CN100467033C - 植物性保肝剂及其制造方法 - Google Patents

植物性保肝剂及其制造方法 Download PDF

Info

Publication number
CN100467033C
CN100467033C CNB038265435A CN03826543A CN100467033C CN 100467033 C CN100467033 C CN 100467033C CN B038265435 A CNB038265435 A CN B038265435A CN 03826543 A CN03826543 A CN 03826543A CN 100467033 C CN100467033 C CN 100467033C
Authority
CN
China
Prior art keywords
acteoside
concentration
extract
liquid fractionation
residue
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB038265435A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1771048A (zh
Inventor
关蓝
那比
夸齐
帕卡须 苏芮 欧姆
拉尔 贝迪 卡楚里
艾薇塔 苏芮 克利斯韩
戴塔 古瀑塔 毕弦
辛格 贾各 布宾德
克利斯韩 卡帕嘿 拜尔
库玛 萨堤 奈瑞许
阿悯那 穆萨瑞特
克利斯韩 查丹 拜尔
夏玛 尼兰
辛格 戈大弦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Council of Scientific and Industrial Research CSIR
Original Assignee
Council of Scientific and Industrial Research CSIR
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Council of Scientific and Industrial Research CSIR filed Critical Council of Scientific and Industrial Research CSIR
Publication of CN1771048A publication Critical patent/CN1771048A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100467033C publication Critical patent/CN100467033C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

一种从羽萼木(Colerbrookea oppositifolia)的植物分离具有高度肝脏保护作用的纯麦角甾苷(Acteoside)的方法，此方法的步骤包括干燥植物的花茎叶；将干燥部分磨成粉末；利用水或乙醇将粉未浸提3～4次以获得萃出物；过滤萃出物以清除悬浮颗粒而获得上清液；约45至55℃下干燥上清液以获得残留物；依续以氯仿、醋酸乙酯和丁醇分馏残留物；将甲醇加入分馏液之后取丁醇分馏液进行SiO2的吸附层析；将经吸附的分馏液置入玻璃管柱内；以渐增极性的甲醇∶氯仿的溶剂洗提管柱而获得进一步的分馏液并重复一次此步骤；将此分馏液进行管柱层析而获得分馏液；在减压下浓缩分馏液而获得麦角甾苷的残留物，以及利用羽萼木植物的纯麦角甾苷有效保护病人的肝脏的方法，此方法的步骤包括投与病人适当低剂量的麦角甾苷。

Description

植物性保肝剂及其制造方法
技术领域
本发明涉及一种植物性保肝剂及其制造方法，特别是关于一种从羽萼木(Colerbrookea oppositifolia)的植物分离具有高度肝脏保护作用的纯麦角甾苷(Acteoside)的方法，此方法的步骤包括干燥植物的花茎叶；将干燥部分磨成粉末；利用水或乙醇将粉末浸提3～4次以获得萃出物；过滤萃出物以清除悬浮颗粒而获得上清液；约45至55℃下干燥上清液以获得残留物；依续以氯仿、醋酸乙酯和丁醇分馏残留物；将甲醇加入分馏液之后取丁醇分馏液进行SiO2的吸附层析；将经吸附的分馏液置入玻璃管柱内；以渐增极性的甲醇：氯仿的溶剂洗提管柱而获得进一步的分馏液并重复一次此步骤；将此分馏液进行管柱层析而获得分馏液；在减压下浓缩分馏液而获得麦角甾苷的残留物，以及利用羽萼木植物的纯麦角甾苷有效保护病人的肝脏的方法，此方法的步骤包括投与病人适当低剂量的麦角甾苷。
背景技术
根据报告苯乙醇(phenylethanoids)是存在于植物如肉苁蓉(Cistanche deserticola)和扬波(Buddleja species)内的化合物(QuanboXing，Koji Hase等人，PlantaMedica，64，120～125(1998)；Peter J.Houghton和Hiroshi Hikino，Planta Medica，第55卷，123～126(1989))。
作者第一次从羽萼木中分离出苯乙醇—毛蕊花糖苷(verbascoside)(亦称为麦角甾苷或臭梧桐苷(kusaginin))并且发现其在极低的剂量下(1.25和2.5毫克/公斤之间)对大鼠和小白鼠具有极强的抗肝毒/肝保护活性。
从羽萼木的文献中已报告存在多种的类黄酮(flavonoids)和类黄酮醇(glycoflavonoids)[S.Aziz Ahmed，S.A.Siddiqui和Asif Zaman，Indian J.Chemistry 12：1327～28(1974)；S.A.Patwardhan和A.S.Gupta，Indian J.Chemistry，20B，627(1981)；Fan Yank，Xing-Li，HAN-Qing Wang和Chong-Ren Yang，Phytochemistry 42：867～69(1996)]。然而，第一次报告从这些植物中发现麦角甾苷。
较早曾报告此植物以睾丸细胞族群活动力作为参考对雄性大鼠具有抗生殖活性(R.S.gupta，R.J.Yadav，V.P.Dixit和M.P.Dobhal，Fitoterapia，72：236～45(2001))。
但是亦报告可从其它两种植物即肉苁蓉和扬波分离出具有肝保护/抗肝毒活性的麦角甾苷(毛蕊花糖苷)。(Quanbo Xing，Koji Hase等人，Planta Medica，64：120～125(1998)；PeterJ.Houghton和HiroshiHikino，Planta Medica，第55卷，123～126(1989))，然而本发明报告其不仅可取自不同的来源即羽萼木亦可在大鼠中使用1.5至2.5毫克/公斤的极低剂量即获得所需的活性。
已报告麦角甾苷在活体外及体内均具有如上述的肝保护/抗肝毒活性(Quanbo Xing，Koji Hase等人，Planta Medica，64：120～125(1998))。但是本发明分离自迄今未曾报告的来源的麦角甾苷则为具有低于先前技术约12至25倍剂量的抗肝毒性/肝保护活性的化合物(Quanbo Xing，Koji Hase等人，Planta Medica，64：120～125(1998))；Peter J.Houghton和Hiroshi Hikino，Planta Medica，第55卷，123～126(1989))。此外，先前报告中的评估参数仅限于ALT(体内)和AST和MDA(活体外)而本发明则使用可明确判定任何影响麦角甾苷对肝保护或抗肝毒性产品的效果的全部重要参数。
比较先前技术中的报告低剂量麦角甾苷即具有活性的理由为使用特殊的分离方法以产生较高纯度的产品。已知植物化学物质内的污染物会严重影响纯活性化合物的活性，虽然其可能为协同作用，然而，在先前技术中并未述及或指示。
发明内容
本发明的主要目的为从羽萼木(Colerbrookea oppositifolia)的植物分离出肝脏保护剂。
本发明的另一目的为提供一种从羽萼木的植物分离麦角甾苷(Acteoside)的方法。
又本发明的另一目的为提供一种利用羽萼木保护病人肝脏的方法。
具有上述优点的本件植物性保肝剂及其制造方法，是为一种从羽萼木植物分离具有高度肝脏保护作用的纯麦角甾苷的方法，该方法的步骤包括干燥植物的花茎叶；将干燥部分磨成粉末；利用水或乙醇将粉末浸提3～4次以获得萃出物；过滤萃出物以清除悬浮颗粒而获得上清液；约45至55℃下干燥上清液以获得残留物；依续以氯仿、醋酸乙酯和丁醇分馏残留物；将甲醇加入分馏液之后取丁醇分馏液进行SiO2的吸附层析；将经吸附的分馏液置入玻璃管柱内；以渐增极性的甲醇：氯仿的溶剂洗提管柱而获得进一步的分馏液并重复一次此步骤；将此分馏液进行管柱层析而获得分馏液；在减压下浓缩分馏液而获得麦角甾苷的残留物，以及利用羽萼木植物的纯麦角甾苷有效保护病人的肝脏的方法，该方法的步骤包括投与病人适当低剂量的麦角甾苷。
在本发明的一具体例中，其中从羽萼木植物分离具有高度肝脏保护作用的纯麦角甾苷的方法包括下列步骤：
●干燥植物的花茎叶；
●将干燥部分磨成粉末；
●利用水或乙醇将粉末浸提3～4次以获得萃出物；
●过滤萃出物以清除悬浮颗粒而获得上清液；
●约45至55℃下干燥上清液以获得残留物；
●依续以氯仿、醋酸乙酯和丁醇分馏残留物；
●将甲醇加入分馏液之后取丁醇分馏液进行SiO2的吸附层析；
●将经吸附的分馏液置入玻璃管柱内；
●以渐增极性的甲醇：氯仿的溶剂洗提管柱而获得进一步的分馏液并重复一次此步骤；
●将此分馏液进行管柱层析而获得分馏液；
●在减压下浓缩分馏液而获得麦角甾苷的残留物。
在本发明的另一具体例中，其中藉由此方法获得的麦角甾苷比较从其它来源获得者显示具有低于12至25倍剂量的肝保护活性。
又本发明的另一具体例中，其中萃出物为水和酒精萃出物。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷占总萃出物约1.0％(重量)。
在仍为本发明的另一具体例中，其中利用羽萼木植物的纯麦角甾苷有效保护病人的肝脏的方法，该方法的步骤包括投与病人适当低剂量的麦角甾苷。
在仍为本发明的另一具体例中，其中投与剂量为0.5至10.0毫克/公斤体重。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷是从经口(P.O.)的途径投与。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可降低血清麸醯胺酸丙酮酸转化酶(GPT)的浓度的异常上升。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可降低血清麸醯胺酸草酸转化酶(GOT)的浓度的异常上升。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可降低血清碱性磷酸酶(ALP)的浓度的异常上升。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可降低血清胆红素的浓度的异常上升。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可降低血清三酸甘油酯(TG)的浓度的异常上升。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可降低脂肪过氧化酶(LP)的浓度的异常上升。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可增加白蛋白的浓度的异常降低。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷可增加还原型麸胺基硫(GSH)的浓度的异常降低。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷的药效约为市售肝脏保护剂的10至20倍。
在仍为本发明的另一具体例中，其中麦角甾苷对抗肝毒性约提供40～85％的保护作用。
本发明是关于第一次从从羽萼木的植物分离出及报告在极低的剂量下具有抗肝毒/肝保护活性的称为毛蕊花糖苷的苯乙醇—亦称为麦角甾苷或臭梧桐苷。
本发明述及分离毛蕊花糖苷的特殊方法以及说明其在极低剂量下对抗不同毒素的抗肝毒/肝保护活性。
本发明的作者第一次报告从羽萼木的植物分离出麦角甾苷(毛蕊花糖苷)的活性化合物。以类似文献中(Phytochemistry 21：1123～1127(1982))报告的1H和13C核磁共振仪(NMR)确认作者所分离的麦角甾苷的可靠性。
实施例的附件-1中说明从各种植物萃出物(95％酒精；50％酒精及水)分离麦角甾苷的方法。
确认纯度的HPLC图形揭示于图1。
利用附件-2的综合性试验的设计生物学检测化合物的肝保护/抗肝毒活性。在生物学检测中利用检测套组(意大利Clonital公司和占那市Accurex生物医药公司)以试验参数测定其生物学效力及最适剂量。各种参数列举于附件-2。附件-3为就不同参数比较水飞蓟素(silymarin)和甘草甜素(glycyrrhizin)的标准药物而言的剂量反应图。
各种剂量的麦角甾苷比较标准药物即水飞蓟素和甘草甜素，及所需对照的生物学检测数据附于本发明的表1。图2和表1清楚显示投与肝毒素CCl4之后受影响的全部参数以剂量1.25毫克至5毫克/公斤的麦角甾苷可使其恢复至正常的浓度。参考本发明使用的全部参数麦角甾苷提供的整体保护的百分比通常为从40～80％，并且其甚至优于10～20倍麦角甾苷剂量的水飞蓟素。
本发明的麦角甾苷可达到保护作用的最适剂量为介于1.25毫克/公斤至2.5毫克/公斤之间。在统计学上，除1.25毫克/公斤和5毫克/公斤的剂量比较数据之外，三种剂量即1.25、2.5和5毫克/公斤之间并无显著性意义(表2)。较高剂量即2.5毫克/公斤和5毫克/公斤之间无可观察的统计学上显著性意义。同时，在1.25和2.5毫克/公斤之间以类似的方法观察均具有极佳的剂量效应。
附图说明
请参阅以下有关本发明一较佳实施例的详细说明及其附图，将可进一步了解本发明的技术内容及其目的功效；有关该实施例的附图为：
图1为确认纯度的HPLC图；
图2为麦角甾苷、水飞蓟素和甘草甜素的肝保护活性(％)的比较；
表1 老派为麦角甾苷在啮齿类预防中对抗CCl4导致的肝损伤的肝脏保护效力图表；
表2 为麦角甾苷各种剂量间的显著性分性图表。
具体实施方式
实施例1
将干燥羽萼木植物的花茎叶(500公克)研磨成粗粉末。以95％乙醇浸提粉末14小时。利用总量为9公升的95％乙醇(3.0+2.0+2.0+2.0公升，四次萃取)重复四次萃取过程。收集全部四次萃出物并过滤以清除悬浮颗粒。在50±5℃下将上清液于刮膜式蒸发器上蒸发干燥。获得萃取值为12％的60.0公克残留物(编号RJM/0862/P08/A001)。依续以CHCl3、EtOAc和n-BuOH(各2x1公升)分馏萃取。在溶于少量甲醇内之后将15.0公克n-BuOH的萃取物在SiO2凝胶的100～200网孔(100公克)上进行吸附层析。完全移除溶剂而获得流体物质。将经吸附的分馏液置入37.5毫米玻璃管柱内。以CHCl3内渐增MeOH百分率的溶剂洗提管柱。收集各100毫升的105件分馏液并利用8:1:1的EtOAc:HCOOH:H2O作为流动相进行薄膜色层分析(TLC)。喷洒新鲜制备的硼酸盐-PEG4000溶液[MeOH内2-胺乙基联苯硼酸盐的1％溶液及EtOH内聚乙二醇4000的5％溶液(喷洒前以1:1体积/体积比例混合)使其显影。收集七件具有相同TLC图形的分馏液，干燥并利用100～200网孔的凝胶管柱(1:20比例)再进行层析及以渐增极性的CHCl3:MeOH混合物进行洗提。收集各200毫升的全部60件分馏液。干燥在TLC上收集的八件分馏液并再一次进行管柱色层分析。收集各100毫升的30件分馏液。在减压下浓缩六件分馏液。利用MeOH/CHCl3结晶残留物而获得可溶于MeOH的无色非晶形粉末。在Rf值0.42(溶剂系统EtOAc:HCOOH:H2O为8:1:1)发现的化合物编号为862-II。利用下列的操作环境以HPLC测定862-II的纯度：
管柱：RP-18e(E-Merck公司，5微米，4.6x250毫米)，于
流动相：乙腈(B)：水内的1.5％醋酸(A)；
流速：1毫升/分钟；
λmax：335奈米。
此化合物为根据NMR(1H和13C)及FABMS数据所确认的麦角甾苷。
实施例2
研磨羽萼木植物的干燥花茎叶(500公克)并以50％含水乙醇浸提四次(50％EtOH，4x2.5公升)分别为每次14小时。收集全部四次的萃出物。离心收集的含水萃出物，在50±5℃下将透明上清液于刮膜式蒸发器上蒸发干燥。残留物(90公克)编号为RJM/0862/P08/A002(萃取值18％)然后依续以CHCl3、EtOAc和n-BuOH进行分馏。n-BuOH萃出物在CHCl3内以梯度MeOH的硅凝胶管柱(60～120网孔)进行层析。将CHCl3:MeOH(5:1)析出物利用CHCl3-MeOH:H2O(6:1:0.1)作为溶剂以硅凝胶(100～200网孔)管柱再次进行层析。收集TLC上均质化的分馏液，干燥并置于葡聚糖凝胶Sephadex LH-20管柱以MeOH浸提而产生各500毫升的分馏液。将含主要标的化合物(862-II)的第二种分馏液进一步在Sephadex LH-20上纯化。以MeOH:H2O(3:2)浸提的管柱产生一分馏液，其利用MeOH/CHCl3结晶而产生可溶于MeOH的无色非晶形粉末，Rf值为0.42(溶剂系统EtOAc：HCOOH:H2O为8:1:1)。利用下列的操作环境根据862-II的HPLC进行萃出物RJM/0862/P08/A002的标准化：
管柱：RP-18e(E-Merck公司，5微米，4.6x250毫米)，于
流动相：乙腈(B)：水内的1.5％醋酸(A)；
流速：1毫升/分钟；
λmax：335奈米。
此化合物为根据NMR(1H和13C)及FABMS数据所确认的麦角甾苷。萃出物RJM/0862/P08/A002内862-II的百分率为0.86。
实施例3
将干燥羽萼木植物的花茎叶(500公克)研磨成粗粉末然后在98±1℃下以去离子水萃取2小时。利用全部的水(1+3x0.7公升，四次萃取)重复四次萃取过程。收集全部四次萃出物。离心收集的萃出物，冷冻干燥透明的滤过物而获得淡黄色非晶形粉末(产量为95公克)。编号为RJM/0862/P08/A003的含水萃取残留物(萃取值19％)依续以CHCl3、EtOAc和n-BuOH进行分馏。将n-BuOH萃出物在SiO2凝胶的60～120网孔(150公克)上进行吸附层析。完全移除溶剂而获得流体物质。将1.5时直径的玻璃管柱装填在EtOAc内的60～120网孔的100公克SiO2凝胶。将经吸附的分馏液置入管柱内。以EtOAc及渐增百分率的MeOH洗提管柱。收集各100毫升的全部120件分馏液并置于TLC进行层析(8:1:1的EtOAc:HCOOH:H2O作为显像溶剂)。喷洒新鲜制备的硼酸盐-PEG4000溶液[MeOH内2-胺乙基联苯硼酸盐的1％溶液及EtOH内聚乙二醇4000的5％溶液(喷洒前以1:1体积/体积比例混合]使其显影。在EtOAc及10％MeOH内洗提的分馏液显示具有相同的TLC图形。收集这些分馏液，干燥然后溶解于最少量的MeOH内。藉由甲醇溶液内加入少量的CHCl3进行结晶化而产生被鉴定为862-II的无色非晶形粉末。
利用下列的操作环境根据862-II的HPLC进行萃出物RJM/0862/P08/A003的标准化：
管柱：RP-18e(E-Merck公司，5微米，4.6x250毫米)，于
流动相：乙腈(B)：水内的1.5％醋酸(A)；
流速：1毫升/分钟；
λmax：335奈米。
此化合物为根据NMR(1H和13C)及FABMS数据所确认的麦角甾苷。萃出物RJM/0862/P08/A003内862-II的百分率为0.22。
已发现熔点145～146℃，[α]21-85.6[C0.5％MeOH]，MS：FABMS，[M+Na]+m/z 647的862-II非晶形粉末为习知的苯丙醇，即毛蕊花糖苷(麦角甾苷)；[β-(3’，4’-二羟基苯基)乙基-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→3)-β-D-(4-O-咖啡醯基)-吡喃葡萄糖苷]。藉由1H和13C的核磁共振(NMR)最后已确认其构造类似已报告的文献(Andary C.，Wylde，R.，Laffite C.，Privat G.和Winternitz F.；Laboratie de Botanique etCryptogamie，Faculte de Pharmacie公司，34000 Montpellier法国；Phytochemistry，21(5)：1123～1127(1982)。
试验设计
1.动物：雌雄大白鼠(Albino rats)(韦斯研究所，150～180公克)及雌雄小白鼠(Albino mice)(瑞士，25～30公克)；
2.肝毒素：四氯化碳(CCl4)；
3.试验：预防；
4.治疗方法：投与毒素48、24、2小时之前及6小时之后；最后一投与测试/参考标准物质之后18小时采集血液和肝脏样本；
5.剂量：
麦角甾苷  经口投与0.625、1.25、2.5和5.0毫克/公斤
水飞蓟素  经口投与50毫克/公斤
甘草甜素  经口投与100毫克/公斤
四氯化碳  经口投与液态石蜡(1：1)1毫升/公斤
6.参数：
血清
胆红素Jendrassik法，利用供应自意大利Clonital公司24030-Carvico(BG)的套组
三酸甘油酯酵素GPO-POD法，利用供应自占那市Accurex生物医药公司的套组
白蛋白呈色BCG法，利用供应自占那市Accurex生物医药公司的套组
转化酶(ALT/AST)在和2，4-二硝基苯胼反应之后利用分光光度计测定藉由转胺反应产生的丙酮酸(Reitman和Frankel，1957)
ALP利用对硝基苯磷酸盐作为基质以分光光度计测定碱性介质内形成的对硝基苯酚(Waler和Schutt，1974)
肝脏均质物
GSH在脱蛋白化后利用和DTNB的反应进行测定(Ellman 1959经David 1987修订)
脂肪过氧化藉由Buege和Aust(1978)法在535奈米的分光光度计测定硫巴比妥酸反应物质
肝脏保护活性
藉由下式计算肝脏保护活性(H)：
H＝[1-(TC-V/VC-V)]x100
其中TC、VC和V分别为治疗动物的药物+毒素、赋形剂+毒素及赋形剂对照组。
上列详细说明是针对本发明的一可行实施例的具体说明，然而该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明技艺精神所为的等效实施或变更，例如：等变化的等效性实施例，均应包含于本案的专利范围中。
Figure C03826543D00151

Claims (11)

1.羽萼木植物分离具有高度肝脏保护作用的纯麦角甾苷的方法，该方法的步骤包括:
a.干燥植物的花茎叶；
b.将干燥部分磨成粉末；
c.利用水或乙醇将粉末浸提3～4次以获得萃出物；
d.过滤萃出物以清除悬浮颗粒而获得上清液；
e.约45至55℃下干燥上清液以获得残留物；
f.依续以氯仿、醋酸乙酯和丁醇分馏残留物；
g.将甲醇加入分馏液之后取丁醇分馏液进行SiO2的吸附层析；
h.将经吸附的分馏液置入玻璃管柱内；
i.以渐增极性的甲醇:氯仿的溶剂洗提管柱而获得进一步的分馏液并重复一次此步骤；
j.将此分馏液进行管柱层析而获得分馏液；
k.在减压下浓缩分馏液而获得麦角甾苷的残留物。
2.如权利要求1所述的方法，其中藉由此方法获得的麦角甾苷，在产生相同肝保护活性的条件下，其所需的肝保护活性剂量，相较于以水飞蓟素或甘草甜素所产生的肝保护活性剂量为1/12至1/25倍。
3.如权利要求1所述的方法，其中萃出物为水和酒精萃出物。
4.如权利要求1所述的方法，其中麦角甾苷占总萃出物约1.0％(重量)。
5.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可降低血清麸醯胺酸丙酮酸转化酶(GPT)的浓度的异常上升。
6如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可降低血清麸醯胺酸草酸转化酶(GOT)的浓度的异常上升。
7.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可降低血清碱性磷酸酶(ALP)的浓度的异常上升。
8.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可降低血清胆红素的浓度的异常上升。
9.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可降低血清三酸甘油酯(TG)的浓度的异常上升。
10.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可降低脂肪过氧化酶(LP)的浓度的异常上升。
11.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可增加白蛋白的浓度的异常降低。
12.如权利要求2所述的方法，其中麦角甾苷可增加还原型麸胺基硫(GSH)的浓度的异常降低。
CNB038265435A 2003-03-31 2003-03-31 植物性保肝剂及其制造方法 Expired - Fee Related CN100467033C (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IB2003/001180 WO2004087184A1 (en) 2003-03-31 2003-03-31 Isolation of the hepatoprotective agent acteoside from colerbrokea oppositifolia

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1771048A CN1771048A (zh) 2006-05-10
CN100467033C true CN100467033C (zh) 2009-03-11

Family

ID=33104924

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB038265435A Expired - Fee Related CN100467033C (zh) 2003-03-31 2003-03-31 植物性保肝剂及其制造方法

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP1617853B1 (zh)
JP (1) JP4486508B2 (zh)
CN (1) CN100467033C (zh)
AT (1) ATE376426T1 (zh)
AU (1) AU2003215819A1 (zh)
DE (1) DE60317111T2 (zh)
WO (1) WO2004087184A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109776631A (zh) * 2019-01-30 2019-05-21 中国人民解放军联勤保障部队第九二八医院 一种毛蕊花糖苷的制备方法
CN117205131B (zh) * 2023-11-09 2024-01-26 云南雅赫生物科技有限公司 具有美白和抗氧化作用的羽萼叶碱性水提物

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03271227A (ja) * 1990-03-20 1991-12-03 Tsumura & Co 糖尿病治療剤
ES2075437T3 (es) * 1991-03-21 1995-10-01 Dior Christian Parfums Nuevo derivado del acido cafeico, el oraposido, composicion cosmetica o farmaceutica, particularmente dermatologica que lo contiene.

Also Published As

Publication number Publication date
JP2006514675A (ja) 2006-05-11
EP1617853A1 (en) 2006-01-25
EP1617853B1 (en) 2007-10-24
ATE376426T1 (de) 2007-11-15
DE60317111D1 (de) 2007-12-06
AU2003215819A1 (en) 2004-10-25
DE60317111T2 (de) 2008-07-31
WO2004087184A1 (en) 2004-10-14
JP4486508B2 (ja) 2010-06-23
CN1771048A (zh) 2006-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6383526B1 (en) Process for the extraction of valerian root
US7491414B2 (en) Anti-inflammatory substances extracted from Echinacea
Hajhashemi et al. Analgesic and anti-inflammatory properties of the hydroalcoholic, polyphenolic and boiled extracts of Stachys lavandulifolia
CN102670631B (zh) 一种四楞麻总苯乙醇苷组合物、制备方法及应用
CN100467033C (zh) 植物性保肝剂及其制造方法
Ghalib et al. The investigation of some phytochemical compounds found in Anchusa strigosa L. grown naturally in Iraq
Shankar et al. Antidiabetic Activity of Novel Androstane Derivatives from Syzygium cuminii Linn.
CN108524668B (zh) 一种对药物性肝损伤具有修复和治疗作用的枸杞提取物的制备方法
JP2000503686A (ja) 黄栢皮とオミナエシ植物の混合抽出物を含有するｃ型肝炎治療用製薬組成物
Colombo et al. Phytochemical evaluation of Helleborus species growing in northern Italy
Kumar et al. A Textbook of Pharmacognosy and Phytochemistry
US6350478B1 (en) Artemisia judaica fractionation method
CN101032585A (zh) 治伤消瘀制剂及质量控制方法
EP1487847B1 (en) A simple process for obtaining beta-aescin from indian horse chestnut (aesculus indica)
AU654034B2 (en) Antineoplastic chemotherapeutic of plant origin, having high selectivity and greatly reduced toxicity, and process for the preparation thereof
CN103497229B (zh) 从地乌药材中同时制备地乌皂苷w1和w3的方法
Devi et al. Isolation and characterization of active components derived from whole plant of Saccharum spontaneum (Linn.)
CN112250655A (zh) 两种新的环状二苯基庚烷类化合物及其制备方法和用途
CN101912453B (zh) 一种具有抗炎镇痛作用的药物组合物及其制备方法和用途
CN108619179A (zh) 老鹳草提取物及其医药用途
CN102824391B (zh) 马兰在制备降血脂药物或功能性食品中的应用
US6989162B2 (en) Hepatoprotective agent of plant origin and a process thereof
CN110787196B (zh) 锡叶藤及其提取物在制备治疗和/或预防酒精性肝损伤药物方面的应用
Panyakom Structurl elucidation of bioactive compounds of clinacanthus nutans (BURM. F.) lindau leaves
CN102212002A (zh) 一种高纯度丹酚酸a的批量制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20090311

Termination date: 20200331