CN101062037B - 作为髓过氧化物酶抑制剂的硫代黄嘌呤衍生物的制法及其应用 - Google Patents

Abstract

公开了通式(Ia)或(Ib)化合物，其中R¹、R²、R³、R⁴、X和Y如说明书所定义，或其药学上可接受的盐，在制备用于治疗或预防髓过氧化物酶(MPO)被抑制有益时的疾病或症状的药物中的用途。公开了某些新的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐，及其制备方法。通式(Ia)或(Ib)化合物是MPO抑制剂，因此特别用于治疗或预防神经炎性疾病。

Description

作为髓过氧化物酶抑制剂的硫代黄嘌呤衍生物的制法及其应用

本申请系申请日为2003年4月15日、申请号为03808355.8、发明名称为“作为髓过氧化物酶抑制剂的硫代黄嘌呤衍生物”的发明专利申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及作为髓过氧化物酶(MPO)抑制剂的硫代黄嘌呤衍生物的用途。还公开了某些新的硫代黄嘌呤衍生物、它们的制备方法、含有它们的组合物以及它们在治疗中的用途。

发明背景

髓过氧化物酶(MPO)是主要在多形核白细胞(PMNs)中发现的含血红素的酶。MPO是哺乳动物过氧化物酶的多种蛋白家族中的一员，哺乳动物过氧化物酶还包括嗜酸细胞过氧化物酶、甲状腺过氧化物酶、唾液过氧化物酶、乳过氧化物酶、前列腺素H合酶等等。成熟的酶是两个相同半分子的二聚体。每个半分子含有共价键血红素，该血红素表现出与MPO特有的绿色相对应的异常的光谱特性。连结MPO的两个半分子的二硫键断裂产生半酶，半酶与全酶相比表现出难以辨别的光谱和催化特性。该酶利用过氧化氢将氯氧化成次氯酸。其它的卤化物和类卤化物(如硫氰酸盐)也是MPO的生理学底物。

PMNs对于抑制传染是特别重要的。这些细胞含有MPO，据记载具有良好的杀菌活性。PMNs通过非特异性的吞噬作用吞食微生物，将其混入到液泡中，被称为吞噬体，其与含有髓过氧化物酶的颗粒结合形成吞噬溶酶体。在吞噬溶酶体中，髓过氧化物酶的酶活性导致次氯酸的形成，它是一种有效的杀细菌化合物。次氯酸自身氧化，最易与硫醇和硫醚反应，而且将胺转化成氯胺，氯化芳族氨基酸。巨噬细胞是巨大的吞噬细胞，如PMNs，能够吞噬微生物。巨噬细胞可产生过氧化氢，活化可产生髓过氧化物酶。MPO和过氧化氢也能释放到细胞的外部，与氯反应可引起邻近组织的损伤。

在神经炎性反应的神经疾病中暗示了MPO的活性与疾病的联系，包括多发性硬化、阿尔茨海默病、帕金森病和中风，以及其它的炎性疾病或症状如哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、动脉硬化症、炎性肠病、肾小球损伤和风湿性关节炎。肺癌也表明与高浓度的MPO有关。

WO01/85146公开了多种MPO抑制剂化合物，因此用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD).3-正丙基-2-硫代黄嘌呤公开在Drug DevelopmentResearch，1999，47，45-53中.3-异丁基-6-硫代黄嘌呤公开在J.Chem.Soc.，1962，1863中.2-硫代黄嘌呤是市售的.

本发明涉及一批硫代黄嘌呤衍生物，令人惊奇地显示出了作为MPO酶抑制剂的有益性能.

发明内容

本发明提供了通式(Ia)或(Ib)化合物

或

其中：

X和Y中的一个代表S，另一个代表O或S；

R¹代表氢或C1-6烷基；

R²代表氢或C1-6烷基；所述烷基可任选的被以下基团所取代：

i)饱和或部分不饱和的3-7元环，任选的加入一个或两个独立的选自O、N和S的杂原子，和任选的加入羰基；该环可任选的被一个或多个选自卤素、羟基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；该烷基可任选的再被羟基或C1-6烷氧基所取代；或

ii)C1-6烷氧基；或

iii)选自苯基、呋喃基或噻吩基的芳环；该芳环可任选的再被卤素、C1-6烷基或C1-6烷氧基所取代；

R³和R⁴独立的代表氢或C1-6烷基；

或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防MPO酶被抑制时的疾病或症状的药物中有益的用途.

通式(Ia)或(Ib)的化合物可以对映异构体的形式存在.因此所有的对映体、非对映体、外消旋物及其混合物都包括在本发明的范围内.

应当理解，当R³在通式(Ia)和(Ib)中代表氢时，两个可选择的代表(Ia)和(Ib)是同一化合物的互变异构体形式.所有的上述互变异构体以及互变异构体的混合物都包括在本发明的范围内.

本发明更特别的一方面提供了通式(Ia)或(Ib)的化合物或其药学上可接受的盐，在治疗或预防神经炎性疾病的药物制备中的用途.

本发明还提供了治疗，或降低MPO酶被抑制有益时的疾病或症状的危险的方法，包括向患有所述疾病或症状或正在此危险中的病人施用治疗有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐.

更特别地，还提供了治疗，或降低患有所述疾病或症状病人的神经炎性疾病的危险的方法，其中，该方法包括向病人施用治疗有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐.

本发明另一方面提供了一种药物制剂，包含治疗有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合，用于治疗或预防MPO酶被抑制时的疾病或症状是有益的.

本发明另一更特别的方面提供了一种药物制剂，包含治疗有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合，用于治疗或预防神经炎性疾病.

在一个实施方案中，提供了通式(Ia)或(Ib)化合物，其中X和Y中的至少一个代表S，另一个代表O或S；R¹代表氢或C1-6烷基；R²代表氢或C1-6烷基；所述烷基可任选的被C3-7环烷基、C1-4烷氧基、或选自苯基、呋喃基或噻吩基的芳环所取代；所述芳环可任选的再被卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基所取代；R³和R⁴独立的代表氢或C1-6烷基；或其药学上可接受的盐，其对映体或外消旋物，在制备用于治疗或预防MPO酶被抑制时的疾病或症状的药物中的用途是有益的.

在另一实施方案中，提供了通式(Ia)或(Ib)化合物，其中X和Y中的至少一个代表S，另一个代表O或S；R¹代表氢或C1-6烷基；R²代表氢或C1-6烷基；所述烷基可任选的被以下基团所取代：i)饱和或部分不饱和的3-7元环，该环任选的加入一个或两个独立的选自O、N和S的杂原子，和任选的加入羰基；该环可任选的被一个或多个选自卤素、羟基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；该烷基可任选的再被羟基或C1-4烷氧基所取代；或ii)C1-4烷氧基；或iii)选自苯基、呋喃基或噻吩基的芳环；该芳环可任选的再被卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基所取代；R³和R⁴独立的代表氢或C1-6烷基；或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防MPO酶被抑制时的疾病或症状的药物中的用途有益.

在一个实施方案中，本发明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O.

在另一实施方案中，R³在通式(Ia)或(Ib)中代表氢.

在另一实施方案中，R²在通式(Ia)或(Ib)中代表任选的取代的C1-6烷基.

在另一实施方案中，R²在通式(Ia)或(Ib)中代表被饱和或部分不饱和的3-7元环取代的C1-6烷基，该环任选的加入一个或两个独立的选自O、N和S的杂原子，和任选的加入羰基；该环可任选的被一个或多个选自卤素、羟基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；该烷基可任选的再被羟基或C1-6烷氧基所取代.

在另一实施方案中，R²在通式(Ia)或(Ib)中代表被环丙基、环己基、四氢呋喃或吗啉基所取代的亚甲基、1，2-亚乙基或1，3-亚丙基.

在另一实施方案中，R²在通式(Ia)或(Ib)中代表被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基.

在另一实施方案中，R²在通式(Ia)或(Ib)中代表被甲氧基或乙氧基所取代的1，2-亚乙基或1，3-亚丙基.

当X代表S，Y代表O时，另一个实施方案包括其中R¹代表氢的通式(Ia)或(Ib)化合物.

当X代表S，Y代表O时，再另一个实施方案包括其中R⁴代表氢的通式(Ia)或(Ib)化合物.

当X代表O，Y代表S时，另一个实施方案包括其中R¹代表C1-6烷基的通式(Ia)或(Ib)化合物.

当X代表O，Y代表S时，再另一个实施方案包括其中R⁴代表C1-6烷基的通式(Ia)或(Ib)化合物.

在一个实施方案中，本发明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O；R²代表任选的取代的C1-6烷基；R¹、R³和R⁴每一个代表氢.

在一个实施方案中，本发明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O；R²代表被饱和或部分不饱和的3-7元环取代的C1-6烷基，该环任选的加入一个或两个独立的选自O、N和S的杂原子，和任选的加入羰基；该环可任选的被一个或多个选自卤素、羟基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；该烷基可任选的再被羟基或C1-6烷氧基所取代；和R¹、R³和R⁴每一个代表氢.

在一个实施方案中，本发明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O；R²代表被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；和R¹、R³和R⁴每一个代表氢.

本发明具体的一方面涉及以下的通式(Ia)或(Ib)的化合物：

1，3-二异丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤；

1，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-1，8-二甲基-6-硫代黄嘌呤；

3-(2-甲基丁基)-6-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-2，6-二硫代黄嘌呤；

3-异丁基-8-甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-7-甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-环己基甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黄嘌呤；

3-环丙基甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-1-甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(4-氟苄基)-2-硫代黄嘌呤；

3-苯乙基-2-硫代黄嘌呤；

(+)-3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

(-)-3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-正丁基-2-硫代黄嘌呤；

3-正丙基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-6-硫代黄嘌呤；

2-硫代黄嘌呤；

及其药学上可接受的盐的用途.

除非另外说明，此处所涉及的术语“C1-6烷基”指的是具有1-6个碳原子的直链或支链烷基.上述基团的实例包括甲基、乙基、1-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基和己基.

术语“C1-4烷基”类似地进行解释.

除非另外说明，此处所涉及的术语“C3-7环烷基”指的是具有3-7个碳原子的环烷基.上述基团的实例包括环丙基、环戊基和环己基.

除非另外说明，此处所涉及的术语“C1-6烷氧基”指的是具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基.上述基团的实例包括甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基和叔丁氧基.

术语“C1-4烷氧基”类似地进行解释.

除非另外说明，此处所涉及的术语“卤素”指氟、氯、溴和碘.

任选的加入一个或两个独立的选自O、N和S的杂原子，和任选的加入羰基的饱和或部分不饱和的3-7元环的实例包括环丙基、环戊基、环己基、环戊酮、四氢呋喃、吡咯烷、哌啶、吗啉、哌嗪、吡咯烷酮和哌啶酮(piperidinone).特别的实例包括环丙基、环己基、四氢呋喃基和吗啉基.

通式(Ia)或(Ib)的某些化合物是新的.因此，本发明的另一方法提供了下列的通式(Ia)或(Ib)的新化合物

或

其中：

X代表S，Y代表O；

R¹代表氢或C1-6烷基；

R²代表被饱和或部分不饱和的3-7元环取代的C1-6烷基，该环任选的加入一个或两个独立的选自O、N和S的杂原子，和任选的加入羰基；该环可任选的被一个或多个选自卤素、羟基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；该烷基可任选的再被羟基或C1-6烷氧基所取代；

R³和R⁴独立的代表氢或C1-6烷基；

及其药学上可接受的盐.

本发明的另一方面提供了下列的通式(Ia)或(Ib)的新化合物：

1，3-二异丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤；

1，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-1，8-二甲基-6-硫代黄嘌呤；

3-(2-甲基丁基)-6-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-2，6-二硫代黄嘌呤；

3-异丁基-8-甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-7-甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-环己基甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黄嘌呤；

3-环丙基甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-异丁基-1-甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(4-氟苄基)-2-硫代黄嘌呤；

3-苯乙基-2-硫代黄嘌呤；

(+)-3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

(-)-3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-正丁基-2-硫代黄嘌呤；

及其药学上可接受的盐.

本发明的另一方面是通式(Ia)或(Ib)的新化合物作为药物的用途.

根据本发明，我们还提供了制备通式(Ia)或(Ib)的新化合物，或其药学上可接受的盐，其对映体、非对映体或外消旋物的方法，包括：

(a)通式(IIa)或(IIb)化合物

或

其中R¹、R²、R³和R⁴如通式(Ia)或(Ib)中所定义，X代表O或S，Y代表0；

与硫化作用化合物如Lawesson试剂或五硫化二磷的反应；或

(b)通式(IIIa)或(IIIb)的二胺

或

其中R¹、R²、R³、X和Y如通式(Ia)或(Ib)中所定义；

与甲酸或与三烷基原酸酯反应；

其中，根据需要将所得的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其另一种盐转化成其药学上可接受的盐；或将所得的通式(Ia)或(Ib)化合物转化成另一种通式(Ia)或(Ib)化合物；其中根据需要将所得的通式(Ia)或(Ib)化合物转化成其光学异构体.

在方法(a)中，通式(IIa)或(IIb)化合物和硫化试剂如Lawesson试剂或五硫化二磷溶解或悬浮在适合的无水有机溶剂如苯、甲苯、二甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷或二噁烷中，然后加热到30℃至溶剂的回流温度，直到反应完成，一般1-30小时.然后，反应混合物冷却并过滤分出不溶的固体.减压分出溶剂，粗产物通过柱色谱法或重结晶法纯化.

在方法(b)中，通式(IIIa)或(IIIb)的二胺在适合的温度下用过量的适当的原酸酯如原甲酸三乙酯、原乙酸三乙酯、原丙酸三乙酯、原丁酸三乙酯、原甲酸三丙酯、原甲酸三丁酯和原甲酸三异丙酯，任选的在适合的溶剂如醇的存在下处理，直到反应完成.温度一般是直到反应混合物的回流温度，反应时间通常30分钟至过夜.在一个实施方案中，原酸酯是原甲酸三乙酯，乙醇作为任选的溶剂.

有选择性地，在方法(b)中，通式(IIIa)或(IIIb)的二胺在室温至反应混合物回流温度的适合的温度下用98％的甲酸处理.该方法继续适当的一段时间，一般0.5-5小时.分出甲酸后，用适合的碱水溶液处理，例如，用10％的氢氧化钠水溶液处理，然后得到通式(I)化合物.碱处理在适合的时间内适合的温度下进行，例如，在室温至反应混合物的回流温度下约10分钟至4小时的时间.

通式(IIIa)或(IIIb)的二胺转化成通式(Ia)或(Ib)化合物的其它方法在文献中有描述，对本领域的技术人员来说应该是公知的.

本发明包括通式(Ia)或(Ib)化合物的盐的形式，尤其是酸加成盐.适合的盐包括那些与有机酸和无机酸形成的盐.虽然，非药学上可接受的酸盐在化合物的制备和纯化中的实用性受到怀疑，但是上述酸加成盐通常是药学上可接受的.因而，优选的盐包括那些由盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、甲磺酸和苯磺酸形成的盐.

通式(Ia)或(Ib)化合物的盐可通过将其游离碱、或盐、对映体或外消旋物，与一个或多个当量的适当的酸反应来形成.反应可在盐不溶的溶剂或介质中进行，或在盐可溶的溶剂中进行，例如，水、二噁烷、乙醇、四氢呋喃或乙醚、或溶剂的混合物，溶剂可通过真空或冷冻干燥分出.反应也可以是置换方法或可通过离子交换树脂来进行.

通式通式(IIa)或(IIb)化合物和通式(IIIa)或(IIIb)化合物在文献中也是公知的，或可利用对本领域技术人员来说很显而易见的公知方法来制备.

本发明的化合物及其中间体可从它们的反应混合物中分离，如果需要可利用标准技术进一步纯化.

通式(Ia)或(Ib)化合物可以对映异构体的形式存在.因此，所有的对映体、非对映体、外消旋物及其混合物都包括在本发明的范围内.多种光学异构体可利用常规技术，例如，分级结晶、或HPLC对化合物的外消旋混合物进行分离.有选择性地，多种光学异构体可直接通过旋光起始物质来制备.

中间体化合物也可以对映体的形式存在，可用作纯化的对映体、非对映体、外消旋物或混合物.

通式(Ia)或(Ib)的化合物，和它们药学上可接受的盐是有用的，因为它们拥有作为MPO酶抑制剂的药物学活性.

通式(Ia)和(Ib)化合物，和它们的药学上可接受的盐指出用于治疗或预防其中的髓过氧化物酶(MPO)的活性需要调节的疾病或症状.特别地，在神经炎性疾病中暗示了MPO活性与疾病的联系.因此，本发明化合物特别指出用于治疗哺乳动物包括人的神经炎性症状或疾病.上述症状或疾病对本领域技术人员来说是显而易见的.

可具体提及的症状或疾病包括多发性硬化、阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩性(脊髓)侧索硬化和中风、以及其它的炎性疾病或症状如哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、特发性肺纤维化、急性呼吸窘迫综合征、窦炎、鼻炎、牛皮癣、皮炎、葡萄膜炎、龈炎、动脉硬化症、炎性肠病、肾小球损伤、肝纤维化、败血症、直肠炎、风湿性关节炎、和与损伤再愈合、脊髓损伤和组织伤害/疤痕/粘连/排斥有关的炎症.肺癌也表明与高浓度的MPO有关.该化合物也期望在治疗疼痛中是有用的.

预防被认为与先前发作过所述疾病或症状，或其它的被认为其危险增加时的病人的治疗特别相关.有产生特殊疾病或症状的危险的病人通常包括那些具有疾病或症状的家族史，或那些通过遗传测验或筛选鉴定特别容易产生该疾病或症状的人.

当然，对于上述的治疗适应症，所施用的剂量随施用的化合物、施用方式和治疗需要而变化.然而，通常，当化合物以固体形式施用时，每天1mg-2000mg的剂量获得了满意的结果.

通式(Ia)或(Ib)化合物，及其药学上可接受的衍生物可单独使用，或以化合物或衍生物与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合的适当的药物组合物的形式使用.因而，本发明的另一方面涉及含有新的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合的药物组合物.施药可通过，但不限制于，经肠(包括口服、舌下或直肠)、鼻内、吸入、静脉内、局部或其它的肠道外路线.选择和制备适合的药物制剂的常规方法描述在，例如，“Pharmaceuticals-The Science of Dosage FormDesigns”，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988中.药物组合物优选含有少于80％，更优选少于50％的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其药学上可接受的盐.

还提供了制备上述药物组合物的方法，包括混合这些成分.

本发明通过下面的实施例进行说明，但决不是进行限制.

在25℃下通过300MHz Bruker DPX仪器或Varian Unity 400MHz分光计记录¹H和¹³C NMR光谱.使用下面的参考信号：DMSO-d₆ δ39.5(¹³C)；DMSO-d₆δ2.50(¹H)的中间线.所有的质谱通过Waters LCMS(2790)仪器进行记录.薄层色谱法(TLC)通过Merck TLC铝片硅胶60F₂₅₄预制板(层厚度0.2mm)来进行.Merck Silica gel60(0.063-0.200mm)用于柱色谱法.通过Gynkotek P580HPG进行HPLC分析，带有Gynkotek UVD170S紫外-可冗光检测器的梯度泵.柱子；Waters symmetry C18，5μm，3.9x150mm.制备液相色谱法通过Gynkotek P580HPG进行，带有Gynkotek UVD 170S UV-vis检测器的梯度泵.柱子；Waters symmetry C18，5μm，19x100mm.

起始物质可根据下面的参考文献制备：

1.Merlos，M.；Gomez，L.；Vericat，M.L.；Bartroli，J.；Garcia-Rafanell，J.；Forn，J.；Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.；25；8：1990；653-658.

2.Kjellin，P.G.；Persson，C.G.A.，EP0010531.

3.Katritzky，A.R.；Drewniak，M.，Tet.Lett.(1988)，29(15)，1755-1758.

4.Van der Goot，H.；Schepers，M.J.P.；Sterk，G.J.；Timmerman，H.，Eur.J.Med.Chem.(1992)，27(5)，511-517.

实施例1

1，3-二异丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤

1，3-二异丁基-8-甲基黄嘌呤¹(0.20g，0.72mmol)和Lawesson试剂(1.5g，3.6mmol)悬浮在甲苯(8mL)中，然后在100℃下加热21小时.反应混合物冷却，过滤分出不溶固体.减压分出溶剂，粗产物通过柱色谱法利用硅胶并用乙酸乙酯/庚烷(1：1)洗脱进行纯化得到题列化合物(90mg，43％的收率).

1H NMR(DMSO-d₆)：δ13.1(s，1H)，4.28(d，2H，J7.2Hz)，3.84(d，2H，J7.5Hz)，2.40(s，3H)，2.28-2.35(m，1H)，2.17-2.25(m，1H)，0.85-0.88(m，12H).

MS(ES)m/z295(M+1).

实施例2

1，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤

1，3-二丁基-8-甲基黄嘌呤¹(0.20g，0.72mmol)和Lawesson试剂(0.87g，2.2mmol)悬浮在甲苯(8mL)中，在120℃下加热30小时.所得的褐色混合物冷却，减压蒸发出溶剂.微褐色的固体残余物悬浮在10％的氢氧化钠(25mL)中并搅拌过夜.然后，溶液的pH用10％的乙酸调整至pH4.过滤收集沉淀物并用水洗涤.该粗产物通过柱色谱法利用硅胶并用乙酸乙酯/庚烷(9：1)洗脱进行纯化得到题列化合物(0.15g，收率69％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.1(s，1H)，4.40(t，2H，J7.6Hz)，3.99(t，2H，J7.3Hz)，2.40(s，3H)，1.57-1.69(m，4H)，1.28-1.35(m，4H)，0.88-0.93(m，6H).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.5，154.2，148.9，143.2，118.9，45.61，43.13，29.24，28.37，19.51，19.31，14.42，13.60.

MS(ES)m/z295(M+1).

实施例3

3-异丁基-1，8-二甲基-6-硫代黄嘌呤

3-异丁基-1，8-二甲基黄嘌呤¹(0.150g，6.35mmol，1.0当量)和Lawesson试剂(0.128g，3.17mmol，0.5当量)悬浮在甲苯(10mL)中，反应混合物加热至回流3.5小时.根据HPLC转化小于10％.加入Lawesson试剂(0.5g)，反应混合物加热至回流过夜.蒸发出溶剂，剩余的褐色固体通过制备HPLC纯化得到题列化合物(78mg，49％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.16(s，1H)，3.92(d，2H)，3.77(s，3H)，2.50(s，3H)，2.35(m，1H)，0.97(d，6H).

实施例4

3-(2-甲基丁基)-6-硫代黄嘌呤

3-(2-甲基丁基)黄嘌呤²(3g，0.013mol)和五硫化二磷(5g，0.025mol)的二噁烷(250mL)溶液回流3小时.蒸馏出差不多150mL二噁烷，并冷却该溶液.加入水(100mL)，混合物室温下搅拌2小时.加入2N氢氧化钠(75mL)，过滤该溶液并用5N的盐酸中和.过滤出该粗结晶并由乙醇中重结晶得到题列化合物(1.6g，51％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.53(s，1H)，12.32(s，1H)，8.11(s，1H)，3.85(dd，1H，²J13.1Hz，³J7.1Hz)，3.78(dd，1H，²J13.1Hz，³J 8.1 Hz)，2.00(m，1H)，1.36(m，1H)，1.14(m，1H)，0.87(t，3H，J7.6)，0.82(d，3H，J6.6).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ175.11，149.19，145.73，143.62，118.32，48.11，32.93，26.40，16.57，11.05.

实施例5

3-异丁基-8-甲基-6-硫代黄嘌呤

3-异丁基-8-甲基黄嘌呤²(4.5g，0.02mol)和五硫化二磷(8g，0.04mol)的二噁烷(400mL)溶液回流5小时.蒸馏出差不多200mL二噁烷，并冷却该溶液.加入水(250mL)，混合物室温下搅拌2小时.加入2N氢氧化钠(150mL)，过滤该溶液并用5N的盐酸中和，该溶液留置过夜.过滤出粗结晶并用水洗涤，得到所要的产物(4.3g).一部分(2.3g)由乙酸中重结晶得到纯的产物(1.5g，共31％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.13(s，1H)，12.16(s，1H)，3.77(d，2H，J8.1Hz)，2.38(s，3H)，2.20(m，1H)，0.86(d，3H，J7.1).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.19，154.23，149.14，146.11，118.56，49.29，26.63，19.73，14.54.

实施例6

3-异丁基-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-异丁基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

异丁基硫脲³(3.8g，29mmol)和氰基乙酸乙酯(3.9g，34mmol)加入到乙醇钠溶液[由钠(0.72g，32mmol)和无水乙醇(30mL)制备]中.所得的混合物回流4小时.冷却至室温后，减压下蒸发出溶剂.10％的乙酸(45mL)加入到粘稠的浆中.过滤收集所得的沉淀物，并用水洗涤该固体.由甲醇/水中重结晶得到所要的产物(4.0g，70％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.8(s，1H)，6.99(s，2H)，4.85(m，2H)，4.61(宽s，1H)，2.29(m，1H)，0.87(d，6H，J6.6Hz).

MS(ES)m/z200(M+1).

b)6-氨基-1-异丁基-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

6-氨基-1-异丁基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.0g，5.0mmol)悬浮在10％的乙酸(20mL)中，加入亚硝酸钠(0.38g，5.5mmol)，所得的混合物在75℃下加热1小时.反应混合物先变为粉红色，然后变为紫色.紫色混合物冷却至室温.然后加入水(20mL)，过滤收集紫色固体并用水洗涤得到题列化合物(1.1g，92％的收率).该固体不用进一步纯化用于以下步骤.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.1(宽s，1H)，12.8(宽s，1H)，9.1(宽s，1H)，4.80(宽s，1H)，3.78(宽s，1H)，2.21(m，1H)，0.88(d，6H，J6.3Hz).

MS(ES)m/z229(M+1).

c)5，6-二氨基-1-异丁基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

6-氨基-1-异丁基-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.1g，4.5mmol)悬浮在32％的氨水(10mL)中，加入水(10mL).该红色混合物在75℃下加热.以少部分的加入连二硫酸钠.当加入1.8g(10mmol)连二硫酸钠时，溶液的颜色由红色变为浅黄色.在该点所有的固体都溶解了.再加热5分钟后，在溶液中形成沉淀.从油浴中移出反应混合物，室温下搅拌45分钟.溶液的pH用10％的乙酸调整至中性pH.过滤收集黄色沉淀并用水洗涤，干燥得到二胺(0.76g，77％).该产物使用时不用进一步纯化.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.3(宽s，1H)，6.19(s，2H)，4.94(宽s，1H)，3.70(宽s，1H)，3.43(s，2H)，2.27-2.35(m，1H)，0.88(d，6H，J6.1Hz)·

MS(ES)m/z215(M+1).

d)3-异丁基-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-异丁基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.22g，1.0mmol)悬浮在甲酸(1.5mL)中，该溶液在100℃下加热1小时.减压蒸发出过量的甲酸.10％的氢氧化钠(1.5mL)加入到橙色固体中，所得的溶液在100℃下加热15分钟.加入水，溶液的pH用稀乙酸调整至pH4.所得的浆状物室温下搅拌0.5小时，然后过滤收集沉淀物并用水洗涤.收率：(0.21g，90％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.82(s，1H)，12.42(s，1H)，8.15(s，1H)，4.31(d，2H，J7.6Hz)，2.50(m，1H)，0.88(d，6H，J6.6Hz).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.81，152.57，149.79，141.19，110.68，54.04，26.11，19.79.

MS(ES)m/z225(M+1).

实施例7

3-异丁基-2，6-二硫代黄嘌呤

3-异丁基-2-硫代黄嘌呤(0.20g，0.89mmol)和Lawesson试剂(1.1g，2.7mmol)悬浮在甲苯(8mL)中.该混合物在120℃下加热17小时.冷却反应混合物，减压分出溶剂.加入10％的氢氧化钠(20mL)，该混合物搅拌10分钟.过滤该溶液分出不溶固体，固体用10％的氢氧化钠溶液洗涤.碱性滤液用稀乙酸处理直到达到pH4.过滤收集所得的沉淀并用水洗涤.干燥该物质得到题列化合物(0.16g，73％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.9(s宽，1H)，13.5(s宽，1H)，8.27(s，1H)，4.32(d，2H，J7.5Hz)，2.48-2.55(m，1H)，0.89(d，6H，J6.7Hz).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ173.3，172.0，144.9，144.5，122.8，54.9，26.3，20.2.

MS(ES)m/z241(M+1).

实施例8

3-异丁基-8-甲基-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-异丁基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(实施例6(c)，0.70g，3.26mmol)和原乙酸三乙酯(10mL)的混合物在130℃下加热2小时40分钟.然后反应混合物用冰浴冷却，过滤固体并用乙醇(4x2mL)洗涤.该固体真空干燥得到题列化合物(0.71g，95％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.45(s，1H)，12.33(s，1H)，4.28(d，2H，J7.6Hz)，2.50(m，1H)，2.39(s，3H)，0.87(d，6H，J6.6Hz).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.47，152.09，151.18，150.01，110.62，53.96，26.08，19.75，14.41.

MS(ES)m/z239(M+1).

实施例9

3-异丁基-7-甲基-2-硫代黄嘌呤

a)N-(6-氨基-1-异丁基-4-氧代-2-硫代-1，2，3，4-四氢嘧啶-5-基) 甲酰胺

5，6-二氨基-1-异丁基′-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(实施例6(c)，0.25g，1.2mmol)溶解在甲酸(1.5mL)中，室温下搅拌0.5小时.几分钟后开始形成粉红色沉淀.加入水，所得的混合物搅拌10分钟.过滤收集粉红色固体，用水洗涤，干燥得到题列化合物(0.25g，86％).该物质的使用不用进一步纯化.NMR显示所获得的产物是两种互变异构体的混合物：甲酰胺(主要)和亚氨基(次要).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ12.0(宽s，1H)，8.73(s，1H)，8.07(s，1H)，6.85(s，2H)，4.94(宽s，1H)，3.71(宽s，1H)，2.22-2.32(m，1H)，0.88(d，6H，J6.5Hz).由亚氨基异构体产生的另外的峰8.12(d，1H，J11.5Hz)，7.77(d，1H，J11.5Hz)，7.13(s，2H).

MS(ES)m/z243(M+1).

b)6-氨基-1-异下基-5-甲基氨基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

N-(6-氨基-1-异丁基-4-氧代-2-硫代-1，2，3，4-四氢嘧啶-5-基)甲酰胺(0.25g，1.0mmol)悬浮在无水四氢呋喃(5mL)中，并逐滴地加入硼烷二甲亚砜络合物(1M的二氯甲烷溶液，2.5mL，2.5mmol).反应混合物室温下搅拌2.5小时.向所得的澄清黄色溶液中加入几滴2M的盐酸来除去未反应的硼烷.加入水，所得的水溶液用二氯甲烷(3x15mL)萃取.合并后的有机相用盐水洗涤并通过Na₂SO₄干燥.减压下蒸发出溶剂得到题列化合物(0.12g，收率54％).该物质不用进一步纯化就可使用.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.9(宽s，1H)，5.75(s，2H)，4.94(宽s，1H)，3.70(宽s，1H)，3.43(s，2H)，2.38(s，3H)，2.24-2.32(m，1H)，0.87(d，6H，J6.8Hz).

MS(ES)m/z229(M+1).

c)3-异丁基-7-甲基-2-硫代黄嘌呤

6-氨基-1-异丁基-5-甲基氨基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.11g，0.48mmol)溶解在甲酸(1mL)中，在85℃下加热1小时.减压下蒸发出过量的甲酸.加入10％的氢氧化钠溶液(2mL)，在85℃下加热该溶液20分钟.加入水，用稀乙酸将pH调整至4，此时有白色固体沉淀.过滤收集白色固体，用水洗涤并干燥得到题列化合物(85mg，74％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ12.4(s，1H)，8.10(s，1H)，4.28(d，2H，J7.5Hz)，3.89(s，3H)，2.44-2.50(m，1H)，0.88(d，6H，J6.7Hz).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ174.3，153.2，150.1，143.7，111.2，54.1，33.6，26.4，20.1.

MS(ES)m/z239(M+1).

实施例10

3-环己基甲基-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-环己基甲基-2-硫代-2，3-二氢1H-嘧啶-4-酮

题列化合物根据实施例6(a)的一般方法利用环己基甲基硫脲⁴(3.92g，22.7mmol)来制备，得到题列化合物，白色固体(4.87g，90％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.75(s，1H)，6.93(s，2H)，5.1-4.7(brm，1H)，4.83(s，1H)，3.55(宽，1H)，1.93(br，1H)，1.75-1.30(brm，5H)，1.10(br，5H).

b)6-氨基-1-环己基甲基-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例6(b)的一般方法由6-氨基-1-环己基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(3.75g，15.7mmol)制备题列化合物，得到3.60g(85％)的紫色固体产物.

¹HNMR：δ13.5(brs，1H)，12.7(br s，1H)，9.1(brs，1H)，4.84(brs，1H)，3.82(br s，1H)，1.80(br，1H)，1.64-1.59(brm，5H)，1.07(br，5H).

c)5，6-二氨基-1-环己基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例6(c)中的一般方法由6-氨基-1-环己基甲基-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(3.60g，13.4mmol)制备题列化合物，不用进一步纯化在下一步骤中使用.

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ6.17(s，2H)，5.01(br，1H)，4.0-3.0(非常宽的峰，3H)，1.97(br，1H)，1.8-1.3(brm，5H)，1.09(brm，5H).

d)3-环己基甲基-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-环己基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.44g，5.67mmol)与原甲酸三乙酯(15mL)在146℃下加热2小时10分钟.混合物冷却至室温，然后再通过冰浴冷却，之后加入庚烷(5mL).悬浮液过滤并用庚烷(20mL)洗涤后，所获得的固体真空干燥.将该固体(1.2g)悬浮在2-丙醇(125mL)、水(5mL)和叔丁基甲基醚(25mL)的热混合物中，冷却并过滤后得到白色沉淀，再用叔丁基甲基醚(5mL)洗涤.该固体真空干燥得到题列化合物(0.95g，63％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.69(s，1H)，12.35(s，1H)，8.12(s，1H)，4.33(d，2H，J7.1Hz)，2.18(m，1H)，1.49-1.50(m，5H)，1.02-1.17(m，5H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ173.65，152.68，149.90，141.41，110.96，52.97，35.31，30.09，25.88，25.32.

MS(ES)m/z265(M+1).

实施例11

3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

甲醇钠(0.81g，21.2mmol，1.05当量)加入到3-甲氧基丙基硫脲(3.00g，20.2mmol)的乙醇(10mL)溶液中.加入氰基乙酸乙酯(2.18mL，20.2mmol)的乙醇(10mL)溶液，所得的白色浆状物加热至回流2.5小时.蒸出溶剂，剩余的淡褐色油用2M的乙酸(15mL)处理.过滤出白色结晶并用乙酸洗涤得到题列化合物(2.10g，48％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ1.77(s，1H)，6.95(s，2H)，4.86(s，1H)，3.39(t，2H)，3.24(s，3H)，1.88(m，2H).

b)3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黄嘌呤

乙酸(25mL)加入到6-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(2.00g，9.29mmol)中，红色反应混合物加热至90℃.加入亚硝酸钠(0.71g，10.2mmol)的水(7mL)溶液，移走油浴，反应混合物搅拌20分钟.溶剂与乙醇共蒸发，剩余的红色固体(1.8g，79％)不用进一步纯化用于下一步骤中.

铂/碳(0.5g)加入到粗6-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.80g，7.38mmol)的四氢呋喃(80mL)和水(20mL)溶液中，反应混合物大气压下氢化2小时.过滤掉催化剂，淡褐色的滤液与乙醇(250mL)共蒸发.所得的褐色固体1.6g不用进一步纯化用于下一步骤中.

5，6-二氨基-1-环己基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.6g，12.2mmol)溶解在乙醇(10mL)和原甲酸三乙酯(10mL)中，反应混合物回流2.5小时.蒸发出溶剂，所得的褐色固体通过快速色谱法(庚烷/乙酸乙酯，4：1-1：1)纯化得到题列化合物(110mg，9％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.78(s，1H)，12.40(s，1H)，8.16(s，1H)，4.52(t，2H，J7.1Hz)，3.41(t，2H，J7.1Hz)，3.21(s，3H)，1.98(m，2H).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.27，152.63，149.30，141.50，110.94，69.51，57.82，45.47，26.68.

实施例12

3-环丙基甲基-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-环丙基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

向1-环丙基甲基-2-硫脲(0.60g，4.6mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入甲醇钠(0.26g，4.8mmol)，5分钟后加入氰基乙酸乙酯(0.50mL，4.6mmol).所得的混合物加热至回流2小时40分钟，继而减压蒸发出溶剂，所得的黄色固体用2M的乙酸水溶液(10mL)处理得到白色固体.过滤收集该固体并用2M的乙酸水溶液(10mL)洗涤，与乙醇(10mL)搅拌，然后减压下蒸发并干燥，得到题列化合物(0.51g，56％).

MS(ES)m/z198(M+1).

b)3-环丙基甲基-2-硫代黄嘌呤

6-氨基-1-环丙基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.50g，2.5mmol)悬浮在乙酸(8mL)中，在90℃下加热15分钟后，向溶液中加入亚硝酸钠(0.19g，2.8mmol)的水(1mL)溶液.15分钟后停止加热，反应混合物室温下搅拌3小时.加入乙醇(30mL)，减压分出溶剂.所得的油用乙醇(30mL)处理，蒸发并干燥，得到6-氨基-1-环丙基甲基-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.61g)，棕红色固体.

由前一反应得到的粗产物(0.61g)溶解在水(10mL)和四氢呋喃(30mL)中，加入铂/碳(0.30g).混合物在大气压下氢化4小时，过滤分出催化剂，减压分出溶剂.蒸发加入的乙醇(50mL)得到橙色固体.残余物溶解在乙醇(10mL)中，加入原甲酸三乙酯(5mL)，所得的混合物回流温度下加热过夜.蒸发溶剂并利用制备HPLC纯化得到所要的化合物(38mg，6-氨基-1-环丙基甲基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮的收率6.2％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.78(s，1H)，12.43(s，1H)，8.15(s，1H)，4.37(d，2H，J7.1Hz)，1.50(m，1H)，0.52(m，2H)，0.45(m，2H).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.52，152.62，149.52，141.48，111.02，51.71，9.27，3.50.

MS(ES)m/z223(M+1).

实施例13

3-异丁基-1-甲基-2-硫代黄嘌呤

a)1-异丁基-3-甲基硫脲

甲胺(2M的甲醇溶液，20.0mL，40.2mmol)室温下15分钟内逐滴地加入到异丁基异硫氰酸酯(2.00mL，16.5mmol)中.反应混合物加热至回流3.5小时，蒸发出溶剂得到题列化合物(2.37g，98％)，无色的油.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ7.40(s，1H)，7.29(s，1H)，3.15(宽s，2H)，2.80(d，2H)，1.81(m，1H)，0.83(d，6H).

b)6-氨基-1-异丁基-3-甲基-5-亚硝基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮

氰基乙酸(1.52g，17.8mmol)的乙酸酐(2.45mL，25.9mmol)溶液加入到1-异丁基-3-甲基硫脲(2.37g，16.2mmol)中.反应混合物加热至60℃1.5小时.溶剂蒸发，所得的红色油溶解在乙醇(5mL)中，加入5M的氢氧化钠(1.6mL，8.1mmol).反应混合物回流2小时.溶剂与乙醇共蒸发，所得的淡褐色固体通过快速色谱法(乙酸乙酯)纯化得到6-氨基-1-异丁基-3-甲基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮(1.0g，29％)，黄色固体.

亚硝酸钠(0.34g，4.9mmol)的水(1.5mL)溶液室温下加入到胺(1.00g，4.7mmol)的乙醇(7.0mL)溶液中.加入5M的盐酸(1.0mL，4.9mmol)，所得的暗红色反应混合物室温下搅拌2小时.加入乙醇(20mL)，过滤出红色结晶并用二乙醚洗涤.干燥结晶得到题列化合物(0.68g，60％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ12.87(s，1H)，9.35(s，1H)，4.28(dd，2H)，3.75(s，3H)，2.34(m，1H)，0.90(d，6H).

c)3-异丁基-1-甲基-2-硫代黄嘌呤

钯/碳(3.70g)加入到6-氨基-1-异丁基-3-甲基-5-亚硝基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮(6.0g，24.8mmol)的四氢呋喃(1200mL)和水(300mL)溶液中，反应混合物氢化(2.5bar)21小时.过滤掉催化剂，减压下蒸发出四氢呋喃.残余物用乙酸乙酯(3x200mL)萃取.有机相浓缩，乙醇(100ml)加入到残余物中并蒸发.

褐色的二胺中间体溶解在原甲酸三乙酯(50mL)中，反应混合物加热至140℃40分钟.反应混合物浓缩并与乙醇共蒸发得到褐色固体.残余物通过快速色谱法(庚烷/乙酸乙酯，2：1-乙酸乙酯)纯化，然后用二乙醚和己烷洗涤该固体得到题列化合物(160mg，2.7％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.86(s，1H)，8.21(s，1H)，4.34(d，2H，J7.1Hz)，3.89(s，3H)，2.40(m，1H)，0.86(d，6H，J7.1Hz).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ174.68，153.33，148.41，141.73，109.92，52.83，37.17，25.77，19.92.

实施例14

3-(2-四氢呋喃基-甲基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(2-四氢呋喃基-甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

2-四氢呋喃基-甲基硫脲(1.0g，6.2mmol)和氰基乙酸乙酯(0.85g，7.5mmol)加入到乙醇钠[刚由钠(0.16g，6.9mmol)和无水乙醇(4mL)制备的]溶液中.所得的混合物回流3.5小时.冷却至室温后，减压蒸发出溶剂，所得的粘稠浆液重新溶解在水(30mL)中.该碱性溶液用2M盐酸中和.过滤收集所得的沉淀，固体用水洗涤.该粗产物(1.3g，90％)不用进一步纯化就可使用.

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.9(s，1H)，6.79(s，2H)，4.91(s，1H)，4.62-4.65(m，1H)，4.21-4.31(m，3H)，3.81-3.87(m，1H)，3.63-3.68(m，1H)，1.77-2.01(m，3H)，1.57-1.65(m，1H).

MS(ES)m/z228(M+1).

b)6-氨基-1-(2-四氢呋喃基甲基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H- 嘧啶-4-酮

6-氨基-1-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，5.6mmol)悬浮在10％的乙酸(25mL)水溶液中.加入亚硝酸钠(0.43g，6.2mmol)，该混合物在75℃下加热1小时.过滤收集紫色固体，洗涤并干燥，得到题列产物(1.3g，90％).

¹HNMR：δ13.3(br s，1H)，12.8(br s，1H)，8.93(br s，1H)，4.57(br s，1H)，4.45(br s，1H)，4.18-4.24(m，1H)，3.74-3.79(m，1H)，3.59-3.64(m，1H)，1.86-2.01(m，2H)，1.74-1.82(m，1H)，1.59-1.67(m，1H).

c)5，6-二氨基-1-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶- 4-酮

6-氨基-1-(2-四氢呋喃基甲基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1、3g，5.1mmol)溶解在32％的氨水(15mL)中，加入水(15mL).红色溶液在70℃下加热，同时以小部分的加入连二硫酸钠(2.2g，13mmol).加热再继续15分钟，然后黄色溶液在室温下搅拌1小时.该溶液用2M的盐酸中和.过滤收集黄色沉淀，用水洗涤，干燥，得到题列产物(0.90g，73％).该物质不用进一步纯化用于下一步骤中.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ5.96(s，2H)，4.74(brd，1H)，4.35(brs，1H)，4.21-4.28(m，1H)，3.84-3.89(m，1H)，3.64-3.69(m，1H)，3.49(brs，2H)，1.78-2.01(m，4H)，1.60-1.67(1H).

MS(ES)m/z243(M+1).

d)3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-14-酮(0.25g，1.0mmol)溶解于甲酸(1mL)中，在70℃下加热0.5小时.几分钟后在溶液中形成粉红色固体.蒸发出过量的甲酸，所得的固体溶解于10％的氢氧化钠溶液(4mL)中.该溶液在70℃下加热40分钟，然后用2M的盐酸中和.过滤收集所得的沉淀，用水洗涤并干燥，得到纯产物(0.23g，87％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ13.8(brs，1H)，12.4(brs，1H)，8.16(s，1H)，4.53-4.61(m，2H)，4.38-4.44(m，1H)，3.79-3.84(m，1H)，3.58-3.63(m，1H)，1.72-1.98(m，4H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ173.65，152.68，149.90，141.41，110.96，52.97，35.31，30.09，25.88，25.32.

MS(ES)m/z253(M+1).

实施例15

3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

题列化合物可根据实施例14(a)的一般方法来制备，但是使用(2-甲氧基乙基)硫脲(1.5g，11mmol)，得到题列化合物，白色固体(2.1g，93％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.9(s，1H)，6.82(s，2H)，4.89(s，1H)，4.53(宽s，2H)，3.62(t，2H，J5.9Hz)，3.29(s，3H).

MS(ES)m/z202(M+1).

b)6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶 -4-酮

6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.0g，5.0mmol)悬浮在10％的乙酸(20mL)中.加入亚硝酸钠(0.38g，5.5mmol)，所得的混合物75℃下加热1小时.反应混合物先变为粉红色，再变为紫色.加入水(20mL)，反应混合物放入冰箱中过夜.过滤收集紫色固体，用水洗涤得到题列化合物(0.42g，37％).通过缩小紫色滤液的体积获得第二部分产物(0.22g，19％).该粗产物不用进一步纯化用于下一步骤中.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.4(brs，1H)，12.8(brs，1H)，9.06(brs，1H)，4.54(brs，2H)，3.60(t，2H，J5.8Hz)，3.24(s，3H).

c)5，6-二氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(c)的一般方法制备题列化合物，但是使用6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.42g，1.8mmol)，得到题列化合物，黄色固体(0.28g，68％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.9(br s，1H)，5.94(s，2H)，4.58(br s，2H)，3.64(t，2H，J5.6Hz)，3.47(brs，2H)，3.28(s，3H).

MS(ES)m/z217(M+1).

d)3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.27g，1.3mmol)悬浮在甲酸(2mL)中，该溶液在90℃下加热1.5小时.减压下蒸发出过量的甲酸.10％的氢氧化钠溶液(5mL)加入到橙色固体中，所得的溶液90℃下加热2小时.反应混合物用稀乙酸中和.所得的溶液放入冰箱中几天，然后过滤收集己经形成的橙色针状结晶，并用水洗涤.收率：(0.11g，40％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.8(宽s，1H)，12.5(宽s，1H)，8.16(s，1H)，4.65(t，2H，J6.4Hz)，3.73(t，2H，J6.4Hz)，3.28(s，3H).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ172，14，151.06，148.02，139.85，109.20，66.04，56.65，44.72.

MS(ES)m/z227(M+1).

实施例16

3-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(3-(1-吗琳基)丙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4酮

根据实施例14(a)的一般方法制备题列化合物，只是使用1-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫脲(1.1g，5.3mmol)，得到题列化合物，白色固体(1.2g，87％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.8(s，1H)，7.24(s，2H)，4.84(s，1H)，4.33(br s，2H)，3.55-3.57(m，4H)，2.30-2.36(m，6H)，1.82-1.89(m，2H).

MS(ES)m/z271(M+1).

b)5，6-二氨基-1-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶- 4酮

6-氨基-1-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.57g，2.1mmol)溶解在10％的乙酸(10mL)中.加入亚硝酸钠(0.16g，2.3mmol)，室温下搅拌浆状物.2小时后仍剩余大量起始物质.加入更多的亚硝酸钠(0.32g，4.6mmol)，溶液搅拌过夜.过滤收集沉淀并用水洗涤.没有经过分析，这减少了极端不溶的固体.该固体溶解于32％的氨水(6mL)中，然后加入水(6mL).所得的红色溶液70℃下加热，以小部分的加入连二硫酸钠(0.91g，5.2mmol).然后，该溶液70℃下搅拌1.5小时.加入更多的连二硫酸钠(0.91g，5.2mmol)，该溶液再在70℃下搅拌2.5小时.过滤该中性溶液分出不溶固体.滤液浓缩，所得的黄色固体悬浮在水中.过滤收集固体，用水洗涤，干燥得到题列产物(0.068g，11％).

¹HNMR：δ12.0(br s，1H)，6.48(s，2H)，3.59(m，4H)，2.30-2.45(m，6H)，1.88-1.91(m，2H).

MS(ES)m/z286(M+1).

c)3-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.068g，0.24mmol)溶解于甲酸(0.4mL)中，室温下搅拌1小时.蒸发出过量的甲酸，加入10％的氢氧化钠溶液(1.5mL)，该黄色溶液70℃下加热40分钟.冷却的溶液用2M的盐酸中和，放入冰箱中几小时.过滤收集沉淀，用水洗涤，干燥得到题列化合物，灰白色固体(0.025g，36％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.7(宽s，1H)，12.4(s，1H)，8.17(s，1H)，4.53(t，2H，J7.5Hz)，3.52(m，4H)，2.31-2.46(m，6H)，1.91-1.99(m，2H).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.68，152.99，149.82，141.75，111.24，66.39，55.70，53.43，46.58，23.35.

MS(ES)m/z296(M+1).

实施例17

3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(2-吹喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(a)的一般方法制备题列化合物，只是反应时间降低至1.5小时，用稀乙酸沉淀产物.利用2-呋喃基甲基硫脲(1.0g，6.4mmol)，获得题列产物(0.95g，66％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.8(brs，1H)，7.58-7.62(m，1H)，7.05(brs，2H)，6.38-6.42(m，1H)，6.31-6.36(m，1H)，5.68(br s，2H)，4.85(s，1H).

MS(ES)m/z224(M+1).

b)6-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶 -4-酮

根据实施例14(b)的一般方法制备题列化合物，只是反应混合物先在60℃下加热1小时，然后在室温下搅拌1小时.当使用6-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.37g，1.6mmol)和2当量的亚硝酸钠(0.23g，3.3mmol)时，获得褐色固体产物(0.25g，60％).

¹H NMR：δ12.1(brs，1H)，7.54-7.57(m，1H)，7.45-7.47(m，1H)，6.37-6.40(m，1H)，6.32-6.38(m，1H)，6.30-6.32(m，1H)，5.62(s，2H)，5.48(s，2H).

c)5，6-二氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(c)的一般方法由6-氨基-1-(2-吹喃基甲基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.25g，0.99mmol)制备题列化合物(0.12g，52％)，不需纯化用于下一步骤中.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ12.5(brs，1H)，12.2(s，1H)，7.58-7.60(m，1H)，7.55-7.57(m，1H)，6.38-6.41(m，2H)，6.34-6.37(m，1H)，6.30(brs，2H)，5.77(s，2H)，5.63(s，2H).

MS(ES)m/z239(M+1).

d)3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.12g，0.51mmol)的甲酸(0.5mL)溶液室温下搅拌0.5小时.蒸发出过量的甲酸，所得的固体溶解于10％的氢氧化钠溶液(3mL)中.该溶液在70℃下加热0.5小时.反应混合物用2M的盐酸中和.过滤收集所得的沉淀，用水洗涤，干燥.收率：(0.047g，37％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ13.9(s，1H)，12.5(s，1H)，8.18(s，1H)，7.55-7.57(m，1H)，6.36-6.39(m，2H)，5.69(s，2H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ174.14，152.85，149.56，149.33，142.77，141.80，110.93，109.40，44.26.

MS(ES)m/z249(M+1).

实施例18

3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(a)的一般方法制备题列化合物，只是反应在回流温度下进行2.5小时，继而在室温下进行16小时，利用稀乙酸沉淀产物.用(4-甲氧基苄基)硫脲(1.0g，5.1mmol)起始，得到所要的产物(1.2g，92％).

¹HNMR(CD₃OD)：δ7.19(d，2H，J8.6Hz)，6.89(d，2H，J8.6Hz)，5.72(br s，2H)，5.06(s，1H)，3.77(s，3H).

MS(ES)m/z264(M+1).

b)6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶 -4-酮

根据实施例14(b)的一般方法制备题列化合物，但是使用2.5小时的反应时间.利用6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.2g，4.7mmol)得到产物(1.2g，88％)，蓝绿色固体，不用进一步纯化用于下一反应中.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.9(s，1H)，7.18-7.12(m，2H)，6.95-6.83(m，2H)，5.58(brs，2H)，3.70(s，3H).

c)5，6-二氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(c)的一般方法制备题列化合物，只是使用稀乙酸来中和反应混合物.由6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.2g，4.1mmol)起始制备所要的产物(0.83g，73％)，黄色固体.

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.7(brs，2H)，7.20-7.12(m，2H)，6.92-6.85(m，2H)，6.06(s，2H)，5.73(br s，2H)，3.71(s，3H).

MS(ES)m/z279(M+1).

d)3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黄嘌呤

5，6-二氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.83g，3.0mmol)溶解于甲酸(3.0mL)中，所得的溶液在100℃下加热1小时.减压分出过量的甲酸，残余物溶解于10％的氢氧化钾溶液(8mL)中，在100℃下加热15分钟.反应混合物用10％的乙酸中和，过滤收集所得的沉淀.沉淀物由乙醇：二甲基甲酰胺中重结晶，所分离的结晶溶解于1M的氢氧化钾溶液中，用10％的乙酸中和来沉淀并过滤收集.干燥后，获得题列化合物(0.14g，16％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.9(brs，1H)，12.5(s，1H)，8.15(s，1H)，7.36(d，2H，J8.6Hz)，6.84(d，2H，J8.9Hz)，5.63(s，2H)，3.70(s，3H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ173.85，158.52，152.45，149.36，141.41，129.35，127.97，113.58，110.83，55.01，49.63.

MS(ES)m/z289(M+1).

实施例19

3-(4-氟苄基)-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(a)的一般方法制备题列化合物，只是反应时间为16小时，用稀乙酸处理来沉淀产物.(4-氟苄基)硫脲(1.0g，5.4mmol)得到白色固体产物(1.2g，86％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ11.9(brs，1H)，7.27-7.11(m，4H)，6.91(s，2H)，5.67(brs，2H)，4.89(s，1H).

MS(ES)m/z252(M+1).

b)6-氨基-1-(4-氢苄基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4- 酮

根据实施例14(b)的一般方法制备题列化合物，只是反应时间增加至共8小时.6-氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.2g，4.7mmol)得到所要的产物(0.88g，67％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.1(brs，1H)，12.8(brs，1H)，7.33-7.08(m，2H)，7.13(t，2H，J8.7Hz)，5.62(brs，2H)，

c)5，6-二氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(c)的一般方法制备题列化合物，只是反应在75℃下保持1小时，然后在室温下保持20分钟，用稀乙酸中和反应混合物.利用6-氨基-1-(4-氟苄基)-5-亚硝基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.88g，3.1mmol)得到所要的产物(0.55g，66％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ12.1(brs，2H)，7.29-7.12(m，4H)，6.08(s，2H)，5.75(brs，2H).

MS(ES)m/z267(M+1).

d)3-(4-氟苄基)-2-硫代黄嘌呤

根据实施例18(d)的一般方法制备题列化合物，但是使用5，6-二氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.55g，2.1mmol)，得到所要的产物(0.24g，41％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.9(brs，1H)，12.5(s，1H)，8.15(s，1H)，7.44(dd，2H，J8.6，8.6Hz)，7.12(t，2H，J8.9Hz)，5.68(s，2H).

¹³CNMR(DMSO-d₆)：δ173.96，160.14，152.48，149.28，141.44，132.19，129.83(d，J8.0Hz)，115.00(d，J22Hz)，110.82，49.49.

MS(ES)m/z277(M+1).

实施例20

3-苯乙基-2-硫代黄嘌呤

a)6-氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(a)的一般方法制备题列化合物，只是回流3.5小时的反应时间，然后在室温下反应16小时.用稀乙酸处理来沉淀产物.苯乙基硫脲(1.0g，5.6mmol)得到白色固体产物(1.3g，95％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ11.8(brs，1H)，7.37(d，2H，J7.1Hz)，7.31(t，2H，J7.4Hz)，7.22(t，1H，J7.2Hz)，7.08(bra，2H)，4.88(s，2H)，4.52(brs，1H)，3.32(brs，1H)，2.92(t，2H，J8.3Hz).

MS(ES)m/z248(M+1).

b)6-氨基-5-亚硝基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(b)的一般方法制备题列化合物，只是增加反应时间至1.5小时.6-氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，5.3mmol)得到所要的产物(1.3g，92％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ13.5(brs，1H)，12.8(brs，1H)，9.34(brs，1H)，7.37-7.28(m，4H)，7.25-7.20(m，1H)，4.55(brs，2H)，2.90(t，2H，J8.4Hz).

c)5，6-二氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮

根据实施例14(c)的一般方法制备题列化合物，只是反应在75℃下保持15分钟，然后室温下保持1小时20分钟，用稀乙酸中和反应混合物.使用6-氨基-5-亚硝基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，4.8mmol)分离到所要的产物(1.1g，88％).

¹H NMR(DMSO-d₆)：δ10.1(brs，H)，7.46-7.16(m，5H)，6.25(s，2H)，4.56(brs，2H)，2.94(t，2H，J8.3Hz).

MS(ES)m/z263(M+1).

d)3-苯乙基-2-硫代黄嘌呤

根据实施例18(d)的一般方法制备题列化合物，只是最后用1M的盐酸中和.使用5，6-二氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氢-1H-嘧啶-4-酮(0.55g，2.1mmol)得到所要的产物(0.39g，34％).

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ7.53(s，1H)，7.32(d，4H，J4.5Hz)，7.22(m，1H)，4.63(m，2H)，3.01(m，2H)，1.88brs，2H).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ170.56，155.20，150.51，146.41，138.54，128.58，128.46，126.34，117.49，48.82，32.59.

MS(ES)m/z273(M+1).

实施例21

3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤的对映体

3-(2-四氢吹喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤的外消旋物溶液(3mg/mL)通过手性HPLC在Chirapak AD-RH柱(4.6x150mm；5μm)上进行分离.流动相是甲醇：乙酸：三乙胺(100：0.1：0.1)，流速1mL/min.加样体积为20μL.

对映体1

e.e，93.6％；MS(ES)m/z253(M+1).

对映体2

e.e.97.3％；MS(ES)m/z253(M+1).

实施例22

3-正丁基-2-硫代黄嘌呤

利用实施例6所描述的方法制备题列化合物.

¹HNMR(DMSO-d₆)：δ13.82(s，1H)，12.40(s，1H)，8.15(s，1H)，4.45(m，2H)，1.73(m，2H)，1.34(sextet，2H，J＝7.5)，0.92(t，3H，J＝7.5).

¹³C NMR(DMSO-d₆)：δ173.31，152.62，149.30，141.47，110.84，47.37，28.61，19.48，13.72.

MS(ES)m/z225(M+1).

筛选

测定MPO抑制活性的方法公开在共同未决的专利申请WO02/090575中.本发明化合物的药物活性在下面的筛选中进行测试：

测定缓冲液：20mM的磷酸钠/钾缓冲液pH6.5，含有10mM牛磺酸和100mM NaCl.

展开试剂：2mM的3，3′，5，5′-四甲基联苯胺(TMB)，200μMKI，带有20％DMF的200mM乙酸盐缓冲液pH5.4.

向10μl用测定缓冲液稀释的化合物中，室温下10分钟内加入10μl人体MPO(最后浓度2.5nM).然后室温下10分钟内加入50μl的H₂O₂(最后浓度100μM)，或测定缓冲液单独作为对照.5分钟内加入10μl的0.2mg/ml的过氧化氢酶(最后浓度18μg/ml)来停止反应，再加入100μl的TMB展开试剂(2mMTMB的含有20％二甲基甲酰胺(DMF)的200mM乙酸盐缓冲液pH5.4和200μMKI的溶液)。调制平板，然后利用吸收光谱法在约650nM处约5分钟后测量所形成的氧化3，3′，5，5′-四甲基联苯胺的量.然后利用标准方法测定IC50值.

在进行上述的筛选试验时，实施例1-22的化合物得到了小于60μM的IC₅₀值，它们表现出了有用的治疗活性.有代表性的结果列在下表中：

 

化合物	MPO的抑制作用(IC50μM)
		实施例6	0.87
实施例10	0.53
		实施例14	0.51
实施例15	0.44
		实施例16	2.94
实施例17	7.57
		实施例18	0.49
实施例20	0.96

Claims (10)

1.通式(Ia)或(Ib)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗神经炎性疾病或症状的药物中的用途：

其中：

X代表S，和Y代表O；

R¹代表氢或C1-6烷基；

R²代表被环丙基、环己基、四氢呋喃基或吗啉基取代的亚甲基、1，2-亚乙基或1，3-亚丙基；

R³和R⁴独立地代表氢或C1-6烷基。

2.根据权利要求1的用途，其中所述的疾病或症状是多发性硬化。

3.根据权利要求1的用途，其中所述的疾病或症状是阿尔茨海默病。

4.根据权利要求1的用途，其中所述的疾病或症状是帕金森病。

5.根据权利要求1的用途，其中所述的疾病或症状是肌萎缩性(脊髓)侧索硬化。

6.根据权利要求1的用途，其中所述的疾病或症状是中风。

7.如权利要求1中定义的化合物在制备用于治疗慢性阻塞性肺病的药物中的用途。

8.如权利要求1中定义的化合物在制备用于治疗囊性纤维化的药物中的用途。

9.如权利要求1中定义的化合物在制备用于治疗动脉硬化症的药物中的用途。

10.根据权利要求1-9之任一项的用途，其中所述式(Ia)或(Ib)化合物选自：

3-环己基甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-环丙基甲基-2-硫代黄嘌呤；

3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

3-(3-(1-吗啉基)丙基)-2-硫代黄嘌呤；

(+)-3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

(-)-3-(2-四氢呋喃基甲基)-2-硫代黄嘌呤；

或其药学上可接受的盐。