CN100574764C

CN100574764C - 一种抗肝炎药物组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN100574764C
Application number: CN200610149188A
Authority: CN
Inventors: 黄振华
Original assignee: Shandong Xuanzhu Pharma Co Ltd
Current assignee: Haian Su Fu Technology Transfer Center Co Ltd
Priority date: 2005-11-22
Filing date: 2006-11-21
Publication date: 2009-12-30
Anticipated expiration: 2026-11-21
Also published as: CN1969896A

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了一种用于抗肝炎的药物组合物及其制备方法和用途，制成该药物组合物所含药效组分的原料药由板蓝根、田基黄和黄芩苷组成，其重量份为：板蓝根200～20000份、田基黄500～8000份、黄芩苷60～1000份，也可由板蓝根提取物、田基黄提取物和黄芩苷投料，其重量份为：板蓝根提取物1～400份、田基黄提取物5～160份、黄芩苷60～1000份，可制成各种药学上可接受的剂型。该组合物在抗肝炎方面具有协同增效作用，比单用同剂量的板蓝根或田基黄或黄芩苷的效果大大提高，产生了意想不到的效果，具有广泛的应用前景。

Description

一种抗肝炎药物组合物及其制备方法

1、技术领域

本发明涉及由板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物和黄芩苷制成的药物组合物及其制备方法和用途，属于医药技术领域。

2、背景技术

肝炎是常见的严重传染病之一，其中以病毒性肝炎为主。据不完全统计，目前我国人群中有8～10％为乙肝病毒携带者，且每年仍有相当数量的新患者增加。病毒性肝炎从类型上可分为：急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎和胆性肝炎。目前虽然治疗肝病的药物有许多种，但由于肝病的发病机制未完全阐明，多为改善肝脏功能，促进肝细胞再生，增强肝脏的解毒能力等功能的药物。因此迫切需要一种标本兼治，攻补兼施的药物。

板蓝根(Radix Isatidis)，别名靛青根、蓝靛根、靛根，为十字花科菘蓝属植物菘蓝Isatisindigotica Fort.的干燥根，味苦，性寒，归心、胃经，具有清热解毒、凉血利咽之功效。用于抗菌、抗病毒、抗内毒素、抗炎、增强免疫功能等，主要用于治疗流感、腮腺炎、温病发热、发斑、风热感冒、咽喉肿烂、流行性乙型脑炎、肝炎等，为传统的抗病毒中药之一，始载于《神农本草经》，《中国药典》1985～2005年版一直有收载。板蓝根化学成分相当复杂，含有多种成分，如吲哚类化合物靛蓝、靛玉红等，喹唑类生物碱色氨酮等，芥子苷类化合物，含硫类化合物，有机酸类，碱基核苷类鸟嘌呤等，氨基酸类等。现代药理研究证明其抗菌主要活性成分为色氨酮等化合物，抗病毒有效成分有嘌呤、嘧啶、吲哚等，抗内毒素活性物质为其中的有机酸类，具有免疫调节作用的为板蓝根多糖，其指标成分为板蓝根总氮。

田基黄，又名地耳草，为藤黄科植物地耳草Hypericum japonicum Thunb.的全草。味甘、微苦，性凉，属传统的清热利湿，消肿解毒药，主要用于治疗传染性肝炎，泻痢，小儿惊风，疳积，喉蛾，肠痈，疖肿、蛇咬伤等。现代药理研究表明田基黄具有抑菌、保肝、抑制肿瘤和防治心血管系统疾病等作用，目前田基黄已被提取制成针剂用于临床治疗急、慢性肝炎，其指标成分为田基黄总黄酮。

黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，味苦，性寒，归肺、胆、脾、大肠、小肠经，具有清热燥湿、泻火解毒之功效，用于湿温，暑温，胸闷呕恶，肺热咳嗽，高热烦渴等症。黄芩苷为黄芩中提取的有效活性成分，为β-D-葡萄糖酸-5，6-二羟基-4-氧-2-苯基-4H-苯并吡喃-7，已收载入国家药品监督管理局国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第10册239页(国家药典委员会编)，其中规定含黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)不得少于90.0％(注射用)；不得少于83.0％(口服用)。黄芩苷为抗菌药，具有抑菌抗炎、清热解毒、螯合金属离子、镇静、降压、神经保护作用等药理作用，主要用于感染、肺炎、肝炎、高血压等疾病。目前黄芩苷原料国内已有8家上市。黄芩苷的结构式如下所示：

目前利用板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物和黄芩苷的相互作用，配伍组方，用于治疗肝炎方面的药物，尚未见报道。

3、发明内容

为了满足临床需要，更好的治疗肝炎，提高人民健康水平，本发明提供了一种抗肝炎药物组合物及其制备方法和用途，主要由板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物和黄芩苷制备而成，在用于治疗急、慢性肝炎疾病等方面，产生了意想不到的效果。

本发明药物组合物中的板蓝根具有清热解毒的功效，能够抗炎，增强免疫力，对肝炎有治疗作用；田基黄属传统的清热利湿，消肿解毒药，具有抑菌、保肝等作用；黄芩苷为抗菌抗病毒药，对肝炎病毒有较好的抑制作用，三药配伍协同增效，产生了意想不到的效果。

本发明药物组合物，主要由下列重量份的原料药制成：板蓝根200～20000份、田基黄500～8000份、黄芩苷60～1000份；优选为：板蓝根500～15000份、田基黄1000～4000份、黄芩苷125～500份；最优为：板蓝根1000～7000份、田基黄2000份、黄芩苷250份。

上述药物组合物中的原药材可以用适宜的溶剂和方法单提或混提制备得到提取物，总提取物再与黄芩苷和药学上可接受的辅料混合制成任一制剂。所得总提取物的指标成分为板蓝根总氮、田基黄总黄酮。

上文所述的板蓝根可以用适宜的溶剂经过提取加工得到板蓝根提取物，其中的溶剂优选水或乙醇，提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法。如可通过水提制备得到板蓝根提取物。

本发明提供了一种板蓝根的优选制备工艺，具体如下：

取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，加1％盐酸调pH值至5～6，加于强酸性阳离子交换树脂柱上，加2倍量水冲柱，弃去冲洗液，再加1％氨试液冲柱，收集洗脱液，再加1％盐酸调pH值至7～7.5，静置过夜，滤过，浓缩，干燥，即得。通过本工艺制得的板蓝根提取物得率为0.5～2％，提取物中总氮的含量不低于10％。

板蓝根提取物还可由如下工艺制备，但不仅限于下述方法：

工艺一：取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，放冷，加乙醇使含醇量达80％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.32～1.35稠膏，真空干燥，即得。通过本工艺制得的板蓝根提取物得率为10～12％，提取物中总氮的含量不低于2％。

工艺二：取板蓝根药材，加水煎煮二次，第一次2小时加水12倍量，第二次1小时加水10倍量，合并煎液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.03～1.11，加入乙醇使含醇量至70％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，滤液用氨试液调节pH值为8.0～8.5，搅匀，冷藏48小时，加热除去氨，加水适量，冷藏，滤过，滤液用1％氢氧化钠调节pH值为7.0～7.5，冷藏滤过，滤液减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥，即得。通过本工艺制备的板蓝根提取物得率为2～4％，提取物中总氮的含量不低于5％。

上文所述的田基黄可以用适宜的溶剂经过提取加工得到田基黄提取物，其中的溶剂优选水或乙醇，田基黄的提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法。如可通过水提制备得到田基黄提取物。

本发明提供了一种田基黄的优选制备工艺，具体如下：

取田基黄，切断，加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.10～1.15，加乙醇至含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至适量，搅匀，冷藏静置过夜，滤过，滤液加于已处理好的聚酰胺柱上，先用3倍柱体积的水洗脱，弃去洗脱液，再用4倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.10～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。通过本工艺制备的田基黄提取物得率为1～2％，总黄酮含量以芦丁计不低于60％，以槲皮素计不低于20％。

田基黄提取物还可由如下工艺制备，但不仅限于下述方法：

工艺一：取田基黄，切断，加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.10～1.15，加乙醇至含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至适量，加乙醇至含醇量达75％，同上法处理后，加水至500ml，搅匀，静置24小时，滤过，滤液加新制的明胶溶液，边加边搅拌，冷藏24小时，滤过，滤液浓缩至适量，加乙醇至含醇量达85％，静置48小时，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.30～1.35的稠膏，真空干燥，即得。通过本工艺制备的田基黄提取物得率为3～5％，总黄酮含量以芦丁计不低于30％，以槲皮素计不低于5％。

工艺二：取田基黄，切断，加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩成每1ml相当于1g生药材溶液，冷藏静置过夜，滤过，滤液加20％氢氧化钠调pH值至8.0，静置，滤过，再加稀盐酸调pH值至7.0，静置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.30～1.35的稠膏，真空干燥，即得。通过本工艺制备的田基黄提取物得率为6～8％，总黄酮含量以芦丁计不低于20％，以槲皮素计不低于3％。

本发明药物组合物除可用上述药材投料制得外，还可以由板蓝根的提取物和田基黄的提取物及黄芩苷投料制成。按照提取物相对于药材的得率(板蓝根提取物得率为0.5～2％，田基黄提取物得率为1～2％)计算，本发明组合物按重量份数比为：板蓝根提取物1～400份、田基黄提取物5～160份、黄芩苷60～1000份；优选为：板蓝根提取物3～300份、田基黄提取物10～80份、黄芩苷125～500份；最优为：板蓝根提取物5～140份、田基黄提取物20～40份、黄芩苷250份。板蓝根提取物含总氮不低于2％，最好不低于10％；田基黄提取物含总黄酮以芦丁计不低于20％，最好不低于60％，以槲皮素计不低于3％，最好不低于20％。

以上组成是按重量份作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减小，如大规模生产可以以千克为单位，或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间重量配比的比例不变。

以上组成，若以克为单位，可以制成100～10000次用量的制剂，如作为片剂，可制成100～10000片，每次服用1～10片，如作为注射剂，可制成100～10000支，每次用量1～10支。

以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，可以相应调整组成的比例，增加或者减少不超过100％。

本发明药物组分的用量是发明人经过大量摸索总结得出的，各组分用量在上述重量份范围内都具有较好疗效。

本发明药物组合物可用于制备治疗肝炎疾病的药物。药理试验表明，本发明药物组合物抗大鼠肝纤维化作用较好，显著恢复透明质酸(HA)和层粘蛋白(LN)的活性；对四氯化碳(CCl₄)中毒小鼠的肝、脾指数有很好的降低作用；对醋氨酚中毒小鼠的肝脏有明显的恢复作用；能提高醋氨酚(AP)中毒所致小鼠的肝脏的GSH含量和降低SGPT、SGST活性；有明显抑制鸭感染DHBV病毒的作用。各实验中，本发明组合物实验组与单用板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物、黄芩苷组相比，疗效显著增强，表明板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物和黄芩苷三药具有协同抗肝炎疾病的作用。

本发明药物组合物可以与一种或多种药学上可接受的载体混合制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型，优选口服制剂或注射剂，以口服或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。

用于口服给药时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂，以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂，依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂，包括滴丸、糖丸、小丸等。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂，可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。口服混悬剂系指难溶性固体药物，分散在液体介质中，制成供口服的混悬液体制剂，也包括干混悬剂或浓混悬液。糖浆剂系指含有药物的浓蔗糖水溶液。

用于肠胃外给药时，可制成注射剂。注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，注射剂可分为注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，可用于肌内注射、静脉注射、静脉滴注等；其规格有1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供静脉滴注用的大体积(一般不小于100ml)注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，可用适宜的注射用溶剂配制后注射，也可用静脉输液配制后静脉滴注；无菌粉末用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。

本发明药物组合物制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。常用填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；常用粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；常用崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；常用润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。

制成注射剂时，可选用水性溶剂或非水性溶剂，可根据药物的性质加入适宜的附加剂。最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9％氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。常用的附加剂包括渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、填充剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸-醋酸钠、乳酸、枸橼酸-枸橼酸钠、碳酸氢钠-碳酸钠等；常用的增溶剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充剂包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂为苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射剂常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。

本发明组合物具有以下优点：

(1)提供了一种用于治疗肝炎疾病的药物组合物及其制备方法和用途，满足了临床急需；

(2)首次对本发明组合物的相互作用和配伍组方进行了药效学研究，发现了组合物具有明显的抗肝炎作用，对四氯化碳中毒所致小鼠的肝脏的血清ALT(谷丙转氨酶))、AST(谷草转氨酶)有明显的恢复作用，筛选出具有显著疗效的重量配比范围；

(3)本发明通过药理实验研究表明，本发明组合物有显著抗四氯化碳(CCl₄)诱导的大鼠肝纤维化作用，对CCl₄诱导的小鼠急性肝损伤、对醋氨酚致小鼠急性肝损伤具有显著保护作用，有明显抑制鸭感染DHBV病毒的作用；上述各实验组中，本发明组合物实验组与单用板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物、黄芩苷组相比，疗效显著增强，表明板蓝根或其提取物、田基黄或其提取物和黄芩苷三药合用抗肝炎效果显著，其结果是本技术领域的普通技术人员所意想不到的；

(4)板蓝根具有清热解毒的功效，能够抗炎，增强免疫力，对肝炎有治疗作用，田基黄属传统的清热利湿，消肿解毒药，具有抑菌、保肝等作用；黄芩苷为抗菌抗病毒药，对肝炎病毒有较好的抑制作用，三药合并用药疗效确切，且减小了相对用药剂量，具有广泛的应用前景。

以下通过实验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。下列实验例中：板蓝根提取物、田基黄提取物和黄芩苷的组合物以下简称BTH组合物。实验例中所用的板蓝根提取物取自实施例1，田基黄提取物取自实施例2，黄芩苷，市购，黑龙江庆安制药股份有限公司。

实验例1BTH组合物合并用药药效研究——对大鼠急性肝损伤的保护作用

受试动物：SD大鼠，雌雄各半，体重200±20g。

供试品：

正常对照组：生理盐水，市购；

CCl₄造模组：CCl₄注射液，自制；

甘草酸二铵胶囊组：甘草酸二铵胶囊，江苏正大天晴药业股份有限公司

板蓝根组：板蓝根提取物胶囊，自制；

田基黄组：田基黄提取物胶囊，自制；

黄芩苷组：黄芩苷胶囊，自制(原料市购)；

BTH组合物组：BTH组合物胶囊，自制。

实验方法：

CCl₄进入机体后主要在肝微粒体中发生脂质过氧化反应，引起肝细胞膜结构和功能的损害，使细胞内ALT、AST溢出，导致血中ALT、AST活性升高。肝损伤区域越大，ALT、AST活性越高。

取SD大鼠200只，雌雄各半，实验条件下预养2天，按性别和体重随机分为20组，分别为正常对照组，CCl₄造模组，甘草酸二铵胶囊组，板蓝根组，田基黄组，黄芩苷组，BTH组合物组：14组，板蓝根+田基黄+黄芩苷：200mg+8000mg+1000mg，200mg+8000mg+60mg，500mg+4000mg+125mg，500mg+4000mg+500mg，1000mg+2000mg+125mg，1000mg+2000mg+250mg，1000mg+2000mg+500mg，2000mg+1000mg+125mg，2000mg+1000mg+500mg，4000mg+500mg+1000mg，4000mg+500mg+60mg。各给药组均为用生理盐水配置成混悬液后灌胃给药。正常对照组和CCl₄造模组给0.9％生理盐水，甘草酸二铵组给甘草酸二铵胶囊。每天一次，连续给药7天。末次给药后1h，正常对照组按照0.6ml/kg的剂量腹腔注射植物油，其余各组均按照0.6ml/kg的剂量腹腔注射30％的CCl₄植物油造成大鼠急性肝损伤。24小时后，眼眶取血，分离血清，用赖氏法测定血清ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)，所有数据用SPSS10.0统计软件进行处理。

实验结果与结论：实验结果见表1。

(1)正常对照组与CCl₄造模组相比较，血清ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)的活性有显著性差异(p＜0.01)，说明造模成功。

(2)与CCl₄造模组相比较，BTH组合物组、田基黄组、甘草酸二铵胶囊组的ALT、AST活性极显著降低(p＜0.01)，说明肝损伤区域极显著减小；板蓝根组和黄芩苷组的ALT、AST活性显著降低(p＜0.05)。

(3)与单用板蓝根组、田基黄组或黄芩苷组相比较，BTH组合物组ALT、AST的活性降低，尤其是板蓝根+田基黄+黄芩苷＝(500～15000)+(1000～4000)+(125～500)时，ALT、AST的活性显著降低降低，其中重量配比为板蓝根+田基黄+黄芩苷＝(1000～7000)+2000+125时，效果最佳。

上述结果表明，板蓝根、田基黄和黄芩苷三味药配伍，有协同增效作用，且作用效果与配比有关，在各个重量份数中，板蓝根+田基黄+黄芩苷＝(500～15000)+(1000～4000)+(125～500)配比时，效果较优，且在重量份数为板蓝根+田基黄+黄芩苷＝(1000～7000)+2000+25时，效果最好，提示其可能为最佳配比。

表1BTH组合物胶囊剂对CCl₄所致急性肝损伤大鼠血清ALT、AST活性的影响(X±SD，n＝10)

注：与CCl₄造模组相比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与板蓝根组相比较，^&p＜0.01；与田基黄组相比较，^#p＜0.05；^△p＜0.05，与黄芩苷组相比。

实验例2BTH组合物对四氯化碳(CCl ₄ )中毒小鼠ALT、LTG、MDA的影响

受试动物：健康昆明种小鼠，体重18～22g。

供试品：

空白对照组：0.9％生理盐水，市购；

CCl₄对照组：CCl₄注射液，自制；

板蓝根提取物组：板蓝根提取物片剂，自制；

田基黄提取物组：田基黄提取物片剂，自制；

黄芩苷组：黄芩苷片剂，自制(原料市购)；

BTH组合物组：BTH组合物片剂，自制。

实验方法：

取小鼠170只，随机分为17组，分别为空白对照组、CCl₄对照组、板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物注射液组(12组，板蓝根提取物+田基黄提取物+黄芩苷，5mg+5mg+1000mg、5mg+10mg+500mg、5mg+20mg+250mg、5mg+40mg+250mg、5mg+80mg+125mg、5mg+160mg+60mg、140mg+5mg+1000mg、140mg+10mg+500mg、140mg+20mg+250mg、140mg+40mg+250mg、140mg+80mg+125mg、140mg+160mg+60mg)，每组10只。各给药组均为用生理盐水配置成混悬液后灌胃给药。空白对照组灌胃0.9％生理盐水，10ml/kg，其余各组动物均腹腔注射CCl₄10ml/kg，禁食过夜。给药组灌胃给药，每日1次，连续10天。于最后一次给药后，断头处死动物，取血和肝分别测定血清谷丙转氨酶(ALT)、甘油酸三酯(LTG)、丙二醛(MDA)。

表2BTH组合物片剂对四氯化碳(CCl₄)中毒小鼠ALT、LTG、MDA的影响(X±SD，n＝10)

注：与CCl₄对照组相比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与板蓝根提取物组相比较，^&p＜0.05；与田基黄提取物组相比较，^#p＜0.05；与黄芩苷组相比较，^△p＜0.05。

实验结果与结论：实验结果见表2。

(1)空白对照组与CCl₄对照组相比较有极显著差异(p＜0.01)，说明造模成功。

(2)各给药组都对四氯化碳(CCl₄)中毒所致小鼠的肝脏的ALT、LTG和MDA有明显的恢复作用(p＜0.05和p＜0.01)。其中BTH组合物组的作用都明显强于单用板蓝根提取物或田基黄提取物或黄芩苷(p＜0.05)。

证明板蓝根、田基黄和黄芩苷配伍对四氯化碳中毒所致小鼠的肝脏的ALT、LTG和MDA有明显的恢复作用，使肝脏的ALT、LTG和MDA水平恢复正常，与空白对照组相比没有明显差异。且与组合物的剂量配比有关，BTH组合物中板蓝根提取物+田基黄提取物+黄芩苷＝(5～140mg)+(20～40)mg+250mg时作用最好。

实验例3BTH组合物对四氯化碳(CCl ₄ )中毒小鼠SGPT、LTG、MDA的影响

供试品：

空白对照组：0.9％生理盐水注射液，自制；

CCl₄对照组：CCl₄注射液，自制；

板蓝根提取物组：板蓝根提取物注射液，自制；

田基黄提取物组：田基黄提取物注射液，自制；

黄芩苷组：黄芩苷注射液，自制(原料市购)；

BTH组合物注射液组，自制。

受试动物：健康昆明种小鼠，体重18～22g，140只，随机分为14组。

实验方法：取小鼠140只，随机分为14组，分别为空白对照组、CCl₄对照组、板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物注射液组，每组10只。空白对照组腹腔注射0.9％生理盐水10ml/kg，其余各组动物均腹腔注射CCl₄10ml/kg，禁食过夜。给药组腹腔注射给药，每日1次，给药剂量见表1，连续10d，对照组给相应体积的生理盐水，于最后一次给药后，断头处死动物，取血和肝分别测定血清谷丙转氨酶(SGPT)、甘油酸三酯(LTG)、丙二醛(MDA)。

实验结果与结论：实验结果见表3。

CCl₄对照组与空白对照组相比有显著差异(p＜0.01)，说明造模成功。各给药组都对四氯化碳(CCl₄)中毒所致小鼠的肝脏的SGPT、LTG和MDA有明显的恢复作用(p＜0.05，p＜0.01)。其中BTH组合物注射液组的作用都明显强于单用板蓝根提取物或田基黄提取物或黄芩苷(p＜0.05)。证明板蓝根、田基黄和黄芩苷配伍对四氯化碳中毒所致小鼠的肝脏的SGPT、LTG和MDA有明显的恢复作用，使肝脏的SGPT、LTG和MDA水平恢复正常，与空白对照组相比没有明显差异。证明板蓝根、田基黄和黄芩苷配伍疗效显著。

表3BTH组合物注射液对四氯化碳(CCl₄)中毒小鼠SGPT、LTG、MDA的影响(X±SD，n＝10)

注：^*p＜0.05，^**p＜0.01与空白对照组相比；^#p＜0.05，^##P＜0.01，与CCl₄对照组相比；&p＜0.05，与板蓝根提取物组相比；^△p＜0.05，与田基黄提取物组相比；^○p＜0.05，与黄芩苷组相比。

实验例4BTH组合物抗大鼠肝纤维化作用

实验动物：Wistar大鼠，体重180～230g，雄性，90只。

供试品：

空白对照组：0.9％生理盐水，市购；

板蓝根提取物组：板蓝根提取物片剂，自制；

田基黄提取物组：田基黄提取物片剂，自制；

黄芩苷组：黄芩苷片剂，自制(原料市购)；

BTH组合物1组：BTH组合物片剂(板蓝根+田基黄+黄芩苷＝7g+1g+0.25g)，自制。

BTH组合物2组：BTH组合物片剂(板蓝根+田基黄+黄芩苷＝7g+2g+0.25g)，自制。

BTH组合物3组：BTH组合物片剂(板蓝根+田基黄+黄芩苷＝7g+4g+0.25g)，自制。

实验方法：

取Wistar大鼠10只，皮下注射花生油3ml/kg，每日1次，共10周，作为对照组。肝纤维化模型组应用40％CCl₄花生油溶液按3ml/kg皮下注射，每周2次，共8周，诱导肝纤维化模型。取肝纤维化模型大鼠80只，随机分为8组，分别为模型组、硫普罗宁组、板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物1组、BTH组合物2组、BTH组合物3组，每组10只。除对照组外，其余各组继续以40％CCl₄花生油溶液3ml/kg皮下注射，每日1次。板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物1组、BTH组合物2组、BTH组合物3组同时灌胃给药相应药物，连续给药2周。10周后宰杀大鼠，无菌操作取血2ml，分离血清，-20℃保存，用放射免疫法检测肝纤维化指标：透明质酸(HA)和层粘蛋白(LN)。

实验结果与结论：实验结果见表4。

(1)与空白对照组比较，模型组大鼠血清HA、LN含量有极显著性差异，说明造模成功。

(2)与模型组比较，硫普罗宁组、田基黄提取物组、BTH组合物1组、BTH组合物2组、BTH组合物3组治疗后肝纤维化大鼠血清HA和LN水平均极显著低于模型组(p＜0.01)，板蓝根提取物组和黄芩苷组治疗后肝纤维化大鼠血清HA和LN水平均显著低于模型组(p＜0.05)，提示各给药组均可改善肝纤维化血清学指标，具有抗肝纤维化的作用。

(3)BTH组合物1组、BTH组合物2组、BTH组合物3组的作用都明显强于单用板蓝根提取物或田基黄提取物或黄芩苷(p＜0.05)。

上述结果表明板蓝根、田基黄和黄芩苷具有协同增效作用，均可改善肝纤维化，具有抗肝纤维化的作用。

表4BTH组合物对CCl₄所致肝纤维化大鼠的血清学指标的影响(X±SD，n＝10)

注：与空白对照组相比较，^○p＜0.01；与模型组相比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与板蓝根提取物组相比较，^&p＜0.05；与田基黄提取物组相比较，^#p＜0.05；与黄芩苷组相比较，^△p＜0.05。

实验例5BTH组合物对醋氨酚(AP)中毒小鼠SGPT、SGST活性和GSH含量的影响

受试动物：健康昆明种小鼠，体重18～22g。

供试品：

空白对照组：0.9％生理盐水注射液，自制；

AP对照组：AP注射液，自制；

板蓝根提取物组：板蓝根提取物注射液，自制；

田基黄提取物组：田基黄提取物注射液，自制；

黄芩苷组：黄芩苷注射液，自制(原料市购)；

BTH组合物注射液组(板蓝根提取物+田基黄提取物+黄芩苷＝10mg+30mg+250mg)：分为低、中、高三个剂量组，自制。

受试动物：健康昆明种小鼠，体重18～22g，80只，随机分为8组。

实验方法：

取小鼠80只，随机分为8组，分别为空白对照组、AP对照组、板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物注射液低、中、高三个剂量组，每组10只。除空白对照组外，其余各组动物均腹腔注射AP 100ml/kg，禁食过夜。给药组腹腔注射给药，每日1次，给药剂量见表3，连续10d，对照组给相应体积的生理盐水，于最后一次给药后，腹腔注射AP100mg/kg，禁食3h后，断头处死动物，取血和肝分别测定血清谷丙转氨酶(SGPT)、谷胱甘肽S-转移酶(SGST)和还原型谷胱甘肽(GSH)。

表5BTH组合物对醋氨酚(AP)中毒小鼠SGPT、SGST活性和GSH含量的影响(X±SD，n＝10)

注：^*p＜0.05，^**p＜0.01，与空白对照组相比；^#p＜0.05，^##p＜0.01，与AP对照组相比；^&p＜0.05，与板蓝根提取物组相比；^△p＜0.05，与田基黄提取物组相比；^○p＜0.05，与黄芩苷组相比。

实验结果与结论：实验结果见表5。

(1)与空白对照组相比，AP对照组极显著降低GSH含量和极显著提高SGPT、SGST活性(p＜0.01)，说明造模成功。

(2)与空白对照组相比，各给药组都能提高醋氨酚(AP)中毒所致小鼠的肝脏的GSH含量和降低SGPT、SGST活性(p＜0.05、p＜0.01)。

(3)其中BTH组合物注射液组的作用都明显强于单用板蓝根提取物或田基黄提取物或黄芩苷(p＜0.05)。证明板蓝根、田基黄和黄芩苷配伍对醋氨酚中毒小鼠的肝脏有明显的恢复作用，使肝脏的SGPT、SGST水平恢复正常，与空白对照组相比没有明显差异。随着剂量的增加，增加GSH含量和降低SGPT、SGST活性的作用加大，高剂量时作用最好。

实验例6BTH组合物对四氯化碳(CCl ₄ )中毒所致急性肝损伤小鼠的肝、脾指数的影响

受试动物：健康昆明种小鼠，体重18～22g。

供试品：

空白对照组：0.9％生理盐水注射液，自制；

CCl₄对照组：CCl₄注射液，自制；

板蓝根提取物组：板蓝根提取物注射液，自制；

田基黄提取物组：田基黄提取物注射液，自制；

黄芩苷组：黄芩苷注射液，自制(原料市购)；

实验方法：

取小鼠80只，随机分为8组，分别为空白对照组、CCl₄对照组、板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物注射液低、中、高三个剂量组，每组10只。空白对照组腹腔注射0.9％生理盐水10ml/kg，其余各组动物均腹腔注射CCl₄10ml/kg，禁食过夜。给药组腹腔注射给药，每日1次，给药剂量见表2，连续10d，对照组给相应体积的生理盐水，于最后一次给药后，断头处死动物，取肝脏和脾脏，吸去血液，剪去脂肪、系膜，精确称重。

表6BTH组合物对四氯化碳(CCl₄)中毒所致急性肝损伤小鼠的肝、脾指数的影响(X±SD，n＝10)

注：^*p＜0.05，^**p＜0.01，与空白对照组相比；^#p＜0.05，^##p＜0.01，与CCl₄对照组相比；^&p＜0.05，与板蓝根提取物组相比；^△p＜0.05，与田基黄提取物组相比；^○p＜0.05，与黄芩苷组相比。

实验结果与结论：实验结果见表6。

(1)与空白对照组相比较，CCl₄对照组肝、脾指数极显著提高(p＜0.01)，说明造模成功。

(2)与CCl₄对照组相比，各给药组都能明显的降低四氯化碳(CCl₄)中毒小鼠的肝、脾指数(p＜0.05和p＜0.01)。其中BTH组合物注射液组的作用都明显强于单用板蓝根提取物或或田基黄提取物或黄芩苷(p＜0.05)。

证明板蓝根、田基黄和黄芩苷配伍有很好的降低四氯化碳(CCl₄)中毒小鼠的肝、脾指数的作用，与空白对照组相比没有显著差异。且与组合物的给药剂量有关，高剂量时作用最好。

实验例7BTH组合物对DHBV-DNA的抑制作用

受试动物：市售1日龄北京鸭。

供试品：

空白对照组：0.9％生理盐水注射液，自制；

阳性对照组：阿昔洛韦(ACV)注射液，自制；

板蓝根提取物组：板蓝根提取物注射液，自制；

田基黄提取物组：田基黄提取物注射液，自制；

黄芩苷组：黄芩苷注射液，自制(原料市购)；

给药剂量单位：mg/kg。

病毒：DHBV阳性血清。

实验方法：

(1)动物模型：北京鸭经足静脉注射0.2mlDHBV阳性血清，7d后取血，分离血清，-20℃保存检验。

(2)药物治疗：筛选出感染成功的阳性鸭42只，随机分为7组，每组6只。分别为空白对照组、阳性对照组、板蓝根提取物组、田基黄提取物组、黄芩苷组、BTH组合物注射液低、中、高三个剂量组，给药剂量见下表。静脉注射给药，给药2周。分别于药前、用药第7天、用药第14天和停药后第3天，自鸭腿静脉抽血，分离血清，-20℃保存待验。

(3)检测方法：采用DHBV-DNA Dot Blot法，以杂交斑点吸光度值(A)作为标本DHBV-DNA水平值。

(4)统计学处理：用药组不同时间DNA含量与用药前比较，采用配对t检验；用药组同一时间DNA含量与病毒对照组比较，采用t检验。

实验结果与结论：实验结果见表7。

(1)与空白对照组相比较，各给药组都明显抑制DHBV病毒(p＜0.05、p＜0.01)。

(2)与单用板蓝根提取物或田基黄提取物或黄芩苷相比较，BTH组合物注射液组的作用都明显强于单用板蓝根提取物或田基黄提取物或黄芩苷(p＜0.05)。(3)与同组治疗前相比较，停药后无反跳与给药前比较差异显著(^*p＜0.05和^**p＜0.01)，而阳性对照组在停药后与给药前比较无显著差异。

综上所述，板蓝根、田基黄和黄芩苷配伍能较好的抑制DHBV-DNA，停药后无反跳，效果较好，且疗效与组合物的给药剂量有关，高剂量作用最好。

表7BTH组合物对DHBV-DNA的抑制作用(X±SD，n＝10)

注：^*p＜0.05，^**p＜0.01，与同组治疗前相比；^&p＜0.05，^&&p＜0.01，与空白对照组相比；^#p＜0.05，与板蓝根提取物组相比；^△p＜0.05，与田基黄提取物组相比；^○p＜0.05，与黄芩苷组相比。

实验例8小鼠注射给药急性毒性实验

(1)实验方法

供试品：BTH组合物注射液(自制，5ml：板蓝根提取物+田基黄提取物+黄芩苷＝10mg+30mg+250mg)。

受试动物：小鼠，每组雌雄各5只，雄性体重25～28g，雌性体重21～24g。

给药途径：静脉注射、腹腔注射。

观察项目：死亡数、一般状态、体重、剖检、半数致死量。

(2)实验结果

按照急性毒性实验要求进行预试，腹腔注射及静脉注射两给药途径皆无法测出药物的半数致死量，也未见明显的毒性反应，故进行一日内最大给药量实验。给药剂量：尾静脉注射0.2ml/10g，腹腔注射0.2ml/10g，一日2次。

死亡数：未出现死亡。一般状态：未见异常变化。

体重：于给药前1天，给药日，给药后1、3、7、14天测量；未见异常变化。

剖检：心、肝、肺、肾等组织未见异常变化。

(3)结论

本实验中未出现死亡，推测BTH组合物注射液对雌雄小鼠静脉和腹腔注射给药的最大耐受量均为0.4ml/10g，相当于50kg体重人日最大用量20ml的100倍。表明本品低毒，安全性高。

实验例9BTH组合物注射液稳定性实验

样品：BTH组合物注射液(自制，5ml：板蓝根提取物+田基黄提取物+黄芩苷＝10mg+30mg+250mg)。

考察项目：性状、pH值、澄明度、有关物质、标示含量；并在加速实验6个月和长期实验期末增加无菌和热原检查。

1、影响因素实验

强光照射实验：取供试品，置照度为4500Lx的光照箱内放置10天。

高温实验：取供试品，分别置于40℃、60℃条件下放置10天。

低温实验：取供试品，在4℃冰箱中放置10天。

上述实验，分别于第5、10天取样测定。比较性状后测试各项指标，并将结果与0天比较。

结果：光照4500Lx条件下放置10天，除有关物质略有升高外，其它各项指标均无明显变化。高温60℃条件下放置10天，外观变为淡黄色澄明液体，标示含量下降，有关物质略有升高。高温40℃、低温4℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。

2、加速实验

方法：置温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月。在实验期间分别于第1个月、2个月、3个月、6个月末取样，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在6个月末增加无菌和热原检查。

结果：温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月，除有关物质略有增加，标示含量略有下降外，其它各项指标均无明显变化，加速实验6个月末，热原、无菌检查均符合规定。

3、长期实验

方法：置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月。分别于第3个月、6个月、9个月、12个月、18个月，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在18个月末增加无菌和热原检查。

结果：温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月，各项指标均无明显变化，长期实验18个月末，热原、无菌检查均符合规定。

结论：由上述考察结果得出结论，各项实验中，BTH组合物注射液比较稳定。

4、具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。实施例3～10中的实验例中所用的板蓝根提取物取自实施例1，田基黄提取物取自实施例2，黄芩苷，市购，黑龙江庆安制药股份有限公司。

实施例1板蓝根提取物的制备

板蓝根提取物的制备方法

取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，加1％盐酸调pH值至5～6，加于强酸性阳离子交换树脂柱上，加2倍量水冲柱，弃去冲洗液，再加1％氨试液冲柱，收集洗脱液，再加1％盐酸调pH值至7～7.5，静置过夜，滤过，浓缩，干燥，即得。

板蓝根提取物鉴别实验

取本品0.1g，加乙醇10ml，超声处理15min，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml同法制成对照药材溶液。再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照片色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。

板蓝根提取物含量测定

总氮的含量测定

总氮量测定，照药典氮测定法测定即可。

根据上述工艺，制得板蓝根提取物三批样品，其含量和得率见表8。通过本工艺制备的板蓝根提取物得率为0.5～2％，其中总氮的含量不低于10％。

表8板蓝根提取物总氮含量和得率

实施例2田基黄提取物的制备

田基黄提取物的制备方法

取地耳草(田基黄)，切断，加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.10～1.15，加乙醇至含醇量达60％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至适量，搅匀，冷藏静置过夜，滤过，滤液加于已处理好的聚酰胺柱上，先用3倍柱体积的水洗脱，弃去洗脱液，再用4倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度1.10～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。

田基黄提取物鉴别实验

取本品10ml，加甲醇10ml、盐酸1ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取槲皮素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录BI B)试验，吸取供试品溶液5μl、对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热约5分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

田基黄提取物含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.2％磷酸溶液(50∶50)为流动相；检测波长为260nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500.

对照品溶液的制备：精密称取经五氧化二磷减压干燥24小时的槲皮素对照品，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密称取本品0.2g，置圆底烧瓶中，加甲醇15ml、盐酸1ml，混匀，加热回流30分钟，放冷，移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

根据上述工艺，制得田基黄提取物三批样品，其含量和得率见表9。通过本工艺制备的田基黄提取物提取物得率：1～2％，总黄酮含量(以芦丁计)：不少于60％；总黄酮含量(以槲皮素计)：不少于20％。

表9田基黄提取物得率和总黄酮含量

实施例3BTH组合物片剂的制备

处方一：

板蓝根提取物 14g(相当与原药材1000g)

田基黄提取物 30g(相当与原药材2000g)

黄芩苷 125g

淀粉 110.0g

微晶纤维素 35.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

羧甲淀粉钠 4.0g

共制备 1000片

处方二：

板蓝根提取物 14g(相当与原药材1000g)

田基黄提取物 30g(相当与原药材2000g)

黄芩苷 250g

淀粉 120.0g

微晶纤维素 40.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

羧甲淀粉钠 4.0g

共制备 1000片

处方三：

板蓝根提取物 14g(相当与原药材1000g)

田基黄提取物 30g(相当与原药材2000g)

黄芩苷 500g

淀粉 130.0g

微晶纤维素 50.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 3.0g

羧甲淀粉钠 5.0g

共制备 1000片

处方四：

板蓝根提取物 100g(相当与原药材7000g)

田基黄提取物 30g(相当与原药材2000g)

黄芩苷 125g

淀粉 120.0g

微晶纤维素 40.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

羧甲淀粉钠 4.0g

共制备 1000片

处方五：

板蓝根提取物 100g(相当与原药材7000g)

田基黄提取物 30g(相当与原药材2000g)

黄芩苷 250g

淀粉 130.0g

微晶纤维素 45.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

羧甲淀粉钠 4.0g

共制备 1000片

处方六：

板蓝根提取物 100g(相当与原药材7000g)

田基黄提取物 30g(相当与原药材2000g)

黄芩苷 500g

淀粉 150.0g

微晶纤维素 55.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 3.0g

羧甲淀粉钠 6.0g

共制备 1000片

制备工艺：

1)将板蓝根提取物、田基黄提取物和黄芩苷粉碎过100目筛备用。

2)按照处方量称取原料和辅料。

3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。

4)将板蓝根提取物、田基黄提取物、黄芩苷、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材

5)20目筛制颗粒。

6)粒在60℃的条件下烘干。

7)燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。

8)样，半成品化验。

9)照化验确定的片重压片。

10)成品全检，包装入库。

实施例4BTH组合物胶囊剂的制备

处方一：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 20g

黄芩苷 250g

淀粉 60.0g

微晶纤维素 20.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 1.0g

共制备 1000粒

处方二：

板蓝根提取物 70g

田基黄提取物 20g

黄芩苷 250g

淀粉 65.0g

微晶纤维素 25.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

共制备 1000粒

处方三：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

淀粉 60.0g

微晶纤维素 20.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 1.0g

共制备 1000粒

处方四：

板蓝根提取物 70g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

淀粉 65.0g

微晶纤维素 25.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

共制备 1000粒

处方五：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 40g

黄芩苷 250g

淀粉 60.0g

微晶纤维素 20.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 1.0g

共制备 1000粒

处方六：

板蓝根提取物 70g

田基黄提取物 40g

黄芩苷 250g

淀粉 65.0g

微晶纤维素 25.0g

2％HPMC水溶液适量

硬脂酸镁 2.0g

共制备 1000粒

制备工艺：

2)按照处方量称取原料和辅料。

3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。

4)将板蓝根提取物、田基黄提取物、黄芩苷、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。

5)20目筛制颗粒。

6)粒在60℃的条件下烘干。

7)燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀。

8)样，半成品化验。

9)照化验确定的装量装入胶囊。

10)成品全检，包装入库。

实施例5BTH组合物颗粒剂的制备

处方一：

板蓝根 7000g

田基黄 1000g

黄芩苷 250g

糖粉 500.0g

糊精 300.0g

甜橘素 20g

2％HPMC50％醇溶液适量

共制备 1000包

处方二：

板蓝根 7000g

田基黄 2000g

黄芩苷 250g

糖粉 600.0g

糊精 350.0g

甜橘素 25g

2％HPMC50％乙醇溶液适量

共制备 1000包

处方三：

板蓝根 7000g

田基黄 4000g

黄芩苷 250g

糖粉 800.0g

糊精 400.0g

甜橘素 30g

2％HPMC50％乙醇溶液适量

共制备 1000包

制备工艺：

1)将蔗糖粉碎过100目筛备用。将板蓝根提取物、田基黄提取物和黄芩苷粉碎过100目筛备用。

2)按照处方量称取原料和辅料。

3)将板蓝根提取物、田基黄提取物、黄芩苷与糖粉、糊精、甜橘素以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。

4)20目筛制颗粒。

5)粒在60℃的条件下烘干。

6)颗粒过18目筛整粒。

7)样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。

8)包装，成品全检，包装入库。

实施例6BTH组合物口服液制备

处方一：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 50g

苯甲酸钠 15g

甜菊甙 10g

水加至1000ml

共制备 1000ml

处方二：

板蓝根提取物 70g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 55g

苯甲酸钠 20g

甜菊甙 15g

水加至1000ml

共制备 1000ml

处方三：

板蓝根提取物 140g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 70g

苯甲酸钠 35g

甜菊甙 30g

水加至1000ml

共制备 1000ml

制备工艺：

1)将聚山梨酯80用配液量40％的水溶解完全，再将板蓝根提取物、田基黄提取物加入，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量水加热后加适量氢氧化钠溶解完全。

2)甲酸钠和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。

3)并上述溶液，补加水至全量。

4)0.8μm的微孔滤膜过滤。

5)成品化验。

6)灌装。成品全检，包装入库。

实施例7BTH组合物水针剂的制备

处方：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 50g

注射用水加至5000ml

共制备 1000支

制备工艺：

1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。

2)取配液量40％的注射用水，加入处方量的聚山梨酯80、板蓝根提取物、田基黄提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解，合并溶液，补加注射用水至全量。

3)入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。

4)砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。

5)0.45μm的微孔滤膜精滤。

6)查溶液的澄明度，半成品化验。

7)溶液熔封于玻璃安瓿中。

8)00℃流通蒸汽灭菌30分钟。

9)热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏。

10)灯检，成品全检，包装入库。

实施例8BTH组合物粉针剂的制备

处方：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 50g

甘露醇 300g

无菌注射用水加至3000ml

共制备 1000支

制备工艺：

1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理。

2)按照处方量称取原料和辅料。

3)取配液量40％的注射用水加入处方量的聚山梨酯80、板蓝根提取物、田基黄提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。合并上述溶液，再加入甘露醇加热搅拌溶解完全，补加无菌注射用水至全量。

4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。

5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。

6)经0.22μm的微孔滤膜精滤。

7)检查溶液的澄明度，半成品化验。

8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时。

9)冻干结束，压塞，轧盖。

10)成品全检，包装入库。

实施例9BTH组合物氯化钠输液的制备

处方：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 50g

氯化钠 900g

注射用水加至100000ml

共制备 1000瓶

制备工艺：

1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。

2)取配液量40％的注射用水，加入处方量的聚山梨酯80、板蓝根提取物、田基黄提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。将氯化钠用配液量40％的注射用水溶解完全。合并上述溶液，补加注射用水至全量。

3)入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。

4)砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。

5)经0.45μm的微孔滤膜精滤。

6)检查溶液的澄明度，半成品化验。

7)灌装于100ml的输液瓶中。

8)115℃热压灭菌30分钟。

9)灯检，成品全检，包装入库。

实施例10BTH组合物葡萄糖输液的制备

处方：

板蓝根提取物 10g

田基黄提取物 30g

黄芩苷 250g

聚山梨酯80 50g

葡萄糖 5000g

注射用水加至100000ml

共制备 1000瓶

制备工艺：

2)取配液量40％的注射用水，加入处方量的聚山梨酯80、板蓝根提取物、田基黄提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全。合并上述溶液，补加注射用水至全量。

3)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。

4)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。

5)经0.45μm的微孔滤膜精滤。

6)检查溶液的澄明度，半成品化验。

7)灌装于100ml的输液瓶中。

8)115℃热压灭菌30分钟。

9)灯检，成品全检，包装入库。

Claims

1、一种抗肝炎的药物组合物，其特征在于，该药物组合物由板蓝根提取物、田基黄提取物和黄芩苷制成，其重量份数为：板蓝根提取物1～400份、田基黄提取物5～160份、黄芩苷60～1000份，板蓝根提取物和田基黄提取物的制备方法是将板蓝根和田基黄分别以水或乙醇为溶剂采用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法得到相应的提取物，板蓝根提取物含总氮不低于2％，田基黄提取物含总黄酮以芦丁计不低于20％，以槲皮素计不低于3％。

2、如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，其重量份数为：板蓝根提取物3～300份、田基黄提取物10～80份、黄芩苷125～500份。

3、如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，其重量份数为：板蓝根提取物5～140份、田基黄提取物20～40份、黄芩苷250份。

4、如权利要求1～3任一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物可以与药学上可接受的辅料混合制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。

5、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的临床上或药学上可接受的剂型为口服制剂或注射剂。