CN101065108A

CN101065108A - 纯化的磷脂－非甾体抗炎药缔合组合物及其制备和使用方法

Info

Publication number: CN101065108A
Application number: CN 200580040620
Authority: CN
Inventors: L·M·里奇腾伯格
Original assignee: University of Texas System
Current assignee: University of Texas System
Priority date: 2004-10-12
Filing date: 2005-10-12
Publication date: 2007-10-31

Abstract

公开了包含纯化的磷脂－选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药缔合复合物的新的药物组合物，以及制备和使用它们的方法。还公开了用于鉴别会形成磷脂缔合复合物的化合物的筛选方法。

Description

纯化的磷脂-非甾体抗炎药缔合组合物及其制备和使用方法

相关申请

本申请要求享有2004年10月12日提交的美国临时专利申请系列号60/617,732和2005年5月19日提交的美国临时专利申请系列号60/682,440的临时优先权。

政府利益

本申请中公开的有些主题在一定程度上得到了美国政府以国立卫生研究院资助号R42 DK063882提供的资助。

发明背景

1.发明领域

本发明涉及磷脂(PL)与选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)的高纯度缔合复合物，并涉及制备和使用它们的方法。本发明也涉及筛选化合物(包括药物试剂(PA))提高磷脂(PL)在溶剂中的溶解度的能力的方法，在所述溶剂中所述PL具有中等溶解度、低溶解度或不溶。

更具体地，本发明涉及磷脂(PL)与选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药的高纯度缔合复合物，以及制备和使用它们的方法，其中所述复合物包含极性溶剂可溶的PL-sns-NSAID复合物。所述方法包括下述步骤：将选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)和磷脂(PL)加入极性溶剂，然后在有或没有真空存在下，用或不用冷却，去除所述极性溶剂，形成纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物。本发明也涉及筛选药物试剂(PA)的方法，包括将PA加入PL在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的溶剂，然后加入PL，以确定PL的溶解度是否得到提高。

2.相关技术的描述

已知磷脂会与诸如选择性的和非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID，包括NSAID和/或COX-2抑制剂)等药物试剂缔合，众所周知这些药物试剂伴有胃肠(GI)、肝和肾的不利副作用，胃-十二指肠溃疡和出血是最常见的，且倾向于减少(如果不能消除)这些不利的健康危险。

下面的外国专利、美国专利和美国未决专利申请确定了与本申请有关的现有技术：GB 0092121，US 4,332,795；US 4,369,182；US4,378,354；US 4,421,747；US 4,528,193；US 4,687,766；US4,748,157；US 4,918,063；US 4,950,656；US 5,032,585；US5,043,329；US 5,763,422；US 5,955,451；USSN 10/433,454；USSN10/909748，和USSN 10/909751，其在这里通过参考并入。这些文献证实，磷脂可以减少或消除NSAID的GI毒性。

尽管已知磷脂会减少NSAID的GI毒性并可形成缔合复合物，本领域需要高纯度PL-sns-NSAID缔合复合物，制备和使用它们的方法。本领域还需要筛选可以与磷脂形成缔合复合物的药物试剂的方法。

发明概述

制备高纯度PL-NSAID缔合组合物的方法

本发明提供了一种方法，其包括下述步骤：在适合生成纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的条件下，使一种选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)或多种sns-NSAID与一种磷脂(PL)或多种PL在极性溶剂中接触，其中纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物包括的PL的量超过了在没有sns-NSAID的情况下可溶于所述溶剂中的PL的量。在一个实施方案中，过量PL的量低于这样一个量：基于sns-NSAID的量，在该量下PL开始从溶液中沉淀出来。一旦达到PL与sns-NSAID的希望比例，通过任何标准的溶剂去除方法，包括蒸发、冷冻干燥、真空蒸馏、真空辅助蒸发、强迫气体蒸发、旋转蒸发或任何类似的溶剂汽提或去除方法，来去除溶剂。

纯化的PL-NSAID组合物

本发明提供了一种组合物，其包含纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物，其中所述纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物包括一定量的PL，该量大于在没有sns-NSAID的情况下可溶于极性有机溶剂中的PL的量，其中PL在所述极性溶剂中具有中等溶解度、低溶解度或不溶。

本发明也提供了一种药物，其包括本发明的纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物，其中所述药物是下述形式：软或硬胶囊，片剂，具有不透水的包衣的片剂，在生物相容的油中的分散剂，在水溶液中的分散剂。

施用药物的方法

本发明也提供了将药物施用给动物(包括人)的方法，其包括给所述动物施用有效量的药物的步骤，其中所述药物通过下述方法制备：在适合生成纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的条件下，使一种选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)或多种sns-NSAID与一种磷脂(PL)或多种PL在极性溶剂中接触，其中纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物包括一定量的PL，该量超过了在没有NSAID的情况下通常可溶于所述溶剂中的PL的量。在一个实施方案中，过量PL的量低于这样一个量：基于sns-NSAID的量，在该量下PL开始从溶液中沉淀出来。一旦达到PL与sns-NSAID的希望比例，通过任何标准的溶剂去除方法，包括蒸发、冷冻干燥、真空蒸馏、真空辅助蒸发、强迫气体蒸发、旋转蒸发或任何类似的溶剂汽提或去除方法，来去除溶剂。

筛选化合物的方法

本发明也提供了就使磷脂(PL)在溶剂中增溶的能力筛选化合物的方法，在该溶剂中所述磷脂具有中等溶解度、低溶解度或不溶。发明人认为，提高PL在这样的溶剂中的溶解度的化合物是，与PL形成缔合复合物的化合物。所述方法包括下述步骤：将一定量的PL加入所述PL在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的溶剂中，形成PL-溶剂混合物，其中PL的量大于PL在所述溶剂中的溶解度，以致存在沉淀。一旦形成PL-溶剂混合物，在有或没有加热下，在搅拌下将测试化合物加入PL-溶剂混合物。如果一些或全部沉淀溶解，则确定基本上完全消除沉淀所需的化合物的量，或可以与测试化合物一起被拉入溶液中的PL的量。如果形成没有沉淀的溶液，则去除溶剂，形成PL和所述化合物的组合物。发明人认为，能使PL在这样的溶剂中增溶的化合物是能与PL形成缔合复合物的化合物，且得到的组合物代表纯化的PL-化合物复合物。

本发明提供了就使PL在所述磷脂在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的溶剂中增溶的能力而筛选化合物的替代方法。所述方法包括下述步骤：将待筛选化合物溶解于所述磷脂在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的溶剂中。制备化合物溶液后，在有或没有加热下，在搅拌下加入超过它在所述溶剂中的溶解度的量的PL。如果没有形成沉淀，或如果形成沉淀后又消失，则确定导致形成持久沉淀所需的PL的量。如果形成没有沉淀的溶液，则可以去除溶剂，形成PL和在所述溶剂中可溶的化合物的组合物，并认为代表纯化的PL-化合物缔合复合物。在一个实施方案中，所述筛选方法指向筛选药学活性剂(PA)，以形成组合物，其包括PL-PA缔合复合物。新的PL-PA组合物可以从缔合复合物中PL的存在获益，这样的益处可以包括降低的GI毒性，提高的化合物生物利用度，提高的膜通透性，和提高的PA的治疗活性或已知与磷脂相关的其它类似的益处。在另一个实施方案中，所述方法被用于发现形成用于其它工业和研究领域的这类PL复合物的化学试剂。

附图简述

参考下面的详述以及所附的解释性附图，可以更好地理解本发明，在附图中，类似的元素具有相同的编号：

图1描绘了使用P35SB作为PC来源，丙酮可沉淀物相对于加入的布洛芬的重量的图；

图2描绘了丙酮可沉淀物相对于90G(PC来源)与布洛芬的一系列重量比的图；

图3描绘了诱导的急性(L-NAME)大鼠肠出血数据的图，其中对比了单独的布洛芬、丙酮溶解的布洛芬和本发明的纯化的PC-布洛芬组合物。

图4描绘了在用布洛芬、吲哚美辛和本发明的纯化的PC-布洛芬组合物进行的后爪4天NSAID测试中，接受0.1mL CFA注射的大鼠的痛阈数据的图；

图5描绘了诱导的急性(L-NAME)大鼠肠出血数据的图，其中对比了单独的布洛芬、单独的布洛芬钠盐、4种基于油的PC-布洛芬组合物和本发明的纯化的PC-布洛芬组合物；

图6描绘了来自大鼠急性肠出血模型(L-NAME)的结果，其中对比了盐水、布洛芬(IBU)、不经冷却使用丙酮制备的纯化的PC∶IBU(2∶1重量比)、和经冷却使用丙酮制备的纯化的PC∶IBU(2∶1重量比)；

图7描绘了来自大鼠急性肠出血模型(L-NAME)的结果，其中对比了盐水、布洛芬、使用丙酮制备的纯化的PC∶IBU(2∶1重量比)、和IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2；

图8描绘了在胃溃疡急性啮齿动物模型中当与阿司匹林(ASA)预缔合时磷脂酰胆碱(PC)的保护作用的结果，其中对比了盐水，来自片剂的ASA，使用丙酮制备的1∶1 PC-ASA，使用丙酮制备的2∶1 PC-ASA，使用丙酮制备的3∶1 PC-ASA，和使用丙酮制备的3.5∶1 PC-ASA；

图9描绘了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，ASA(阿司匹林)，1∶1 ASA∶P53，1∶1 ASA∶P35和使用丙酮制备的1∶3 ASA∶90G；

图10描绘了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，ASA(阿司匹林)，经冷却使用丙酮制备的1∶4 ASA∶90G和不经冷却使用丙酮制备的1∶4 ASA∶90G；

图11描绘了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，氟比洛芬(FURIB)和使用丙酮制备的1∶2 FURIB∶PC；

图12描绘了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，萘普生(Nap)钠盐，1∶1 Nap∶P35和使用丙酮制备的1∶2 Nap∶90G；

图13描绘了使用Randall Siletto方法，CFA诱导的大鼠炎症的痛阈的结果，其中对比了ASA(阿司匹林)，1∶1 ASA∶P35和使用丙酮制备的1∶3 ASA∶90G；

图14A描绘了对用CFA处理的大鼠踝厚度的慢性抗炎作用的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图14B描绘了对用CFA处理的大鼠血细胞比容水平的慢性作用的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图14C描绘了对用CFA处理的大鼠GI出血的慢性作用的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图14D描绘了对用CFA处理的大鼠粪便失血的慢性作用的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图14E描绘了用CFA处理的大鼠慢性止痛作用的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图14F描绘了慢性NSAID处理对用CFA处理的大鼠体重的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图14G描绘了使用髓过氧化物酶在用CFA处理的大鼠中测得的慢性抗炎作用的结果，所述结果分别对应于：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用IBU(布洛芬)处理，用使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G处理，和用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2处理；

图15A描绘了CFA诱导的关节炎症后对大鼠的局部止痛作用的痛阈结果，所述大鼠分别：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，用在丙二醇中的布洛芬(IBU/pg)处理，用使用丙酮制备的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU 2∶1/油)油处理，和用使用丙酮制备的在丙二醇中的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU/pg)处理；

图15B描绘了CFA诱导的关节炎症后对大鼠的局部抗炎作用的Δ踝厚度结果，所述大鼠分别：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，用在丙二醇中的布洛芬(IBU/pg)处理，用使用丙酮制备的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU 2∶1/油)油处理，和用使用丙酮制备的在丙二醇中的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU/pg)处理；

图15C描绘了CFA诱导的关节炎症后对大鼠的局部抗炎作用的髓过氧化物酶(MPO)活性结果，所述大鼠分别：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，用在丙二醇中的布洛芬(IBU/pg)处理，用使用丙酮制备的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU 2∶1/油)油处理，和用使用丙酮制备的在丙二醇中的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU/pg)处理。

发明详述

发明人已经发现，可以制备富集的和/或纯化的组合物，其包含一种磷脂(PL)或多种磷脂(PL)和一种选择性的和/或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID，它包括NSAID和COX-2抑制剂)或多种sns-NSAID，其中复合物的特征在于，所述NSAID提高PL在极性溶剂中的溶解度，在该溶剂中PL具有中等溶解度、低溶解度或不溶。一旦去除溶剂，PL-sns-NSAID组合物代表着包含基本上纯的PL-NSAID缔合复合物的组合物。发明人已经发现，与单独的sns-NSAID相比，这样的高纯度PL-sns-NSAID组合物具有提高的胃肠(GI)安全性或降低的GI毒性。发明人还已经发现，与不在上面的极性溶剂过程中形成的PL-NSAID组合物相比，纯化的PL-NSAID组合物具有类似的且经常更好的GI安全性，其当然具有比单独的NSAID更好的GI安全性和提高的功效。在体内动物试验中，这些纯化的PL-NSAID组合物也表现出与通过常规方法制备的PL-NSAID组合物类似的且经常更好的NSAID功效。除非另有说明，比例是重量百分比(wt.％)比例，且以重量百分比(wt.％)表达所有配方。尽管现在正在开发各种分析证据来确定在P1与选择性的和非选择性的非甾体抗炎药(例如，传统的NSAID和COX-2抑制剂)之间形成的缔合复合物的确切性质和结构，这样的复合物的确切性质和结构仍然有待讨论。因而，术语缔合复合物用于指PL和sns-NSAID或能提高PL在极性溶剂(例如丙酮)中的溶解度的任何其它化合物之间的任何化学的和/或物理的缔合。

本发明的新方法和由其衍生的组合物是基于发明人的观察结果，即PL在某些极性有机溶剂中具有有限的溶解度，且NSAID会大大提高PL在这样的溶剂中的溶解度。发明人认为，该提高的PL溶解度是由PL和NSAID之间的缔合复合物的形成造成的。实际上，NSAID可以使可溶于溶剂中的PL的量从数克/15mL溶剂(＜2克/15mL)提高到＞50克/15mL溶剂。另外，发明人认为，且分析数据证实，一旦去除溶剂后得到的组合物代表着纯化的PL-NSAID缔合复合物，这允许在这些纯化的PL-NSAID缔合复合物的基础上制备NSAID组合物。然后，可以经口地、肠内地、直肠地、局部地、静脉内地、动脉内地，将这样的NSAID组合物施用给动物，包括人，或直接施用于组织部位，以改善炎症、疼痛、发热、血栓形成或已知NSAID对其具有治疗价值的其它症状和/或病症(例如，癌症，心脏病，阿尔茨海默病)。

另外，根据本发明的方法制备的纯化的PL-NSAID缔合复合物和由此制备的组合物总体已经显示出具有比单独的NSAID或通过常规方法制备的PL-NSAID组合物更优的胃肠(GI)安全性和提高的治疗功效。发明人认为，本发明的方法将允许制备其它将由PL获益的纯化的磷脂-药物试剂(PL-PA)缔合复合物。

可以单独，或与下面的构成与本申请有关的现有技术的外国专利、美国专利和美国未决专利申请中所述的组合物联合，使用本发明的组合物：GB 0092121，US 4,332,795；US 4,369,182；US 4,378,354；US 4,421,747；US 4,528,193；US 4,687,766；US 4,748,157；US4,918,063；US 4,950,656；US 5,032,585；US 5,043,329；US5,763,422；US 5,955,451；USSN 10/433,454；USSN 10/909748，和USSN 10/909751，其在这里通过参考并入。

本发明的组合物可以用于治疗现在已知或以后发现sns-NSAID和PL对其有效的任何医学病症。因而，该组合物可以用于减轻或抑制疼痛、炎症、发热、血小板聚集等，和/或治疗或预防现在已知或以后发现sns-NSAID对其有效的疾病，例如关节炎(类风湿性关节炎和骨关节炎)，其它慢性炎性疾病，中风，外伤性脑损伤，脊髓损伤，外周神经病，其它神经学疾病，阿尔茨海默病，血栓形成，心肌梗塞，其它心血管疾病，某些种类的癌症，包括但不限于，结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌、白血病、胰腺癌、食管癌或其它类似的癌症。

本发明广泛地涉及制备纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的方法。该方法大体包括下述步骤：在适合生成纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的条件下，使一种sns-NSAID或多种sns-NSAID与一种PL或多种PL在极性溶剂中接触，其中纯化的PL-sns-NSAID缔合组合物会提供比单独的sns-NSAID或常规制备的PL-sns-NSAID组合物提高的GI安全性和类似的或提高的治疗功效和/或有效性。

本发明也广泛地涉及一种组合物，其包含纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物，其中所述纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物通常具有比单独的sns-NSAID或常规制备的PL-sns-NSAID组合物更优的GI安全性和提高的功效。在给定温度下，纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物可溶于极性溶剂中，其中PL的量超过了在没有该sns-NSAID的情况下在这些条件下可溶于该溶剂中的PL的量。

制备纯化的PL-缔合复合物的方法

在本发明的一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：在适合生成纯化的PL-NSAID缔合复合物的条件下，使一种sns-NSAID或多种sns-NSAID与一种PL或多种PL在极性溶剂中接触。去除溶剂后，纯化的PL-NSAID缔合复合物或由此制备的组合物会提供与常规制备的PL-NSAID缔合复合物类似的且经常提高的GI安全性，和比单独的NSAID更优的GI安全性。

在本发明的另一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：在去除溶剂后适合生成纯化的PC-NSAID缔合复合物的条件下，使一种NSAID或多种NSAID与一种磷脂酰胆碱(PC)或多种PC在极性溶剂中接触。

在本发明的另一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：在溶解温度，将一定量的NSAID和一定量的PL加入极性溶剂，持续溶解时间，所述温度和时间足以完全溶解所述NSAID和PL。一旦NSAID和PL溶解，将溶液冷却，持续冷却时间，冷却至冷却温度，所述时间和温度足以沉淀出基于最初加入的NSAID的量超过PL的缔合量的任何PL。所述缔合量是在给定条件下能与所述量的NSAID缔合的PL的最大量，即在冷却后不形成PL沉淀。当然，PL的最大量随每种PL-NSAID组合和使用的每种溶剂而变化。通过过滤、离心等方法，去除经冷却形成的任何沉淀。去除沉淀后，将溶剂去除至低于希望水平，FDA要求的水平，或低于对溶剂的检出限，以制备纯化的PL-NSAID缔合复合物。

在本发明的另一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：在溶解温度，将NSAID和PC加入极性溶剂，持续溶解时间，其中所述溶解时间和溶解温度足以完全溶解所述NSAID和PC。溶解伴随微量沉淀或没有沉淀后，在去除温度，通过溶剂去除步骤去除溶剂，持续去除时间，所述温度和时间足以将溶剂去除至低于希望的低水平，FDA要求的水平，或低于对溶剂的检出限，以制备纯化的PC-NSAID缔合复合物或组合物。

在本发明的另一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：在一定温度，在极性溶剂中合并一种NSAID或多种NSAID和一种PL或多种PL，持续一定时间，所述温度和时间足以完全溶解所述NSAID和PL，形成PL-NSAID溶液。然后，将PL-NSAID溶液快速冷却至足以允许任何过量的PL从溶液中沉淀出来的沉淀温度。温度的突然下降，会使游离PL从溶液中沉淀出来，形成富集的或纯化的PL-NSAID缔合组合物。然后，在有或没有真空的情况下和/或在有或没有加热的情况下，在惰性气氛下，通过蒸发去除溶剂，以回收富集的或纯化的PL-NSAID缔合组合物。或者，可以通过低压冻干、冷冻干燥或其它类似的溶剂去除方法，去除溶剂。一旦已经确定不会在冷却过程中导致PL沉淀的PL与NSAID的特定比例，则可以取消冷却和可能的过滤步骤，而不丧失所得到的PL-NSAID缔合组合物的活性。

在本发明的另一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：在溶解温度，将COX-2抑制剂和PC加入极性溶剂，持续溶解时间，其中所述溶解时间和溶解温度足以完全溶解所述COX-2抑制剂和PC。溶解伴随微量沉淀或没有沉淀后，在去除温度，通过溶剂去除步骤去除溶剂，持续去除时间，所述温度和时间足以将溶剂去除至低于希望的低水平，FDA要求的水平，或低于对溶剂的检出限，以制备纯化的PC-NSAID缔合复合物或组合物。

施用纯化的PL-缔合复合物的方法

在本发明的另一个实施方案中，公开了一种包括下述步骤的方法：根据一种给药方案，将药学上有效量的本发明的纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物施用给动物，包括人。所述给药方案可包括一个或多个给药步骤，其中每个给药步骤可以选自：经口的给药步骤，肠内的给药步骤，直肠的给药步骤，局部的给药步骤，鼻内的给药步骤，无菌制品的静脉内的给药步骤，无菌制品的动脉内的给药步骤，无菌制品的直接组织注射给药步骤，和鼻递送给药步骤，例如喷雾入鼻或鼻冲洗。当然，取决于给药途径和本发明的富集的和/或纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的形式，所述组合物还可以包括其它组分，所述组分适用于提高稳定性(例如，贮存期)，增强分散，提高生物利用度，优化治疗活性等。对于肠胃外给药(例如，静脉内给药，动脉内给药，直接组织给药或鼻递送给药步骤，例如喷雾入鼻或鼻冲洗)，通常将本发明的富集的和/或纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物分散、悬浮或溶解于盐水或其它可接受的等渗溶液中，并在递送前无菌过滤，如在这里通过参考并入的08/02/04提交的同时待审的美国专利申请系列号10/909748中所述。

纯化的PL-NSAID组合物

在本发明的某些实施方案中，所述组合物包括纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物，其中所述纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物具有比单独的sns-NSAID或常规制备的PL-sns-NSAID组合物更优的GI安全性和提高的功效。

在本发明的某些实施方案中，所述药物包括本发明的纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物，其中所述药物是下述形式：软或硬明胶胶囊，片剂，具有不透水的包衣的片剂，在生物相容的油中的分散剂，含水悬浮剂等。

在本发明的某些实施方案中，所述组合物包含富集的和/或纯化的PL-NSAID缔合复合物，后者源自PL-NSAID混合物的极性溶剂可溶的提取物，其中所述富集的和/或纯化的PL-NSAID缔合复合物具有比单独的NSAID或常规制备的PL-NSAID组合物更优的GI安全性和提高的功效。

在本发明的某些实施方案中，所述药物包括纯化的PL-NSAID缔合复合物，后者源自PL-NSAID混合物的极性溶剂可溶的提取物，其中所述药物具有比单独的NSAID或常规制备的PL-NSAID缔合复合物更优的GI安全性和提高的功效。

在本发明的某些实施方案中，所述组合物包含富集的和/或纯化的PL-COX-2抑制剂缔合复合物，后者源自PL-COX-2抑制剂混合物的极性溶剂可溶的提取物，其中所述富集的和/或纯化的PL-COX-2抑制剂缔合复合物具有比单独的COX-2抑制剂或常规制备的PL-COX-2抑制剂组合物更优的GI安全性和提高的功效。

在本发明的某些实施方案中，所述药物包括纯化的PL-COX-2抑制剂缔合复合物，后者源自PL-COX-2抑制剂混合物的极性溶剂可溶的提取物，其中所述药物具有比单独的COX-2抑制剂或常规制备的PL-COX-2抑制剂缔合复合物更优的GI安全性和提高的功效。

对于大多数sns-NSAID，不会导致PL沉淀的重量比是至少1∶2(sns-NSAID∶PL)。对于布洛芬、氟比洛芬或萘普生磷脂制剂，重量比是至少1∶2，生成在丙酮中可溶的缔合复合物，并生成具有类似于且经常优于(尤其是在GI毒性方面)单独的NSAID的性质的组合物。在大多数实施方案中，1∶2重量比代表着可接受的商业应用材料。对于阿司匹林和其它水杨酸衍生物，1∶2的重量比是有效的，但是约1∶3至约1∶4的重量比似乎具有某种程度上更优的GI安全性。

筛选化合物的方法

本发明也涉及就使PL在溶剂中增溶的能力筛选化合物的方法，在该溶剂中所述磷脂具有中等溶解度、低溶解度或不溶。所述方法包括下述步骤：将一定量的磷脂溶于所述磷脂在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的溶剂中，其中所述量足以形成PL沉淀。一旦形成具有PL沉淀的PL溶液，在有或没有加热下，在搅拌下向其中加入化合物。如果一些或全部沉淀溶解，则确定基本上完全消除沉淀所需的化合物的量。如果形成没有沉淀的溶液，则去除溶剂，形成PL和在该溶剂中可溶的化合物的组合物。发明人认为，能使PL增溶的化合物是能与PL形成缔合复合物的化合物。如果该化合物具有生物活性(药学或是营养学活性)，则该化合物可能具有改变该化合物的功效的属性。

本发明也涉及就使磷脂在溶剂中增溶的能力筛选化合物的替代方法，在该溶剂中所述磷脂具有中等溶解度、低溶解度或不溶。所述方法包括下述步骤：将待筛选化合物溶于所述磷脂在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的溶剂中。制备化合物溶液后，在有或没有加热下，在搅拌下加入超过它在该溶剂中的溶解度的量的PL。如果没有形成沉淀，或如果形成沉淀后又消失，则确定导致形成沉淀所需的PL的量。如果形成没有沉淀的溶液，则可以去除溶剂，形成PL和在该溶剂中可溶的化合物的组合物。发明人认为，能使PL增溶的化合物是能与PL形成缔合复合物的化合物。如果该化合物具有生物活性(药学或是营养学活性)，则该化合物可能具有改变该化合物的功效的属性。

本发明的该方法的另一个实施方案包括，将PL和药学活性剂(PA)溶于极性溶剂中。通常，加热极性溶剂来促进PL和PA的溶解，升高的温度是在室温和所选溶剂的沸点之间。在某些实施方案中，升高的温度是约30℃至约90℃。在其它实施方案中，升高的温度是约35℃至约75℃。在其它实施方案中，升高的温度是约40℃至约60℃。通常在混合或搅拌下进行溶解，以促进溶解和充分的试剂相互作用，并且持续直到PL和PA完全溶于溶剂中。在某些实施方案中，溶解通常花费约10分钟至约120分钟。在其它实施方案中，溶解花费约15至90分钟，但是，根据使用的PA、PL和极性溶剂，可以使用更短的和更长的时间。

一旦溶解完全，则将溶液冷却至足以使超过PL-PA缔合复合物量的任何PL从溶液中沉淀出来的冷却温度。冷却温度通常是低于用于完全溶解所述PA和PL的升高的温度、并允许未缔合的PL从最终的组合物中去除的温度。冷却温度取决于使用的PA、使用的PL、和使用的溶剂。在本发明的该方法的某些实施方案中，冷却温度低于用于溶解PA和PL的升高的温度，且是0℃或以上。在本发明的该方法的其它实施方案中，冷却温度是约室温(约25℃)至约0℃。在本发明的该方法的其它实施方案中，冷却温度是约0℃至约20℃。在本发明的该方法的其它实施方案中，冷却温度是约0℃至约10℃。在本发明的该方法的其它实施方案中，冷却温度约0℃至约4℃。

如果形成沉淀，则通过本领域已知的任何技术，包括但不限于重力过滤、真空过滤、施压过滤、离心、半透膜分离、微孔过滤或其它类似的将沉淀与上清液分离除去的方法，去除沉淀。冷却后，将溶液维持在所述冷却温度，持续冷却时间，所述时间足以允许沉淀任何过量的PL，并生成包含纯化的PL-PA缔合复合物的上清液。在某些实施方案中，冷却时间是约10至约60分钟。在其它实施方案中，冷却时间是约15分钟至约30分钟。但是，根据溶剂和PL-PA复合物，可以使用更短的或更长的时间。当然，本领域的普通技术人员会认识到，冷却步骤包括2个子步骤：冷却至给定温度，和将得到的组合物维持在该给定温度。冷却速率和维持时间都可以变化，且取决于使用的PA、PL和溶剂。

然后去除溶剂，生成纯化的PL-PA缔合复合物。通常，通过蒸发，持续足以使溶剂浓度降低至或低于可接受低的浓度的蒸发时间，去除溶剂。在某些实施方案中，蒸发在惰性气氛下进行，且可以在有或没有真空的情况下进行。在其它实施方案中，溶剂去除技术是旋转蒸发，这包括在存在真空和加热以促进溶剂去除的条件下的液体旋转。在其它实施方案中，溶剂去除的技术是，将溶液在真空下的干燥器中放置延长的时间，直到在组合物中仅仅可检测到可忽略量的溶剂。在其它实施方案中，溶剂去除技术是真空干燥箱溶剂去除，其中所述干燥箱温度通常是在溶剂沸点±约10℃的范围内加热。在其它实施方案中，对于沸点低于约100℃的溶剂，溶剂去除技术是直接蒸馏、快速蒸馏或真空蒸馏。在某些实施方案中，真空蒸馏是优选的。直接蒸馏总是一个选择，当然，条件是蒸馏温度不会不利地影响PA、PL或PL-PA缔合复合物。

尽管发明人已经列出了用于溶剂去除的几种蒸发和蒸馏方法，也可以使用其它技术，包括但不限于，喷雾干燥，冷冻干燥，低压冻干等。

当然，可以单独地或共同地使用任何这些溶剂去除技术，条件是，得到的产物(它可以是固体、半固体、液体或油)基本上不含有溶剂，或最终产物中的溶剂浓度是在或低于希望的低值。希望的低溶剂值通常是在或低于FDA在其关于药物试剂的纯度的规定中设定的水平。在某些实施方案中，低值是在或低于对于从测量药物组合物中的残余溶剂认可的分析技术的检出限的值。

一旦已经定量地降低溶剂浓度或将它降低至希望的低值，可以储藏最终产物供将来使用，或立即加工成希望的递送系统，例如丸剂(包衣的或未包衣的)、软或硬凝胶胶囊、注射剂、软膏等。如果储藏，在某些实施方案中，将最终产物置于惰性气氛下的容器中。

在一个实施方案中，将溶液快速冷却至足以允许任何过量的PL从溶液中沉淀出来的沉淀温度。认为温度的突然下降可更好地促进游离的或未缔合的PL的沉淀，生成优异的富集的和/或纯化的PL-PA缔合组合物。

尽管上面的筛选方法适用于确定化合物(包括药学活性剂)是否会与PL形成缔合复合物，所述方法也适用于生产PL-sns-NSAID缔合复合物。但是，一旦确定sns-NSAID与PL的范围，则该方法可以简化成，在足以促进复合物形成的溶解温度和溶解时间，在溶剂中混合各成分，然后进行简单的溶剂去除。通常，得到的组合物是均质的油或均质的粘性流体。

合适的给药技术

合适的给药程序包括但不限于，经口给药，肠内给药，直肠给药，局部给药，无菌制品的静脉内给药，无菌制品的动脉内给药，无菌制品的直接组织给药，肌肉内给药，皮下微量泵给药，或经鼻给药，例如喷雾入鼻或通过鼻冲洗。另外，可以将一种或多种这样的给药组合成一种给药方案。因而，给药方案可以象本发明组合物的连续的、定期的或间歇的经口给药一样简单，到象连续地、定期地或间歇地静脉内给药、动脉内给药、直接组织给药、肌肉内给药、局部给药、经口给药和经鼻给药一样复杂，其中更复杂的给药方案会适用于战场和其它紧急情况下的给药方案。

当然，根据给药途径，本发明的纯化的PL-NSAID缔合复合物还可以包括其它组分，所述组分适用于提高稳定性(例如，贮存期)，增强分散，提高生物利用度，优化治疗活性等。

对于肠胃外给药(例如，静脉内给药，动脉内给药，肌肉内给药，或直接组织给药)，通常将本发明的富集的和/或纯化的PL-NSAID缔合复合物悬浮于盐水或其它可接受的等渗溶液中，并在递送前无菌过滤，如在这里通过参考并入的08/02/04提交的同时待审的美国专利申请系列号10/909748中所述。

本发明的组合物包含富集的和/或纯化的PL-NSAID缔合复合物，与单独的PA或常规制备的PL-NSAID组合物相比，其具有优异的GI安全性和提高的功效。在某些实施方案中，本发明的组合物包括一种或多种PL和一种或多种NSAID或化学上相关的在极性溶剂(例如丙酮)中具有溶解度的药物试剂，例如对乙酰氨基酚。非常适用于本发明的组合物中的药物试剂具有与它们的给药相关的不利副作用，例如GI溃疡、疼痛、消化不良、胃灼热、粘膜炎、炎症、糜烂、出血和/或穿孔或其它不利的GI副作用或有限的生物利用度。

在某些实施方案中，本发明的药物包括本发明的纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物，其中所述药物是下述形式：软或硬明胶胶囊，片剂，具有不透水的包衣的片剂，在生物相容的油中的分散剂，含水悬浮剂等。

合适的试剂

适用于本发明的磷脂包括但不限于下面通式的磷脂：

其中R¹和R²是饱和的或不饱和的8-32个碳原子的取代基；R³是H或CH₃，且X是H或COOH；且R⁴是＝O或H₂，或它们的混合物或组合。发现特别有用的本发明的某些实施方案中的磷脂化合物是二亚油酰磷脂酰胆碱(DLL-PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)和卵磷脂酰胆碱(卵-PC或PC_e)。在DPPC(一种饱和磷脂)中，饱和的脂肪族取代基R¹和R²是CH₃-(CH₂)₁₄，R³是CH₃，且X是H。在DLL-PC(一种不饱和磷脂)中，R¹和R²是CH³-(CH₂)₄-CH＝CH-CH₂-CH＝CH-(CH₂)₇，R³是CH₃，且X是H。在卵PC(不饱和磷脂的混合物)中，R¹主要包含饱和的脂肪族取代基(例如，棕榈酸或硬脂酸)，且R²主要是不饱和的脂肪族取代基(例如，油酸或花生四烯酸)或它们的混合或组合。

两性离子磷脂的示例性实例包括，但不限于，磷脂酰胆碱类，例如磷脂酰胆碱(PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，其它二饱和磷脂酰胆碱类，磷脂酰乙醇胺类，磷脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸类鞘磷脂或其它神经酰胺，或各种其它的两性离子磷脂，含有磷脂的油例如源自大豆的卵磷脂油，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂酰胆碱，二亚油酰磷脂酰胆碱(DLL-PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，大豆磷脂酰胆碱(大豆-PC或PC_s)和卵磷脂酰胆碱(卵-PC或PC_E)。在大豆-PC中，除了饱和的磷脂(棕榈酸和硬脂酸)外，它是不饱和磷脂[油酸，亚油酸和亚麻酸]的混合物。在某些实施方案中，两性离子磷脂包括但不限于，二棕榈酰磷脂酰胆碱，磷脂酰胆碱，或它们的混合物或组合。

合适的选择性的和非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)包括但不限于，非选择性的非甾体抗炎药(NSAID)和选择性的非甾体抗炎药(NSAID)或COX-2抑制剂或它们的混合物或组合。

合适的非甾体抗炎药(NSAID)包括但不限于，丙酸类药物例如苯氧布洛芬钙(Nalfon)，氟比洛芬(Ansaid)，舒洛芬，苯洛芬，布洛芬(处方药Motrin)，布洛芬(200mg.非处方药Nuprin，Motrin1B)，酮洛芬(Orduis，Oruvall)，萘普生(Naprosyn)，萘普生钠(Aleve，Anaprox，Aflaxen)，奥沙普秦(Daypro)等；乙酸类药物例如双氯芬酸钠(Voltaren)，双氯芬酸钾(Cataflam)，依托度酸(Lodine)，吲哚美辛(Indocin)，酮咯酸氨丁三醇(Acular，Toradol肌肉内用药)，酮咯酸(口服Toradol)等；酮类药物例如萘丁美酮(Relafen)，舒林酸(Clinoril)，托美丁钠(Tolectin)等；芬那酸类药物例如甲氯灭酸钠(Meclomen)，甲芬那酸(Ponstel)等；昔康类药物例如吡罗昔康(Dolibid)等；水杨酸类药物例如水杨酸，水杨酸镁，二氟尼柳(Feldene)，阿司匹林等；吡唑啉酸类药物例如羟布宗(Tandearil)，保泰松(Butazolidin)等；对乙酰氨基酚(Tylenol)等，或它们的混合物或组合。在某些实施方案中，NSAID是布洛芬，阿司匹林，水杨酸，萘普生，吲哚美辛，双氯芬酸，吡罗昔康，氟比洛芬，酮洛芬和它们的混合物或组合.

用于本发明的合适的COX-2抑制剂包括但不限于，塞来考昔，美洛昔康，lumiracoxib，美洛昔康，吡罗昔康，或新批准的COX-2抑制剂或它们的混合物或组合。

用于本发明的合适的极性溶剂包括但不限于，酮类例如丙酮，甲基乙基酮(MEK)，甲基丁基酮，甲基异丁基酮等，乙酸酯类例如乙酸甲酯，乙酸乙酯，乙酸丙酯，乙酸异丙酯，乙酸丁酯，乙酸异丁酯等，腈类例如乙腈等，醚类例如二乙醚，四氢呋喃等，甲酸酯类例如甲酸乙酯，N，N-二甲基乙酰胺，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，硝基甲烷，氯化烃类例如四氯化碳，氯仿，1，2-二氯乙烷，1，1-二氯乙烯，1，2-二氯乙烯，二氯甲烷，1，1，1-三氯乙烷等，或它们的混合物或组合。在某些实施方案中，溶剂是丙酮，但是溶剂的选择将取决于所选择的药物试剂和磷脂。因而，溶剂必须能容易地溶解药物试剂，而磷脂在没有该药物试剂的情况下，必须具有中等或低溶解度。在某些实施方案中，磷脂在升高的温度时具有更高的溶解度，且在较低温度时具有较低的溶解度。

合适的辅剂(辅助添加剂)包括但不限于，控制pH的辅剂和第二治疗佐药，后者包括但不限于：(1)抗炎剂例如抗组胺剂，皮质激素等，或它们的混合物或组合；(2)抗微生物剂例如丁香油酚，愈创木酚，氯化苄烷氨等，或它们的混合物或组合；(3)抗生素剂例如杆菌肽，硫酸新霉素，硫酸庆大霉素，红霉素等，或它们的混合物或组合；(4)止血剂例如氧化纤维素，凝血酶，羧甲基纤维素等，或它们的混合物或组合；(5)麻醉剂例如普鲁卡因，利多卡因，甲哌卡因等，或它们的混合物或组合；(6)抗真菌剂例如苯甲酸，水杨酸，两性霉素B，咪康唑，制霉素，toinaftate等，或它们的混合物或组合；(7)可以提高或增强本发明的组合物的治疗益处而不干扰酶抑制剂的抑制活性的其它添加剂；或它们的混合物或组合，或任何上面各组列出的佐药。

通过中和已知会加重暴露或累及的组织的酶损伤的粪便组分来控制pH的辅剂，包括但不限于，有效浓度的无机和有机缓冲剂(pK为2.0至6.0)，以将pH控制在约3.0至约7.0，例如碳酸盐、马来酸盐、硼酸盐、柠檬酸盐、己二酸盐等，或它们的混合物或组合。将pH控制在约3.0至约6.0，会预防氨散发，中和胆汁酸/盐活性，并有助于使酶活性最小化。弱碱性的琼脂糖、葡聚糖、纤维素和聚苯乙烯的阴离子交换树脂会多价螯合胆汁盐/酸或增强胆汁盐/酸的中和，并有助于pH控制，或它们的混合或组合。

适用于溶解、稳定、乳化和/或悬浮主要的化学或治疗组分(酶灭活剂)和次要的化学或治疗组分(佐药)的化学赋形剂，包括但不限于，乳化剂，表面活性剂，助悬剂，或它们的混合物或组合。

合适的乳化剂包括，但不限于：(1)单分子膜例如月桂酸酯，脱水山梨糖醇等，或它们的混合物或组合；(2)多分子膜例如阿拉伯胶，明胶等，或它们的混合物或组合；(3)固体颗粒膜例如膨润土等，或它们的混合物或组合；(4)表面活性剂例如天然的或合成的、阴离子型、阳离子型或非离子型表面活性剂，或它们的混合物或组合；或(5)上面列出的乳化剂的组合或混合物。

合适的局部制剂包括但不限于，软膏剂，乳剂，悬浮液，粉剂等。

合适的生物相容的乳化剂包括但不限于，批准用于人或动物消费或内用的任何离子型或非离子型乳化剂或表面活性剂。示例性实例包括乙酰基化的单酸甘油酯，脂肪酸的铝盐，阿拉伯半乳聚糖，面包酵母聚糖，碳酸钙，脂肪酸的钙盐，角豆胶(卡罗布胶)，产碱杆菌多糖，食用脂肪或油或形成食用脂肪的脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯的二乙酰基酒石酸酯，丁二酸二辛酯磺酸钠，磷酸氢二钠(X-ref-磷酸钠，单-，二-，&三-)，乙氧基化的甘油单酯和甘油二酯，Eucheuma cottonii提取物，Eucheuma spinosum提取物，脂肪酸，(铝、钙、镁、钾和钠)的盐，用β-淀粉酶处理的正辛烯基琥珀酸酐酯化的食物淀粉，呋喃唑酮，丹麦琼脂(Furcelleran)，铵、钙、钾、或钠的盐，印度胶，Gigartina提取物，脂肪酸的乳酸甘油酯(Glyceryl-lacto esters)，己糖醇油酸酯，羟基化的卵磷脂，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，乳酰化(Lactylated)脂肪酸甘油酯和丙二醇酯，脂肪酸的乳酸酯(Lactylic esters)，卵磷脂，羟基化的卵磷脂，甲基乙基纤维素，食用脂肪或油类或形成食用脂肪的酸的甘油单酯和甘油二酯，柠檬酸单异丙基酯，食用脂肪或油类或形成食用脂肪的脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯磷酸单钠盐衍生物，Myrj 45(聚氧乙烯8-硬脂酸酯，牛胆汁提取物，果胶(包括改性的果胶)，聚乙二醇(400)二油酸酯，脂肪酸聚甘油酯，聚桂醇400单油酸酯和二油酸酯，聚山梨醇酯60(聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单硬脂酸酯)，聚山梨醇酯65(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇三硬脂酸酯)，聚山梨醇酯80(聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单油酸酯)，脂肪酸的钾盐，丙二醇藻酸酯(藻酸的丙二醇酯)，脂肪和脂肪酸的丙二醇单酯和二酯，完全氢化的、超甘油化的(superglycerinated)油菜籽油，酸式焦磷酸钠，磷酸铝钠，次磷酸钠，十二烷基硫酸钠，偏磷酸钠，甲基硫酸钠，果胶酸钠，脂肪酸的钠盐，硬脂酰乳酸钠，磺基乙酸钠衍生物(甘油单酯以及甘油二酯)，脱水山梨糖醇单油酸酯，脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，琥珀酰化的甘油单酯，琥珀酰硬脂酸酯(succistearin)(琥珀氢酸硬脂酰丙二醇酯)，乙酰蔗糖异丁酸酯(SAIB)，蔗糖脂肪酸酯，硫酸化油酸丁酯，磷酸三钠，黄原胶等，或它们的混合物或组合。

合适的中性脂类包括，但不限于，任何中性脂类，如甘油三酯。对于代表性中性脂类的部分列表，如甘油三酯，特别参考美国专利4,950,656和5,043,329。饱和的和不饱和的甘油三酯都可用于本发明组合物中，包括诸如三棕榈酸甘油酯(饱和的)，三油酸甘油酯和三亚麻油酸甘油酯(不饱和的)等甘油三酯。但是，这里列出这些具体的甘油三酯只是为了便于理解，它们只是多种有用的甘油三酯的代表，不旨在包括全部。

合适的生物相容的、生物可降解的聚合物的非限制性实例包括，但不限于，聚(丙)交酯，聚乙交酯，聚己内酯，聚酐类，聚酰胺，聚氨基甲酸酯，聚酯酰胺，聚原酸酯，聚二烷酮，聚缩醛类，聚缩酮类(polyketals)，聚碳酸酯，聚原碳酸酯，含磷腈类聚合物(polyphosphazenes)，聚羟基丁酸酯，聚羟基戊酸酯，聚亚烷基草酸酯(polyalkylene oxalates)，聚亚烷基琥珀酸酯，聚(苹果酸)，聚(氨基酸)，聚(甲基乙烯基醚)，聚(顺丁烯二酸酐)，甲壳质，脱乙酰壳聚糖，和其共聚物、三元共聚物或单体高聚物，或它们的混合物或组合。在某些实施方案中，优选的生物可降解的聚合物都通过水解降解。

典型地，聚合物为表面易蚀的聚合物，如聚酐类，或本体易蚀的聚合物，如聚原酸酯。聚(1-乳酸)(PlLA)，聚(d1-乳酸)(PLA)，聚(乙醇酸)(PGA)，聚己内酯，其共聚物、三元共聚物或单体高聚物，或它们的混合物或组合。在某些优选的实施方案中，聚合物是优选的生物相容的、生物可降解的共聚物。生物可降解的共聚物是乳酸和乙醇酸共聚物，有时称为聚(d1-乳酸-共聚-乙醇酸)(PLG)。在某些优选的实施方案中，聚(DL-乳酸-共聚-乙醇酸)的共聚单体(丙交酯∶乙交酯)比例是，约100∶0至约50∶50的乳酸∶乙醇酸。在某些优选的实施方案中，共聚单体比例是85∶15至约50∶50的乳酸比乙醇酸。PLA和PLG的混合物，优选地，约85∶15至约50∶50的PLG∶PLA，也用来制备聚合物材料。

PLA，P1LA，PGA，PLG及其组合或混合物或共混物是被批准用于人类临床使用的合成的聚合物。它们目前被用作手术缝合材料，用在控释装置中，以及用于其它的医学和药学应用。它们是生物相容的，且它们的降解产物为低分子量化合物，如乳酸和乙醇酸，它们能进入正常的代谢途径。而且，聚(乳酸-共聚-乙醇酸)的共聚物有一个优点，即降解速率的范围很宽，可从几天至几年，这可通过简单地改变乳酸与乙醇酸的共聚物比例而实现。

为了促进用于生物学应用的聚合物的生物降解，本发明组合物还可包括加入可以促进组合物中所用聚合物的生物降解的酶。在某些优选的实施方案中，酶或类似试剂是蛋白酶或具有酯水解能力的水解酶。这类酶包括，但不限于，蛋白酶K，菠萝蛋白酶，链霉蛋白酶E，纤维素酶，葡聚糖酶，弹性蛋白酶，纤溶酶链激酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶，木瓜蛋白酶，木瓜凝乳蛋白酶，胶原酶，枯草杆菌蛋白酶(subtilisn)，chlostridopeptidase A，无花果蛋白酶，羧基肽酶A，果胶酶，果胶酯酶，氧化还原酶，氧化酶等。包括适当量的这类降解促进剂，可以用于调节植入物持续时间。

合适的生物相容的油包括但不限于，FDA批准用于人或动物消费的任何油，包括天然的油，例如植物或动物油或它们的衍生物，或合成的油，尤其是富含磷脂的天然油，例如大豆卵磷脂油。这样的油的示例性实例包括，精油类、植物油和氢化植物油，动物油，如花生油、芸苔油、鳄梨油、红花油、橄榄油、玉米油、大豆油、芝麻油、维生素A、维生素D、维生素E、鱼油等。

本发明的制剂或组合物还可包括其他的化学物质，如抗氧化剂(如维生素A、C、D、E等)，微量金属和/或多价阳离子(铝、金、铜、锌、钙等)，表面活性剂和/或溶剂(如丙二醇/PPG、二甲基亚砜/DMSO、中链的甘油三酯/MCT等)，在制剂的制备过程中，还可加入无毒染色剂和风味增强剂，以改进稳定性、流动性/扩散性、渗透性、有效性和使用者接受性。

本发明的实施方案的实验细节的讨论

发明人已经发现，通过在有非甾体抗炎药(NSAID)例如布洛芬存在下，组合纯化的磷脂酰胆碱(PC)或富集PC的卵磷脂油与丙酮，无论是将NSAID首先、其次还是与PC同时加入丙酮，都可显著降低溶解和冷却后从丙酮中沉淀出来的物质的量。通常，在约40℃至约60℃的温度，将PC和NSAID在丙酮中溶解约15至约90分钟，其中根据PC，可以使用更短或更长的时间。PC和NSAID溶解在丙酮中后，通过将装有溶液的容器置于冰浴中约15至约30分钟，将丙酮溶液冷却至约0℃至约4℃的温度，其中根据PC和NSAID，可以使用更短或更长的时间。然后，离心所得到的混合物，并倾析上清液。然后，收集丙酮可沉淀物，并称重。然后，在约60℃至约110℃的升高温度，在烘箱中干燥上清液足够的时间，去除剩余的溶剂，其中所述足够的时间通常是1小时至几天。

使用该方法确定，系统地提高布洛芬与含有35％PC的卵磷脂油(P35 SB，购自American Lecithin，Oxford，CN)的重量比，以0.5的增量，比例从0.0∶1.0(无布洛芬)至2.5∶1.0，导致丙酮可沉淀物从50％逐步下降至＜8％，如图1所示。因而，布洛芬的存在，防止PC从丙酮中沉淀出来，生成纯化的PC-布洛芬缔合复合物。

在另一个体外实验中，将布洛芬的量保持恒定在0.5g，向其中加入递增量(从0.25g至1.0g)的纯化的大豆(＞90％纯)PC(Phosal90G，购自American Lecithin，Oxford，CN)。从图2可以看出，在达到1.0∶0.5g的90G∶布洛芬重量比之前，没有检测到丙酮可沉淀物。因而，当使用纯化的大豆卵磷脂磷脂时，最佳地在2∶1(PC∶布洛芬)的重量比获得纯化的PC-布洛芬缔合组合物。

体内实施例

基于这些实验，我们进行了2项体内实验来评价得到的2∶1重量比的纯化的PC∶布洛芬复合物的GI安全性和治疗有效性。应当注意，在啮齿动物测试系统中评价纯化的PC-布洛芬复合物之前，彻底去除丙酮。

在第一个体内实施例中，我们使用在用一氧化氮合成酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲基酯(L-NAME)处理的大鼠中NSAID-诱导的GI出血的急性啮齿动物模型，如在这里通过参考并入的Lichtenberger LM，WangZ-M，Romero JJ，Ulloa C，Perez JC，Giraud M-N，Barreto JC.Non-steroidal anti-inflammatory drugs(NSAIDs)associate withzwitterionic phospholipids：Insight into the mechanism andreversal of NSAID-induced gastrointestinal injury.NatureMedicine 1：154-158，1995所述。图3中的结果表明，使用可比较浓度的布洛芬(250mg/kg)，与在布洛芬对照或施用布洛芬(其预先暴露于丙酮，随后通过彻底蒸发去除溶剂)的动物组中观察到的结果相比，丙酮制备的PC(90G)-布洛芬复合物诱导GI出血的显著(＞95％)降低(如通过测量肠灌注液中的血红蛋白所测得的)。

在第二个体内实验中，我们对比了PC-布洛芬丙酮制品和单独的布洛芬(剂量为20和50mg/kg)在大鼠中的止痛活性，并对比了对亚阈剂量的吲哚美辛(1mg/kg)的反应。测量在大鼠上进行，其中在4天之前，将0.1mL完全弗氏佐剂(CFA)皮下地注射进左后爪的背面，以提高受影响的爪对压力的敏感性。在实验的当天，使用我们对Randall-Sellito技术(参见Lichtenberger LM，Ulloa C，Various AL，Romero JJ，Dial EJ，Illich PA，Walters ET.Zwitterionicphospholipids enhance aspirin′s therapeutic activity，asdemonstrated in rodent model systems.JPET 1996；277：1221-1227)的改良，测量基线(给药前)疼痛压力阈值，然后在给药试验试剂后2小时，重复该操作。图4表明，未修饰的布洛芬和丙酮制备的PC-布洛芬诱导明显的剂量依赖性的疼痛压力阈值升高，而亚阈剂量的吲哚美辛没有作用。另外，该止痛活性指数表明，丙酮制备的PC-布洛芬的治疗活性可以与未修饰的布洛芬相比，和/或比它更优。

啮齿动物急性胃溃疡模型

在第二个体内实验中，在该研究中，将阿司匹林与Phosal 35 SB(一种含有35％PC的大豆卵磷脂油)、P53(一种含有53％PC的卵磷脂油)或Phospholipon 90G(一种含有＞90％PC的大豆卵磷脂油)相组合，并以18mg/kg的阿司匹林剂量，灌胃地施用给禁食的大鼠，其中NSAID∶卵磷脂油重量比从1∶0.5系统地变化至1∶1、1∶2，如图8-10所示。另外，其它组大鼠接受等剂量的无卵磷脂油的阿司匹林，或等体积的盐水。45分钟后，用1mL 0.6N HCl灌胃地攻击所有动物，15分钟后，对动物实施安乐死，打开它们的胃，通过确立的方法评价胃损伤。

NSAID-诱导的GI毒性的慢性模型

在本方案中，大鼠接受左后踝皮下注射(通过连接到1mL注射器上的20号针)0.2mL完全弗氏佐剂(CFA；Sigma Chemical，St.Louis，MO)，诱导急性关节炎症。然后，将大鼠随机地分配到研究组，并立即开始使用盐水介质、布洛芬(50-75mg/kg，一日二次)或PC-布洛芬(50-75mg NSAID/kg，一日二次)的给药处理方案，连续4-5天。在研究阶段结束时，将大鼠称重，并通过CO₂吸入实施安乐死，随后双侧胸廓切开。通过测量体重的变化、血细胞比容值、肠穿孔的存在和GI灌注液中血红蛋白的浓度，我们评价了我们的布洛芬试验制品的毒性。另外，从发炎的关节收集组织样品，以便进行髓过氧化物酶测定，评价发炎的组织的嗜中性粒细胞活性。最后，测量踝厚度，以证实NSAID制品的抗炎作用，并使用改进的Randall和Selitto疼痛试验来显示止痛活性。Randall和Selitto及改进的Randall和Selitto疼痛试验的另外细节，可以参见Lichtenberger LM，Ulloa C，Vanous AL，Romero JJ，Dial EJ，Illich PA，Walters ET.Zwitterionicphospholipids enhance aspirin′s therapeutic activity，asdemonstrated in rodent model systems.JPET 1996；277：1221-1227；Lichtenberger LM，Romero JJ，DeRuijter WMJ et al.Phosphatidylcholine association increases theanti-inflammatory and analgesic activity of ibuprofen in acuteand chronic rodent models of inflammation：relationship toalterations in bioavailability and cyclooxygenase-inhibitoryactivity.JPET 298：279-287，2001 and Randall LO，Selitto JJ.A method of measuring analgesic activity of inflamed tissue.Arch hit Pharmacodyn 1957；111：409-419，其在这里通过参考并入。

测量下面的参数，来评价NSAID-诱导的GI毒性。

Δ体重

通过从大鼠最初的处理前体重减去它们在研究最后一天时的体重，计算经给药阶段的体重变化。这称作‘Δ’体重。

血细胞比容值

通过心脏穿刺将大鼠血抽入毛细管，然后离心，并测量红细胞级分与总血清级分的比例，测量血细胞比容

GI灌注液

在组织收集的过程中，用3ml冷盐水冲洗小肠的远端一半，如前所述测量收集的灌注液中的血红蛋白浓度，另外细节可以参见Lichtenberger LM，Graziani LA，Dial EJ，Butler BD，Hills BA.Role of surface-active phospholipids in gastric cytoprotection.Science 1983；219：1327-29，其在这里通过参考并入。

粪便血红蛋白

在安乐死时收集粪便颗粒，在水中均质化，如前所述测量它们的血红蛋白浓度，另外细节可以参见Lichtenberger LM，Graziani LA，Dial EJ，Butler BD，Hills BA.Role of surface-activephospholipids in gastric cytoprotection.Science 1983；219：1327-29，其在这里通过参考并入。

肠穿孔

纵向切开小肠的远端一半，并由不知道该组织是从哪个实验组收集的观察人员检查穿孔和/或粘连的存在。

评价NSAID抗炎和止痛活性

使用下面简要概述的技术，通过测量踝厚度、髓过氧化物酶活性和发炎的爪对压力的敏感性，评价测试NSAID制品的治疗活性，所述技术更详细地记载在Lichtenberger LM，Romero JJ，DeRuijter WMJet al.Phosphatidylcholine association，increases theanti-inflammatory and analgesic activity of ibuprofen in acuteand chronic rodent models of inflammation：relationship toalterations in bioavailability and cyclooxygenase-inhibitoryactivity.JPET 298：279-287，2001，其在这里通过参考并入。

踝厚度

如前所述由不知情观察人员使用测径器测量局部注射CFA的大鼠的踝厚度。

通过Randall Selitto疼痛敏感性试验评价止痛活性。

为了评价NSAID-诱导的止痛，我们使用对如前所述的Randall和Selitto的技术的改进。简而言之，这如下实现：将有意识的大鼠(该大鼠装在有机玻璃限制笼中)的后爪放置在Analgesymeter(LifeSciences Instruments，Woodlands Hills，CA)的平台上，该装置使用具有钝末端的小不锈钢探头随时间向大鼠爪子施加递增的压力(mmHg)。我们将″疼痛压力阈值″定义为，如“不知情的”观察人员所评定的，由趾伸展或试图将爪子从探头下缩回所指示的大鼠感觉疼痛时的最低压力。

髓过氧化物酶活性

在尸体剖检时，小心地从动物解剖发炎的关节组织，在1ml 0.5％溴化十六烷基三甲基铵于50mM磷酸钾缓冲液中的溶液中，通过Polytron匀浆约30秒。然后将匀浆冷冻(在液氮中)并融化3次，微量离心，收集上清液。根据前述方法，将10-20μl上清液样品加入微孔ELISA平板，然后加入200μl四甲基联苯胺底物。另外细节可以参见：Lichtenberger LM，Ulloa C，Vanous AL，Romero JJ，Dial EJ，Illich PA，Walters ET.Zwitterionic phospholipidsenhance aspirin′s therapeutic activity，as demonstrated inrodent model systems.JPET 1996；277：1221-1227和SuzukiK，Ota H，Sasagawa S，Sakatani T，Fujikura T.Assay method formyeloperoxidase in human polymorphonuclear leukocytes.AnalBiochem 1983；132：345-352，其在这里通过参考并入。以0-25ng/ml的剂量范围，向孔中加入在缓冲液中的过氧化物酶，替代上清液。在室温，在黑暗中温育15min后，在650nm的波长在ELISA平板读数器(Precision Microplate Reader，Molecular Devices，Menlo Park，CA)上读平板。

统计分析

通过方差分析然后进行显著性的Fisher LSD检验，进行组间对比，p≤0.05作为组间统计学显著性的界限。

本发明的实施例

实施例1

在本实施例中，将1.0克三倍强度的大豆卵磷脂(含有33-35％PC，Phosal 35SB，来自American Lecithin)溶于在预先配衡的50ml离心管中的15mL丙酮(含有0，0.5，1.0，1.5，2.0和2.5g布洛芬-酸)。将试管温热至约40℃至约45℃的温度15-30分钟，直到所有PL都溶解。在此时，向试管加入冷丙酮(4℃)至40mL标记，将试管置于冰浴中15分钟，在此期间搅拌溶液。然后，以2,000rpm离心试管15分钟，倾析上清液。然后，用搅拌棒打碎在试管底部的残余物，向试管中加入另外40mL冷丙酮。然后再将试管置于冰浴中15分钟，如上所述离心，并倾析上清液。然后将试管置于水平位置，并置于设定在105℃的烘箱中几天，直到达到恒定重量。图1中的结果表明，通过向极性溶剂加入递增量的布洛芬(IBU)，减少了丙酮沉淀出的PL的量，从50％(0IBU)至＜8％(IBU∶P35重量比为2∶1或更大)。

实施例2

在本实施例中，将0.5g布洛芬预先溶于装有15mL丙酮的预先配衡的试管中，向其中加入递增量(0.25g，0.5g，1.0g)的纯化的(＞90％)大豆PC(Phosal 90G，American Lecithin)。在另一组试管中，将递增量的PC加入装有15mL丙酮且无布洛芬的预先配衡的试管中。然后，如上所述处理试管，溶解且然后沉淀PC(通过将温度从40℃调至4℃)，并通过重量测量丙酮可沉淀物。在图2中图示的结果表明，在有布洛芬存在下，在PC∶IBU的重量比超过2∶1之前，微量或没有纯化的PC在丙酮中沉淀。这些结果表明，在该比例，几乎所有可利用的PC都以PC-布洛芬复合物的形式存在于丙酮相中。

实施例3

在本实施例中，如上所述制备PC-布洛芬，其中将90G∶布洛芬的重量比调整至2∶1，以确保最佳的复合物形成。但是，在本实验中，收集丙酮可溶相，并通过在N₂气流下蒸发，去除丙酮。然后，将装有PC-布洛芬物质的试管转移至干燥器，在真空下放置数天。对溶于丙酮中的未修饰的布洛芬-酸，进行与上述类似的操作，然后通过蒸发彻底去除溶剂。

为了评价丙酮-制备的PC-布洛芬的GI安全性，我们使用前述的评价大鼠肠出血的方法，所述大鼠用NO合成酶-抑制剂L-NAME处理，以提高它们对NSAID的GI副作用的敏感性。这如下实现：在大鼠灌胃接受1mL NSAID试验溶液(作为溶液或悬浮液)之前1小时、和之后1和6小时，给禁食的雄性Sprague Dawley大鼠(150-200g)皮下地注射L-NAME(20mg/kg)。在本实验中，以悬浮于去离子蒸馏水中的200mg/kg的剂量，给禁食的大鼠灌胃地施用盐水(对照)或布洛芬试验溶液(普通的布洛芬，丙酮制备的PC-布洛芬，或丙酮制备的布洛芬)。然后，让大鼠返回它们的笼子，无限制地接近食物和水，且在NSAID施用后16小时通过CO₂吸入实施安乐死，此时，如前所述，解剖肠的远端一半，并用10mL冷盐水冲洗，收集灌注液，进行血红蛋白分析。图3中的结果表明，与未经处理或暴露于丙酮的普通布洛芬酸(它们二者都会在大鼠中诱导严重的急性肠出血(＞800mg％血红蛋白))相比，用等剂量的丙酮制备的PC-布洛芬处理的大鼠遭受极少的或没有肠出血(＜25mg％血红蛋白)。这表明，丙酮制备的PC-NSAID明显比未修饰的布洛芬更安全(GI出血减少＞95％)。

实施例4

在本实验中，我们使用前面详细描述的啮齿动物模型系统，评价试验材料的止痛活性。这如下实现：最初通过将0.1mL完全弗氏佐剂(Sigma Chemical Co.St.Louis，MO)皮下地注射进左后爪的背面，诱导雄性Sprague Dawley大鼠后爪的炎症。为了评价NSAID-诱导的止痛，在诱导关节炎症后4天，我们使用了如前所述的Randall和Selitto的技术的改进。简而言之，这如下实现：将禁食的、有意识的大鼠(该大鼠装在有机玻璃限制笼中)的后爪放置在Analgesymeter(Life Sciences Instruments，Woodlands Hills，CA)的平台上，该装置使用具有钝末端的小不锈钢探头随时间向大鼠爪子施加递增的压力(mmHg)。我们将″疼痛压力阈值″定义为，如“不知情的”观察人员所评定的，由趾伸展或试图将爪子从探头下缩回所指示的大鼠感觉疼痛时的最低压力。

在本实验中，其结果显示在图4中，我们最初测量了给药前疼痛压力阈值，然后立即给禁食的大鼠灌胃地给药20或50mg/kg普通布洛芬或丙酮制备的PC-布洛芬。为了对比，我们还给一组大鼠灌胃地施用亚阈剂量(1mg/kg)的NSAID吲哚美辛，其悬浮于1％甲基纤维素中。2小时后，重复疼痛压力阈值试验，可以看到普通的布洛芬和丙酮制备的PC-布洛芬复合物似乎都诱导剂量依赖性的疼痛压力阈值增加，所述阈值是止痛活性的指标。相对比的是，在接受亚阈剂量的吲哚美辛的大鼠中记录的非显著的反应。由于接受丙酮制备的PC-布洛芬的大鼠维持疼痛压力阈值的显著增加，其等同于或大于接受等剂量的普通的布洛芬的大鼠的反应，可以得出的结论是，丙酮制备方法未改变布洛芬的治疗活性，且实际上可能已经提高了治疗活性。

实施例5

在本实施例中，使用L-NAME模型，分析了本发明的PC-布洛芬缔合组合物与布洛芬(IBU)、布洛芬钠盐和4种常规制备的布洛芬/PC制剂相比的GI保护性质。

现在参考图5，GI保护性质的图：条1-盐水；条2-IBU；条3-NaIBU(布洛芬钠盐)；条4-在室温保藏6个月的IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物；条5-在动物试验前在40℃保藏3个月并在室温保藏剩余的3个月的IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物；条6-新鲜制备的IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物(10分钟，40℃混合时间)；条7-新鲜制备的IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物(30分钟，40℃混合时间)；和条8-使用丙酮作为溶剂制备的本发明的纯化的PC-IBU缔合组合物(最后的条)。显然，本发明的纯化的PC-IBU缔合组合物大大胜过所有其它的IBU制剂，显示类似于盐水的GI保护性质。

评价NSAID诱导的GI毒性和治疗活性的慢性模型

在本方案中，大鼠接受左后踝皮下注射(通过连接到1mL注射器上的20号针)0.2mL完全弗氏佐剂(CFA；Sigma Chemical，St.Louis，MO)，诱导急性关节炎症。然后，将大鼠随机地分配到研究组，并立即开始施用盐水介质、布洛芬(50-75mg/kg，一日二次)或PC-布洛芬(50-75mg NSAID/kg，一日二次)的给药处理方案，连续4-5天。在研究阶段结束时，将大鼠称重，并通过CO₂吸入实施安乐死，随后双侧胸廓切开。通过测量体重的变化、血细胞比容值、肠穿孔的存在和GI灌注液中血红蛋白的浓度，我们评价了我们的布洛芬试验制品的毒性。另外，从发炎的关节收集组织样品，以便进行髓过氧化物酶测定，评价发炎的组织的嗜中性粒细胞活性。最后，测量踝厚度，以证实NSAID制品的抗炎作用，并使用改进的Randall和Selitto疼痛试验来显示止痛活性。Randall和Selitto及改进的Randall和Selitto疼痛试验的另外细节，可以参见Lichtenberger LM，Ulloa C，Vanous AL，Romero JJ，Dial EJ，Illich PA，Walters ET.Zwitterionicphospholipids enhance aspirin′s therapeuticactivity，asdemonstrated in rodent model systems.JPET 1996；277：1221-1227；Lichtenberger LM，Romero JJ，DeRuijter WMJ et al.Phosphatidylcholine association increases theanti-inflammatory and analgesicactivity of ibuprofen in acuteand chronic rodent models of inflammation：relationship toalterations in bioavailability and cyclooxygenase-inhibitoryactivity.JPET 298：279-287，2001 and Randall LO，Selitto JJ.A method of measuring analgesic activity of inflamed tissue.Arch hit Pharmacodyn 1957；111：409-419，其在这里通过参考并入。

使用了这两种方法来确立所述2种NSAID制品的生物利用度和总治疗活性，在评价试验制剂的局部抗炎和止痛活性的实验中，如上所述，将CFA注射进后爪中，3天后，分析踝厚度和疼痛压力阈值(如下所述)，以记录基线(治疗前)读数。此后，立即以所述的剂量，将试验药物局部地施用给受影响的爪子，所述试验药物作为油或溶于丙二醇介质中。在随后的3-5天中，每天进行该应用操作2次，以盲法由观察人员在这些时间点评价抗炎和止痛活性。

PC-布洛芬制剂的制备

如下制备PC-布洛芬制剂：将要求浓度的布洛芬(或不同的试验NSAID)溶于含有2倍所述浓度的Phospholipon 90G(AmericanLecithin，含有约93-96％PC)的丙酮中。在40℃，在丙酮中温育NSAID和PC(1∶2重量比)，直到溶解，然后通过首先在氮气流下蒸发、再在真空下蒸发，去除极性溶剂。最终产物是油，且包含纯化的PC-NSAID缔合复合物。然后，将该产物直接地施用给试验动物，或重新悬浮于水或另一种介质(如指示的)中。为了便于以特定布洛芬剂量范围灌胃地递送该制剂，将需要的体积悬浮于水中，并涡旋搅拌，然后灌胃施用。关于局部递送，将产物直接地(不经稀释)施用给受影响的爪子，或重新悬浮于丙二醇(pg)中。

实施例6

现在参考图6，显示的结果来自如上所述的大鼠急性肠出血模型(L-NAME)研究，其中对比了盐水，布洛芬(IBU)，不经冷却使用丙酮制备的2∶1重量比的纯化的PC∶IBU，和经冷却使用丙酮制备的2∶1重量比的纯化的PC∶IBU。显然，丙酮制品表现出显著的血红蛋白减少，无论丙酮制品是否包含冷却步骤。

实施例7

现在参考图7，结果来自另一项大鼠急性肠出血模型(L-NAME)研究，其中对比了盐水，布洛芬，使用丙酮制备的2∶1重量比的纯化的PC∶IBU，和IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物Plx-2A-2。在本研究中，与根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的基于油的PC∶IBU(PLx-2A-2)材料相比，丙酮制备的PC∶IBU制剂表现出更好的和/或可比的结果。

实施例8

现在参考图8，显示了与阿司匹林(ASA)预缔合时磷脂酰胆碱(PC)在急性啮齿动物胃溃疡模型中的保护作用的结果(对比盐水)：来自片剂的ASA，使用丙酮制备的1∶1 PC-ASA，使用丙酮制备的2∶1 PC-ASA，使用丙酮制备的3∶1 PC-ASA，和使用丙酮制备的3.5∶1 PC-ASA。根据上面给出的实验描述，进行该研究。研究表明，PC∶ASA 3∶1的比例，产生测试的ASA制剂的最佳保护。

实施例9

现在参考图9，显示了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，ASA(阿司匹林)，1∶1 ASA∶P53，1∶1 ASA∶P35和使用丙酮制备的1∶3ASA∶90G。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。研究表明，1∶3ASA∶PC丙酮制品具有与根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的基于油的1∶1 ASA∶P35类似的功效，且二者都优于ASA和ASA∶PC53。

实施例10

现在参考图10，显示了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，ASA(阿司匹林)，经冷却使用丙酮的制备1∶4 ASA∶90G和不经冷却使用丙酮制备的1∶4 ASA∶90G。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。研究表明，有和没有冷却步骤制备的2种丙酮制品的性能类似，且优于单独的ASA。

实施例11

现在参考图11，显示了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，氟比洛芬(FURIB)和使用丙酮制备的1∶2 FURIB∶PC。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。研究表明，使用丙酮制备的氟比洛芬∶PC优于单独的氟比洛芬。

实施例12

现在参考图12，显示了大鼠急性胃损伤的结果，其中对比了盐水，萘普生(Nap)钠盐，1∶1 Nap∶P35和使用丙酮制备的1∶2 Nap∶90G。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。研究表明，使用丙酮制备的1∶2 Nap∶90G优于单独的Nap或根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的1∶1 Nap∶P35。

实施例13

现在参考图13，显示了使用Randall Siletto方法在大鼠中CFA诱导的炎症的痛阈结果，其中对比了ASA(阿司匹林)，1∶1 ASA∶P35和使用丙酮制备的1∶3 ASA∶90G。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。研究表明，所有3种ASA制剂的性能类似。

实施例14

现在参考图14A-G，研究了不同的布洛芬(IBU)制剂对用CFA处理以诱导关节炎症的大鼠的作用。所述大鼠分别：不经CFA处理施用盐水，在CFA处理后施用盐水，在CFA处理后施用IBU(布洛芬)，施用使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G，和施用IBU/含有35％PC的卵磷脂油组合物PLx-2A-2。根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法，制备PLx-2A-2材料。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。

从图14A可以看出，显示的抗炎作用表明，所有3种IBU制剂同样有效。从图14B可以看出，显示的血细胞比容水平表明，使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G制剂在所有测试的IBU制剂中产生最佳结果。从图14C可以看出，显示的血红蛋白水平表明，IBU∶PC制剂优于单独的IBU，并显示，根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的PLx-2A-2材料在一定程度上优于本发明的使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G。从图14D可以看出，显示的血红蛋白水平表明，IBU∶PC制剂优于单独的IBU，且使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G优于根据美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的PLx-2A-2材料，并与单独的盐水类似。从图14E可以看出，显示的痛阈结果表明，IBU∶PC制剂优于单独的IBU，并显示根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的PLx-2A-2材料在一定程度上优于本发明的使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G。从图14F可以看出，显示的体重减轻结果表明，IBU∶PC制剂优于单独的IBU，且使用丙酮制备的1∶2 IBU∶90G优于根据美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的PLx-2A-2材料。从图14G可以看出，显示的髓过氧化物酶活性结果表明，IBU∶PC制剂优于单独的IBU，并显示根据11-06-2003提交的美国专利申请系列号10/433,454所述的方法制备的PLx-2A-2材料在一定程度上优于本发明的使用丙酮制备的1∶2IBU∶90G。

实施例15

现在参考图15A，研究了CFA诱导关节炎症后局部施用的布洛芬(IBU)制剂对大鼠的效果。所述大鼠分别：不经CFA处理用盐水处理，在CFA处理后用盐水处理，在CFA处理后用在丙二醇中的布洛芬(IBU/pg)处理，在CFA处理后用使用丙酮制备的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU 2∶1/油)油处理，和在CFA处理后用使用丙酮制备的在丙二醇中的2∶1布洛芬∶90G油(PC∶IBU/pg)处理。仍然根据上面给出的实验描述，进行该研究。

从图15A可以看出，显示的痛阈结果表明，所有IBU制剂都优于盐水，且IBU∶PC制剂在3天时类似于IBU，但是在5天时优于IBU。从图15B可以看出，显示的Δ踝厚度结果表明，与盐水相比，所有IBU制剂都减轻踝炎症，且两种IBU∶PC制剂在3天和5天试验中都优于单独的IBU。从图15 C可以看出，显示的髓过氧化物酶(MPO)活性结果表明了IBU制剂类似的性能，使用丙酮制备的在丙二醇中的2∶1布洛芬∶90G(PC∶IBU/pg)表现出最低的MPO活性。

在本文中引用的所有文献都通过参考并入。尽管已经参考优选的实施方案公开了本发明，通过阅读本说明书，本领域的技术人员可以理解，可以进行变化和修改，其不脱离上述的和下面的权利要求所要求保护的本发明的范围和精神。

Claims

1.一种方法，其包括下述步骤：

在适合生成包含纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的溶液的条件下，使一种选择性的或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)或多种sns-NSAID与一种磷脂(PL)或多种PL在极性溶剂中接触；和

将溶剂去除至低于希望的水平，形成包含纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的组合物。

2.权利要求1的方法，其中所述sns-NSAID选自：非甾体抗炎药(NSAID)和COX-2抑制剂。

3.权利要求2的方法，其中所述NSAID选自：苯氧布洛芬钙(Nalfon)，氟比洛芬(Ansaid)，舒洛芬，苯洛芬，布洛芬(Motrin，Advil)，酮洛芬(Orduis，Oruvall)，萘普生(Naprosyn)，萘普生钠(Aleve，Anaprox，Aflaxen)，奥沙普秦(Daypro)，双氯芬酸钠(Voltaren)，双氯芬酸钾(Cataflam)，依托度酸(Lodine)，吲哚美辛(Indocin)，酮咯酸氨丁三醇(Acular，Toradol肌肉内用药)，酮咯酸(口服Toradol)，萘丁美酮(Relafen)，舒林酸(Clinoril)，托美丁钠(Tolectin)，甲氯灭酸钠(Meclomen)，甲芬那酸(Ponstel)，吡罗昔康(Dolibid)，二氟尼柳(Feldene)，阿司匹林，羟布宗(Tandearil)，保泰松(Butazolidin)，对乙酰氨基酚(Tylenol)，和它们的混合物或组合。

4.权利要求3的方法，其中所述NSAID选自：布洛芬，阿司匹林，水杨酸，萘普生，吲哚美辛，双氯芬酸，吡罗昔康，氟比洛芬，酮洛芬和它们的混合物或组合。

5.权利要求2的方法，其中所述COX-2抑制剂选自：塞来考昔，lumiracoxib，美洛昔康，吡罗昔康，或新批准的COX-2抑制剂或它们的混合物或组合。

6.权利要求1的方法，其中所述磷脂是一种或多种下述通式的化合物：

其中R¹和R²是饱和的或不饱和的8-32个碳原子的取代基；R³是H或CH₃，且X是H或COOH；且R⁴是＝O或H₂。

7.权利要求1的方法，其中所述磷脂是选自下组的磷脂酰胆碱：磷脂酰胆碱(PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，其它二饱和的磷脂酰胆碱，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸鞘磷脂或其它神经酰胺，源自大豆的卵磷脂油，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂酰胆碱，二亚油酰磷脂酰胆碱(DLL-PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，大豆磷脂酰胆碱(大豆-PC或PC_s)，卵磷脂酰胆碱(卵-PC或PC_E)，和它们的混合物或组合。

8.权利要求1的方法，其中所述溶剂选自：丙酮，甲基乙基酮(MEK)，甲基丁基酮，甲基异丁基酮等，乙酸酯类例如乙酸甲酯，乙酸乙酯，乙酸丙酯，乙酸异丙酯，乙酸丁酯，乙酸异丁酯等，腈类例如乙腈等，醚类例如二乙醚，四氢呋喃等，甲酸酯类例如甲酸乙酯，N，N-二甲基乙酰胺，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，硝基甲烷，氯化烃例如四氯化碳，氯仿，1，2-二氯乙烷，1，1-二氯乙烯，1，2-二氯乙烯，二氯甲烷，1，1，1-三氯乙烷等，或它们的混合物或组合。

9.权利要求1的方法，其中所述希望的水平是在或低于FDA批准的水平或者在或低于所述溶剂的检出限。

10.权利要求1的方法，其中所述溶剂是丙酮。

11.一种方法，包括下述步骤：

将治疗有效量的组合物施用给动物，包括人，

其中所述组合物通过包含下述步骤的方法制备：

在适合生成包含PL-sns-NSAID缔合复合物的溶液的条件下，使一种选择性的或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)或多种sns-NSAID与一种磷脂(PL)或多种PL在极性溶剂中接触；和

将溶剂去除至希望的水平，形成包含纯化的PL-sns-NSAID缔合复合物的组合物。

12.权利要求11的方法，其中所述组合物制备方法还包含下述步骤：

在去除步骤之前，在冷却温度下冷却溶液，持续冷却时间，其中所述冷却时间和冷却温度足以沉淀未与sns-NSAID缔合的任何PL或超过缔合量的任何PL，和

分离任何沉淀，生成所述溶液。

13.权利要求11的方法，其中所述施用步骤选自：经口的给药步骤，肠内的给药步骤，直肠的给药步骤，局部的给药步骤，无菌制品的静脉内的给药步骤，无菌制品的动脉内的给药步骤，无菌制品的肌肉内的给药步骤，无菌制品的直接组织注射给药步骤，无菌制品的皮下泵给药步骤或鼻给药步骤。

14.权利要求11的方法，其中所述sns-NSAID选自：非甾体抗炎药(NSAID)和COX-2抑制剂。

15.权利要求14的方法，其中所述NSAID选自：苯氧布洛芬钙(Nalfon)，氟比洛芬(Ansaid)，舒洛芬，苯洛芬，布洛芬(Motrin，Advil)，酮洛芬(Orduis，Oruvall)，萘普生(Naprosyn)，萘普生钠(Aleve，Anaprox，Aflaxen)，奥沙普秦(Daypro)，双氯芬酸钠(Voltaren)，双氯芬酸钾(Cataflam)，依托度酸(Lodine)，吲哚美辛(Indocin)，酮咯酸氨丁三醇(Acular，Toradol肌肉内用药)，酮咯酸(口服Toradol)，萘丁美酮(Relafen)，舒林酸(Clinoril)，托美丁钠(Tolectin)，甲氯灭酸钠(Meclomen)，甲芬那酸(Ponstel)，吡罗昔康(Dolibid)，二氟尼柳(Feldene)，阿司匹林，羟布宗(Tandearil)，保泰松(Butazolidin)，对乙酰氨基酚(Tylenol)，和它们的混合物或组合。

16.权利要求15的方法，其中所述NSAID选自：布洛芬，阿司匹林，水杨酸，萘普生，吲哚美辛，双氯芬酸，吡罗昔康，氟比洛芬，酮洛芬和它们的混合物或组合。

17.权利要求14的方法，其中所述COX-2抑制剂选自：塞来考昔，lumiracoxib，美洛昔康，吡罗昔康，或新批准的COX-2抑制剂或它们的混合物或组合。

18.权利要求11的方法，其中所述磷脂是一种或多种下述通式的化合物：

19.权利要求11的方法，其中所述磷脂是选自下组的磷脂酰胆碱：磷脂酰胆碱(PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，其它二饱和的磷脂酰胆碱，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸鞘磷脂或其它神经酰胺，源自大豆的卵磷脂油，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂酰胆碱，二亚油酰磷脂酰胆碱(DLL-PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，大豆磷脂酰胆碱(大豆-PC或PC_s)，卵磷脂酰胆碱(卵-PC或PC_E)，和它们的混合物或组合。

20.权利要求11的方法，其中所述溶剂选自：丙酮，甲基乙基酮(MEK)，甲基丁基酮，甲基异丁基酮等，乙酸酯类例如乙酸甲酯，乙酸乙酯，乙酸丙酯，乙酸异丙酯，乙酸丁酯，乙酸异丁酯等，腈类例如乙腈等，醚类例如二乙醚，四氢呋喃等，甲酸酯类例如甲酸乙酯，N，N-二甲基乙酰胺，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，硝基甲烷，氯化烃例如四氯化碳，氯仿，1，2-二氯乙烷，1，1-二氯乙烯，1，2-二氯乙烯，二氯甲烷，1，1，1-三氯乙烷等，或它们的混合物或组合。

21.权利要求11的方法，其中所述希望的水平是在或低于FDA批准的水平或者在或低于所述溶剂的检出限。

22.权利要求11的方法，其中所述溶剂是丙酮。

23.一种组合物，其包含一种磷脂(PL)或多种PL与一种选择性的或非选择性的非甾体抗炎药(sns-NSAID)或多种sns-NSAID的纯化的缔合复合物，该缔合复合物具有这样一种sns-NSAID∶PL的重量比：其中当所述组合物溶于所述PL在其中具有中等溶解度、低溶解度或不溶的极性溶剂中时，所述sns-NSAID的含量足以防止PL的沉淀。

24.权利要求23的组合物，其中所述sns-NSAID选自：非甾体抗炎药(NSAID)和COX-2抑制剂。

25.权利要求24的组合物，其中所述NSAID选自：苯氧布洛芬钙(Nalfon)，氟比洛芬(Ansaid)，舒洛芬，苯洛芬，布洛芬(Motrin，Advil)，酮洛芬(Orduis，Oruvall)，萘普生(Naprosyn)，萘普生钠(Aleve，Anaprox，Aflaxen)，奥沙普秦(Daypro)，双氯芬酸钠(Voltaren)，双氯芬酸钾(Cataflam)，依托度酸(Lodine)，吲哚美辛(Indocin)，酮咯酸氨丁三醇(Acular，Toradol肌肉内用药)，酮咯酸(口服Toradol)，萘丁美酮(Relafen)，舒林酸(Clinoril)，托美丁钠(Tolectin)，甲氯灭酸钠(Meclomen)，甲芬那酸(Ponstel)，吡罗昔康(Dolibid)，二氟尼柳(Feldene)，阿司匹林，羟布宗(Tandearil)，保泰松(Butazolidin)，对乙酰氨基酚(Tylenol)，和它们的混合物或组合。

26.权利要求25的组合物，其中所述NSAID选自：布洛芬，阿司匹林，水杨酸，萘普生，吲哚美辛，双氯芬酸，吡罗昔康，氟比洛芬，酮洛芬和它们的混合物或组合。

27.权利要求24的组合物，其中所述COX-2抑制剂选自：塞来考昔，lumiracoxib，美洛昔康，吡罗昔康，或新批准的COX-2抑制剂或它们的混合物或组合。

28.权利要求23的组合物，其中所述磷脂是一种或多种下述通式的化合物：

29.权利要求23的组合物，其中所述磷脂是选自下组的磷脂酰胆碱：磷脂酰胆碱(PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，其它二饱和的磷脂酰胆碱，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰肌醇，磷脂酰丝氨酸鞘磷脂或其它神经酰胺，源自大豆的卵磷脂油，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂酰胆碱，二亚油酰磷脂酰胆碱(DLL-PC)，二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)，大豆磷脂酰胆碱(大豆-PC或PC_s)，卵磷脂酰胆碱(卵-PC或PC_E)，和它们的混合物或组合。

30.权利要求23的组合物，其中所述溶剂选自：丙酮，甲基乙基酮(MEK)，甲基丁基酮，甲基异丁基酮等，乙酸酯类例如乙酸甲酯，乙酸乙酯，乙酸丙酯，乙酸异丙酯，乙酸丁酯，乙酸异丁酯等，腈类例如乙腈等，醚类例如二乙醚，四氢呋喃等，甲酸酯类例如甲酸乙酯，N，N-二甲基乙酰胺，N，N-二甲基甲酰胺，N-甲基吡咯烷酮，硝基甲烷，氯化烃例如四氯化碳，氯仿，1，2-二氯乙烷，1，1-二氯乙烯，1，2-二氯乙烯，二氯甲烷，1，1，1-三氯乙烷等，或它们的混合物或组合。

31.权利要求23的组合物，其中所述溶剂是丙酮。

32.权利要求23的组合物，其中所述重量比是至少1∶2sns-NSAID∶PL。