CN101407828A - 一种高温酒精发酵方法 - Google Patents
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Abstract
一种高温酒精发酵方法，是将从自然界土壤样品中筛选所获得的高温酒精酵母斜面保藏种接种于高温酒精酵母种子液中，于35－37℃、pH 3.0－7.0下培养24－48小时，制备得高温酒精酵母种子液。将制备得的高温酒精酵母种子液按10－30％(v/v)的接种量接入高温酒精酵母发酵液中，于37－44℃、pH3.0－7.0下发酵48－72小时。采用本发明在高温下进行酒精发酵，能够克服由于夏季温度高而难以维持生产的问题，使生产成本比用传统的常温酒精酵母发酵大大降低。
Description
一、技术领域
本发明属于一种高温酒精发酵的方法。
二、技术背景
由于石油等不可再生能源的国际供求关系日益紧张，寻找可再生性的替代能源，特别是新的液态燃料，已成为维持我国国民经济持续发展的一项紧迫任务。酒精(乙醇)作为一种可再生能源，可以用来替代或者部分替代石油，从而缓解石油日益枯竭的压力。传统的酒精生产一般在30-34℃下进行，在许多炎热的国家，如东南亚国家、中国南方地区，夏天的气温常高达40℃以上，在没有冷却情况下，由于放热反应，酒精发酵的温度会升高11℃，结果发酵罐内的温度会升高至40℃以上，从而导致酒精产率的下降。因此酒精发酵通常是通过发酵罐内冷却管通入冷却水冷却才能达到生产所需的温度，这势必造成生产成本的增加。采用40-45℃的高温酒精发酵方法可大大地降低发酵过程中的冷却用水，降低能耗(每吨酒精降低冷却用水12吨，电耗降低25千瓦小时)，还可以减少杂菌的污染，同时解决常规工艺在夏天高温时发酵温度难于控制的问题。
三、发明内容
本发明的目的是提供一种高温酒精发酵的方法，该方法能使酒精发酵成本尤其是在夏季发酵时的发酵成本大大降低。
本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种高温酒精发酵方法，所述方法包括以下步骤：
(1)制备高温酒精酵母种子液
将从自然界土壤样品中筛选所获得的高温酒精酵母斜面保藏种接种于高温酒精酵母种子液中，于35-37℃、pH 3.0-7.0下培养24-48小时，制备得高温酒精酵母种子液，
(2)接种到高温酒精酵母发酵液中
将(1)制备得的高温酒精酵母种子液按10-30％(v/v)的接种量接入高温酒精酵母发酵液中，于37-44℃、pH 3.0-7.0下发酵48-72小时。
其中，所述高温酒精酵母的种子液和发酵液的组成为：
(1)所述高温酒精酵母种子液的组成(w/v)为：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4，
(2)所述高温酒精酵母发酵液的组成(w/v)为：10.0-25.0％碳源，0.2％尿素，0.05％MgSO4，其中的碳源是葡萄糖、蔗糖、甘蔗糖蜜、甘蔗汁、木薯粉水解液、玉米粉水解液的一种。
所述从自然界土壤样品中筛选所获得的高温酒精酵母通过以下方法获得：
(1)筛选
从热带、亚热带地区的水果树下、甘蔗地、糖厂、温泉等地方采集土壤样品，分别放置于高温酒精酵母种子液中，于pH 3.0、42℃下静止培养72小时，选择有菌生长的富集培养物于固体平板培养基上进行常规划线分离纯化，固体平板培养基的组成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4、琼脂1.5％，于pH 5.0、42℃下培养，待长出酵母单菌落，用含0.05％红四氮唑的固体平板培养基覆盖于菌落上层，观察菌落颜色深浅变化，挑选出颜色较深的菌株进一步纯化，将纯化的酵母接种于高温酒精酵母种子液中，于37℃、转速为160r/min的摇床中培养24小时，按15％接种量将高温酒精酵母种子液接入发酵液中，发酵液的组成(w/v)：15％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4，于pH 5.0、40℃下静止发酵48小时，测定发酵液的酒精含量，选取酒精含量最高的酵母即得高温酒精酵母。
(2)保藏
将高温酒精酵母接种于斜面培养基上，斜面培养基的组成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4、琼脂1.5％、pH 5.0，37℃培养48小时后于4℃冰箱中保存。
本发明的技术优点如下：
1、使用的是高温酒精酵母发酵酒精，能使酒精发酵成本尤其是在夏季发酵时的发酵成本大大降低。
2、使用的高温酒精酵母发酵液的组成成分简单、经济，能适应于范围较广的原料发酵。
四、具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
1、耐高温酵母的富集、筛选保藏
(1)富集、筛选
从热带、亚热带地区的水果树下、甘蔗地、糖厂、温泉等地方采集土壤样品，分别放置于高温酒精酵母富集培养液中，高温酒精酵母富集培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖、1％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4，于pH 3.0、42℃下静止培养72小时，选择有菌生长的富集培养物于固体平板培养基上进行常规划线分离纯化，固体平板培养基的组成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4、琼脂1.5％，于pH 5.0、42℃下培养，待长出酵母单菌落，用含0.05％TTC(红四氮唑)的固体平板培养基覆盖于菌落上层，观察菌落颜色深浅变化，挑选出颜色较深的菌株进一步纯化，将纯化的酵母接种于高温酒精酵母种子液中，于37℃、转速为160r/min的摇床中培养24小时，按15％接种量将高温酒精酵母种子液接入发酵液中，发酵液的组成(w/v)：15％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4，于pH 5.0、40℃下静止发酵48小时，测定发酵液的酒精含量，选取酒精含量最高的酵母即得高温酒精酵母。
(2)保藏
将高温酒精酵母接种于斜面培养基上，斜面培养基的组成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4、琼脂1.5％、pH 5.0，37℃培养48小时后于4℃冰箱中保存。
2、高温酒精酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 5.0、35℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：木薯粉水解液，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)本薯粉水解液制备方法：称取30g木薯粉，加入60ml自来水调浆，按照8U/g淀粉的用量加入α-高温淀粉酶，85℃-90℃保温作用约40分钟(用碘液检测淀粉是否水解完全)，待降温至50℃-60℃，按照150U/g淀粉用量加入糖化酶，50℃-60℃保温作用2-3小时，定容至70ml，121℃灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按30％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于40℃，pH 7.0条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始还原糖糖为19.0g，酒度为9.2％，残余还原糖为1.8g，发酵率为74.8％。
实施例2
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 5.0、37℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：木薯粉水解液，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)木薯粉水解液制备方法：称取25g木薯粉，加入60ml自来水调浆，按照8U/g淀粉的用量加入α-高温淀粉酶，85℃-90℃保温作用约40分钟(用碘液检测淀粉是否水解完全)，待降温至50℃-60℃，按照150U/g淀粉用量加入糖化酶，50℃-60℃保温作用2-3小时，定容至90ml，121℃灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于37℃，pH 6.0条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始还原糖糖为16.8g，酒度为7.7％，残余还原糖为1.1g，发酵率为70.8％。
实施例3
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 7.0、35℃、160rpm/min摇床培养36小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：木薯粉水解液，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)木薯粉水解液制备方法：称取25g木薯粉，加入60ml自来水调浆，按照8U/g淀粉的用量加入α-高温淀粉酶，85℃-90℃保温作用约40分钟(用碘液检测淀粉是否水解完全)，待降温至50℃-60℃，按照150U/g淀粉用量加入糖化酶，50℃-60℃保温作用2-3小时，定容至85ml，121℃灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按15％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于40℃，pH 5.0条件下，静止培养48小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始还原糖为15.8g，酒度为8.1％，残余还原糖为1.4g，发酵率为79.4％。
实施例4
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 5.0、35℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成(w/v)：蔗糖，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于90ml发酵培养基中，于37℃，pH 6.8条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液初始蔗糖为10.3g，酒度为6.5％，发酵率为92.5％。
实施例5
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 3.0、37℃、160rpm/min摇床培养48小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成(w/v)：葡萄糖，0.2％酵母膏，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)发酵工艺条件：将耐高温酒精酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于90ml发酵培养基中，于40℃，pH 3.0条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始葡萄糖为15.9g，酒度为8.0％，残还原糖2.0g，发酵率为76.7％。
实施例6
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 4.0、36℃、160rpm/min摇床培养36小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：木薯粉水解液，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)木薯粉水解液制备方法：称取20g木薯粉，加入60ml自来水调浆，按照8U/g淀粉用量加入α-高温淀粉酶，85℃-90℃保温作用约40分钟(用碘液检测淀粉是否水解完全)，待降温至50℃-60℃，按照150U/g淀粉用量加入糖化酶，50℃-60℃保温作用2-3小时，定容至85ml，121℃灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按15％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于44℃，pH 6.8条件下，静止培养48小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始还原糖为11.0g，酒度为5.1％，残还原糖为0.6g，发酵率为70.8％。
实施例7
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 5.0、35℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：玉米粉水解液，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)玉米粉水解液制备方法：称取20g玉米粉，加入60ml自来水调浆，按照8U/g淀粉用量加入α-高温淀粉酶，85℃-90℃保温作用约60分钟(用碘液检测淀粉是否水解完全)，待降温至50℃-60℃，按照150U/g淀粉用量加入糖化酶，50℃-60℃保温作用2-3小时，定容至90ml，121℃灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于40℃，pH 6.8条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始还原糖为10.0g，酒度为4.7％，残还原糖为0.6g，发酵率为71.8％。
实施例8
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 6.0、37℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：玉米粉水解液，0.2％尿素，0.05％MgSO4
(2)玉米粉水解液制备方法：称取25g玉米粉，加入60ml自来水调浆，按照8U/g淀粉的用量加入α-高温淀粉酶，85℃-90℃保温作用约60分钟(用碘液检测淀粉是否水解完全)，待降温至50℃-60℃按照150U/g淀粉用量加入糖化酶，50℃-60℃保温作用2-3小时，定容至90ml，121℃灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于37℃，pH 7.0条件下，静止培养60小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始还原糖为16.2g，酒度为6.8％，残余还原糖为0.8g，发酵率为64.8％。
实施例9
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 4.0、35℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成(w/v)：蔗糖，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于90ml发酵培养基中，于40℃，pH 5.0条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液初始蔗糖为14.4g，酒度为8.6％，残糖为葡萄糖1.6g，果糖1.3g，发酵率为87.1％。
实施例10
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 5.0、35℃、160rpm/min摇床培养36小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成(w/v)：葡萄糖，酵母膏0.2％，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于90ml发酵培养基中，于40℃，pH 4.0条件下，静止培养72小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始葡萄糖为15.8g，酒度为8.2％，残葡萄糖1.9g，发酵率为80.0％。
实施例11
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 6.0、35℃、160rpm/min摇床培养24小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成(w/v)：新鲜甘蔗汁，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于90ml发酵培养基中，于40℃，pH 5.0条件下，静止培养48小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液初始含果糖2.6g，葡萄糖5.5g，蔗糖6.0g，酒度为8.2％，残糖为果糖0.3g，葡萄糖1.4g，蔗糖0.1g，发酵率为87.2％。
实施例12
1、耐高温酵母的富集、筛选和保藏
采用与实施例1相同的方法富集、筛选和保藏。
2、耐高温酵母种子液的制备
高温酒精酵母种子培养液的组成(w/v)：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4。
培养工艺条件：将筛选到的产酒精能力最强的高温酒精酵母斜面种接种于高温酒精酵母种子培养液中，于pH 3.0、35℃、160rpm/min摇床培养36小时即制成高温酒精酵母种子液。
3、酒精发酵
(1)发酵培养基组成：甘蔗糖蜜，0.2％尿素，0.05％MgSO4。
(2)糖蜜培养基的制备方法：将甘蔗糖蜜稀释至30个锤度(用糖度计测量)，量取90ml，121℃，灭菌20分钟。
(3)发酵工艺条件：将耐高温酵母种子液按10％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于40℃，pH 5.0条件下，静止培养60小时。
4、蒸馏酒精，测定酒精含量。
5、结果：发酵醪液中初始糖含蔗糖7.5g，果糖1.2g，葡萄糖1.3g，酒度为6.6％，残还原糖为蔗糖1.2g，果糖0.8g，葡萄糖0.5g，发酵率为96.6％。
酒精蒸馏是按国家标准GB5009.48-85采用的方法：取100ml样品于250ml全玻璃蒸馏器中，加50ml水，再加入玻璃珠数粒，蒸馏，用100ml容量瓶收集馏出液100ml，将收集的馏出液倒入量筒，再将洗净擦干后的酒度计缓缓沉入量筒中，静止后再轻轻按下少许，待其上升静止后，从水平位置观察其与液面相交处的刻度，即为乙醇的浓度(v/v)，同时测定温度，按测定的温度与浓度，查《酒精计温度浓度换算表》。
Claims (3)
1、一种高温酒精发酵方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：
(1)制备高温酒精酵母种子液
将从自然界土壤样品中筛选所获得的高温酒精酵母斜面保藏种接种于高温酒精酵母种子液中，于35-37℃、pH 3.0-7.0下培养24-48小时，制备得高温酒精酵母种子液，
(2)接种到高温酒精酵母发酵液中
将(1)制备得的高温酒精酵母种子液按10-30％(v/v)的接种量接入高温酒精酵母发酵液中，于37-44℃、pH 3.0-7.0下发酵48-72小时。
2、根据权利要求1所述的高温酒精发酵方法，其特征在于所述高温酒精酵母的种子液和发酵液的组成为：
(1)所述高温酒精酵母种子液的组成(w/v)为：2％葡萄糖，0.2％酵母膏，0.5％蛋白胨，0.05％MgSO4，
(2)所述高温酒精酵母发酵液的组成(w/v)为：10.0-25.0％碳源，0.2％尿素，0.05％MgSO4，其中的碳源是葡萄糖、蔗糖、甘蔗糖蜜、甘蔗汁、木薯粉水解液、玉米粉水解液的一种。
3、根据权利要求1所述的高温酒精发酵方法，其特征在于，所述从自然界土壤样品中筛选所获得的高温酒精酵母通过以下方法获得：
(1)筛选
从热带、亚热带地区的水果树下、甘蔗地、糖厂、温泉等地方采集土壤样品，分别放置于高温酒精酵母种子液中，于pH 3.0、42℃下静止培养72小时，选择有菌生长的富集培养物于固体平板培养基上进行常规划线分离纯化，固体平板培养基的组成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4、琼脂1.5％，于pH 5.0、42℃下培养，待长出酵母单菌落，用含0.05％红四氮唑的固体平板培养基覆盖于菌落上层，观察菌落颜色深浅变化，挑选出颜色较深的菌株进一步纯化，将纯化的酵母接种于高温酒精酵母种子液中，于37℃、转速为160r/min的摇床中培养24小时，按15％接种量将高温酒精酵母种子液接入发酵液中，发酵液的组成(w/v)：15％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4，于pH 5.0、40℃下静止发酵48小时，测定发酵液的酒精含量，选取酒精含量最高的酵母即得高温酒精酵母。
(2)保藏
将高温酒精酵母接种于斜面培养基上，斜面培养基的组成(w/v)：2％葡萄糖、0.5％蛋白胨、0.2％酵母膏、0.05％MgSO4、琼脂1.5％、pH 5.0，37℃培养48小时后于4℃冰箱中保存。
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|---|---|---|---|---|
| CN108048367A (zh) * | 2018-01-25 | 2018-05-18 | 仁和堂药业有限公司 | 白葡萄球菌粉及其应用 |
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2008
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