CN101254200B - 青钱柳苷类化合物在制备治疗糖尿病药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种青钱柳苷化合物或其药学上可接受的盐，或者含该类化合物的植物提取物的用途，它可被用于制备治疗或预防糖尿病的组合物。

Description

青钱柳苷类化合物在制备治疗糖尿病药物中的用途

技术领域

本发明涉及植物提取物，尤其涉及一种从胡桃科植物青钱柳中提取的青钱柳苷化合物，或者含有该化合物的药物组合物在制备治疗糖尿病药物中的应用。

背景技术

近年来，随着人民生活水平的提高，糖尿病日渐成为人类健康的一大隐患，目前研究表明，其病因和发病机理仍不十分清楚。由于胰岛素的分泌绝对或相对不足、靶细胞胰岛素受体缺陷，从而引起血液中葡萄糖浓度增高，临床主要表现为烦渴、多饮、多尿、多食。

糖尿病主要分为以下两型：(1)胰岛素依赖型糖尿病(I型，IDDM)，约占糖尿病发病率的10％，好发于30岁以下的儿童、青少年，此类病人的血清中常可检出抗胰岛细胞抗体(ILA)。其发病机理为，由于环境或遗传因素所致，胰岛β细胞受到破坏或免疫损伤，例如病毒感染，人类第6号染色体短臂上HLA-DR3、HLA-DR4的基因检测呈阳性或HLA-DR5的基因检测呈阴性。(2)非胰岛素依赖型糖尿病(II型，NIDDM)，约占糖尿病发病率的90％，中年后发病，起病缓慢、隐匿，血液中胰岛素含量偏低、正常或偏高，而胰腺内胰岛β细胞可正常。其发病机理为，由于遗传、肥胖、缺乏运动、高脂饮食等因素所致，造成胰岛素的相对缺乏，即机体组织细胞对胰岛素敏感性降低。

糖尿病的治疗目的为降低血糖，消除症状，预防、延缓各种急、慢性并发症的发生，提高患者生活质量。其治疗方案和原则为：(1)饮食治疗：饮食控制的目的为维持标准体重，矫正代谢紊乱和减轻胰岛β细胞的负担；(2)运动治疗：运动治疗有利于控制体重，增加胰岛素的敏感性和控制血糖；(3)药物治疗：胰岛素是I型糖尿病患者维持生命和控制血糖所必需的药物。II型糖尿病患者虽然不需要胰岛素来维持生命，但多数患者在糖尿病的晚期却需要使用胰岛素来控制血糖的水平以降低急、慢性并发症的发生率。以往，人们担心在II型糖尿病患者中使用胰岛素会加重动脉粥样硬化，但在UKPDS研究中，使用胰岛素或促胰岛素分泌剂治疗的患者组与其他药物治疗组和主要以饮食控制的对照组相比，大血管病变的发病率并没有增加。因此，胰岛素目前仍被当作帮助II型糖尿病患者达到良好血糖控制的重要手段。有些患者因较严重的胰岛素抵抗需要使用较大量的胰岛素(如每日1U/kg体重)，为避免体重明显增加和加强血糖的控制，可加用二甲双胍、格列酮类或α-糖苷酶抑制剂。

由于糖尿病严重威胁着人类的健康，其治疗也成为人们关注的焦点，传统的药物治疗由于缺乏特异性，取得疗效的同时往往给患者带来较大的副作用。因此，寻找靶向性的小分子药物已日渐成为新药研究领域的一个重点，而从天然植物中筛选具有崭新分子结构的新化合物或者已知天然化合物的新用途，成为新药开发的主要途径之一。

青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja)系双子叶植物纲胡桃科植物，广泛分布于江西、广西、四川、福建、贵州等十三个省区，是我国特有的速生树种。《中国中药资源志要》记载，其树皮具有清热消肿、止痛等功效，可用于治疗顽廯。民间长期以来，取其叶制作饮料，因其味甜，有清热解暑、降血压、降血糖等功能，故又称甜茶、神茶。

青钱柳中含有多种化学成分，从青钱柳树叶中分离出的化合物有肌醇、山俞酸、青钱柳酸A、青钱柳酸B、2α-乌苏酸、咖啡因、β-谷甾醇、胡萝卜苷、β-L-吡喃阿拉伯糖、硬脂酸、棕榈酸、青钱柳苷I、II、III、山萘酚、槲皮素、异槲皮苷、逆没食子酸。此外，从青钱柳根分离的化合物有儿茶素、南酸枣苷和乔松素-7-0-吡喃葡萄糖苷。

1995年，舒任庚等从青钱柳叶中分离出20个单体化合物，鉴定并推断出15个化合物的结构。其中，5个为自然界新发现的化合物：青钱柳甙I(cyclocarioside I)、青钱柳甙II(cyclocarioside II)、青钱柳甙III(cyclocarioside III)、青钱柳酸I(cyclocaric acid I)和青钱柳酸II(cyclocaric acid II)。

现代药理学研究表明，青钱柳的生物活性可归纳为以下几方面：

①降血糖。易醒等通过给小鼠注射四氧嘧啶来选择性破坏胰岛β细胞，造成小鼠实验性糖尿病模型，再灌注青钱柳提取物，结果显示青钱柳提取物对实验性小鼠具有显著的降血糖作用，并且推测其降血糖的主要活性物质有多糖类、甾体类化合物及内酯成分(青钱柳对四氧嘧啶糖尿病小鼠降血糖作用的研究。易醒，谢明勇，温辉梁，等。天然产物研究与开发，2001，13(3)：52-54，57)。有研究者认为，青钱柳的降血糖作用可能是通过恢复病变胰岛细胞的结构和功能、降低血糖、增加糖耐量来实现的(梅山降糖神茶对四氧嘧啶糖尿病大鼠的降糖作用。何明，等。中国药学杂志，1996，31：723-725)。Kurihara等人研究发现，青钱柳提取物能抑制α-葡萄糖苷酶活性，从而降低葡萄糖的吸收利用度(Hypoglycemic action of Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja innormal and diabetic mice.Kurihara H，Fukami H，Kusumoto A，et al.BiosciBiotechnol Biochem，2003，67(4)：877-880)。

②降血压、血脂。血清胆固醇的升高是形成动脉粥样硬化的一个主要因素。易醒等证实青钱柳提取物能抑制大鼠血清胆固醇的升高，因此其对防治心脑血管疾病有重要意义(青钱柳对胆固醇调节作用的初步研究。易醒，谢明勇。中国商办工业，2000，4：51)。Kurihara等研究表明，青钱柳提取物可通过抑制消化脂肪酶活性来降低血脂水平，从而发挥其治疗和预防高血脂病的功能(Hypolipemic effect of Cyclocarya paliurus(Batal)Iljinskaja inlipid-loaded mice.Kurihara H，Asami S，Shibata H，et al.Biol PharmBull，2003，26(3)：383-385)。黄敬耀等报道了青钱柳嫩叶的水提物和醇提物对家兔有显著的降压作用，而对心率和心电图却无明显影响；还能明显抑制小鼠胃肠道蠕动和显著延长小鼠常压缺氧的存活时间(摇钱树叶的药理研究。黄敬耀，楼兰英，徐彭。中药通报，1986，11(11)：63)。

③调节免疫。北京神农医药开发研究所将青钱柳叶配制的梅山神茶煮沸浓缩，取低剂量对小鼠体液免疫和细胞免疫进行实验，结果表明浓缩液具有增加抗体数、增强动物体液免疫和细胞免疫、增强单核巨噬细胞的吞噬能力等功能，并且对人体无毒副作用；另有实验表明青钱柳叶煎剂对大鼠无致畸胎毒性。黄贝贝等研究发现，青钱柳提取物通过提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和促进脾淋巴细胞的自发反应，从而发挥其对小鼠免疫系统正向调节的功能(青钱柳对小鼠免疫功能的影响。黄贝贝，肖凤仪，张文平，等。江西中医学院学报，2004，16(5)：59-60)。

综上所述，作为一种单一成分的化合物，国内外文献均未记载青钱柳苷类化合物在降血糖方面的应用，尤其未见有文献报道其在制备治疗或预防糖尿病药物方面的用途。

发明内容

本发明旨在提供青钱柳苷类化合物作为单一化合物在防治糖尿病中的应用。

在本发明的第一方面，提供了一种青钱柳苷化合物或其药学上可接受的盐，或者含该化合物的植物提取物的用途，它可被用于制备治疗或预防糖尿病的组合物。

在另一优选例中，所述的组合物能降低血糖，和/或提高机体的葡萄糖耐受能力。

在另一优选例中，所述的青钱柳苷化合物选自下组：青钱柳苷I、青钱柳苷II、青钱柳苷III，或其药学上可接受的盐。

在另一优选例中，所述的青钱柳苷化合物的化学结构式分别如下：

青钱柳苷I

青钱柳苷II

青钱柳苷III。

在另一优选例中，所述的糖尿病选自下组：胰岛素依赖型糖尿病、非胰岛素依赖型糖尿病。

在另一优选例中，所述的药学上可接受的盐是青钱柳苷化合物与碱或碱土金属所形成的盐。

在另一优选例中，所述的碱或碱土金属选自下组：

碱如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁、碳酸氢钠、氯化铵、或氨水等；

碱土金属如钠、钾、钙、铝、铜、锌、或镁等。

在另一优选例中，所述的青钱柳苷化合物或所述的提取物是从胡桃科植物中提取得到的。

在另一优选例中，所述的胡桃科植物为青钱柳。尤其是叶的部位。

在本发明的第二方面，提供了一种组合物，它含有(a)有效量的作为活性成分的青钱柳苷化合物或其药学上可接受的盐，或者含有该化合物的植物提取物，和(b)药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述的青钱柳苷化合物选自下组：青钱柳苷I、青钱柳苷II、青钱柳苷III，或其药学上可接受的盐。

在另一优选例中，所述的组合物还含有：

(c)选自下组的一种或多种辅助活性成分：

磺酰脲类药物如甲磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、格列奇特、格列喹酮、格列美脲；

双胍类药物如二甲双胍、苯乙双胍；

α-糖苷酶抑制剂如阿卡波糖、伏格列波糖；

噻唑烷二酮类药物如盐酸毗格列酮、马来酸罗格列酮；

格列奈类药物如瑞格列奈、那格列奈。

在另一优选例中，所述组合物中的药学上可接受的盐是青钱柳苷化合物与碱或碱土金属所形成的盐。

在另一优选例中，碱或碱土金选自下组：

碱如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁、碳酸氢钠、氯化铵、氨水等；

碱土金属如钠、钾、钙、铝、铜、锌、镁等。

在另一优选例中，所述的组合物是药物组合物、食品组合物或饮食补充剂。

在另一优选例中，所述的组合物选自片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、口服液、醑剂、酊剂、气雾剂、粉雾剂、注射剂、注射用无菌粉末、栓剂。

在另一优选例中，所述的青钱柳苷化合物或所述的提取物是从胡桃科植物中提取得到的。

在另一优选例中，所述的胡桃科植物为青钱柳，尤其是叶的部位。

本发明的第三方面，提供了一种治疗糖尿病的方法，所述的方法包括步骤：给患者施用有效剂量的青钱柳苷化合物或其药学上可接受的盐，或者含有该化合物的植物提取物。

在另一优选例中，所述的青钱柳苷化合物选自下组：青钱柳苷I、青钱柳苷II、青钱柳苷III，或其药学上可接受的盐。

据此，本发明提供了青钱柳苷化合物在降血糖方面的应用，尤其是其在制备治疗或预防糖尿病药物方面的用途。

附图说明

图1显示了青钱柳苷化合物对糖尿病小鼠体重的影响。

图2显示了青钱柳苷化合物对糖尿病小鼠饮水量的影响。

图3显示了青钱柳苷化合物对糖尿病小鼠进食量的影响。

图4显示了青钱柳苷化合物对正常小鼠基础血糖的影响。

图5显示了青钱柳苷化合物对糖尿病小鼠血糖的影响。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，意外地发现青钱柳苷化合物具有防治糖尿病的作用，具体地这些化合物可以改善糖尿病症状、降低血糖、或增强机体的糖耐受能力。

如本文所用，“青钱柳苷化合物”和“青钱柳苷类化合物”都是指从胡桃科植物中提取得到的物质，所述的胡桃科植物为青钱柳，优选是叶的部位提取得到的。它们选自下组：青钱柳苷I、青钱柳苷II、青钱柳苷III。

化合物

本发明的组合物是青钱柳苷化合物或其药学上可接受的盐。其中青钱柳苷化合物优选如下三种化合物：

青钱柳苷I

青钱柳苷II

青钱柳苷III

青钱柳苷化合物可由植物中提取或化学合成、半合成、生物转化的方式获得，例如从胡桃科植物青钱柳中提取，尤其是叶的部位。

本发明的化合物可以以药学或生理学上可接受的盐的形式使用。这些盐包括(但不限于)与如下碱或碱土金属所形成的盐：碱如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁、碳酸氢钠、氯化铵、氨水等，优选氢氧化钠，氢氧化钾；碱土金属如钠、钾、钙、铝、铜、锌、镁等，优选钠，钾。

含有青钱柳苷化合物的植物提取物也可用于本发明。一种优选的提取方法如上所述。通常，在提取物中式I化合物的纯度按重量计应在40％-99.9％，更佳地为50％-98％。

用途

本发明的青钱柳苷化合物可用于治疗糖尿病，代表性的例子包括(但并不限于)：胰岛素依赖型糖尿病、非胰岛素依赖型糖尿病。

所用的活性成分的有效剂量可随给药模式和待治疗疾病的严重程度而变化。然而，通常当本发明的化合物每天以约0.5-500mg/kg动物体重的剂量给予时，能得到令人满意的效果，较佳地每天以2-4次分开的剂量给予，或以缓释形式给药。对大部分大型哺乳动物而言，每天的总剂量约为1-100mg。适用于内服的剂量形式，包含与固态或液态药学上可接受的载体混合的约0.5-500mg的活性化合物。可调节此治疗方案以达到最佳治疗效果。例如，可根据治疗状况的需要，每天若干次分开给药，或将剂量按比例减少。通常，成人口服临床剂量的范围为1-1000mg/日，优选为10-200mg/日，成人非口服的剂量为0.1-100mg/日，优选1-100mg/日。

在使用本发明化合物治疗糖尿病时，还可与其他治疗剂联用。例如与选自下组的一种或多种辅助活性成分联用：

磺酰脲类药物：甲磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、格列奇特、格列喹酮、格列美脲

双胍类药物：二甲双胍、苯乙双胍；

α-糖苷酶抑制剂：阿卡波糖、伏格列波糖；

噻唑烷二酮类药物：盐酸毗格列酮、马来酸罗格列酮；

格列奈类药物：瑞格列奈、那格列奈。

本发明还包括药物组合物、食品组合物、饮食补充剂以及防治糖尿病的方法，它包括给哺乳动物施用药物有效量的本发明化合物。

通常，当本发明化合物用于上述用途时，它们可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合制成不同给药途径的药物剂型，如片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、口服液、醑剂、酊剂、气雾剂、粉雾剂、注射剂、注射用无菌粉末、栓剂等。

本发明的化合物可经过口服、静脉内、肌内或皮下途径给药。

上述剂型中可经口服给药的剂型为：片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、醑剂。固态载体包括：淀粉、乳糖、磷酸氢钙、微晶纤维素、蔗糖、白陶土、微粉硅胶、滑石粉、低取代羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、聚乙烯吡咯烷酮。而液态载体包括：无菌水、乙醇、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)。在制备药物组合物的过程中通常使用的佐剂包括：调味剂、着色剂、防腐剂(如羟苯烷基丁酯、苯甲酸钠、山梨酸)和抗氧化剂(如维生素E、维生素C、焦亚硫酸钠和二丁基羟基甲苯)。

上述剂型中可用于注射途径给药的剂型包括：注射剂、注射用无菌粉末，它们是将药物与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合制成以供注射给药的形式。溶剂包括：无菌水、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇。此外，还需加入抑菌剂(如苯甲醇、羟苯丁酯、硫柳汞)、等渗调节剂(如氯化钠、葡萄糖)、助悬剂(如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素)、增溶剂(吐温-80、卵磷酯)、抗氧化剂(如维生素E、维生素C、焦亚硫酸钠)和填充剂(如乳糖、甘露醇)。

从易于制备和给药的立场看，优选的药物组合物是固态组合物，尤其是片剂和固体填充或液体填充的胶囊。优选口服给药。

本发明的优点在于：

1.青钱柳苷化合物具有明显的治疗和预防糖尿病的功效。

2.本发明化合物可将其单独或与其他药物共同作为活性成分制成治疗和预防糖尿病的药品。

3.所述的青钱柳苷化合物是从天然植物中提取的。

以下结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分比和份数按重量计。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1

青钱柳中提取青钱柳苷化合物

青钱柳嫩叶干碎片5000g，用70％EtOH回流提取，回收溶剂，所得浸膏用水分散，分别依次用石油醚，氯仿，正丁醇萃取。正丁醇萃取部分得浸膏160g，浸膏再以正丁醇饱和的水液进行多次洗涤，弃去水液，所得浸膏减压干燥，即得青钱柳苷的有效部位。经紫外分光光度法检测此浸膏中青钱柳苷的含量为78％以上。

通过上述方法提取得到的青钱柳苷化合物，用于以下实施例2中。

实施例2

青钱柳苷化合物对四氧嘧啶诱发小鼠I型糖尿病的影响

四氧嘧啶是一种胰岛β细胞毒剂，可选择性的损伤多种动物的胰岛β细胞，引起实验性糖尿病。注射四氧嘧啶后，动物血糖水平一般会出现三个时期：①早期短暂的高血糖期(约1～4h)，此期可能与应激反应相关；②由于其破坏β细胞作用和胰岛素释放所致的低血糖期，可持续48h左右，有可能致动物死亡；③48h后，由于β细胞损伤导致持久的高血糖，形成四氧嘧啶糖尿病。

实验动物：雄性SPF级KM小鼠，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供(许可证号：SCXK(沪)2003-0003；质量合格证编号：0022643)，体重为13-15g，SPF级动物房饲养，12h光照/12h黑暗，自由摄取饲料和水。

实验方法：

1.造模方法：小鼠尾静脉注射剂量为60mg/kg的四氧嘧啶，72h后测空腹血糖和体重，血糖值大于11.0mmol/L认为造模成功。

2.给药情况：将小鼠按体重随机分为3组(每组10只)：(1)模型组；(2)药物组，造模前6天开始灌胃给药，青钱柳苷化合物的剂量为100mg/kg，确定造模成功后，继续给药观察24天；(3)二甲双胍组，给药方式和步骤同(2)组，二甲双胍的剂量为100mg/kg。

3.观察指标：

①体重；

②24h进食量和饮水量(9：30am给小鼠加入定量的水和食物，第二天9：30am称量剩余水的体积和食物的重量。进食量以g/24h表示，饮水量以ml/24h表示)；

③血糖。

实验结果：

1.造模后，各组小鼠体重均有所下降，随着给药时间的延长，青钱柳苷能抑制糖尿病小鼠体重的降低；

2.从各组小鼠的饮水量和进食量可以看出，二甲双胍能显著降低糖尿病小鼠的饮水量和进食量，而青钱柳苷亦具有减少糖尿病小鼠饮水量和进食量的趋势，与模型组相比，存在显著性差异。说明青钱柳苷能显著改善糖尿病小鼠的症状；

3.由血糖结果可以看出，给药6天后，青钱柳苷不影响正常小鼠的基础血糖；于造模后72h测定血糖发现，青钱柳苷能显著降低糖尿病小鼠的血糖。提示青钱柳苷对小鼠胰岛β细胞具有保护作用，能有效预防四氧嘧啶诱导的血糖升高；随着给药时间的延长，青钱柳苷表现出持久的降血糖作用。

结果表明，在四氧嘧啶诱发的I型糖尿病小鼠模型中，青钱柳苷能显著改善糖尿病小鼠的症状和抑制血糖的升高，并且早期用药对小鼠胰岛β细胞还具有预防性的保护作用。提示青钱柳苷能有效预防和治疗糖尿病。

实施例3

青钱柳苷I对实验性糖尿病小鼠葡萄糖耐量的影响

青钱柳苷I：自制，制备方法如下：

青钱柳嫩叶干碎片5000g，用95％EtOH回流提取，回收溶剂，所得浸膏用水分散，分别依次用石油醚，氯仿，正丁醇萃取。正丁醇萃取部分得浸膏15g，进行硅胶柱层析，以氯仿和氯仿-甲醇为洗脱剂梯度洗脱，每份500ml，TLC检查，合并相同流份，第52-63份合并[CHCl₃-MeOH(83：17)]浓缩后用MeOH重结晶得化合物830mg。第64-82份[CHCl₃-MeOH(3：1)]合并后再经两次低压柱层析，CHCl₃-MeOH-H₂O(75：15：4)洗脱，反复精制得化合物II280mg和III78mg。经TLC和HPLC检测(纯度90％以上)，为一个单体化合物，其分子式、IR(KBr)cm^-1、¹H-NMR和¹³C-NMR数据如下：

分子式：C₄₁H₇₀O₁₂

IR(KBr)cm^-1：3409，1067(缔合多羟基)，2968，2877(C-H)，1384(区域A)，1319(区域B)(四环三萜母核)。

¹H-NMR(400MHz，δppm，CD₃OD)：5.02(1H，d，J＝7.8Hz)，3.93(1H，t，J＝7.8Hz)，4.15(1H，t，J＝8.9Hz)，3.68(1H，t，J＝8.9Hz)，3.81(1H，m)，1.59(3H，d，J＝6.0Hz)

¹³C-NMR(100MHz，δppm，CD₃OD)：35.7(CH₂)，26.7(CH₂)，79.3(CH)，38.0(C)，51.0(CH)，18.4(CH₂)，36.4(CH₂)，41.6(C)，54.1(CH)，40.0(C)，34.5(CH₂)，76.8(CH)，41.2(CH)，50.2(C)，31.6(CH₂)，21.3(CH₂)，49.3(CH)，17.0(CH₃)，16.7(CH₃)，86.4(C)，24.5(CH₃)，34.2(CH₂)，26.3(CH₂)，64.2(CH)，71.2(C)，26.1(CH₃)，27.6(CH₃)，23.0(CH₃)，30.0(CH₃)，16.8(CH₃)

结构式：

青钱柳苷I

实验动物：雄性SPF级KM小鼠，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供(许可证号：SCXK(沪)2003-0003；质量合格证编号：0022643)，体重为13-15g，SPF级动物房饲养，12h光照/12h黑暗，自由摄取饲料和水。

实验方法：

1.造模方法：小鼠尾静脉注射剂量为60mg/kg的四氧嘧啶，72h后测空腹血糖，血糖值大于11.0mmol/L认为造模成功。

2.给药情况：将小鼠按体重随机分为3组(每组10只)：(1)模型组，(2)给药组，造模前6天开始灌胃给药，青钱柳苷I的剂量为100mg/kg，确定造模成功后，继续给药观察24天，尾静脉注射葡萄糖溶液的剂量为20g/kg；(3)二甲双胍组，给药方式和步骤同(2)组，二甲双胍的剂量为100mg/kg。

3.观察指标：采集末次空腹血，测定血糖值作为0min时血糖值；各组再分别尾静脉注射剂量为20g/kg的葡萄糖溶液；给葡萄糖30min、60min、120min后眶静脉取血，分别测定血糖值。

实验结果：

表1青钱柳苷I对实验性糖尿病小鼠葡萄糖耐量的影响

^*表示p<0.01，与对照组相比，具有显著性差异。

结果表明，注射葡萄溶液后，给药组小鼠的血糖值明显低于模型组，且具有显著性差异(p<0.01)。提示青钱柳苷I可增强四氧嘧啶糖尿病小鼠的葡萄糖耐受能力，并推测青钱柳降血糖作用可能与恢复受损胰岛结构、功能以及影响糖代谢过程相关。

实施例4

制备片剂

利用常规技术，混合以下组分，然后直接压片，制备片剂形式的药物组合物，其配方如下：

成分	处方量(g/1000片)
		实施例1制得的青钱柳苷	100
乳糖	50
		微晶纤维素	40
玉米淀粉	6
		羧甲基淀粉钠	3
硬脂酸镁	1
		总量	200

实施例5

制备注射剂

成分	处方量(g/1000ml)
		实施例3中自制的青钱柳苷I	10
亚硫酸氢钠	0.2
		羧甲基纤维素钠	5
吐温-80	1.5
		注射用水	加至1000ml

①将亚硫酸氢钠加于500ml注射用水中，加入羧甲基纤维素钠，混匀，浸泡过夜(24小时)，全溶后，用210目尼龙布过滤；

②将溶液①水浴加热，加入吐温-80，混匀；

③至水浴沸腾，加入青钱柳苷I，混匀，继续加热30分钟，取出冷却至室温，G3垂熔玻璃漏斗过滤；

④加注射用水至1000ml，混匀，灌封，用100℃30分钟灭菌。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (4)

1.一种青钱柳苷化合物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，被用于制备治疗或预防糖尿病的组合物；

所述的青钱柳苷化合物是青钱柳苷I。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的组合物能降低血糖，和/或提高机体的葡萄糖耐受能力。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药学上可接受的盐是青钱柳苷化合物与碱或碱土金属所形成的盐。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的青钱柳苷化合物是从胡桃科植物中提取得到的。

Images