CH719662A1 - Complete extraction procedure of the bioactive components from propolis in a solution of water and honey, with antibacterial properties. - Google Patents

Complete extraction procedure of the bioactive components from propolis in a solution of water and honey, with antibacterial properties. Download PDF

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CH719662A1
CH719662A1 CH000523/2022A CH5232022A CH719662A1 CH 719662 A1 CH719662 A1 CH 719662A1 CH 000523/2022 A CH000523/2022 A CH 000523/2022A CH 5232022 A CH5232022 A CH 5232022A CH 719662 A1 CH719662 A1 CH 719662A1
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Abstract

L'invenzione riguarda un procedimento per l'estrazione completa di sostanze bioattive dalla propoli, solubilizzata in una soluzione di acqua e miele, con proprietà antibatteriche e minimizzazione dell'estrazione di componenti terapeuticamente inerti, come cera e grassi.The invention concerns a process for the complete extraction of bioactive substances from propolis, solubilized in a solution of water and honey, with antibacterial properties and minimization of the extraction of therapeutically inert components, such as wax and fats.

Description

OggettoObject

[0001] L'invenzione riguarda un procedimento per l'estrazione completa di sostanze bioattive dalla propoli, solubilizzata in una soluzione di acqua e miele, con proprietà antibatteriche. [0001] The invention concerns a process for the complete extraction of bioactive substances from propolis, solubilized in a solution of water and honey, with antibacterial properties.

[0002] Il processo prevede anche la minimizzazione dell'estrazione di componenti terapeuticamente inerti, come cera e grassi e l'ottenimento di una soluzione omogenea standardizzata dal gusto dolce aromatico che conserva il colore della propoli grezza, rispettivamente giallo-rossastro, giallo-bruno, giallo-verde, ecc., con maggiore bioammissibilità e attività antibatterica. [0002] The process also involves minimizing the extraction of therapeutically inert components, such as wax and fats and obtaining a standardized homogeneous solution with a sweet aromatic taste which preserves the color of the raw propolis, respectively yellow-reddish, yellow-brown , yellow-green, etc., with increased bioadmissibility and antibacterial activity.

[0003] I prodotti delle api sono un'importante fonte di nutrienti e fitonutrienti per la salute umana. I prodotti delle api sono stati utilizzati fin dall'antichità sia come alimento, soprattutto per il gusto aromatico, ma anche per azione terapeutica. Negli ultimi anni, le metodologie di analisi sviluppate, così come la ricerca e la sperimentazione clinica con i prodotti delle api, sono riuscite ad identificare le principali sostanze responsabili della loro azione terapeutica. In generale, la combinazione di enzimi, composti flavonoidi, vitamine, minerali nei prodotti delle api è importante per la salute umana, ma anche per le api. [0003] Bee products are an important source of nutrients and phytonutrients for human health. Bee products have been used since ancient times both as food, especially for their aromatic taste, but also for therapeutic action. In recent years, the analytical methodologies developed, as well as research and clinical trials with bee products, have managed to identify the main substances responsible for their therapeutic action. In general, the combination of enzymes, flavonoid compounds, vitamins, minerals in bee products is important for human health, but also for bees.

[0004] Il miele è il prodotto principale dell'alveare. I tipi di miele sono classificati in base all'origine vegetale da cui le api raccolgono il nettare. I tipi di miele si dividono in base alla loro origine in miele unifloreale, polifloreale e miele di melata. Il liquido secreto dagli afidi sulla superficie di foglie, rami, aghi di abete viene raccolto dalle api, quindi lavorato allo stesso modo del nettare floreale, ottenendo miele di melata. [0004] Honey is the main product of the hive. Types of honey are classified based on the plant origin from which the bees collect the nectar. The types of honey are divided according to their origin into single-floral honey, polyfloral honey and honeydew honey. The liquid secreted by aphids on the surface of leaves, branches, fir needles is collected by bees, then processed in the same way as floral nectar, obtaining honeydew honey.

[0005] Il miele ha una composizione chimica complessa, costituita da zuccheri, fermenti, sali minerali e vitamine. [0005] Honey has a complex chemical composition, made up of sugars, ferments, mineral salts and vitamins.

[0006] I fermenti o enzimi dal miele sono macromolecole di origine proteica con il ruolo di biocatalizzatori, con l'aiuto delle quali le cellule viventi possono svolgere reazioni complesse in breve tempo, a temperatura ambiente. [0006] Ferments or enzymes from honey are macromolecules of protein origin with the role of biocatalysts, with the help of which living cells can carry out complex reactions in a short time, at room temperature.

[0007] La propoli grezza ha uno dei valori più importanti di tutti i prodotti dell'alveare grazie al suo potenziale utilizzo in apiterapia e ai benefici per la salute dei consumatori. La propoli è considerata un prodotto antibiotico naturale. Numerosi sono gli studi scientifici che hanno dimostrato il carattere antibatterico della propoli grezza su vari ceppi di batteri, compresi i batteri resistenti agli antibiotici. Oltre alle sue capacità antibatteriche, la propoli grezza ha proprietà antivirale, antimicotico, antinfiammatorio, antiossidante. La propoli è uno strumento per le api per proteggersi dai microrganismi. È la loro medicina miracolosa. La propoli è una fantastica miscela di resina degli alberi e secrezioni dalle api, una combinazione che dà origine ad un antibiotico naturale. Le api raccolgono la resina principalmente dai germogli di varie piante. Lo fanno nelle ore più calde della giornata, quando la resina è morbida. La resina lo mescola con le secrezioni della ghiandola mandibolare e lo riportano nell'alveare come se fosse un carico di polline. Si presume generalmente che solo un piccolo gruppo di api sia specializzato nella raccolta di propoli. La propoli è morbida e appiccicosa a temperature normali nell'alveare. A temperature più basse, diventa dura e fragile. L'origine della propoli si divide in tre tipi: [0007] Raw propolis has one of the most important values of all hive products due to its potential use in apitherapy and health benefits for consumers. Propolis is considered a natural antibiotic product. There are numerous scientific studies that have demonstrated the antibacterial character of raw propolis on various strains of bacteria, including antibiotic-resistant bacteria. In addition to its antibacterial capabilities, raw propolis has antiviral, antifungal, anti-inflammatory, antioxidant properties. Propolis is a tool for bees to protect themselves from microorganisms. It's their miracle medicine. Propolis is a fantastic blend of tree resin and bee secretions, a combination that creates a natural antibiotic. Bees collect resin mainly from the shoots of various plants. They do this in the hottest hours of the day, when the resin is soft. The resin mixes it with the mandibular gland secretions and carries it back into the hive as if it were a load of pollen. It is generally assumed that only a small group of bees specialize in collecting propolis. Propolis is soft and sticky at normal temperatures in the hive. At lower temperatures, it becomes hard and brittle. The origin of propolis is divided into three types:

[0008] A causa della sua origine biologica, la propoli ha un odore e un sapore specifico di resine e balsami. Contiene sostanze bioattive solubili in acqua, alcol e grassi. Generalmente per l'estrazione vengono utilizzati solventi organici come ad esempio acetone, etanolo, metanolo, etere, ecc. La propoli cruda ha un contenuto di cera che varia molto, essendo il principale componente della propoli 10-55%. Tuttavia, la cera non ha proprietà terapeutiche. Oltre alla cera, la propoli cruda contiene resine vegetali, balsamo di varie composizioni, flavonoidi, derivati flavonoidi, oli essenziali, amminoacidi, fermenti, ferro, microelementi - rame, zinco, manganese, cobalto, ai quali si aggiungono polline e secrezioni delle ghiandole salivari delle api. Il peso specifico è di 1,112 -1,136 g/cm<3>. Il punto di fusione è tra 70 - 120°C. Alla temperatura di 37°C si ammorbidisce e alle basse temperature è fragile. [0008] Due to its biological origin, propolis has a specific odor and flavor of resins and balms. Contains bioactive substances soluble in water, alcohol and fat. Generally organic solvents such as acetone, ethanol, methanol, ether, etc. are used for extraction. Raw propolis has a wax content that varies greatly, the main component of propolis being 10-55%. However, the wax has no therapeutic properties. In addition to wax, raw propolis contains plant resins, balm of various compositions, flavonoids, flavonoid derivatives, essential oils, amino acids, ferments, iron, microelements - copper, zinc, manganese, cobalt, to which pollen and salivary gland secretions are added of bees. The specific weight is 1.112 -1.136 g/cm<3>. The melting point is between 70 - 120°C. At a temperature of 37°C it softens and at low temperatures it is fragile.

[0009] Il crescente interesse per la propoli proviene dai servizi medici e dai campi della medicina alternativa, sensibilizzando sulle sue proprietà terapeutiche. Questi sono considerati i principali driver per il mercato della propoli. Questi portano alla necessità di innovare gli attuali processi di estrazione, al fine di avere prodotti a base di propoli di qualità superiore, il più sicuri possibile per il consumo umano e il più conveniente possibile dal punto di vista economico. [0009] The growing interest in propolis comes from medical services and alternative medicine fields, raising awareness of its therapeutic properties. These are considered to be the main drivers for the propolis market. These lead to the need to innovate current extraction processes, in order to have propolis-based products of superior quality, as safe as possible for human consumption and as convenient as possible from an economic point of view.

[0010] Gli estratti di propoli hanno diversi usi, essendo utilizzati in campo medico, alimentare e cosmetico, sia per l'uomo che per gli animali. [0010] Propolis extracts have various uses, being used in the medical, food and cosmetic fields, both for humans and animals.

[0011] La propoli grezza può essere utilizzata tal quale come una gomma da masticare perché è stato riscontrato che la saliva è una delle poche soluzioni che ha la capacità di dissolvere e solubilizzare delle sostanze terapeutiche della propoli. Ciò è dovuto agli enzimi secreti nella saliva. [0011] Raw propolis can be used as is as a chewing gum because it has been found that saliva is one of the few solutions that has the ability to dissolve and solubilize the therapeutic substances of propolis. This is due to enzymes secreted in saliva.

Esposizione dell'invenzione:Exposition of the invention:

Stato della tecnicaState of the art

[0012] Attualmente l'estratto di propoli più diffuso è quello in alcol etilico, chiamato tintura di propoli. Altri estratti di propoli: estratto di glicerolo - propoli in glicerina, estratto di propoli glicole- in glicole propilenico, estratto di olio di propoli- in olio, estratto di propoli molle - in alcool, estratto acquoso di propoli, estratto di propoli in polvere con vari eccipienti. Questi estratti sono generalmente ottenuti dalla classica tintura di propoli con piccole variazioni del processo di macerazione. [0012] Currently the most widespread propolis extract is the one in ethyl alcohol, called propolis tincture. Other propolis extracts: glycerol extract - propolis in glycerin, propolis glycol extract - in propylene glycol, propolis oil extract - in oil, soft propolis extract - in alcohol, aqueous propolis extract, powdered propolis extract with various excipients. These extracts are generally obtained from the classic propolis tincture with small variations in the maceration process.

[0013] Gli estratti di propoli ottenuti con CO2utilizzano la tecnologia di estrazione con CO2 supercritica ma questa, anche se ha un'elevata efficienza di estrazione, è una tecnologia costosa e questi estratti hanno un prezzo molto alto. Alcuni esempi di processi che utilizzano questa tecnologia sono presentati anche nei brevetti: CN108210557B, CN107961356A, JP2001161290A, JP2001149027A. [0013] Propolis extracts obtained with CO2 use supercritical CO2 extraction technology but this, although it has a high extraction efficiency, is an expensive technology and these extracts have a very high price. Some examples of processes using this technology are also presented in the patents: CN108210557B, CN107961356A, JP2001161290A, JP2001149027A.

[0014] Gli estratti alcolici di propoli di tipo tintura presentano lo svantaggio della grande quantità di alcol etilico contenuto, essendo difficili da somministrare a bambini, anziani e persone allergiche all'alcol. Oltre a questo aspetto, gli estratti alcolici hanno un contenuto di cera del 10-20% che macchia sia la pelle per uso esterno che i denti per uso orale creando disagio all'utilizzatore. [0014] Tincture-type alcoholic extracts of propolis have the disadvantage of the large quantity of ethyl alcohol contained, being difficult to administer to children, the elderly and people allergic to alcohol. In addition to this aspect, alcoholic extracts have a wax content of 10-20% which stains both the skin for external use and the teeth for oral use, creating discomfort for the user.

[0015] Il brevetto CN102224892A relativo al processo di estrazione della propoli descrive un metodo classico di estrazione della propoli, il metodo utilizzato per ottenere la tintura di propoli, in cui si utilizza l'estrazione con etanolo. L'invenzione prevede l'evaporazione dell'alcol, ottenendo una pasta di propoli caratterizzata come estratto di propoli purificato. Tuttavia, questa pasta è solubile solo in solventi organici (es. metanolo, etanolo, acetone, etere, ecc.) e non può essere utilizzata in soluzione acquosa; non può essere consumato tal quale, essendo una massa appiccicosa di estratto di propoli difficile da maneggiare. [0015] Patent CN102224892A relating to the propolis extraction process describes a classic method of propolis extraction, the method used to obtain propolis tincture, in which ethanol extraction is used. The invention involves the evaporation of alcohol, obtaining a propolis paste characterized as purified propolis extract. However, this paste is only soluble in organic solvents (e.g. methanol, ethanol, acetone, ether, etc.) and cannot be used in aqueous solution; it cannot be consumed as it is, being a sticky mass of propolis extract that is difficult to handle.

[0016] Il processo di estrazione presentato nel brevetto RO128363A2 riferito ad un estratto di propoli in soluzione acquosa, prevede l'ottenimento di un estratto acquoso di propoli che non è effettivamente solubilizzato nella soluzione acquosa ma l'estratto è in forma di dispersione finissima, con astringente amaro gusto che non piace ai consumatori, soprattutto ai bambini. [0016] The extraction process presented in patent RO128363A2 referring to a propolis extract in aqueous solution, involves obtaining an aqueous propolis extract which is not actually solubilized in the aqueous solution but the extract is in the form of a very fine dispersion, with an astringent bitter taste that is not liked by consumers, especially children.

[0017] L'ottenimento di un estratto di propoli solubile in acqua è descritto nel brevetto JPH08214797A. Il processo prevede l'idratazione o „ammollo“ della propoli grezza in etanolo o etanolo idratato seguito da un'estrazione con acqua, filtrazione e una concentrazione dell'estratto contenente solo i componenti idrosolubili della propoli grezza, fino ad ottenere una polvere di propoli o una polvere di propoli a base di lattosio/destrine. Si dice che l'etanolo o etanolo idrato utilizzato nella fase di idratazione contiene componenti solubili in alcol e questi, considerati estratti alcolici o tintura di propoli, possono essere utilizzati separatamente. Dagli esempi riportati si osserva una bassa resa di estrazione per cui l'estratto anche se solubile in acqua non è un estratto totale dei componenti bioattivi dalla propoli grezza. [0017] Obtaining a water-soluble propolis extract is described in patent JPH08214797A. The process involves hydrating or "soaking" the raw propolis in ethanol or hydrated ethanol followed by an extraction with water, filtration and a concentration of the extract containing only the water-soluble components of the raw propolis, until a propolis powder or a lactose/dextrin based propolis powder. Ethanol or hydrated ethanol used in the hydration phase is said to contain alcohol-soluble components and these, considered alcoholic extracts or propolis tincture, can be used separately. From the examples given, a low extraction yield is observed, so the extract, even if soluble in water, is not a total extract of the bioactive components from the raw propolis.

ObiettivoObjective

[0018] Il problema risolto dall'invenzione è garantire le condizioni e i parametri del processo di estrazione per l'estrazione completa dei componenti pregiati della propoli che consentano l'uso del miele come idrotropo per solubilizzare i componenti bioattivi della propoli grezza in soluzione acquosa di miele. [0018] The problem solved by the invention is to guarantee the conditions and parameters of the extraction process for the complete extraction of the valuable components of propolis which allow the use of honey as a hydrotrope to solubilize the bioactive components of raw propolis in aqueous solution of honey.

SoluzioneSolution

[0019] Il processo di estrazione completa dei componenti bioattivi dalla propoli elimina gli svantaggi sopra menzionati per il fatto che si compone delle seguenti fasi in ordine successivo: – condizionamento della propoli grezza che prevede la rimozione dei corpi estranei, il congelamento a temperature comprese tra -1 e -25 gradi C per 5 – 72 ore e la macinazione fino a una granulazione inferiore a 100 micron; – macerazione della propoli macinata in soluzione acqua-miele seguita da successive macerazioni in soluzione di miele più soluzione idroalcolica, in recipiente di acciaio inox con agitatore e riscaldamento a camicia a pressioni comprese tra 1 Bar e 20 Bar, a temperature comprese tra 10 e 42 gradi Celsius e tempi tra 60 minuti e 21 giorni; – successive filtrazioni attraverso filtri di 2-30 micron dopo ogni processo di macerazione; – concentrazione delle soluzioni ottenute dalla filtrazione mediante lavorazione in concentratore/evaporatore sotto vuoto ad una temperatura compresa tra 10 e 42 gradi C per l'eliminazione dell'alcol e la concentrazione dell'estratto; – la standardizzazione ad una concentrazione netta standard di polifenoli/flavonoidi dell'estratto totale di propoli in soluzione di acqua e miele con proprietà antibatteriche, avviene mediante aggiunta di acqua distillata/demineralizzata e miele mediante miscelazione continua a 100-1000 rotazioni al minuto per 5-10 minuti.[0019] The process of complete extraction of the bioactive components from propolis eliminates the disadvantages mentioned above due to the fact that it is made up of the following phases in successive order: – conditioning of the raw propolis which involves the removal of foreign bodies, freezing at temperatures between -1 and -25 degrees C for 5 – 72 hours and grinding to a granulation of less than 100 microns; – maceration of ground propolis in water-honey solution followed by subsequent macerations in honey solution plus hydroalcoholic solution, in a stainless steel container with stirrer and jacket heating at pressures between 1 Bar and 20 Bar, at temperatures between 10 and 42 degrees Celsius and times between 60 minutes and 21 days; – subsequent filtrations through 2-30 micron filters after each maceration process; – concentration of the solutions obtained from filtration by processing in a vacuum concentrator/evaporator at a temperature between 10 and 42 degrees C for the elimination of alcohol and the concentration of the extract; – the standardization to a standard net concentration of polyphenols/flavonoids of the total propolis extract in a solution of water and honey with antibacterial properties, occurs by adding distilled/demineralized water and honey by continuous mixing at 100-1000 rotations per minute for 5 -10 minutes.

VantaggiAdvantages

[0020] Applicando l'invenzione si ottengono i seguenti vantaggi: [0020] By applying the invention the following advantages are obtained:

Realizzazione dell'invenzione Realization of the invention

[0021] La propoli grezza è sottoposta all'operazione di condizionamento che prevede: – rimozione di corpi estranei – congelamento a una temperatura di -1 ...- 25°C per 5 ... 72 ore, – macinazione fino ad una granulazione inferiore a 100 micron;[0021] The raw propolis is subjected to the conditioning operation which involves: – removal of foreign bodies – freezing at a temperature of -1 ...- 25°C for 5 ... 72 hours, – grinding until granulation less than 100 microns;

[0022] La propoli macinata viene sottoposta a successive macerazioni, in recipiente a pressione di acciaio inossidabile, con agitatore e riscaldamento a camicia, ad una pressione specifica nell'intervallo 1 Bar...20 Bar, ad una temperatura specifica nell'intervallo 10...42°C in un intervallo di tempo da 60 minuti a 21 giorni. [0022] The ground propolis is subjected to successive macerations, in a stainless steel pressure vessel, with a stirrer and jacket heating, at a specific pressure in the range 1 Bar...20 Bar, at a specific temperature in the range 10 ...42°C over a period of 60 minutes to 21 days.

[0023] Per la prima macerazione viene utilizzata una soluzione di miele con una concentrazione di 10...80°Brix in un rapporto di 1:3 propoli grezza: soluzione di miele. [0023] For the first maceration, a honey solution with a concentration of 10...80°Brix is used in a ratio of 1:3 raw propolis: honey solution.

[0024] La macerazione viene filtrata e il residuo ottenuto viene sottoposto ad almeno una nuova macerazione con una soluzione con miele di concentrazione 2...30 °Brix in rapporto 1:1 con una soluzione idroalcolica con una concentrazione alcolica di 5...70 gradi v/v. [0024] The maceration is filtered and the residue obtained is subjected to at least one new maceration with a solution with honey of a concentration of 2...30 °Brix in a 1:1 ratio with a hydroalcoholic solution with an alcohol concentration of 5... 70 degrees v/v.

[0025] Al termine del successivo processo di macerazione, le soluzioni risultanti dalle filtrazioni effettuate tramite filtri con densità di 2...30 micron, vengono lavorate in un concentratore/evaporatore sotto vuoto ad una temperatura compresa tra 20...42°C per eliminare l'alcol e concentrare l'estratto. [0025] At the end of the subsequent maceration process, the solutions resulting from the filtrations carried out through filters with a density of 2...30 microns are processed in a vacuum concentrator/evaporator at a temperature between 20...42°C to eliminate the alcohol and concentrate the extract.

[0026] Il semilavorato concentrato è l'estratto totale di propoli grezza che mantiene il suo colore di propoli grezza. [0026] The concentrated semi-finished product is the total extract of raw propolis which maintains its raw propolis colour.

[0027] Per ottenere un prodotto standardizzato, omogeneo con una concentrazione netta standard di polifenoli/flavonoidi proprietà antibatteriche, il semilavorato concentrato viene portato alla concentrazione desiderata aggiungendo acqua distillata/demineralizzata e miele mescolando in continuo a 100-1000 rpm per 5-10 minuti . [0027] To obtain a standardized, homogeneous product with a standard net concentration of polyphenols/flavonoids, antibacterial properties, the concentrated semi-finished product is brought to the desired concentration by adding distilled/demineralised water and honey, stirring continuously at 100-1000 rpm for 5-10 minutes .

[0028] Il prodotto finale si presenta sotto forma di una soluzione fluida, opaca, omogenea, giallo-rossastra/giallo-marrone/giallo-verde/ecc, specifica di propoli e miele, dal gusto aromatico dolce e con un contenuto di grassi inferiore all'1% e con proprietà antibatteriche. [0028] The final product is in the form of a fluid, opaque, homogeneous, yellow-reddish/yellow-brown/yellow-green/etc solution, specific to propolis and honey, with a sweet aromatic taste and a lower fat content at 1% and with antibacterial properties.

[0029] Il residuo risultante dal processo sopra descritto contiene il principale componente inerte della propoli, ovvero cera e grasso. [0029] The residue resulting from the process described above contains the main inert component of propolis, i.e. wax and fat.

Descrizione del prodotto finale:Final Product Description:

[0030] Determinazione Valore ottenuto Metodo Gusto Dolce - aromatico - specifico per i prodotti delle api Organolettico Odore specifico per i prodotti delle api Organolettico Aspetto e colore Omogeneo, opaco, giallo-rossastro/giallomarrone/giallo-verde/ecc- specifico per prodotti delle api Organolettico Carboidrati 40-50% PS-LC-10, PS-LC-11, PS-LC-12, PS-LC-15, PS-LC-18 Umidità 50-55% PS-LC-15 Capacità antiossidante 145-155 µg/ml DPPH Polifenoli totali 55-65 % Spettrofotometrico Folin-Ciocalteu Flavonoidi totali 10-20% Spettrofotometrico Folin-Ciocalteu Cera < 1 % Soxhlet Attività antibatterica Microdiluizione Concentrazioni minime inibitorie (MIC) Enterococcus faecalis COS 41 Isolato clinico umano ultiresistente agli antibiotici 15.62-31.25 g/l Attività antibatterica Concentrazioni inibitorie minime (MIC) Enterococcus faecalis WDCM 00087 Ceppo di riferimento per test di sensibilità antimicrobica 3.9 - 7.8 g/l Microdiluizione Attività antibatterica Concentrazioni inibitorie minime (MIC) Staphylococcus aureus CCOS 666 Isolato clinico umano multiresistente agli antibiotici 3.9 - 7.8 g/l Microdiluizione Attività antibatterica Concentrazioni inibitorie minime (MIC) Staphylococcus aureus WDCM 00131 Ceppo di riferimento per test di sensibilità antimicrobica 3.9 - 7.8 g/l Microdiluizione Attività antibatterica Concentrazioni inibitorie minime (MIC) Escherichia coli CCOS 730 Isolato clinico umano multiresistente agli antibiotici 31.25- 62.5 g/l Microdiluizione Attività antibatterica Concentrazioni inibitorie minime (MIC) Escherichia coli WDCM 00013 Ceppo di riferimento per test di sensibilità antimicrobica 15.62-31.25 g/l Microdiluizione[0030] Determination Value obtained Method Taste Sweet - aromatic - specific for bee products Organoleptic Odor specific for bee products Organoleptic Appearance and color Homogeneous, opaque, yellow-reddish/yellow-brown/yellow-green/etc - specific for bee products api Organoleptic Carbohydrates 40-50% PS-LC-10, PS-LC-11, PS-LC-12, PS-LC-15, PS-LC-18 Humidity 50-55% PS-LC-15 Antioxidant capacity 145- 155 µg/ml DPPH Total polyphenols 55-65 % Spectrophotometric Folin-Ciocalteu Total flavonoids 10-20% Spectrophotometric Folin-Ciocalteu Wax < 1 % Soxhlet Antibacterial activity Microdilution Minimum inhibitory concentrations (MIC) Enterococcus faecalis COS 41 Human clinical isolate ultra-resistant to antibiotics 15.62 -31.25 g/l Antibacterial activity Minimum inhibitory concentrations (MIC) Enterococcus faecalis WDCM 00087 Reference strain for antimicrobial susceptibility testing 3.9 - 7.8 g/l Microdilution Antibacterial activity Minimum inhibitory concentrations (MIC) Staphylococcus aureus CCOS 666 Human clinical isolate multi-resistant to antibiotics 3.9 - 7.8 g/l Microdilution Antibacterial activity Minimum inhibitory concentrations (MIC) Staphylococcus aureus WDCM 00131 Reference strain for antimicrobial susceptibility testing 3.9 - 7.8 g/l Microdilution Antibacterial activity Minimum inhibitory concentrations (MIC) Escherichia coli CCOS 730 Multi-resistant human clinical isolate to antibiotics 31.25- 62.5 g/l Microdilution Antibacterial activity Minimum inhibitory concentrations (MIC) Escherichia coli WDCM 00013 Reference strain for antimicrobial susceptibility testing 15.62-31.25 g/l Microdilution

Le seguenti sono alcune forme di realizzazione dell'invenzione:The following are some embodiments of the invention:

Esempio 1:Example 1:

[0031] La propoli grezza viene condizionata eliminando i corpi estranei, viene congelata per 72 ore a -1°C, viene macinata fino a una granulazione di 100 micron, pesare 1 kg. La propoli grezza così macinata viene trasferita nel serbatoio di acciaio inox con agitatore continuo a doppia camicia, riscaldato a 20 gradi C e pressione di 20 bar, sopra si aggiunge in proporzione 1:3 una soluzione di miele di 80 gradi Bx, seguita da macerazione per 60 minuti. [0031] The raw propolis is conditioned by eliminating foreign bodies, it is frozen for 72 hours at -1°C, it is ground to a granulation of 100 microns, weighing 1 kg. The raw propolis thus ground is transferred into the stainless steel tank with a continuous double-jacketed stirrer, heated to 20 degrees C and a pressure of 20 bar, above which a honey solution of 80 degrees Bx is added in a 1:3 proportion, followed by maceration for 60 minutes.

[0032] Il macerato così ottenuto viene filtrato attraverso un filtro da 30 micron. Il residuo viene sottoposto a due successive macerazioni nello stesso serbatoio di acciaio inox con agitatore ad agitazione continua, doppia camicia, riscaldato a 20 gradi C e pressione 20 bar sopra la quale si aggiunge in rapporto 1:1 soluzione di miele 2 gradi Bx e soluzione idroalcolica 5 gradi alcool, seguita da macerazione per 60 minuti. [0032] The macerate thus obtained is filtered through a 30 micron filter. The residue is subjected to two subsequent macerations in the same stainless steel tank with a continuously stirring stirrer, double jacket, heated to 20 degrees C and a pressure of 20 bar above which a 2 degree Bx honey solution and solution are added in a 1:1 ratio. hydroalcoholic 5 degrees alcohol, followed by maceration for 60 minutes.

[0033] Il filtrato ottenuto da queste successive macerazioni, filtrato attraverso un filtro da 2 micron, viene lavorato in un concentratore sottovuoto ad una temperatura di 20 gradi C per rimuovere l'alcol e concentrare l'estratto chiamato semilavorato. Il semilavorato concentrato è l'estratto totale di propoli. Per ottenere il prodotto finale aggiungere acqua e miele fino ad ottenere la concentrazione desiderata mescolando in continuo a 100-1000 rpm per 5-10 minuti. [0033] The filtrate obtained from these subsequent macerations, filtered through a 2 micron filter, is processed in a vacuum concentrator at a temperature of 20 degrees C to remove the alcohol and concentrate the extract called semi-finished product. The concentrated semi-finished product is the total propolis extract. To obtain the final product, add water and honey until the desired concentration is obtained, stirring continuously at 100-1000 rpm for 5-10 minutes.

Esempio 2Example 2

[0034] Condizionare la propoli grezza, eliminare i corpi estranei, congelare per 35 ore a - 13 gradi C, macinare a una granulometria di 50 micron, pesare 1 kg. La propoli grezza così macinata viene trasferita nel serbatoio di acciaio inox con agitatore continuo a doppia camicia, riscaldata a 31 gradi C e pressione di 10 bar, si aggiunge in rapporto 1:3 soluzione di miele 40 gradi Bx, seguita da macerazione per 10 giorni. [0034] Condition the raw propolis, remove foreign bodies, freeze for 35 hours at - 13 degrees C, grind to a grain size of 50 microns, weigh 1 kg. The raw propolis thus ground is transferred into the stainless steel tank with a continuous double-jacketed stirrer, heated to 31 degrees C and a pressure of 10 bar, a 40 degree Bx honey solution is added in a 1:3 ratio, followed by maceration for 10 days .

[0035] Il macerato così ottenuto viene filtrato attraverso un filtro da 15 micron. Il residuo viene sottoposto a due successive macerazioni nello stesso serbatoio di acciaio inox con agitatore ad agitazione continua, doppia camicia, riscaldato a 31 gradi C e pressione 10 bar sopra la quale si aggiunge in rapporto 1:1 soluzione di miele 15 gradi Bx e soluzione idroalcolica 30 gradi alcool, seguita da macerazione per 10 giorni. [0035] The macerate thus obtained is filtered through a 15 micron filter. The residue is subjected to two subsequent macerations in the same stainless steel tank with a continuously agitated double-jacketed stirrer, heated to 31 degrees C and a pressure of 10 bar, above which a 1:1 honey solution of 15 degrees Bx and solution are added in a 1:1 ratio. hydroalcoholic 30 degrees alcohol, followed by maceration for 10 days.

[0036] Il filtrato ottenuto da queste successive macerazioni, filtrato attraverso un filtro da 15 micron, viene lavorato in un concentratore sottovuoto ad una temperatura di 31 gradi C per rimuovere l'alcol e concentrare l'estratto detto semilavorato. Il semilavorato concentrato è l'estratto totale di propoli. [0036] The filtrate obtained from these subsequent macerations, filtered through a 15 micron filter, is processed in a vacuum concentrator at a temperature of 31 degrees C to remove the alcohol and concentrate the extract called semi-finished product. The concentrated semi-finished product is the total propolis extract.

[0037] Per ottenere il prodotto finale aggiungere acqua e miele fino ad ottenere la concentrazione desiderata mescolando in continuo a 100-1000 rpm per 5-10 minuti. [0037] To obtain the final product, add water and honey until the desired concentration is obtained, stirring continuously at 100-1000 rpm for 5-10 minutes.

Esempio 3Example 3

[0038] Condizionare la propoli grezza, eliminare i corpi estranei, congelare per 5 ore a -25°C, macinare a una granulometria di 20 micron, pesare 1 kg. La propoli grezza così macinata viene trasferita nel serbatoio di acciaio inox con agitatore sotto agitazione continua a doppia camicia, riscaldata a 42 gradi C e pressione di 1 bar; si aggiunge in rapporto 1:3 soluzione di miele 10 gradi Bx, seguita da macerazione per 21 giorni. [0038] Condition the raw propolis, remove foreign bodies, freeze for 5 hours at -25°C, grind to a grain size of 20 microns, weigh 1 kg. The raw propolis thus ground is transferred into the stainless steel tank with a double-jacketed continuously agitated stirrer, heated to 42 degrees C and a pressure of 1 bar; honey solution 10 degrees Bx is added in a 1:3 ratio, followed by maceration for 21 days.

[0039] Il macerato così ottenuto viene filtrato attraverso un filtro da 5 micron. Il residuo viene sottoposto a due successive macerazioni nello stesso serbatoio di acciaio inox con agitatore ad agitazione continua, doppia camicia, riscaldato a 42 gradi C e pressione 1 barr su cui si aggiunge in rapporto 1:1 soluzione di miele 30 gradi Bx e soluzione idroalcolica 70 gradi alcolici, seguita da macerazione per 21 giorni. [0039] The macerate thus obtained is filtered through a 5 micron filter. The residue is subjected to two subsequent macerations in the same stainless steel tank with a continuous agitator, double jacket, heated to 42 degrees C and 1 bar pressure to which a 30 degrees Bx honey solution and hydroalcoholic solution are added in a 1:1 ratio. 70 degrees alcohol, followed by maceration for 21 days.

[0040] Il filtrato ottenuto da queste successive macerazioni, filtrato attraverso un filtro da 20 micron viene lavorato in un concentratore sottovuoto ad una temperatura di 42 gradi C per rimuovere l'alcol e concentrare l'estratto chiamato semilavorato. Il semilavorato concentrato è l'estratto totale di propoli. Per ottenere il prodotto finale aggiungere acqua e miele fino ad ottenere la concentrazione desiderata mescolando in continuo a 100-1000 rpm per 5-10 minuti. [0040] The filtrate obtained from these subsequent macerations, filtered through a 20 micron filter, is processed in a vacuum concentrator at a temperature of 42 degrees C to remove the alcohol and concentrate the extract called semi-finished product. The concentrated semi-finished product is the total propolis extract. To obtain the final product, add water and honey until the desired concentration is obtained, stirring continuously at 100-1000 rpm for 5-10 minutes.

Claims (1)

1. Procedimento per l'estrazione completa dei componenti bioattivi dalla propoli, caratterizzato dal fatto di essere costituito dalle seguenti fasi in ordine successivo:1. Procedure for the complete extraction of the bioactive components from propolis, characterized by the fact that it consists of the following phases in successive order: – condizionamento della propoli grezza che prevede la rimozione dei corpi estranei, il congelamento a temperature comprese tra -1 e -25 gradi C per 5 - 72 ore e la macinazione fino a una granulometria inferiore a 100 micron;– conditioning of raw propolis which involves the removal of foreign bodies, freezing at temperatures between -1 and -25 degrees C for 5 - 72 hours and grinding to a grain size of less than 100 microns; – macerazione della propoli grezza macinata in soluzione acqua-miele con una concentrazione di 10...80°Brix in un rapporto di 1:3 propoli grezza: soluzione di miele; seguita da successive macerazioni in rapporto 1:1 con soluzione di acqua-miele di concentrazione 2...30 °Brix insieme a una soluzione idroalcolica con concentrazione alcolica di 5...70 gradi v/v., in recipiente di acciaio inox con agitatore e riscaldamento a camicia, a pressioni comprese tra 1 Barr e 20 Bar, a temperature comprese tra 10 e 42 gradi Celsius e tempi tra 60 minuti e 21 giorni;– maceration of ground raw propolis in water-honey solution with a concentration of 10...80°Brix in a ratio of 1:3 raw propolis: honey solution; followed by subsequent macerations in a 1:1 ratio with a water-honey solution with a concentration of 2...30 °Brix together with a hydroalcoholic solution with an alcohol concentration of 5...70 degrees v/v., in a stainless steel container with stirrer and jacket heating, at pressures between 1 Barr and 20 Bar, at temperatures between 10 and 42 degrees Celsius and times between 60 minutes and 21 days; – successive filtrazioni attraverso filtri di 2-30 micron dopo ogni processo di macerazione;– subsequent filtrations through 2-30 micron filters after each maceration process; – concentrazione delle soluzioni ottenute dalla filtrazione mediante lavorazione in concentratore/evaporatore sotto vuoto ad una temperatura compresa tra 10 e 42 gradi Celsius per l'eliminazione dell'alcol e la concentrazione dell'estratto;– concentration of the solutions obtained from filtration by processing in a vacuum concentrator/evaporator at a temperature between 10 and 42 degrees Celsius for the elimination of alcohol and the concentration of the extract; – standardizzazione della concentrazione dell'estratto totale di propoli in soluzione di acqua e miele con proprietà antibatteriche, ad una concentrazione netta standard di polifenoli/flavonoidi, mediante aggiunta di acqua distillata/demineralizzata e miele mediante miscelazione continua ad una velocità compresa tra 100-1000 rotazioni al minuto per 5-10 minuti.– standardization of the concentration of the total propolis extract in a solution of water and honey with antibacterial properties, at a standard net concentration of polyphenols/flavonoids, by adding distilled/demineralised water and honey by continuous mixing at a speed between 100-1000 rotations per minute for 5-10 minutes.
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