<B>Procédé de préparation de</B> ptéroy1glutamate diéthylique. La présente invention se rapporte à im procédé de préparation d'une ptéridine subs tituée, soit de ptéroy 1glut.amate diéthy ligue qui, sous une forme tautomère ati moins, ré pond à la.
formi@de suivante
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Suivant l'invention, on prépare ce ptéroyl- glutamate diéthylique en faisant réagir de la 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine, du 2,3-di- hydroxyaerylaldéhyde et du p-aminobenzoyl- glutamate diéthylique.
Le ptéroylglutamate diéthylique obtenu, qui constitue un produit nouveau, est un so lide jaune à orangé, difficilement soluble dans l'eau, mais soluble dans des solvants organi ques et n'ayant pas de point de fusion pré- eis. Il est utile comme intermédiaire pour la préparation d'acide ptéroylglutamique.
La 2,4,5-triamino-6-hy droxy pyrimidine est. un composé connu qui peut exister sous une ou plusieurs formes tautomères. Ces formes tautomères réagissant de manière analogue dans les mêmes réactions chimiques, on peut. les utiliser l'une pour l'autre.
Le 2,3-dihydroxyacry laldéhyde, connu sous le nom de réductone et répondant à la for mule
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existe également sous plusieurs formes tauto- mères.
Le troisième réactif, le p-aminobenzoylglu- tamate diéthylique peut se préparer par action de chlorure de p-nitrobenzoyle sur du glutamate diéthylique et. réduction du groupe nitro en groupe amino.
La. réaction ayant lieu dans le procédé se lon la. présente invention peut être repré sentée par l'équation globale suivante
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On peut effectuer la réaction donnant lieu à la formation du ptéroylglutamate diéthyli- que en mélangeant simultanément les trois réactifs ou en faisant premièrement réagir le second réactif avec l'un des deux autres avant d'ajouter le troisième réactif au mélange réac tionnel, en isolant au non les intermédiaires.
La réaction peut être effectuée dans de l'eau ou dans un solvant organique, de préfé rence dans un liquide organique hydroxylé, tel que l'alcool éthylique, le glycol éthyléni- que ou autres solvants semblables. On peut également utiliser d'autres solvants tels que l'acétone, le benzène, le formamide, etc. La température peut varier entre-la température ambiante et l60 C environ les températures supérieures à 100 C étant préférées. Le temps nécessaire varie naturellement selon la tem pérature et les autres conditions.
On peut utiliser certains agents de conden sation alcalins, tels que l'acétate de sodium, le phosphate disodique, le formiate de sodium, la pyzddine au la diméthyl-aniline, pour augmen ter le rendement.
La réaction a également lieu dans de lar ges limites de pu et ne semble pas qu'il existe une limite d'acidité ou d'alcalinité. Les meil leurs résultats sont toutefois obtenus à un pH compris entre 3 et 5. Les exemples suivants se réfèrent à diver ses mises en oeuvre du procédé selon l'inven tion.
Exemple <I>1:</I> On dissout 5 g de réductone dans 100 cuir- d'eau à 60 C environ en l'espace de 15 mi nutes, puis on refroidit, la solution à. la. tem pérature ordinaire. Cette solution est ajoutée à un mélange de 16 g de p-aminobenzoylglu- tamate diéthylique, 7 em3 d'acide elilorhydri- que concentré, 1600 em3 d'eau et 100 em3 d'éthanol.
Le mélange est, soumis à. une agita tion rapide pendant plusieurs heures à. la tem pérature ordinaire et placé ensuite dans suie glacière pour y rester pendant la nuit.. Le pré cipité déposé est recueilli par filtration, lavé une fois à l'éther et. séché. On obtient l.6,7 ,@ de N-(2,3-dihydroxy-2-propénylidèiie)-p- aminobenzoy1glutamate diéth@-lique.
On ajoute<B>0,3g</B> de ce produit et. 0,2,5 ; de 2,4,5-trianiino-6-hydroxypy rimidixie à 6 @ciïi3 -de glycol éthylénique et on chauffe le mélange à. 135 C pendant. 30 minutes. Le mélange est ensuite refroidi et additionné de -1 volumes d'eau. Après refroidissement du mélange, le solide est recueilli, lavé et séché. On obtient.
0,25 g de N-[4-i [ (2-aniino-4-hydrox,#--6-pyri- mido [4,5-b] pyrazyl)méthyl] amino-}benzoyl]- glutamate diéthylique. Analyse chimique <B>17,8</B> #'/o. Une partie de ce produit dissoute dans un solvant non hy drolisant est soumise à un essai avec S.
faecalis R et présente alors une activité de stimulation de croissance de 12,1<B>%</B>. On dissout un autre échantillon de ce produit clans de l'hydroxyde de sodium 0,1 n et on chauffe la solution à 50 C pendant 30 mi nutes. A l'essai avec S. faecalis R le produit. obtenu donne une valeur de 21,5 /o, ce qui in dique que l'hydrolyse en acide ptéroy1gluta- inique est complète.
Exemple ?: On introduit dans un ballon de 250 ciras un mélange de 7 g de N-(2,3-dihydroxy-2-pro- pénylidène)-p-aminobenzoylglutamate diéthy- lique (préparé suivant l'exemple 1), 5 g de <B><U>'</U></B> -1 ,4,5-triamino-6-hydroxypyriiiiidiiie et 200 cin3, de glycol éthylénique et on chauffe le mélange à 130 à 140 C pendant 30 minutes en agitant continuellement.
Le mélange est refroidi un peu et versé dans environ 600 em3 d'eau. On additionne le mélange de quelques gouttes d'acide chlorhydrique pour amener le pH à à 4. Le précipité est recueilli, lavé à l'eau, <B>3 3</B> au méthanol et à l'éther et séché. On obtient. 5,5 g de ptéroy lglutamate diéthylique qui est. identique au produit obtenu suivant l'exem ple 1.
<B> Process for the preparation of </B> diethyl pteroy1glutamate. The present invention relates to a process for the preparation of a substituted pteridine, or pteroy 1glut.amate diéthy league which, in an ati less tautomeric form, responds to the.
formi @ of following
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According to the invention, this diethyl pteroyl-glutamate is prepared by reacting 2,4,5-triamino-6-hydroxypyrimidine, 2,3-di-hydroxyaerylaldehyde and diethyl p-aminobenzoyl-glutamate.
The diethyl pteroylglutamate obtained, which constitutes a new product, is a yellow to orange solid, hardly soluble in water, but soluble in organic solvents and having no specified melting point. It is useful as an intermediate for the preparation of pteroylglutamic acid.
2,4,5-triamino-6-hy droxy pyrimidine is. a known compound which may exist in one or more tautomeric forms. These tautomeric forms reacting analogously in the same chemical reactions, it is possible. use them for each other.
2,3-Dihydroxyacryaldehyde, known as reductone and having the formula
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also exists in several tautomatic forms.
The third reagent, diethyl p-aminobenzoylglutamate can be prepared by the action of p-nitrobenzoyl chloride on diethyl glutamate and. reduction of nitro group to amino group.
The reaction taking place in the process follows. present invention can be represented by the following global equation
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The reaction resulting in the formation of diethyl pteroylglutamate can be carried out by simultaneously mixing the three reagents or by first reacting the second reagent with one of the other two before adding the third reagent to the reaction mixture, isolating not the intermediaries.
The reaction can be carried out in water or in an organic solvent, preferably in a hydroxylated organic liquid, such as ethyl alcohol, ethylene glycol or the like. It is also possible to use other solvents such as acetone, benzene, formamide, etc. The temperature can vary from room temperature to about 160 ° C, with temperatures above 100 ° C being preferred. The time required will naturally vary depending on temperature and other conditions.
Certain alkaline condensing agents, such as sodium acetate, disodium phosphate, sodium formate, pyzddine and dimethyl aniline, can be used to increase the yield.
The reaction also takes place within wide limits of pu and does not appear to be a limit of acidity or alkalinity. The best results are however obtained at a pH of between 3 and 5. The following examples refer to various implementations of the process according to the invention.
Example <I> 1: </I> 5 g of reductone are dissolved in 100 leather of water at approximately 60 ° C. in the space of 15 minutes, then the solution is cooled to. the. ordinary temperature. This solution is added to a mixture of 16 g of diethyl p-aminobenzoylglutamate, 7 em3 of concentrated hydrofluoric acid, 1600 em3 of water and 100 em3 of ethanol.
The mixture is, subjected to. rapid stirring for several hours at. room temperature and then placed in a cooler soot to stay there overnight. The precipitate deposited is collected by filtration, washed once with ether and. dried. There is obtained 1,6,7% of N- (2,3-dihydroxy-2-propenylide) -p-aminobenzoylglutamate dieth @ -lique.
Add <B> 0.3g </B> of this product and. 0.2.5; 2,4,5-trianiino-6-hydroxypy rimidixie to 6% ethylenic glycol and the mixture is heated to. 135 C during. 30 minutes. The mixture is then cooled and added with -1 volumes of water. After cooling the mixture, the solid is collected, washed and dried. We obtain.
0.25 g of N- [4-i [(2-aniino-4-hydrox, # - 6-pyri-mido [4,5-b] pyrazyl) methyl] amino-} benzoyl] - diethyl glutamate. Chemical analysis <B> 17.8 </B> # '/ o. A part of this product dissolved in a non-hy drolizing solvent is subjected to a test with S.
faecalis R and then exhibits a growth stimulating activity of 12.1 <B>% </B>. Another sample of this product was dissolved in 0.1 n sodium hydroxide and the solution was heated at 50 ° C. for 30 minutes. The product is tested with S. faecalis R. obtained gives a value of 21.5%, which indicates that the hydrolysis to pteroylglutaminic acid is complete.
Example ?: A mixture of 7 g of diethyl N- (2,3-dihydroxy-2-pro-penylidene) -p-aminobenzoylglutamate (prepared according to Example 1), 5 g of <B><U>'</U> </B> -1, 4,5-triamino-6-hydroxypyriiiiidiie and 200 cin3, of ethylenic glycol and the mixture is heated at 130 to 140 C for 30 minutes while stirring continually.
The mixture is cooled a little and poured into about 600 em3 of water. A few drops of hydrochloric acid are added to the mixture to bring the pH to 4. The precipitate is collected, washed with water, <B> 3 3 </B> with methanol and with ether and dried. We obtain. 5.5 g of diethyl pteroylglutamate which is. identical to the product obtained according to Example 1.