CN101422462A - 磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 - Google Patents
磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101422462A CN101422462A CNA2008102401063A CN200810240106A CN101422462A CN 101422462 A CN101422462 A CN 101422462A CN A2008102401063 A CNA2008102401063 A CN A2008102401063A CN 200810240106 A CN200810240106 A CN 200810240106A CN 101422462 A CN101422462 A CN 101422462A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dilated cardiomyopathy
- ligustrazine phosphate
- medicine
- application
- preparation treatment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- KWWLGXNRLABSMP-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;2,3,5,6-tetramethylpyrazine Chemical compound OP(O)(O)=O.CC1=NC(C)=C(C)N=C1C KWWLGXNRLABSMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 46
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims abstract description 20
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 13
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000004217 heart function Effects 0.000 claims abstract description 10
- 102000016349 Myosin Light Chains Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 108010067385 Myosin Light Chains Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 210000001908 sarcoplasmic reticulum Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 101150008975 Col3a1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 101100403745 Mus musculus Myot gene Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 230000008965 mitochondrial swelling Effects 0.000 claims abstract description 5
- 102100026893 Troponin T, cardiac muscle Human genes 0.000 claims description 15
- 101710165323 Troponin T, cardiac muscle Proteins 0.000 claims description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 15
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 claims description 11
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 8
- 102000002585 Contractile Proteins Human genes 0.000 claims description 6
- 108010068426 Contractile Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000001788 irregular Effects 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 101150008656 COL1A1 gene Proteins 0.000 abstract description 5
- 230000034994 death Effects 0.000 abstract description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 102100030540 Gap junction alpha-5 protein Human genes 0.000 abstract 1
- 101710177922 Gap junction alpha-5 protein Proteins 0.000 abstract 1
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 abstract 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 abstract 1
- 101150069582 MYL4 gene Proteins 0.000 abstract 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 abstract 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 abstract 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 8
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 4
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 2
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FINHMKGKINIASC-UHFFFAOYSA-N Tetramethylpyrazine Chemical compound CC1=NC(C)=C(C)N=C1C FINHMKGKINIASC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004903 Troponin Human genes 0.000 description 2
- 108090001027 Troponin Proteins 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 101100447432 Danio rerio gapdh-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038894 Myotilin Human genes 0.000 description 1
- 101710100281 Myotilin Proteins 0.000 description 1
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 description 1
- 229920002334 Spandex Polymers 0.000 description 1
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- IYPRWQPJYRBHIS-UHFFFAOYSA-N acetic acid;uranium Chemical compound [U].CC(O)=O IYPRWQPJYRBHIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H bis[[2-(5-hydroxy-4,7-dioxo-1,3,2$l^{2}-dioxaplumbepan-5-yl)acetyl]oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HOQPTLCRWVZIQZ-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 description 1
- 201000002950 dengue hemorrhagic fever Diseases 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960004756 ethanol Drugs 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- RNQBLUNNAYFBIW-NPULLEENSA-M hexadecyl(trimethyl)azanium (2S)-2-(6-methoxynaphthalen-2-yl)propanoate Chemical compound COc1ccc2cc(ccc2c1)[C@H](C)C([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C RNQBLUNNAYFBIW-NPULLEENSA-M 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- ABCGFHPGHXSVKI-UHFFFAOYSA-O meso-tetrakis(n-methyl-4-pyridyl)porphine(4+) Chemical compound C1=C[N+](C)=CC=C1C(C1=CC=C(N1)C(C=1C=C[N+](C)=CC=1)=C1C=CC(=N1)C(C=1C=C[N+](C)=CC=1)=C1C=CC(N1)=C1C=2C=C[N+](C)=CC=2)=C2N=C1C=C2 ABCGFHPGHXSVKI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- IYDGMDWEHDFVQI-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxotungsten Chemical compound O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.O=[W](=O)=O.OP(O)(O)=O IYDGMDWEHDFVQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000004759 spandex Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N tribromoethanol Chemical compound OCC(Br)(Br)Br YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004616 tribromoethanol Drugs 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 206010047470 viral myocarditis Diseases 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明属于医药领域，提供磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用。所述磷酸川芎嗪具有以下功能：长期给药可降低遗传性扩心病的死亡率，改善扩张型心肌病的心功能，减轻左心室的扩张；减轻扩心病心肌细胞的肥大及间质胶原的增生；减轻扩心病心肌纤维粗细不均，排列紊乱，线粒体肿胀、嵴断裂，肌浆网扩张，闰盘连接破坏；提高心肌细胞间连接蛋白Cx40的表达，提高肌球蛋白轻链Myl4、Myl7的表达，降低肌收缩蛋白Myot的表达，降低胶原纤维Col1a1、Col3a1的表达。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，特别是涉及磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用。
背景技术
扩张型心肌病，是以心室扩张和心肌收缩功能受损为主要特征的心肌疾病，临床表现以进行性心力衰竭、心律失常、血栓栓塞，甚至猝死为基本特征，预后极差，5年生存率不及50％。典型病理特征是心室腔扩张，心壁变薄，心肌细胞凋亡，主要病因是病毒性心肌炎和基因突变，占扩张型心肌病发病率的70％。
临床研究中发现了多种与扩心病相关的突变基因，但多数基因突变会同时导致HCM和DCM，而cTnT蛋白的R141W突变(肌钙蛋白的精氨酸Arg→色氨酸Trp)仅导致DCM，因此该突变的基因模型对于研究扩心病的发病具有特异性。中国医学科学院实验动物研究所遗传中心建立的转基因扩张型心肌病模型cTnTR141W为目前国内仅有的扩心病基因工程动物模型，该模型小鼠表现为心室扩张、室壁变薄、心功能下降，与人类扩心病的病理表型相似。
川芎嗪(C8H12N2)是一种存在于许多植物如川芎中的已知化学单体，磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O，Tetramethylpyrazine Phosphate，TMPP)为其衍生物，其结构及有关生物活性己报道于有关教科书及已发表的文献中，但磷酸川芎嗪作为制备治扩张型心肌病药的用途至今未见报道。
发明内容
本发明的主要目的在于提供磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用。
本发明提供的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用：
所述磷酸川芎嗪包括磷酸川芎嗪单体及赋形剂或载体；
所述的扩张型心肌病是指cTnTR141W(肌钙蛋白T的精氨酸Arg→色氨酸Trp)导致的死亡。
所述的扩张型心肌病是指cTnTR141W导致的左心室进行性扩张，心功能进行性减退。
所述的扩张型心肌病是指cTnTR141W导致的左心室心肌细胞的不规则肥大，间质的胶原纤维增生。
所述的扩张型心肌病是指cTnTR141W导致的心肌纤维粗细不均，排列紊乱，线粒体肿胀、嵴断裂，肌浆网扩张，闰盘连接破坏。
所述的扩张型心肌病是指cTnTR141W导致的心肌细胞间连接蛋白Cx40表达的降低，肌球蛋白轻链My14、My17表达的降低，肌收缩蛋白Myot表达的升高，胶原纤维Col1a1、Col3a1表达的升高。
本发明的磷酸川芎嗪一般以药物组合物的形式使用，也可以单体的形式使用。可通过口服、注射给药，可以这种组合物含有治疗有效计量的作为活性成分的磷酸川芎嗪和可药用辅料。含有磷酸川芎嗪的药物组合物可通过口服、注射给药，可以制成片剂、胶囊、粉剂、颗粒、锭剂，或口服液等剂型供临床应用。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
本发明提供的磷酸川芎嗪具有以下功能：可减轻肌钙蛋白突变导致的左心室的进行性扩张及心功能的减退；减轻心肌细胞的不规则肥大，减少间质胶原纤维的生成；改善心肌纤维排列及闰盘结构，减轻线粒体肿胀，肌浆网扩张；增加心肌细胞间连接蛋白、肌球蛋白轻链的表达，降低肌收缩蛋白的表达。从而为磷酸川芎嗪应用于扩张型心肌病的防治提供了直接有力的实验依据和理论基础，既有很强的科学性和创新性，又有很高的开发应用价值。
本发明利用实验室建立的cTnTR141W转基因扩张型心肌病模型，对20种低毒、结构明确、对心血管系统有治疗潜力的中药单体成分进行筛选，结果显示磷酸川芎嗪对扩张型心肌病具有较好的防治作用。磷酸川芎嗪长期给药可降低扩心病的死亡率，改善扩张型心肌病的心功能，减轻左心室的扩张；减轻扩心病心肌细胞的肥大及间质胶原的增生；减轻扩心病心肌纤维粗细不均，排列紊乱，线粒体肿胀、嵴断裂，肌浆网扩张，闰盘连接破坏；提高心肌细胞间连接蛋白Cx40的表达，提高肌球蛋白轻链My14、My17的表达，降低肌收缩蛋白Myot的表达，降低胶原纤维Col1a1、Col3a1的表达。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的技术方案进行一步说明，但不作对本发明的限定：
实施例1
磷酸川芎嗪长期给药对扩心病模型小鼠生存率的影响：
1.动物分组及给药：PCR法鉴定cTnTR141W转基因阳性鼠。将阴性鼠作为对照，阳性鼠在出生1.5个月后根据心脏超声结果将动物按体重、心功能均匀分为模型组及磷酸川芎嗪给药组，每组12只。磷酸川芎嗪(45mg/kg，国药准字H11021964，北京市燕京药业有限公司)口服给药，连续给药6个月。
2.生存分析：该cTnTR141W转基因扩张型心肌病模型在饲养过程中有个体的死亡，我们将从给药开始到观察终点各组的动物死亡数记录下来，阴性对照组动物死亡数为0只，模型组动物死亡数为7只，磷酸川芎嗪组动物死亡数为2只，结果显示磷酸川芎嗪可降低扩心病模型的死亡率。
实施例2
磷酸川芎嗪长期给药对扩心病模型小鼠心功能及构型的影响(超声)：
每个月进行一次心脏超声检测，三溴乙醇麻醉，采用小动物超声仪(Vevo770小动物超声探测系统，加拿大)，30MHz的探头扫描，对左心室长轴M超结果进行心脏超声影像分析，比较各组动物的心脏形态及心功能，包括BW(body weight，体重)、LVPW；d(舒张期左室后壁的厚度)、LVPW；s(收缩期左室后壁的厚度)、LVAW；d(舒张期左室前壁的厚度)、LVAW；s(收缩期左室前壁的厚度)LV Mass(AW)(左室重量)、Diameter；s(收缩期左室内径)、Diameter；d(舒张期左室内径)、Volume；s(收缩期左室容积)、Volume；d(舒张期左室容积)、SV(Stroke Volume，每搏输出量)、EF(Ejection Fraction，射血分数)、FS(Fractional Shortening，短轴缩短率)、CO(Cardiac Output，心输出量)。结果显示磷酸川芎嗪可显著减轻扩心病模型心腔的扩张，改善心功能，其作用包括显著降低左心室内径及容积，增加射血分数及短轴缩短率，降低左心室重量。具体结果见表1。
表1 给药6个月心脏超声结果
实施例3
磷酸川芎嗪长期给药对扩心病模型小鼠心脏显微结构的影响
(HE及Masson染色)：
1.方法：固定心脏，石蜡切片，常规HE染色。Masson复合染色液5min，0.2％醋酸水溶液稍洗，5％磷钨酸5-10min，0.2％醋酸水溶液浸洗2次，亮绿染色液5min。0.2％醋酸水溶液浸洗2次，无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。光镜下观察：胶原纤维呈绿色，肌纤维呈红色，红细胞呈桔红色。
2.结果：光镜下观察，模型组心肌纤维不均匀肥大，排列紊乱，部分细胞空泡样变性；心肌细胞核大，深染，伴异形；心肌局部有纤维组织增生。磷酸川芎嗪组心肌细胞的肥大及排列紊乱均有显著改善，间质的胶原纤维也显著减少。
实施例4
磷酸川芎嗪长期给药对扩心病模型小鼠左心室超微结构的影响(电镜)：
1.方法：新鲜心肌组织固定于2.5％戊二醛溶液，再用1％锇酸后固定，丙酮梯度脱水后用Epon812包埋，每例包埋5块，超薄切片用醋酸铀及枸橼酸铅双染色，JEM1230型投射电镜观察。仪器：JEM1230型透射电镜(日本电子公司)，LEICA UCT型超薄切片机(德国莱卡公司)。
2.结果：模型组心肌纤维粗细不均，线粒体高度肿胀及空泡形成，肌质网中度扩张，闰盘连接破坏。磷酸川芎嗪组心肌纤维结构清晰，大部分线粒体结构正常，肌质网轻度扩张，闰盘结构较清晰。
实施例5
磷酸川芎嗪长期给药对扩心病模型小鼠心脏重要基因表达的影响(RT-PCR法)：
1.方法：将组织在液氮中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1ml Trizol液研磨，研磨液室温放置5分钟；加0.2ml氯仿，盖紧离心管，剧烈摇荡离心管15秒；取上层水相于一新的离心管，加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟，4℃下12000g离心10分钟；弃上清液，加入1ml 75％乙醇，涡旋混匀，4℃下7500g离心5分钟；小心弃去上清液，室温干燥5-10分钟，将RNA溶于水中。取2ug RNA，用SSIIIRT(Invitrogen)试剂盒合成cDNA。PCR反应体系(20μl)及条件：10XPCR Buffer 2μl，25mM MgCL2 1μl，10mM dNTPs 0.4μl，25μM上下游引物各0.2μl，cDNA 1μl，Taq Polymerase 0.2μl，ddH2O 15μl。反应条件为94℃预变性30sec，72℃延伸30sec，退火温度及时间、引物序列、循环数如表2所示：
表2 RT-PCR引物序列及反应条件
Gapdh(3-磷酸甘油醛脱氢酶)为内参照；
Cx40，43为connexin40，43(连接蛋白)；
My14，My17为myosin light chain(肌球蛋白轻链)；
Myot为myotilin(肌收缩蛋白)；
Col1a1为collagen，type1，alpha1(I型胶原纤维)；
Col3a1为collagen，type3，alpha1(III型胶原纤维)；
2.结果：磷酸川芎嗪提高心肌细胞间连接蛋白Cx40的表达，提高肌球蛋白轻链My14、My17的表达，降低肌收缩蛋白Myot的表达，降低胶原纤维Col1a1、Col3a1的表达。
Claims (9)
1、磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用。
2、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述磷酸川芎嗪包括磷酸川芎嗪单体及赋形剂或载体。
3、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述扩张型心肌病是指cTnT蛋白的R141W突变导致的心肌病。
4、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述的扩张型心肌病是指cTnT蛋白的R141W突变导致的左心室进行性扩张，心功能进行性减退。
5、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述的扩张型心肌病是指cTnT蛋白的R141W突变导致的左心室心肌细胞的不规则肥大，间质的胶原纤维增生。
6、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述的扩张型心肌病是指cTnT蛋白的R141W突变导致的心肌纤维粗细不均，排列紊乱，线粒体肿胀、嵴断裂，肌浆网扩张，闰盘连接破坏。
7、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述的扩张型心肌病是指cTnT蛋白的R141W突变导致的心肌细胞间连接蛋白Cx40表达的降低，肌球蛋白轻链My14、My17表达的降低，肌收缩蛋白Myot表达的升高，胶原纤维Colla1、Col3a1表达的升高。
8、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述磷酸川芎嗪以药物组合物的形式使用。
9、根据权利要求1所述的磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用，其特征在于，所述磷酸川芎嗪以单体的形式使用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008102401063A CN101422462B (zh) | 2008-12-18 | 2008-12-18 | 磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008102401063A CN101422462B (zh) | 2008-12-18 | 2008-12-18 | 磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101422462A true CN101422462A (zh) | 2009-05-06 |
| CN101422462B CN101422462B (zh) | 2011-08-17 |
Family
ID=40613491
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2008102401063A Expired - Fee Related CN101422462B (zh) | 2008-12-18 | 2008-12-18 | 磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101422462B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111419876A (zh) * | 2020-04-30 | 2020-07-17 | 复旦大学附属中山医院 | 线粒体移植在治疗原发性扩心病中的应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1212861C (zh) * | 1999-09-17 | 2005-08-03 | 第一三得利制药株式会社 | 以NF－κB抑制剂为有效成分的心肌炎、扩张型心肌病和心衰的预防或治疗药 |
| CN1824776A (zh) * | 2005-02-23 | 2006-08-30 | 中国医学科学院阜外心血管病医院 | 扩张型心肌病诊断和治疗方法及用于该方法的试剂 |
| CN1969940A (zh) * | 2005-11-22 | 2007-05-30 | 李呼伦 | 一种抗病毒药用组合物 |
-
2008
- 2008-12-18 CN CN2008102401063A patent/CN101422462B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111419876A (zh) * | 2020-04-30 | 2020-07-17 | 复旦大学附属中山医院 | 线粒体移植在治疗原发性扩心病中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101422462B (zh) | 2011-08-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Li et al. | Bioengineering an electro-mechanically functional miniature ventricular heart chamber from human pluripotent stem cells | |
| Luitel et al. | Pressure overload leads to an increased accumulation and activity of mast cells in the right ventricle | |
| Weinberger et al. | Cardiac regeneration: new hope for an old dream | |
| CN102316879B (zh) | 药物制剂 | |
| Ai et al. | Transient secretion of VEGF protein from transplanted hiPSC-CMs enhances engraftment and improves rat heart function post MI | |
| CN103619168B (zh) | 用于治疗白血病的组合物、方法和药盒 | |
| CN110934873A (zh) | 靶向组织微环境中衰老细胞的抗衰老药物d/s及其应用 | |
| CN110628723B (zh) | 基因修饰MSCs治疗2型糖尿病 | |
| Wang et al. | MiR-640 inhibition alleviates acute liver injury via regulating WNT signaling pathway and LRP1. | |
| Fan et al. | Guanxinning injection ameliorates cardiac remodeling in HF mouse and 3D heart spheroid models via p38/FOS/MMP1-mediated inhibition of myocardial hypertrophy and fibrosis | |
| CN101422462B (zh) | 磷酸川芎嗪作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 | |
| Huang et al. | [Retracted] miR‐92b‐3p Exerts Neuroprotective Effects on Ischemia/Reperfusion‐Induced Cerebral Injury via Targeting NOX4 in a Rat Model | |
| CN101390872B (zh) | 人参皂甙Rb1作为制备治疗扩张型心肌病的药物中的应用 | |
| CN104116737A (zh) | 小檗碱用于促进生成线粒体和改善线粒体功能 | |
| Gattuso et al. | Cardiac performance in Salmo salar with infectious salmon anaemia (ISA): putative role of nitric oxide | |
| CN112442102A (zh) | 治疗淋巴水肿的小分子化合物及其用途 | |
| Eshraghi et al. | Circular RNAs: a small piece in the heart failure puzzle | |
| TWI629991B (zh) | 牛樟芝在防治心肌肥大及心肌纖維化中的應用 | |
| CN107951918B (zh) | 金银花石油醚部位提取物在制备治疗肺纤维化药物中的应用 | |
| CN103356637B (zh) | 毛壳素在制备预防和治疗心脏病药物中的应用 | |
| Hu et al. | CDK6 is essential for mesenchymal stem cell proliferation and adipocyte differentiation | |
| CN107243006B (zh) | Amd3100在制备治疗和/或预防恶液质的药物中的应用 | |
| CN102247392A (zh) | 甘草酸治疗扩张型心肌病心脏重构和心功能障碍的用途 | |
| Qu et al. | Induction of substantial myocardial regeneration by an active fraction of the Chinese herb Rosa laevigata Michx | |
| CN112972638B (zh) | 治疗银屑病中药在制备防治心肌缺血再灌注损伤药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20110817 Termination date: 20111218 |