CN101234099A - 用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物和抑制小鸡沙门氏菌感染的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，所述组合物包含作为活性成分的葡萄糖酸或其盐或其衍生物，提供了一种用于小鸡的抑制沙门氏菌感染的饲料组合物，所述饲料组合物包含用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，提供了一种抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，所述方法包括对小鸡施与有效量沙门氏菌感染抑制组合物或用于小鸡的抑制沙门氏菌感染的饲料组合物的步骤，还提供了葡萄糖酸或其盐或其衍生物在制备抑制小鸡沙门氏菌感染的组合物中的用途。

Description

用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物和抑制小鸡沙门氏菌感染的方法

技术领域

本发明涉及用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物以及抑制小鸡沙门氏菌感染的方法。

背景技术

大规模食物中毒的频繁爆发成为一个社会问题。根据以病源生物体为基础的食物中毒的统计数据，沙门氏菌食物中毒在发生频率和患者数量上占据较高级别。食物中毒频繁爆发的主要原因之一是被肠炎沙门氏菌(下文有时称为沙门氏菌)感染的鸡蛋。

在被沙门氏菌感染的产蛋鸡体内，沙门氏菌被散布于卵巢和输卵管中并且随之侵入鸡蛋。从而，当母鸡产蛋时，蛋的内部已经被沙门氏菌污染(蛋内污染)。已被蛋内污染的鸡蛋无法从外观上与未污染的鸡蛋区分开。而且，鸡蛋的内部污染不能在GP中心(分级包装中心，即清洗、根据大小筛选、并包装鸡蛋的厂家)的净化步骤中被清除。

当一群鸡被沙门氏菌感染时，产出沙门氏菌污染鸡蛋的比率是0.01％至1％。然而，如果沙门氏菌污染的鸡蛋被用于烹饪并且未充分烹制从而使沙门氏菌存活且烹制过的鸡蛋被置于不足的温度下，则沙门氏菌的主动繁殖重新开始，导致沙门氏菌增长至足以引起食物中毒的细菌数量并且随后在某些情况下能引起食物中毒。尤其是，对于抵抗力低的婴儿和老人以及患者，食物中毒通过较健康成人而言更小量的细菌即可引起。起因于沙门氏菌的食物中毒发生在家庭中，但是在食品行业的企业，以及针对学校、医院、部队等的供食机构中大规模食物中毒的爆发会导致非常严重的社会问题。

为了保证鸡蛋的卫生品质和减少沙门氏菌食物中毒，在鸡蛋的生产以及从农场到餐桌的配送过程中，每一步都需要策略。考虑到沙门氏菌，最重要的一点是鸡在农场被保持在无沙门氏菌的条件下或者是降低在农场里鸡感染沙门氏菌的比率。

已知鸡对沙门氏菌具有极高的敏感度，尤其当其处于幼年时期时，并且，事实上，当小鸡被少量的沙门氏菌感染后，该小鸡排放大量的细菌。在近年来的家禽饲养中，小鸡在孵卵所中产出并且不与母鸡接触，此外，在每一步都进行全面消毒，旨在防止源于产蛋鸡的疾病传播。因此，小鸡不能从母鸡那里遗传得到抵御肠道病原体感染所必需的有益肠菌群。这是导致前述现象的最大原因。据说当鸡被正常饲养于旷野的情况下，抵御沙门氏菌感染所必需的肠菌群的建立需要6周或更长的时间。

在家畜中，只有家禽包括鸡是在如上所述不与其亲代接触的条件下被孵出并饲养。因此认为当肠菌群不成熟的幼鸡被沙门氏菌感染时，一群小鸡内部的整体感染发生并且随之影响鸡群的沙门氏菌感染比率。

由于这个原因，发现了抑制沙门氏菌感染的方法，该方法包括将成年鸡的肠菌群移植给小鸡从而即使小鸡经口感染了沙门氏菌，小鸡体内沙门氏菌的增殖也能被抑制并且该领域中常见的大量细菌的排放能被阻止(例如，见JP-A11-302185)。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，所述组合物在小鸡达到性成熟而成为成年鸡之前(尤其是，在小鸡孵出后尽可能早地)被施与，由此可发挥显著效果，以及一种采用所述组合物抑制小鸡沙门氏菌感染的方法。

在这种情况下，本发明的发明人进行了深入研究，结果完成了本发明。

本发明提供：

1.用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，其包含葡萄糖酸或其盐或其衍生物作为有效成分(下文有时称作本发明的感染抑制组合物)；

2.上述第1项的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，其中葡萄糖酸或其盐或其衍生物选自葡萄糖酸钠、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸-δ-内酯和葡萄糖酸-γ-内酯；

3.上述第1项的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，其中葡萄糖酸或其盐或其衍生物是葡萄糖酸钠；

4.用于小鸡的抑制沙门氏菌感染的饲料组合物，其包含上述第1项的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物(下文有时称作本发明的饲料组合物)；

5.抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，其包括对小鸡施与有效量的上述第1项的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物或上述第4项的用于小鸡的抑制沙门氏菌感染的饲料组合物的步骤(下文有时称作本发明的感染抑制方法)；

6.上述第5项的抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，其中小鸡是孵出后0至5周大；

7.葡萄糖酸或其盐或其衍生物在制备抑制小鸡沙门氏菌感染的组合物中的用途(下文有时称作本发明的用途)；等

根据本发明，能提供用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，所述组合物在小鸡孵出后尽可能早地被施与并由此发挥显著效果，以及一种采用所述组合物抑制小鸡沙门氏菌感染的方法。

具体实施方式

下文详细说明本发明。

在饲养鸡时，通常，从蛋孵出的小鸡(通常称为“新生鸡(newborn chicks)”)被饲养至其成为成年鸡。对于产蛋鸡，特别地，从孵出后第一次喂食起到5周大的小鸡被称为“幼鸡(infant chicks)”，并且被饲养于温控的小鸡育雏器(chickbrooder)中，因为幼鸡自己不能调节体温。然后，小鸡经过“中间阶段”(6至10周大)和“最终阶段”(11至17周大)达到性成熟而成为“成年鸡”。从中间阶段至最终阶段，小鸡通常被饲养在一组屋笼里的覆盖有铺展材料的平坦表面上，或者是小鸡饲养场的水泥地面上。然后，到达性成熟的成年鸡被从小鸡饲养场转移至成年鸡场。

本发明适合于到达性成熟并变成成年鸡之前的小鸡(即新生鸡、幼鸡、中间阶段的小鸡、以及最终阶段的小鸡)。在这些小鸡中，优选幼鸡作为本发明的对象。更优选的对象是孵出后0至7天大的小鸡。

本发明的感染抑制组合物包含葡萄糖酸或其盐或其衍生物作为有效成分。

用作本发明的感染抑制组合物的活性成分的“葡萄糖酸或其盐或其衍生物”是指葡萄糖酸，或与葡萄糖酸具有药学等价作用的它的盐或衍生物。葡萄糖酸的盐或衍生物的具体例子包括葡萄糖酸钠、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸的分子内酯(即，内酯化合物)等。优选葡萄糖酸钠。此处所用的“药学等价作用”是指当其用作用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物的活性成分时与葡萄糖酸钠相当的沙门氏菌感染抑制作用。

葡萄糖酸的分子内酯的优选例子包括葡萄糖酸-δ-内酯和葡萄糖酸-γ-内酯。

本发明的感染抑制组合物可以是葡萄糖酸或其盐或其衍生物本身。本发明的感染抑制组合物通常包含葡萄糖酸或其盐或其衍生物以及赋形剂，例如固体载体、液体载体等，并且可以根据常规方法(例如，在Akinobu Otsuka等人编，1995，Nankodo Co.，Ltd出版的Manufacturing Pharmacy中所述的方法等)，在制成片剂、散剂、颗粒剂、胶囊、水溶性制剂、溶液剂、水分散粉末、混悬剂等后使用。

作为赋形剂的固体载体的例子包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、玉米淀粉、明胶、酪蛋白、淀粉、阿拉伯树胶、纤维素衍生物、藻酸等。作为赋形剂的液体载体包括水、甘油、植物油、脂肪酸、脂肪酸酯、山梨醇等。

本发明的感染抑制组合物可含有有机矿物例如肽锌(peptide zinc)、肽铁(peptide iron)等；无机矿物例如碳酸锌、碳酸镁、硫酸铁、碳酸镁等；维生素类例如维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、泛酸、烟酸等；苜蓿粉(alfalfa meal)、压片玉米(flaked corn)等。此外，本发明的感染抑制组合物可含有用于增进口感的香料。

进一步，如果需要，本发明的感染抑制组合物可含有常规添加剂例如抗细菌剂、抗真菌剂、驱虫剂、抗氧化剂、着色材料、调味剂(flavoring agent)、矫味剂(tasting agent)或酶，并优选在采用常规方法制成例如散剂、颗粒剂、溶液剂、片剂等后使用。本发明的感染抑制组合物的这种制剂优选含有按重量计大约0.01～95％的葡萄糖酸或其盐或其衍生物作为有效成分。

如此配制成的本发明的感染抑制组合物被直接使用或用水等稀释后使用。进一步，本发明的感染抑制组合物可与常规添加剂例如抗细菌剂、抗真菌剂、驱虫剂、抗氧化剂、着色材料、调味剂、矫味剂或酶混合、或同时使用、或不同时使用。

对向小鸡施与本发明的感染抑制组合物的方法没有特别的限制。本发明的感染抑制组合物可采用常规方法施与小鸡，例如，将其喷洒或如后文所述将其混合于饲料。本发明的感染抑制组合物的剂量是用于对小鸡沙门氏菌感染产生抑制作用的有效量，即，与不向小鸡施与本发明的感染抑制组合物而其它条件相同的情况相比，本发明的感染抑制组合物产生增强的对小鸡沙门氏菌感染抑制作用的量。

本发明的感染抑制组合物可以是凝胶的形式。本发明的感染抑制组合物的凝胶通过将活性成分与其它成分混合，然后用水溶性多糖使该混合物凝胶化而制备。本发明的感染抑制组合物的凝胶可以通过让小鸡自由摄取所述凝胶而施与小鸡，并且这种施与可以在孵卵所或小鸡饲养场进行或在将小鸡从孵卵所运往小鸡饲养场的途中进行。

本发明的感染抑制组合物可以是可凝胶化制品(preparation for gelation)，其通过将活性成分与规定量的水溶性多糖粉末混合而制得。可凝胶化制品在孵卵所或农场使用前可以用水稀释，以获得凝胶样固体，该固体可以施与小鸡(即，自由摄取、或直接投于农作物中)。水溶性多糖的例子在后面叙述。

本发明的感染抑制组合物通常单独使用，或者可以在用水稀释后作为稀释品使用(即，以饮用水稀释物施与)。稀释品中活性成分的浓度通常是大约10至500,000ppm，优选为约35至3,500ppm。例如，有效成分量为大约0.01至500g的本发明的感染抑制组合物被溶解于1L水，然后按剂量施与。优选地，有效成分量为大约0.035至35g的本发明的感染抑制组合物被溶解于1L水，然后施与。

当上述稀释品被施与小鸡时，可采用饮用水添加设备等施与。稀释品的剂量可依据对象小鸡的大小、生长状况、饲养密度、施与方法等适当调整，并且通常是大约300至2,000L每10,000只鸡。

对于本发明的感染抑制组合物的施与时机(timing)和时间(period)，当用于产蛋鸡的种类和用于烤焙的种类时，本发明的感染抑制组合物在饲养小鸡过程中，优选在幼鸡阶段(孵出后0至5周大)被持续施与。更优选地，本发明的感染抑制组合物在孵出后0至7天施与。

本发明的饲料组合物包含本发明的感染抑制组合物。通常，本发明的饲料组合物通过将本发明的感染抑制组合物加入饲料、饮用水、生理电解质溶液等制得。

本发明的饲料组合物优选包含按重量计大约0.25～5％的本发明的感染抑制组合物。

对用于本发明的饲料组合物的饲料、饮用水和生理电解质溶液没有特别的限制，只要它们是通常使用的即可。饲料的例子包括将选自下述物质的一种或多种适当混合而制得的饲料：玉米、大米、小麦、蜀黍、豆饼、糠、去脂米糠、鱼粉、脱脂奶粉、干乳清、脂肪或油、苜蓿粉、白鱼粉、豆油、纯化牛脂粉末、小麦粉、菜籽油、骨粉饲料(羽毛粉)、动物脂肪或油、磷酸钙、玉米黄浆粉、蜂蜡、玉米胚粉、碳酸钙、磷酸三钙、氯化钠、氯化胆碱、维生素类(维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素D、维生素E、泛酸钙、烟酰胺、叶酸等)、氨基酸类(赖氨酸、蛋氨酸等)、微量(minor)无机盐(硫酸镁、硫酸铁、硫酸铜、硫酸锌、碘化钾、硫酸钴等)、益生素等。

本发明的饲料组合物可包含有机矿物例如肽锌，肽铁等；无机矿物例如碳酸锌、碳酸镁、硫酸铁、碳酸镁等；维生素类例如维生素A、维生素B、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、泛酸、烟酸等；苜蓿粉、压片玉米等。此外，本发明的饲料组合物可含有用于增进口感的香料。

对向小鸡施与本发明的饲料组合物的方法没有特别的限制。本发明的饲料组合物可采用常规方法施与于小鸡，例如，将其喷洒到饲料上或混合于饲料中。本发明的饲料组合物的剂量是对小鸡沙门氏菌感染产生抑制作用的有效量，即，与不向小鸡施与本发明的饲料组合物而其它条件相同的情况相比，本发明的饲料组合物产生对小鸡沙门氏菌感染增强的抑制作用的量。

对于本发明的饲料组合物的施与时机和时间，当用于产蛋鸡的种类和用于烤焙的种类时，本发明的饲料组合物在饲养小鸡过程中，优选在幼鸡阶段(孵出后0至5周大)持续施与。更优选地，本发明的饲料组合物在孵出后0至7天施与。

当本发明的饲料组合物通过将葡萄糖酸钠和饲料混合而制备时，本发明的饲料组合物可包含按重量计大约0.0005～5％、优选按重量计大约0.05～2％、更优选按重量计大约0.1～1％的葡萄糖酸钠。当本发明的饲料组合物通过将葡萄糖酸钠加入饮用水或生理电解质溶液而制备时，本发明的饲料组合物可包含按重量计大约0.035～3.5％、优选按重量计大约0.035％～1.4％、更优选按重量计大约0.07～0.7％的葡萄糖酸钠。

本发明的感染抑制方法包括向小鸡施与有效量本发明的感染抑制组合物或本发明的饲料组合物的步骤。在该方法中，本发明的饲料组合物可通过常规方法施与动物。有效量根据条件例如制剂种类、对象动物、摄取时间等而不同，并且可以通过增加或减少上述范围而适当地确定。

特别地，例如，本发明的感染抑制组合物用水稀释至适于对小鸡施与的浓度。如此得到的稀释溶液可用于施与。稀释度可根据饮用水稀释物的常规施与方法确定，例如，优选使用稀释大约5～10倍的溶液。

特别地，例如，本发明的感染抑制组合物用水稀释至规定浓度。向稀释溶液中加入水溶性多糖并在搅拌下混合以获得均一溶液，使该溶液处于常温下或被储存于寒冷处(例如冰箱等)以获得凝胶状固体。如果采用在高温下溶解而在低温下凝聚的胶凝剂(例如琼脂、明胶等)，胶凝剂被预先加入用于制备本发明的感染抑制组合物的介质(medium)中。然后，将该介质进行高压蒸汽灭菌并冷却。如果需要，种细菌例如益生菌和菌苗(vaccine)在凝胶化之前被立即接种到介质上，在37℃培养，然后将其置于常温下或储存于寒冷处(例如冰箱等)以获得凝胶状固体。如此获得的凝胶状固体可用于施与。凝胶状固体的凝胶强度适当地大约是200～2,000g/cm²。当采用琼脂时，凝胶强度根据凝胶种类而不同，并对应于大约0.5～3.0％的浓度。

用于使本发明的感染抑制组合物在水性介质中凝胶化的水溶性多糖的例子包括琼脂、角叉菜聚糖、羧甲基纤维素、淀粉、甘露聚糖、明胶、藻酸钠、阿拉伯树胶、刺槐豆胶、黄原胶、壳聚糖、瓜耳胶、果胶、藻酸丙二醇酯、阿拉伯半乳聚糖、茄替胶、罗望子胶、短醒霉多糖(pullulan)、吗啉脂肪酸盐、凝胶多糖(curdlan)、黄蓍胶等。在这些多糖中，特别地，从低成本和容易获得的角度考虑，优选琼脂，淀粉、甘露聚糖和明胶。

例如，当凝胶状固体被施与大约0至7天大、水和饲料的摄取量小的小鸡时，小鸡能很容易地在短时间内摄取必需量的本发明的感染抑制组合物，因为小鸡具有一种啄食地面上固体物质的遗传性活动(习性)。如果需要，难以施与幼鸡的益生菌、疫苗、药物、营养物质等可以与本发明的感染抑制组合物混合，用水溶性多糖凝胶化，然后提供给小鸡，让它们自由摄取凝胶，由此这些物质可以与本发明的感染抑制组合物一起有效地施与小鸡。小鸡阶段中水和营养物质的供应对于后来的生产率是非常重要的。从而，当施与营养物质时，其例子包括维生素类、矿物质类等，以及碳水化合物类例如糖类，例如，单糖例如葡萄糖、甘露糖、果糖等，以及它们的低聚物，和二糖例如蔗糖等，蛋白质类例如脱脂乳等，以及脂类。

当然，本发明包括葡萄糖酸或其盐或其衍生物在制备抑制小鸡沙门氏菌感染的组合物中的用途(即本发明的用途)。

实施例

在下文中，通过给出制备例和试验例来详细解释本发明，但是本发明并不限于这些实施例。在实施例中，术语“份”是指重量份。

制备例1：粉末

25份葡萄糖酸钠和25份乳糖在研钵中被充分混合后，将混合物充分搅拌并混合得到粉末。

制备例2：颗粒

25份葡萄糖酸钠和25份乳糖被充分搅拌混合。向混合物中加入适量的水，并进一步搅拌。将混合物用制粒机制成颗粒，然后通风干燥得到颗粒。

制备例3：溶液

将25份葡萄糖酸钠溶于50份水中，将混合物充分搅拌得到溶液。

下列试验例证明本发明的饲料组合物对于沙门氏菌感染产生了优异的抑制作用。

试验例1：在屏蔽实验室(barriered laboratory)中的第一次鼠伤寒沙门氏菌感染测试

通过使小鸡按照受试组摄取受试饲料(见表1)将葡萄糖酸钠施与60只市售的小鸡(烤焙种(broiler species)；1天大)，受试小鸡的数量和饲料中葡萄糖酸钠加入量在表2中示出。

当小鸡3天大时，按每只小鸡1×10³个鼠伤寒沙门氏菌将鼠伤寒沙门氏菌经口接种入小鸡内。

当小鸡8天大时，它们被宰杀。从死亡的小鸡中取出阑尾部分，并从阑尾中取出阑尾粪便。然后，测定阑尾粪便中活着的沙门氏菌数量。结果在表3中示出。

[表1]

成分	％
		玉米	57.38
EX大豆	2.00
		大豆粉45	27.23
玉米蛋白粉(corn gluten meal)	5.00
		豆油	4.90
碳酸钙	0.68
		磷酸钙	1.89
氯化钠	0.20
		赖氨酸	0.30
氯化胆碱	0.02
		维生素预混合料	0.40
合计	100.00

[表2]

受试组	受试小鸡数量	葡萄糖酸钠的加入量(g/kg饲料)
			葡萄糖酸钠-低加入组	15	1
葡萄糖酸钠-中加入组	15	5
			葡萄糖酸钠-高加入组	15	10
对照组	15	-

[表3]

	重量增加(g)	沙门氏菌的数量(log CFU)
			葡萄糖酸钠-低加入组	101.03±8.0	4.42±2.20
葡萄糖酸钠-中加入组	103.1±22.6	6.27±1.77
			葡萄糖酸钠-高加入组	106.4±18.7	5.93±1.64
对照组	90.5±10.6	6.69±1.28

与对照组的细菌数量相比，各葡萄糖酸钠-加入组中阑尾粪便里活着的沙门氏菌的数量小。特别地，在葡萄糖酸钠-低加入组中，具有统计学上(t检验)的显著性差异(P＜0.01)。

试验例2：在屏蔽实验室中的第二次鼠伤寒沙门氏菌感染测试

通过使小鸡按照受试组摄取受试饲料(见表1)将葡萄糖酸钠施与60只市售的小鸡(烤焙种；1天大)，受试小鸡的数量和饲料中葡萄糖酸钠的加入量在表4中示出。

当小鸡14天大时，按每只小鸡1×10³鼠伤寒沙门氏菌将鼠伤寒沙门氏菌经口接种入小鸡内。

当小鸡19天大时，它们被宰杀。从死亡的小鸡中取出阑尾部分，并从阑尾中取出阑尾粪便。然后，测定阑尾粪便中活着的沙门氏菌数量。结果在表5中示出。

[表4]

受试组	受试小鸡数量	葡萄糖酸钠的加入量(g/kg饲料)
			葡萄糖酸钠-低加入组	15	1
葡萄糖酸钠-中加入组	15	5
			葡萄糖酸钠-高加入组	15	10
对照组	15	-

[表5]

	重量增加(g)	沙门氏菌阳性率
			葡萄糖酸钠-低加入组	409.7±47.5	1/15
葡萄糖酸钠-中加入组	520.4±36.9	0/15
			葡萄糖酸钠-高加入组	483.7±31.5	0/15
对照组	375.9±56.1	4/15

对于存在于阑尾粪便里的沙门氏菌阳性率，对照组15个样品中的4个样品是阳性的，而葡萄糖酸钠-低加入组中只有1个样品是阳性的，并且葡萄糖酸钠-高加入组和葡萄糖酸钠-中加入组中的全部样品都是阴性的。特别地，在葡萄糖酸钠-高加入组和葡萄糖酸钠-中加入组中，具有统计学上(X²检验)的显著性差异(P＜0.05)。

首次证实了葡萄糖酸钠作为用于小鸡的沙门氏菌感染抑制剂是有用的。

Claims (9)

1.用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，其包含葡萄糖酸或其盐或其衍生物作为有效成分。

2.权利要求1的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，其中葡萄糖酸或其盐或其衍生物选自葡萄糖酸钠、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸-δ-内酯和葡萄糖酸-γ-内酯。

3.权利要求1的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物，其中葡萄糖酸或其盐或其衍生物是葡萄糖酸钠。

4.用于小鸡的抑制沙门氏菌感染的饲料组合物，其包含权利要求1所述的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物。

5.抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，其包括对小鸡施与有效量的权利要求1所述的用于小鸡的沙门氏菌感染抑制组合物的步骤。

6.权利要求5的抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，其中小鸡是孵出后0至5周大。

7.抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，其包括对小鸡施与有效量的权利要求4所述的用于小鸡的抑制沙门氏菌感染的饲料组合物的步骤。

8.权利要求7的抑制小鸡沙门氏菌感染的方法，其中小鸡是孵出后0至5周大。

9.葡萄糖酸或其盐或其衍生物在制备抑制小鸡沙门氏菌感染的组合物中的用途。