Verfahren zur Herstellung einer neuen Epoxy-Verbindung Verfahren zur Herstellung des bisher unb#ekann- ten Epoxy-Steroids, der Formel<B>1,</B>
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dadurch gekennzeichnet, dass man Oaabain, 1,19- Isopropylidenouabagenin oder Oaabagenin in alko holischer Lösung mit Salzsäure behandelt.
Das Verfahren wird vorzugsweise folgenderraas- sen ausgeführt. 1,19-Isopropyliden-ouabagenin wird in wässerigem Alkohol mit 0,05-n. Salzsäure während <B>30</B> bis<B>60</B> Minuten bei Rückflusstemperatur erhitzt. Die Lösung wird im Vakuum zur Trockne einge dampft und anschliessend nach bekannten Methoden aufgearbeitet. Das. neue Epoxy-Steroid wird auch aus Ouabagenin selbst erhalten, wenn aus diesem bei spielsweise mit<B>0,05</B> bis 1-n. Salzsäure während<B>30</B> bis <B>60</B> Minuten bei Rückflusstemperatur Wasser abge spalten wird.
Schliesslich kann das neue Epoxy-Steroid auch erhalten werden, wenn man aus dem Glykosid Oua- bin mit 0,05-n. Salzsäure während<B>30</B> Minuten bei Rückflusstemperatur Wasser abspaltet.
Monoanhydro-ouabagenin ist durch die in der Steroidreihe neuartige, la,lla-Epoxyd-Gruppierung charakterisiert. Der verfahrensgemäss hergestellten neuen Verbindung wird die Konstitution des la, <B>11</B> a- Epoxy-3ss,5,14,19-tetrahydroxy-carden-(20,22)-o,lids (la,lla-Epoxy-strophanthidol) zuerteilt. Nach dem UV-Spektrum, [A.ax <B>= 217</B> mit (log e<B>=</B> 4,17) (Alko hol)] ist der Butenolidring von Monoanhydro-ouaba- genin unversehrt. Mit Tetranitromethan in Chloro form wird keine Gelbfärbung beobachtet.
Die erfindungsgemäss hergestellte Verbindung eignet sich als, Zwischenprodukt für die Synthm von therapeutisch wirksamen Steroiden. In den nachfol genden Beispielen erfolgen alle Temperaturangaben in Celsiusgraden. Die Schmelzpunkte sind korrigiert. <I>Beispiel<B>1</B></I> Monoanhyclro-ouabagenin (la,lla-Epoxy-31)', 5,14,19-tetrahydroxy-carden-(20,22)-olid;
<B>1</B> aj <B><I>1</I></B> a-Epoxy-strophanthidol <I>aus</I> 1,19-Isopropyliden-ouabagenin <B>6,0 g</B> 1,19-Iso-propyliden-ouabagenin vom Smp. <B>282-288'</B> werden mit<B>600</B> ccm 96-proz. Athanol und <B>3,5</B> cem HCI <B>(=</B> 0,05-n. HCI) <B>1</B> Stunde unter Rück- fluss gekocht.
Hierauf wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand aus Methanol-Äther kristaffisiert. Es, resultieren<B>1,90 g</B> krist. Monoanhy- dro-ouabage,nin vom Smp. <B>262-275'.</B> Nach Umkri- stallisieren aus Methanol-Äther Nadeln vom Smp. <B>274-275'</B> (Zers.) resp. 306-316' (Zers.)
(Kofler- Block); [a]22<B>=</B> +46' 2' (c <B>=</B> 0,467 in Methanol). <B>D</B> Eine Lösung in Methanol-Chlorofonn gibt mit Tetra- nitromethan keine Gelbfärbung. IR-Spektrum. (KBr) Banden bei ca. <B>2,93 ss</B> (OH), 5,54,u und<B>5,76</B> g (C=O, Butenolidring), <B>6,20</B> tt <B>(C=C,</B> Butenolidring).
Die Mutterlaugenrückstände <B>(2,3 g)</B> werden an <B>69 g</B> A1201 chromatographiert. Zum Nachwaschen dienen<B>230</B> ccm Lösungsmittel pro Fraktion. Frak tion<B>1</B> (eluiert mit Chloroforin-Methanol-[99:1]) gibt 12 mg amorphes Material.
Fraktion 2<B>(591</B> mg elu-
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iert <SEP> mit <SEP> Chloroform-Methanol-[99:1]) <SEP> gibt <SEP> aus <SEP> Me thanol-Ather <SEP> <B>168</B> <SEP> mg <SEP> langsam <SEP> kristallisierendes <SEP> Tetra anhydro#-ouabageiün <SEP> vom <SEP> Smp. <SEP> <B>121-130'.</B> <SEP> Nach <SEP> Um kristallisieren <SEP> aus <SEP> Aceton-Äther <SEP> und <SEP> Methanol-Äther
<tb> Prismen <SEP> vom <SEP> Smp. <SEP> 238-240'; <SEP> [a]23 <SEP> <B>= <SEP> + <SEP> 18' <SEP> </B> <SEP> 2'
<tb> <B>D</B>
<tb> (c <SEP> <B>= <SEP> 0,830</B> <SEP> in <SEP> Methanol). <SEP> Eine <SEP> Lösung <SEP> in <SEP> Chloro form <SEP> gibt <SEP> mit <SEP> Tetranitromethan <SEP> eine <SEP> starke <SEP> Gelbfär bung. <SEP> UV-Spektrum:
<SEP> <B>=</B> <SEP> 214,5 <SEP> my, <SEP> log <SEP> e <SEP> <B>=</B> <SEP> 4,42,
<tb> Schulter <SEP> M <SEP> <B>255-265</B> <SEP> my, <SEP> log <SEP> e <SEP> <B>= <SEP> 2,7</B> <SEP> in <SEP> Äthanol.
<tb> Mikrohydrierung <SEP> mit <SEP> Pt <SEP> in <SEP> Eisessig: <SEP> 4,939 <SEP> mg <SEP> Sub stanz <SEP> verbrauchen <SEP> 1,274 <SEP> ccm <SEP> <U>H.</U> <SEP> <B>(0'/760</B> <SEP> mm). <SEP> Ber.
<tb> für <SEP> 4 <SEP> H,: <SEP> 1,208 <SEP> ccm.
<tb>
Die <SEP> Fraktionen <SEP> 3-14 <SEP> (cluiert <SEP> mit <SEP> Chloroforni-Me> thanol-[99:1], <SEP> <B>[98:2]</B> <SEP> und <SEP> <B>[97:31)</B> <SEP> geben <SEP> <B>903</B> <SEP> mg
<tb> amorphes <SEP> Material.
<tb>
Die <SEP> Fraktionen <SEP> <B>15-25 <SEP> (656</B> <SEP> mg, <SEP> eluiert <SEP> mit <SEP> Chlo rofonn-Methanol-[95:5], <SEP> <B>[90:101</B> <SEP> und <SEP> <B>[80:201)</B> <SEP> geben
<tb> aus <SEP> Methanol-Äther <SEP> noch <SEP> <B>396</B> <SEP> mg <SEP> krist. <SEP> Monoanhy dro-ouabagenin <SEP> vom <SEP> Smp. <SEP> <B>286-301'.</B>
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<I>Papierchromatographie:
<SEP> Rf-Werte <SEP> bei <SEP> 20-22'</I>
<tb> System <SEP> Wasser/Toluol <SEP> Wasser/
<tb> Butanol-(1:1), <SEP> Butanol,
<tb> <B>6</B> <SEP> Stunden <SEP> <B>15-16</B> <SEP> Stunden
<tb> Ouabagenin <SEP> <B>0,13</B> <SEP> 0,44
<tb> Monoanhydro- <SEP> <B>0,27 <SEP> 0,63</B>
<tb> ouabagenin
<tb> 1,19-Isopropyliden- <SEP> 0,46 <SEP> <B>0,79</B>
<tb> ouabagenin
<tb> Tetraanhydro- <SEP> 0,84 <SEP> <B>0,90</B>
<tb> <U>ouabagenin</U> <I>Beispiel 2</I> Monoanhydro-ouabagenin <I>aus</I> Ouabagenin 104 mg Ouabagenin vom Smp. 240-250' (pa- pierehromatographisch rein)
werden mit<B>5</B> ccm 96- proz. Athanol und<B>0,03</B> ccrn konz. HCI <B>30</B> Minuten unter Rückfluss gekocht.
Der nach Eindampfen im Vakuum erhaltene Rückstand gibt aus Methanol- Äther 44 mg krist. Monoanhydro#-ouabagenin vom Sinp. 270-276' (Zers.). Nach Mischsmp. und Pa- pierchromato,graphie identisch nüt Präparat erhalten aus 1,19-Isopropyliden-ouabagenin.
<I>Beispiel<B>3</B></I> Monoanhydro-ouabagenin <I>aus</I> Ouabain <B>1,0 g</B> Ouabain (Spm. 184-187', papierehromato- graphisch rein) wird mit<B>50</B> ml einer<B>96</B> 11.10 äthanoli- sehen Lösung von<B>0,3</B> cem konzentrierter HCI wäh rend<B>30</B> Minuten am Rückfluss gekocht. Nach Ein dampfen zur Trockne und weiterem Eintrocknen des Rückstandes durch Eindampfen mit Benzol erhält man<B>0,95 g</B> rohes Produkt.
Die Papierehromatogra- phie zeigt, dass Monoanhydro-ouabagenin vorhanden ist, das identisch ist mit dem Präparat aus Beispiel<B>1</B> und 2.
Process for the production of a new epoxy compound Process for the production of the previously unknown epoxy steroid, of the formula <B> 1, </B>
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characterized in that oaabain, 1,19-isopropylidenouabagenin or oaabagenin are treated in alcoholic solution with hydrochloric acid.
The method is preferably carried out as follows. 1,19-Isopropylidene-ouabagenin is in aqueous alcohol with 0.05-n. Hydrochloric acid heated for <B> 30 </B> to <B> 60 </B> minutes at reflux temperature. The solution is evaporated to dryness in vacuo and then worked up by known methods. The. new epoxy steroid is also obtained from ouabagenin itself, if from this for example <B> 0.05 </B> to 1-n. Hydrochloric acid is split off for <B> 30 </B> to <B> 60 </B> minutes at reflux temperature.
Finally, the new epoxy steroid can also be obtained by using 0.05-n from the glycoside Ouabin. Hydrochloric acid splits off water for <B> 30 </B> minutes at reflux temperature.
Monoanhydro-ouabagenin is characterized by the la, lla-epoxy group, which is new in the steroid series. The new compound produced according to the method has the constitution of la, 11a-epoxy-3ss, 5,14,19-tetrahydroxy-cardden- (20,22) -o, lids (la, lla-epoxy -strophanthidol). According to the UV spectrum, [A.ax <B> = 217 </B> with (log e <B> = </B> 4.17) (alcohol)] the butenolide ring of monoanhydro-ouabagenin is intact . No yellow coloration is observed with tetranitromethane in chloro form.
The compound prepared according to the invention is suitable as an intermediate product for the synthesis of therapeutically active steroids. In the examples below, all temperatures are given in degrees Celsius. The melting points are corrected. <I>Example<B>1</B> </I> Monoanhyclro-ouabagenin (la, lla-epoxy-31) ', 5,14,19-tetrahydroxy-carden- (20,22) -olide;
<B> 1 </B> aj <B><I>1</I> </B> a-epoxy-strophanthidol <I> from </I> 1,19-isopropylidene-ouabagenin <B> 6.0 g </B> 1,19-iso-propylidene-ouabagenin of melting point <B> 282-288 '</B> are <B> 600 </B> ccm 96 percent. Ethanol and <B> 3.5 </B> cem HCI <B> (= </B> 0.05-n. HCI) <B> 1 </B> hour under reflux.
It is then evaporated to dryness in vacuo and the residue is crystallized from methanol-ether. The result is <B> 1.90 g </B> crystalline. Monoanhydro-ouabage, nin of melting point <B> 262-275 '. </B> After recrystallization from methanol-ether, needles of melting point <B> 274-275' </B> (decomp.) Or . 306-316 '(dec.)
(Kofler's block); [a] 22 = +46 '2' (c <B> = </B> 0.467 in methanol). <B> D </B> A solution in methanol-chloroform does not turn yellow with tetranitromethane. IR spectrum. (KBr) bands at about <B> 2.93 ss </B> (OH), 5.54, u and <B> 5.76 </B> g (C = O, butenolide ring), <B> 6.20 </B> tt <B> (C = C, </B> butenolide ring).
The mother liquor residues <B> (2.3 g) </B> are chromatographed on <B> 69 g </B> A1201. <B> 230 </B> ccm of solvent per fraction are used for subsequent washing. Fraction <B> 1 </B> (eluted with chloroforin-methanol- [99: 1]) gives 12 mg of amorphous material.
Fraction 2 <B> (591 </B> mg elu-
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ated <SEP> with <SEP> chloroform-methanol- [99: 1]) <SEP> emits <SEP> <SEP> methanol-ether <SEP> <B> 168 </B> <SEP> mg <SEP > slowly <SEP> crystallizing <SEP> Tetra anhydro # -ouabageiün <SEP> from <SEP> m.p. <SEP> <B> 121-130 '. </B> <SEP> After <SEP> to crystallize <SEP> from <SEP> acetone-ether <SEP> and <SEP> methanol-ether
<tb> Prisms <SEP> from <SEP> Smp. <SEP> 238-240 '; <SEP> [a] 23 <SEP> <B> = <SEP> + <SEP> 18 '<SEP> </B> <SEP> 2'
<tb> <B> D </B>
<tb> (c <SEP> <B> = <SEP> 0.830 </B> <SEP> in <SEP> methanol). <SEP> A <SEP> solution <SEP> in <SEP> chloro form <SEP> gives <SEP> with <SEP> tetranitromethane <SEP> a <SEP> strong <SEP> yellow color. <SEP> UV spectrum:
<SEP> <B> = </B> <SEP> 214.5 <SEP> my, <SEP> log <SEP> e <SEP> <B> = </B> <SEP> 4.42,
<tb> Shoulder <SEP> M <SEP> <B> 255-265 </B> <SEP> my, <SEP> log <SEP> e <SEP> <B> = <SEP> 2.7 </ B > <SEP> in <SEP> ethanol.
<tb> Microhydration <SEP> with <SEP> Pt <SEP> in <SEP> glacial acetic acid: <SEP> 4.939 <SEP> mg <SEP> Consume substance <SEP> <SEP> 1.274 <SEP> ccm <SEP> < U> H. </U> <SEP> <B> (0 '/ 760 </B> <SEP> mm). <SEP> Ber.
<tb> for <SEP> 4 <SEP> H ,: <SEP> 1.208 <SEP> ccm.
<tb>
The <SEP> fractions <SEP> 3-14 <SEP> (cluting <SEP> with <SEP> Chloroforni-Me> ethanol- [99: 1], <SEP> <B> [98: 2] </B> <SEP> and <SEP> <B> [97:31) </B> <SEP> give <SEP> <B> 903 </B> <SEP> mg
<tb> amorphous <SEP> material.
<tb>
The <SEP> fractions <SEP> <B> 15-25 <SEP> (656 </B> <SEP> mg, <SEP> eluted <SEP> with <SEP> chlorofon-methanol [95: 5], Enter <SEP> <B> [90: 101 </B> <SEP> and <SEP> <B> [80: 201) </B> <SEP>
<tb> from <SEP> methanol-ether <SEP> still <SEP> <B> 396 </B> <SEP> mg <SEP> crist. <SEP> Monoanhy dro-ouabagenin <SEP> from <SEP> Smp. <SEP> <B> 286-301 '. </B>
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<I> paper chromatography:
<SEP> Rf values <SEP> at <SEP> 20-22 '</I>
<tb> System <SEP> water / toluene <SEP> water /
<tb> butanol- (1: 1), <SEP> butanol,
<tb> <B> 6 </B> <SEP> hours <SEP> <B> 15-16 </B> <SEP> hours
<tb> Ouabagenin <SEP> <B> 0.13 </B> <SEP> 0.44
<tb> Monoanhydro- <SEP> <B> 0.27 <SEP> 0.63 </B>
<tb> ouabagenin
<tb> 1,19-Isopropylidene- <SEP> 0.46 <SEP> <B> 0.79 </B>
<tb> ouabagenin
<tb> Tetraanhydro- <SEP> 0.84 <SEP> <B> 0.90 </B>
<tb> <U> ouabagenin </U> <I> Example 2 </I> Monoanhydro-ouabagenin <I> from </I> Ouabagenin 104 mg ouabagenin with a melting point of 240-250 '(pure paper chromatography)
are <B> 5 </B> ccm 96 percent. Ethanol and <B> 0.03 </B> ccrn conc. HCI refluxed <B> 30 </B> minutes.
The residue obtained after evaporation in vacuo gives 44 mg of crystalline from methanol-ether. Monoanhydro # -ouabagenin from Sinp. 270-276 '(dec.). After Mischsmp. and paper chromatography identical to the preparation obtained from 1,19-isopropylidene-ouabagenin.
<I> Example<B>3</B> </I> Monoanhydro-ouabagenin <I> from </I> Ouabain <B> 1.0 g </B> Ouabain (Spm. 184-187 ', paper rhomato- graphically pure) with <B> 50 </B> ml of a <B> 96 </B> 11.10 ethanolic solution of <B> 0.3 </B> cem concentrated HCI during <B> 30 </ B> refluxed for minutes. After evaporation to dryness and further drying of the residue by evaporation with benzene, <B> 0.95 g </B> crude product is obtained.
The paper chromatography shows that monoanhydro-ouabagenin is present, which is identical to the preparation from example <B> 1 </B> and 2.