CN101351207A

CN101351207A - 用于调节免疫系统的组合物和方法

Info

Publication number: CN101351207A
Application number: CNA200780001036XA
Authority: CN
Inventors: 帕特里克·T·普伦德加斯特
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2006-05-11
Filing date: 2007-05-11
Publication date: 2009-01-21
Also published as: GB0609478D0

Abstract

本发明提供了用于预防血细胞紊乱如中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少、以及贫血的方法和组合物。本发明提供了其中治疗性地或预防性地给予包含至少一种细胞分裂素化合物的组合物的方法。本发明进一步具有在DNA修复的方法中的应用。

Description

用于调节免疫系统的组合物和方法

技术领域

本发明涉及用于刺激白细胞的细胞生产(产生)的方法。尤其是，本发明提供了用于增强血细胞生产的组合物和方法。具体地说，本发明的化合物、组合物以及方法可以用来改善或治疗一些病症如中性白细胞减少、血小板减少、贫血以及其它血细胞缺乏，或者其它示例性病症如反应性氧化应激(其起因于或由γ射线、X射线或质子辐射暴露引起)。

背景技术

免疫系统的抑制或调节异常(失调)可以是许多病理性疾病或病症的组成部分。尤其是，免疫调节异常可以导致疾病的发作和发展。在发生疾病发作的情况下，免疫系统的调节异常是指个体缺乏免疫力而不能建立全免疫应答来抵抗特定疾病或致病状态。

急性放射综合征(ARS)起因于个体暴露于高水平辐射。ARS是一种威胁生命的病症，其主要由血细胞计数的减少引起。高水平辐射会抑制骨髓生产血细胞。这样的血细胞包括：白细胞、中性白细胞(嗜中性粒细胞)、血小板以及血液凝固所需要的因子。这些血液成分的严重减少可导致一些病症如中性白细胞减少(其中存在较低的中性白细胞计数)以及血小板减少(其中存在较低的血小板计数)。

虽然骨髓可以功能上回复以产生在辐射暴露以前所产生水平的血细胞成分，但这种回复(reversion)可能需花费长达3个月的时间。在过渡时期，免疫系统是严重缺乏免疫力的，这是由于细胞数目的减少，以及尤其是由于减少的中性白细胞数。

由于存在恐怖分子攻击(其可能包括某种形式的放射性元素)的可能性，因此需要针对ARS的可行的治疗方法，其是成本低的以及易于产生和给予，并且其先前已经用于人的其它适应症。

化疗也可以引起骨髓损伤并因此导致中性白细胞和血小板数的减少。此外，高度期待使用这样的化合物，其可以被给予以降低化疗对骨髓细胞生产的副作用。

本发明的发明人已意想不到地确定了两组化合物，这些化合物已出乎意料地显示出可以介导(独立地或与其它化合物结合)抵抗血细胞减少的保护效应。防止血细胞减少可以介导中性白细胞减少、血小板减少以及贫血的缓解，并且还可以刺激B细胞和T细胞功能的增强(在由于受治疗者暴露于辐射而导致上述功能受损以后)。

由本发明的发明人确定的化合物是非甾体类化合物，这些化合物已出乎意料地显示出可用于治疗和/或改善一种或多种病症(其可能归因于血细胞数目的缺乏或调节异常)，并且尤其是治疗和/或改善免疫系统的功能。这种调节异常的特征尤其在于细胞数目的减少，该细胞例如是在介导免疫(mediating immunity)方面具有作用或功能的淋巴细胞。同样地，本发明的化合物具有在用于治疗由暴露于辐射所介导的免疫抑制性病症的方法中的应用，尤其是在治疗血细胞缺乏如中性白细胞减少和血小板减少中的应用。

发明内容

根据本发明的第一方面，提供了一种用于治疗和/或预防血细胞减少(血细胞缺失，blood cell depletion)的方法，该方法包括：

-提供治疗有效量或预防有效量的奥替普拉(oltipraz)或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐，以及

-将上述物质给予需要这样的治疗的受治疗者。

在某些具体实施方式中，血细胞减少导致免疫调节异常。在某些进一步的具体实施方式中，血细胞减少导致选自但不限于中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少症、以及贫血中的病症。

如在本文中所定义的，中性白细胞减少是一种其特征在于中性白细胞的数目减少的病症。淋巴细胞减少症是一种其特征在于淋巴细胞的数目减少的病症。血小板减少是一种其特征在于血小板的数目减少的病症。

在某些具体实施方式中，中性白细胞减少选自但不限于由感染后中性白细胞减少、自身免疫性中性白细胞减少、慢性特发性中性白细胞减少(慢性特发性粒细胞减少)、或这样的中性白细胞减少，其起因于或潜在地起因于在治疗癌性病症中使用的化疗、用于治疗自身免疫性疾病的化疗、抗病毒治疗、直接辐射暴露、由于环境污染的次级辐射暴露、在组织或实体器官移植或老化或免疫衰老中的组织或实体器官同种异体移植物或异种移植物排斥或免疫抑制治疗，组成的组。

在某些进一步的具体实施方式中，该病症是反应性氧化应激，例如，其可以是起因于、或可以由受治疗者暴露于γ射线、X射线或质子辐射暴露所引起的反应性氧化应激。

奥替普拉的结构示于化学式I中：

化学式I

在某些进一步的具体实施方式中，奥替普拉(还称作二硫杂环戊烯硫酮奥替普拉(dithiolethione oltipraz，OPZ))的代谢物是代谢物3(还称作M3)。通过分子重排，奥替普拉经过代谢而产生M3，一种吡咯并吡嗪(pyrrolopyrazine)衍生物。

在某些进一步的具体实施方式中，将奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物或前药和羧甲基纤维素(CMC)一起进行配制以形成复合药物(组合药物，combined medicament)。羧甲基纤维素是一种纤维素衍生物，其中羧甲基基团结合于构成纤维素主链的吡喃葡萄糖单体的某些羟基基团。

本发明的发明人已意想不到地确定了，连同羧甲基纤维素一起配制奥替普拉导致毒性显著降低。具体地说，并且不希望受理论约束，本发明的发明人已经确定，当用这种方式进行配制时，对于给予受治疗者2000mg/kg的量来说，奥替普拉是安全的。本发明的发明人已发现，当以50至100mg/kg的水平单独给予奥替普拉时，预计奥替普拉在肝中会引起毒性。本发明的发明人已经确定了，当和羧甲基纤维素一起进行配制时，奥替普拉不会被吸收入血流中，而是内衬(覆盖，line)消化道，这用来保护而不受损伤如胃肠损伤。

在本发明的进一步的方面，提供了一种用于治疗血细胞减少的药物组合物，该组合物包含奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐，以及(连同)药用稀释剂和/或载体。

通常，药用稀释剂或载体将根据给予药物组合物的预计途径进行选择。

在某些具体实施方式中，组合物包含奥替普拉衍生物M3(代谢物3)。

在某些具体实施方式中，药物组合物进一步包含羧甲基纤维素。

本发明的进一步的方面提供了奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐在制备用于治疗血细胞紊乱(血细胞病症，blood cell disorder)的药物中的应用。

在某些具体实施方式中，血细胞紊乱选自但不限于由中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少、以及贫血组成的组。

在某些具体实施方式中，奥替普拉的衍生物是M3(代谢物3)。在某些进一步的具体实施方式中，组合物进一步包含羧甲基纤维素。

本发明的又一方面提供了一种用于防止血细胞减少的包含奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐的试剂盒(药盒，kit)。

不希望受理论约束，本发明的发明人预测，作用方式来自奥替普拉或者其衍生物或类似物与一种或多种二价或三价放射性金属离子螯合、或与一种或多种二价或三价放射性金属离子形成络合物，从而在受治疗者的细胞或组织中的二价或三价放射性离子被重新分布或螯合，以致离子在其参与不希望的组织破坏方面的能力受到限制。

在某些具体实施方式中，二价或三价金属离子选自包括但不限于Fe、Cu、Ni、Ca、Mg、Mn、Cd、Pb、Al、Hg、Co、I、Se、Cs、U、Pa、Th、Ra、Ce、以及Zn的组。

根据本发明的进一步的方面，提供了一种用于治疗和/或预防血细胞减少的方法，该方法包括：

-提供治疗有效量或预防有效量的至少一种细胞分裂素化合物，以及

-将上述化合物给予需要这样的治疗的受治疗者。

在某些具体实施方式中，血细胞减少导致免疫调节异常。在某些进一步的具体实施方式中，血细胞减少导致选自但不限于中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少、以及贫血中的病症。

如在本文中所定义的，中性白细胞减少是一种其特征在于中性白细胞的数目减少的病症。淋巴细胞减少是一种其特征在于淋巴细胞的数目减少的病症。血小板减少是一种其特征在于血小板的数目减少的病症。

在某些具体实施方式中，中性白细胞减少选自但不限于由感染后中性白细胞减少、自身免疫性中性白细胞减少、慢性特发性中性白细胞减少、或这样的中性白细胞减少，其起因于或潜在地起因于供治疗癌性病症之用的化疗、用于治疗自身免疫性疾病的化疗、抗病毒治疗、直接辐射暴露、由于环境污染的次级辐射暴露、在组织或实体器官移植或老化或免疫衰老中的组织或实体器官同种异体移植物或异种移植物排斥或免疫抑制治疗，组成的组。

在某些进一步的具体实施方式中，病症是反应性氧化应激，例如，其可以起因于、或可以由受治疗者暴露于γ射线、X射线或质子辐射暴露所引起的反应性氧化应激。

在某些具体实施方式中，细胞分裂素化合物是N⁶异戊烯基腺苷或者其类似物、衍生物、代谢物、前药或药用盐。

在一种进一步的具体实施方式中，该方法进一步包括给予受治疗者治疗有效量的奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐的步骤。

以下示出了N⁶异戊烯基腺苷或者其类似物、衍生物、代谢物、前药或药用盐的实例，所述化合物在下文中加以描述。

在某些具体实施方式中，提供了按照化学式2的N⁶异戊烯基腺苷化合物：

化学式II

其中：

R1＝H，R2＝CH3，R3＝CH3，以及R4＝H，或R1＝H或CH3S以及R4为如下：

并且R5＝CH3、Cl、OH或单磷酸酯(盐)基团，R6＝CH3、CH2OH或Cl，并且R7＝H或Br，或R1＝H以及R4如下：

并且X1和X2独立地选自H、甲基、乙基、羟基、卤素和羧基，或R4为如下：

或

并且其中R8如下：

或

(CH₂)₇CH₃；

以及R2＝OH和R3＝OH、单磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯基团，或R2和R3相连接以形成3’，5’-环状单磷酸酯衍生物、或任何这样的化合物的生理用盐(生理学可接受的盐)。

在本文中化学式II用来指所有这样的化合物和盐。

本发明的这个方面进一步延及如下所述的另外的N⁶异戊烯基腺苷化合物。这些化合物列在下文作为化合物Ia至Iu，其中所述化合物限定化学式II的R1、R2、R3以及R4的成分。这些化合物如下：

化合物Ia，其中：R1＝H、R2＝OH、R3＝OH以及R4为如下：

该化合物被称作N6-(Δ2-异戊烯基)腺苷。

化合物Ib，其中：R1＝H、R2＝OH、R3＝单磷酸酯以及R4为如下：

该化合物被称作N6-(Δ2-异戊烯基)腺苷-5’-单磷酸酯。

化合物Ic，其中：R1＝H、R2和R3相连接以形成3’，5’-环状单磷酸酯衍生物，以及R4为如下：

该化合物被称作N6-(Δ2-异戊烯基)腺苷-5’-环状单磷酸酯。

化合物Id，其中：R1＝H、R2＝OH、R3＝OH以及R4＝CH2C6H6，该化合物被称作N6-苄基腺苷(N6-benzyl adenosine)。

化合物Ie，其中：R1＝H、R2＝OH、R3＝单磷酸酯、以及R4＝CH2C6H6。该化合物被称作N6-苄基腺苷-5’-单磷酸酯。

化合物If，其中：R1＝H、R2和R3相连接以形成3’，5’-环状单磷酸酯衍生物以及R4＝CH2C6H6。其中，该化合物被称作N6-苄基腺苷-3’，5’环状单磷酸酯。

化合物Ig，其中：R1＝H、R2＝OH、R3＝OH、以及R4为如下：

其中，该化合物被称作糠基腺苷。

化合物Ih，其是N6-糠基腺苷-5’单磷酸酯。化合物Ii，其是N6-糠基腺苷-3’，5’-环状单磷酸酯。化合物Ij，其是N-(嘌呤-6-基氨基甲酰基)-邻氯苯胺核糖核苷(N-(purin-6-ylcarbamoyl)-o-chloroaniline ribonucleoside)。化合物Ik，其是N-(嘌呤-6-基氨基甲酰基)-邻氯苯胺核糖核苷-5’单磷酸酯。化合物Il，其是N6-金刚烷基腺苷(N6-adamantyladenosine)。化合物Im，其是N6-金刚烷基腺苷-5’-单磷酸酯。化合物In，其是N-(嘌呤-6-基氨基甲酰基)-正辛基胺核糖核苷。化合物Io，其是N-(嘌呤-6-基氨基甲酰基)-正辛基胺核糖核苷-5’-单磷酸酯。化合物Ip，其是N-(嘌呤-6-基氨基甲酰基)-正辛基胺核糖核苷-3’，5’-环状单磷酸酯。化合物Iq，其是N6-(Δ2-异戊基)-2-甲硫基腺苷。化合物Ir，其是N6-(4-羟基-3-甲基-反式-2-丁烯基)-腺苷。化合物Is，其是N6-(3-氯-反式-丁烯基)腺苷。化合物It，其是N6-(3-氯-顺式-2-丁烯基)腺苷。化合物Iu，其中：R1＝H、R2＝CH3、R3＝CH3以及R4＝H。

本发明进一步延及化学式II的化合物的一种或多种代谢物。例如，优选的代谢物包括：n6-(Δ2-异戊烯基)腺嘌呤、6-N-(3-甲基-3-羟基丁基氨基)嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿酸以及甲基化黄嘌呤。

在某些进一步的具体实施方式中，将N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物或前药连同羧甲基纤维素(CMC)一起进行配制以形成复合药物。羧甲基纤维素是一种纤维素衍生物，其中羧甲基基团结合于构成纤维素主链的吡喃葡萄糖单体的某些羟基基团。

本发明的发明人已意想不到地确定了，连同羧甲基纤维素一起配制N⁶异戊烯基腺苷可导致毒性显著降低。具体地说，并且不希望受理论约束，本发明的发明人已经确定，当用这种方式进行配制时，对于给予受治疗者2000mg/kg的量来说，N⁶异戊烯基腺苷是安全的。本发明的发明人已发现，当以50至100mg/kg的水平单独给予N⁶异戊烯基腺苷时，预计N⁶异戊烯基腺苷在肝中会引起毒性。本发明的发明人已经确定了，当和羧甲基纤维素一起进行配制时，N⁶异戊烯基腺苷不会被吸收入血流中，而是内衬消化道，这用来保护而不受损伤如胃肠损伤。

在本发明的进一步的方面，提供了一种用于治疗血细胞减少的药物组合物，该组合物包含N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐，以及药用稀释剂和/或载体。

本发明的进一步的方面提供了N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐在制备用于治疗血细胞紊乱的药物中的应用。

在某些具体实施方式中，N⁶异戊烯基腺苷是按照化学式II的化合物。

本发明的又一方面提供了一种用于防止血细胞减少的包含N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐的试剂盒。

在某些进一步的具体实施方式中，细胞分裂素化合物是N⁶苄基腺苷或者其类似物、衍生物、代谢物、前药或药用盐。

以下示出了N⁶苄基腺苷或者其类似物、衍生物、代谢物、前药或药用盐的实例，所述化合物在下文中加以描述。

在某些进一步的具体实施方式中，N⁶苄基腺苷是N6-苄基-腺苷-5’单磷酸酯，其在下文示出作为具有化学式III的化合物：

化学式III

在某些进一步的具体实施方式中，N⁶苄基腺苷是(N6-苄基)腺嘌呤基-对(N6-苄基)腺嘌呤基-对(N6-苄基)腺苷，其在以下示出，作为具有化学式IV的化合物：

在某些进一步的方面，本发明进一步延及以下化合物：

ADT，其具有一般结构：

ADO，其具有一般结构：

1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮，其具有结构：

硫辛酰胺(1，2-二噻茂烷)(硫辛酰胺二硫戊环lipoamide(1，2-dithiolane))，其具有结构：

1，3-二硫杂环戊烯-2-硫酮，其具有结构：

[1，2]二硫代(Dithiolo)[4，3-c]-1，2-二硫杂环戊烯-3，6-二硫酮，其具有结构：

马洛替酯(malotilate)，其具有一般结构：

1，2-二噻茂烷，1类，其具有一般结构：

1，2-二硫杂环戊烯，2类，其具有一般结构：

1，3-二硫杂环戊烯，3类，其具有一般结构：

1，3-二噻茂烷，4类，其具有一般结构：

其中，Z＝S、O、NR、R2、CR2并且Z可以具有对于所有类型可选的和独立的指定(标号，designation)。在这种情况下，R包括H、烷基(C1-C5)、烷氧基(C1-C5)、烷氧羰基(C1-C5)。R2可以在环碳原子周围形成螺环(spiro ring)。

对于硫代坊(thiolane)类，环碳原子可以被双取代。对于所有类型，R1-R4是主环取代基，并且为了涵盖(覆盖)各种各样的取代基，应当可选和独立地包括H、烷基、芳基、杂环、卤素、烷氧羰基(C1-C5)或羧基。

R1、R2或R3、R4可以在它们相连的碳原子周围形成螺环，或它们可以与相邻的碳原子形成稠环或桥环。以下定义涵盖大部分化合物。

烷基在本文中被定义为饱和或不饱和的C1-C10直链或支链，其可以可选地被下述基团单或多取代：卤素、烷基(C1-C5)、羟基、烷氧基(C1-C5)、烷氧羰基(C1-C5)、羧基、酰氨基、烷基酰胺基(C1-C5)、氨基、单和二烷基氨基(C1-C5)、烷基氨基甲酰基(C1-C5)硫羟、烷基硫代(C1-C5)或苯型芳基(benzenoid aryl)。

芳基在本文中被定义为任何可选地单或多取代的苯型基团(C6-C14)。

杂环基是指任何4、5或6元的、饱和或不饱和的可选杂环，其包含1-3个N、O或S的环原子，剩余原子为碳原子。

在芳基或杂环基上的取代基包括：

卤素、烷基(C₁-C₅)、羟基、烷氧基(C₁-C₅)、烷氧基羰基(C₁-C₅)、羧基、酰胺基(amido)、烷基酰胺基(C₁-C₅)、氨基、单和二烷基氨基(C₁-C₅)、烷基氨基甲酰基(C₁-C₅)、硫羟、烷基硫代(C₁-C₅)或苯型芳基、氰基、硝基、卤烷基、烷基磺酰基(C₁-C₅)、磺酸酯。上述取代基中的两个可以是稠环的一部分，其可以是饱和的或不饱和的、杂环的或碳环的。

图8

图9

图10

图11

其中

X选自

＝S

＝O

＝N-OH

＝N-R₅

R₅是C₁-C₆烷基或芳基基团，

＝N-NH-CO-NH₂，和

＝N-NH-CS-NH₂，以及

Z和Z’是吸电子基团，如酯或氰基基团。

A选自＞C＝N-OH基团、化学式为＞C＝N-OR₃的基团(其中R₃选自羟基、氨基、氯代以及C₁-C₄烷氧基基团、芳基(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆烷基)羰基基团以及芳基(C₁-C₆烷基)羰基基团)。

A还可以选自＞C＝O基团、＞C＝N-R₄基团，R₄是C₁-C₆烷基基团或芳基基团，以及CHOH基团。

R₁和R₂彼此独立地选自氢、卤素、硝基基团、亚硝基基团、氰硫基基团、C₁-C₆烷基基团、C₂-C₆烯基基团、芳基基团、芳基(C₁-C₆烷基)基团、芳基(C₂-C₆烯基)基团、羧基基团、(C₁-C₆烷基)羰基基团、芳基羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基(C₁-C₆烷基)基团、C₁-C₆烷氧基基团、三氟甲基基团、氨基基团、二(C₁-C₆烷基)氨基(C₁-C₆烷基)、化学式为-NHCOC_nH_2n+1(其中n为0至6)的酰基氨基基团、其中n为0至6的基团-NH-CSC_nH_2n+1、萜烯基基团、氰基基团、C₂-C₆炔基基团、被C₁-C₆烷基或芳基基团取代的C₂-C₆炔基基团、羟基(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆酰基)氧(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆烷基)硫代基团以及芳基硫代(arylthio)基团；

或可替换地，R₁和R₂一起形成单环或多环C₂-C₂₀亚烷基基团，该亚烷基基团可选地包括一个或多个杂原子，除2，2-二甲基三亚甲基基团、或C₃-C₁₂环亚烷基基团以外。

R选自C₁-C₆烷基基团、以及它们的药用盐。

在前述定义中，芳基基团或芳烷基基团的芳基部分是指芳香族碳基基团如苯基或萘基基团、或芳香族杂环基团如呋喃基基团的噻吩基，这些基团可以带有一个或多个取代基，所述取代基选自卤素原子、C₁-C₄烷基基团、C₁-C₄烷氧基基团、三氟甲基基团、硝基基团以及羟基基团，

1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮衍生物的肟如图12、13以及14中所示出的：

图12

图13

图14

此外，加入先前确定的化合物的醛类或酮类，如图15中所示：

图15

根据一种具体实施方式的一种或多种以下化合物，其中A(图10、11)是基团C＝N＝OR’₃，其中R₃是可选取代的C₁-C₆烷基基团，尤其被一个或多个选自羟基、氨基、氯基、溴基、氟基、碘基以及C₁-C₄烷氧基基团，或芳基(C₁-C₆烷基)基团的基团取代，即以下化学式的化合物：

图16

或

图18

其中R₃具有以上给出的含义。

如在一种具体实施方式中所描述的一种或多种以下化合物(图10和11)，其中A是基团C＝N-O-CO-R”₃，R”₃选自氢原子、可选取代的C₁-C₆烷基基团、芳基基团以及芳基(C₁-C₆烷基)基团，即以下化学式的化合物：

图19

其中R”₃选自氢原子、可选取代的C₁-C₆烷基基团、芳基基团。

另一组化合物由具体实施方式的化合物(图10和11)所形成，其中A是CH-OH基团，即以下化学式的化合物：

图20

另一组化合物由具体实施方式的化合物(图10和11)所形成，其中A是基团C＝N-R，R是C₁-C₆烷基或芳基基团，即以下化学式的化合物：

图21

另一组化合物包括具体实施方式的化合物(图10和11)，其中A是C＝O基团以及X是氧原子，即以下化学式的化合物：

图22

其中

R₁选自氢、卤素、硝基基团、亚硝基基团、氰硫基基团、C₁-C₆烷基基团、C₂-C₆烯基基团、芳基基团、芳基(C₁-C₆烷基)基团、芳基(C₂-C₆烯基)基团、羧基基团、(C₁-C₆烷基)羰基基团、芳基羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基(C₁-C₆烷基)基团、C₁-C₆烷氧基基团、三氟甲基基团、氨基基团、二(C₁-C₆烷基)氨基(C₁-C₆烷基)基团、化学式为-NHCOC_nH_2n+1(其中n为0至6)的酰基氨基基团、其中n为0至6的基团-NH-CSC_nH_2n+1、萜烯基基团、氰基基团、C₁-C₆炔基基团、用C₁-C₆烷基或芳基基团取代的C₂-C₆炔基基团、羟基(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆酰基)-氧(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆烷基)硫代基团以及芳基硫代基团。

R₂选自硝基基团、亚硝基基团、氰硫基基团、C₁-C₆烷基基团、C₂-C₆烯基基团、芳基基团、芳基(C₁-C₆烷基)基团、芳基(C₂-C₆烯基)基团、羧基基团、(C₁-C₆烷基)羰基基团、芳基羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基基团、(C₁-C₆烷基)基团、三氟甲基基团、二(C₁-C₆烷基)氨基(C₁-C₆烷基)基团、化学式为-NHCOC_nH_2n+1(其中n为0至6)的酰基氨基基团、其中n为0至6的基团-NH-CSC_nH_2n+1、萜烯基基团、氰基基团、C₂-C₆炔基基团、用C₁-C₆烷基或芳基基团取代的C₂-C₆炔基基团、羟基(C₁-C₆烷基)基团、C₁-C₆酰基-氧(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆烷基)硫代基团以及芳基硫代基团；

或者可替换地，R₁和R₂一起形成单环或多环C₂-C₂₀亚烷基基团，该亚烷基基团可选地包括一个或多个杂原子，

一种或多种以下在图23中示出的化学式的化合物：

图23

R₁和R₂彼此独立地选自氢、卤素、硝基基团、亚硝基基团、氰硫基基团、C₁-C₆烷基基团、C₂-C₆烯基基团、芳基基团、芳基(C₁-C₆烷基)基团、芳基(C₂-C₆烯基)基团、羧基基团、(C₁-C₆烷基)羰基基团、芳基羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基基团、(C₁-C₆烷氧基)羰基(C₁-C₆烷基)基团、C₁-C₆烷氧基基团、三氟甲基基团、二(C₁-C₆烷基)氨基(C₁-C₆烷基)基团、化学式为-NHCOC_nH_2n+1(其中n为0至6)的酰氨基基团、其中n为0至6的基团-NH-CSC_nH_2n+1、萜烯基基团、氰基基团、C₂-C₆炔基基团、用C₁-C₆烷基或芳基基团取代的C₂-C₆炔基基团、羟基(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆酰基)氧(C₁-C₆烷基)基团、(C₁-C₆烷基)硫代基团以及芳基硫代基因；

或者可替换地，R₁和R₂一起形成单环或多环C₂-C₂₀亚烷基基团，该亚烷基基团可选地包括一个或多个杂原子。

R选自C₁-C₆烷基基团、以及它们的药用盐。

以下异苯并噻唑酮(isobenzothiazolone)衍生物的一种或多种，其具有以下结构：

图24

在该结构中，R¹和R²中的至少一个优选为硝基、芳基偶氮基、取代的芳基偶氮基、亚苄基氨基或取代的亚苄基氨基。仅当R¹和R²中的一个被如此取代时，则R¹和R²之一可以是氢。R³取代基选自少于约7个碳原子的烷基基团、氨基、羟基、烷氧基、以及芳基基团(及其官能化形式)。

本发明优选的异苯并噻唑衍生物包含例如R¹作为硝基或芳基偶氮以及R²作为氢。实例包括这样的化合物，其中R²是氢，而R¹是：苯基偶氮基；取代的芳基偶氮基如4-羟基苯基偶氮基；4-硝基-2-甲基苯基偶氮基；2-羟基-1-萘基偶氮基；2-羟基-5-甲基苯基偶氮基；2-羟基-4-甲基-5-硝基苯基偶氮基；4-羟基-1-萘基偶氮基；4-羟基-3-甲基-1-萘基偶氮基；4-羟基-5-氮杂-1-萘基偶氮基；2-氨基-1-萘基偶氮基；1-羟基-2-萘基偶氮基；3-N，N-二甲基氨基丙基羧基酰胺基-1-羟基-4-萘基偶氮基；1-羟基-4-甲氧基-2-萘基偶氮基；2-羟基-3-羧基-1-萘基偶氮基；1-羟基-3，6-二磺酰-2-萘基偶氮基；2，3-二羟基-1-萘基偶氮基；或2-羟基-3，5-二甲基-1-苯基偶氮基。在一种特定的具体实施方式中，R¹是取代的亚苄基氨基、2，4-二硝基亚苄基氨基，而R²是氢。此外，R¹是氢而R²是2-羟基-1-萘基偶氮或4-羟基-1-苯基偶氮。

在一个方面，R³取代基具有足够的极性以给予化合物水溶解性。例如，R³可以是-(CH₂)nR⁴R⁵，其中n为2至6并且R⁴和R⁵是单纯烷基或氢。其它可能的水溶性侧链包括3-羧基丙基、磺酰乙基(磺酸乙基，sulfonatoethyl)以及类型为-CH₂(CH₂OCH₂)_nCH₃的聚乙醚，其中n小于10。优选的化合物包括R³侧链，该侧链包含氨烷基、羧基烷基、ω氨基聚乙醚以及N-卤代乙酰基的衍生物。在更广泛的意义上，对于各种应用，R³可以是烷基、芳基、杂芳基、烷氧基、羟基或氨基基团。当包括用于溶解性或反应性目的的取代时，R³可以是氨烷基、羧基烷基、羟烷基或卤代烷基。芳基或杂芳基(heteroarl)R³部分可以被取代，例如，作为氨基芳基、羧基芳基或羟芳基，

一种或多种下述异苯并噻唑酮衍生物，其具有以下结构：

图25

其中R¹和R²中的至少一个是硝基、芳基偶氮、取代的芳基偶氮、亚苄基氨基或取代的亚苄基氨基以及R¹和R²之一可以是氢，并且R³是氨基烯丙基(aminoallayl)、氨基芳基和氨基杂芳基、羧基烷基、羧基芳基或羧基杂芳基，其共价连接于包含氨基或羟基基团的聚合物。间隔臂R³可以包括低聚物或聚乙二醇及其衍生物。在一个方面，R³可以是17-氯乙酰氨基-3，6，9，12，15-五氧十七烷基，其中六甘醇(六亚乙基二醇，hexaethyl glycol)已被氯乙酰胺化。当聚合物基团、Y¹和R³包含羧基基团时，共价键优选通过酯键。当聚合物包含氨基基团时，类似共价键是通过酰胺键。当偶联于R³时，带有胺的聚合物可以是诸如壳聚糖、多烷基胺、氨基葡聚糖、多亚乙基亚胺、聚赖氨酸(多熔素，polylysine)或氨基苯乙烯(amitryrene)的聚合物。

本发明的R³取代基还可以包括通过从α-卤代烷基或α-卤代烷基羧基酰胺基(carboxy amido)R³前体的卤素的胺置换而连接于带胺的聚合物的烷基。在氨基烷基或氨基芳基基团的情况下，R³取代基还可以共价连接于聚合物如聚表氯醇、氯甲基聚苯乙烯、聚乙烯醇或聚乙烯吡啶。本发明的R³取代基通常可以是氨烷基、羟烷基、氨基芳基或羟基芳基基团，其通过酰胺键或酯键连接于包含羧基基团的聚合物。

当在R³结构中涉及聚合物时，聚合物可以是这样的聚合物如聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚衣康酸(polyilaconic acid)、氧化聚环氧乙烷、聚(甲基丙烯酸甲酯/甲基丙烯酸)、羧甲基纤维素、羧甲基琼脂糖或羧甲基葡聚糖。当涉及这样的羧基聚合物时，R³可以是氨烷基(例如诸如8-氨基己基)、羟烷基、氨基芳基或羟基芳基，其通过酰胺键或酯键连接于聚合物。在这样的情况下，R³前体官能团可以带有胺或羟基基团，其通过与带有酸酐的聚合物的反应或通过与带有羧酸酯的聚合物偶联(通过碳二亚胺(carbodimide)诱导的键形成)而共价连接于聚合物。

在本发明的化合物中的R³取代基或者其前体还可以是卤烷基或羧基卤烷基(carboxylialoalkyl)部分如氯乙酰氨基。通过卤素的胺置换，这样的取代基可以容易地偶联于带胺的聚合物。

如在本文中所使用的，“芳基”用来包括衍生自芳香烃或芳族杂环系统的有机残基。因此，芳基基团包括未取代的环状残基如苯基和萘基以及其取代形式。杂环或杂芳基残基可以是那些在环状系统中包含一个或多个杂原子(例如，氮、氧、硫)的残基，如吡啶基、噁唑基、喹啉基、噻唑基以及其取代形式。如在本文中所使用的，“烷基”用来包括在连接点处具有碳原子的脂肪族和环状有机残基。因此，烷基基团包括化学式为C_nH_2n+1的未取代的烃残基以及其取代的和环状形式。这样的烃通常属于具有6个或更少碳原子的低级烷基类。应当理解，可以使用更大的烷基基团。烷基包括取代的残基，其用来包括如下所述的带有一个或多个、相同或不同的官能团的烃残基。

先前描述的烷基和芳基基团可以被官能团取代。这样的官能团基本上包括所有化学基团，其可以合成地引入并导致稳定的化合物。这些官能团的实例是羟基、卤素(氟基、氯基、溴基)、氨基(包括烷基氨基和二烷基氨基)、氰基、硝基、羧基(包括烷氧羰基)、氨基甲酰基(包括N和N，N烷基)、磺基(sulfb)、烷氧基、烷基、芳基、以及芳基偶氮基，

一种或多种以下化合物：

图26

其中R₁和R₂独立地是(＝O)或-OR，其中R是H或(C₁-C₄)烷基；以及R₃是H或(C₁-C₄)烷基。优选地，R₃是H。优选地，R₁和R₂是(＝O)或OH，

一种或多种以下化合物：

图27

其中X是H或两个X表示两个硫原子之间的直接结合；R₁是(＝O)或-OH；以及R₂是H、Na、K或(C₁-C₄)烷基。

尤其是，该化合物可以是3-酮基硫辛酸、3-羟基硫辛酸、3-酮基二氢硫辛酸或3-羟基二氢硫辛酸，

以下图28中所示化学式的1，2-二硫羟-3-硫酮衍生物的一种或多种

图28

其中R表示氢、卤素、低级烷氧基基团、低级烷基基团、氨基基团、低级烷基取代的氨基基团或低级烷氧羰基基团。

在上述化学式图28中，术语“低级”是指甲基、乙基、丙基和丁基，及其结构同分异构体如异丙基、异丁基以及叔丁基。

在图28所示化学式的化合物中，优选的化合物包括

5-(4-苯基-1，3-丁二烯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮，

5-4(4-氯苯基)-1，3-丁二烯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮，

5-{4(4-甲氧基苯基)-1，3-丁二烯基}-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮，

5-{4-(对甲苯甲酰)-1，3-丁二烯基}-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮，

5-{4-(邻氯苯基)-1，3-丁二烯基}-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮，以及

5-{4-(间甲基苯基)-1，3-丁二烯基}-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮。

还包括以下化合物：

图29

图30

图31

图31a

图32

图33

以下的一种或多种；

化学式(图34)的1，2-二硫杂环戊烯

图34

其中Het表示嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、或嘧啶-5-基，或被卤素、1至4个碳原子的烷基、1至4个碳原子的烷氧基、巯基、1至4个碳原子的烷基硫代(alkylthio)、或在每个烷基中具有1至4个碳原子的二烷基氨基取代的所述嘧啶-2-基、嘧啶4-基或嘧啶-5-基，以及R表示卤素、1至4个碳原子的烷基、1至4个碳原子的烷基(被在烷氧基中具有1至4个碳原子的烷氧羰基取代)、羧基、在烷氧基中具有1至4个碳原子的烷氧羰基、氨基甲酰基、在烷基中具有1至4个碳原子的N-烷基氨基甲酰基，或R-CH(OH)-，其中R表示氢或1至3个碳原子的烷基。

不希望受理论约束，本发明的发明人预测，作用方式来自N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物或类似物与一种或多种二价或三价放射性金属离子螯合、或与一种或多种二价或三价放射性金属离子形成络合物，从而在受治疗者的细胞或组织中的二价或三价放射性离子被重新分布或螯合，以致离子在其参与不希望的组织破坏方面的能力受到限制。

在某些具体实施方式中，二价或三价金属离子选自包括但不限于：Fe、Cu、Ni、Ca、Mg、Mn、Cd、Pb、Al、Hg、Co、I、Se、Cs、U、Pa、Th、Ra、Ce、以及Zn的组。

在某些具体实施方式中，细胞分裂素是由本发明提供的细胞分裂素的前药，其中通过代谢或水解作用所述前药被转化成生物上活性或有效的化合物。在某些进一步的具体实施方式中，所述细胞分裂素化合物进一步被代谢以形成代谢物，所述代谢物介导本发明的效应(作用)。

如在本文中所定义的，术语“细胞分裂素”是指一种植物生长物质(植物激素)的化合物，该植物生长物质与细胞生长和分化以及其它过程有关。尤其是该术语包括称作“腺嘌呤细胞因子”的一类细胞分裂素，其包括激动素、玉米素以及苄基腺嘌呤。该术语进一步包括“苯脲细胞分裂素”如N，N′-二苯脲，其虽然具有不同的化学组成，但具有与腺嘌呤细胞分裂素类似的生物活性。

供本发明的上述方面之用的适宜的细胞分裂素化合物在本文中提供为化学式1的化合物。适宜的化学式1的化合物的实例在本文的附录1中详细列出。

在本发明的具体实施方式中，其中预防性地实施本发明的该方面的方法，通常在将受治疗者暴露于损伤(如化学损伤)以前实施所述方法，其中所述损伤可以导致血细胞数目减少。在某些进一步的具体实施方式中，损伤是生物损伤、辐射损伤或者其组合，其中所述损伤可以诱导或引起血细胞减少的进展以及随后病症的发展，如贫血、中性白细胞减少或血小板减少。

在根据本发明的该方面的方法对患者进行治疗的情况下，优选的是，治疗降低(1)在血管或微血管阻塞期间疼痛的严重性，(2)血管或微血管阻塞的严重性或(3)血管或微血管阻塞的频率。

在一种具体实施方式中，在本发明前述方面的方法过程中给予的组合物包括至少一种细胞分裂素化合物以及(连同)至少一种药用载体或稀释剂。

进一步提供了复合药物或包含该复合药物的药物组合物在实施本发明的方法以预防和/或治疗血细胞紊乱中的应用。

因此，本发明的进一步的方面提供了一种用于预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱的方法，包括：

-提供治疗有效量的奥替普拉，以及

-将治疗有效量的奥替普拉给予需要这样的治疗的受治疗者。

在某些具体实施方式中，血细胞紊乱选自包括但不限于：中性白细胞减少、血小板减少或贫血的组。

本发明的该方面的方法可进一步用于治疗中性白细胞减少、血小板减少或贫血的症状，并因此本发明的细胞分裂素化合物可以给予个体以便治疗这样的病症。

在某些具体实施方式中，中性白细胞减少是感染后中性白细胞减少、自身免疫性中性白细胞减少、慢性特发性中性白(粒)细胞减少或这样的中性白细胞减少，其起因于或潜在地起因于癌症化疗、用于治疗自身免疫性疾病的化疗、抗病毒治疗、直接辐射暴露、通过环境污染的次级辐射暴露、在组织或实体器官移植或老化或免疫衰老中的组织或实体器官同种异体移植物或异种移植物排斥或免疫抑制治疗。

因此，本发明的更进一步的方面延及给予细胞分裂素化合物(如本文详述的)的方法，用于治疗上述病症。

本发明的进一步的方面提供了细胞分裂素化合物在制备用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血的药物中的应用。

在一种具体实施方式中，细胞分裂素化合物是N6异戊基腺苷或者其类似物或药用盐。在一种进一步的具体实施方式中，细胞分裂素化合物是N6苄基腺苷或者其类似物或药用盐。

在一种进一步的具体实施方式中，细胞分裂素化合物是一种通过代谢或水解作用可以被转化成生物活性化合物的细胞分裂素的前药。

本发明的又一个方面提供了一种药物组合物，用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血，所述组合物包括细胞分裂素化合物以及至少一种药用稀释剂。

在一种具体实施方式中，细胞分裂素化合物是N6异戊烯基腺苷或者其类似物或药用盐。在一种进一步的具体实施方式中，细胞分裂素化合物是N6苄基腺苷或者其类似物或药用盐。

本发明的发明人已进一步确定了，奥替普拉及其类似物、衍生物、前药和代谢物可惊人地用于治疗和/或预防血细胞数目减少以及一些病症如免疫调节异常和细胞氧化性损伤。上述病症可以由受治疗者暴露于辐射，如γ辐射引起。

在受照射小鼠研究中，本发明的化合物已显示出，它们具有预防和治疗与血细胞数目减少有关的病症的能力，该病症例如但限于：中性白细胞减少、血小板减少、以及贫血。不希望受理论约束，本发明的发明人推测，所述化合物期望抵抗和中和在活组织中辐射引起的氧化性损伤。

在进一步的具体实施方式中，化合物可以是3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、茴三硫(anetol trithion)和/或莱菔硫烷(sulforaphane)、和/或柚苷(narigin)。

在一种进一步的具体实施方式中，化合物可以选自包括5-(4-甲氧基苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、ADT、ADO、1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、1，2-二噻茂烷、1，3-二硫杂环戊烯-2-硫酮、以及马洛替酯的组。

在一种进一步的具体实施方式中，化合物与一种或多种二价或三价放射性金属离子螯合、或与一种或多种二价或三价放射性金属离子形成络合物(complex)，从而在受治疗者的细胞或组织中的二价或三价放射性离子被重新分布或螯合，以致离子在参与不希望的组织破坏方面的能力受到限制。

在一种具体实施方式中，二价或三价金属离子选自Fe、Cu、Ni、Ca、Mg、Mn、Cd、Pb、Al、Hg、Co、I、Se、Cs、U、Pa、Th、Ra、Ce、以及Zn离子。

在一种进一步的具体实施方式中，化学式2的化合物可以在由辐射暴露所引起的II态(第二阶段，phase II)解毒酶的细胞生产减少以后增强II态解毒酶的细胞生产。II态解毒酶可以选自由谷胱甘肽S转移酶、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶、环氧化物水化酶、AFB-1醛还原酶、葡糖苷酸还原酶、葡糖-6-磷酸脱氢酶、UDP-葡糖苷酸转移酶以及AND(P)H：醌氧化还原酶组成的组。

在进一步的具体实施方式中，化学式2的化合物如上述所定义并选自由4-(3，5-二异丙基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-(3，5-二叔丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3，5-二(1，1-二甲基丙基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3，5-二(1，1-二甲基丁基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3，5-二(1，1，3，3-四甲基丁基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3，5-二(1-甲基环己基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3，5-二(1，1-二甲基苄基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-(3-叔丁基-4-羟基-S-异丙基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-(3-叔丁基-4-羟基-5-甲基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3(1，1-二甲基丙基)-4-羟基-5-异丙基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、4-[3(1，1-二甲基苄基)-4-羟基-5-异丙基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-苄硫基-4-(3，5-二叔丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-苄硫基-4-[3，5-二(1，1-二甲基丙基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-己硫基-4-(3，5-二叔丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-己硫基-4-[3，5-二(1，1-二甲基丁基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-十八烷硫基-4-(3，5-二叔丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-十八烷硫基-4-[3，5-二(1，1-二甲基苄基)-4-羟基苯基]-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-烯丙基硫代(allylthio)-4-(3，5-二叔丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、5-环己基硫代-4-(3，5-二叔丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、以及4-(3，5-二仲丁基-4-羟基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮组成的组。

在一种具体实施方式中，该方法可进一步用于治疗中性白细胞减少、血小板减少或贫血的症状，并因此奥替普拉或者其衍生物或类似物可以给予个体以便治疗上述病症。

在一种具体实施方式中，中性白细胞减少是感染后中性白细胞减少、自身免疫性中性白细胞减少、慢性特发性中性白细胞减少或这样的中性白细胞减少，其起因于或潜在地起因于癌症化疗、用于治疗自身免疫性疾病的化疗、抗病毒治疗、直接辐射暴露、由于环境污染的次级辐射暴露、在组织或实体器官移植或老化或免疫衰老中的组织或实体器官同种异体移植物或异种移植物排斥或免疫抑制治疗。

因此，本发明的更进一步的方面延及给予奥替普拉(如本文详述的)用于治疗上述病症的方法。

本发明的进一步的方面提供了奥替普拉或者其衍生物或类似物在制备用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血的药物中的应用。

本发明的又一个方面提供了一种药物组合物，用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血，所述组合物包括奥替普拉或者其衍生物或类似物以及至少一种药用稀释剂。

本发明的发明人已经进一步确定了，给予治疗药剂(其是细胞分裂素化合物连同奥替普拉或者其衍生物或类似物的组合)可导致一种组合物，对于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏病症如中性白细胞减少、血小板减少或贫血来说，上述组合物相对于单独给予任何一种化合物而言呈现协同益处。

因此，本发明的又一方面提供了一种用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血的方法，该方法包括给予需要上述治疗的个体治疗有效量的细胞分裂素化合物连同奥替普拉或者其类似物或衍生物的步骤。

在一种进一步的具体实施方式中，细胞分裂素化合物是一种通过代谢或水解作用可以转化成生物活性化合物的细胞分裂素的前药。

在一种具体实施方式中，需要用本发明的该方面的方法加以治疗的个体是患有血细胞缺乏紊乱的人。

本发明的进一步的方面提供了复合药物在制备用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱，如中性白细胞减少、血小板减少或贫血的药物中的应用，所述复合药物包括至少一种细胞分裂素化合物和奥替普拉。

本发明的一个更进一步的方面提供了一种复合药物组合物，用于在个体中预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血，所述组合物包含细胞分裂素化合物和奥替普拉以及至少一种药用稀释剂。

在一种进一步的具体实施方式中，细胞分裂素化合物是通过代谢或水解作用可以转化成生物活性化合物的细胞分裂素的前药。

本发明的一个更进一步的方面提供了一种包含化学式1和化学式2的化合物的复合药物，其中将该复合药物给予需要治疗的个体，以用于预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血。在本文中，这样的化合物可以称作化学式3的化合物“F3cs”。

在一种具体实施方式中，治疗包括以0.01mg/Kg体重至1000mg/Kg体重的单位剂量、单独或连同化学式2的化合物给予化学式1的所述剂型(制剂)。

在一种进一步的具体实施方式中，化学式1和/或化学式2的化合物被微粉化或这些化合物存在于包括药用载体的组合物中，所述载体可选地选自磷脂酰胆碱、双磷脂酰胆碱、维生素E、环糊精、厚朴酚(木兰醇)、微生物防腐剂、适合于眼用药剂剂型的水或液体赋形剂，或将这些化合物配制在组织分解基质中以便于由聚合物递送物缓慢递送(如使用硅酮聚合物)。

优选的是，通过结合独立配制的药物、或通过制备由药物混合物组成的联合剂型来提供本发明的该方面的药物组合物。当实际中使用本发明的药物组合物时，配制适合于口服的单位剂型并根据适当药物领域的常规给予。为达到此目的，口服剂型包括硬或软胶囊剂、片剂、散剂等。除奥替普拉/细胞分裂素化合物作为药理活性剂以外，口服剂型还可以包含一种或多种药理非活性常规载体介质。例如，口服剂型可以包含下述作为添加剂：淀粉、乳糖、羧甲基纤维素、高岭土、以及类似的赋形剂；水、明胶、醇、葡萄糖、阿拉伯树胶、黄蓍胶以及类似的粘合剂；淀粉、糊精、海藻酸钠、以及类似的崩解剂(disintegrant)；滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、液状石蜡(液体石蜡)、以及类似的润滑剂。可以进一步加入溶解助剂。

本发明的日剂量取决于各种因素如患者的肝损伤程度、肝炎发作的时间、年龄、健康状况、并发症等。然而，对于一般的成年人，每日给予奥替普拉/细胞分裂素化合物的组合物一次或两次，总日剂量为5至200mg，更优选为25至50mg。然而，在患有严重肝损伤的患者中或当在肝癌切除术以后用作抗复发剂时，本发明可以偏离以上药物组合物的范围并采用甚至更大的剂量。最优选地，口服给予包含25mg奥替普拉和5mg细胞分裂素化合物的一个或两个单位剂量每天两次。

辐射暴露以后的DNA修复机制的调节

DNA损伤

起因于细胞内正常代谢过程的DNA损伤以50,000至500,000个分子损害/细胞/天的速率发生。

DNA损伤可以细分成两种主要类型：

内源性损伤如产生自正常代谢副产物的活性氧自由基的攻击(自发突变)；

(i)由外部因素引起的外源性损伤，如来自太阳的紫外线[UV200-300nm]辐射，(ii)其它辐射频率，包括X射线和γ射线，(iii)水解或热破坏，(iv)某些植物毒素，(iv)人造诱变化学试剂，如来自香烟烟雾的烃类，以及(v)癌症化疗和放射疗法。

在细胞分裂以前，受损DNA的复制可以导致掺入与受损碱基相反的错误碱基。在子细胞遗传错误碱基以后，这些细胞变成突变细胞(携带突变的细胞)，并且无法回复(除非通过回复突变和基因转变的稀有过程)。

DNA修复机制

细胞不能耐受损害在基因组中的基本信息的完整性和易接近性(但当所谓的“非必需”基因失去或受损时，细胞仍然表面上起作用)的DNA损伤。取决于在DNA双螺旋结构上遭受的损伤类型，已经发展各种各样的修复策略来恢复丧失的信息。细胞使用DNA的未修饰的互补链或姐妹染色体作为修复的模板。在没有利用模板信息的情况下，DNA修复是易错的(但这可以是标准途径，例如，在哺乳动物细胞中的大多数双链断裂是在没有模板辅助的情况下加以修复的；参见下文)。

DNA的损伤会改变螺旋的空间构型并且这样的改变可以由细胞加以检测。一旦损伤被定位，特定的DNA修复分子被召集到、并结合在损伤部位或附近，从而诱导其它分子结合并形成使实际修复能够发生的复合物(complex)。涉及的分子类型和动员的修复机制取决于成为问题的DNA损伤的类型以及细胞是否已经进入衰老状态(细胞所处的细胞周期的阶段)。

单链和双链DNA损伤

当仅染色体的两个链之一具有缺损时，另一个链可以用作模板来指导受损链的校正。为了修复对DNA的两个螺旋结构域之一的损伤，存在许多通过其可以使DNA修复发生的机制。这些机制包括通过各种机制(其专门用于逆转特定类型的损伤)来直接逆转损伤。实例包括甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)，其从鸟嘌呤专门除去甲基基团；以及在细菌中的光裂合酶，其破坏在相邻胸苷碱基之间由UV光产生的化学键。对于这种形式的修复，不需要模板链。

通过用与在未受损DNA链中的核苷酸互补的未受损核苷酸替换受损的核苷酸，切除修复机制可以除去受损的核苷酸。这些机制包括碱基切除修复(BER)，其修复由氧化、烷基化、水解、或脱氨作用引起的归因于单核苷酸的损伤；核苷酸切除修复(NER)，其修复对2-30个核苷酸长度链有影响的损伤。这些损伤包括庞大的(bulky)、螺旋变形损伤，如由UV光引起的胸腺嘧啶二聚化(dimerization)以及单链断裂。称作转录耦合修复(TCR)的专门形式的NER将高度优先的NER修复酶用于正被主动转录的基因；错配修复(MMR)，该修复校正DNA复制和重组的错误，DNA复制和重组的错误导致在DNA复制以后的错配核苷酸。

双链断裂

对于分裂细胞的特别危险的DNA损伤类型是在双螺旋中两个链的断裂。存在两种机制来修复这种损伤。它们通常称作非同源端连接(End-Joining)和重组修复、模板辅助修复、或同源重组。

重组修复需要存在相同或几乎相同的序列以用作用于断裂修复的模板。负责该修复过程的酶促方法(enzymatic machinery)几乎相同于在生殖细胞中在减数分裂期间负责染色体交换的方法。重组修复机制主要用于这样的细胞周期的阶段期间，其时正复制DNA或已经完成复制其DNA。这使得可以利用新产生的姐妹染色单体作为模板(即，相同的拷贝，其此外有序地配对于受损的区域)来修复受损的染色体。在人基因组中的许多基因存在于提供相同序列的许多可能来源的多拷贝中。但依赖这些拷贝作为彼此的模板的重组修复是有问题的，因为它导致染色体易位和其它类型的染色体重排。在没有模板序列的情况下，非同源端连接(NHEJ)再接合断裂的两端。然而，在该过程中经常存在DNA序列丧失，因此这种修复可能是致突变的。NHEJ可以发生在细胞周期的所有阶段，但在哺乳动物细胞中是主要的修复机制，直到DNA复制使重组修复可以使用姐妹染色单体作为模板。因为在人类和其它多细胞生物中，大多数的基因组由不包含基因的DNA(所谓的“无用DNA”)构成，所以致突变的NHEJ可能比在有多模板序列存在的情况下的模板辅助修复较小有害，因为在后一种情况下，会发生不希望的染色体重排。用于NHEJ的酶促方法还用在B细胞中以再接合在VDJ重组(在由免疫系统产生抗体多样性中的一个关键步骤)期间由RAG蛋白产生的断裂。

操作如化疗和放疗是通过控制细胞修复DNA损伤的能力和导致细胞死亡来起作用。最快速分裂的细胞如癌细胞优先受到影响。副作用是其它非癌性但类似地快速分裂的细胞如骨髓中的干细胞也受到影响。现代癌症治疗试图将DNA损伤定位到仅与癌症有关的细胞和组织。

本发明的发明人已经意想不到地发现，奥替普拉可以诱导DNA修复机制。这样的DNA修复尤其可以在辐射暴露以后加以介导。

因此，本发明的一个更进一步的方面提供了一种在辐射损伤以后在细胞中介导DNA修复(其需要这样的修复)的方法，该方法包括使治疗有效量的奥替普拉或者其衍生物或类似物与细胞接触的步骤。

在一种具体实施方式中，奥替普拉衍生物或者其类似物选自包括3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、莱菔硫烷、5-(4-甲氧基苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、ADT、ADO、1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、1，2-二噻茂烷、1，3-二硫杂环戊烯-2-硫酮、以及马洛替酯的组。

在一种具体实施方式中，在辐射损伤以后需要DNA修复的细胞位于个体中，并因此本发明的该方面进一步扩展到对个体进行DNA修复治疗的方法，该方法包括将治疗有效量的奥替普拉给予个体的步骤。

在一种进一步的具体实施方式中，提供了奥替普拉或者其衍生物或类似物在制备用于在辐射暴露以后刺激细胞DNA修复机制的药物中的应用。

本发明的更进一步的方面提供了一种用于在辐射暴露以后介导DNA修复的药物组合物，该药物组合物包含奥替普拉或者其衍生物或类似物连同药用载体。

宇宙飞行引起的免疫抑制

在宇宙飞行期间经受的状态，如隔离、应力、密封、微重力以及辐射均认为会介导对免疫系统的抑制效应。尤其是，辐射可以引起人骨髓干细胞的损伤，人骨髓干细胞是免疫系统的细胞的前体细胞。

在宇宙旅行期间，人暴露于太阳辐射可以总计高达3Gy质子和γ辐射。这可以导致免疫抑制，该免疫抑制可以进一步导致潜伏性病毒感染和恶性肿瘤的再活化。对这样的太阳辐射特别敏感的免疫细胞包括：骨髓干细胞(CD34+细胞)、辅助性T细胞(CD4+)、细胞毒性T细胞(CD8+)、B细胞(CD19+)、单核细胞以及巨噬细胞(CD19+)和天然杀伤(NK)细胞(CD56+)。

本发明的发明人已经确定了，本发明的化合物可进一步用于在宇宙旅行期间治疗和预防辐射诱导的免疫抑制。

因此，本发明的一个进一步的方面提供了一种治疗和/或预防辐射诱导的免疫抑制的方法，其中辐射来自太阳辐射、尤其是质子或γ辐射，该方法包括将治疗有效量的本发明的化合物的至少一种给予需要这种治疗的个体。

治疗/疗法

术语“治疗”在本文中用来指任何可以有益于人或非人动物的方案。该治疗可以是关于存在的病症或可以是预防性的(预防性治疗)。治疗可以包括治愈效应、减轻效应或预防性效应。

更具体地说，要在最广泛的意义上理解本文提及的“治疗性的”和“预防性的”治疗。术语“治疗性的”并不一定意味着对受治疗者进行治疗直到完全康复(痊愈)。类似地，“预防性的”并不一定意味着受治疗者将不会最终感染疾病。

因此，治疗性和预防性治疗包括改善特定病症的症状或预防或以其它方式降低发展特定病症的危险。术语“预防性的”可以认为是降低特定病症的严重性或发作。“治疗性的”还可以降低现有病症的严重性。

如在本文中所使用的，术语“治疗有效量”是指为降低血细胞减少或由血细胞减少所引起的的至少一种病症或症状的严重性和/或对其进行改善所需要的组合物量。

如在本文中所使用的，术语“预防有效量”是指通过给予本发明的化合物来预防血细胞减少或由血细胞减少所引起的至少一种症状或病症的最初发作、发展或复发所需要的组合物量。

如在本文中所使用的，术语“受治疗者”是指动物，优选哺乳动物，并且尤其是人。在一种特定的具体实施方式中，受治疗者是哺乳动物，尤其是人，其已经、或将要暴露于辐射，例如，辐射疗法如化疗或放疗。如在本文中所使用的，术语“受治疗者”可与术语“患者”互换。

给药

可以单独给予本发明的产品，但优选作为药物组合物的一部分给予，其中药物组合物通常还包含适宜的药物赋形剂、稀释剂或载体，其是根据预计的给药途径来选择的。

可以借助于任何适宜的途径将本发明的产品给予需要治疗的患者。精确剂量将取决于许多因素。

给药途径可以包括肠外途径(包括皮下途径、肌内途径、静脉内途径，借助于例如滴注贴剂(drip patch))，某些进一步适宜的给药途径包括(但不限于)口服、直肠途径、鼻途径、局部途径(包括颊途径和舌下途径)、输注、阴道途径、真皮内途径、腹膜内途径、颅内途径、鞘内途径以及硬膜外给药或借助于例如雾化器或吸入器经由口腔或鼻吸入给药、或借助于植入物给药。

在优选的具体实施方式中，口服给予组合物，或将组合物作为气雾剂经由口腔或鼻吸入给予至肺。

为了经由口腔或鼻吸入途径进行给药，优选地，活性组分将在适宜的药物剂型中并且可以利用机械形式加以递送，机械形式包括但不限于吸入器或雾化器装置。

另外，在使用口腔或鼻吸入途径的情况下，可以使用SPAG(小颗粒气雾发生器)来给药。

对于静脉注射，活性组分将以肠外用水溶液的形式，其中肠外用水溶液是无热原的并且具有适宜的pH值、等渗性以及稳定性。本领域技术人员利用例如等张赋形剂，如氯化钠注射液、林格氏注射液、乳酸盐林格氏注射液能很好地制备适宜的溶液。当需要时，可以包括防腐剂、稳定剂、缓冲剂、抗氧化剂和/或者其它添加剂。

用于口服的药物组合物可以是片剂、胶囊剂、散剂或液体形式。片剂可以包含固体载体如明胶或佐剂。液体药物组合物通常包含液体载体如水、石油、动物或植物油、矿物油(液状石蜡)或合成油。可以包括生理盐水溶液、右旋糖(葡萄糖)或者其它糖类溶液或多元醇(glycols)如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇。

还可以通过微球体、脂质体、其它微颗粒递送系统或缓释剂型(放置在某些包括血液的组织中)来给予组合物。缓释载体的适宜实例包括以共用件(shared article)形式的半透性聚合物基质，例如，栓剂或微囊剂。可植入或微胶囊缓释基质包括聚交酯(美国专利第3,773,919号；EP-A-0058481)、L-谷氨酸和γ乙基-L-谷氨酸酯的共聚物(Sidman等人，Biopolymers 22(1)：547-556，1985)、聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)或乙烯乙酸乙烯酯(Langer等人，J.Biomed.Mater.Res.15：167-277，1981，以及Langer，Chem.Tech.12：98-105，1982)。

上面提及的技术和方案(protocol)的实例以及根据本发明可以使用的其它技术和方案可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences，18th edition，Gennaro，A.R.，Lippincott Williams&Wilkins；20thedition (December 15，2000)ISBN 0-912734-04-3以及Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems；Ansel，H.C.et al.7th Edition ISBN 0-683305-72-7中找到，将其所披露的全部内容结合于本文供参考。

药物组合物

实际给予量、以及给予的速率和时间进程将取决于待治疗疾病的特性和严重性。治疗处方，例如，剂量决定等，最终是全科医师(普通医师)和其它医师的责任并由他们自行处理，而且通常考虑要治疗的辐射损伤、个体患者的状况、递送部位、给药方法以及医师已知的其它因素。

治疗处方，例如，剂量决定等，最终是全科医师、内科医师或者其它医师的责任并由他们自行处理，而且通常考虑要治疗的病症、个体患者的状况、递送部位、给药方法以及医师已知的其它因素。

最佳剂量可以由内科医师基于许多参数加以确定，其中参数包括，例如，年龄、性别、体重、待治疗病症的严重性、待给予的活性组分以及给药途径。

除非另有限定，否则本文中使用的所有技术和科学术语均具有本发明的技术领域中的技术人员所通常理解的含义。

在整个说明书中，除非上下文另有要求，否则术语“包含”或“包括”将被理解为具有包括所陈述的整体(integer)或整体组的含义，但不排除任何其它整体或整体组。

如在本文中所使用的，术语如“一”、“一个”、“一种”以及“该”、“所述”包括单数和复数对象，除非上下文清楚地另有要求。因此，例如，“一种活性剂”或“一种药理活性剂”的含义包括单一活性剂以及联用的两种或更多种不同的活性剂，而“一种载体”的含义包括两种或更多种载体的混合物以及单一载体等。

发明详述

盐和溶剂合物

如上所述，本文中披露的活性化合物可以制备成它们的药用盐的形式。药用盐是这样的盐，其保留母体化合物的所希望的生物活性并且不会赋予(传递)不希望的毒理学效应。药用盐的实例在Berge等人，1977，“Pharmaceutically Acceptable Salts，”J.Pharm.ScL，Vol.66，pp.1-19中讨论。

所披露的活性化合物还可以制备成它们的溶剂合物的形式。术语“溶剂合物”在本文中在常规意义上用来指溶质(例如，活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂的复合物。如果溶剂是水，则溶剂合物可以方便地称作水合物，例如，半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、四水合物等。

前药

本发明进一步扩展到本发明的化合物的前药。利用众所周知的制药技术可以制备任何化合物的前药。

同系物(同源物)和类似物

除使用以上列出的化合物之外，本发明进一步用于包括使用这样的化合物的同系物、衍生物以及类似物。关于这点，同系物是具有与上述化合物基本结构类似性的分子，而类似物是具有基本上生物类似性而与结构类似性无关的分子。

本发明进一步提供了用于实施本发明的治疗方案的试剂盒。这样的试剂盒可以包括(在一个或多个容器中)治疗有效量或预防有效量的本发明的药用形式的组合物。这样的试剂盒可以进一步包括用于本发明的组合物的使用、或用于实施本发明的方法的说明书，或可以提供进一步的信息以向内科医师提供适合于治疗血细胞减少或由血细胞减少引起的病症的信息。

现在，将参照以下实施例来描述本发明，其中实施例用于说明的目的并不用来解释成限制本发明。本发明将参考以下附图，其中：

图1是图解说明了在给予IPA以后的B淋巴细胞功能的曲线图，以及

图2是图解说明了在给予IPA以后的T淋巴细胞功能的曲线图。

实施例

实施例1

材料和方法

核黄素、氮蓝四唑(NBT)、还原型谷胱甘肽(reducedglutathione)(GSH)、S-S′-二硫代二(2-硝基苯甲酸)(DTNB)、以及1-氯-2，4-二硝基苯(CDNB)获自印度的Sisco Research LaboratoriesPvt.Ltd，Mumbai。硫代巴比土酸购自印度的Hi-media laboratories，Mumbai，1，1，3，3-四甲氧基丙烷由Sigma-Aldrich USA供应。在本研究中使用的所有其它化学药品和试剂均是分析级。奥替普拉由订约人(contractor)Canopus公司供应。

近亲繁殖的4-6周龄的雌性瑞士白化体小鼠(20-30g)获自小动物饲养站，Kerala Agricultural University，Mannuthy，Thrissur。在温度、压力以及湿度的标准条件下，将动物保持在通风良好的笼中。向动物提供任意的正常小鼠食物和水。在本研究过程中进行的所有动物实验得到预先允许并遵循Institutional Animal Ethics Committee(IAEC)的指导。

照射

用单剂量的700拉德(7Gy)的辐射对动物进行处理。辐射源是6°钴Theratron-Phoenix远距离放射治疗装置(Atomic Energy Ltd，加拿大)。动物被限制在专门设计的、通风良好的笼中而没有麻醉并暴露于全身辐射：速率为1.33Gy/min、照射野为25×25cm²以及离辐射源的距离为80cm。

确定奥替普拉对经照射动物的血液学参数的影响

将24只小鼠随机分成三组，每组8只动物。第I组是作为经照射的对照，其被供给赋形剂。在照射前10天用奥替普拉(50mgs/Kg体重)处理第II组。在照射前10天将奥替普拉(50mgs/Kg体重)给予第III组并在照射以后再继续15天。用750拉德的单剂量照射所有三组动物。在照射前1天和其后每个第三天确定所有动物的体重。从尾部静脉将血液收集到肝素化管中并在辐射前1天和其后每个第三天分析以下参数。分析的参数是总WBC计数(血球计方法)、分类计数(利什曼染色法)以及通过杜拉伯金(Drabkin)法获得的血红蛋白。确定奥替普拉对经照射动物的骨髓生存力和抗氧化参数的影响。

将36只动物分成四组，每组9只动物。对于第一至第四组，治疗方案和上述类似。第四组是作为正常动物而没有任何治疗。在照射(750拉德)以后的第5、10以及15天，将来自每个组的3只动物处死。将血液收集到肝素化管，除去血浆，然后测定血液中的以下参数。通过McCord和Fridovich的NBT还原方法测量了酶SOD的活性。借助于Aebi的方法并通过在240nm处测量过氧化氢的分解速率估计了CAT活性。通过Moron等人的方法并基于与DTBN的反应，测定了GSH水平。GPX的测定是按照Hafeman的方法并基于在有GSH存在的情况下的H₂O₂的降解。按照Habig的方法并基于在GSH和CDNB之间共轭物形成增加的速率，来测定GST的活性。

切开3只上述动物的股骨并将骨髓细胞冲洗到包含2％牛胎血清的磷酸盐缓冲生理盐水(pH 7.4)中。洗涤细胞，然后通过Sredni的方法确定骨髓生存力。结果表示为活骨髓细胞数目×10⁶/股骨。

快速切除被处死动物的肝脏，在冰冷的盐水中洗涤，然后保持在-70℃直到分析的日期。在分析的日期，25％匀浆被制备在三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液中(0.1M，pH7.4)。以12000rpm离心匀浆30分钟，然后利用Okhawa等人的TBA方法，用上清液来确定组织脂质过氧化物水平(LPO)。

数据分析

数据表示为平均值±标准差(SD)。利用斯图顿特(Student)t-检验来确定差异比较的显著性水平。将奥替普拉治疗组的平均值与单独辐射治疗组的平均值进行比较。然后将单独辐射治疗组进一步与未治疗组进行比较。如果p＜-0.001，则平均值之间的差异被认为是统计上显著的。

以这里所用的剂量水平进行的辐射治疗并不在所暴露动物的体重上产生统计上显著的减小。对于第I组、第II组以及第III组，动物的最初体重分别为26.27±3.76、23.92±4.61以及24.98±3.76。在第六天体重分别降低到21.82±3.34、21.02±4.14以及21.10±2.51(p＞0.05)。在照射动物中，辐射显著地降低了总白细胞计数。发现给予奥替普拉可增加计数。在照射后的最初几天，第II组(奥替普拉预治疗组)和第III组(奥替普拉连续给予组)均显示出几乎类似的WBC数目。但在照射以后的稍后几天中，与每I组(单独辐射治疗组)以及第II组相比，第III组显示出显著提高的WBC。这表明，连续给予奥替普拉可以以浓度相关方式刺激造血系统。

这种观察结果进一步受到在第III组中发现的增加的骨髓生存力支持。在正常动物(第IV组)中的骨髓生存力是16.21±0.45×10⁶个细胞/股骨。在照射以后，骨髓生存力显著降低。在照射后第15天以后，第II组具有6.1×10⁶个细胞/股骨的数值，而第II组和第III组分别显示出5.82×10⁶和14.32×10⁶个细胞/股骨。在照射以后，血红蛋白水平显著降低。在第六天，单独辐射治疗组具有10.37±3.19的血红蛋白水平，而奥替普拉连续给予组具有12.42±2.76的值。该分类计数并没有显示出任何显著变化。

发现在照射以后，SOD和CAT(与抗氧化防御机制有关的主要酶中的两种)两者的活性均下降。连续给予奥替普拉可增强SOD活性，其在照射后的第15天显示出最大值，而CAT则在照射后的第10天显示出最大值。

还发现，在全身照射以后，GPX的活性会下降。连续给予奥替普拉会提高GPX的活性。在照射后的第15天，第I组具有1254.00±116.23U/L的溶血物质的活性，而第III组显示出1927.87±136.06的活性，其说明给予奥替普拉刺激GPX活性(p＜-0.001)。在给予奥替普拉以后，主要细胞抗氧化剂GSH的水平增加。在照射以后，GSH的水平会降低。与单独辐射治疗组相比，在第15天，在奥替普拉连续给予组中GSH的水平增加几乎三倍，这表明给予奥替普拉可提高GSH水平(p＜0.001)。可以假设，增加的抗氧化酶和GSH水平是给予奥替普拉的直接结果并且在未照射动物中也可以看到这一点。给予奥替普拉还可以提高GST(一种与谷胱甘肽介导的解毒系统有关的酶)的活性。在第15天，第III组显示出2.38±0.25(纳摩尔的形成的CDNB-GSH共轭物)的活性(p＜-0.01)，而第I组仅具有1.51±0.37的活性。在所有辐射治疗动物中，辐射增加了脂质过氧化作用的水平。在第15天，对于第I组，它是3.47±0.31(纳摩尔的形成的MDA/mg蛋白)，而在第III组中它显著降低到2.12±0.21的水平(p＜-0.001)。

实施例2-患者病例研究

用化学式2的化合物对患者进行治疗并监测血细胞参数。该实验的样本量为1，由受治疗者1组成。受治疗者1为免疫受损患者，该患者患有多种复发性感染性发作，需要住院治疗，而在几乎濒死的状态下开始用实验药物异戊烯基腺苷(IPA)进行治疗。

该受治疗者已住院治疗以防止威胁生命的感染。在住院治疗之前的三个月期间，该受治疗者的总白细胞计数在2200-4900的范围内。最初两个月观察到T4/T8细胞比率为50/270(0.22)。该患者因抑郁、衰竭、支气管感染、严重腹泻、严重失重以及完全失去食欲和强化的发烧(高烧，spiked fever)而住院治疗。该患者的体重为98磅。

虽然对于接受实验性IPA治疗患者最初是非常合作的，但没有合理的理由患者在不同时间停止了IPA。

化学式2的异戊烯基腺苷(IPA)治疗-免疫学研究

受治疗者最初接受IPA(参见图1和图2)。T和B淋巴细胞感应性(反应能力)是通过这些细胞响应特异性刺激促分裂原(对于T细胞为PHA以及对于B细胞为PWM)而增殖的能力来加以测量的，其是每周加以监测直到死亡。分别如图1和图2中所示，受治疗者的T和B淋巴细胞感应性远低于正常状态。事实上，这些免疫细胞群体的感应性均小于正常供体的第一个百分位(percentile)；即，大于历史上试验的所有正常供体的99％(在我们的实验室，＞1460个正常供体)具有大于患者所显示的应答。

在开始IPA治疗后的不到7天内，经历T和B淋巴细胞感应性的较大快速康复。在开始药物治疗的7天内感应性的水平高于正常供体的反应性的下限。这表明自从患者接受药物治疗以后发生了显著康复。大多数免疫刺激剂(例如，BCG、左旋咪唑)呈现更慢和更少显著的免疫康复能力。该受治疗者认真地连续服用恒定口服剂量的IPA。

该受治疗者感到已治愈并突然地停止服药。除受治疗者和他的朋友以外无人知道这种单方面的决定直到几个星期以后。受治疗者的发烧和泻腹已完全消退并且在此期间患者呈现15磅的增重。

如图1和图2中所示，在患者宣告自治愈并因此停止所有IPA药疗法时，他的T和B淋巴细胞感应性再次下降到小于正常供体的感应性的1％。

这在T淋巴细胞功能中可以最显著地观察到，但以有点滞后的方式也在B淋巴细胞功能中观察到。在此期间，总WBC计数在1650至2550的范围内。他的外周血(peripheral blood)显示50个T4细胞和220个T8细胞(比率为0.23)。

该患者停止化学式2的IPA治疗几天。在此期间，T和B淋巴细胞感应性均快速降至最低点，由于严重的支气管感染和发烧、泻腹、焦虑以及失重，患者住院治疗7至10天。

该受治疗者重新开始以推荐的剂量水平进行化学式2的IPA治疗。在接着的一周期间，较小的T淋巴细胞感应性得到恢复；B淋巴细胞感应性继续下降。在两周内，T淋巴细胞感应性再次几乎在正常范围内。虽然B淋巴细胞感应性仍然有点受到抑制，但这种细胞的感应性也得到改善。在1个月内，T淋巴细胞感应性已经上升到正常供体反应性的范围内，而B淋巴细胞感应性稍微低于正常下限。

该受治疗者的个人状态说明了显著改善，他周期性地外出用餐并具有较大的食欲，泻腹已经减轻，发热已经消退，他每天骑自行车并参加体力活动。该受治疗者再次中止进行药疗法一周而没有告诉内科医师。T淋巴细胞感应性再次显示较大的突然降低到小于正常供体的活性的1％。

患者再次呈现强化的发热、急性泻腹和衰竭。该受治疗者在随后的星期再次重新开始用推荐剂量的一半进行化学式2的IPA治疗1周。受治疗者的T淋巴细胞感应性显著地增加到高于正常范围的下限。B淋巴细胞有效地显示出轻微的提高。在下星期期间，大大地(＞3X)增加了IPA的剂量。T淋巴细胞感应性显示出压抑(depression)，这暗示IPA的免疫毒性；因为在接着的星期中33％的降低剂量导致T淋巴细胞感应性再次增加。

在下一月期间，该患者停止治疗，作为直接的结果，T和B淋巴细胞功能均下降到零。大约两周以后，该患者死于急性支气管感染并伴随高热、泻腹、衰竭和失重。

总之，在给予化学式2的IPA期间，观察到生活质量与抑制的或提高的T和B淋巴细胞功能之间的直接相关性。增强的T和B淋巴细胞感应性很好地与连续的化学式2的IPA药疗法有关；似乎在给予的最佳IPA剂量水平感受最佳水平的感应性。因为为了抵抗宿主的微生物感染需要感应性T和B淋巴细胞功能，所以主要的感染性发作与感应性被最严重损害时的时间有关。在患者处于晚期濒死期间，患者存活了5个月，其中在开始化学式2的IPA治疗以后具有极好质量的一段时间。看来，如果患者已经认真地和连续地接受IPA药疗法，则患者可能会享受来自化学式2的IPA的明显的治疗益处。如果已经更明确地建立了最佳剂量水平，则大概可以优化生命质量并在更大程度上(相比于在该患者中所实际观察的)延长生命。

在本说明书中提及的所有文献均以引用方式结合于本文。对于本领域的技术人员来说，在不偏离本发明的范围的情况下，本发明所描述的具体实施方式的各种改进和变化将是显而易见的。虽然已经连同特定的优选具体实施方式对本发明进行了描述，但应当理解，如要求保护的本发明不应不适当地限于这样的特定具体实施方式。事实上，实施本发明的所描述方式的各种改进(其对于本领域技术人员来说是显而易见的)被本发明所涵盖。在本说明书中对任何先前技术的参考并不是、并且不应当视为承认或任何形式的暗示：这种先前技术在任何国家构成公知常识的一部分。

Claims

1.一种用于治疗和/或预防血细胞减少的方法，所述方法包括：

提供治疗有效量或预防有效量的奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐，以及

将所述治疗有效量或预防有效量的奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐给予需要这样的治疗的受治疗者。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述血细胞减少导致至少一种选自由中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少、以及贫血组成的组中的病症。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，所述细胞分裂素是奥替普拉代谢物M3。

4.根据任何前述权利要求所述的方法，其中，将所述奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物或前药连同羧甲基纤维素(CMC)一起配制以形成复合药物。

5.一种用于治疗血细胞减少的药物组合物，所述组合物包含奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐，以及药用稀释剂和/或载体。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中，奥替普拉是以M3代谢物的形式提供的。

7.根据权利要求5或6所述的药物组合物，其中，所述组合物是连同羧甲基纤维素一起配制的。

8.奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐在制备用于治疗血细胞紊乱的药剂中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其中，所述血细胞紊乱选自包括中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少、以及贫血的组。

10.根据权利要求8或权利要求9所述的应用，其中，奥替普拉的所述衍生物是M3(代谢物3)。

11.根据权利要求8至10中任一项所述的应用，其中，所述药剂进一步包含羧甲基纤维素。

12.一种用于治疗和/或预防血细胞减少的方法，所述方法包括：

提供治疗有效量或预防有效量的至少一种细胞分裂素化合物，以及

将所述治疗有效量或预防有效量的至少一种细胞分裂素化合物给予需要这样的治疗的受治疗者。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述细胞分裂素化合物是N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，将所述N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物或前药连同羧甲基纤维素(CMC)一起配制以形成复合药物。

15.一种用于治疗血细胞减少的药物组合物，所述组合物包括N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐，以及药用稀释剂和/或载体。

16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中，所述组合物是连同羧甲基纤维素一起配制的。

17.根据权利要求15或16所述的药物组合物，进一步包含奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐。

18.N⁶异戊烯基腺苷或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐在制备用于治疗血细胞紊乱的药剂中的应用。

19.根据权利要求18所述的应用，其中，所述血细胞紊乱选自包括中性白细胞减少、血小板减少、淋巴细胞减少、以及贫血的组。

20.根据权利要求18或19所述的应用，其中，所述药剂进一步包含羧甲基纤维素。

21.根据权利要求18至21中任一项所述的应用，其中，所述药剂进一步包含奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐。

22.一种用于预防和/或治疗和/或改善血细胞缺乏紊乱如中性白细胞减少、血小板减少或贫血的复合药物组合物，所述组合物包含细胞分裂素化合物和奥替普拉或者其衍生物或功能上等效的类似物以及至少一种药用稀释剂。

23.根据权利要求22所述的组合物，其中，所述细胞分裂素化合物是N6异戊烯基腺苷或者其类似物或药用盐。

24.根据权利要求23所述的组合物，其中，所述细胞分裂素化合物是N6苄基腺苷或者其类似物或药用盐。

25.根据权利要求24所述的组合物，其中，所述奥替普拉的类似物或衍生物选自包括3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、莱菔硫烷、柚苷、5-(4-甲氧基苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、ADT、ADO、1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、1，2-二噻茂烷、1，3-二硫杂环戊烯-2-硫酮、以及马洛替酯的组。

26.一种在辐射损伤以后的需要DNA修复治疗的受治疗者的至少一种细胞中介导DNA修复的方法，所述方法包括以下步骤：

提供治疗有效量的奥替普拉或者其衍生物或类似物、代谢物或盐，以及

将所述组合物给予包含需要这样的治疗的细胞的受治疗者。

27.一种用于在辐射暴露以后对个体进行DNA修复治疗的方法，所述方法包括将治疗有效量的奥替普拉或者其衍生物或类似物给予所述个体的步骤。

28.奥替普拉在制备用于在辐射暴露以前或以后刺激细胞DNA修复机制的药剂中的应用。

29.根据权利要求28所述的应用，其中，所述辐射暴露由宇宙旅行引起。

30.根据权利要求27所述的应用，其中，奥替普拉的所述类似物或衍生物选自包括3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、莱菔硫烷、柚苷、5-(4-甲氧基苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、ADT、ADO、1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、1，2-二噻茂烷、1，3-二硫杂环戊烯-2-硫酮、以及马洛替酯的组。

31.一种用于在辐射暴露以后介导DNA修复的药物组合物，包括给予奥替普拉或者其衍生物或类似物以及药用载体。

32.根据权利要求31所述的药物组合物，其中，奥替普拉的所述类似物或衍生物选自包括3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、莱菔硫烷、柚苷、5-(4-甲氧基苯基)-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、ADT、ADO、1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、1，2-二噻茂烷、1，3-二硫杂环戊烯-2-硫酮、以及马洛替酯的组。

33.奥替普拉或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐在制备用于给予宇航员的药剂中的应用，其中，所述药剂是在宇宙旅行之前给予的。

34.根据权利要求33所述的应用，其中，所述奥替普拉代谢物是M3。

35.根据权利要求33或34所述的应用，进一步包含至少一种细胞分裂素化合物。

36.至少一种细胞分裂素化合物或者其衍生物、类似物、代谢物、前药或药用盐在制备用于给予宇航员的药剂中的应用，其中，所述药剂是在宇宙旅行之前给予的。