CN101271069A - 微型芯片检查系统、检查装置和计算机能读入的媒体 - Google Patents
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Abstract
一种微型芯片检查系统、微型芯片检查装置和计算机能读入的媒体,包括:微型芯片,其至少含有目标物质和与所述目标物质特异结合而进行荧光标识的试剂,并使所述目标物质与所述试剂进行反应而在被检测部检测荧光强度;微型芯片收容部;光检测部;反应开始机构;控制部,其控制所述反应开始机构的反应开始时刻以及所述光检测部在反应前和反应后荧光强度的检测时刻,该微型芯片检查系统中所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的所述反应开始时刻相对应。
Description
技术领域
本发明涉及微型芯片检查系统、微型芯片检查装置和程序。
背景技术
近年来,在集成加工有微细流路的微型芯片上把多种溶液混合反应,检测该反应的状态并进行分析的微型综合分析系统(Micro TotalAnalysis System:μTAS)被关注。
μTAS有试样的量少、反应时间短和废弃物少等优点。在医疗领域使用时由减少检体(血液、尿、擦拭液等)的量而能减轻患者的负担,由减少试剂的量而能降低检查成本。且由于检体和试剂的量少,所以反应时间被大幅度缩短,能谋求检查的高效率。且由于装置是小型的,所以小的医疗机构也能设置,能不选择场所地迅速进行检查。
微型芯片检查系统通过从微型泵等向微型芯片供给驱动液而使微型芯片内收容的检体和试剂沿流路进行送液。这样,检体和试剂在流路内被混合并产生反应。反应液被向微型芯片内的被检测部送液,在被检测部进行反应液内目标物质浓度等的检测。
例如国际公开第2005-108571号中记载有使用集成加工微细流路的微型芯片来检测目标基因的例子。首先在微型芯片的被检测部把捕获目标基因的物质预先固定化。然后使目标基因放大用试剂与检体反应来生成放大产物。这样,只要检体中含有目标基因,则放大产物内就存在被放大的目标基因。接着,使被放大的目标基因变性成单链。通过把检体向被检测部供给而使被检测部中被固定化的捕获目标基因的物质来捕获目标基因。然后把与该单链目标基因杂交的DNA探针向被检测部供给,利用杂交反应使目标基因与DNA探针结合。DNA探针被预先进行了荧光标识。然后把与结合有被捕获目标基因的DNA探针结合的金胶质液向被检测部供给,使金胶质与DNA探针结合。然后向被检测部供给洗净液以把未结合的金胶质从被检测部除去。通过光学检测被检测部中金胶质的浓度来进行目标基因的检测。
日本特开2001-255328号公报中记载:在生物芯片内目标基因的检测中,向由荧光标识的目标基因与DNA探针杂交的处理液照射激励光,检测从处理液发出的荧光的荧光强度。
日本特表2003-517591号公报中记载:作为能高灵敏度进行目标基因检测的技术有循环探测法。该方法是:通过把目标基因作为铸模并循环地反复进行DNA探针与目标基因的杂交、游离,而对于少数的目标基因能生成多个荧光标识。
循环探测法通过利用荧光共振能移动的荧光色素而把DNA探针进行标识化。该DNA探针在通常状态下是以供体即荧光物质和受体即猝光物成对地存在,即使照射激励光,也由于从荧光物质发出的荧光被猝光物吸收而不发生供体的荧光。该DNA探针在与目标基因产生杂交反应的状态下,荧光物质与猝光物的结合被切断,荧光物质的荧光则能向外部发出。当荧光物质与猝光物的结合被切断,该DNA探针从目标基因游离。变为自由的目标基因与通常状态的DNA探针再次进行杂交反应而结合。这样,通过反复进行杂交反应则猝光物被切断的DNA探针被放大,随着反应的进行而能得到强的荧光强度。
在如日本特开2001-255328号公报那样利用荧光强度进行检测时,为了进行高精度检测,则需要测定杂交反应前的荧光强度来校正反应后的荧光强度。
特别是使用循环探测法时,在杂交反应前,来自荧光物质的荧光应该被猝光物所吸收,但现实情况是来自没被猝光物吸收的荧光物质的荧光呈现出微弱的荧光。因此,测定反应前的荧光强度来校正反应后的荧光强度具有很大的意义。
发明内容
本发明是根据这种要求而开发的,目的在于提供一种正确测定反应前后的荧光强度变化部分,而能进行高精度检测的微型芯片检查系统、微型芯片检查装置和程序。
本发明的一个方面是微型芯片检查系统,包括:微型芯片,其至少含有目标物质和与所述目标物质特异结合而进行荧光标识的试剂,并使所述目标物质与所述试剂进行反应而在被检测部检测荧光强度;微型芯片收容部,其能收容所述微型芯片;光检测部,其与所述微型芯片收容部所收容的微型芯片被检测部对应设置,且具有向所述被检测部照射激励光的发光部和接受来自所述被检测部荧光的受光部,其中,该检查系统具有:使所述反应开始的反应开始机构、控制所述反应开始机构的反应开始时刻以及所述光检测部在反应前和反应后荧光强度的检测时刻的控制部,所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的所述反应开始时刻相对应。
本发明的另一个方面是微型芯片检查装置,包括:微型芯片收容部,其能收容微型芯片:该微型芯片至少含有目标物质和与被荧光标识的所述目标物质特异结合的试剂,并使所述目标物质与所述试剂进行反应而在被检测部检测荧光强度;光检测部,其与所述微型芯片收容部所收容的微型芯片被检测部对应设置,且具有向所述被检测部照射激励光的发光部和接受来自所述被检测部荧光的受光部,其中,该检查装置具有:使所述反应开始的反应开始机构、控制所述反应开始机构的反应开始时刻以及所述光检测部在反应前和反应后荧光强度的检测时刻的控制部,所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的所述反应开始时刻相对应。
本发明的其它方面是提供一种利用存储程序的计算机能够读写的存储器,该程序由计算机来运行,该程序包括:至少把目标物质和与被荧光标识的所述目标物质进行特异结合的试剂收容在被微型芯片收容部收容的微型芯片被检测部中的步骤、通过反应开始机构使所述目标物质与所述试剂开始反应的步骤、光检测部进行反应前荧光强度检测的步骤、光检测部进行反应后荧光强度检测的步骤,其中,使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的所述反应开始时刻相对应。
附图说明
图1是使用本实施例微型芯片的检查装置的外观图;
图2是使用本实施例微型芯片的检查装置的结构图;
图3(a)是微型芯片1的上面图;
图3(b)是微型芯片1的侧面图;
图3(c)是把图3(a)中覆盖基板109卸下来的图;
图4是表示使用本实施例微型芯片的检查装置控制结构主要部分的图;
图5是本实施例的检测控制流程图。
具体实施方式
以下根据附图说明本实施例,但这仅是一例,而并不限定于本实施例。
在此,“微型芯片”和“检查系统”是指使DNA、RNA等核酸、蛋白质等生物分子进行混合、分离、合成、抽取等的化学操作和生物化学反应在小型芯片内进行并进一步检测反应结果的装置,以及与该装置组合而成的系统。
(装置结构)
图1是使用本实施例微型芯片的检查装置80的外观图。检查装置80是使预先注入在微型芯片1中的检体与试剂自动反应并把反应结果自动输出的装置。
检查装置80的壳体82上设置有:用于把微型芯片1向装置内部插入的插入口83、显示部84、存储卡槽85、打印输出口86、操作面板87和外部输入输出端子88。
检查人员按图1的箭头方向把微型芯片1插入,操作操作面板87而开始检查。如后所述,随着操作开始而位于检查装置80内的微型芯片1内开始荧光反应,基于荧光检测结果的检查结果由显示部84显示。通过操作操作面板87而能使检查结果从打印输出口86被打印输出,或是存储在被插入到存储卡槽85内的存储卡上。且例如使用LAN电缆能从外部输入输出端子88把数据保存在计算机等中。检查终了后,检查人员把微型芯片1从插入口83取出。
图2是使用本实施例微型芯片的检查装置80的结构图。图2表示把微型芯片从图1所示的插入口83插入而安装完成的状态。
检查装置80包括:把用于对预先注入在微型芯片1中的检体和试剂进行送液的驱动液11进行贮存的驱动液罐10、用于把驱动液11向微型芯片1供给的微型泵5、使驱动液11不泄漏地连接微型泵5和微型芯片1的衬垫6、对微型芯片1的必要部分进行温度调节的温度调节单元3、使微型芯片1不偏离地用于把温度调节单元3和衬垫6贴紧的芯片按压板2、用于使芯片按压板2升降的按压板驱动部21、把微型芯片1对于微型泵5高精度进行定位的限制部件22、检测微型芯片1内检体与试剂反应状态等的光检测部4等。
在初始状态时,芯片按压板2从图2所示的位置向上方退避。这样,微型芯片1就能向箭头X方向插拔,检查人员从插入口83(参照图1)把微型芯片1插入到与限制部件22抵接。然后芯片按压板2通过按压板驱动部21而下降并与微型芯片1抵接,使微型芯片1的下面与温度调节单元3和衬垫6贴紧。这样,微型芯片1的安装完成。由限制部件22、按压板2、温度调节单元3和衬垫6等构成本发明的微型芯片收容部。在芯片按压板2的内部设置有把所安装的微型芯片1的被检测部125、126(参照图3)加热,而用于促进后述目标基因的放大反应和杂交反应的加热器23。加热器23相当于本发明的加热机构。
温度调节单元3在与微型芯片1相对的面上具备珀尔帖元件31,在把微型芯片1安装到检查装置80时,珀尔帖元件31与微型芯片1贴紧。使收容有试剂的部分被珀尔帖元件31冷却而使试剂不变性。
光检测部4包括:作为本发明发光部的LED等的激励光源41、限制从激励光源41发出的激励光波长区域的激励光滤光器42、用于把透射激励光滤光器42的激励光整形成覆盖微型芯片1被检测部125、126(参照图3)的尺寸合适的光束点的聚光透镜43、把透射聚光透镜43的激励光进行反射并向微型芯片1的被检测部125、126照射,而且透射由该激励光而发出来自微型芯片1被检测部125、126的荧光的分色镜44、用于把透射分色镜44的荧光向受光部47导光的受光透镜45、限制透射受光透镜45的荧光波长区域的检测光滤光器46和对透射检测光滤光器46的荧光进行受光的由光电二极管等构成的受光部47等。
微型泵5包括:泵室52、使泵室52的容积变化的压电元件51、位于泵室52微型芯片1侧的第一缩小流路53、位于泵室驱动液罐10侧的第二缩小流路54等。第一缩小流路53和第二缩小流路54是被缩小的狭窄流路,且第一缩小流路53是比第二缩小流路54长的流路。
在把驱动液11向顺方向(朝向微型芯片1的方向)送液时,首先驱动压电元件51以使泵室52的容积急剧减少。这样在短的缩小流路即第二缩小流路54中则发生紊流,第二缩小流路54的流路阻力相对地比长的缩小流路即第一缩小流路53的大。这样,泵室52内的驱动液11就被支配性地向第一缩小流路53挤出而被送液。然后驱动压电元件51以使泵室52的容积缓慢地增加。这样,随着泵室52内容积的增加而驱动液11从第一缩小流路53和第二缩小流路54流入。这时,由于第二缩小流路54与第一缩小流路53相比长度短,所以第二缩小流路54与第一缩小流路53相比流路阻力小,驱动液11支配性地从第二缩小流路54向泵室52内流入。通过压电元件51反复进行以上的动作则驱动液11被向顺方向送液。
另一方面,在把驱动液11向反方向(朝向驱动液罐10的方向)送液时,首先驱动压电元件51以使泵室52的容积缓慢地减少。这样,由于第二缩小流路54与第一缩小流路53相比长度短,所以第二缩小流路54与第一缩小流路53相比流路阻力小。于是泵室52内的驱动液11就被支配性地向第二缩小流路54挤出而被送液。然后驱动压电元件51以使泵室52的容积急剧增加。这样随着泵室52内容积的增加而驱动液11从第一缩小流路53和第二缩小流路54流入。这时,在短的缩小流路即第二缩小流路54中则发生紊流,第二缩小流路54的流路阻力相对地比长的缩小流路即第一缩小流路53的大。这样,驱动液11支配性地从第一缩小流路53向泵室52内流入。通过压电元件51反复进行以上的动作则驱动液11被向反方向送液。
(微型芯片的结构)
图3是本实施例微型芯片1的结构图。图3(a)是微型芯片1的上面图。图3(b)是微型芯片1的侧面图。图3(c)是把图3(a)中覆盖基板109卸下来的图。表示的是一个例子的结构,但并不限定于此。
图3(a)中的箭头是把微型芯片1向检查装置80插入时的插入方向,图3(a)表示插入时成为微型芯片1下面的面。图3(b)是微型芯片1的侧面图。
如图3(b)所示,微型芯片1由槽形成基板108和覆盖槽形成基板108的覆盖基板109所构成。
如图3(c)所示,槽形成基板108配置有用于使检体与试剂在微型芯片1上混合、反应的微细流路和流路元件。图3(c)中示意性地把微细流路由箭头表示,把流路元件由四方形表示。
微型芯片1上设置有以下的流路元件。
驱动液注入部110a~110e是用于从微型泵注入驱动液11的注入部。
检体注入部113是用于把检体向微型芯片1注入的注入部。
驱动液注入部110a~110e的下游分别设置有:收容检体的检体收容部120、收容目标基因阳性对照用试剂的阳性对照收容部121、收容阴性对照用试剂的阴性对照收容部122、用于把目标基因放大的酶和基质的收容部123、引物和被荧光标识的DNA探针的收容部124。各试剂被预先收容在各收容部内。
阳性对照用试剂和阴性对照用试剂是用于监控检查是否正常进行的试剂。
循环探测法所使用的被荧光标识的DNA探针是由RNA和DNA构成的嵌合寡核苷酸,一个末端是荧光物质,而另一个末端被猝光物所修饰。在导入的状态下,利用荧光共振能迁移现象而不发出荧光,但若与目标基因产生杂交反应,则RNA部分被切断而发出荧光。
在把微型芯片1安装到检查装置80时,上述各收容部与珀尔帖元件31相对而被冷却,以使被收容的检体、试剂不变性。
在检体收容部120、阳性对照收容部121、酶和基质收容部123、引物和被荧光标识的DNA探针收容部124的下游设置有被检测部125,该被检测部125用于对于检体与阳性对照用试剂的混合液进行放大反应和检测。
且在检体收容部120、阴性对照收容部122、酶和基质收容部123、引物和被荧光标识的DNA探针收容部124的下游设置有被检测部126,该被检测部126用于对于检体与阴性对照用试剂的混合液进行放大反应和检测。
在把微型芯片1安装到检查装置80时,被检测部125、126与加热器23相对,为了促进放大而被加热。
被检测部125、126和与被检测部125、126对应的覆盖基板109的窗部109a为了能进行光学检测而由透明的玻璃、树脂等材料构成。
说明检体和各试剂的流动。首先,在由微型芯片1进行检查之前,由检查人员使用注射器等把检体从检体注入部113注入。从检体注入部113注入的检体通过连通的微细流路被收容在检体收容部120中。
然后,检查人员把注入有检体的微型芯片1插入到图1所示检查装置80的插入口83中,如图2所示那样进行安装。这样,就能驱动微型泵5而从驱动液注入部110a~110e注入驱动液11。
首先,当从驱动液注入部110a注入驱动液11时,则把通过连通的微细流路而被收容在检体收容部120中的检体挤出,把检体向被检测部125、126送入。
接着,当从驱动液注入部110b注入驱动液11时,则把通过连通的微细流路而被收容在阳性对照收容部121中的阳性对照用试剂(具有与目标基因相同DNA配列部位的试剂)挤出,把阳性对照用试剂向被检测部125送入,与先前被送液的检体混合。
接着,当从驱动液注入部110c注入驱动液11时,则把通过连通的微细流路而被收容在阴性对照收容部122中的阴性对照用试剂(例如纯水)挤出,把阴性对照用试剂向被检测部126送入,与先前被送液的检体混合。
接着,当从驱动液注入部110d和110e注入驱动液11时,则通过连通的微细流路从123、124的各收容部分别把酶和基质以及引物和被荧光标识的DNA探针向被检测部125、126送入,与先前被送液的检体和调节液的混合液进行混合。
接着由加热器23把被检测部125、126加热,在各自的被检测部中使目标基因(以及阳性对照DNA)的放大反应、放大产物与荧光探针的杂交反应、荧光物质与猝光物的游离反应同时进行,从放大到生成荧光物质的反应被一并进行。
从光检测部4的激励光源41向被检测部125、126照射激励光,由受光部47对从被检测部125、126发出的荧光受光,这样就能进行光检测。
作为变形例,即使放大反应、杂交反应、检测在各自的流路元件中进行也可以。在装置结构上,加热器23、珀尔帖元件31的位置只要能满足它们的功能,则多少有些变动也可以。
表1表示根据被检测部125、126的检测结果来进行检查综合判断的规则的一例。
[表1]
对于阳性对照,即使是其单独的试剂,也产生与目标基因的同等放大反应、与DNA探针的杂交反应以及荧光物质的生成反应。对于阴性对照,其单独的试剂不产生荧光物质的生成反应。
通过对于这些把试剂与检体混合的混合液进行反应和检测,则能判断表1所示的检查结果的好坏。
在阳性即检体中含有目标基因的情况下,则检体与阳性对照用试剂的混合液和检体与阴性对照用试剂的混合液的任何混合液都产生荧光发光。在阴性即检体中不含有目标基因的情况下,则检体与阳性对照用试剂的混合液由阳性对照反应而产生荧光发光,而检体与阴性对照用试剂的混合液则不反应而不产生荧光发光。这两种情况能作为进行正常反应的检查结果来处理。
另一方面,例如在检体中混入有反应抑制物质时等,则检体与阳性对照用试剂的混合液和检体与阴性对照用试剂的混合液中的任一混合液都不产生荧光发光。在检体与阳性对照用试剂的混合液无荧光发光、而检体与阴性对照用试剂的混合液有荧光发光的情况下,则认为微型芯片1所收容的试剂有去失活等的异常。这两种情况能作为进行了异常反应的检查结果而促使进行再次检查。
(控制结构)
图4是表示使用本实施例微型芯片的检查装置控制结构主要部分的图。表示与本发明控制有关的主要结构元件。
以按照程序来实行检查装置80控制的CPU90为中心,通过总线91把ROM92、RAM93、非易失性存储器94、光检测部4、珀尔帖元件31、加热器23、显示部84、操作面板87等相互连接。
ROM92存储由CPU90实行的各种控制程序、数据等。
RAM93由CPU90作为工作区利用,临时存储CPU90实行控制时所必须的程序和数据。
非易失性存储器94存储光检测部4的检测结果等。
CPU90根据ROM92存储的程序来实行控制。发挥本发明控制部的功能。
关于光检测部4、珀尔帖元件31、加热器23、显示部84和操作面板87的说明在前面已经叙述,所以省略。
(检测控制流程)
图5是本实施例的检测控制流程图。
把加热器23进行加热而由循环探测法进行的目标基因放大反应和目标基因与DNA探针的杂交反应开始进行的情况作为一例来说明。加热器23相当于是本发明的反应开始机构。
检测控制根据ROM92存储的检测控制程序由CPU90实行处理来进行。且作为前提,是从检查装置80的操作面板87输入检查开始而开始检查,且设定为已经向被检测部125、126送入在微型芯片1内的流路进行混合等化学操作的各试剂。
首先,CPU90利用光检测部4测定反应前的荧光强度(步骤S1)。这样能检测来自没被猝光物吸收的荧光物质的微弱荧光。
然后CPU90判断是否经过了规定时间T1(例如数秒)(步骤S2)。
当判断经过了规定时间T1(步骤S2:Yes)时,则CPU90利用加热器23对被检测部125、126进行加热(步骤S3)。把温度调节控制为适应于目标基因的放大反应和杂交反应的温度。
当判断没经过规定时间T1(步骤S2:No)时,则CPU90待机直到经过规定时间T1。
然后CPU90判断是否经过了规定时间T2(例如数秒)(步骤S4)。即判断由经过了规定时间T2是否充分进行了杂交反应。
当判断经过了规定时间T2(步骤S4:Yes)时,则CPU90利用光检测部4来测定反应后的荧光强度(步骤S5)。
当判断没经过规定时间T2(步骤S4:No)时,则CPU90待机直到经过规定时间T2。该期间继续进行加热。
然后CPU90以反应前的荧光强度为基准来校正反应后的荧光强度(步骤S6)。例如从反应后的荧光强度中扣除反应前的荧光强度来进行校正。通过该校正则能对每个微型芯片正确且高效率地测定反应前后荧光强度变化的部分。
然后CPU90把校正后的荧光强度显示在显示部84,或保存在非易失性存储器94中(步骤S7)。之后则结束流程。
如上所述根据本实施例,由于管理并进行控制从反应前的检测时刻到反应开始时刻即加热开始时刻的时间(规定时间T1),所以只要把规定时间T1设定成在反应临近开始之前进行反应前检测的时刻,就能正确测定由反应引起的荧光强度变化的部分。
在本实施例中,对于反应前的测定,是在由加热器23加热前进行荧光强度的测定,但根据试剂的不同,即使开始加热但反应暂时没被进行的情况下也有可能。这时也可以在加热同时或加热后而反应进行前来进行荧光强度的测定。当设定成加热后而反应进行前来进行荧光强度的测时刻,则例如能消除由被检测部125、126的加热而引起的液体对流等对荧光强度和检测所给予的影响。这时,只要把图5的步骤S1与步骤S3调换便可。
在由温度而使荧光强度变化大的情况下,只要控制成从开始加热到经过了规定时间T1后进行反应前的检测便可。这时的图5中只要在步骤S1驱动所述的微型泵5,在经过了送液完成的规定时间T1后(步骤S2)来测定反应前的荧光强度(步骤S3)便可。
本实施例对利用加热使反应开始的情况进行了说明,但仅通过混合而使反应进行的情况也能适用本发明的控制。这时,反应开始是通过目标物质或/和试剂的送液来进行,由于把反应前荧光强度的检测时刻与由于所述送液而目标物质与试剂的混合完成的混合完成时刻相对应,所以即使是没有温度依赖性的反应,也能对每个微型芯片正确且高效率地测定反应前后荧光强度变化的部分。这时,最好把DNA探针从检测试剂收容部124向被检测部125、126送液完成之后来进行反应前的荧光强度测定。由于被检测部125、126所收容的反应前与反应后的液量相同,所以能更正确地进行荧光强度的测定。送液完成的判断,可以根据微型泵5的送液量来预测而进行,也可以另外设置检测被检测部125、126液量的液面传感器等的传感器。这时,微型泵5相当于是本发明的反应开始机构和送液机构。
如本实施例这样由容易产生微弱荧光的循环探测法进行的目标基因DNA配列检测反应系统中能适用本发明的控制,在正确测定反应前后荧光强度变化的部分方面具有大的意义。且根据循环探测法所进行的反应由于是急速进行反应,所以考虑反应而预先决定测定时刻,在进行正确测定反应前后荧光强度变化的部分方面是重要的。
如上所述根据本发明,由于把反应前的检测时刻设定成与反应开始时刻相对应,所以能正确测定反应前后荧光强度变化的部分,能进行高精度的检测。
本申请是根据2007年1月26日向日本专利局申请的专利申请号2007-016153而作出的,且该申请的所有内容通过引用而被编入于此说明书中。
Claims (11)
1、一种微型芯片检查系统,其特征在于,包括:
a、微型芯片,其至少含有目标物质和与所述目标物质特异结合而进行荧光标识的试剂,并使所述目标物质与所述试剂进行反应而在被检测部检测荧光强度;
b、微型芯片收容部,其能收容所述微型芯片;
c、光检测部,其与所述微型芯片收容部所收容的微型芯片被检测部对应设置,且具有向所述被检测部照射激励光的发光部和接受来自所述被检测部荧光的受光部;
d、反应开始机构,其使所述反应开始;
e、控制部,其控制所述反应开始机构的反应开始时刻以及所述光检测部在反应前和反应后荧光强度的检测时刻,
所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的所述反应开始时刻相对应。
2、如权利要求1所述的微型芯片检查系统,其特征在于,所述反应开始机构是对所述微型芯片收容部收容的微型芯片进行加热的加热机构,所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述加热机构的加热开始时刻相对应。
3、如权利要求2所述的微型芯片检查系统,其特征在于,在从所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻开始的规定时间后,所述控制部使所述加热机构的加热开始。
4、如权利要求2所述的微型芯片检查系统,其特征在于,与所述加热机构的加热开始时刻同时地,或在从该加热开始时刻开始的规定时间后,所述控制部来进行所述光检测部的反应前荧光强度的检测。
5、如权利要求1所述的微型芯片检查系统,其特征在于,所述反应开始机构是把所述微型芯片内的所述目标物质或所述试剂进行送液的送液机构,所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述送液机构的使所述目标物质与所述试剂的混合完成的混合完成时刻相对应。
6、如权利要求5所述的微型芯片检查系统,其特征在于,与所述目标物质和所述试剂的混合完成的混合完成时刻同时地,或在从该混合完成时刻开始的规定时间后,所述控制部来进行所述光检测部的反应前荧光强度的检测。
7、如权利要求5或6所述的微型芯片检查系统,其特征在于,所述混合完成时刻是所述送液机构把所述目标物质或所述试剂向所述被检测部进行送液完成的时刻。
8、如权利要求1~7中任一项所述的微型芯片检查系统,其特征在于,所述控制部根据所述光检测部的反应前荧光强度检测值来校正所述光检测部的反应后荧光强度的检测值。
9、如权利要求1~8中任一项所述的微型芯片检查系统,其特征在于,所述目标物质是目标基因,与所述目标物质进行特异结合的被荧光标识的试剂是荧光标识的DNA探针,所述反应是通过所述目标基因与所述DNA探针的杂交而使荧光共振能迁移现象产生变化的反应。
10、一种微型芯片检查装置,其特征在于,包括:
a、微型芯片收容部,其能收容这样的微型芯片:该微型芯片至少含有目标物质和与被荧光标识的所述目标物质特异结合的试剂,并使所述目标物质与所述试剂进行反应而在被检测部检测荧光强度;
b、光检测部,其与所述微型芯片收容部所收容的微型芯片的被检测部对应设置,且具有向所述被检测部照射激励光的发光部和接受来自所述被检测部荧光的受光部;
c、反应开始机构,其使所述反应开始;
d、控制部,其控制所述反应开始机构的反应开始时刻以及所述光检测部在反应前和反应后荧光强度的检测时刻,
所述控制部使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的所述反应开始时刻相对应。
11、一种存储程序的存储媒体,所述程序使以下的步骤在计算机中运行,其特征在于,该步骤包括:
a、至少把目标物质和与被荧光标识的所述目标物质进行特异结合的试剂收容在被微型芯片收容部收容的微型芯片被检测部中的步骤;
b、通过反应开始机构使所述目标物质与所述试剂开始反应的步骤;
c、光检测部进行反应前荧光强度检测的步骤;
d、光检测部进行反应后荧光强度检测的步骤,
使所述光检测部的反应前荧光强度的检测时刻与所述反应开始机构的反应开始时刻相对应。
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Cited By (1)
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---|---|---|---|---|
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Families Citing this family (5)
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JP3871846B2 (ja) | 2000-03-10 | 2007-01-24 | 日立ソフトウエアエンジニアリング株式会社 | ハイブリダイゼーション反応検出方法及び検出装置 |
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DE10315074A1 (de) * | 2003-04-02 | 2004-10-14 | Clondiag Chip Technologies Gmbh | Vorrichtung zur Vervielfältigung und zum Nachweis von Nukleinsäuren |
JP2005237378A (ja) * | 2004-01-29 | 2005-09-08 | Canon Inc | ハイブリダイゼーション装置および方法 |
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JP4475525B2 (ja) * | 2005-02-10 | 2010-06-09 | 国立大学法人京都工芸繊維大学 | 偏光解消法による生体高分子のスクリーニング方法 |
WO2006106643A1 (ja) * | 2005-04-01 | 2006-10-12 | Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. | マイクロ総合分析システム、検査用チップ、及び検査方法 |
JP2006292472A (ja) * | 2005-04-07 | 2006-10-26 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | マイクロ総合分析システム |
JP2007016153A (ja) | 2005-07-08 | 2007-01-25 | Konoshima Chemical Co Ltd | 高い耐熱性を有する水酸化マグネシウム系難燃剤、難燃性樹脂組成物および成型体 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112138735A (zh) * | 2020-09-12 | 2020-12-29 | 深圳市和来生物技术有限公司 | 微流控芯片的加热、温度检测与光学检测装置和方法 |
Also Published As
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