CH617685A5

CH617685A5 -

Info

Publication number: CH617685A5
Application number: CH1303476A
Authority: CH
Inventors: Claude Bonne; Jacques Perronnet; Andre Teche
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1975-10-15
Filing date: 1976-10-14
Publication date: 1980-06-13
Also published as: JPS5251380A; FR2327788A1; JPS6319513B2; DK150543B; NL186768B; IE44037B1; NL186768C; FR2327788B1; DE2646700C2; CA1086730A; IE44037L; DK150543C; GB1563831A; BE847290A; JPS6058727B2; US4108993A; DK462176A; NL7611412A; DE2646700A1; LU76005A1

Description

La présente invention a pour objet des procédés de préparation de nouvelles oxadiazines choisies dans le groupe constitué par a) les oxadiazines de formule générale:

N-R

(la)

(la')

10

20

dans laquelle les symboles X et Y, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical nitro, un radical trifluorométhyle, un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, R représente un atome d'hydrogène, un radical alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical phényle ou un radical benzyle, étant entendu que ou bien l'un au moins des radicaux X ou Y représente un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien R représente un radical benzyle,

et b) les oxadiazines de formule:

dans laquelle lorsque R2 représente un radical méthyle,

R3 représente un radical phényle substitué soit par des atomes de chlore en 2' et 4' ou en 3' et 5', soit par un radical trifluorométhyle en 3'et un radical nitro ou un atòme de chlore en 4', soit par un radical nitro en 3',

lorsque R2 représente un radical phényle, un atome d'hydrogène ou un radical n-pentyle,

R3 représente un radical phényle substitué par des atomes de chlore en 3' et 4'.

Parmi les halogènes que X et Y peuvent représenter, on peut citer notamment le chlore et le brome.

Parmi les radicaux alcoylthio que X et Y peuvent représenter, on peut citer notamment les radicaux méthylthio, éthyl-thio, propylthio, isopropylthio, butylthio, sec-butylthio, tert-butylthio.

Parmi les radicaux alcoyles que R peut représenter, on peut citer notamment les radicaux méthyle, éthyle, propyle, isopro-pyle, butyle, sec-butyle, tert-butyle, pentyle, tert-pentyle.

Parmi les oxadiazines, obtenues par le procédé de l'invention, on peut citer notamment celles décrites dans les exemples et plus particulièrement la 2-méthyl 4-(3/-trifluorométhyl 4'-nitro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine.

On connaissait déjà certaines oxadiazines-1,2,4 ones de formule:

45

50

55

dans laquelle les symboles X et Y représentent les groupes -CO-, -CH2- ou -CH(CH3)- [exceptés les composés pour lesquels X = CO et Y = CH2 ou CH(CH3)] et Ri et R2 représentent des alcoyle inférieurs ou des phényle éventuellement substitués par un halogène ou un groupe nitro, alcoyle, alcoxy ou trifluorométhyle (brevet français no 2 039 472). Ces composés peuvent être utilisés comme agents biocides, notamment pour le traitement des circuits d'eau industriels et pour la protection de matériaux contre les champignons et les bactéries.

Or, les nouvelles oxadiazines manifestent des propriétés pharmacologiques intéressantes. Elles sont douées notamment d'une activité anti-androgène remarquable, plus particulièrement par voie locale.

Cette activité est illustrée plus loin dans la partie expérimentale.

Les nouvelles oxadiazines, obtenues par les procédés de l'invention, inhibent les effets des androgènes sur les récepteurs périphériques sans porter atteinte au fonctionnement normal de l'hypophyse. De ce fait, elles peuvent être utilisées comme médicaments chez les adolescents sans craindre un arrêt de la croissance et chez les adultes sans avoir à redouter certains effets d'une castration chimique.

Elles trouvent notamment leur emploi comme médicaments pour le traitement des affections locales liées à une hyper-androgénicité, telles que l'hirsutisme, l'acné, la séborrhée ou l'hyperpilosité.

Elles peuvent également trouver leur application dans le domaine vétérinaire.

Ainsi, les nouvelles oxadiazines, obtenues par les procédés de l'invention, peuvent être employées pour préparer des compositions médicamenteuses anti-androgènes à action locale renfermant, à titre de principe actif, l'une au moins desdites oxadiazines.

Les nouvelles oxadiazines, obtenues par les procédés objet de l'invention, peuvent être utilisées par les voies habituelles, mais sont plus particulièrement destinées à l'administration par voie locale et pour cela se présenter sous forme de solutions, d'émulsions, de crèmes, pommades et de lotions.

Les formes pharmaceutiques sont préparées selon les méthodes usuelles. Le principe actif peut y être incorporé à des excipients habituellement employés dans ces compositions, tels que les véhicules aqueux ou non, le lactose, l'amidon, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsi-fiants, les conservateurs.

La dose usuelle, variable selon le sujet traité et l'affection en cause, peut être, par exemple, de 1 à 3 applications par jour d'une pommade à 5 à 10% chez l'homme.

Les nouvelles oxadiazines, obtenues par les procédés de l'invention, peuvent aussi trouver leur application en cosmétologie.

Ainsi, l'on peut employer ces oxadiazines pour préparer des compositions cosmétologiques renfermant l'une au moins desdites oxadiazines.

Les procédés de préparation des nouvelles oxadiazines,

telles que définies plus haut, objet de l'invention, sont caractérisés en ce que pour préparer a) des oxadiazines de formule Ib:

617685

N-R1

(Ib)

✓R1

NII-C-N.

h \

OH

par un di-halogéno-l,2-éthane, pour obtenir un produit de formule Ib,

b) des oxadiazines de formule le:

(le)

dans laquelle les symboles X et Y, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical trifluorométhyle, un radical nitro, un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, on effectue l'hydrogénolyse d'un produit de formule Id:

N-CH,

\ /

dans laquelle X et Y ont la signification ci-dessus, à l'aide d'un catalyseur d'hydrogénolyse, pour obtenir un produit de formule le,

c) des oxadiazines de formule If:

CDÜ

dans laquelle Xi et Yi, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical tri fluorométhyle ou un radical nitro, Ri représente un radical alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical phényle, l'on fait réagir un di-halogéno 1,2-éthane sur un produit de formule II:

dans laquelle les symboles X et Y, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical trifluorométhyle, un radical nitro, un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, R' représente un radical alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical phényle ou un radical benzyle, étant entendu que ou bien l'un au moins des radicaux X ou Y représente un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien R représente un radical benzyle, on traite un produit de formule générale IIb:

•NH-C-NC

'R,

"•OH

(II )

dans laquelle Xi, Yi et Ri ont la signification ci-dessus, pour obtenir un produit de formule If,

îs d) des oxadiazines de formule Ia'i:

0

20

r,—i:

(IIb)

u

R'

(Ia%)

25 dans laquelle lorsque R'2 représente un radical méthyle R3 représente un radical phényle substitué soit, par des atomes de chlore en 2; et 4' ou en 3' et 5', soit, par un radical trifluorométhyle en 3' et un radical nitro ou un atome de chlore en 4', 30 soit, par un radical nitro en 3',

lorsque R'2 représente un radical phényle ou un radical n-pentyle,

R3 représente un radical phényle substitué par des atomes de chlore en 3' et 4', l'on fait réagir un di-halogéno 1,2-éthane sur 3s un produit de formule IF:

40

R3-NH-C-N

Il N

O

R'2

OH

(II')

dans laquelle R'2 et R3 ont la signification ci-dessus, pour obtenir le produit désiré,

45 e) l'oxadiazine de formule Ia'2:

50

(Id)

(la',)

55

l'on effectue l'hydrogénolyse de la 2-benzyl 4-(3',4'-dichIoro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine à l'aide d'un catalyseur d'hydrogénolyse, pour obtenir le produit désiré.

Dans un mode préféré d'exécution du procédé de prépara-60 tion des produits de formule Ib et de formule If, le di-halogéno 1,2-éthane est, de préférence, le dichloro 1,2-éthane, mais on peut également utiliser le dibromo 1,2-éthane.

La réaction a lieu de préférence dans un solvant polaire, tel que le diméthylsulfoxyde, mais on peut également utiliser 65 d'autres solvants polaires, tels que le diméthylformamide ou Fhexaméthylphosphorotriamide.

La réaction a lieu, de préférence, en présence d'un sel basique, tel que le carbonate de potassium, mais on peut égale-

5

617 685

ment utiliser le carbonate de sodium ou une base aminée tertiaire, telle que la triéthylamine.

Dans un mode préféré d'exécution du procédé de préparation des produits de formule le: .

- le catalyseur d'hydrogénolyse est, de préférence, le chlorure de palladium sur charbon dans l'acide acétique, mais on peut également utiliser d'autres catalyseurs, tels que le platine, d'autres supports, tels que le sulfate de baryum et d'autres solvants, tels que le méthanol ou l'éthanol.

Les produits de formule IIb peuvent être préparés par action de l'hydroxylamine R'-NHOH sur l'isocyanate de formule III:

tC

N = C = 0

(III)

15

Des exemples sont donnés dans la partie expérimentale. L'isocyanate peut être préparé, lorsqu'il n'est pas connu, par action du phosgène sur l'aniline correspondante. Un exemple d'une telle préparation est donné dans la partie expérimentale.

Il est également donné un exemple de préparation d'une aniline portant un substituant alkylthio. Cette préparation qui permet de préparer les autres anilines portant ce substituant consiste à faire réagir le mercaptan correspondant sur le nitro benzène portant en bonne position un atome de chlore, puis à réduire la fonction nitro.

Les exemples suivants illustrent l'invention.

Exemple 1

2-méthyl 4-(2/,4'-dichloro phényl)

3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine 3s On agite 15 minutes à 20°C, un mélange de 11 g de N-

méthyl N-hydroxy N'-(2,4-dichloro phényl) urée et 55 g de carbonate de potassium dans 66 cm3 de diméthylsulfoxyde. On introduit 11 g de dichloréthane et agite 16 heures à 20-25°C.

On verse dans de l'eau, essore le précipité obtenu, reprend à 40 l'acétate d'éthyle, sèche et distille à sec sous vide. Le produit est recristallisé dans l'éther isopropylique. On obtient 8 g de produit attendu. F = 94-95°C.

Analyse pour C10H10CI2N2O2:

C H Cl

45

N

Calculé: 46,00% 3,86% 27,16% 10,73%

Trouvé: 46,00% 3,90% 27,10% 10,60%

Exemple 2 2-méthyl 4-(3',5/-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine En opérant comme à l'exemple 1 à partir de 16 g de N-méthyl N-hydroxy N'-(3,5-dichloro phényl) urée, 80 g de carbonate de potassium, 100 cm3 de diméthylsulfoxyde et 16 g de dichloréthane, on obtient 20 g de produit que l'on Chromatographie sur gel de silice avec un mélange benzène-acétone (8-2).

On obtient 12 g de produit attendu. F = 105-106°C. Analyse pour C10H10CI2N2O2:

La N-méthyl N-hydroxy N'-(3,5-dichloro phényl) urée, utilisée au départ de l'exemple 2, a été préparée comme suit:

On agite un mélange de 10 g de chlorhydrate de N-méthyl hydroxylamine dans 100 cm3 de chloroforme et introduit à 0°C, 18 cm3 de triéthylamine. On introduit ensuite entre 10 et 15°C, 20 g d'isocyanate de 3,5-dichloro phényle dans 30 cm3 de chloroforme. On agite 5 heures à 20°C et distille sous vide. On reprend le résidu à l'eau, sèche et obtient 22 g de produit attendu. F = 131-132°C.

Exemple 3 2-méthyl 4-(4'-nitro 3'-trifluorométhyl phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine On agite à 20°C un mélange de 15 g de N-méthyl N-hydroxy N'-(3-trifluorométhyl 4-nitro phényl) urée, 75 g de carbonate de potassium et 90 cm3 de diméthylsulfoxyde. On introduit 15 g de dichloréthane et agite 16 heures à 20°C. On verse dans l'eau glacée, décante, reprend l'huile au chlorure de méthylène, lave à l'eau, sèche et distille sous pression réduite. On purifie le produit par Chromatographie avec un mélange benzène-acétone (8-2). On obtient 8 g de produit attendu. F = 104-105°C.

Analyse pour Ci 1H10F3N3O4:

C H N F

Calculé: Trouvé:

43,28% 3,30% 43,50% 3,40%

13,77% 18,67% 13,80% 18,50%

30

La N-hydroxy N-méthyl N/-(4-nitro 3-trifluorométhyl phényl) urée, utilisée au départ de l'exemple 3, a été préparée comme suit:

On agite un mélange de 15 g de chlorhydrate de N-méthyl hydroxylamine dans 100 cm3 de chloroforme, refroidit à 0°C et introduit 24 cm3 de triéthylamine en 5 minutes, puis à 20-25°C, 37,5 g d'isocyanate de 3-trifluorométhyl 4-nitro phényle. On agite 16 heures à 20°C. On verse dans l'eau et essore les cristaux formés et sèche sous vide.

Le produit brut obtenu est repris à chaud dans l'éther isopropylique. On traite au charbon actif, distille sous pression réduite et obtient 20 g de produit attendu. F — 129-130-C.

Exemple 4

2-phényl 4-(3',4 -dichloro phényl)

3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine

En utilisant le même mode opératoire que celui décrit à l'exemple 1, on obtient 28 g de produit attendu au départ de so 40 g de N-(3/,4'-dichloro phényl) N -hydroxy N -phényl uree. Le produit obtenu a un point de fusion de 112—113°C.

Analyse pour C15H12CI2N2O2:

55

Calculé: Trouvé:

C H

55,74% 3,74% 55,70% 3,70%

Cl

N

21,94% 8,67% 21,70% 8,60%

60

Calculé: Trouvé:

C H

46,00% 3,86% 45,80% 3,90%

Cl

N

27,16% 10,73% 27,00% 10,50%

Exemple 5 2-méthyl 4-(3/-nitro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine En opérant comme à l'exemple 1, on obtient, en partant de 30 g de N-méthyl N-hydroxy N'-(3'-nitro phényl) urée, 10 g de produit attendu après Chromatographie avec un mélange benzène-acétone (7-3). F = 107-108°C.

617685

6

Analyse pour C10H11N3O4:

C H N

Calculé: 50,63% 4,67% 17,71%

Trouvé: 50,60% 4,60% 17,80%

Exemple 6 2-méthyl 4-(4'-chloro 3'-trifluorométhyl phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine En opérant comme à l'exemple 1, on obtient 23 g de produit attendu, F = 72-73°C, en partant de 30 g de N-méthyl N-hydroxy N'-(4'-chloro 3'-trifluorométhyl phényl) urée.

Analyse pour C11H10CIF3N2O2:

C H F N

Calculé: 44,83% 3,42% 19,34% 9,51%

Trouvé: 45,10% 3,50% 19,0% 9,30%

La N-méthyl N-hydroxy N'-(4-chloro 3-trifluorométhyl phényl) urée, utilisée au départ de l'exemple 6, est préparée comme suit:

On agite un mélange de 21 g de chlorhydrate de N-méthyl hydroxylamine dans 200 cm3 de chloroforme et introduit à 0°C, 33 cm3 de triéthylamine, puis 44,3 g d'isocyanate de 4-chloro 3-trifluorométhyl phényle dans 200 cm3 de chloroforme. On agite 16 heures à 20°C, lave à l'eau, distille sous vide jusqu'à un volume de 100 cm3, glace, essore, lave à l'eau, sèche et obtient 37 g de produit attendu. F = 114-115°C.

Exemple 7

2-méthyl 4-(4/-méthylthio S'-trifluorométhyle phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine En opérant comme à l'exemple 1, on obtient 0,9 g de produit attendu, en partant de 2,5 g de N-(3-trifluorométhyl 4-méthylthio phényl) N'-méthyl N'-hydroxy urée et après purification par Chromatographie sur silice avec un mélange chlorure de méthylène-acétate d'éthyle (9-1). F = 60°C.

Analyse pour C12H13F3N2O2S:

C H N F S

Calculé: 47,05% 4,27% 9,14% 18,60% 10,46% Trouvé: 46,90% 4,40% 9,20% 18,40% 10,60%

La N-(3-trifluorométhyl 4-méthylthio phényl) N'-méthyl N'-hydroxy urée, utilisée au départ de l'exemple 7, a été préparée comme suit:

Stade A

4-méthylthio 3-trifluorométhyl nitro benzène On introduit 12,5 g de sodium dans 500 cm3 d'éthanol, puis refroidit à 10°C et introduit 30 g de méthyl mercaptan dans 50 cm3 d'éthanol. On introduit ensuite 63 g de 3-trifluorométhyl 4-chloro nitro benzène. On laisse 17 heures à température ambiante, essore le précipité obtenu, lave à l'eau, sèche et obtient 22 g de produit cherché. F = 158°C.

Stade B

4-méthylthio 3-trifluorométhyl aniline On introduit 16,5 g de produit préparé au stade A dans un mélange de 110 cm3 d'éthanol, 100 cm3 d'eau et 1 cm3 d'acide chlorhydrique à 22°Bé, puis 47 g de fonte hématite. On porte 6 heures au reflux, filtre à chaud, lave au chlorure de méthylène, concentre sous vide et obtient 6 g de produit attendu, n?? = 1,553.

Stade C

Isocyanate de 4-méthylthio 3-trifluorométhyl phényle On introduit 6 g de produit préparé au stade B dans 60 cm3 de toluène et verse sur 150 cm3 de toluène saturé en phosgène. On porte 4 heures au reflux sous courant de phosgène et abandonne 17 heures à température ambiante. On amène à sec sous pression réduite, reprend l'extrait sec avec de l'éther isopropylique, dissout à chaud, glace, essore, sèche et obtient 3,4 g de produit attendu. F = 40°C.

Stade D

N-(4-méthylthio 3-trifluorométhyl phényl) N'-méthyl N'-hydroxy tirée On agite un mélange de 1,6 g de chlorhydrate de N-méthyl hydroxylamine dans 16 cm3 de chloroforme et 2,4 cm3 de triéthylamine, puis introduit à 0°C, 3,4 g d'isocyanate de 4-méthylthio 3-trifluorométhyl phényle préparé au stade C dans 34 cm3 de chloroforme. On laisse 48 heures à température ambiante, amène à sec sous vide, reprend à l'éther, filtre et obtient 2,5 g de produit attendu. F = 125°C.

Exemple 8 2-benzyl 4-(3',4'-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine On mélange 15,5 g de N-hydroxy N-benzyl N'-(3',4'-dichloro phényl) urée et 77,5 g de carbonate de potassium dans 93 cm3 de diméthylsulfoxyde. On agite une demi-heure, ajoute 15,5 g de dichloréthane. On agite 16 heures à température ambiante, verse dans l'eau, on essore le produit précipité et le lave à l'eau. On reprend par l'acétate d'éthyle, sèche,

filtre et concentre à sec. On récupère 18 g de produit cristallisé que l'on recristallise dans l'éther isopropylique. On obtient 14,5 g de produit attendu. F = 76°C.

Analyse pour C16H14CI2N2O2:

C H N Cl

Calculé: 56,99% 4,18% 8,30% 21,02%

Trouvé: 56,70% 4,30% 8,30% 21,00%

La N-hydroxy N-benzyl N'-p'^'-dichloro phényl) urée, utilisée au départ de l'exemple 8, a été préparée comme suit:

Dans une solution de 20,3 g d'isocyanate de 3,4-dichloro phényle dans 400 cm3 de benzène anhydre, on introduit 13,3 g de N-benzyl hydroxylamine dans 260 cm3 de benzène anhydre. On chauffe une demi-heure à reflux et laisse refroidir en agitant. Le produit cristallisé est essoré. On empâte au benzène et obtient 28,2 g de produit attendu. F = 157°C.

Exemple 9 2-pentyl 4-(3',4'-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine En opérant comme à l'exemple 1, on obtient 13 g de produit attendu en partant de 20 g de N-pentyl N-hydroxy N'-(3',4'-dichloro phényl) urée. Le produit final est obtenu par Chromatographie sur alumine en éluant au mélange cyclohexane-acétate d'éthyle (8-2). F <40°C.

Analyse pour C14H18CI2N2O2:

C H Cl N

Calculé: 53,01% 5,72% 22,35% 8,83%

Trouvé: 52,70% 5,70% 22,60% 8,70%

La N-pentyl N-hydroxy N'-(3,4-dichloro phényl) urée, utilisée au départ de l'exemple 9, a été préparée comme suit:

s

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

7

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On place 29,2 g d'isocianate de 3,4-dichloro phényle dans 500 cm3 d'éther isopropylique, puis on introduit 16 g de N-pentyl hydroxylamine dans 80 cm3 d'éther isopropylique. On agite 16 heures, amène à sec, reprend à l'éther de pétrole et obtient 45 g de produit attendu. F = 88°C.

Exemple 10 4-(3',4/-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine On mélange 3,37 g de 2-benzyl 4-(3',4'-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine préparé à l'exemple 8, 70 cm3 d'acide acétique, 680 mg de noir animal et 0,6 cm3 de chlorure de palladium en solution à 20%. On hydrogène jusqu'à fin d'absorption, filtre, rince à l'acide acétique, verse dans l'eau glacée et extrait au chlorure de méthylène. On sèche et concentre à sec. On reprend le produit cristallisé par de l'éther isopropylique et obtient 2,37 g de produit attendu. F = 152°C.

Etude pharmacologique

- Le produit, dénommé ci-après produit A, est la 2-méthyl 4-(3', 4'-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine;

- le produit, dénommé ci-après produit B, est la 2-méthyl 4-(4'-chloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine;

- le produit, dénommé ci-après produit C, est la 2-éthyl 4-(3',4'-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine.

A) Test d'inhibition de l'incorporation prostatique de la radioactivité après injection d'une dose traceuse 3H-testostérone chez le rat castré.

Des groupes de 3 rats mâles Sprague-Dawley SPF, pesant 70±10 g castrés depuis vingt-quatre heures reçoivent en injection intrapéritonéale 5 mg de produit à tester. Seize heures après, les animaux reçoivent en injection intramusculaire 10 fxCi/100 g de la3-H-testostérone (26 Ci/mmol) en solution alcoolique. Les animaux sont sacrifiés une heure après l'injection de l'hormone tritiée; la prostate ventrale est prélevée, rincée dans une solution isotonique de chlorure de sodium, pesée, puis solubilisée dans 1 ml de Soluène (R* [Packard]: base organique forte dans le toluène).

La radioactivité des échantillons est mesurée après addition de 15 ml de liquide scintillant.

Les résultats obtenus sont exprimés en pourcentage d'inhibition de l'incorporation de la testostérone:

Groupes

Incorporation

Pourcentage

dpm/mg*

d'inhibition

Témoins...

162,5 ± 1,5

-

Produit A...

63,9 ± 4,8

61

* dpm/mg = désintégration par minute par mg de tissu prostatique frais.

Pour les autres produits de formule I, les résultats exprimés en pourcentage d'inhibition ont été les suivants:

- Produit B: 33% d'inhibition;

- ProduitC: 40% d'inhibition;

- Produit de l'exemple 1:41 % d'inhibition;

- Produit de l'exemple 2:61% d'inhibition;

- Produit de l'exemple 3: 68% d'inhibition;

- Produit de l'exemple 4: 50% d'inhibition;

- Produit de l'exemple 10: 35% d'inhibition;

- Produit de l'exemple 5: 37% d'inhibition;

- Produit de l'exemple 6:44% d'inhibition.

B) Activité anti-androgène locale: test sur culture organoty-pique de prostate:

Des rats castrés depuis 24 heures sont anesthésiés à l'éther. On prélève la prostate aseptiquement et la rince dans une solution de Tyrode à 0-4°. Le tissu prostatique est divisé en fragments mesurant environ 2X3X3 mm en coupant le stroma séparant les formations alvéolaires.

Les fragments sont ensuite mis en culture, selon la méthode de Lasnitzki (J. Endocr. 1964, 30,325), légèrement modifiée, dans 2 ml de milieu synthétique 199 modifié (Institut Pasteur) contenant 100 Ul/ml de penicilline G et 0,1 mg/ml de streptomycine.

Les explants ainsi obtenus sont cultivés d'une part dans un milieu sans hormone (témoin), d'autre part, en présence d'hormone androgène (androstanolone), enfin en présence de l'association = androstanolone et produit à tester.

Au moment de la mise en culture des explants prostatiques, 1 juCi de 3H-Thymidine (26 Ci/mmole) est ajouté au milieu en solution aqueuse sous un volume de 0,1 ml.

Après 72 heures de culture, les explants sont rincés et homogénéisés à l'aide d'un homogénéiseur de Potter, dans une solution de saccharose 0,25 M contenant 1,5 mM CaCk.

L'activité de la phosphatase alcaline est déterminée à pH 10,5, selon la méthode de Bessey et coll. (J. Biol. Chem. 164, 321), sur le surnageant de centrifugation de l'homogénat des explants.

Pour la mesure de l'incorporation de la 3H-Thymidine à l'acide désoxyribonucléique (ADN), le culot de centrifugation est repris par 1 ml de soude normale pendant une heure à 37°C, puis lavé 3 fois par 4 ml d'acide trichloracétique à 5 %. La radioactivité du culot de centrifugation est mesurée après reprise par 0,5 ml de Soluène R (Packard).

Les résultats sont exprimés en dpm de 3H~Thymidine incorporée dans l'ADN par mg de tissu.

L'antagonisme des effets provoqués par l'androstanolone (augmentation de l'activité phosphatase alcaline et de l'incorporation de 3H-Thymidine à l'ADN) démontre l'activité anti-androgène locale du produit testé.

On obtient les résultats suivants:

Groupes

Concentration M

Phosphatase alcaline m U/mg

Incorporation de 3H-Thymi-dine dpm/mg

Témoins

-

52

208

Androstanolone

5•10~8

108

724

Androstanolone + produit de l'exemple 3

5-10-8 ^ IO-6 J

86

343

Témoins

-

40

458

Androstanolone

5-10-8

90

874

Androstanolone + Produit A

5-10-8 Ì

10-6 J

68

511

Le produit de l'exemple 3 provoque une inhibition de 74% de l'incorporation de l'hormone tritiée.

Le produit A provoque une inhibition de 87 % de l'incorporation de l'hormone tritiée.

C) Activité anti-androgène par administration topique sur l'organe sébacé costovertébral du hamster

Principe - Le hamster syrien (Mesocricetus auratus) présente au niveau de la peau dorsale deux formations sébacées, de part et d'autre de la colonne vertébrale, dont le développement est androgénodépendant.

Le traitement local de cet organe par applications quotidiennes d'une lotion contenant un anti-androgène, inhibe s

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

«0

65

617685

8

l'augmentation pondérale de l'organe costovertébral de la femelle, provoquée par l'administration simultanée de propionate de testostérone par voie sous-cutanée.

L'observation de l'organe controlatéral non traité permet d'évaluer l'effet anti-androgène «secondaire», c'est-à-dire non local du produit.

Méthode

On soumet des lots de 5 hamsters femelles pesant 110-130 g à un traitement quotidien pendant 14 jours.

Un lot reçoit du propionate de testostérone solubilisé dans l'huile de Sésame +5% d'alcool benzylique, à raison de 0,2 ml/hamster/jour (correspondant à 125 ag de propionate de testostérone/jour), par voie sous-cutanée;

un autre lot reçoit simultanément en plus de même traitement que ci-dessus, un traitement local de l'organe costovertébral droit au moyen de 0,02 ml d'une solution contenant 25 % en poids de produit de l'exemple 3, 30% en poids de carbonate de propylène, 37% en poids d'éthanol et 8% d'Eutanol (c'est-à-dire 5 mg du produit de l'exemple 3/jour).

Mesure

Les animaux sont sacrifiés 24 heures après le dernier traitement, les organes costovertébraux sont prélevés et pesés.

Résultats

Traitements

Organes costovertébraux poids (en mg)

Gauche

Droite (traité)

Témoins

9.6 ± 1.1

9.2 ± 1.2

Propionate de testostérone

48.8±2.7

43.3 ± 4.4

Propionate de testostérone + Produit de l'ex. 3

41.8 ± 3.3

25.4 ± 2.4

L'application locale du produit de l'exemple 3 sur l'organe is costovertébral droit entraîne une variation non significative de l'augmentation pondérale de l'organe costovertébral gauche. Cette application locale sur l'organe costovertébral droit entraîne un pourcentage d'inhibition de l'augmentation pondérale de cet organe de 52%.

20

Conclusion

Le produit de l'exemple 3 antagonise localement le propionate de testostérone sans présenter d'effet anti-androgène «secondaire».

B

Claims

617685
2. Procédé de préparation des nouvelles oxadiazines de formule:

(le)

-H.

(If)

dans laquelle Xi et Yi, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical trifluorométhyle ou un radical nitro, Ri représente un radical alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical phényle, caractérisé en ce que l'on fait réagir un di-halogéno 1,2-éthane sur un composé correspondant de formule:

40 dans laquelle les symboles X et Y, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical trifluorométhyle, un radical nitro ou un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, caractérisé en ce que l'on prépare par le procédé selon la revendication 1 des composés de formule:

N-CII

(Id)

55

(II)

dans laquelle X et Y ont la signification ci-dessus, et on effectue l'hydrogénolyse desdits composés à l'aide d'un catalyseur d'hydrogénolyse.

6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que 60 l'on prépare l'oxadiazine de formule:

2

REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation des nouvelles oxadiazines de formule:

0 If

—lï ',

(la' )

N-R'

(Ib)

dans laquelle les symboles X et Y, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un radical nitro, un Tadical trifluorométhyle ou un radical alcoyl-thio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, R' représente un radical alcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, un radical phényle ou un radical benzyle, étant entendu que ou bien l'un au moins des radicaux X et Y représente un radical alcoylthio ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien R'représente un radical benzyle, caractérisé en ce que l'on traite un composé correspondant de formule:

dans laquelle io R'2 représente un radical méthyle et

R3 représente un radical phényle substitué soit par des atomes de chlore en 2' et 4' ou en 3' et 57, soit par un radical trifluorométhyle en 3' et un radical nitro ou un atome de chlore en 4', soit par un radical nitro en 3',

îs ou bien

R'2 représente un radical phényle ou un radical n-pentyle et R3 représente un radical phényle substitué par des atomes de chlore 3' et 4',

caractérisé en ce que l'on fait réagir un di-halogéno 1,2-éthane 20 sur un composé correspondant de formule:

R'2

25

Rb-NH-C-N

Il \

O OH

(H')

5. Procédé de préparation des nouvelles oxadiazines de (IIb) formule:

30

par un di-halogéno 1,2-éthane.
3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'on prépare la 2-méthyl 4-(3/-trifluorométhyl 4'-nitro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine à partir de la N-méthyl N- «s hydroxy N'-(3-trifluorométhyl 4-nitro phényl) urée.
4. Procédé de préparation des nouvelles oxadiazines de formule:

CX-

(Ia'2)

617685

par hydrogénolyse de la 2-benzyl 4-(3/,4'-dichloro phényl) 3-oxo 5,6-dihydro 1,2,4-oxadiazine à l'aide d'un catalyseur d'hydrogénolyse.