CN100334221C - 一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法 - Google Patents
一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN100334221C CN100334221C CNB2003101216024A CN200310121602A CN100334221C CN 100334221 C CN100334221 C CN 100334221C CN B2003101216024 A CNB2003101216024 A CN B2003101216024A CN 200310121602 A CN200310121602 A CN 200310121602A CN 100334221 C CN100334221 C CN 100334221C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- colourity
- reaction
- enzyme reaction
- cell enzyme
- direct method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。该生产方法按常规工艺将发酵液经预处理步骤后，送入反应釜冷却系统，降温，加丙烯腈和水进行反应，其中预处理步骤为除去杂质至色度为450以下。本发明的最主要的特色就体现在提前除去杂质：也就是将传统的丙烯酰胺水溶液后续除杂工艺提前至发酵液的预处理阶段，改为提前除杂。不仅整个细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法大为简化，从实验效果上有充分数据表明采用本发明还可节约成本，能耗降低，提高产品质量。
Description
技术领域
本发明涉及一种细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，尤其是一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。
背景技术
丙烯酰胺是一种重要的化工原料，它通常是在水溶液介质中反应生成的，并经过浓缩，结晶和干燥工序而制得其晶体产品。根据专利文献资料(CN86100062A)，申请人：日东化学工业株式会社的发明《利用微生物制备酰胺的方法》提示，利用腈水解酶和腈水化酶的自由细胞反应生成的丙烯酰胺水溶液。其操作方法总结如下：从微生物中选取菌株，培养发酵液，再从培养物(发酵液)中分离细胞或者固化细胞。经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液PH7.7清洗。然后加入一定量的丙烯腈(在0-30℃最适温度0-15℃，反应PH6-10，最适PH7-9，反应0.5-10小时条件下)水化反应成了丙烯酰胺水溶液，最后经过活性炭和离子交换柱过滤去除有色杂质，此工艺可取名为固定化方法。该工艺复杂，生产周期长，成本高，且对环境有一定的污染。
发明内容
本发明的目的在于提供一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，该生产方法工艺简单，生产周期短。
本发明的技术方案为：
一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，按常规工艺将发酵液经预处理步骤后，送入反应釜冷却系统，降温，加丙烯腈和水进行反应，其特征在于：预处理步骤为除去杂质至色度为450以下。
其中杂质为电解质，蛋白酶及固形物等，杂质存在的发酵液在直观上表现为有色的浑浊液。传统的发酵液的预处理是从发酵液中分离细胞或者固化细胞，经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液清洗，传统发酵液的预处理操作复杂，且预处理并不分离除去杂质，其杂质的除去在得到丙烯酰胺水溶液后再进行。除去杂质在实际生产中的质量控制上体现为色度的控制，也就是说，将溶液中的电解质，蛋白酶及固形物等杂质被部分或全部除去，杂质除去前后溶液的色度表现为下降的趋势。
本发明的最主要的特色就体现在提前除去杂质：也就是将传统的丙烯酰胺水溶液后续除杂工艺提前至发酵液的预处理阶段，改为提前除杂，可以完全省略“传统的发酵液的预处理从发酵液中分离细胞或者固化细胞，经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液清洗”的预处理操作，可以将除杂后的发酵液直接送入反应釜冷却系统，降温，加丙烯腈和水进行反应。不仅整个细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法大为简化，从实验效果上有充分数据表明采用本发明还可节约成本，能耗降低，提高产品质量。本发明的最主要的技术特征是控制预处理步骤中除去杂质至色度为450以下。当色度控制为450以下可以实现简化整个细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液工艺这一最基本的目的。
本发明的色度的评判标准为：
色度的标准溶液为称取重铬酸钾0.043克，硫酸钴1.000克置于500毫升容量瓶中，用100毫升水溶解后，加0.5毫升浓硫酸用水稀释至刻度，此标准溶液色度定为500。
取100毫升具塞比色管6支，分别加入色度为500的标准溶液0、2、4、6、8、10、20、40、60、80毫升，然后用水稀释至刻度，则各比色管分别为0、10、20、30、40、50、100、200、300、400度，盖上塞子。
待测溶液的色度，用目测测量。
AM代表丙烯酰胺，AN代表丙烯腈。
较优的技术方案有下列：
送入反应釜冷却系统，降温到15-25℃范围内。
预处理步骤具体采用膜分离的方式除去杂质。
预处理步骤具体采用膜分离的方式除去杂质，选用膜分离的截留孔径参数为5-20万分子量。
预处理步骤为将发酵液经离心机浓缩为20-60％；再经膜分离，除去杂质，送入反应釜冷却系统，降温到8-37℃范围内，加丙烯腈和水进行反应，直到丙烯酰胺浓度为20-45％时，反应终止。
预处理步骤为将发酵液经离心机浓缩为40-50％；再经膜过滤，除去杂质，送入反应釜冷却系统，降温到10-25℃范围内，加丙烯腈和水进行反应，直到丙烯酰胺浓度为28-35％时，反应终止。
预处理步骤具体采用离心分离的方式除去杂质。
预处理步骤具体采用离心分离和膜分离联用的方式除去杂质。
预处理步骤为除去杂质至色度为350以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为300以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为250以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为130以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为80以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为50以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为20以下。
预处理步骤为除去杂质至色度为5以下。
本发明的优点在于：提供了一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，其主要工艺为经离心、膜过滤等方式除去杂质步骤的发酵液，未经固化直接投入到反应釜中，和丙烯腈、水反应最终得到丙烯酰胺水溶液产品，本发明具有工艺简单、操作便利、投资少、成本低且产品纯度高、质量优等特点。
具体实施方式
以下所有实施例的生物发酵液可以按CN86100062A提供的方法得到。
实施例1
取75ml生物发酵液，经离心机分离，参数为7000rpm，控制色度为25以下，去除上清液，把沉降物投入反应器，再加入去离子水至725ml，调节反应体系的PH值于6-8，温度控制在15℃，加入300ml化学纯丙烯腈进行反应240分钟后，让反应液迅速进行膜过滤，取滤清液测得：AM％为32.1％(质量比值)，AN％为1.1％(质量比)，电导率为1220μs/cm，色度为15，PH值为6.8。其余同常规的细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，例如可以采用CN86100062A提供的常规的细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。
实施例2
取75ml生物发酵液经膜分离，选用膜分离的截留孔径参数为6万分子量，控制色度为15以下，重相投入反应器，加入去离子水至725ml，调节PH值于6-8，反应体系温度控制在25℃，加300ml化学纯丙烯腈进行反应，反应240分钟后，让反应液迅速经过膜过滤，取滤清液测得：AM％为33％(质量比)，AN％为0.12％(质量比)；电导率为500μs/cm，色度为10，PH值为7.1。其余同常规的细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，例如可以采用CN86100062A提供的常规的细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。
实施例3
取75ml生物发酵液依次经离心机离心，参数为8000rpm，沉降物经膜过滤，选用膜分离的截留孔径参数为5万分子量，控制色度为5，取重相投入反应器，加入去离子水至725ml，调节PH值于6-8，环境温度控制在18℃，加入300ml化学纯丙烯腈进行水合反应，反应240分钟后，让该反应液迅速经过膜过滤，取滤清液测得：AM％为33％(质量比)，AN％未测出，电导率283μs/cm，色度为5，PH值为7.5。其余同常规的细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，例如可以采用CN86100062A提供的常规的细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。
实施例4
传统固定化细胞酶工艺与本发明的直接法细胞酶工艺的比较：
(1)从微生物中选取菌株，培养发酵液，再从培养物(发酵液)中分离细胞或者固化细胞。经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液PH7.7清洗。然后加入一定量的丙烯腈，在12℃，反应PH＝8，反应10小时条件下，水化反应成了丙烯酰胺水溶液，最后经过活性炭和离子交换柱过滤去除有色杂质，此工艺为传统固定化细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。未经除杂的发酵液的起始色度为530。
(2)具体采用实施例1、2、3或类似方法提供的直接法细胞酶工艺，采用CN86100062A传统固定化细胞酶工艺。未经除杂的发酵液的起始色度为530。
所测数据为两种工艺最终得到丙烯酰胺水溶液产品的理化数据。经多组的对比实验数据统计后如下：
| 项目 | 固定化细胞酶工艺 | 直接法细胞酶工艺 |
| AM％浓度 | 20-25 | 28-35 |
| 电导率(μs/cm) | 1200 | 300 |
| 杂质(μg/ml) | 50 | 5 |
| 色度(hazen) | 15-20 | 5-15 |
| 反应时间(min) | 600 | 240 |
| 生产周期(h) | 30-40 | 2.5-6 |
传统固定化细胞酶工艺与本发明的直接法细胞酶工艺的比较，直接法得到的丙烯酰胺水溶液产品的电导率更低，表明电解质杂质含量更低；色度更低，表明有色杂质含量更低，有色蛋白类杂质去除更完全；而AM％浓度提高，证明产品的回收率更高，而反应时间、生产周期缩短证明直接法的工艺简单、操作更便利、投资少、成本低且产品纯度更高、质量更优。
两种操作方法相比较，固定化细胞酶工艺流程存在如下缺点：
1、从发酵至水合反应的工序多、时间长、增加了能耗，制约着产量。
2、发酵液经固化后，减少了酶细胞的活性，反应丙烯酰胺(AM)浓度为20-25％。
3、反应液中增加了杂质离子和其他固形物，给过滤工序增加了困难。
4、活性炭过滤只能除去发酵液中的菌丝体及发酵固化残渣等固体杂质，不能去除发酵液中的大分子杂质和可溶性蛋白，滤液质量无法保证后期产品质量的稳定。
5、过滤时滤渣带走的产物较多，过滤收率受到影响。
6、反应液的电导率偏高，精制负荷增大，交换树脂用量增加，再生频率加快，收率减少，电导率平均为1200μs/cm左右。
7、固化液和精制再生的酸碱废液的处理费用大。
通过研究、实验发现，本发明的非固化工艺流程有如下优点：
1直接以浓缩纯化后的自由细胞酶投入反应釜进行丙烯腈的水合反应，免去了发酵液的后处理工艺，既避免了发酵液的酶活性的损失，又减少处理液对环境的污染。
2生产AM水剂的总体反应时间大大缩短。将从600min/釜减少到240min/釜，AM水剂的能力大大提高。
3反应后的AM水剂电导率明显降低约400μs/cm左右，大幅度节约了精制交换树脂的用量和酸、碱、去离子水的用量。
4反应物浓度可达到30-35％，比固定化工艺提高至少5个百分点。
5对非固化细胞反应液进行膜滤后，可将粘液中的大分子有机物蛋白酶及其他固形物去除，由于滤液质量的提高对于后工艺收率的提高及结晶步骤的提高更为显著，产品质量将大幅度提高。
6使用寿命较长，再生清洗方便。
7产品质量高，生产费用低，能耗大幅度减少。
本发明的目的就在于克服上述现有工艺技术中的不足之处，提供一种更简单、操作便利、设备投资少、生产成本及能耗低的工艺技术。本工艺大大降低了环境污染程度，提高了生产能力，节约了人力、物力。产品品质有质的飞跃。
实施例5
从微生物中选取菌株，培养发酵液，再从培养物(发酵液)中分离细胞或者固化细胞。经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液PH7.7清洗。然后加入一定量的丙烯腈(在0-30℃最适温度0-15℃，反应PH6-10，最适PH7-9，反应0.5-10小时条件下)水化反应成了丙烯酰胺水溶液，最后经过活性炭和离子交换柱过滤去除有色杂质，此工艺为传统固定化细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。
实施例6
(1)从微生物中选取菌株，培养发酵液，再从培养物(发酵液)中分离细胞或者固化细胞。经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液PH7.7清洗。然后加入一定量的丙烯腈，在12℃，反应PH＝7，反应10小时条件下，水化反应成了丙烯酰胺水溶液，最后经过活性炭和离子交换柱过滤去除有色杂质，此工艺为传统固定化细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。未经除杂的发酵液的起始色度为550。
(2)从微生物中选取菌株，培养发酵液，未经除杂的发酵液的起始色度为550，经过膜过滤去除杂质至色度为450以下，选用膜分离的截留孔径参数为20万分子量，直接投入到反应釜中，加入一定量的丙烯腈和水在冷却系统中控制温度15℃，调节PH值7，反应时间在5小时，腈化物控制不超过3％(重量比)最佳，再经膜过滤后最终得到丙烯酰胺水溶液产品
| 项目 | 固定化细胞酶工艺 | 直接法细胞酶工艺 |
| AM％浓度 | 20-25 | 25-28 |
| 电导率(μs/cm) | 1233 | 1082 |
| 杂质(μg/ml) | 50 | 14 |
| 色度(hazen) | 15-20 | 5-15 |
| 反应时间(min) | 600 | 300 |
| 生产周期(h) | 30-40 | 2.5-6 |
最后得到丙烯酰胺水溶液产品的电解质电导率相比：直接法比固定化法略有下降，另外直接法虽然只除去了少量有色杂质，例如色度只从530下降为400但相比固定化法，只除去了少量有色和电解质杂质的直接法所得的最终得到丙烯酰胺水溶液产品的质量都已经优于固定化法，且反应时间也缩短，成本更低。
实施例7
从微生物中选取菌株，培养发酵液，经过膜过滤去除杂质至色度为50以下，直接投入到反应釜中，加入一定量的丙烯腈和水在冷却系统中控制温度10℃，调节PH值6，反应时间在2.5小时，腈化物控制不超过3％(重量比)最佳，再经膜过滤后最终得到丙烯酰胺水溶液产品。
实施例8
(1)从微生物中选取菌株，培养发酵液，再从培养物(发酵液)中分离细胞或者固化细胞。经过增强粘度，空气造粒，再和盐水交换固定成型，再用盐水缓冲液PH7.7清洗。然后加入一定量的丙烯腈，在12℃，反应PH＝7，反应10小时条件下，水化反应成了丙烯酰胺水溶液，最后经过活性炭和离子交换柱过滤去除有色杂质，此工艺为传统固定化细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法。未经除杂的发酵液的起始色度为480。
(2)从微生物中选取菌株，培养发酵液，未经除杂的发酵液的起始色度为480，经过膜过滤去除杂质至色度为400以下，选用膜分离的截留孔径参数为18万分子量，直接投入到反应釜中，加入一定量的丙烯腈和水在冷却系统中控制温度15℃，调节PH值7，反应时间在4小时，腈化物控制不超过3％(重量比)最佳，再经膜过滤后最终得到丙烯酰胺水溶液产品。
| 项目 | 固定化细胞酶工艺 | 直接法细胞酶工艺 |
| AM％浓度 | 20-25 | 28-35 |
| 电导率(μs/cm) | 1241 | 1056 |
| 杂质(μg/ml) | 50 | 17 |
| 色度(hazen) | 15-20 | 5-15 |
| 反应时间(min) | 600 | 240 |
| 生产周期(h) | 30-40 | 2.5-6 |
实施例9
调节反应体系的PH值于7，温度控制在20℃，其余同实施例2。
实施例10
调节反应体系的PH值于8，温度控制在22℃，其余同实施例1。
实施例11
去除杂质至色度为400以下，其余同实施例7。
实施例12
去除杂质至色度为350以下，其余同实施例7。
实施例13
去除杂质至色度为250以下，其余同实施例8。
实施例14
去除杂质至色度为130以下，其余同实施例7。
实施例15
去除杂质至色度为80以下，其余同实施例7。
实施例16
去除杂质至色度为50以下，其余同实施例7。
实施例17
去除杂质至色度为20以下，其余同实施例8。
实施例18
去除杂质至色度为5以下，其余同实施例7。
实施例19
选用膜分离的截留孔径参数为9万分子量，其余同实施例2。
实施例20
选用膜分离的截留孔径参数为10万分子量，其余同实施例2。
实施例21
选用膜分离的截留孔径参数为12万分子量，其余同实施例2。
实施例22
选用膜分离的截留孔径参数为16万分子量，其余同实施例2。
实施例23
高速离心过滤7000-50000rpm。其余同实施例1。
实施例24
高速离心过滤12000rpm。其余同实施例1。
实施例25
高速离心过滤30000rpm。其余同实施例3。
实施例26
其中杂质为电解质，蛋白酶及固形物，其余同实施例3。
Claims (4)
1、一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，预处理步骤为将发酵液经离心机浓缩为20-60％；其特征在于：再经膜分离，除去杂质至色度为450以下，且最低色度为5，送入反应釜冷却系统，降温到8-37℃范围内，加丙烯腈和水进行反应，直到丙烯酰胺浓度为20-45％时，反应终止。
2、根据权利要求1所述的一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，其特征在于：送入反应釜冷却系统，降温到15-25℃范围内。
3、根据权利要求1所述的一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，其特征在于：选用膜分离的截留孔径参数为5-20万分子量。
4、根据权利要求1所述的一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法，其特征在于：除去杂质至色度为80以下。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2003101216024A CN100334221C (zh) | 2003-12-31 | 2003-12-31 | 一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2003101216024A CN100334221C (zh) | 2003-12-31 | 2003-12-31 | 一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1635130A CN1635130A (zh) | 2005-07-06 |
| CN100334221C true CN100334221C (zh) | 2007-08-29 |
Family
ID=34844225
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2003101216024A Expired - Fee Related CN100334221C (zh) | 2003-12-31 | 2003-12-31 | 一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100334221C (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102557978B (zh) * | 2011-12-23 | 2014-11-05 | 山东宝莫生物化工股份有限公司 | 一种丙烯酰胺精制方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN86100062A (zh) * | 1985-01-08 | 1986-10-01 | 日东化学工业株式会社 | 利用微生物制备酰胺的方法 |
| CN1154360A (zh) * | 1995-11-01 | 1997-07-16 | 三菱化学株式会社 | 一种生产丙烯酰胺的方法 |
| CN1227221A (zh) * | 1998-12-24 | 1999-09-01 | 江西农科化工有限公司 | 一种丙烯酰胺晶体的制造方法 |
-
2003
- 2003-12-31 CN CNB2003101216024A patent/CN100334221C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN86100062A (zh) * | 1985-01-08 | 1986-10-01 | 日东化学工业株式会社 | 利用微生物制备酰胺的方法 |
| CN1154360A (zh) * | 1995-11-01 | 1997-07-16 | 三菱化学株式会社 | 一种生产丙烯酰胺的方法 |
| CN1227221A (zh) * | 1998-12-24 | 1999-09-01 | 江西农科化工有限公司 | 一种丙烯酰胺晶体的制造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1635130A (zh) | 2005-07-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109134594B (zh) | 一种酶法制备谷胱甘肽的方法 | |
| US20110065152A1 (en) | Process for production of galactooligosaccharides (gos) | |
| CN102703535B (zh) | 一种利用陶瓷膜生物反应器生产丙烯酰胺的新工艺 | |
| EP3533862B1 (en) | Methylopila sp. and use thereof in selective resolution and preparation of (s)-alpha-ethyl-2-oxo-1 -pyrrolidine acetate | |
| CN100334221C (zh) | 一种直接法细胞酶反应生产丙烯酰胺水溶液的方法 | |
| US4081327A (en) | Preparation of d-fructose | |
| CN115772549A (zh) | 一种从发酵液中提取含痕量烟酸的烟酰胺制备方法 | |
| CN106148319B (zh) | 基于反应吸附法制备固定化酶的方法 | |
| CN1524961A (zh) | 微生物连续催化法生产丙烯酰胺 | |
| CN1238514C (zh) | 一种应用膜技术的微生物转化生产丙烯酰胺的方法 | |
| CN113774104A (zh) | 一种利用硫酸软骨素废水制备蛋白胨及生物有机肥的方法 | |
| CN1059700C (zh) | Ｌ－苹果酸高产突变株曲霉ｎ１－１４'及生产ｌ－苹果酸的方法 | |
| CN1124349C (zh) | 酵母细胞转化葡萄糖制备阿拉伯糖醇的方法 | |
| CN109321613B (zh) | 一种生产d-甘露糖的方法 | |
| CN1690215A (zh) | 一种利用游离细胞微生物制备丙烯酰胺的方法 | |
| JP2798886B2 (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製造方法 | |
| CN111808895A (zh) | 一种利用甘薯制备味精的发酵方法及装置 | |
| CN117384222B (zh) | 一种从发酵液中分离纯化核苷酸的方法 | |
| CN115583892B (zh) | 一种高品质β-丙氨酸的制备方法及杂质的去除方法 | |
| CN113913416B (zh) | 一种粪产碱杆菌青霉素g酰化酶的制备工艺 | |
| CN112626141B (zh) | 一种丙烯酰胺溶液的生产方法 | |
| CN102390906B (zh) | 一种赖氨酸发酵废水的处理方法和发酵制柠檬酸的方法 | |
| US4927757A (en) | Production of substantially pure fructose | |
| CN116926138A (zh) | 一种基于微生物法可控速率式生产丙烯酰胺的工艺 | |
| CN101270378A (zh) | 米格列醇中间体n-取代-1-脱氧野尻霉素衍生物的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20070829 Termination date: 20121231 |