CH359013A - Verfahren zur Herstellung von Beifuttermitteln - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von BeifuttermittelnInfo
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Description
Verfahren zur Herstellung von Beifuttermitteln Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstel lung von Beifuttermitteln aus Melasseschlempen oder Melasseabläufen. Diese Beifuttermittel enthalten vor zugsweise Vitamin B12 und/oder Antibiotica und/oder den APF-(Animal-Protein-Factor)-Wirkstoffkomplex.
Man hat die Melasseschlempen bereits auf ver schiedene Weise zu verwerten versucht. So hat man Brennereischlempen als Nährmedium zum Züchten von Hefe verwendet. Doch hat dieses Verfahren den Nachteil, dass dabei ein sehr hoher Schwefelsäurever- brauch eintritt, da die aus den organischen Salzen freigemachten organischen Säuren von der Hefe ver braucht werden und dadurch der pH-Wert fortlaufend nach der alkalischen Seite verschoben wird, wenn nicht dauernd Schwefelsäure zugesetzt wird.
Es wurde überraschenderweise festgestellt, dass man Melasseschlempen aller Art, oder Melasse-Ab läufe, z. B. aus der Glutaminsäureherstellung, gege benenfalls nach einer vorherigen Sterilisation, der Einwirkung von Spaltpilzen, z. B. Strahlenpilzen oder Fadenpilzen, mit Erfolg unterwerfen kann. Dies ist deswegen als überraschend anzusehen, weil nicht vor auszusehen war, dass sich Melasseschlempen oder -Abläufe zur Züchtung von solchen Pilzen eignen würden, da die Hefen unter den Mikroorganismen eine Sonderstellung einnehmen und anders geartete Stoffwechselvorgänge aufweisen.
Das überraschende Moment liegt auch darin, dass die Melasseschlempen und -Abläufe der Gärungsindustrie nur wenig assi- mi lierbaren Stickstoff enthalten, da ein grosser Teil hiervon durch die zur Vergärung verwendeten Mikro ben bereits aufgenommen worden ist und in der Schlempe vorwiegend nur schwer assimilierbarer Be tainstickstoff verbleibt; dennoch werden die in der Melasseschlempe verbliebenen Reststickstoffverbin dungen von den genannten Mikroorganismen zu einem grossen Teil assimiliert. Diese überraschende Feststellung kann für die Herstellung von Beifuttermitteln angewendet werden.
Das erfindungsgemässe Verfahren zur Herstellung von Beifuttermitteln ist dadurch gekennzeichnet, dass man Melasseschlempen oder -Abläufe der Einwirkung von Spalt- oder Fadenpilzen unterwirft.
Zweckmässigerweise setzt man bei der Durch führung des erfindungsgemässen Verfahrens der Schlempe oder dem Ablauf Autolysate, Plasmolysate, Thermolysate, Cytolysate oder Hydrolysate von Mikroorganismen, das heisst deren Abbauprodukte zu. Hierdurch werden die durch Gift- oder Reizstoffe der Substrate ausgelösten Gärhemmungen vermindert oder beseitigt. Ausserdem werden auch das Wachstum und die physiologische Leistung der Spalt- oder Fadenpilze infolge des Gehalts an hochmolekularen Stickstoffverbindungen und Wirkstoffen der Cyto- lysate usw. gesteigert.
Im allgemeinen verwendet man hierbei vorteilhafterweise die Autolysate, Plasmo- lysate, Thermolysate, Cytolysate oder Hydrolysate derjenigen Organismen, die bei der' Vergärung von Melasse entstanden sind. Hierdurch ergibt sich der besondere Vorteil, dass man nicht nur die Schlempen, sondern auch die sonst als unbrauchbar anfallenden Kulturen aus der Melassegärung, z.
B. bei einer Citro- nensäuregewinnung, einer Verwertung zuführen kann.
Man kann weiter bei der Ausübung des. erfin dungsgemässen Verfahrens den Schlempen oder Ab läufen Nährsalze und bzw. oder Spurenelemente zu geben.
Vorteilhaft ist es, die Schlempen, z. B. aus der Citronensäuregärung, mit einem Vitamin B12 bilden den Mikroorganismus., wie Streptomyces olivacous, zu vergären, um dadurch aus den Schlempen einen wichtigen Ernährungsfaktor mit oder ohne APF- Wirkung zu gewinnen. In gleicher Weise kann man auch andere Mikroorganismen für denselben Zweck einsetzen, z. B. solche, die Antibiotika bilden, wie Streptomyces aureofaciens.
Der Vorteil des Verfahrens nach der vorliegenden Erfindung besteht zusammenfassend im wesentlichen also darin, dass bei der Vergärung der Schlempe ein Zusatz von Schwefelsäure nicht mehr erforderlich und die Gärführung einfacher und wirtschaftlicher ist.
Die Einsatzmöglichkeit des Verfahrens nach der vorliegenden Erfindung beschränkt sich nicht auf die Melasseschlempen aus der Nahrungsmittelindustrie. Es können auch die bei der anaeroben Methangärung der Melasseschlempen anfallenden Abläufe verwendet werden. Auch hierbei ist es zweckmässig, Abbaupro dukte von Mikroorganismen, das heisst Autolysate, Thermolysate, Plasmolysate, Cytolysate oder Hydro- lysate der Mikroorganismen mit einzusetzen. Bei der Methangärung wird bekanntlich die organische Sub stanz der Melasse zu 50 % abgebaut, ohne dass hierbei Verluste an Stickstoff entstehen.
So erweist sich die Schlempe auf Grund ihres Stickstoffgehaltes und der Spurenelemente als besonders geeignetes Nährmedium für Mikroorganismen.
Der Aufschluss von Mikroorganismen, der bei der Vergärung der Schlempen mit verwendet werden kann, kann auf verschiedene Weise erfolgen. Dies hängt von der Aufschliessbarkeit der Mikroorganismen ab. In besonders einfachen Fällen genügt schon eine Sterilisation, um den Aufschluss herbeizuführen. In anderen Fällen kann anstelle der Thermolyse die Autolyse oder Plasmolyse treten. In schwierigeren Fällen, z. B. bei Aspergillus-Arten, bedient man sich zweckmässigerweise der Hydrolyse. Der Unterschied besteht hier darin, dass bei der Autolyse die Zellwände der Mikroorganismen im wesentlichen erhalten blei ben und nur der Zellinhalt durch den enzymatischen Vorgang gewonnen wird, während bei der Hydrolyse auch die Zellwand abgebaut wird und daher in den Nährboden übergeht.
Die Spaltprodukte gerade dieser Zellwände haben sich für einige dieser Mikroorga nismen als besonders günstige Nährböden erwiesen. Beispielsweise wächst der Lactobazillus bifidus auf einem Hydrolysat viel besser als auf einem Autolysat einer Hefe.
Die Hydrolyse kann partiell oder vollständig in saurem oder alkalischem Medium erfolgen. Die Kon zentration an Säure bzw. Lauge kann in weiten Gren zen variieren, wobei man für höhere Temperaturen entsprechend niedrigere Konzentration an chemischen Reagenzien wählt. Die in einem offenen oder geschlos senen Gefäss durchzuführende Hydrolyse wird im allgemeinen nicht bis zu einer vollständigen Aufspal tung der Gerüst- und Inhaltstoffe gebracht. Einer Hydrolyse unterwirft man z. B. Pilzarten aus der Citronensäure-, Glukonsäure-, Itaconsäuregärung oder auch aus der Penicillinfabrikation.
In besonderen Fällen, z. B. bei schwer aufschliess- baren Mikroorganismen, ist es auch möglich, den Aufschluss der Pilze (Cytolyse) durch die Tätigkeit besonderer anderer Organismen zu erreichen, wobei man die Masse gleichzeitig rühren und gegebenenfalls belüften kann. Zur näheren Erläuterung dieses Vor ganges folgt nachstehend ein Cytolyse-Beispiel.
In einer Gärtrommel werden 50 kg feuchter Pilz substanz mit einem Trockengewicht von etwa 11 kg mit 5 Liter einer in submerser Kultur gewonnenen Suspension von Torula-Hefe geimpft und mit 25 Liter Wasser versetzt. Nach 24stündigem Rotieren der Trommel bei 30 bis 35 kann die nunmehr dick flüssige, aufgeschlossene Pilzmasse der Trommel ent nommen werden. Durch diesen Aufschluss werden etwa 40 % der Trockensubstanz des Mycels in wasser lösliche Form übergeführt.
Anstelle der Torula-Hefe kann z. B. Streptomyces olivaceus oder Penicillium claviforme verwendet wer den. Beispiel 1!! 200 Liter Melasseschlempe aus der Gluconsäure- gewinnung (4,3g Stickstoff/Liter, 1,9g reduzierende Substanz, berechnet als Glucose/Liter, 0,13g P2O5 im Liter, Balling 10 , pH-Wert etwa 5) werden mit 1 kg Calciumcarbonat und 2 g Cobaltchlorid versetzt, eine Stunde bei 120 sterilisiert, auf einen pH-Wert von 5 gebracht, mit 8 % einer Vorkultur von 5treptomyces olivaceus beimpft und zur Herstellung eines haltigen Futtermittels submers, aerob 3-4 Tage lang bei 35 vergoren.
Die endvergorene Maische mit einem Trockensubstanzgehalt von etwa 5 %, deren Zelltrockensubstanz etwa zur Hälfte aus Protein be steht, enthält etwa 1 mg Vitamin B12/Liter und wird zur Trockne verarbeitet.
Die 200 Liter Melasseschlempe können auch durch 200 Liter Abläufe praktisch gleicher Zusam mensetzung aus der Citronensäureherstellung ersetzt werden. Es ist auch möglich, Gemische aus Melasse- schlempe anderer Art und Abläufe der Citronen- säuregärung einzusetzen.
<I>Beisiel 2</I> 1000 kg abgepresste, bei" 70 eine Stunde thermo- lysierte Pilzdecke mit 15-25 % Trockensub- stanz aus der Citronensäureherstellung, 500 kg Melasseablauf, 80 Liter Melasse mit 3500 Liter Wasser auf etwa 1,6 % Zuckergehalt verdünnt, 3 kg Calciumcarbonat,
10 g Cobaltchlorid werden 1 Stunde bei 120 sterilisiert, auf einen pH- Wert von 5 gebracht, mit 5% einer Vorkultur von Streptomyces olivaceus beimpft und zur Herstellung eines Vitamin B1.2-haltigen Zusatzfuttermittels sub- mers, aerob 3-4 Tage lang bei 35 vergoren.
Die endvergorene Maische mit einem Trockensubstanz- gehalt von etwa 10% enthält etwa 1,2 mg Vitamin B12 im Liter. Die Pilzdecke kann auch autolysiert oder plasmolysiert sein.
<I>Beispiel 3</I> Zur Züchtung von Bacillus megatherium können die in den Beispielen 1 und 2 angegebenen Zusam mensetzungen der Nährmedien verwendet werden, nur mit dem Unterschied, dass der Melassezusatz um 10 oder 20% erhöht wird. Die Gärzeit beträgt 4 bis 5 Stunden. Im übrigen wird in gleicher Weise ver fahren.
Beispiel 4!! 200 Liter der Abläufe aus der Methangärung (5,1 % Trockenmasse, 2,3 % organische Substanz, 3,3 % Asche) der Melasseschlempen oder Melasse abläufe werden 15 Minuten bei 180 kontinuierlich sterilisiert, auf den pH-Wert 6 eingestellt und in gleichen oder grösseren Mengen als in den vorstehen den Beispielen angegeben, als Nährsubstrat und gärungsfördernder Zusatz verwendet, mit einer Kultur von Streptomyces olivaceus beimpft und 48 Stunden submers, aerob vergoren, um ein Erzeugnis zu erhal ten, das durch Eindampfen ein Viehzusatzfuttermittel liefert. Die Trockensubstanz beträgt 6,5 % und ent hält ungefähr 0,8 mg Vitamin B12 im Liter und wird zur Verwendung als Futtermittel zur Trockne verarbeitet.
Der bei der Methangärung entstehende Schlamm wird nach der Autolyse oder Thermolyse den Ab läufen zugemischt.
<I>Beispiel 5</I> 50 kg frisches, noch feuchtes Pilzmycel (Asper- gillus niger) von der Citronensäuregärung werden mit 50 Liter Mutterlauge von der Citronensäuregärung versetzt, mechanisch zerkleinert und bei 180 steri lisiert. Dieser Mycelbrei wird nun in eine Gärtrom- mel gebracht und mit 10 Liter einer Schüttelkultur von Streptomyces olivaceus beimpft. Nach einer Laufzeit von 2-4 Tagen, während der die Tempe ratur auf 25-30 gehalten wird, ist der Prozess beendet. Die aufgeschlossene Pilzmasse wird auf einem Walzentrockner vom Wasser befreit und schliesslich gemahlen.
Man erhält etwa 13 kg eines bräunlichen Produkts, das auf Grund seines Gehaltes an wachstumfördernden Wirkstoffen (Vitamine, Fer mente usw.) ein ausgezeichnetes Futtermittel bzw. Zusatzfuttermittel darstellt.
<I>Beispiel 6</I> In einem geschlossenen Gefäss mit einem einge bauten langsam laufenden Schaufelrührwerk werden 20 kg abgepresste Pilzmasse (Aspergillus niger) von der submersen Gluconsäuregärung mit 30 Liter kontinuier lich sterilisierterMelasseschlempe(Brennereischlempe) versetzt und sterilisiert. Die Melasseschlempe ist folgendermassen zusammengesetzt: 4,5 g Stickstoff im Liter, 1,7 g reduzierende Substanz als Glucose berechnet im Liter, 0,15 g P,O5 im Liter (Balling 11 , pH-Wert 5,2). Die erkaltete, dickflüssige Pilzmasse wird hierauf mit 5 Liter einer Suspension von einer submersen Kultur herangezüchtetem Streptomyces griseus beimpft und 24-48 Stunden unter ständigem Rühren und schwacher Belüftung auf einer Temperatur von 28 bis 30 gehalten.
Die aufgeschlossene Pilzmasse wird hierauf abgelassen und getrocknet. Man erhält 7 kg trockenes Material mit einem durchschnittlichen Feuchtigkeitsgehalt von 5 %, das als Futtermittel ver wendet werden kann oder zur Isolierung seiner wert vollen Inhaltsstoffe, wie Antibiotika, z. B. Strepto mycin, Streptydin und andere, weiter verarbeitet wird. <I>Beispiel 7</I> 4 kg gewaschene, zerkleinerte Pilzdecke (Asper- gillus wentii) werden mit 20 Liter Melasseablauf von der Citronensäureherstellung, wie sie nach Fällung des Calciumcitrats anfällt (Trockensubstanzgehalt rund 10 %) und 80 mg Cobaltnitrat versetzt, mit Wasser auf 40 Liter aufgefüllt und sterilisiert. Der pH-Wert wird mit Natronlauge auf 6-7 eingestellt.
Das erkaltete Medium beimpft man nun mit 4 Liter einer Submerskultur von Streptomyces olivaceus. Die Anzucht des Impfmaterials erfolgt in Schüttelkultur, wobei sich ein Mycel-Melasse-Schlempe-Medium gut eignet. Das beimpfte Nährmedium wird dann in einem Fermenter unter Rühren und Zuführen von 600 Liter Luft/Stunde bei 30 belüftet. Nach 3-4 Tagen wird das dickflüssige Medium abgelassen und schonend ge trocknet. Man erhält etwa 2,5 kg eines Trockenpro duktes mit einem Vitamin B12 Gehalt von 10 bis 30 Mikrogramm/Gramm, das als wachstumförderndes Zusatzfuttermittel Verwendung findet oder zur Ge winnung von Inhaltstoffen, z. B. Vitamin B12 verar beitet werden kann.
<I>Beispiel 8</I> 200 Liter Abläufe aus der Glutaminsäureherstel lung aus Melasseschlempe werden wie nach Beispiel 1 behandelt die endvergorene Maische mit einem Trockensubstanzgehalt von etwa 4%, von welcher etwa die Hälfte Protein ist, enthält etwa 0,8 mg Vitamin B12 im Liter.
Sollen aus dem ;gern. den obigen Beispielen erhal tenen Trockenprodukten Vitamin Bit und/oder Anti biotika in reiner Form gewonnen werden, so müssen die Mikroben nach etwa 60stündiger Gärzeit bei Ver wendung von Streptomyces olivaceus und nach einer 5stündigen Gärzeit bei Bacillus, megatherium aus der Gärflüssigkeit abzentrifugiert und aus ihnen die Vitamine bzw. Antibiotika durch Extraktion oder dergleichen in bekannter Weise .gewonnen werden.
<I>Beispiel 9</I> 50 kg gewaschene, noch feuchte Pilzsubstanz von der Citronensäuregärung werden grob zerkleinert, sterilisiert und in einer Gärtrommel mit 5 Liter sterili siertem Melasseablauf und 5 Liter einer Submers- kultur von Streptomyces olivaceus beimpft. Die Heran züchtung der Submerskultur erfolgt auf einer für das Wachstum von Streptomyceten günstigen Nährflüs sigkeit, z.
B. dem bei der Citronensäuregärung nach Abtrennung der Citronensäure anfallenden Melasse ablauf, entweder nach einem Rührverfahren oder in Schüttelkultur. Nach Beimpfung wird die Temperatur in der rotierenden Gärtrommel auf etwa 25-30 gehalten. Der Aufschlussprozess ist nach 24-48 Stun den beendet und die aufgeschlossene Pilzmasse kann nun auf einer Trockenwalze oder irgendeinem anderen geeigneten Trockner vom Wasser befreit werden. Man erhält ungefähr 10 kg Trockenprodukt, das ein ausgezeichnetes Futtermittel darstellt.
Beispiel 10 In einem geschlossenen, mit einem Rührwerk versehenen Behälter werden 30 kg zerkleinerte Pilz substanz sterilisiert und nach dem Erkalten mit 5 Liter sterilisiertem Melasseablauf und 5 Liter einer dichten, in submerser Kultur gezüchteten Mycelsuspension von Penicillium cloviforme beimpft. Zur Gewinnung des Impfmaterials eignen sich alle das Wachstum von Penicillien begünstigenden Nähr flüssigkeiten, z. B. Heuaufgüsse, Weichwasser, Ab lauf von der Citronensäurefabrikation, Schlempe oder deren Kombinationen untereinander und mit anderen bekannten Nährböden. Die beimpfte Pilzmasse wird schwach belüftet und bei einer Temperatur von etwa 25 durch das Rührwerk in ständiger Bewegung ge halten.
Nach 24-48 Stunden wird der Inhalt des Behälters zur Weiterverarbeitung (z. B. Gewinnung von Fermenten, Vitaminen oder anderen Inhalts stoffen) abgelassen. Getrocknet und gemahlen stellt er ein wertvolles, zur Aufzucht von Jungtieren beson ders geeignetes Futtermittel dar. Ausbeute an Trok- kenmasse etwa 7 kg.
Beispiel 11 4 kg gewaschene, zerkleinerte Pilzmycelien (aus der Citronensäure-, Gluconsäure-, Fumarsäuregärung und/oder Gewinnung von Antibiotika und derglei chen) werden mit 20 Liter Melasseschlempe von der Citronensäureherstellung, wie sie nach Fällung des Calciumcitrats anfällt (Trockensubstanzgehalt rund 10%) und 80 mg Cobaltnitrat oder äquivalenten anderen löslichen Cobaltverbindungen versetzt, mit Wasser auf 40 Liter aufgefüllt und sterilisiert. Der pH-Wert wird mit Natronlauge, Kalkmilch gegebenen falls mit Ammoniak einzeln oder im Gemisch auf den Bereich pH 6 bis 7 eingestellt. Das erkaltete Medium beimpft man nun mit 4 Liter Submerskultur von Streptomyces olivaceus. Die Anzucht des Impf materials erfolgt in Schüttelkultur, wobei sich ein Mycel-Melasseschlempe-Medium gut eignet.
Das be- impfte Nährmedium wird dann in einem Fermenter unter Rühren mit 600 Liter/Stunde bei 30 belüftet. Nach 3-4 Tagen wird das dickflüssige Medium ab gelassen. Durch die vorstehenden Massnahmen wird bewirkt, dass der Aufschluss der eingesetzten Pilz- mycelien, ein derartiges Aufschlussprodukt ergibt, dass dieses als wertvolles Futtermittel im flüssigen, einge dickten oder trockenen Zustand verwendet werden kann.
Gemäss den geschilderten Behandlungen erhält man nach einer Entwässerung etwa 2,5 kg eines Trockenproduktes mit einem Vitamin B12 Gehalt von 10 bis 30 Mikrogramm/g, das als wachstumförderndes Zusatzfuttermittel Verwendung findet oder zur Ge winnung der darin enthaltenen Wirkstoffe weiter verarbeitet werden kann. Beispiel 12 Es wird gemäss Beispiel 11 gearbeitet, aber vor dem Sterilisieren der Pilzmycelien mit den Melasse- schlempen der Citronensäuregärung werden noch anorganische oder organische Stickstoffquellen einzeln oder im Gemisch, z. B.
Nitrate, Ammoniumsalze oder Harnstoffe, Fischmehl, Sojabohnenmehl, Weizenkleie, Peptone, Fleischextrakte und dergleichen zugegeben, so dass etwa 0,01 bis 0,06 % Stickstoff, bezogen auf die Gesamtflüssigkeit, zusätzlich eingebracht wird. Durch diese Massnahme werden die Fermentsysteme der später zugefügten Submerskultur von Strepto- myces olivaceus und/oder anderen Mikroorganismen, z. B. Bacillus megatherium, Streptomyces aurofaciens und dergleichen für den Aufschluss der Pilzmycelien besonders angepasst.
Beispiel 13 Es wird gemäss Beispiel 11 gearbeitet, jedoch wird an Stelle des Streptomyces olivaceus jetzt eine Mischkultur mindestens bestehend aus einem Anti- biotika-Bildner, z. B. Streptomyces rimosus und einem Vitamin-, z. B. B12-Bildner, wie z. B. Streptomyces olivaceus zugefügt, wodurch ein besonders guter Auf schluss der Pilzmycelien erreicht wird.
Vorteilhaft ist, dass die erhaltenen Aufschluss- produkte besonders biologisch wertvolle Wirkstoffe enthalten, z. B. solche mit APF-Wirkungen. Ausser dem sind solche Mischkulturen gegen Fremdinfek tionen besonders widerstandsfähig.
Es kann aber auch so gearbeitet werden, dass man die Mischkultur erst entstehen lässt, also nach der Sterilisation, mit einem Mikroorganismus aufschliesst und danach einen zweiten Mikroorganismus oder Mischkulturen von Mikroorganismen zugibt, wobei besondere Vorteile auftreten können, so dass sich der Aufschluss der Pilzmycelien besonders optimal gestaltet und der Gehalt des Aufschlussproduktes an biologischen Wirkstoffen nach der Art und Menge in der verschie densten Weise gesteuert werden kann.
<I>Beispiel 14</I> 40 kg gewaschene Pilzmycelien (Aspergülus niger) aus der Citronensäureherstellung, werden mit 100 Liter Melasseschlempe aus der Citronensäureherstellung, die nach Abtrennung der Citronensäure anfällt, mit 11 kg Glucose (technisch) oder andere äquivalente Mengen Glucose enthaltende Lösungen (z.
B. hydroly- sierten Kohlehydraten), 0,25 kg Diammoniumphos- phat mit Wasser auf 240 Liter aufgefüllt und bei 120 in 30 Minuten sterilisiert, wobei sich ein pH- Wert zwischen 6-7 einstellt.
Das erkaltete Medium beimpft man mit 20 Liter einer dichten Suspension von Lactobacillus casei, der in submerser Kultur herangezüchtet wurde. Das beimpfte Nährmedium wird unter Zugabe von etwa 1,5-2,5 kg Calciumcarbonat in einem Fermenter ohne Belüftung bei 30 langsam 20 bis 30 Stunden gerührt, wobei die Pilzdecke vorzüglich aufgeschlos sen wird.
Um ein biologisch wertvolles Pilzdeckenauf- schlussprodukt zu gewinnen, werden dem Ansatz 500 mg Cobaltnitrat zugefügt und zusätzlich mit 20 Liter einer Submerskultur von Propionibacterium freudenreichii beimpft. Unter weiterem Rühren wird das Produkt anaerob einem weiteren Aufschliessungs- prozess unterworfen, wobei zusätzlich biologisch wertvolle Umsetzungsprodukte entstehen, wie z. B. Vitamin B12, was nach bekannten Methoden isoliert werden kann. Auch lassen sich aus dem Aufschlie ssungsprodukt wertvolle Viehzusatzfuttermittel her stellen.
Beispiel 15 25 kg Pilzdecke (Aspergillus niger), 250 Liter Melasseschlempe von der Citronensäureherstellung, die nach Ausfällung der Citronensäure als Calcium salz erhalten wird, 50 Liter entrahmte Frischmilch (der Milchzusatz kann durch andere geeignete Eiweiss- bzw. Kohlenhydratquellen wie Sojamehl bzw. Molken pulver ersetzt werden), 0,5 kg Diammoniumphosphat, 2,5 kg Calciumcarbonat und 200 Liter Wasser werden durch Kochen sterilisiert und mit 25 Liter einer Kultur eines nisinbildenden Stammes von Strepto- coccus lactis beimpft. Hierauf wird das Medium in einem Fermenter unter langsamem Rühren (z. B. etwa 75 Umdrehungen/Min.) ohne Belüftung bei 30 ge halten.
Nach l2-16 Stunden ist der Aufschluss der Pilzdecke sowie die Milchsäuregärung beendet. Die Gärlösung enthält 1000-2000 Einheiten Nisin je ml. Nach Eindampfung erhält man ein durch seinen Ge halt an Milchsäure und Milchsäurebakterien gutes Silierungsmittel, das den besonderen Vorzug hat, auf Grund seines Nisingehaltes die im Silofutter gefürch tete Entwicklung von Buttersäurebakterien zu unter drücken.
Das Trockenprodukt mit dem Antibiotikum Nisin kann auch als wachstumsförderndes Betfuttermittel für die Tierernährung Verwendung finden.
Beispiel 16 Es wird gemäss Beispiel 15 gearbeitet. Nach Ab schluss des Wachstums von Streptococcus lactis beimpft man durch Zugabe in den Fermenter mit 25 Liter einer Kultur von Propionibacterium freuden- reichii. Nach einer Gärzeit von 3-4 Tagen unter langsamem Rühren wird der Ansatz getrocknet und ergibt ein Betfuttermittel mit antibiotischer Wirksam keit (Nisin) und Vitamin B12 -Aktivität.
Eine andere Verwendung als Silierungsmittel ist möglich auf Grund des Gehaltes an Propionsäure, Milchsäure und Nisin. Ein besonderer Vorteil ist, dass dieses Silagemittel das Wachstum von Butter säurebakterien unterdrückt und die erhaltenen Silo futtermittel das wertvolle Vitamin B12 enthalten. Beispiel 17 Der Aufschluss der Pilzdecke (Pilzmycelien von Aspergillus-Arten) in Anwesenheit von Melasseab läufen mit Propionibacterium freudenreichii gelingt auch ohne vorherige Behandlung des Gärsubstrates mit Milchsäurebakterien. Dazu werden 10 kg Pilz- mycelien mit 75 Liter Melasseabläufe, 0,1 kg Di- ammoniumphosphat und 0,5-1 kg Calciumcarbonat versetzt, auf 100 Liter Wasser aufgefüllt und bei l20 C sterilisiert.
Das so vorbereitete Substrat beimpft man mit 5 Liter einer unter anaeroben Bedingungen herangezüchteten Kultur von Propionbacterium freu- denreichii. Hierauf wird das Medium in einem Fer- menter unter langsamem Rühren (60-100 U/Min.) ohne Betlüftung bei 30 C gehalten. Die Verwendung von Propionibacterium freudenreichii hat den Vorteil, dass die Gärung in stärker saurem Milieu (PH-Ver- lauf etwa von 7 abfallend bis 4,7) vor sich geht, und die Gefahr der Infektion durch Fremdorganismen be seitigt ist. Nach 3-4 Tagen Gärzeit kann der Ansatz zu einem Zusatzfuttermittel mit beachtlichem Vitamin B12-Gehalt aufgearbeitet werden.
Die Ausbeute an Vitamin B12 kann durch Zusatz einer für Propionibacterium freudenreichii vergärbaren Kohlenstoffquellen, z. B. Glucose oder Milchsäure, beträchtlich erhöht werden. Zweckmässig ist es, hierzu glucosehaltige Abläufe oder Melassen mit hohem Invertzuckergehalt zu verwenden.
Claims (1)
- PATENTANSPRUCH Verfahren zur Herstellung von Betfuttermitteln, dadurch gekennzeichnet, dass man Melasseschlempen oder -Abläufe der Einwirkung von Spalt- oder Faden- Pilzen unterwirft. UNTERANSPRÜCHE 1. Verfahren nach Patentanspruch, dadurch ge kennzeichnet, dass man die Melasseschlempen oder -Abläufe vorgängig sterilisiert. 2.Verfahren nach Unteranspruch 1, dadurch ge kennzeichnet, dass man der Melasseschlempe oder dem -Ablauf Autolysate, Plasmolysate, Thermolysate, Cytolysate oder Hydrolysate von Mikroorganismen zusetzt. 3. Verfahren nach Unteranspruch 2, dadurch ge kennzeichnet, dass man die Autolysate, Plasmolysate, Thermolysate, Cytolysate oder Hydrolysate derjenigen Mikroorganismen zusetzt, die bei der Vergärung von Melasse entstanden sind. 4.Verfahren nach Unteranspruch 1, dadurch ge kennzeichnet, dass man den Melasseschlempen oder -Abläufen Nährsalze und bzw. oder Spurenelemente zugibt. 5. Verfahren nach Unteranspruch 1, dadurch ge kennzeichnet, dass man die Melasseabläufe aus der Citronensäuregärung und Thermolysate, Plasmolysate, Autolysate, Cytolysate oder Hydrolysate der dabei entstandenen Pilzdecken sowie einen Vitamin B" bil denden Mikroorganismus, z.B. Streptomyces oliva- ceus, verwendet. 6. Verfahren nach Unteranspruch 1, dadurch ge kennzeichnet, dass man die Melasseabläufe aus der Citronensäuregärung sowie Thermolysate, Plasmoly- sate, Autolysate, Cytolysate oder Hydrolysate der dabei gebildeten Pilzdecken und einen Antibiotika bildenden Mikroorganismus, z. B. Streptomyces aureo- faciens, verwendet. 7.Verfahren nach Unteranspruch 1, dadurch ge kennzeichnet, dass man die Melasseabläufe der anae roben Methangärung und den dabei gleichfalls an fallenden Schlamm nach seiner Autolyse, Thermo- lyse, Plasmolyse, Cytolyse oder Hydrolyse verwendet. B. Verfahren nach Unteranspruch 5, dadurch ge kennzeichnet, dass man die Melasseabläufe aus der Glutaminsäureherstellung verwendet.
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