p53报道基因系统中，我们获得并且筛选了可以由National Cancer Institute获得的2000种化合物小分子库。令人意外的是，我们鉴定了8种化合物，它们对p53报道基因系统起作用并得到荧光素酶表达和活性的增加。一种化合物(称作Rp53-1或G6)产生了显著的荧光素酶活性水平并且在高浓度(10μM)诱导的荧光素酶表达水平高于转染的野生型p53(参见，例如，图2B)。
化疗剂Rp53-1特异性地靶向瘤形成
为了评价小分子化合物Rp53-1模拟导致Bax表达和诱导细胞死亡的p53促进转录功能的能力，用Rp53-1处理p53-突变的MDA-MB-435和p53-野生型MCF-7人乳腺癌细胞。令人关注的是，仅前者对Rp53-1敏感(图3)。类似地，其它p53-突变体肿瘤细胞系也对p53-1敏感(结肠：ColoHSR，SW480，HT29；前列腺：PC-3，DU145；骨肉瘤：SAOS-2)，而p53-野生型细胞为抗性的(结肠：Lovo；前列腺：LNCaP)。由Rp53-1仅在p53-突变细胞中诱导死亡显示的特异性使得它成为用作p53-无活性(或p53-机能不良)肿瘤(即临床最常见的相关肿瘤)的治疗干预中的理想候选物。在产生正常p53活性的细胞(所有其它人细胞)中缺少毒性将减少可能的副作用。
由于p53上调Bax表达，通过它还下调相关的抗-细胞凋亡Bcl-2(由此具有至少两种导致细胞死亡的作用)，所以鉴定能够通过上调Bax来取代丢失的p53活性，由此以不依赖p53的方式诱导细胞死亡(即在无p53功能存在下通过用小分子取代p53功能活性来诱导细胞死亡)的小分子，可以发现控制组织内Bax和Bcl-2的新的工具。这些关键分子在人瘤形成中的重要性得到了人癌瘤中高频率的p53、Bax和Bcl-2突变的支持。
结论
第一种p53模拟物，即活性化合物Rp53-1的发现验证并显示了上面概述的方法的潜力。本文所述的筛选系统显著增加了我们获得如Rp53-1的发现、优化针对人临床试验的Rp53-1并且能够产生根除乳腺癌的新手段的可能。
实施例2
使用p53模拟物作为Bax表达的激活物的癌症治疗剂
p53突变与所有人肿瘤的高百分比相关。使用本文研发的新的高通量小分子筛选，在Buck Institute′s Discovery Translation Unit(DTU)的科学家们已发现称作G6的第一种p53功能模拟物。可以将G6和相关治疗剂开发为癌症的治疗剂，所述的癌症包括乳腺癌、前列腺癌、肺癌、结肠癌和胰腺癌以及骨肉瘤。
背景
将p53视为＂基因组的守护者＂。p53的作用之一在于使遗传异常的细胞程序性细胞死亡，由此抑制肿瘤生长。如果p53不存在或突变成非功能形式，那么其作为肿瘤阻抑物的关键作用就被消除，正如在许多癌症中所观察到的。活化p53通常对于使肿瘤细胞对化疗和放疗敏感而言是必不可少的；缺乏p53功能通常与对这些疗法的无应答性相关。所有人类肿瘤中有超过一半缺乏适当的p53功能。并不令人意外的是，长期寻找恢复p53功能的方法作为抗癌策略，但是，已经证实这是一个令人畏缩的难题。
p53的一个关键功能在于调节对生命重要的蛋白质表达和在对不良的肿瘤情况应答时细胞作出死亡决策(death decision)，所述的不良肿瘤情况诸如导入DNA的有害突变或增殖率的无法确保的增加。活化p53(通过修饰如磷酸化(图4，圆圈))导致作为拮抗配偶体Bax和Bcl2的这类蛋白质的表达改变。
在肿瘤形成条件中，p53上调前-死亡蛋白质Bax的表达，同时它下调抗-死亡(致瘤)蛋白Bcl2。此外，唯一已知的Bax表达的内源性激活物为p53。所有晚期人乳腺癌中有三分之一表现出Bax表达的显著下降。显示Bax表达下降的患者亚组一般对治疗应答很差并且显示快速的肿瘤生长和较短的生存中值。由于这些和其它原因，我们设计了用于小分子化合物的筛选，这些小分子化合物可模拟p53作为肿瘤生成延迟剂的作用。
技术
预计作为p53模拟物起作用的小分子化合物的筛选可产生对许多癌症的治疗剂。第一种p53功能模拟物活性化合物G6的发现(参见，例如，图2A和2B)验证并显示了该方法的潜能。我们使用新的活细胞高通量筛选系统确定G6(图2A)可以补救在瘤形成中丢失的p53转录活性。这种＂前导＂化合物为在癌症中进行人体临床试验的优化提供了机会，所述的癌症为p53缺陷型的或表达错误的p53。显然，可以通过相同筛选方法鉴定其它化合物族。
最初的药物设计中固有的是开发疗法的策略，所述疗法靶向含有细胞的突变体p53并且可以使表达正常的p53的健康细胞不受影响(图3)。由于断定G6作为前导化合物的可靠性，所以用G6处理的每种p53缺陷型肿瘤细胞系均显示出易感性，而来自相应正常组织的野生型细胞不受影响，由此证实了药物的选择性(参见，例如，表1和图8和9)。
表1.P53wt和缺失细胞对G6敏感
Figure A200580036012D00191
由于G6活化了内在细胞途径，所以纳摩尔范围的G6单脉冲足以激活细胞死亡程序(图7)。由此G6表现为有效治疗。
G6在人骨肉瘤异种移植的裸鼠中的初步试验已经显示出希望(promise)(图10)。具有p53异常肿瘤的小鼠对G6反应充分。肿瘤完全消退并且小鼠中无一显示对用G6治疗反应出的不良副作用。进一步的小鼠研究目前正在进行中。
可以理解本文所述的实施例和实施方案仅出于解释目的，并且可以提示本领域技术人员对其进行变型或改变，且它们均包括在本申请的精神和范围内以及所附权利要求的范围内。为此将本文引述的所有出版物、专利和专利申请在此通过它们的完整引用并入本文。

Claims (25)

1.组合物，其包含促进p53稚细胞的细胞死亡的化合物或其可药用的酯或盐，所述的化合物包含下式：
Figure A200580036012C00021
其中：
R1和R4独立地选自下组：氨基、氰基、硝基、羧基、卤素、羟基、SO2、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-8烷氧基、C1-11烷氧基烷基、C1-6烷基氨基和C1-6氨基烷基；
R2和R3独立地选自C、N组成的组；
R5为C或O；
R6和R7独立地选自H、H、卤素、CN、NO2、C1-10支链或非支链饱和或不饱和烷基、C1-10支链或非支链烷氧基、C1-10支链或非支链酰基、C1-10支链或非支链酰氧基、C1-10支链或非支链烷硫基、氨基磺酰基、芳基、芳酰基、芳氧基、芳基磺酰基、杂芳基和杂芳氧基组成的组；
R8选自NO2、OH、COOH组成的组；
R9选自H、CH3组成的组。
2.权利要求1所述的组合物，其中R6和R7均为卤素。
3.权利要求1所述的组合物，其中R1和R4均为氨基。
4.权利要求1所述的组合物，其中R2和R3均为N。
5.权利要求1所述的组合物，其中R8为NO2。
6.权利要求1所述的组合物，其中所述的化合物具有下式：
Figure A200580036012C00031
7.权利要求1-6中任一项所述的组合物，其中所述的化合物在可药用的赋形剂中。
8.权利要求7所述的组合物，其中将该组合物配制成单位剂量剂型。
9.促进p53稚细胞的细胞死亡的方法，该方法包含使所述细胞接触诱导ras转录的化合物。
10.权利要求9所述的方法，其中所述的化合物在权利要求1-6中任一项的组合物中。
11.权利要求9所述的方法，其中所述的化合物在可药用的赋形剂中。
12.权利要求9所述的方法，其中所述的细胞为癌细胞。
13.权利要求12所述的方法，其中所述的细胞为癌细胞，所述的癌细胞选自下组：肝癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞、肺癌细胞、子宫癌细胞、卵巢癌细胞、前列腺癌细胞和结肠癌细胞。
14.用于筛选试剂的细胞系，所述试剂促进p53稚细胞的细胞死亡，该细胞系包含含有核酸构建体的哺乳动物细胞，所述的核酸构建体包含包括5′UTR、TATAA序列和一个或多个结合p53的共有序列的bax启动子元件，其中所述的bax启动子元件可操作地与报道基因连接，使得p53蛋白与一个或多个所述共有序列的结合可诱导或增加所述报道基因的转录。
15.权利要求14所述的细胞系，其中所述的报道基因为选自下组的报道基因：荧光蛋白、荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶(CAT)、β-半乳糖苷酶(β-gal)、碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶(HRP)和生长激素(GH)。
16.权利要求14所述的细胞系，其中所述的报道基因为荧光素基因。
17.权利要求14所述的细胞系，其中所述的哺乳动物细胞为p53稚细胞。
18.权利要求14所述的细胞系，其中所述的哺乳动物细胞为HEK293T细胞。
19.鉴定促进p53稚细胞的细胞死亡的试剂的方法，该方法包括：
使来自权利要求14-17中任一项的细胞系的细胞接触一种或多种测试剂；
检测来自所述细胞中报道基因的信号，其中来自所述报道基因的信号增加表示所述的试剂为可能促进p53稚细胞的细胞死亡的试剂。
20.权利要求19所述的方法，其中使多种测试剂同时接触所述的细胞。
21.权利要求19所述的方法，其中使单一测试剂接触所述的细胞。
22.权利要求19所述的方法，其中所述的增加是相对于缺乏所述测试剂的对照而言。
23.权利要求19所述的方法，其中所述的增加是相对于包含较低浓度的所述测试剂的对照而言。
24.权利要求19所述的方法，其中通过机器人系统进行所述的方法。
25.权利要求19所述的方法，其中所述的测试剂来自选自下组的库：Chem Bridge DiverSet E、Bionet 1、CEREP、Maybridge 1、Maybridge 2、Peakdale1、Peakdale 2、ChemDiv Combilab and International、Mixed Commercial Plate 1、Mixed Commercial Plate 2、Mixed Commercial Plate 3、Mixed Commercial Plate4、ChemBridge Microformat、Commercial Diversity Set1、NCI StructuralDiversity Set version 1、NCI Structural Diversity Set version 2、NCI MechanisticDiversity Set、NCI Open Collection 1、NCI Open Collection 2、NINDS CustomCollection、SpecPlus Collection、BIOMOL ICCB Known Bioactives、ICCBDiscretes Collections、ICCB2、ICCB3、ICCB4、NCI Marine Extracts、含水级分-NCI Plant and Fungal Extracts、有机级分-NCI Plant and Fungal Extracts、Philippines Plant Extracts 1、Philippines Plant Extracts 2和Starr FoundationExtracts 1。
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WO (1) WO2006023410A2 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108024987A (zh) * 2014-10-10 2018-05-11 德玛医药 用于治疗癌症的二去水卫矛醇的类似物或衍生物与含铂抗肿瘤药物的组合
CN108135151A (zh) * 2015-09-02 2018-06-08 瑞泽恩制药公司 前列腺癌的啮齿动物模型

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101432001A (zh) 2004-08-20 2009-05-13 巴克年龄研究协会 取代或激动p53功能的小分子
EP3125920B1 (en) 2014-04-04 2020-12-23 Del Mar Pharmaceuticals Dianhydrogalactitol, diacetyldianhydrogalactitol or dibromodulcitol to treat non-small-cell carcinoma of the lung and ovarian cancer

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1998583A (en) * 1930-01-27 1935-04-23 Ig Farbenindustrie Ag Inorganic acid esters of the condensation products of a glycol and chlorinated paraffin hydrocarbons
GB8400665D0 (en) * 1984-01-11 1984-02-15 Secr Defence Disubstituted ethanes
US5506337A (en) * 1985-03-15 1996-04-09 Antivirals Inc. Morpholino-subunit combinatorial library and method
US4699789A (en) * 1985-09-27 1987-10-13 Eastern Artificial Insemination Cooperative, Inc. Viral free semen and methods of producing the same
AU598305B2 (en) * 1986-10-14 1990-06-21 Gekkeikan Sake Company, Ltd. Quality improvement of alcoholic liquors
US5010175A (en) * 1988-05-02 1991-04-23 The Regents Of The University Of California General method for producing and selecting peptides with specific properties
IE66205B1 (en) 1990-06-14 1995-12-13 Paul A Bartlett Polypeptide analogs
US5650489A (en) 1990-07-02 1997-07-22 The Arizona Board Of Regents Random bio-oligomer library, a method of synthesis thereof, and a method of use thereof
US5573905A (en) 1992-03-30 1996-11-12 The Scripps Research Institute Encoded combinatorial chemical libraries
US5288514A (en) 1992-09-14 1994-02-22 The Regents Of The University Of California Solid phase and combinatorial synthesis of benzodiazepine compounds on a solid support
JPH06256113A (ja) * 1993-03-01 1994-09-13 Mitsubishi Petrochem Co Ltd 除草剤組成物
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US5659024A (en) 1994-01-14 1997-08-19 The Burnham Institute Promotors that regulate the expression of genes involved in cell death
US5593853A (en) 1994-02-09 1997-01-14 Martek Corporation Generation and screening of synthetic drug libraries
US5539083A (en) 1994-02-23 1996-07-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Peptide nucleic acid combinatorial libraries and improved methods of synthesis
US5525735A (en) * 1994-06-22 1996-06-11 Affymax Technologies Nv Methods for synthesizing diverse collections of pyrrolidine compounds
US5549974A (en) * 1994-06-23 1996-08-27 Affymax Technologies Nv Methods for the solid phase synthesis of thiazolidinones, metathiazanones, and derivatives thereof
US5856362A (en) * 1994-09-02 1999-01-05 Glaxo Wellcome Inc. Medicaments for the treatment of toxoplasmosis
DE69638269D1 (de) 1995-06-14 2010-11-18 Univ California Hochaffine humane antikörper gegen tumorantigene
US5569588A (en) 1995-08-09 1996-10-29 The Regents Of The University Of California Methods for drug screening
US5744310A (en) * 1996-07-29 1998-04-28 The Burnham Institute Bax promoter sequence and screening assays for indentifying agents that regulate bax gene expression
US5837838A (en) * 1997-03-14 1998-11-17 The Burnham Institute Bax inhibitor proteins
US6228850B1 (en) * 1997-09-30 2001-05-08 Dabur Research Foundation Antiangiogenic activity of betulinic acid and its derivatives
US6235714B1 (en) 1998-03-23 2001-05-22 Sudhir Paul Methods for identifying inducers and inhibitors of proteolytic antibodies, compositions and their uses
KR100311949B1 (ko) * 1999-03-10 2001-11-02 최승주 1-[(사이클로펜트-3-엔-1-일)메틸]-5-에틸-6-(3,5-다이메틸벤조일)-2,4-피리미딘다이온의제조방법
WO2001012228A2 (en) * 1999-08-13 2001-02-22 University Of Maryland Biotechnology Institute Compositions for treating viral infections, and methods therefor
MXPA03000431A (es) * 2000-07-21 2003-06-24 Syngenta Participations Ag Proceso para preparar 4,6-dimetoxi-2-(metilsulfonil)-1,3-pirimidina.
CN101432001A (zh) 2004-08-20 2009-05-13 巴克年龄研究协会 取代或激动p53功能的小分子

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108024987A (zh) * 2014-10-10 2018-05-11 德玛医药 用于治疗癌症的二去水卫矛醇的类似物或衍生物与含铂抗肿瘤药物的组合
CN108135151A (zh) * 2015-09-02 2018-06-08 瑞泽恩制药公司 前列腺癌的啮齿动物模型

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