CN100500679C

CN100500679C - 具有调节血管内皮细胞功能活性的化合物及其制备方法和用途

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Publication number: CN100500679C
Application number: CNB011372680A
Authority: CN
Inventors: 杨日芳; 汪海; 赵如胜; 慕邵峰; 恽榴红; 张雁芳; 赵利枝; 陈冬梅; 费改顺; 陈凯; 龙超良; 山丽梅
Original assignee: Institute of Pharmacology and Toxicology of AMMS
Current assignee: Institute of Pharmacology and Toxicology of AMMS
Priority date: 2001-11-01
Filing date: 2001-11-01
Publication date: 2009-06-17
Anticipated expiration: 2021-11-01
Also published as: CN1415619A

Abstract

本发明提供了通式I所表示的化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、药用盐或其溶剂化物，含它们的药物组合物、其制备方法，以及所述的化合物在制备用于预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病如高血压、充血性心衰、静脉内膜炎、微循环障碍等，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病的药物中的应用，或作为工具药用于研究与血管内皮细胞功能或其功能紊乱相关的疾病的应用。

Description

具有调节血管内皮细胞功能活性的化合物及其制备方法和用途

本发明涉及具有调节血管内皮细胞功能活性的的取代的α-胺基腈、α-胺基羧酸、和α-胺基膦酸、其衍生物、其立体异构体、其药用盐、其溶剂化物，其制备方法，及其在预防或治疗血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病如高血压、充血性心衰、静脉内膜炎、微循环障碍等，以及糖尿病、衰老和缺血等疾病中的应用，或作为工具药用于研究血管内皮细胞功能或其功能紊乱相关的心血管疾病的用途，以及含有这些化合物的药物组合物。

心血管病是严重危害人类健康的重大疾病，是全世界人口死亡和致残的一个重要原因。血管内皮细胞是体内最大的、具有分泌作用的器官之一。它能分泌和代谢多种血管活性物质，在调节血管张力、维持血液平衡等方面具有不可替代的作用。血管内皮细胞上存在可被乙酰胆碱(acetyl choline，ACh)激活的蛋白(endothelial proteinactivated-by acetyl choline，EPA)。以EPA介导的内皮依赖的血管舒张反应性降低为特征的血管内皮细胞功能紊乱现象存在于高血压、冠心病、充血性心衰、衰老、缺血及慢性吸烟等疾病状态中。开发血管内皮细胞的保护药物，以维持其正常的生理功能和纠正异常的病理变化，将为上述心脑血管疾病提供新的防治措施。

EPA作为一个新的潜在的药物作用靶标，其生理作用可能是在内源性、内皮细胞自分泌的ACh作用下，调整血液张力，维持血液平衡。在以内皮细胞功能紊乱为起因的疾病中，EPA是最早期改变的指标，具有重要的病理生理作用。

已有的有关EPA的报道多作为毒蕈碱(M)受体的新亚型来研究，研究用的工具药也多局限于经典的M受体激动剂与拮抗剂。EPA作为一个新的潜在的药物作用靶标，在药物化学上尚未见有研究报道。

目前尚未见有特异性作用于血管内皮细胞的药物报道，但有报道一些他汀类、贝特类等降血脂药物与格列酮类降血糖药物具有调节内皮细胞功能的作用。

本发明的通式I化合物及其衍生物在调节内皮细胞功能、预防或治疗高血压、充血性心力衰竭等心血管疾病等方面的用途尚未见报道。

本发明的目的在于寻找并开发新的具有调节内皮细胞功能作用，可预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病的药物，尤其是预防或治疗如高血压、充血性心衰、静脉内膜炎、微循环障碍等心血管疾病，以及糖尿病、衰老与缺血等的药物。

本发明人经广泛深入研究，现已发现具有优良的调节血管内皮细胞功能作用的式I或式Ia所示的化合物，该类化合物可用于预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病如高血压、充血性心力衰竭、静脉内膜炎、微循环障碍等，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病。研究表明，式I或式Ia所示的化合物具有调节血管内皮细胞功能的作用。进一步的合成与研究表明，本发明所包括的衍生物与适当的无机酸或有机酸或与无机碱或有机碱形成的药用盐也同样具有调节血管内皮细胞功能的作用。本发明基于上述发现得以完成。

本发明第一方面涉及通式I所示的化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、其药用盐、或溶剂化物在制备可用于预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病如高血压、充血性心力衰竭、静脉内膜炎、微循环障碍等，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病的药物中用途或作为用于研究血管内皮细胞功能或血管内皮细胞功能紊乱相关的心脑血管疾病的工具药的用途，

其中：

R₁、R₂、R₃分别代表氢原子、C_1-20的饱和或不饱和的直链或支链脂肪烃、C_3-20的环烷烃基、取代C_3-20环烷烃基、C_4-20的芳香烃基、取代C_5-20芳香烃基、C_3-20杂环烃基、取代C_3-20杂环烃基、β-羟基C_2-20烃基、β-C_1-10烷羰氧C_2-10烃基、β-C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、β-取代C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、β-C_1-10烷氧基C_2-10烃基、β-C_4-10芳氧基C₂ _-10烃基、β-取代C_4-10芳氧基C_2-10烃基、β-巯基C_2-20烃基、β-C_1-10烷硫基C_2-10烃基、β-C_4-10芳硫基C_2-10烃基、β-取代C_4-10芳硫基C_2- ₁₀烃基、β-氨基C_2-20烃基、β-C_1-10烷胺基C_2-10烃基、β-C_4-14芳胺基C_2-10烃基、β-取代C_4-14芳胺基C_2-10烃基、β-C_1-10烷酰胺基C_2-10烃基、β-C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基、β-取代C_5-14芳酰胺基C_1-10烃基、γ-羟基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷羰氧C_2-10烃基、γ-C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、γ-取代C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、γ-C_1-10芳氧基C_2-10烃基、γ-取代C_5-10芳氧基C_2-10烃基、γ-巯基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷硫基C_2-10烃基、γ-C_4-10芳硫基C_2-10烃基、γ-取代C_5-10芳硫基C_2-10烃基、γ-氨基C_2- ₂₀烃基、γ-C_1-10烷胺基C_2-10烃基、γ-C_4-14芳胺基C_2-10烃基、γ-取代C_4-14芳胺基C_2-10烃基、γ-C_1-10烷酰胺基C_2-10烃基、γ-C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基、γ-取代C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基；或

R₁与R₂或R₃生成3-9元环状结构，特别是吗啉环、哌嗪环、哌啶环、吡咯啉环、咪唑啉环、吡唑啉环、噻唑啉环、高吗啉环、高哌嗪环、高哌啶环、取代的哌嗪环、N-(取代的C_4-6芳烃基)哌嗪环、取代的哌啶环、取代的吡咯啉环、取代的咪唑啉环、N-(取代的C_4-6芳烃基)咪唑啉环、取代的吡唑啉环、N-(取代的C_4-6芳烃基)吡唑啉环、取代的噻唑啉环、取代的高吗啉环、取代的高哌嗪环、N-(取代的C_4-6芳烃基)高哌嗪环、取代的高哌啶环，其中，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-10烃基、C_4-6芳烃基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、一、二或三卤代C_1-6烷基、氨基、C_1-10烃胺基、C_1-10烃酰氧基、C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基；

Y代表氰基、羧基、膦酸基、C_1-10烷氧基羰基、C_3-10杂环氧基羰基、取代的C_3-10杂环氧基羰基、C_4-10芳氧基羰基、取代的C_4-10芳氧基羰基、氨甲酰基、C_1-10烷胺基羰基、C_3-10杂环胺基羰基、取代的C_3-10杂环胺基羰基、C_4-10芳胺基羰基、取代C_4-10芳胺基羰基、单C_1-10烷氧基膦酰基、单C_3-10杂环氧基膦酰基、单(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、单C₄ _-10芳氧基膦酰基、单(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、二(C_1-10烷氧基)膦酰基、二(C_3-10杂环氧基)膦酰基、二(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、二(C_4-10芳氧基)膦酰基、二(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、单C_1-10烷胺基膦酰基、单C_4-10杂环胺基膦酰基、单(取代的C_4-10杂环胺基)膦酰基、单C_4-10芳胺基膦酰基、单(取代的C_5-10芳胺基)膦酰基、二(C_1-10烷胺基)膦酰基、二(C_4-10杂环胺基)膦酰基、二(取代的C_4-10杂环胺基)膦酰基、二(C_4-10芳胺基)膦酰基、二(取代的C_5-10芳胺基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(C_6-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(C₄ _-10芳胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、咪唑基、吡唑基、三氮唑基、四氮唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑啉基、吡唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基，其中所述“二取代的膦酰基”中的取代基团可以相同，也可以不同，杂环指含1-3个选自N、O或S杂原子的单或稠合杂环，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素，羟基，氰基，硝基，C_1-6烃基，C_4-6芳烃基，C₁ _-6烷氧基，C_1-6烷硫基，一、二或三卤代C_1-6烷基，氨基，C_1-10烃胺基，C_1-10烃酰氧基，C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基。

本发明第二方面涉及用于预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心脑血管疾病如高血压、充血性心衰、静肪内膜炎、微循环障碍等，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病的通式I_a所示的新化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、药用盐或其溶剂化物，

其中：

R₁’、R₂’、R₃’分别代表氢原子、C_1-20的饱和或不饱和的直链或支链脂肪烃、C_3-20的环烷烃基、取代C_3-20环烷烃基、C_4-20的芳香烃基、取代C_5-20芳香烃基、C_3-20杂环烃基、取代C_3-20杂环烃基、β-羟基C_2-20烃基、β-C_1-10烷羰氧C_2-10烃基、β-C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、β-取代C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、β-C_1-10烷氧基C_2-10烃基、β-C_4-10芳氧基C_2-10烃基、β-取代C_4-10芳氧基C_2-10烃基、β-巯基C_2-20烃基、β-C_1- ₁₀烷硫基C_2-10烃基、β-C_4-10芳硫基C_2-10烃基、β-取代C_4-10芳硫基C₂ _-10烃基、β-氨基C_2-20烃基、β-C_1-10烷胺基C_2-10烃基、β-C_4-14芳胺基C_2-10烃基、β-取代C_4-14芳胺基C_2-10烃基、β-C_1-10烷酰胺基C_2-10烃基、β-C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基、β-取代C_5-14芳酰胺基C_1-10烃基、γ-羟基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷羰氧C_2-10烃基、γ-C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、γ-取代C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、γ-C_1-10芳氧基C_2-10烃基、γ-取代C_5-10芳氧基C_2-10烃基、γ-巯基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷硫基C_2-10烃基、γ-C_4-10芳硫基C_2-10烃基、γ-取代C_5-10芳硫基C_2-10烃基、γ-氨基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷胺基C_2-10烃基、γ-C_4-14芳胺基C_2-10烃基、γ-取代C_4-14芳胺基C_2-10烃基、γ-C_1-10烷酰胺基C_2-10烃基、γ-C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基、γ-取代C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基；或

R₁’与R₂’或R₃’生成3-9元环状结构，特别是吗啉环、哌嗪环、哌啶环、吡咯啉环、咪唑啉环、吡唑啉环、噻唑啉环、高吗啉环、高哌嗪环、高哌啶环、取代的哌嗪环、N-(取代的C_4-6芳烃基)哌嗪环、取代的哌啶环、取代的吡咯啉环、取代的咪唑啉环、N-(取代的C_4-6芳烃基)咪唑啉环、取代的吡唑啉环、N-(取代的C_4-6芳烃基)吡唑啉环、取代的噻唑啉环、取代的高吗啉环、取代的高哌嗪环、N-(取代的C_4-6芳烃基)高哌嗪环、取代的高哌啶环，其中，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素、羟基、氰基、硝基、C_1-10烃基、C_4-6芳烃基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基、一、二或三卤代C_1-6烷基、氨基、C_1-10烃胺基、C_1-10烃酰氧基、C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基；

Y代表氰基、羧基、膦酸基、C_1-10烷氧基羰基、C_3-10杂环氧基羰基、取代的C_3-10杂环氧基羰基、C_4-10芳氧基羰基、取代的C_4-10芳氧基羰基、氨甲酰基、C_1-10烷胺基羰基、C_3-10杂环胺基羰基、取代的C_3-10杂环胺基羰基、C_4-10芳胺基羰基、取代C_4-10芳胺基羰基、单C_1-10烷氧基膦酰基、单C_3-10杂环氧基膦酰基、单(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、单C₄ _-10芳氧基膦酰基、单(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、二(C_1-10烷氧基)膦酰基、二(C_3-10杂环氧基)膦酰基、二(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、二(C_4-10芳氧基)膦酰基、二(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、单C_1-10烷胺基膦酰基、单C_4-10杂环胺基膦酰基、单(取代的C_4-10杂环胺基)膦酰基、单C_4-10芳胺基膦酰基、单(取代的C_5-10芳胺基)膦酰基、二(C_1-10烷胺基)膦酰基、二(C_4-10杂环胺基)膦酰基、二(取代的C_4-10杂环胺基)膦酰基、二(C_4-10芳胺基)膦酰基、二(取代的C_5-10芳胺基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(C_1-10烷氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(取代的C_3-10杂环氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_4-10芳胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_1-10烷胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(C_4-10杂环胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_4-10杂环胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(C₄ _-10芳胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、(取代的C_5-10芳胺基)(取代的C_4-10芳氧基)膦酰基、咪唑基、吡唑基、三氮唑基、四氮唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑啉基、吡唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基，其中所述“二取代的膦酰基”中的取代基团可以相同，也可以不同，杂环指含1-3个选自N、O或S杂原子的单或稠合杂环，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素，羟基，氰基，硝基，C_1-6烃基，C_4-6芳烃基，C₁ _-6烷氧基，C_1-6烷硫基，一、二或三卤代C_1-6烷基，氨基，C_1-10烃胺基，C_1-10烃酰氧基，C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基。

本发明再一方面涉及用于预防或治疗如高血压、充血性心衰、静脉内膜炎、微循环障碍等与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病的通式I所示的化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、其药用盐或其溶剂化物，

其中：

本发明再一方面涉及药物组合物，其含有至少一种式I_a或式I所示的化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、其药用盐或其溶剂化物，及药用载体或赋形剂。

本发明还涉及预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病，尤其是预防或治疗如高血压、充血性心衰、静脉内膜炎、微循环障碍等心血管疾病，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病的方法，其包括对患有与血管内皮细胞功能紊乱的心脑血管疾病如高血压、充心性心力衰竭等的患者给予预防或治疗有效量的式I或式I_a的化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、其药用盐或其溶剂化物。

本发明还涉及制备上述式I_a化合物的方法：首先，本发明人发现了一类新型的类Mannich反应，即当R₃’＝HO-Ar，Y＝PO(OR)OR’时，

酚醛、仲胺与亚磷酸酯在有/无有机溶剂、有/无催化剂存在下，经加热到40-300℃和/或加压到0.1-20Mpa进行反应制备，其中R₁’、R₂’和R₃’同如上所定义，R与R’为C_0-10烃基；所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、丁酮、甲苯、二甲苯、1，2-二氯乙烷、甲氢呋喃、1，4-二氧六环、乙二醇二甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲亚砜；催化剂为酸或/和碱催化剂，酸催化剂为路易斯酸包括有机酸或无机酸，碱催化剂为路易斯碱包括有机碱叔胺与无机碱。该反应的发现与应用使本发明人得以大量制备高活性的新型α-胺基膦酸及其衍生物。

其酰胺可按本领域共知的方法，由相应的酸制备酰卤，再与相应的胺缩合而得，或由相应的酸与相应的胺在缩合剂存在下反应制备。

其次，当Y＝CN时，可应用下述三元Mannich反应，

或

当Y＝COOH时，可由相应的腈水解制备，其水解方法为本领域公知的酸水解法、碱水解法或过氧化氢氧化水解法；或由相应的酰氨水解制备，其水解方法为本领域公知的酸水解法或碱水解法。

当Y＝COOR，CONHR或CONRR’时，均可由相应的羧酸制备，其制备方法为本领域公知的酯化与酰胺化方法。

再次，还可由相应的胺与相应的卤代烃或磺酸酯通过烷基化制备，

或

上述方法还包括将所述的反应得到的产物经不对称反应或进一步拆分制成同分异构体或光学异构体的步骤；还包括将反应所得到的产物与无机酸或有机酸反应，形成药学上可接受的盐，即无机酸如盐酸、硫酸、磷酸和氢溴酸的盐；或有机酸盐，即乙酸、草酸、柠檬酸、葡萄糖酸、琥珀酸、酒石酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、苯甲酸、乳酸和马来酸的盐；还包括将反应所得的产物与无机碱或有机碱反应所形成的药用盐，即碱金属如Li，Na和K；与碱土金属如Ca和Mg；与有机碱如二乙醇胺，胆碱等；或与手性碱如烷基苯基胺等形成药用盐。

根据本发明，本发明中所用术语“与血管内皮细胞功能紊乱相关的疾病”是指与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病如高血压、充血性心衰、静脉内膜炎、微循环障碍等，以及糖尿病、缺血和衰老等疾病。

根据本发明通式I的化合物，R₁或R₂优选分别为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、2-羟基乙基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、2-丙氧基乙基、2-异丙氧基乙基、2-丁氧基乙基、2-异丁氧基乙基、2-叔丁氧基乙基、2-氨基乙基、2-甲胺基乙基、2-乙胺基乙基、2-丙胺基乙基、2-异丙胺基乙基、2-丁胺基乙基、2-异丁胺基乙基、2-叔丁胺基乙基、2-(二甲胺基)乙基、2-(二乙胺基)乙基、2-(二丙胺基)乙基、2-(二丙胺基)乙基、2-(二丁胺基)乙基、2-(二异丁胺基)乙基、2-(二叔丁胺基)乙基、2-吗啉基乙基、2-哌啶基乙基、2-哌嗪基乙基、2-(4-甲基哌嗪基)乙基、3-羟基丙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、3-丙氧基丙基、3-异丙氧基丙基、3-丁氧基丙基、3-异丁氧基丙基、3-叔丁氧基丙基、3-氨基丙基、3-甲胺基丙基、3-乙胺基丙基、3-丙胺基丙基、3-异丙胺基丙基、3-丁胺基丙基、3-异丁胺基丙基、3-叔丁胺基丙基、3-(二甲胺基)丙基、3-(二丙胺基)丙基、3-(二丙胺基)丙基、3-(二丙胺基)丙基、3-(二丁胺基)丙基、3-(二异丁胺基)丙基、3-(二叔丁胺基)丙基、3-吗啉基丙基、3-哌啶基丙基、3-哌嗪基丙基、3-(4-甲基哌嗪基)丙基、；或者，

R₁R₂N优选为吗啉基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基、4-(2-吡啶基)哌嗪基、4-(4-甲基-2-吡啶基)哌嗪基、4-(4-哌啶甲基-2-吡啶基)哌嗪基、4-(3-吡啶基)哌嗪基、4-(4-吡啶基)哌嗪基、4-(2-嘧啶基)哌嗪基、4-(4-嘧啶基)哌嗪基、4-(5-嘧啶基)哌嗪基、4-(6-嘧啶基)哌嗪基、4-(2-哒嗪基)哌嗪基、4-(4，6-二甲氧基-2-三嗪基)哌嗪基、4-(2-氯苯基)哌嗪基、4-(3-氯苯基)哌嗪基、4-(4-氯苯基)哌嗪基、4-(2-氟苯基)哌嗪基、4-(3-氟苯基)哌嗪基、4-(4-氟苯基)哌嗪基、4-(2-氯苯基)哌嗪基、4-(3，4-二氯苯基)哌嗪基、4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基、4-(2-甲氧基苯基)哌嗪基、4-(3-甲氧基苯基)哌嗪基、4-(4-甲氧基苯基)哌嗪基、4-双(4-氟苯基)甲基哌嗪基、4-氨甲酰基-4-哌啶基哌啶基；

R₃优选为氢原子、甲基、C_2-12的烃基、C_3-8环烃基、C_6-12芳烃基、取代的C_6-12芳烃基、C_4-12杂环芳烃基、取代的C_4-12杂环芳烃基，其中，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素，羟基，氰基，硝基，C_1- ₆烃基，C_4-6芳烃基，C_1-6烷氧基，C_1-6烷硫基，一、二或三卤代C_1-6烷基，氨基，C_1-10烃胺基，C_1-10烃酰氧基，C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基，取代基可有一、二、三或四个，可相同或不同；

Y优选为氰基、羧基、C_1-10烃氧基羰基、氨甲酰基、C_1-10烃胺基羰基、膦酸基、一C_1-10烃氧基膦酰基、二C_1-10烃氧基膦酰基、C_1-10。烃氧基C_1-10烃胺基膦酰基、一C_1-10烃胺基膦酰基、二C_1-10烃胺基膦酰基、咪唑基、吡唑基、三氮唑基、四氮唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑啉基、吡唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基。

在本发明的两个优选实施方案中，所述的R₁R₂N为4-(2-吡啶基)哌嗪基，R₃为3，5-二甲氧基-4-羟基苯基或4-羟基-3-甲氧基苯基，Y为二乙氧基膦酰基。

根据本发明，式I或式Ia化合物的酸加成盐举例讲是无机酸盐如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐；或有机酸盐如乙酸盐、草酸盐、柠檬盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐和马来酸盐；式I化合物与碱形成盐举例讲是碱金属盐如锂，钠和钾盐；碱土金属盐如钙和镁盐；有机碱盐如二乙醇胺盐和胆碱盐等；或手性碱盐如烷基苯基胺盐.

本发明的化合物的溶剂化物可以是水合物或包含其它的结晶溶剂如醇类。

本发明进一步涉及新的用于预防或治疗与血管内皮细胞功能紊乱相关的心血管疾病如高血压、充血性心力衰竭、静脉内膜炎等，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病，或作为工具药用于研究与血管内皮细胞功能或其功能紊乱相关的疾病的通式I_a所示的新化合物、其衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、药用盐或溶剂化物，

其中：

Y代表氰基、羧基、膦酸基、C_1-10烷氧基羰基、C_3-10杂环氧基羰基、C_4-10芳氧基羰基、取代C_4-10芳氧基羰基、氨甲酰基、C_1-10烷胺基羰基、C_3-10杂环胺基羰基、C_4-10芳胺基羰基、取代C_4-10芳胺基羰基、C_1-10烷氧基膦酰基、C_3-10杂环氧基膦酰基、C_4-10芳氧基膦酰基、取代C_4-10芳氧基膦酰基、C_1-10烷胺基膦酰基、C_4-10杂环胺基膦酰基、C_4-10芳胺基膦酰基、取代C_5-10芳胺基膦酰基、咪唑基、吡唑基、三氮唑基、四氮唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑啉基、吡唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基，其中所述杂环指含1-3个选自N、O或S杂原子的单或稠合杂环，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素，羟基，氰基，硝基，C_1-6烃基，C_4-6芳烃基，C_1-6烷氧基，C_1-6烷硫基，一、二或三卤代C_1-6烷基，氨基，C_1-10烃胺基，C_1-10烃酰氧基，C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基。

优选地，本发明的式Ia化合物可选自下面化合物组成的组中的任一种：

2-(3，5-二甲氧基-4-羟基苯基)-2-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基膦酸二乙酯；

2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基膦酸二乙酯；

2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)甲基膦酸二乙酯；

1-(氰甲基)-4-甲基哌嗪；

2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙腈；

2-(2-呋喃基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙腈；

2-氰基-1，4-二苄基哌嗪

2-氰基-1-甲基-1-氮杂双环[3，2，1]-2-庚烯(2-氰基-2-托品烯)8-苄基-6β-氰基-8-氮杂双环[3，2，1]辛-3-烯-2-酮；和

2-吗啉基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酸。

根据本发明，式I_a所示的胺衍生物、其异构体、消旋体或光学异构体、药用盐或溶剂化物，也具有预防或治疗调节血管内皮细胞功能的作用。其中式I_a胺衍生物的酸加成盐举例讲是无机酸盐如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐；或有机酸盐如乙酸盐、草酸盐、柠檬盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、马来酸盐、烟酸盐、肉桂酸盐或3-羟基-3-甲基戊二酸盐。优选式I_a胺衍生物的盐酸盐、马来酸盐、对甲苯磺酸盐、肉桂酸盐和3-羟基-3-甲基戊二酸盐。此外，式Ia化合物与碱形成的盐和其溶剂化物如上文对式I化合物定义。

更具体讲，本发明通式I衍生物中，R₁、R₂、R₃可相同或不同，分别代表氢原子、C_1-20的饱和或不饱和的直链或支链脂肪烃、C_3-20的环烷烃基、取代C_3-20环烷烃基、C_4-20的芳香烃基、取代C_5-20芳香烃基、C_3-20杂环烃基、取代C_3-20杂环烃基、β-羟基C_2-20烃基、β-C_1-10烷羰氧C_2-10烃基、β-C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、β-取代C_5-14芳羰氧基C_2- ₁₀烃基、β-C_1-10烷氧基C_2-10烃基、β-C_4-10芳氧基C_2-10烃基、β-取代C_4-10芳氧基C_2-10烃基、β-巯基C_2-20烃基、β-C_1-10烷硫基C_2-10烃基、β-C_4-10芳硫基C_2-10烃基、β-取代C_4-10芳硫基C_2-10烃基、β-氨基C₂ _-20烃基、β-C_1-10烷胺基C_2-10烃基、β-C_4-14芳胺基C_2-10烃基、β-取代C_4-14芳胺基C_2-10烃基、β-C_1-10烷酰胺基C_2-10烃基、β-C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基、β-取代C_5-14芳酰胺基C_1-10烃基、γ-羟基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷羰氧C_2-10烃基、γ-C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、γ-取代C_5-14芳羰氧基C_2-10烃基、γ-C_1-10芳氧基C_2-10烃基、γ-取代C_5-10芳氧基C₂ _-10烃基、γ-巯基C_2-20烃基、γ-C_1-10烷硫基C_2-10烃基、γ-C_4-10芳硫基C_2-10烃基、γ-取代C_5-10芳硫基C_2-10烃基、γ-氨基C_2-20烃基、γ-C_1- ₁₀烷胺基C_2-10烃基、γ-C_4-14芳胺基C_2-10烃基、γ-取代C_4-14芳胺基C₂ _-10烃基、γ-C_1-10烷酰胺基C_2-10烃基、γ-C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基、γ-取代C_5-14芳酰胺基C_2-10烃基；或

Y代表氰基、羧基、膦酸基、C_1-10烷氧基羰基、C_3-10杂环氧基羰基、C_4-10芳氧基羰基、取代C_4-10芳氧基羰基、氨甲酰基、C_1-10烷胺基羰基、C_3-10杂环胺基羰基、C_4-10芳胺基羰基、取代C_4-10芳胺基羰基、C_1-10烷氧基膦酰基、C_3-10杂环氧基膦酰基、C_4-10芳氧基膦酰基、取代C_4-10芳氧基膦酰基、C_1-10烷胺基膦酰基、C_4-10杂环胺基膦酰基、C_4-10芳胺基膦酰基、取代C_5-10芳胺基膦酰基、咪唑基、吡唑基、三氮唑基、四氮唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑啉基、吡唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基，其中所述杂环指含1-3个选自N、O或S杂原子的单或稠合杂环，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素，羟基，氰基，硝基，C_1-6烃基，C_4-6芳烃基，C_1-6烷氧基，C_1-6烷硫基，一、二或三卤代C_1-6烷基，氨基，C_1-10烃胺基，C_1-10烃酰氧基，C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基；

当Y＝PO(OEt)₂时，优选的式I化合物见表1。

表1 Y＝PO(OEt)₂时，优选的式I化合物及其取代基

当Y为氰基时，优选的式I化合物及其取代基见表1所示。

表2 Y＝CN时，优选的式I化合物及其取代基

当Y＝CONH₂时，优选的化合物与取代基见表3

表3 优选式I化合物，其中式I中Y＝CONH₂

当Y＝CO₂H时，优选的化合物与取代基见表4

表4 优选式I化合物，其中式I中Y＝CO₂H

当Y＝CO₂Me时，优选的化合物与取代基见表5

表5 优选式I化合物，其中式I中Y＝CO₂Me

进一步，式I_a化合物若存在可修饰基团，还可与适当衍生化试剂反应，制备相应的衍生物。如酚羟基的烷基化(如甲基化、羧甲基化与烷氧羰基甲基化)、酯化、酯水解等。

根据本发明，式I_a化合物中Y＝PO(OR’)OR”时，通用的制备方法为本发明人所发现的新型类Mannich反应，其通用条件一般为：酚醛、仲胺与亚磷酸酯在有/无有机溶剂存在下加热反应制备，与以往反应不同，该反应不需要酰氯作催化剂。

根据本发明，当通式I所代表的化合物中Y＝CN时，通用的方法可按本领域已知的方法制备，参见Houben-Weyl.Meth Org Chem，1952，8：282-283。

当通式I所代表的化合物中Y＝CONH₂时，通用的方法可按本领域已知的方法由相应的腈水解制备，参见Houben-Weyl.Meth Org Chem，1952，8：661-663；J Am Chem Soc，1960，82：4642-4644。

当通式I所代表的化合物中Y＝COOH时，通用的方法可按本领域已知的方法由相应的腈水解制备，参见Houben-Weyl.Meth Org Chem，1952，8：428-431；或由相应的酰氨制备，参见Houben-Weyl.Meth OrgChem，1952，8：432。

当通式I所代表的化合物中Y＝COOR’时，通用的方法可按本领域已知的方法由相应的腈制备，参见Houben-Wèyl.Meth Org Chem，1952，8：536-537；或由相应的酸制备，参见Houben-Weyl.Meth Org Chem，1952，8：542-547。

通式I所代表的化合物还可经由本领域众知的烷基化方法制备，即由相应的仲胺或酚与适当的卤代物或磺酸酯制备，参见Org Synth，1955，Coll Vol 3：256-258。

根据本发明，式I或式Ia化合物可以立体异构体形式存在。式(I)化合物中存在的不对称中心可具有R构型或S构型。本发明包括所有可能的立体异构体如对映体或非对映体，以及两种或多种立体异构体的混合物，例如对映体和/或非对映体的任何所需比例的混合物。因此，本发明涉及对映体，例如以对映体纯形式存在的左旋-和右旋-对映体，和不同比例存在的两种对映体的混合物或外消旋物。如果存在顺/反异构体，本发明涉及顺式形式和反式形式以及这些形式的混合物。如果需要，单一立体异构体的制备可根据常规方法拆分混合物，或通过例如立体选择合成制备。如果存在机动的氢原子，本发明也涉及式I化合物的互变异构形式。

根据本发明，式I或Ia化合物及其立体异构体可调节血管内皮细胞功能，诱导血管舒张性反应，在预防或治疗与内皮细胞功能紊乱相关的疾病如高血压、充血性心力衰竭、静脉内膜炎、微循环障碍等心血管疾病，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病中显示优良效果。因此可作为预防或治疗与内皮细胞功能紊乱相关的疾病如高血压、充血性心力衰竭、静脉内膜炎、微循环障碍等心血管疾病，以及糖尿病、衰老、缺血等疾病的药物，此类药物可用于动物，优选用于哺乳动物，特别是人。

本发明因此还涉及含有作为活性成份的有效剂量的至少一种式I或式I_a化合物，或其药用盐和/或其立体异构体以及常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1-90重量％的式I或式I_a化合物和/或其生理上可接受的盐。药物组合物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将式I或式I_a化合物和/或立体异构体与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。

本发明的式I或式I_a化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、栓剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成栓剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分式I或式I_a化合物或其立体异构体与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明明胶囊或软胶囊中。也可将有效成分式I或式I_a化合物或其立体异构体制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域常用的所有稀释剂，例如，水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

本发明式I或式I_a化合物，或其药用盐或其立体异构体的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。

实施例

本发明可通过下列实施例得到进一步说明，但这些实施例子不意味着对本发明的任何限制。

实施例1 2-(3，5-二甲氧基-4-羟基苯基)-2-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基膦酸二乙酯—化合物1的制备

称取26.60g(0.146mol)3，5-二甲氧基-4-羟基苯甲醛、23.20g(O.141mol)1-(2-吡啶基)哌嗪与21.10g(0.153mol)亚磷酸二乙酯，加入50ml无水乙醇溶解，于60℃左右浴温中搅拌3.5天，蒸除溶剂，硅胶柱层析，先以氯仿洗去过量的原料，再以氯仿-乙醇(4:1)洗脱，回收溶剂，再以异丙醇-1，4-二氧六环结晶，得无色结晶46.8g，产率71.3％，mp125-127℃。元素分析C₂₂H₃₂N₃O₆P(％)计算值C 56.76，H6.93，N9.02，实测值C 56.80，H 6.92，N 8.88。¹H-NMR(CDCl₃，ppm)1.05-1.12(t，J＝7.04Hz，3H)，1.35-1.38(t，J＝7.04Hz，3H)，2.60-2.70(m，2H)，2.90-3.00(m，2H)，3.45-3.75(m，4H)，3.7853.821(d，J＝20.33Hz，1H)，3.902(s，6H)，3.90-4.00(m，2H)，4.20-4.30(m，2H)，5.542(s，1H)，6.60-6.70(m，2H)，6.739(s，2H)，7.50-7.60(m，1H)，8.15-8.17(dd，1H)。MS(m/z)466.2(M+1)，328.1(B，M-PO(OEt)₂)。以异丙醇溶解化合物1，再以HCl-Et₂O成盐，即得盐酸盐：mp135-136℃，¹H-NMR(D₂O，ppm)1.00-1.20(m，6H)，3.40-3.50(m，4H)，3.65-4.05(m，16H)，4.3855.007(dd，J＝11-15Hz，1H)，6.726(d，J＝2.20Hz，1H)，6.874(s，1H)，7.021(t，J＝6.59Hz，1H)，7.23-7.28(m，1H)，8.013(d，J＝2.20Hz，1H)，8.025(m→d，J＝2.20Hz，1H)。MS(FAB⁺，m/z)466.2(M+1)，328.1(B，M-PO(OEt)₂)。

实施例2 2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基膦酸二乙酯—化合物2的制备

按实施例1的方法，以香草醛代替3，5-二甲氧基-4-羟基苯甲醛制备，以异丙醇-环已烷重结晶，得白色粒状结晶，产率64.9％，mp130-132℃。元素分析C₂₁H₃₀N₃O₅P(％)计算值C 57.92，H 6.94，N 9.65；实测值C 57.86，H 7.01，N 9.48；¹H-NMR(CO(CD₃)₂，ppm)0.97-1.00(t，J＝7.17Hz，3H)，1.27-1.30(t，J＝7.02Hz，3H)，2.48-2.53(m，2H)，2.88-2.92(m，2H)，3.071(s，1H)，3.45-3.49(t，J＝5.04Hz，2H)，3.66-3.74(m，1H)，3.785(s，3H)，3.81-3.92(m，1H)，3.9403.978(d，J＝23.19Hz，1H)，4.15-4.26(m，2H)，6.50-6.52(m，1H)，6.6686.683(d，J＝8.85Hz，1H)，6.7576.770(d，J＝7.94Hz，1H)，6.90-6.93(d，J＝7.94Hz，1H)，7.138(s，1H)，7.39-7.43(m，1H)，8.00-8.02(dd，1H).MS(EI，m/z)435.1(M⁺)，298.1(B，M-PO(OEt)₂)。盐酸盐：mp208-209℃，¹H-NMR(D₂O，ppm)1.00-1.25(m，6H)，3.38-3.50(m，4H)，3.65-4.05(m，13H)，4.4055.004(dd，J＝11-14Hz，1H)，6.84-6.92(m，1H)，6.96-7.04(m，2H)，7.10-7.30(m，2H)，7.774(m→s，J＝2.20Hz，1H)，8.025(m，1H)。MS(FAB⁺，m/z)436.2(M+1)，298.1(B，M-PO(OEt)₂)。

实施例3 2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)甲基膦酸二乙酯—化合物11的制备

按实施例1的方法，以N-甲基哌嗪反应制备，以乙醚-乙醇结晶，产率94.1％，¹H-NMR(CDCl₃，ppm)1.05-1.09(t，J＝7.08Hz，3H)，1.34-1.38(t，J＝7.08Hz，3H)，2.25(s，3H)，2.38-2.53(m，4H)，2.80-2.94(m，2H)，3.62-3.74(m，2H)，3.7453.801(d，J＝22.46Hz，1H)，3.862(s，3H)，3.80-3.98(m，2H)，4.08-4.32(m，2H)，6.7656.786(d，J＝8.30Hz，1H)，6.8306.849(d，J＝7.81Hz，1H)，7.034(s，1H).MS(EI⁺，m/z)372.2(M⁺)，274.1(M-MP)⁺，235.1(B，M-PO(OEt)₂)。

实施例4 N-(氰甲基)吗啉—化合物133的制备

称取8.30g(0.11mol)氯乙腈，加入50ml无水乙醚，搅拌及冰水冷却下，滴入17.50g(0.20mol)吗啉与20ml无水乙醚，滴毕，放置过夜，次日，过滤，以无水乙醚充分洗涤，合并乙醚溶液，旋转蒸去低沸点部分，得浅红色液体12.20g(96.8％)，即化合物1。取2.60g(0.020mol)液体，溶于20ml无水乙醚，以HCl-Et₂O成盐，得白色固体3.20g(95.4％)，即N-(氰乙基)吗啉盐酸盐，mp，元素分析C₆H₁₁ClN₂O(％)理论值C44.32，H6.82，N17.23；实测值C44.36，H6.83，N17.31。¹H-NMR(D₂O，ppm)3.37-3.46(m，4H)，3.95-4.02(t，J＝4.58Hz，4H)，4.37-4.43(m，2H).

实施例5 1-(氰甲基)-4-甲基哌嗪—化合物134的制备

按实施例4的方法，以N-甲基哌嗪代替吗啉制备，化合物2的产率98.1％；成盐产率97.2％。¹H-NMR(D₂O，ppm)2.70-2.80(m，2H)，2.92-2.93(d，J＝1.10Hz，3H)，3.12-3.24(m，4H)，3.55-3.64(m，2H)，3.82-3.84(d，J＝1.10Hz，2H).

实施例6 2-(3，4-亚甲二氧基苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙腈—化合物150的制备

称取1.10g(0.0224mol)氰化钠、2.21g(0.0213mol)亚硫酸氢钠与3.10g(0.0206mol)胡椒醛，加入20ml水，摇匀，再加入2.10g(0.0210mol)N-甲基哌嗪和10ml乙醇，于50℃左右浴温及搅拌下反应40小时，冷却，加水，以乙醚提取3次，无水硫酸镁干燥，回收溶剂，以乙醚-石油醚结晶，得白色晶体3.50g(65.8％)，mp 87-88℃。元素分析C₁₄H₁₇N₃O₂(％)理论值C 64.85，H 6.61，N 16.20；实测值C 64.88，H 6.59，N 16.27。IR(KBr压片，cm^-1)3457.92，2905.61，2244.99，2220.27，2187.02，1504.49，1504.49，1496.79，1460.03，1452.37，1258.70，1113.09，932.23，825.46；¹H-NMR(CDCl₃，ppm)2.293(s，3H)，2.40-2.55(m，4H)，2.55-2.64(m，4H)，4.721(s，1H)，5.993(s，2H)，6.7936.814(d，J＝8.30Hz，1H)，6.994(s，1H)，7.0057.025(d，J＝8.30Hz，1H)；MS(FAB⁺，m/z)260.2(M+1)⁺，259.2(M⁺)，258.2(M-1)⁺，233.2(M-CN)⁺，160.0(B，(M-MP)⁺)。

实施例7 2-(2-呋喃基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙腈—化合物152的制备

称取1.40g(0.0103mol)N-甲基哌嗪盐酸盐、1.01g(0.0105mol)呋喃甲醛与0.52g(0.0106mol)氰化钠，溶于10ml水和20ml乙醇，于55℃左右浴温中搅拌反应约6小时，冷却，加入50ml水，再以乙酸乙酯(70ml×2)提取，无水硫酸钠干燥，回收溶剂，残留物即为化合物2，以EtOH-AcOEt-Et₂O溶解，HCl-Et₂O成盐，即得2-(2-呋喃基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙腈·盐酸盐2.05g(84.7％)，mp 174-175℃。IR(KBr压片，cm^-1)3435.79(br)，2800-2400(m)，1460.65，1184.56，1143.60，1111.70，1015.64，983.75，878.48，752.43；¹H-NMR(CDCl₃，ppm)2.8262.837(d，J＝4.39Hz，3H)，2.90-3.05(m，4H)，3.06-3.24(m，2H)，3.50-3.62(m，2H)，4.945(s，1H)，6.42-6.44(m，1H)，6.6046.611(d，J＝2.93Hz，1H)，7.483(s，1H)，12.925(br，1H)；MS(FAB⁺，m/z)447.2(2M-Cl^-1)⁺，206.1(M-Cl^-1)⁺，179.1(B，(B-CN)⁺)。

实施例8 2-氰基-1，4-二苄基哌嗪—化合物182的制备

称取10.65g(0.050mol)2，3-二溴丙腈，加入40ml干燥苯，于40℃及搅拌下滴入溶有10.20g(0.101mol)三乙胺和12.05g(0.050mol)N，N’-二苄基乙二胺的20ml干燥苯溶液，滴毕，回流3小时，冷却，过滤，固体以苯洗涤，合并苯液，回收苯，硅胶柱层析，得淡黄色稠状液体，即化合物；取1.0g产品，以20ml乙醚溶解，以盐酸乙醚成盐，析出稠状固体，弃去溶剂，以异丙醇-乙醚结晶，得盐酸盐0.90g(80.0％)，mp 170-171℃。

实施例9 2-氰基-1-甲基-1-氮杂双环[3，2，1]-2-庚烯(2-氰基-2-托品烯)—化合物183的制备

称取30.20g(0.258mol)2，4，6-环庚三烯腈，置入反应釜中，加入200ml甲胺醇溶液，置于85-90℃油浴中加热反应28小时，冷却，开釜，旋转蒸去低沸点部分，然后减压蒸馏，得浅黄色液体33.80g(88.5％)，bp 95-98℃/2-3mmHg.以HCl-Et₂O成盐，得白色固体，mp 181-184℃。

实施例10 8-苄基-6β-氰基-8-氮杂双环[3，2，1]辛-3-烯-2-酮—化合物184的制备

称取11.20g(0.050mol)氯化N-苄基-3-羟基吡啶和0.10g对苯二酚，加入25ml丙烯腈和10ml三乙胺及65ml四氢呋喃，回流搅拌反应过夜。次日，过滤，旋转蒸去溶剂，加入100ml乙醚，过滤，回收溶剂，残渣以乙醇重结晶，得黄色晶体6.35g(53.4％)，mp 87-89℃。

实施例11 2-氨甲酰基-1-甲基-1-氮杂双环[3，2，1]-2-庚烯(脱水芽子碱酰胺)—化合物250的制备

取3.05g(0.0206mol)2-氰基-2-托品烯，溶于20ml浓盐酸，回流反应6小时，减压蒸去水，以无水乙醇结晶，得白色固体3.46g(82.5％)，mp 218-221℃。

实施例12 2-吗啉基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酸—化合物254的制备

参照实施例11的方法，取2-吗啉基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙腈盐酸盐1.80g(6.46mmol)，溶于25ml浓盐酸和15ml水，回流反应过夜，次日，旋转蒸干，残留物以无水乙醇溶解，加乙醚沉淀，过滤，固体以乙醚洗涤，再以无水乙醇重结晶.

实施例13 8-苄基-6β-甲氧羰基-8-氮杂双环[3，2，1]辛-3-烯-2-酮—化合物385的制备

按照实施例10的方法，以丙烯酸甲酯代替丙烯腈制备，得6.50g(48.0％)，mp 90-92℃。

下面的生物活性实验用来进一步说明本发明。

生物效应实验1本发明式I代表性化合物对离体大鼠主动脉环内皮依赖的血管舒张反应性的影响(EPA激动活性)及对豚鼠回肠收缩反应的影响(M₃激动活性)

表1 本发明式I代表性化合物的EPA激动活性与M₃激动活性

*注：“-”代表明显活性，“+”代表最大舒张率<20％，“++”代表最大舒张率为20-50％，“+++”代表最大舒张率>50％.

表2 本发明式I代表性化合物对离体大鼠主动脉环血管舒张反应性影响的内皮依赖性

注：X±SD，n＝3-14，*P<0.05，**P<0.01.

以上实验结果表明，本发明式I化合物能选择性在激活EPA，而对M₃受体没有明显作用；其舒血管效应是内皮依赖的。

生物效应实验1的研究方法之一，Wistar大鼠，♀♂兼用，体重200-250g；豚鼠，♀♂兼用，体重300±50g，均由军事医学科学院实验动物中心提供。Wistar大鼠断头处死，迅速开胸，取出主动脉胸腹段，置于盛有Krebs-Ringer营养液(NaCl 118、KCl 4.7、CaCl₂ 11.0、KH₂PO₄ 1.2、NaHCO₃ 25.0、葡萄糖11.1、EDTACa-Na₂ 0.026mmol.L^-1，PH7.4)的培养皿中，切成3-5mm固定长度的动脉环，置于盛有10mlKrebs-Ringer营养液的37℃恒温浴槽内，下端固定，上端通过张力换能器连于自动平衡记录仪，记录血管环的张力变化，持续通入95％O₂和5％CO₂的混合气。动脉环前负荷为1.5g，平衡60min后，进行下述实验，以0.62μmol.L^-1NE预收缩血管，再平衡40min后，以0.62μmol.L^-1NE收缩血管，达最大收缩幅度并至坪值，稳定后加入10^-5mol.L^-1被评筛化合物，观察新结构化合物对血管张力的影响。以NE诱发的最大收缩幅度为100％，化合物诱发血管舒张或收缩的幅度与NE诱发最大收缩幅度之间的比率为血管的舒张率或收缩率。

用棉棒轻轻擦去内皮后，在0.62μmol.L^-1NE收缩血管，达最大收缩幅度后，加入10^-6mol.L^-1ACh，观察有无舒血管反应，以初步判断内皮是否去干净，冲洗标本并平衡40min后，0.62μmol.L^-1NE收缩血管，达最大收缩幅度后，加入10^-5mol.L¹被评筛化合物，观察血管张力的变化，初步判断其舒血管作用是否为内皮依赖性舒张作用。

实验方法详见参考文献：Feletou M，Vanhoutte PM.Endothelium-dependent hyperpolarization of canine coronarysmooth muscle.Br J Pharmacol，1988；93：515-524.

生物效应实验1的研究方法之二，豚鼠实验前禁食24小时，击头致昏后，迅速取出距盲肠10-20cm的这断回肠，截成1.5cm的肠管，以台氏液冲洗干净后，置于混合O₂饱和的台氏液中备用。上述肠管的两端以丝线结扎，置于盛有10ml台氏液的37℃恒温浴槽内，持续通入95％O₂和5％CO₂的混合气。下端固定，上端通过张力换能器连于自动平衡记录仪。静息张力为3.0g，标本稳定20min后，基线稳定后开始实验，描记回肠收缩曲线。以10^-6mol.L^-1槟榔碱为阳性对照，槟榔碱能引起快速且很强的收缩反应，持续30min以上。受试化合物浓度为10^-5mol.L^-1，实验数据以回肠的收缩率表示。实验方法详见参考文献：Bekemeier H，Hirschelmann R，Giessler AJ.Carrageenin-inducedthrombosis in rats and mice：A model for testing antithromboticsubstance？Agents and Actions，1985；16(5)：446-451.

生物效应实验2 在离体大鼠主动脉环上活性候选化合物对一氧化氮和前列环素生成的影响。

表3 吲哚美辛与L-NAME对化合物1与化合物2的舒血管效应的拮抗作用

注：X±SD，n＝3-14，*P<0.05，**P<0.01。实验数据采用X±SD表示，采用成组t检验或自身配对t检验进行显著性分析，应用SAS D2P8程序.

以上实验结果表明，化合物1和化合物2的舒血管效应能被L-NAME和吲哚美辛所拮抗，而L-NAME为NO合成酶抑制剂，特异性地抑制血管内皮细胞合成并释放NO，拮抗其舒血管效应；吲哚美辛为花生四烯酸代谢过程中的环氧合酶抑制剂，能够特异性地抑制PGI₂的生成，拮抗其舒血管效应；

综合上述结果，化合物1和2诱发的内皮依赖性舒血管反应是通过PGI₂和NO两个途径共同起作用，

生物效应2的实验方法采用离体大鼠主动脉环实验，以0.62μmol.L^-1NE收缩标本，达最大收缩平衡后，加入10^-5mol.L^-1吲哚美辛和10^-4mol.L^-1L-NAME预孵育标本5min后，加入0.62μmol.L^-1NE收缩标本，达最大收缩平衡后，加入10^-5mol.L^-1化合物1和2，观察标本舒张率的改变。

生物效应实验3 新化合物1对大鼠血压和心功能的影响

表4 化合物1(10mg/kg，iv)对麻醉正常大鼠血压和心功能的影响

注：MAP为平均动脉压；HR为心率；心脏收缩功能指标有：LVSP为左室收缩压，+dp/dt_max为左室等容期压力最大变化速率，+dp/dt_max/IP为左室压力对数值，T+dp/dt_max为室内压上高段最大变化速率所在时间，Vmax为心肌纤维缩短速率；心脏舒张功能指标有：-dp/dt_max为左室等容期压力最大变化速率，T-dp/dt_max为室内压下降段最大变化速率所在时间.数据采用X±SD表示，n＝8，*p<0.05，**p<0.01，与给药前比较，数据统计采用配对t检验。

以上实验结果表明，化合物1在0.1-1.0mg/kg对血压及心功能明显影响，高剂量10mg/kg有轻度降低平均动脉压和轻度降低心率的作用；对心脏收缩功能和舒张功能无明显影响。

生物效应实验3的实验方法，Wistar大鼠用戊巴比妥钠麻醉后，颈部腹侧偏右分离右颈总动脉，结扎远心端，右颈总动脉插管，导管中充满0.03％肝素的生理盐水，并与压力换能器和记录仪连接，观察示波器上压力波形的变化；信号输入至SMUP-PC生物信息处理系统，可自动记录平均动脉压和心功能各项指标。操作步骤详见文献：Aguilar-Bryan L，Nichols CG，Wechsler SW，et al.Cloning of theβ cell high-affinity sulfonylurea receptor：A regulation ofinsulin secretion.Science(Wash DC)1995；268；423-6.

Claims

1.通式I_a所示的化合物或其药用盐，

其中：

R₁′R₂′N为4-甲基哌嗪基、4-(2-吡啶基)哌嗪基、4-(4-甲基-2-吡啶基)哌嗪基、4-(4-哌啶甲基-2-吡啶基)哌嗪基、4-(3-吡啶基)哌嗪基、4-(4-吡啶基)哌嗪基、4-(2-嘧啶基)哌嗪基、4-(4-嘧啶基)哌嗪基、4-(5-嘧啶基)哌嗪基、4-(6-嘧啶基)哌嗪基、4-(2-哒嗪基)哌嗪基、4-(4，6-二甲氧基-2-三嗪基)哌嗪基、4-(2-氯苯基)哌嗪基、4-(3-氯苯基)哌嗪基、4-(4-氯苯基)哌嗪基、4-(2-氟苯基)哌嗪基、4-(3-氟苯基)哌嗪基、4-(4-氟苯基)哌嗪基、4-(2-氯苯基)哌嗪基、4-(3，4-二氯苯基)哌嗪基、4-(5-氯-2-甲基苯基)哌嗪基、4-(2-甲氧基苯基)哌嗪基、4-(3-甲氧基苯基)哌嗪基、4-(4-甲氧基苯基)哌嗪基、4-双(4-氟苯基)甲基哌嗪基；

R₃′代表C_6-12芳烃基、取代的C_6-12芳烃基，其中，每个带有取代基的基团的取代基选自：卤素，羟基，氰基，硝基，C_1-6烃基，C_4-6芳烃基，C_1-6烷氧基，C_1-6烷硫基，一、二或三卤代C_1-6烷基，氨基，C_1-10烃胺基，C_1-10烃酰氧基，C_6-10芳酰氧基或C_1-10烃酰胺基，取代基可有一、二、三或四个，可相同或不同；

Y代表膦酸基、一C_1-10烃氧基膦酰基、二C_1-10烃氧基膦酰基、C_1-10烃氧基C_1-10烃胺基膦酰基、一C_1-10烃胺基膦酰基、二C_1-10烃胺基膦酰基。

2.权利要求1的化合物，选自

2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)甲基膦酸二乙酯。

3.权利要求1或2的化合物，其中，所述的药用盐是药用酸加成的盐，选自盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐；或者是乙酸盐、草酸盐、柠檬盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐或马来酸盐。

4.权利要求1或2的化合物，其中所述的药用盐是与碱形成的盐，选自碱金属盐，碱土金属盐，与有机碱形成的盐或与手性碱形成的盐。

5.权利要求1的化合物，其中，所述的化合物是2-(3，5-二甲氧基-4-羟基苯基)-2-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基膦酸二乙酯·盐酸盐。

6.权利要求1的化合物，其中，所述的化合物是2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-[4-(2-吡啶基)哌嗪基]甲基膦酸二乙酯·盐酸盐。