CN101006944A - 一种在多孔纯钛牙种植体表面组装rgd的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种在多孔纯钛牙种植体表面组装RGD的方法。利用层层静电自组装技术，先用聚乙烯亚胺(PEI)溶液处理多孔纯钛种植体使种植体表面带有正电荷，然后将种植体浸入RGD溶液中，利用异种电荷相吸引原理将RGD固定在PEI表面，再用戊二醛交联PEI和RGD，最后将种植体浸入RGD溶液中封闭未结合的醛基，这样能进一步增加RGD量，重复上述过程可得到多层RGD覆盖层。本发明既能保证在RGD的组装过程中不破坏种植体表面原有的形貌，又能保证RGD在种植体表面的数量和结合力，更有利于临床应用。
Description
技术领域
本发明涉及在牙种植体表面组装RGD，具体是指一种在多孔纯钛牙种植体表面组装RGD的方法。
背景技术
将某些生物活性短肽固定在纯钛或钛合金材料的表面，可以改善种植体表面结构特征，提高材料表面的生物活性，加强细胞的亲和力，为细胞粘附、增殖、伸展和分化提供仿生界面，促进种植体骨结合。RGD(Arg-Gly-Asp)序列是最常应用于种植体表面的一种生物活性短肽，是各种细胞外基质中最常见的基本结构部分，也是广泛存在于细胞识别系统的基本单位。大约有11种整合素依赖RGD序列与细胞外基质(ECM)特异性相结合，包括α3β1、α5β1、α8β1、αIIbβ3、αvβ1、αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α2β1、α4β1。多种细胞膜整合素与ECM的粘附依赖于RGD序列，说明RGD序列在细胞粘附中的重要性，同时也证明了RGD序列是最有效的促粘附短肽。Zreiqat将线状RGD(GRGDSP)组装到Ti6A14V表面，观察其对成骨细胞生物学行为的影响，发现线状RGD能促进成骨细胞高表达骨钙素、I型胶原和骨涎蛋白的mRNAs基因和蛋白水平，说明线状RGD能刺激成骨细胞分化，促进细胞粘附、伸展。Verrier通过化学方法将7种线状RGD和3种环状RGD组装到Ti6A14V表面，观察其对成骨细胞对钛合金粘附的影响，结果表明线状RGD和环状RGD均能有效地促进成骨细胞对钛合金的粘附，环状RGD效果更佳。Elmengaard将环状RGD(RGDfK)组装到Ti6A14V种植体表面，植入狗的胫骨，观察4周，组织形态学表明处理组种植体表面骨组织明显生长，而纤维组织明显减少，在种植体周围0-100um范围内骨量明显增加，拉出试验表明处理组种植体的机械固位力明显高于对照组种植体，说明环状RGD能促进种植早期骨形成。Kroese-deutman在多孔样的钛纤维网种植体表面共价上环状RGD，植入新西兰大白兔的颅骨中，术后4周、8周处理组骨形成明显多于对照组，证明环状RGD和钛纤维网共同使用能促进新骨形成。大量研究证明胶原能促进种植体周围新骨形成，胶原和RGD序列结合能更好地促进种植体周围新骨形成。
目前在种植体表面上RGD固定方法常用的有物理吸附和化学偶联两大类。物理吸附是RGD固定方法中较简单的一种，是通过非共价键作用自然吸附于种植体表面。物理吸附所形成RGD覆盖层厚薄不一，RGD与材料结合力较小，稳定性差，重复性差，容易在处理过程或手术过程中被擦掉，易出现实验误差。Ferris用这种方法将RGD短肽组装到光滑种植体表面，并植入大鼠股骨中，观察RGD对新骨形成和界面结合力的影响，结果发现在2周时RGD覆盖的种植体周围骨量明显增加，但4周时种植体周围骨量虽有所增加但并没有统计学意义，拉出测试也表明界面结合力虽有所增大但并没有统计学意义。而Elmengaard和Kroese-Deutman研究发现在4周和8周时种植体周围骨量明显增加，界面结合力明显增大。化学偶联是将材料通过某种方法活化，如表面水解、等离子沉降、紫外辐射等，引入能与多肽键和的功能基团，如-OH、-COOH、-NH2、巯基、活性氢等基团，然后利用交联剂与肽段以共价键结合，产生化学反应。化学偶联与物理吸附相比，RGD与材料结合牢固、稳定，可形成较均匀的一层膜状物，重复性好，但也存在一些缺点，例如：临床应用的种植体表面往往经过特殊处理(喷砂、酸蚀等)才得到的，是经过大量研究证实能与骨组织结合较好的一种表面，在RGD的组装过程中最好不要被破坏，尽量保持种植体表面的完整性，但是化学偶联在RGD固定过程中，大多先进行预处理，例如酸和双氧水处理，使钛材料带有-OH、-COOH、-NH2、巯基、活性氢等基团，而使用的这些处理剂大多是要破坏种植体表面的，不能保持种植体原有的形貌，这对种植体的临床应用有一定的影响。
发明内容
本发明的目的在于提供一种在多孔纯钛牙种植体表面组装RGD的方法，在RGD的组装过程中既保证不破坏种植体表面原有的形貌，又能保证RGD在种植体表面的数量和结合力，从而有利于临床应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是包括以下步骤：
1)将多孔纯钛牙种植体浸入0.5～1mg/ml PEI溶液中30～90min，取出种植体，放入双蒸水10～20min；
2)再将种植体浸入含0.4～1mg/mlRGD的NaHCO3溶液中6～12hrs，取出种植体，双蒸水清洗10～20min；
3)后将种植体浸入0.5～1.5mg/100ml戊二醛溶液中2～4hrs，取出种植体，双蒸水清洗10～20min；
4)最后将种植体浸入0.4～1mg/mlRGD的NaHCO3溶液中12～24hrs，取出种植体，双蒸水清洗10～20min，干燥备用；
5)重复上述1～4过程，能得到多层RGD覆盖层。
所述的纯钛牙种植体是用商业纯钛材制备，其表面为多孔状螺纹型。
本发明的步骤1可使种植体表面覆盖PEI，即表面带有正电荷，步骤2可利用RGD本身带有少量负电荷与PEI结合，步骤3是利用戊二醛上的醛基与PEI和RGD上的氨基结合，使RGD与PEI结合更紧密，步骤4利用RGD上的氨基与戊二醛上的醛基结合，进一步增加RGD的量。
本发明具有的有益效果是：用本发明提供的方法在多孔纯钛牙种植体表面组装RGD，既能保证在RGD的组装过程中不破坏种植体表面原有的形貌，又能保证RGD在种植体表面的数量和结合力，更有利于临床应用。
附图说明
图1是多孔纯钛种植体表面在组装RGD前的SEM图；表面形成多级孔洞结构。
图2是多孔纯钛种植体表面在组装RGD后的SEM图；表面的多级孔洞结构没有破坏。
图3是采用本发明组装一层RGD的荧光图像；在多孔纯钛种植体表面可见RGD覆盖。
图4是采用本发明组装二层RGD的荧光图像；在多孔纯钛种植体表面可见较多RGD覆盖。
图5是采用本发明组装三层RGD的荧光图像；在多孔纯钛种植体表面可见较多RGD覆盖。
具体实施方式
实施例1：
1)将多孔纯钛牙种植体浸入0.5mg/ml PEI溶液中90min，取出种植体，放入双蒸水10min；
2)再将种植体浸入含0.4mg/mlRGD的NaHCO3溶液中12hrs，取出种植体，双蒸水清洗10min；
3)后将种植体浸入0.5mg/100ml戊二醛溶液中4hrs，取出种植体，双蒸水清洗10min；
4)最后将种植体浸入0.4mg/mlRGD的NaHCO3溶液中24hrs，取出种植体，双蒸水清洗10min，干燥备用；
5)重复上述1～4过程，可得到多层RGD覆盖层(如图3～5所示)。
实施例2：
1)将多孔纯钛牙种植体浸入0.8mg/ml PEI溶液中60min，取出种植体，放入双蒸水15min；
2)再将种植体浸入含0.7mg/mlRGD的NaHCO3溶液中9hrs，取出种植体，双蒸水清洗15min；
3)后将种植体浸入1mg/100ml戊二醛溶液中3hrs，取出种植体，双蒸水清洗15min；
4)最后将种植体浸入0.7mg/mlRGD的NaHCO3溶液中18hrs，取出种植体，双蒸水清洗15min，干燥备用；
5)重复上述1～4过程，可得到多层RGD覆盖层。
实施例3：
1)将多孔纯钛牙种植体浸入1mg/ml PEI溶液中30min，取出种植体，放入双蒸水20min；
2)再将种植体浸入含1mg/mlRGD的NaHCO3溶液中6hrs，取出种植体，双蒸水清洗20min；
3)后将种植体浸入1.5mg/100ml戊二醛溶液中2hrs，取出种植体，双蒸水清洗20min；
4)最后将种植体浸入1mg/mlRGD的NaHCO3溶液中12hrs，取出种植体，双蒸水清洗20min，干燥备用；
5)重复上述1～4过程，可得到多层RGD覆盖层。
上述实施例用来说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明作出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。
Claims (2)
1.一种在多孔纯钛牙种植体表面组装RGD的方法，其特征在于该方法的步骤如下：
1)将多孔纯钛牙种植体浸入0.5～1mg/ml PEI溶液中30～90min，取出种植体，放入双蒸水10～20min；
2)再将种植体浸入含0.4～1mg/ml RGD的NaHCO3溶液中6～12hrs，取出种植体，双蒸水清洗10～20min；
3)后将种植体浸入0.5～1.5mg/100ml戊二醛溶液中2～4hrs，取出种植体，双蒸水清洗10～20min；
4)最后将种植体浸入0.4～1mg/ml RGD的NaHCO3溶液中12～24hrs，取出种植体，双蒸水清洗10～20min，干燥备用；
5)重复上述1～4过程，能得到多层RGD覆盖层。
2.根据权利要求1所述的一种在多孔纯钛牙种植体表面组装RGD的方法，其特征在于：所述的纯钛牙种植体是用商业纯钛材，其表面为多孔状螺纹型。
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101961508A (zh) * | 2010-09-30 | 2011-02-02 | 浙江大学 | 一种聚电解质复合涂层的制备方法 |
| CN102327645A (zh) * | 2011-09-26 | 2012-01-25 | 浙江大学 | 一种负载生物活性因子的仿生涂层制备方法 |
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|---|---|---|---|---|
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Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101961508A (zh) * | 2010-09-30 | 2011-02-02 | 浙江大学 | 一种聚电解质复合涂层的制备方法 |
| CN102327645A (zh) * | 2011-09-26 | 2012-01-25 | 浙江大学 | 一种负载生物活性因子的仿生涂层制备方法 |
| CN102634792A (zh) * | 2012-04-09 | 2012-08-15 | 天津大学 | 一种基于多巴胺改性聚电解质的层层静电自组装方法及应用 |
| CN107117962A (zh) * | 2017-05-04 | 2017-09-01 | 郑州汉东科技有限公司 | 一种基于静电自组装技术的牙科全瓷修复材料的制备方法 |
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| CN110893121A (zh) * | 2018-09-13 | 2020-03-20 | 光弘生医科技股份有限公司 | 植体结构及其制备方法 |
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