CN101336896A - 一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，通过试验可以测定新鱼腥草素钠对淋巴细胞增殖的影响，从而确定新鱼腥草素钠在体外具有刺激淋巴细胞增殖的能力以及最佳剂量，通过试验可以测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平以及外周血CD₄ ⁺/CD₈ ⁺淋巴细胞比值，从而确定新鱼腥草素钠在体外具有刺激淋巴细胞增殖的能力以及最佳剂量，通过试验可以测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平，从而确定新鱼腥草素钠对氟苯尼考引起的雏鸡免疫抑制的拮抗作用以及最佳剂量，上述的实验系统研究了新鱼腥草素钠对家禽免疫的增强作用，进一步的丰富和完善了对新鱼腥草素钠的免疫药理学认知。

Description

一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用

技术领域

本发明涉及一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用。

背景技术

目前在公开文献中未见有关于新鱼腥草素钠注射液用于增强家禽免疫方面应用的报道。

发明内容

本发明提供了一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，它不但可以提高家禽免疫，而且家禽免疫抑制具有一定的拮抗作用。

本发明采用以下技术方案：一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用。

所述的新鱼腥草素钠注射液在刺激家禽外周血T淋巴细胞增殖的应用。所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫应答的应用。所述的新鱼腥草素钠注射液在提高家禽细胞免疫的应用。所述的新鱼腥草素钠注射液能够拮抗氟苯尼考产生的免疫抑制作用。所述的新鱼腥草素钠注射液主要是新鱼腥草素钠10g和吐温-80 100mL为主要原料，辅以5000mL注射用水制成注射液。所述的注射用水规格为5mL:10mg。

本发明将新鱼腥草素钠注射液通过在家禽的体外和体内试验可以得知，(1)通过试验可以测定新鱼腥草素钠对淋巴细胞增殖的影响，从而确定新鱼腥草素钠在体外具有刺激淋巴细胞增殖的能力以及最佳剂量，(2)通过试验可以测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平以及外周血CD₄ ⁺/CD₈ ⁺淋巴细胞比值，从而确定新鱼腥草素钠在体外具有刺激淋巴细胞增殖的能力以及最佳剂量，(3)通过试验可以测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平，从而确定新鱼腥草素钠对氟苯尼考引起的雏鸡免疫抑制的拮抗作用以及最佳剂量，上述的实验系统研究了新鱼腥草素钠对家禽免疫的增强作用，进一步的丰富和完善了对新鱼腥草素钠的免疫药理学认知，确定了新鱼腥草素钠能够明显拮抗氟苯尼考产生的免疫抑制作用，为其家禽实践中的中西药结合使用提供理论依据。

附图说明

图1为新鱼腥草素钠对淋巴细胞增殖影响的规律条形图

图2为新鱼腥草素钠对抗NDV抗体产生影响的规律折线图

图3为新鱼腥草素钠对外周血CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比值影响的折线图

图4为新鱼腥草素钠作对抗NDV抗体效价影响的折线图

图5为新鱼腥草素钠对外周血CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比值影响的折线图

具体实施方式

本发明中新鱼腥草素钠注射液主要是新鱼腥草素钠10g和吐温-80 100mL为主要原料，辅以5000mL注射用水制成注射液，注射用水规格为5mL:10mg。

本发明采用对雏鸡的试验来进一步说明新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用。

实施例一：新鱼腥草素钠对雏鸡外周血T淋巴细胞增殖的影响

参见图1，采集健康雏鸡肝素抗凝血，分离外周血淋巴细胞并于体外培养24h后，加入不同剂量的新鱼腥草素钠和/或ConA(见表1)，继续培养44h后，以MTT法测定新鱼腥草素钠对淋巴细胞增殖的影响。结果表明，新鱼腥草素钠在体外具有刺激淋巴细胞增殖的能力，且与ConA具有协同作用。进一步分析表明，不同给药剂量的新鱼腥草素钠对淋巴细胞的影响不同，其中以终浓度为250mg/L效果最明显(如图1)。

表1试验分组及加药方法

实施例二：新鱼腥草素钠对雏鸡免疫应答的影响

(1)动物分组与用药

将180羽非免疫健康三黄雏鸡随机分成8组。试验组I-III分别颈部皮下注射高、中、低剂量的新鱼腥草素钠，高剂量为4mg/kg，中剂量为2mg/kg，低剂量为1mg/kg；第IV～VI在接种NDV LaSota株弱毒疫苗的同时，将新鱼腥草素钠作为免疫佐剂按不同剂量颈部皮下注射；第IV组为白细胞介素对照，于14天和28天配合疫苗以厂家规定用量饮水免疫，饮水时间为50min；第V组以注射等量生理盐水作为对照。所有各组动物均于14日龄以NDV LaSota株弱毒活疫苗通过滴鼻进行第一次免疫，2周后以同样方法加强免疫一次(见表2)，

表2动物分组及其给药方法

(2)对雏鸡体液免疫应答的影响

参见图2，在第一次免疫后第7、14、21、28、35、和42天测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体水平以及外周血CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比值，结果表明动物在初次免疫后的第35天(第二次免疫后的第21天)，各组的抗NDV血凝抑制抗体均呈现上升趋势，且新鱼腥草素钠能够对提高鸡体抗NDV血凝抑制抗体效价具有一定作用，通过t检验分析证明与对照组差异显著(P＜0.05)。但进一步分析表明，不同给药剂量的新鱼腥草素钠对提高鸡体抗NDV血凝抑制抗体效价的影响不同，其中第II组与第I、III组差异显著(P＜0.05)；这表明以中等剂量(2mg/kg)的新鱼腥草素钠作为NDV LaSota株弱毒活疫苗的免疫佐剂时效果相对最为理想，而高剂量(4mg/kg)反而效果还不如低剂量(1mg/kg)，参见图2。

(3)对雏鸡细胞免疫的影响

参见图3，结果统计还显示，不同剂量的新鱼腥草素钠试验组于第一次疫苗免疫后，CD4⁺T/CD8⁺T细胞比值均高于生理盐水对照(P＜0.05)；第二次疫苗免疫后第14天(即首次免疫后的第28天)，各新鱼腥草素钠剂量组的CD4⁺T/CD8⁺T细胞比值均达到最大，且其中的中剂量新鱼腥草素钠组显著高于低、高剂量新鱼腥草素钠组和生理盐水对照组(表2)，以上数据表明，新鱼腥草素钠具有提高外周血CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比值的作用，且这种作用同样与给药剂量相关，其中以2mg/kg体重最为理想(见图3)。

(4)对雏鸡免疫器官指数的影响

实验结果提示，动物在注射新鱼腥草素钠后，对胸腺、脾脏和法氏囊的免疫器官指数无明显影响(表3)，尽管中剂量(2mg/kg)的新鱼腥草素钠对脾脏的免疫器官指数比对照组有一定提高，但差异不显著(P＞0.05)(表3)。这表明了新鱼腥草素钠对新城疫疫苗免疫效果的影响不是通过促进免疫器官发育实现的。

表3新鱼腥草素钠对免疫器官指数的影响

实施例三：新鱼腥草素钠对氟苯尼考导致雏鸡免疫应答免疫抑制的影响

(1)动物分组与用药将120只非免疫健康鸡随机分为5组，第I～III组为试验组，分别口服氟苯尼考1.2g/kg的同时，将新鱼腥草素钠按高、中、低不同剂量颈部皮下注射，高剂量为4mg/kg，中剂量为2mg/kg，低剂量为1mg/kg；第IV组为氟苯尼考对照组；第V组为疫苗对照组；所有动物于14日龄以鸡NDV LaSota株弱毒活疫苗进行第一次免疫，2周后加强免疫一次，并于第一次免疫后的第7天、14天、21天、28天分别测定各组动物的抗鸡NDV血凝抑制抗体水平和外周血CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比值。(表4)

表4动物分组及其给药方法

Table 4 Assignment and treatment of the animals

(2)实验结果

参见图4和图5，统计分析表明，高剂量氟苯尼考使用可以明显抑制雏鸡免疫应答，但新鱼腥草素钠能够拮抗氟苯尼考产生的免疫抑制作用。

Claims (7)

1、一种新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用。

2、根据权利要求1所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，其特征是所述的新鱼腥草素钠注射液在刺激家禽外周血T淋巴细胞增殖的应用。

3、根据权利要求1所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，其特征是所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫应答的应用。

4、根据权利要求1所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，其特征是所述的新鱼腥草素钠注射液在提高家禽细胞免疫的应用。

5、根据权利要求1所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，其特征是所述的新鱼腥草素钠注射液能够拮抗氟苯尼考产生的免疫抑制作用。

6、根据权利要求1所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，其特征是所述的新鱼腥草素钠注射液主要是新鱼腥草素钠10g和吐温-80 100mL为主要原料，辅以5000mL注射用水制成注射液。

7、根据权利要求6所述的新鱼腥草素钠注射液在增强家禽免疫方面的应用，其特征是所述的注射用水规格为5mL∶10mg。

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