CN101190299A - 一种治疗抗菌药物引起的相关性肠炎的药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗抗生素相关性腹泻的药物,它所含的药效组分是由黄连、黄芩、党参、白术、茯苓、甘草、泽泻、木香按一定的重量配比制备而成。这些药效组分可以被制备成任何一种常用内服剂型。本发明药物具有清化湿热、健脾益气,缓解腹泻、腹痛症状,促进肠道菌群失调恢复正常的功能,可治疗抗生素相关性腹泻或菌群交替性肠炎。本发明还公开了该药物的制备方法。
Description
【技术领域】
本发明涉及一种具有清化湿热和健脾益气功效的药物,属于中药领域,及其制备方法,本发明还涉及该药物的制备方法以及制备治疗抗生素相关性肠炎或菌群交替性肠炎药物的用途。
【背景技术】
随着抗生素的广泛应用,与抗生素有关的腹泻或结肠炎屡有发生。由于广谱抗生素使用时间较长、大剂量联合应用或频繁更换抗生素,引起肠道生态平衡失调,肠道定植抗力减弱,导致腹泻,甚至出现脓血便。病理学研究显示,该种腹泻属结肠和小肠黏膜的坏死性炎症,多见于结肠,在坏死黏膜上常覆以伪膜,因而称为“伪膜性肠炎”,又将其称为“抗生素相关性肠炎”或“菌群交替性肠炎”。
抗生素相关性肠炎的发病率随抗生素的广泛应用而呈逐年增加趋势,临床较为多见。受滥用抗生素的影响,我国的发病率明显高于国外。国内外西医对停用抗生素仍不能消除腹泻、腹痛等症状的患者,应用万古霉素或培菲康进行治疗,但对多数患者不能完全治愈,易复发,对症状严重者最终采用的方法是手术切除结肠,给患者的身心带来极大痛苦。据临床调查显示,目前国内外西医对其并无有效治疗药物,也未见明确用于该适应证、具有国家标准的中成药。
中医古籍中无抗生素相关腹泻的病名,但该病可归属于中医泄泻范畴。中医药治疗泄泻积累了丰富的经验,将中医药宝贵的经验用于抗生素相关腹泻的治疗,既扩大了中医药治疗疾病的范围,又给广大患者解除了病痛。此外,抗生素相关腹泻临床较为多见,且目前中西医均没有有效治疗药物,万古霉素虽对该致病菌有一定的抑制作用,但其价格贵,复发率高。至今为止,还没有发现任何有关本发明药物组合物的报道。本发明人经过反复研究,并通过动物和临床试验的反复验证,终于找到了有更好疗效的治疗抗生素相关性肠炎的中药内服药物,从而完成了本发明。
【发明内容】
本发明的目的就是提供一种更为有效的治疗抗生素相关性腹泻的一种中药组合物。
本发明的另外一个目的是提供了该中药组合物的制备方法。
本发明药物是由药效组分或者药效组分和药学上可接受的辅料组成,其中制成药效组分的原料含有:黄连、黄芩、党参、白术(炒)、茯苓、木香、泽泻和甘草。
将这些中药材组合使得各药物的功效产生协同作用,从而能更有效地治疗抗生素相关性腹泻、腹痛。黄连、黄芩均属苦寒之品,能清热燥湿,泻火解毒,二者合用,相得益彰,黄连、黄芩还可入手阳明大肠经,善治湿热蕴结肠道而致的发热口渴、泻下腹痛。方中以党参、白术、茯苓、甘草为臣药,此四者的组合为四君之意,意在大补中土之虚,健脾除湿,可使脾胃之清气健旺,运化功能复常易滋生气血,可起到扶正之效。同时君药黄连、黄芩均为大苦大寒之品,尤对脾虚之体有伤胃气之弊,故用四君子补脾胃可纠黄连、黄芩之偏,方中白术与黄芩相合为伍,二者一补一泻,一温一寒,相互制约,相互促进。泽泻、木香为佐药。泽泻甘淡而凉,善逐三焦、膀胱之水,茯苓得泽泻,利水除湿之功倍增,泽泻的茯苓,利水而无伤脾气,二药伍用,相辅相成,可使中焦得运,水道通调,水湿之气从上顺下,出于膀胱。同时,泽泻可佐助白术,白术健脾以升清阳,泽泻利水湿以降浊阴,二味相合,攻中寓攻,升清降浊,利水除湿。木香芳香辛散,调中宣滞,行气止痛,除脘腹气滞胀痛之症。同时,木香与黄连为伍,二味相合,一温散,一寒折,可调升降,理寒热,共奏调气行滞,厚肠止泻之效。
制备本发明药物药效组分的原料用量也是经过发明人进行大量的摸索总结得出的,各原料用量为在下述重量份范围内都有较好的疗效:
黄连1-10重量份、黄芩1-10重量份、党参1-10重量份、炒白术1-8重量份、
泽泻1-10重量份、茯苓1-10重量份、甘草1-8重量份和木香1-8重量份。
本发明各原料用量优选是:
黄连3-9重量份、黄芩3-9重量份、党参3-9重量份、炒白术1-6重量份、
茯苓3-9重量份、泽泻3-9重量份、木香1-6重量份和甘草1-6重量份。
最佳原料用量为:黄连4重量份、黄芩6重量份、党参6重量份、炒白术4重量份、茯苓4重量份、泽泻4重量份、甘草4重量份和木香4重量份。
本发明中白术为炒白术,按《中华人民共和国药典》(2005年版)炒白术方法进行炮制。
本发明药物组合物的药效成分可以是将上述中药材分别干燥粉碎,混合均匀制成。也可以上述中药材分别干燥粉碎,混合均匀,加水煎煮,浓缩后制成。
优选的本发明药物药效组分的制备方法如下:
a)称取各原料药黄连、黄芩、党参、炒白术、泽泻、茯苓、甘草和木香备用;
b)将黄连用4-8倍量的40-95%乙醇提取,回收乙醇、减压浓缩得干浸膏1;
c)将黄芩温水浸泡后与党参、茯苓、泽泻、甘草、白术(炒)加水煮三次,减压浓缩至80℃测比重为1.15-1.20,真空干燥得干浸膏2;
d)将木香进行水蒸气蒸馏得到挥发油,水液浓缩得干浸膏3;
e)将干浸膏1、2和干浸膏3合并,将其粉碎成粉,喷入木香挥发油混匀,就制备成了本发明药物的活性成分。
本发明药物药效组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常用辅料,如崩解剂、润滑剂、粘合剂、肠溶包衣剂等以常规的制剂方法制备成任何一种常用口服制剂,如颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、口服液等适合临床应用的药物制剂。
本发明药物具有清化湿热和健脾益气功能。可用于治疗抗生素相关性腹泻证或菌群交替性肠炎。本发明药物对抗生素诱发的地鼠结肠炎有一定的治疗作用,并具有一定的抗炎、治泻和止痛作用。
【具体实施方式】
以下通过试验例来进一步阐述本发明所述的药物的有益效果,这些试验例包括了本发明药物的制备实施例和药效学试验。
【实施例1】本发明药物的药效组分的制备
a)称取原料:黄连40克、黄芩60克、党参60克、炒白术40克、茯苓40克、泽泻40克、甘草40克和木香40克,备用;
b)黄连用5~7倍50%~80%乙醇提取三次,每次1~3小时,回收乙醇得干浸膏1;
c)黄芩温水浸泡后与党参、茯苓、泽泻、甘草和白术(炒)六味药合并加水煎煮三次,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.15~1.20(50℃),放置24小时,真空干燥得到干浸膏2;
d)木香粗粉,加8~10倍水,水蒸汽蒸馏4~8小时,收集挥发油,水液浓缩得到干浸膏3;
e)将干浸膏1、2和3合并,粉碎成粉,喷入木香挥发油混匀,就制备成了本发明药物的药效组分。
实验例1:
试验材料:
药物:
实施例1制备的本发明药物药效组分:每毫升含生药5.0克,用前加适量的蒸馏水稀释成相应的浓度;青霉素G钾盐注射液:40万单位;硫酸庆大霉素注射液:4万单位;去甲基万古霉素片:0.5g/片;盐酸黄连素片:0.1g/片;阿司匹林片:0.5g/片。
菌株:
人胚肺二倍体传代细胞2BS;金黄色葡萄球菌24株临床分离株;难辨梭菌23株,包括标准菌株和临床分离菌株;9株地鼠分离株。
动物:
金黄地鼠:雌雄各半,体重70-80克;Wistar种大鼠:雄性,体重150-160克;昆明种小鼠:雌、雄性,体重18-20克。
仪器:
GasPak厌氧罐;倒置显微镜;热板测痛仪GJ-8420型。
方法与结果:
1对地鼠抗生素结肠炎的影响
取70-80g地鼠,雌雄各半,随即分为6组,及正常对照组、模型对照组、阳性对照组和本品大、中、小剂量组,每组10只,每5只一笼饲养,以本品20、10、5g(生药)/kg剂量(分别相当于临床剂量的15、7.5、3.75倍),连续灌胃给药10天,阳性对照组给予万古霉素0.25g/kg,给药体积为1ml/100g,给药第3天,除正常对照组外,每鼠连续5天灌胃给青霉素和庆大霉素混合注射液造型,青霉素(10万单位)+庆大霉素(1万单位)/100g,每日2次,每次间隔8小时。
2难辨梭菌的分离及细胞毒素的测定
给药后11天拉颈处死动物,切开腹壁,结扎回肠末端和结肠起端,无菌条件下取盲肠内容物置无菌试管内,称重,以0.05%哮母菌浸粉水制成10%悬液(w/v),充分振荡均匀后,用酵母粉水进行10倍的稀释置10-7。用微量加样器取10-5及10-7悬液20ul点种于难辨梭菌选择血琼脂上,每稀释度3点。选择GLA(庆大-洁霉素琼脂)琼脂培养基。接种后的平板置GasPak厌氧罐内37℃培养72小时。选择可疑菌落涂片染色镜检并计数每克湿便中的难梭菌数。
将上述10%的粪便悬液9600xg离心10分钟,上清液通过0.45mu微孔滤膜过滤除菌。将人胚肺二倍体传代细胞在96空瓶底微量培养板上培养成单层(培养液为Eagle MEM加15%的小牛血清)。每份滤液自1∶10起作系列10倍稀释,加在细胞单层上,每稀释度每凹10ul,1∶10加2凹,其中一凹再加10ul,1∶40。另置细胞、难辨梭菌抗生素对照。二氧化碳温箱中培养24小时,在倒置显微镜下观察细胞发生病变的情况。细胞100%发生病变者为毒素阳性。
结果显示,模型组动物在造型后3天出现腹泻(稀便),动物肛门周围出现特持久的稀粘粪便,腹泻持续至处死动物前;动物进食减少,体重下降,毛色无光泽,造型第8日晨有2只动物死亡;经培养、分离,10只动物的肠内容物均为毒素阳性,均分离出难辨梭菌。阳性药万古霉素及本品给药三剂量组均可不同程度的增加造型动物体重,减少其腹泻数、死亡数、粪便毒素阳性数和难辨梭菌的阳性数,与模型组比较差异显著。显示阳性药和本发明药物对地鼠结肠炎模型具有治疗作用。见表1、2。
3对结肠炎地鼠肠道菌群的影响
3.1直接镜检
给药后第11天剖杀动物,取盲肠内容物在0.05%酵母粉水中制成10%悬液,每进一步稀释10倍。在载片上划分为2个小格,每格面积为1×1=1cm2。,用微量加样器取102稀释的粪便悬液各10μl,分别滴加于每一个方格内,风干,革兰氏染色,油镜(1000倍)下观察。观察对象依其形态及染色性分为四类:即革兰氏阳性粗大杆菌(难辨梭菌包括在内)、革兰氏阳性球菌(包括球杆菌)、革兰氏阳性短杆菌和革兰氏阴性杆菌。按固定方式移动载片,计10个视野中每类细菌的数目,并计算其平均值。在各组问进行比较分析和统计学处理时,将每组10只动物同类形态菌数的均值合并,再求出均值及标准差。
结果表明,在正常动物粪便中,形态粗大的革兰氏阳性杆菌很少或没有,动物造型后,革兰氏阳性粗大杆菌和球菌的数量显著增加,其中大部分杆菌是难辨梭菌,革兰氏阴性杆菌的数量下降。造型动物给予本品和去甲基万古霉素后,革兰氏阳性粗大杆菌和球菌的数量明显减少,革兰氏阴性杆菌的数量增加,本发明药物颗粒三剂量组和阳性药去甲基万古霉素对革兰氏阴性杆菌的生长均有促进作用,各给药组与模型组动物相比差异显著。见表3。
3.2分离培养进行菌群分析
需氧及兼性厌氧菌以大肠杆菌和肠球菌为代表,分别用伊红美兰培养基(EMB)及肠球菌选择培养基(EC)分离培养。厌氧菌的选择培养基根据康白及光冈知足的方法,并根据本实验室经验加以配制。EG培养基一计厌氧菌总数,NBGT培养基一主要用于分离拟杆菌,PS培养基--分离厌氧球菌,FS培养基--分离梭杆菌,BS培养基--分离双歧杆菌。
用酵母粉水将每组中3份粪便悬液作10倍系列稀释,需氧及厌氧菌用10~103三个稀释度各0.1ml,分别接种至EMB及EC平板上,在普通温箱中培养24小时,分离厌氧菌用105~107三个稀释度,接种后置GasPak(BBL)厌氧罐中培养48小时,培养后选择各培养基上生长的不同形态的菌落染色镜检及计数,计数结果以每克湿便中菌数的对数表示。
结果表明,模型组动物肠道内的兼性厌氧菌--肠球菌的数量增多,另一种兼性厌氧菌--大肠杆菌的生长被完全抑制,从而破坏了菌群的平衡。万古霉素和本发明药物颗粒三剂量均可使模型动物肠道内的大肠杆菌恢复至原来的数量的范围,万古霉素使肠球菌的数量继续增多(与模型组相比),本发明药物颗粒大剂量组可使肠球菌的数量恢复致正常水平;模型组动物肠道内革兰氏阳性厌氧球菌的数量减少,万古霉素使厌氧球菌的数量继续下降,本发明药物颗粒大剂量组可增加厌氧球菌的数量;模型组动物肠道内革兰氏阳性杆菌乳杆菌的生长被完全抑制,双歧杆菌的数量明显减少,万古霉素和本发明药物颗粒三剂量组均可使两种杆菌的数量恢复至正常范围;模型组动物肠道内革兰氏阴性厌氧杆菌--梭杆菌和拟杆菌的数量明显增多,其中梭杆菌的数量增多较明显,本发明药物颗粒可使梭杆菌的数量恢复至正常范围,万古霉素对梭杆菌的数量无明显影响,万古霉素和本发明药物颗粒均可使拟杆菌的数量恢复至正常范围。见表4。
由于革兰氏阴性厌氧杆菌是肠道菌群的主要组成部分,它们数量大,是病原菌定植的主要障碍,所以能否保持足够数量的阴性厌氧杆菌非常重要。本发明药物颗粒可使厌氧菌总的数量上升,这对于维持菌群的稳定性和抑制病原菌都有重要的意义。本发明药物颗粒在肠道菌群恢复方面的作用强于万古霉素。
表1 对结肠炎地鼠体重的影响(X±S;g;n=10)
组间T检验:与正常对照组相比###P<0.001;
与模型对照组相比***P<0.001。
表2 对结肠炎地鼠盲肠内容物中难辨梭菌的影响(X±S;g;n=10)
卡方检验:与正常对照组相比#P<0.05,###<0.01;
与模型对照组相比*P<0.05 **P<0.01。
表3 肠内容物直接镜检结果(X±S;n=10)
组间T检验:与正常对照组相比###P<0.001;
与模型对照组相比***P<0.001。
表4-1 对肠道正常菌群的影响(X±S;n=10)
组间T检验:与正常对照组相比##P<0.01;
与模型对照组相比*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。
表4-2 对肠道正常菌群的影响(X±S;n=10)
组间T检验:与正常对照组相比#P<0.05;##P<0.01;
与模型对照组相比*P<0.05;:**P<0.01;***P<0.001。
【实施例2】本发明药物的胶囊剂制备
a)称取原料:黄连30克、黄芩30克、党参30克、炒白术10克、茯苓30克、泽泻30克、甘草10克和木香10克,备用;
b)黄连,用5~7倍50%~80%乙醇提取三次,每次1~3小时,回收乙醇得干浸膏1;
c)黄芩温水浸泡后与党参、炒白术、茯苓、泽泻、甘草六味药合并加水煎煮三次,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.10~1.30(50℃),放置24小时,取上清液减压浓缩至相对密度为1.10~1.30(80℃)的清膏,减压干燥至干浸膏2;
d)木香粗粉,加入8~10倍水,水蒸汽蒸馏4~8小时,收集挥发油,水液浓缩得到干浸膏3;
e)合并干浸膏1、2和3,再粉碎成细粉,喷洒木香挥发油,混匀,装入明胶硬胶囊。
【实施例3】本发明药物的片剂制备
a)称取原料:黄连90克、黄芩90克、党参90克、炒白术60克、茯苓90克、泽泻90克、甘草60克和木香60克,备用;
b)黄连用5~7倍50%~80%乙醇提取三次,每次1~3小时,回收乙醇得干浸膏1;
c)黄芩温水浸泡后与党参、茯苓、泽泻、甘草和白术(炒)六味药合并加水煎煮三次,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.15~1.20(50℃),放置24小时,真空干燥得到干浸膏2;
d)木香粗粉,加8~10倍水,水蒸汽蒸馏4~8小时,收集挥发油,水液浓缩得到干浸膏3;
e)将干浸膏1、2和3合并,粉碎成粉,喷入木香挥发油混匀,加入辅料制成颗粒、干燥、整粒、压片。也可以用肠溶衣包衣在肠中崩解,在肠中起到更好的作用。
【实施例4】本发明药物的颗粒剂制备
a)称取原料:黄连30克、黄芩30克、党参90克、炒白术10克、茯苓90克、泽泻30克、甘草10克和木香60克,备用;
b)黄连用5~7倍50%~80%乙醇提取三次,每次1~3小时,回收乙醇得干浸膏1;
c)黄芩温水浸泡后与党参、茯苓、泽泻、甘草和白术(炒)六味药合并加水煎煮三次,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度1.15~1.20(50℃),放置24小时,真空干燥得到干浸膏2;
d)木香粗粉,加8~10倍水,水蒸汽蒸馏4~8小时,收集挥发油,水液浓缩得到干浸膏3;
e)将干浸膏1、2和3合并,粉碎成粉,喷入木香挥发油混匀,加入黏合剂、矫味剂辅料,制成颗粒即得。
Claims (9)
1.一种具有清化湿热和健脾益气功效的药物,它是由药效组分或者药效组分和药学上可接受的辅料组成,其中制成药效组分的原料含有:
黄连1-10重量份、黄芩1-10重量份、党参1-10重量份、炒白术1-8重量份、
泽泻1-10重量份、茯苓1-10重量份、甘草1-8重量份和木香1-8重量份。
2.根据权利要求1所述的药物,其中制成药效组分的原料含有:
黄连3-9重量份、黄芩3-9重量份、党参3-9重量份、炒白术1-6重量份、
茯苓3-9重量份、泽泻3-9重量份、木香1-6重量份和甘草1-6重量份。
3.根据权利要求2所述的药物,其中制成药效成分的原料含有:
黄连4重量份、黄芩6重量份、党参6重量份、炒白术4重量份、
茯苓4重量份、泽泻4重量份、甘草4重量份和木香4重量份。
4.权利要求1或2或3所述的药物,它是片剂、颗粒剂和胶囊剂。
5.权利要求1或2或3所述药物的制备方法,它包括下列步骤:
a)称取各原料药黄连、黄芩、党参、炒白术、泽泻、茯苓、甘草和木香,备用;
b)将黄连用4-8倍量的40-95%乙醇提取,回收乙醇、减压浓缩得干浸膏1;
c)将黄芩温水浸泡后与党参、茯苓、泽泻、甘草、炒白术加水煮三次,减压浓缩至80℃测比重1.15-1.20,真空干燥得干浸膏2;
d)将木香进行水蒸气蒸馏得到挥发油,水液浓缩得干浸膏3;
e)将上述步骤制得的干浸膏1、2和干浸膏3合并,将其粉碎成粉,喷入木香挥发油混匀,得到药效组分。
6.根据权利要求5的制备方法,它还包括下列步骤:将药效组分装入明胶硬胶囊。
7.根据权利要求5的制备方法,它还包括下列步骤:将药效组分中加入辅料制成颗粒、干燥、整粒、压片。
8.根据权利要求5的制备方法,它还包括下列步骤:将药效组分中加入黏合剂、矫味剂辅料,制成颗粒即得。
9.权利要求1或2或3所述的药物在制备治疗抗生素相关性肠炎或菌群交替性肠炎药物的用途。
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